專(zhuān)利名稱(chēng)：糖攝取促進(jìn)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取的作用的糖攝取促進(jìn)劑。本發(fā)明還涉及促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取的方法。
背景技術(shù)：
表皮從角層向基底層由各種類(lèi)型的細(xì)胞構(gòu)成，如表皮角化細(xì)胞、朗氏(Langerhans)細(xì)胞和黑素細(xì)胞。表皮，特別是表皮角化細(xì)胞的糖攝取在表皮細(xì)胞新生、細(xì)胞分裂和分化(角化)中起著重要作用。因此，表皮角化細(xì)胞的糖攝取的活化可以促進(jìn)皮膚更新(turnover)和新陳代謝，因此被期待對(duì)黑色素等色素沉積的預(yù)防或消除、細(xì)胞賦活、皮膚老化防止、或由紫外線引起的表皮角化細(xì)胞損害的預(yù)防或消除有效果。
發(fā)明的公開(kāi)本發(fā)明的目的是提供可以促進(jìn)表皮細(xì)胞的糖攝取的物質(zhì)。更具體地，本發(fā)明的目的是提供可以促進(jìn)表皮細(xì)胞，特別是表皮角化細(xì)胞的糖攝取，特別是葡萄糖攝取的物質(zhì)。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取的方法。
本發(fā)明人對(duì)表皮細(xì)胞的葡萄糖攝取的促進(jìn)進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，嘌呤堿，特別是一磷酸腺苷，即腺苷的一磷酸酯具有優(yōu)良的促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的葡萄糖攝取的作用?；谠摪l(fā)現(xiàn)完成了本發(fā)明。
本發(fā)明具有以下方面(1)一種表皮角化細(xì)胞的糖攝取促進(jìn)劑，含有嘌呤堿或其鹽作為有效成分。
(2)上述(1)所述的糖攝取促進(jìn)劑，其中嘌呤堿為選自腺嘌呤、鳥(niǎo)嘌呤、一磷酸腺苷、5’-二磷酸腺苷、5’-三磷酸腺苷、黃素腺嘌呤二核苷酸和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的至少一種。
(3)上述(1)所述的糖攝取促進(jìn)劑，其中所述的嘌呤堿為一磷酸腺苷。
(4)上述(1)所述的糖攝取促進(jìn)劑，其以每100重量％促進(jìn)劑至少0.1重量％的比例含有嘌呤堿或其鹽。
(5)上述(1)所述的糖攝取促進(jìn)劑，其以每100重量％促進(jìn)劑0.1-10重量％的比例含有嘌呤堿或其鹽。
(6)上述(1)所述的糖攝取促進(jìn)劑，其以每100重量％促進(jìn)劑0.1-7重量％的比例含有嘌呤堿或其鹽。
(7)上述(1)所述的糖攝取促進(jìn)劑，其中所述的糖為選自葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和果糖的至少一種。
(8)上述(1)所述的糖攝取促進(jìn)劑，其pH范圍為2-8。
(9)上述(1)所述的糖攝取促進(jìn)劑，其為外用形式。
(10)一種促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取的方法，包括在皮膚上應(yīng)用嘌呤堿或其鹽。
(11)上述(10)所述的方法，其中所述的嘌呤堿為選自腺嘌呤、鳥(niǎo)嘌呤、一磷酸腺苷、5’-二磷酸腺苷、5’-三磷酸腺苷、黃素腺嘌呤二核苷酸和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的至少一種。
