一種用于葡萄糖測(cè)定試劑盒的復(fù)合穩(wěn)定劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于葡萄糖測(cè)定試劑盒的復(fù)合穩(wěn)定劑，復(fù)合穩(wěn)定劑包括牛血清白蛋白、海藻糖、丙三醇、表面活性劑Brij35和液體生物防腐劑Proclin300，各組分的含量為：牛血清白蛋白5~15g/L、海藻糖5~15g/L、丙三醇10~20g/L、Brij350.5~2g/L、Proclin3000.5~2g/L。通過上述方式，本發(fā)明的復(fù)合穩(wěn)定劑用于葡萄糖測(cè)定試劑盒中，不僅保證了試劑盒檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，還能夠使該試劑盒測(cè)定結(jié)果更為穩(wěn)定，可有效延長(zhǎng)試劑盒的保存時(shí)間。另外，該復(fù)合穩(wěn)定劑成本低廉，配制簡(jiǎn)單，因此值得進(jìn)一步推廣使用。
【專利說(shuō)明】一種用于葡萄糖測(cè)定試劑盒的復(fù)合穩(wěn)定劑

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及體外診斷領(lǐng)域，特別是涉及一種用于葡萄糖測(cè)定試劑盒的復(fù)合穩(wěn)定 劑。

【背景技術(shù)】
[0002] 血液中的葡萄糖是人類生命活動(dòng)的必要物質(zhì)，它的氧化反應(yīng)放出的熱量是人類生 命活動(dòng)所需能量的重要來(lái)源，是人體內(nèi)重要的生理指標(biāo)，所以血糖必須保持一定的水平才 能維持體內(nèi)各器官和組織的需要，其含量測(cè)定對(duì)臨床檢測(cè)具有重要意義。目前血糖的主要 檢測(cè)方法有葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法。由于后者檢測(cè)試劑盒成本較高，價(jià)格較貴，大部 分醫(yī)療機(jī)構(gòu)首選以葡萄糖氧化酶法作為檢測(cè)原理的葡萄糖測(cè)定試劑盒，但是由于該試劑盒 包含葡萄糖氧化酶和過氧化物酶，而酶活性易受到pH、溫度、紫外線、重金屬鹽、抑制劑、激 活劑等各種因素的干擾，導(dǎo)致葡萄糖測(cè)定試劑盒缺乏穩(wěn)定性，保存時(shí)間短，直接影響到臨床 使用。
[0003] 目前關(guān)于葡萄糖測(cè)定試劑及其穩(wěn)定性的報(bào)道非常有限。專利CN101571485A提 供了一種葡萄糖檢測(cè)試劑盒，但未加入任何穩(wěn)定劑，未對(duì)試劑盒的穩(wěn)定性進(jìn)行說(shuō)明；專利 CN200510111883. 4提供了一種酶復(fù)合穩(wěn)定劑，對(duì)單獨(dú)的過氧化物酶溶液具有良好的穩(wěn)定效 果，但并未提及對(duì)于成分更加復(fù)雜的試劑盒也可起到類似的穩(wěn)定作用，且該穩(wěn)定劑組成成 分較復(fù)雜，包含牛血清白蛋白、乙二醇二乙醚二胺四乙酸（EGTA)、1，2-二硫代蘇糖醇、葡萄 糖酸鉀、氯化鈉 、Proclin 300、醋酸鎂等，容易對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生干擾。因此研究一種配制簡(jiǎn) 單、成本低廉、對(duì)葡萄糖測(cè)定試劑盒有良好穩(wěn)定效果的復(fù)合穩(wěn)定劑，是非常必要的。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題是提供一種用于葡萄糖測(cè)定試劑盒的復(fù)合穩(wěn)定劑，該 復(fù)合穩(wěn)定劑要配制簡(jiǎn)單、成本低廉且對(duì)葡萄糖測(cè)定試劑盒有良好的穩(wěn)定效果。
[0005] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的一個(gè)技術(shù)方案是：提供一種用于葡萄糖測(cè) 定試劑盒的復(fù)合穩(wěn)定劑，所述復(fù)合穩(wěn)定劑包括牛血清白蛋白、海藻糖、丙三醇、表面活性劑 Brij 35和液體生物防腐劑Proclin 300,各組分的含量為：牛血清白蛋白5?15 g/L、海藻 糖 5?15 g/L、丙三醇 10?20 g/L、Brij 35 0.5?2.0 g/L、Proclin 300 0.5?2.0 g/L。
