專利名稱：一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥提取物組合物，具體涉及一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合 物及其制備方法。
背景技術(shù)：
“復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方”(FTZ)，是一種中藥組合物，用于治療高脂血癥，取得理想療效， 臨床總有效率達91%。全方由女貞子、白術(shù)、佛手、杜仲、大薊、丹參、黃連、三七8味中藥組 成。該組方FTZ已獲國家發(fā)明專利授權(quán)，專利號200410051250.4。雖然不少復(fù)方中藥具有良好的血脂調(diào)節(jié)功能和臨床療效，但是由于是中藥復(fù)方制 劑，還有許多不足之處(1)其成分較復(fù)雜，其有效成分還不清楚，不易量化，最終將影響產(chǎn) 品的臨床療效的穩(wěn)定性，(2)相對簡單的制備工藝，方中有效成分得不到應(yīng)有的純化，雜質(zhì) 成分多，服用劑量大，病人服用順應(yīng)性不夠理想，(3)由于方劑提取物量大，應(yīng)用范圍受到各 種限制。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服已有技術(shù)的不足，提供一種療效更顯著確切，有效成份含 量高，易于量化，質(zhì)量易于控制的防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物。本發(fā)明的另一目的是提供一種工藝穩(wěn)定，重現(xiàn)性好的上述防治脂代謝紊亂的植物 提取物組合物的制備方法。本發(fā)明的又一目的是提供上述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物在制備預(yù)防 或治療脂代謝紊亂相關(guān)疾病藥物和或保健品中的應(yīng)用。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)上述目的
一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物，包括三七總皂苷提取物與黃連總生物堿提 取物。三七總皂苷提取物與黃連總生物堿提取物的重量比優(yōu)選為廣9:廣3。一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的制備方法，步驟如下
(ι)三七總皂苷提取物的制備將原料藥物三七經(jīng)過(V3醇提后，合并總提取物，濃縮 總提取物后得到濃縮液，除去濃縮液中非皂苷類成分，得到三七總皂苷提取物；
(2)黃連總生物堿提取物的制備將原料藥物黃連加Ci_3醇回流提取，回收CV3醇，濃縮 得濃縮液，再以酸溶解堿沉淀重結(jié)晶析出黃連總生物堿提取物；
(3)將三七總皂苷提取物與黃連總生物堿提取物混合，得到防治脂代謝紊亂的植物提 取物組合物。上述制備方法步驟(1) Ci_3醇提是用30 95體積％的CV3醇提取1 5次，優(yōu)選 用65 75體積％的C"醇提取2 3次，每次提取的CV3醇體積為藥材質(zhì)量的1 15倍， 優(yōu)選為5 10倍，每次提取時間為5分鐘以上，優(yōu)選為6(Γ120分鐘；所述Cu醇為甲醇、乙 醇或丙醇，優(yōu)選為乙醇，因為乙醇安全性比甲醇更高，也更易獲得，提取效果也比丙醇好。
步驟(1)中除去濃縮液中非皂苷類成分采用大孔樹脂，大孔樹脂與濃縮液的用量 比是Ikg樹脂加濃縮液0. 5飛L，優(yōu)選為廣1. 5L。用大孔樹脂柱吸附后洗脫用5(Γ95體積％ 乙醇，優(yōu)選為75 85體積％乙醇，用量為每Ikg大孔樹脂用;Γ20 L乙醇，優(yōu)選4飛L乙醇， 以廣20 ml/min，優(yōu)選5 12 ml/min流速洗脫、洗脫至無色；所述大孔樹脂為聚酰胺型樹脂 或聚苯乙烯弱堿性陰離子交換樹脂。步驟(2) CV3醇回流提取是用50 95體積％，優(yōu)選為65 75體積％ C1^3醇提取1 5次，優(yōu)選為2 3次，每次提取的C"醇體積為藥材質(zhì)量的1 15倍，優(yōu)選為5 10倍， 每次提取時間為5分鐘以上，優(yōu)選為6(Γ120分鐘。