(12)上述(10)所述的方法，其中所述的嘌呤堿為一磷酸腺苷。
(13)上述(10)所述的方法，其中所述的糖為選自葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和果糖的至少一種。
(14)上述(10)所述的方法，包括在皮膚上應(yīng)用一種組合物，所述的組合物以至少0.1重量％的比例含有嘌呤堿或其鹽。
(15)上述(10)所述的方法，包括在皮膚上應(yīng)用一種組合物，所述的組合物以0.1-10重量％的比例含有嘌呤堿或其鹽。
(16)上述(10)所述的方法，包括在皮膚上應(yīng)用一種組合物，所述的組合物以0.1-7重量％的比例含有嘌呤堿或其鹽。
(17)上述(14)所述的方法，其中所述的組合物的pH范圍為2-8。
(18)嘌呤堿或其鹽在制備表皮角化細(xì)胞的糖攝取促進(jìn)劑中的應(yīng)用。
(19)嘌呤堿或其鹽在促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取中的應(yīng)用。
附圖的簡(jiǎn)單說(shuō)明

圖1表示實(shí)驗(yàn)例1的結(jié)果，考查了AMP-2Na(-■-)、腺苷(-▲-)和次黃苷(-O-)對(duì)于表皮角化細(xì)胞的3H-2-脫氧葡萄糖(2-DG)攝取的促進(jìn)效果。圖中，橫坐標(biāo)表示各嘌呤堿的濃度(log M)，縱坐標(biāo)表示每μg細(xì)胞蛋白質(zhì)的3H-2-脫氧葡萄糖攝取量(把對(duì)照的量設(shè)為1，2-脫氧葡萄糖攝取量相對(duì)于該量的比)。
實(shí)施發(fā)明的最佳方式1.表皮角化細(xì)胞的糖攝取促進(jìn)劑本發(fā)明的表皮角化細(xì)胞的糖攝取促進(jìn)劑含有嘌呤堿或其鹽作為有效成分。
嘌呤堿是嘌呤和具有嘌呤核的各種嘌呤衍生物的總稱(chēng)。例子包括，腺嘌呤、鳥(niǎo)嘌呤以及它們的脫氨基化合物(次黃嘌呤、黃嘌呤)、腺苷、鳥(niǎo)苷、次黃苷、磷酸腺苷(2’-磷酸腺苷、3’-磷酸腺苷、5’-磷酸腺苷、5’-二磷酸腺苷、5’-三磷酸腺苷)、磷酸鳥(niǎo)苷(3’-磷酸鳥(niǎo)苷、5’-磷酸鳥(niǎo)苷、5’-二磷酸鳥(niǎo)苷、5’-三磷酸鳥(niǎo)苷)、腺苷酸基琥珀酸、黃原酸、次黃苷酸、黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)等。優(yōu)選用于本發(fā)明的嘌呤堿的例子包括腺嘌呤、鳥(niǎo)嘌呤、一磷酸腺苷[2’-磷酸腺苷、3’-磷酸腺苷、5’-磷酸腺苷(AMP)]、5’-二磷酸腺苷(ADP)、5’-三磷酸腺苷(ATP)、黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)。更優(yōu)選一磷酸腺苷，特別優(yōu)選5’-磷酸腺苷(AMP)。
本發(fā)明中，嘌呤堿的鹽可以代替嘌呤堿使用，或者與其結(jié)合使用。這樣的嘌呤堿的鹽的例子包括堿金屬鹽如鈉鹽和鉀鹽；堿土金屬鹽如鎂鹽、鈣鹽和鋇鹽；堿性氨基酸如精氨酸和賴(lài)氨酸的鹽；銨和銨鹽如三環(huán)己基銨鹽；以及鏈烷醇胺如單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、單異丙醇胺、二異丙醇胺和三異丙醇胺的鹽。優(yōu)選堿金屬鹽如鈉鹽。特別優(yōu)選一磷酸腺苷一鈉和一磷酸腺苷二鈉。
嘌呤堿或其鹽可以單獨(dú)使用或者兩種以上組合使用。組合的方式?jīng)]有特別的限制，只要其不影響本發(fā)明的效果即可。