[0006] 在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，所述復(fù)合穩(wěn)定劑組分的含量為：牛血清白蛋白10 g/L、海藻糖 10 g/L、丙三醇 15 g/L、表面活性劑 fcij 35 1 g/L 和 Proclin 300 1 g/L。
[0007] 在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，所述復(fù)合穩(wěn)定劑應(yīng)用于葡萄糖測(cè)定試劑盒中，所述 葡萄糖測(cè)定試劑盒包括第一試劑和第二試劑，所述第一試劑的組分為：十二水磷酸氫二鈉 21.488 g/L、磷酸二氫鉀1.371 g/L、氯化鎂0.609 g/L、4-氨基安替比林0.508 g/L，所述 第二試劑的組分為：十二水磷酸氫二鈉21.488 g/L、磷酸二氫鉀1.371 g/L、ESPAS 1.476 g/L、葡萄糖氧化酶20000 U/L、過氧化物酶1500 U/L。
[0008] 在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，所述復(fù)合穩(wěn)定劑的使用量在總膽固醇測(cè)定試劑盒中 的體積分?jǐn)?shù)為1%。
[0009] 本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明的復(fù)合穩(wěn)定劑用于葡萄糖測(cè)定試劑盒中，不僅保證 了試劑盒檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，還能夠使該試劑盒測(cè)定結(jié)果更為穩(wěn)定，可有效延長(zhǎng)試劑盒的 保存時(shí)間。另外，該復(fù)合穩(wěn)定劑成本低廉，配制簡(jiǎn)單，因此值得進(jìn)一步推廣使用。

【具體實(shí)施方式】
[0010] 下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施 例僅是本發(fā)明的一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通 技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其它實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范 圍。
[0011] 本發(fā)明以下實(shí)施例中涉及的儀器有：uv Blue Star紫外分光光度計(jì)1臺(tái)（北京萊 伯泰科儀器有限公司，亦或者其它品牌）；恒溫?cái)?shù)顯水浴鍋1臺(tái)（上海梅香儀器有限公司，亦 或者其它品牌)。
[0012] 實(shí)施例1 : 提供一種用于葡萄糖測(cè)定試劑盒的復(fù)合穩(wěn)定劑，所述復(fù)合穩(wěn)定劑組分的含量為：牛血 清白蛋白10 g/L、海藻糖10 g/L、丙三醇15 g/L、表面活性劑Brij 35 1 g/L和Proclin 300 1 g/L，將上述各組分充分溶解、混合后，即可制得一種液體復(fù)合穩(wěn)定劑成品。
[0013] 將實(shí)施例1應(yīng)用于葡萄糖測(cè)定試劑盒，并從穩(wěn)定效期和使用量?jī)煞矫孢M(jìn)行評(píng)價(jià)。
[0014] (一）穩(wěn)定效期試驗(yàn) 1、材料準(zhǔn)備：配制實(shí)施例1所述復(fù)合穩(wěn)定劑； 配制葡萄糖測(cè)定試劑盒，由試劑1和試劑2組成，組分如下： 試劑1:十二水磷酸氫二鈉21.488 g/L、磷酸二氫鉀1.371 g/L、氯化鎂0.609 g/L、 4-氨基安替比林0.508 g/L; 試劑2:十二水磷酸氫二鈉21.488 g/L、磷酸二氫鉀1.371 g/L、ESPAS 1.476 g/L、葡 萄糖氧化酶20000 U/L、過氧化物酶1500 U/L。