所述CV3醇為甲醇、乙醇或丙醇，優(yōu)選為 乙醇，因為乙醇安全性比甲醇更高，也更易獲得，提取效果也比丙醇好。酸溶解是用醋酸溶解，醋酸用量為Cu醇提物的3 10倍，優(yōu)選為3 5倍；加 Γ30質(zhì)量％，優(yōu)選為10質(zhì)量％HC1調(diào)pH為0. 2 4，優(yōu)選pH為1. 5 2. 5。加入NaCl重結(jié)晶， 溶液NaCl濃度約為5 12質(zhì)量％，優(yōu)選為6 8質(zhì)量％ ；堿沉淀是用廣30質(zhì)量％，優(yōu)選為 10質(zhì)量％NaOH溶液，pH為纊13，優(yōu)選pH為1廣12. 5，重結(jié)晶體積為黃連重量的廣5倍，優(yōu)選 為2 3倍。防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物在制備預(yù)防或治療脂代謝紊亂疾病藥物或 保健品中的應(yīng)用，所述脂代謝紊亂疾病為高脂血癥、代謝綜合癥等。本發(fā)明中所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物簡稱為SHCE。所述藥物為將SHCE按照藥劑學(xué)上可以接受的載體和/或輔料，使用一般制劑方 法，加工成為口服制劑或注射制劑等形式。常規(guī)輔料有潤滑劑、填充劑、粘合劑、崩解劑等。 口服制劑有片劑、膠囊、散劑、丸劑、粉末、顆粒、晶體、溶液、浸出物、懸劑、湯、糖漿、酏劑、 茶、油等形式。本發(fā)明的SHCE有效成分為三七皂苷Rl、人參皂苷Rb 1、人參皂苷Rd、人參皂苷Re、 人參皂苷Rgl、小檗堿、黃連堿、表小檗堿、巴馬汀。其中重量比例比為三七皂苷Rl 人參皂 苷Rbl 人參皂苷Rd:人參皂苷Re 人參皂苷Rgl 小檗堿黃連堿表小檗堿巴馬汀等于 1 4:1 8:1 3:1 2:1 11:1 10 :1 3:1 2:1 3。當(dāng)三七總皂苷提取物和黃總生物堿提取物的配比為7 3時，SHCE有效成分及重 量百分含量比分別為三七皂苷Rl 人參皂苷Rgl 人參皂苷Re 人參皂苷Rbl 人參皂苷 Rd 小檗堿黃連堿表小檗堿巴馬汀等于2. 3 2. 8 10 12 :0. 95 1. 1 :7. 6 9. 0 1. 6 1. 9 :9· 5 11. 5 :2· 4 2. 8 1. 1 1. 3 :2. 1 2. 4。經(jīng)藥理研究，(1)動物體內(nèi)試驗表明，本發(fā)明SHCE對實驗性高脂血癥，有明顯降低 膽固醇的作用，能夠改善脂質(zhì)代謝；(2)本發(fā)明SHCE能作用于脂代謝的膽固醇吸收、轉(zhuǎn)運、 轉(zhuǎn)化、排泄和體內(nèi)膽固醇合成等環(huán)節(jié)，從而調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝紊亂；(3)臨床研究結(jié)果表明，本 發(fā)明SHCE具有顯著的降脂作用，治療高血脂癥和代謝綜合征臨床療效確切，并且沒有觀察 到明顯副作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果
本發(fā)明SHCE是在中國發(fā)明專利ZL200410051250. 4基礎(chǔ)上，選取其中的兩味中藥三七 和黃連，用其提取物組成的組合物，該組合物是在進行活性成分群(有效部位)及其組分配 伍的活性篩選而獲得的最佳配伍。通過本發(fā)明制備方法，可以去除復(fù)方中藥中大量無效的 化學(xué)成分，得到更有效的中藥有效提取部位，既保留了中藥特色，又使傳統(tǒng)中藥中的有效成分含量大大提高，減少了無效成分對產(chǎn)品加工和制劑質(zhì)量及安全性的影響，使該復(fù)方中藥 有效成分明確，制備工藝穩(wěn)定，產(chǎn)品質(zhì)量可控，有利于大量生產(chǎn)。動物體內(nèi)試驗表明，該植物 提取物組合物對實驗性高脂血癥有明顯降脂作用，能降低膽固醇，改善脂質(zhì)代謝，并且沒有 觀察到明顯副作用，增加了用藥的安全性。本發(fā)明的優(yōu)點在于為預(yù)防和/或治療脂質(zhì)代謝紊亂相關(guān)疾病提供了一種新產(chǎn)品。 本發(fā)明與同類防治脂代謝脂紊亂相關(guān)疾病的藥品比較，療效確切，安全無明顯毒副作用，單 獨使用或與其它藥物復(fù)配都有良好的應(yīng)用前景。本發(fā)明的防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物與復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方(原方，F(xiàn)TZ)相 比較