嘌呤堿或其鹽對(duì)皮膚表皮細(xì)胞起作用，特別是促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取能力。因此，通過(guò)應(yīng)用于皮膚上嘌呤堿或其鹽可以產(chǎn)生其效果，從而可以有效利用該效果。嘌呤堿或其鹽可以單獨(dú)用作表皮角化細(xì)胞的糖攝取促進(jìn)劑。或者，它們可以作為有效成分，與其它的藥學(xué)或美容上容許的基劑、載體或添加劑組合，調(diào)制成具有糖攝取促進(jìn)作用的化妝品或皮膚外用制劑(糖攝取促進(jìn)劑)如外用醫(yī)藥品或準(zhǔn)醫(yī)藥品。在后一種情況下，嘌呤堿或其鹽在皮膚制劑中的比例沒(méi)有特別的限制，只要可以取得本發(fā)明的效果即可。嘌呤堿或其鹽通?？梢砸悦?00重量％最終制品皮膚制劑(糖攝取促進(jìn)劑)為約0.1重量％以上、優(yōu)選約0.5重量％以上的比例加入。嘌呤堿或其鹽的比例沒(méi)有上限，只要制劑取得本發(fā)明的糖攝取促進(jìn)效果即可。上限可以為例如約10重量％、優(yōu)選約7重量％、更優(yōu)選約6重量％。嘌呤堿或其鹽的比例可以通過(guò)上面的上限和下限值作為指導(dǎo)進(jìn)行適當(dāng)選擇。其比例可以為例如每100重量％最終制品皮膚制劑(糖攝取促進(jìn)劑)為0.1-10重量％、0.1-7重量％、或0.5-10重量％?？紤]到制品穩(wěn)定性及與其它成分的平衡，該比例優(yōu)選為0.5-7重量％，更優(yōu)選1-6重量％。
本發(fā)明的促進(jìn)劑在促進(jìn)表皮細(xì)胞的葡萄糖攝取能力方面特別卓越。作為目標(biāo)的糖不限于葡萄糖，也包括阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、果糖等單糖。本發(fā)明的糖攝取促進(jìn)劑具有促進(jìn)表皮角化細(xì)胞中至少一種糖，特別是至少一種單糖的攝取的作用，但不必促進(jìn)所有糖的攝取。葡萄糖是特別優(yōu)選的糖。
本發(fā)明的糖攝取促進(jìn)劑可以根據(jù)需要含有通常加到外用劑中的各種成分，如表面活性劑、增溶成分、油脂類(lèi)、多元醇、增稠劑、防腐劑、著色劑、分散劑、pH調(diào)節(jié)劑和香料。這些成分可以單獨(dú)使用或兩種以上組合使用。
可用的表面活性劑的例子包括陽(yáng)離子表面活性劑、陰離子表面活性劑、非離子表面活性劑、和兩性表面活性劑。
增溶成分的例子包括低級(jí)醇如乙醇；多元醇如甘油、乙二醇和丙二醇；氫化大豆磷脂、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯羊毛脂醇、蓖麻油聚氧乙烯醚、氫化蓖麻油聚氧乙烯醚、甾醇聚氧乙烯醚、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯-聚氧丙烯烷基醚、聚氧乙烯烷基苯基醚等。
油脂類(lèi)的例子包括花生油、芝麻油、大豆油、紅花油、鱷梨油、向日葵油、玉米油、菜籽油、棉籽油、蓖麻油、山茶油、椰子油、橄欖油、罌粟子油、可可油、霍霍巴油(jojoba oil)、牛油、豬油、羊毛油等油脂類(lèi)；凡士林、液體石蠟、角鯊?fù)椤ⅵ?