[0015] 2、測(cè)定方法 按實(shí)施例1配制復(fù)合穩(wěn)定劑，按1%(ν/ν)的量加入葡萄糖測(cè)定試劑盒中(試劑1和試劑 2均按此量添加)，與不添加復(fù)合穩(wěn)定劑的葡萄糖測(cè)定試劑盒分別測(cè)定樣本中葡萄糖含量。 本試驗(yàn)以英國(guó)朗道質(zhì)控血清水平2 (質(zhì)控2)和質(zhì)控血清水平3 (質(zhì)控3)為樣本，標(biāo)準(zhǔn)品另 購(gòu)，采用紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，設(shè)一個(gè)空白測(cè)試、一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試、兩個(gè)樣本測(cè)試(空 白測(cè)試以蒸餾水代替樣本)。樣本與試劑1和試劑2的比例為：15yL : lOOOyL : 500yL， 設(shè)定的主波長(zhǎng)為505nm、副波長(zhǎng)為660nm，樣本與試劑1混勻后，37°C孵育3. 5min，讀取各 管吸光度A1，加入試劑2混勻后反應(yīng)5min，讀取吸光度A2,每管的吸光度變化Λ A=A2-A1， 扣除試劑空白后計(jì)算出樣本、標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度變化值Λ ，然后根據(jù)公式葡萄糖 (mg/dUzAAi^/AA^^X Cs?l計(jì)算出樣本中葡萄糖含量（Cs?l為標(biāo)準(zhǔn)品濃度)。質(zhì)控2 葡萄糖的靶值為lllmg/dL，質(zhì)控3葡萄糖的靶值為281mg/dL，允許偏差范圍在±10%。
[0016] 根據(jù)以上測(cè)定方法，以同批次同瓶裝的質(zhì)控血清2、質(zhì)控血清3作為檢測(cè)樣本，分 別用添加1% (V/V)復(fù)合穩(wěn)定劑的葡萄糖測(cè)定試劑盒和不添加復(fù)合穩(wěn)定劑的葡萄糖測(cè)定試 劑盒進(jìn)行檢測(cè)，每7天檢測(cè)一次，檢測(cè)周期50天，計(jì)算得到測(cè)定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD)和有 效期天數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)偏差這項(xiàng)可反映測(cè)定結(jié)果的穩(wěn)定性。
[0017] 3、測(cè)定結(jié)果 穩(wěn)定效期試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)詳見下表。

【權(quán)利要求】
1. 一種用于葡萄糖測(cè)定試劑盒的復(fù)合穩(wěn)定劑，其特征在于，所述復(fù)合穩(wěn)定劑包括牛血 清白蛋白、海藻糖、丙三醇、表面活性劑Brij 35和液體生物防腐劑Proclin 300,各組分的 含量為：牛血清白蛋白5?15 g/L、海藻糖5?15 g/L、丙三醇1(Γ20 g/L、Brij 35 0.5?2.0 g/L、Proclin 300 0.5?2.0 g/L。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合穩(wěn)定劑，其特征在于，所述復(fù)合穩(wěn)定劑組分的含量為： 牛血清白蛋白10 g/L、海藻糖10 g/L、丙三醇15 g/L、表面活性劑Brij 35 1 g/L和 Proclin 300 1 g/L。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合穩(wěn)定劑，其特征在于，所述復(fù)合穩(wěn)定劑應(yīng)用于葡萄糖測(cè) 定試劑盒中，所述葡萄糖測(cè)定試劑盒包括第一試劑和第二試劑，所述第一試劑的組分為： 十二水磷酸氫二鈉2L 488 g/L、磷酸二氫鉀L 371 g/L、氯化鎂0.609 g/L、4-氨基安 替比林0.508 g/L，所述第二試劑的組分為：十二水磷酸氫二鈉21.488 g/L、磷酸二氫鉀 1.371 g/L、N-乙基-N- (3-磺丙基）-3-甲氧基苯胺鈉鹽（ESPAS) 1.476 g/L、葡萄糖氧化 酶20000 U/L、過氧化物酶1500 U/L。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合穩(wěn)定劑，其特征在于，所述復(fù)合穩(wěn)定劑的使用量在總膽 固醇測(cè)定試劑盒中的體積分?jǐn)?shù)為1%。
【文檔編號(hào)】C12Q1/54GK104195221SQ201410404619
【公開日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2014年8月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月18日
【發(fā)明者】楊靈勇, 周麗霞 申請(qǐng)人:蘇州康銘誠(chéng)業(yè)醫(yī)用科技有限公司