(1)服用量由原來的6g提取物縮減為600mg，縮減為原來的1/10；
(2)藥物有效成分的含量提高約10倍；
(3)動物體內(nèi)試驗表明，SHCE對實驗性高脂血癥有明顯降脂作用，并能降低膽固醇的作 用，改善脂質(zhì)代謝，并且沒有觀察到明顯副作用，增加了用藥的安全性。對于高脂飲食性高 脂血癥的降血膽固醇的藥效，SHCE部分指標(biāo)優(yōu)于原方，達到了減少服用量而不降低藥效的 目的。


圖1 實施例1 SHCE的制備(6)片劑的制備項下SHCE經(jīng)HPLC分析得到的指紋圖 譜中三七總皂苷成分的色譜峰圖。圖2 實施例1 SHCE的制備(6)片劑的制備項下SHCE經(jīng)HPLC分析得到的指紋圖 譜中黃連總生物堿成分的色譜峰圖。圖3 實施例2中SHCE促進L_02肝細胞膽固醇7 α羥化酶(CYP7A1)基因mRNA表 達的試驗結(jié)果圖，其中1為空白對照，2為FTZ組，3為SHCE低劑量組，4為SHCE中劑量組， 5為SHCE高劑量組。圖4 實施例2中SHCE對HMG-CoA還原酶活性的抑制作用，圖中C為空白對照；FTZ 為FTZ組；SHCE小為SHCE小劑量組；SHCE大為SHCE大劑量組；辛伐他汀為辛伐他汀組。
具體實施例方式實施例1 SHCE的制備 一、三七總皂苷提取物的制備 (1)三七總皂苷提取物
稱取10 kg三七藥材，粉碎，以藥材量的8倍、8倍和6倍的75體積％乙醇分別回流提 取3次，每次池，合并提取液用200目濾布過濾，合并濾液?；厥找掖疾⑹勾继岵糠譂舛葹?Iml相當(dāng)于Ig生藥的濃縮液(1. 9 L);上大孔樹脂柱吸附，大孔樹脂為聚苯乙烯弱堿性陰離 子交換樹脂系列的HPD-100，按1 kg樹脂加濃縮液1.5L上大孔樹脂柱吸附，用水洗至洗脫 液近無色，然后用85體積％乙醇4. 5 L以10 ml/min流速洗脫，洗脫至流出液無色，合并 洗脫液，真空減壓回收乙醇并濃縮至為Iml約相當(dāng)于2 g生藥濃縮液(相對密度為1. 08 1. 10，60°C )，600C以下干燥得總皂苷提取物0. 65 kg。干燥的方法很多，可用減壓干燥，也可用薄膜蒸發(fā)干燥等。本發(fā)明優(yōu)選采用噴霧干
5燥法，其進風(fēng)口溫度80 108°C，出口溫度55 60°C，風(fēng)速5 10m/S，壓力0. 02 0. IkPa,廣2次干燥。三七總皂苷提取物用HPLC方法測定含三七總皂苷含量為73. 8%，人參皂苷Rbl、人 參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分別為提取物總重量的25. 6%、 5. 2%、3· 1%、32· 1%、7· 5%。(2)三七總皂苷提取物
稱取10 kg三七藥材，粉碎，以藥材量的8倍、7倍和5倍的65體積％甲醇分別回流提 取3次，每次池，合并提取液用200目濾布過濾，合并濾液?；厥占状疾⑹勾继岵糠譂舛葹?Iml相當(dāng)于Ig生藥的濃縮液(2. O L);上大孔樹脂柱吸附，大孔樹脂為聚苯乙烯弱堿性陰離 子交換樹脂系列的HPD-600，按1 kg樹脂加濃縮液1.2 L上大孔樹脂柱吸附，用水洗至洗 脫液近無色，然后用90體積％乙醇3. 5 L以10 ml/min流速洗脫，洗脫至流出液無色，合并 洗脫液，真空減壓回收乙醇并濃縮至為Iml約相當(dāng)于2 g生藥濃縮液(相對密度為1. 08 1. 10，60°C )，600C以下減壓干燥得總皂苷提取物0. 64 kg。三七總皂苷提取物用HPLC方法測定含三七總皂苷含量為75. 2%，人參皂苷Rbl、人 參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分別為提取物總重量的26. 1%、 5. 3%、3· 2%, 32. 8%、7· 6%。(3)三七總皂苷提取物