烯烴低聚物等烴類(lèi)液狀油；肉豆蔻酸異丙酯、異硬脂酸異丙酯、肉豆蔻酸肉豆蔻基酯、棕櫚酸鯨蠟酯、異辛酸鯨蠟酯、肉豆蔻酸異鯨蠟酯、肉豆蔻酸正丁酯、肉豆蔻酸辛基十二烷基酯、亞麻酸異丙酯、蓖麻油酸丙酯、蓖麻油酸異丙酯、蓖麻油酸異丁酯、蓖麻油酸庚酯、癸二酸二乙酯、己二酸二異丙酯等高級(jí)脂肪酸酯類(lèi)；白蜂蠟、鯨脂、野漆樹(shù)蠟等蠟類(lèi)；鯨蠟醇、硬脂醇、二十二醇、鯊肝醇、銀鮫肝醇等高級(jí)脂肪醇類(lèi)；蠟類(lèi)；硬脂酸、油酸、棕櫚酸等高級(jí)脂肪酸類(lèi)；甲基聚硅氧烷、二甲基聚硅氧烷、甲基苯基聚硅氧烷、甲基氫聚硅氧烷等鏈狀硅酮類(lèi)；C12-18飽和或不飽脂肪酸的單-、二-或三甘油酯混合物；十甲基環(huán)五硅氧烷、八甲基環(huán)四硅氧烷、甲基環(huán)硅氧烷等環(huán)狀硅酮；交聯(lián)甲基聚硅氧烷、交聯(lián)甲基苯基聚硅氧烷等交聯(lián)硅酮；以及硅油如聚氧乙烯、聚氧丙烯等改性的硅酮。優(yōu)選烴類(lèi)液狀油如凡士林、液體石蠟、角鯊?fù)椤⒑挺?烯烴低聚物。當(dāng)油為固體時(shí)，優(yōu)選使用輔助溶解劑。
多元醇的實(shí)例包括甘油、聚合度為2-10的聚甘油(例如，二甘油、三甘油、四甘油)、乙二醇、二乙二醇、聚乙二醇、1，3-丁二醇、丙二醇、二丙二醇、異戊二醇(isoprene glycol)、戊二醇、山梨醇、麥芽糖醇、果糖等。
通過(guò)根據(jù)需要在嘌呤堿或其鹽中添加上述成分，并進(jìn)一步根據(jù)需要加入其它溶劑和通常用于外用劑的基劑或載體，本發(fā)明的糖攝取促進(jìn)劑可以調(diào)制成各種所需要的外用劑形式，如糊劑、摩絲、凝膠、液體、乳液、懸浮液、霜?jiǎng)?、軟膏、板狀、氣霧劑和噴霧劑。這些制品可以通過(guò)常規(guī)的方法制備。
本發(fā)明的糖攝取促進(jìn)劑的pH范圍通常為2-8。從對(duì)皮膚和粘膜的低刺激性以及皮膚使用感良好的角度考慮，優(yōu)選pH范圍為2-7，更優(yōu)選3-7，進(jìn)一步更優(yōu)選輕微酸性至中性的pH范圍5-7。
本發(fā)明的糖攝取促進(jìn)劑的具體形式及用途沒(méi)有特別的限制，只要其是以可適用于皮膚的形式即可，如化妝品、皮膚外用醫(yī)藥品或皮膚外用準(zhǔn)醫(yī)藥品。例子包括補(bǔ)充化妝品(makeup cosmetic)如粉底霜、口紅、唇膏、染眉毛油、眼影膏、眼線膏、撲面粉、眉筆和指甲護(hù)理品；基礎(chǔ)皮膚護(hù)理品如乳液、雪花膏、洗劑、油和剝撕式面膜(pack)；洗凈劑如洗面奶(facial washes)、清潔霜和沐浴露(body washes)；發(fā)用化妝品如整發(fā)劑、養(yǎng)發(fā)劑；各種外用組合物如傷口愈合劑、清洗劑、清潔劑、增白劑、UV保護(hù)劑和浴用劑。根據(jù)使用者的年齡和性別、用途、皮膚患部的癥狀程度等，合適量的這些制品可以在皮膚上應(yīng)用一次或多次。
本發(fā)明的糖攝取促進(jìn)劑可以通過(guò)涂布、貼附或噴霧到皮膚上促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取，因此被期待在促進(jìn)皮膚更新和防止或改善皮膚病或皮膚障礙、皮膚老化等方面有效果。皮膚病和皮膚障礙包括斑點(diǎn)、雀斑、紅斑、曬斑、無(wú)光澤(dullness)等色素(黑色素)沉積、皺紋等。
II.促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取的方法如上所述，嘌呤堿或其鹽可以促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取。因此，本發(fā)明提供使用嘌呤或其鹽促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取的方法。
本發(fā)明的促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取的方法可以通過(guò)在皮膚上僅應(yīng)用嘌呤堿或其鹽，或應(yīng)用含有嘌呤堿或其鹽作為有效成分的組合物來(lái)進(jìn)行。
可用于本發(fā)明的嘌呤堿或其鹽與上述的糖攝取促進(jìn)劑中使用的相同，作為目標(biāo)的糖也與上述的糖攝取促進(jìn)劑中的相同。
在本發(fā)明的方法中，在皮膚上應(yīng)用嘌呤堿或其鹽的方法沒(méi)有特別的限制，只要嘌呤堿或其鹽能與目標(biāo)皮膚部位接觸即可。例如，嘌呤堿或其鹽單獨(dú)，或者含有該物質(zhì)作為有效成分并進(jìn)一步含有藥學(xué)或美容上容許的基劑、載體或添加劑的組合物，可以涂布或噴霧到皮膚上或以貼片的形式貼附到皮膚上。當(dāng)以組合物形式使用時(shí)，只要可以取得本發(fā)明的效果，嘌呤堿或其鹽的比例沒(méi)有特別的限制。嘌呤堿或其鹽通?？梢砸悦?00重量％組合物為約0.1重量％以上、更優(yōu)選約0.5重量％以上的比例加入。嘌呤堿或其鹽的比例沒(méi)有上限，只要可以取得本發(fā)明的糖攝取促進(jìn)效果即可。上限可以是例如約10重量％、優(yōu)選約7重量％、更優(yōu)選約6重量％?？梢允褂蒙鲜龅纳舷藓拖孪拗底鳛橹笇?dǎo)，適當(dāng)選擇嘌呤堿或其鹽的比例，該比例可以是例如每100重量％組合物為0.1-10重量％、0.1-7重量％、0.5-10重量％。該比例優(yōu)選為0.5-7重量％，更優(yōu)選1-6重量％。該組合物的pH范圍通常為2-8?？紤]到對(duì)皮膚和粘膜的低刺激性以及皮膚使用感良好，pH范圍優(yōu)選2-7，更優(yōu)選3-7，進(jìn)一步更優(yōu)選弱酸性pH范圍5-7。
實(shí)施本發(fā)明的方法的方式包括例如通過(guò)使用含有嘌呤堿或其鹽的各種外用組合物(例如，補(bǔ)充化妝品如粉底霜、口紅、唇膏、染眉毛油、眼影膏、眼線膏、撲面粉、眉筆和指甲護(hù)理品；基礎(chǔ)皮膚護(hù)理品如乳液、雪花膏、洗劑、油和剝撕式面膜；洗凈劑如洗面奶、清潔霜和沐浴露；發(fā)用化妝品如整發(fā)劑、養(yǎng)發(fā)劑；各種外用組合物如傷口愈合劑、清洗劑、清潔劑、增白劑、UV保護(hù)劑和浴用劑)將嘌呤堿或其鹽應(yīng)用到皮膚上。
嘌呤堿或其鹽的涂布量和涂布次數(shù)沒(méi)有特別的限制。例如，根據(jù)使用者的年齡、性別、用途、皮膚患部的癥狀程度、涂布形式等，可以將適當(dāng)量的嘌呤堿或其鹽以每天一次至數(shù)次涂布到皮膚上。
實(shí)施例以下的實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，不是對(duì)本發(fā)明范圍的限制。在這些例子中，如果沒(méi)有特別指明，百分?jǐn)?shù)均指重量百分?jǐn)?shù)。
實(shí)驗(yàn)例1使用5’-磷酸腺苷-2Na(AMP-2Na)、腺苷和次黃苷作為試驗(yàn)化合物，考查了嘌呤堿對(duì)表皮角化細(xì)胞的葡萄糖攝取的影響。作為對(duì)照，除沒(méi)有使用試驗(yàn)化合物外以同樣的方式進(jìn)行試驗(yàn)。
<試藥等的制備方法>
1.人表皮角化細(xì)胞的準(zhǔn)備將人表皮角化細(xì)胞(正常人新生兒包皮表皮角化細(xì)胞，“EpidercellNHEK(F)”，Kurabo Industries，Ltd.制)首先在10cm佩氏培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，并在使用前冷凍保存。使用時(shí)將該冷凍保存的細(xì)胞在24孔板中培養(yǎng)約6-7天，并當(dāng)細(xì)胞達(dá)到70-80％融合時(shí)，用于該實(shí)驗(yàn)。