稱取10 kg三七藥材，粉碎，以藥材量的8倍、7倍的70體積％正丙醇分別回流提取2 次，每次池，合并提取液用200目濾布過濾，合并濾液?；厥照疾⑹勾继岵糠譂舛葹镮ml 相當(dāng)于Ig生藥的濃縮液(1.7 L);上大孔樹脂柱吸附，大孔樹脂優(yōu)選為聚酰胺型AB-8。按 1 kg樹脂加濃縮液1.3L上大孔樹脂柱吸附，用水洗至洗脫液近無色，后用80%乙醇6 L以 9 ml/min流速洗脫、洗脫至流出液無色、合并洗脫液，真空減壓回收乙醇并濃縮至為Iml約 相當(dāng)于2 g生藥濃縮液(相對密度為1. 08 1. 10，60°C )，60°C以下減壓干燥得總皂苷提取 物 0.62 kg。三七總皂苷提取物用HPLC方法測定含三七總皂苷含量為72. 2%，人參皂苷Rbl、人 參皂苷Rd、人參皂苷Re、人參皂苷Rgl、三七皂苷Rl的含量分別為提取物總重量的25. 3%、 5. 0%、3· 2%, 31. 3%、7· 2%。 表1不同制備工藝三七總皂苷提取物得率及HPLC含量測定結(jié)果(％)
樣品序號得率三七總皂苷人參皂苷Rbl人參皂苷Rd人參皂苷Re人參皂苷Rgl三七皂苷Rl(1)6. 573. 825. 65. 23. 132. 17. 5(2)6. 475. 226. 15. 33. 232. 87. 6(3)6. 272. 225. 35. 03. 231. 37. 2
、黃連總生物堿的制備
(4)黃連總生物堿提取物
稱取10 kg黃連藥材，粗粉碎，以藥材量的6倍、5倍和5倍的70%乙醇分別回流提取3 次，每次2 h，合并提取液，真空減壓回收乙醇濃縮至1.3g藥材、ml，得流浸膏2. lkg。加入 冰醋酸6 L溶解，充分?jǐn)嚢瑁? 10°C放置過夜，離心(5000 r / min，15min)，抽濾，棄去沉 淀，取上清液，上清液中加10質(zhì)量％HC1調(diào)pH至2. 5，然后加入NaCl，使溶液NaCl濃度約為 8質(zhì)量％，充分?jǐn)嚢瑁筃aCl溶解，靜置Mh，離心(5000 r / min，15min)，收集沉淀物；上清 液加10質(zhì)量％NaOH調(diào)pH至12，靜置24h，離心(5000 r / min，15min)，收集沉淀物，合并2次沉淀物，60°C減壓干燥，即得黃連總生物堿提取物1.65 kg。黃連總生物堿提取物用HPLC方法測定含總生物堿含量為57. 1%，其中小檗堿 35. 0%,黃連堿8. 6%、表小檗堿4. 1%、巴馬汀7. 6%。(5 )黃連總生物堿提取物
稱取10 kg黃連藥材，粗粉碎，以藥材量的8倍、5倍和4倍的75體積％甲醇分別回流 提取3次，每次2 h，合并提取液，真空減壓回收甲醇得浸膏2. 05kg。加入冰醋酸溶解5. 5 L， 得酸水提取液，4 1(TC放置過夜，離心(5000 r / min，15min)，抽濾，棄去沉淀，取上清液， 上清液中加10質(zhì)量％HC1調(diào)pH至3. 0，然后加入NaCl，使溶液NaCl濃度約為6質(zhì)量％，充 分?jǐn)嚢?，使NaCl溶解，靜置Mh，離心(5000 r / min，15min)，收集沉淀物；上清液加10質(zhì) fi%NaOH調(diào)pH至12，靜置24h，離心(5000 r / min，15min)，收集沉淀物，合并2次沉淀物， 60°C減壓干燥，即得黃連總生物堿提取物1. 63 kg。黃連總生物堿提取物用HPLC方法測定含總生物堿含量為55. 6%，其中小檗堿 34. 0%,黃連堿8. 4%、表小檗堿4. 0%、巴馬汀7. 5%。三七總皂苷色譜條件
以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以水為流動相B，按下表2中的 規(guī)定進行梯度洗脫；檢測波長為203nm ；流速lml/min ；柱溫25°C ；檢測波長203nm ；自動 進樣器進樣。表 權(quán)利要求
1.一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物，包括三七總皂苷提取物與黃連總生物堿 提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物，其特征在于所述三七 總皂苷提取物與黃連總生物堿提取物的重量比為廣9:廣3。
3.權(quán)利要求1或2所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的制備方法，步驟如下(ι)三七總皂苷提取物的制備將原料藥物三七經(jīng)過(V3醇提后，合并總提取物，濃縮總提取物后得到濃縮液，除去濃縮液中非皂苷類成分，得到三七總皂苷提取物；(2)黃連總生物堿提取物的制備將原料藥物黃連加Ci_3醇回流提取，回收CV3醇，濃縮 得濃縮液，再以酸溶解堿沉淀重結(jié)晶析出黃連總生物堿提取物；(3)將三七總皂苷提取物與黃連總生物堿提取物混合，得到防治脂代謝紊亂的植物提 取物組合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的制備方法，其特征在于 步驟(1) C1^3醇提是用30 95體積％的Cp3醇提取1 5次，每次提取的Cp3醇體積為藥 材質(zhì)量的1 15倍，每次提取時間為5分鐘以上；所述CV3醇為甲醇、乙醇或丙醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的制備方法，其特征在于 步驟(1)中除去濃縮液中非皂苷類成分采用大孔樹脂，大孔樹脂與濃縮液的用量比是Ikg 大孔樹脂加濃縮液廣5L。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的制備方法，其特征在于 是用大孔樹脂柱吸附后洗脫用5(Γ95體積％乙醇，用量為每Ikg大孔樹脂用5 20 L乙醇，以 Γ20 ml/min流速洗脫，洗脫至無色；所述大孔樹脂為聚酰胺型樹脂或聚苯乙烯弱堿性陰離 子交換樹脂。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的制備方法，其特征在于 步驟(2)(V3醇回流提取是用5(Γ70體積醇提取1 5次，每次提取的Cu醇體積為藥 材質(zhì)量的1 15倍，每次提取時間為5分鐘以上。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的制備方法，其特征在于 步驟(2)所述酸溶解是用醋酸溶解，用廣30質(zhì)量％HC1調(diào)pH為0.廣5。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物的制備方法，其特征在于 步驟(2)所述堿沉淀是用廣30質(zhì)量％NaOH溶液，pH為9 13，重結(jié)晶體積為黃連重量的廣5 倍。
10.權(quán)利要求1或2所述防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物在制備預(yù)防或治療脂代 謝紊亂疾病藥物或保健品中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物，包括三七總皂苷提取物與黃連總生物堿提取物。本發(fā)明還公開了上述組合物的制備方法，是將三七經(jīng)過C1-3醇提后，合并總提取物，濃縮后得總提取物濃縮液，除去其中非皂苷類成分，得到三七總皂苷提取物；將黃連加C1-3醇回流提取，回收C1-3醇，濃縮，濃縮液再以酸溶解堿沉淀重結(jié)晶析出總生物堿提取物，兩者混合后得到防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物。本發(fā)明的防治脂代謝紊亂的植物提取物組合物去除了原復(fù)方中藥中大量無效的化學(xué)成分，減少了無效成分對產(chǎn)品加工和制劑質(zhì)量及安全性的影響，使有效成分明確，含量增加，制備工藝穩(wěn)定，產(chǎn)品質(zhì)量可控，利于工業(yè)化生產(chǎn)，并顯著提高降脂藥效。
文檔編號A61P3/06GK102100761SQ20111002684
公開日2011年6月22日 申請日期2011年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月25日
發(fā)明者郭姣 申請人:廣州中醫(yī)藥大學(xué)