2.1％BSA/不含葡萄糖的培養(yǎng)基(pH7.4)的調(diào)制通過(guò)在表皮角化細(xì)胞增殖用無(wú)血清培養(yǎng)基(“HuMedia-KG2”，特別定制的培養(yǎng)基，Kurabo Industries，Ltd.制)中加入該培養(yǎng)基產(chǎn)品附帶的鈣溶液1ml和酚紅0.1ml調(diào)制不含葡萄糖的培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入經(jīng)活性碳處理除去了雜質(zhì)的牛血清白蛋白(BSA)至濃度為1％，并用NaOH將培養(yǎng)基的pH調(diào)節(jié)至7.4。
3.3H-2-脫氧葡萄糖溶液的調(diào)制將10mM 2-脫氧葡萄糖1ml、250μCi/250μl3H-2-脫氧葡萄糖60μl和1％BSA/不含葡萄糖的培養(yǎng)基(pH7.4)940μl混合。
<實(shí)驗(yàn)方法>
用PBS(-)(不含Ca2+和Mg2+的磷酸鹽緩沖鹽水)將在24孔板中培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞洗滌三次。加入表皮角化細(xì)胞增殖用無(wú)血清培養(yǎng)基(“HuMedia-KG2”，特別定制的培養(yǎng)基，Kurabo Industries，Ltd.制)后，將細(xì)胞培養(yǎng)2小時(shí)，然后用PBS(-)洗滌三次。加入溶解有試驗(yàn)化合物的1％BSA/不含葡萄糖的培養(yǎng)基(pH7.4)1ml后，將細(xì)胞培養(yǎng)30分鐘，然后每1ml培養(yǎng)基加入20μl3H-2-脫氧葡萄糖溶液。將細(xì)胞靜置10分鐘，然后用冰冷的含有葡萄糖的PBS(-)洗滌三次。加入含有0.1％SDS的0.1N NaOH 0.5ml后，將細(xì)胞在靜止條件下放置至少2小時(shí)，制成細(xì)胞溶解液。加入含有0.1％SDS的0.1 1NHCl 0.5ml，以酸化該細(xì)胞溶解液。80μl細(xì)胞溶解液用于蛋白質(zhì)分析(“DC ProteinAssay”，Bio-Rad制)，并將750μl同樣的溶液放置到玻璃瓶中。加入20ml液體閃爍計(jì)數(shù)器用的雞尾酒(ACS-II，Amersham制)。輕輕攪拌混合物后，使用液體閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定放射活性。從得到的放射活性求出每單位蛋白質(zhì)量的放射活性，并通過(guò)減去由非特異的3H-2-脫氧葡萄糖攝取造成的放射活性算出3H-2-脫氧葡萄糖攝取量(H-DPM(μg)/μg蛋白質(zhì))。
<結(jié)果>
進(jìn)行上述試驗(yàn)兩次，并計(jì)算平均值。為與對(duì)照比較，將各值轉(zhuǎn)換成與設(shè)為1的對(duì)照值的比。圖1示出了結(jié)果。圖1中，橫坐標(biāo)表示各嘌呤堿(AMP-2Na、腺苷、次黃苷)的濃度(logM)，縱坐標(biāo)表示細(xì)胞攝取的2-脫氧基葡萄糖量(H-DPM(μg)/μg蛋白質(zhì))與設(shè)為1的對(duì)照的比。
如圖1所示，在第一實(shí)驗(yàn)中，濃度為10-6M和10-5M的AMP-2Na促進(jìn)葡萄糖攝取分別為對(duì)照(無(wú)試驗(yàn)化合物)的約1.48倍和約1.61倍。在第二實(shí)驗(yàn)中，濃度為10-6M和10-5M的AMP-2Na促進(jìn)糖攝取分別為對(duì)照的約1.48倍和約1.43倍。
另外確認(rèn)了腺苷和次黃苷與AMP-2Na一樣，也具有促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的葡萄糖攝取的作用。但是，如圖1所示，當(dāng)用相同濃度作比較時(shí)，AMP-2Na在低濃度時(shí)對(duì)葡萄糖攝取的促進(jìn)比腺苷有效。濃度為10-6M的AMP-2Na的促進(jìn)效果在第一實(shí)驗(yàn)中比同樣濃度的腺苷的效果高約1.16倍，在第二實(shí)驗(yàn)中高約1.32倍，這是統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著差異(第一實(shí)驗(yàn)p＜0.05，第二實(shí)驗(yàn)p＜0.05)。也可以說(shuō)AMP-2Na在低濃度(10-7M)時(shí)比次黃苷更有效地促進(jìn)葡萄糖攝取。
上述結(jié)果說(shuō)明嘌呤堿如AMP-2Na、腺苷和次黃苷具有促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的葡萄糖攝取能力的作用，特別是AMP-2Na即使低濃度也能取得這種效果。因此嘌呤堿在促進(jìn)葡萄糖攝取能力方面是卓越的。
實(shí)施例1乳液羧基乙烯基聚合物 0.3(％)AMP-2Na 1.5十甘油單肉豆蔻酸酯 2.0角鯊?fù)? 5.0精制甘油 6.0pH調(diào)節(jié)劑 將pH調(diào)至7所需的量防腐劑 適量?jī)艋嗔靠偭? 100.0％實(shí)施例2化妝水氫化蓖麻油聚氧乙烯醚(E.O.60) 0.7(％)AMP-2Na 3.0乙醇 5.0甘油 2.0pH調(diào)節(jié)劑 將pH調(diào)至7所需的量防腐劑適量香料 適量?jī)艋嗔靠偭? 100.0％實(shí)施例3養(yǎng)發(fā)劑水楊酸 0.1(％)AMP-2Na10.0乙醇 20.0甘油 2.0pH調(diào)節(jié)劑 將pH調(diào)至7所需的量防腐劑 適量香料 適量?jī)艋?余量總量 100.0％工業(yè)實(shí)用性根據(jù)本發(fā)明，表皮角化細(xì)胞的糖攝取能力可被促進(jìn)，并且可以期待皮膚的更新和新陳代謝促進(jìn)效果。因此本發(fā)明的糖攝取促進(jìn)劑可用作期待在抗皮膚老化和皮膚美化，即、預(yù)防細(xì)皺紋、賦予皮膚彈性、預(yù)防色素沉積、維持和促進(jìn)皮膚的美白化方面有效的皮膚化妝品、外用醫(yī)藥制劑或外用準(zhǔn)醫(yī)藥制劑。
權(quán)利要求
1.一種表皮角化細(xì)胞的糖攝取促進(jìn)劑，含有嘌呤堿或其鹽作為有效成分。
2.權(quán)利要求1所述的糖攝取促進(jìn)劑，其中嘌呤堿為選自腺嘌呤、鳥(niǎo)嘌呤、一磷酸腺苷、5’-二磷酸腺苷、5’-三磷酸腺苷、黃素腺嘌呤二核苷酸和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的至少一種。
3.權(quán)利要求1所述的糖攝取促進(jìn)劑，其中所述的嘌呤堿為一磷酸腺苷。
4.權(quán)利要求1所述的糖攝取促進(jìn)劑，其以每100重量％促進(jìn)劑至少0.1重量％的比例含有嘌呤堿或其鹽。
5.權(quán)利要求1所述的糖攝取促進(jìn)劑，其以每100重量％促進(jìn)劑0.1-10重量％的比例含有嘌呤堿或其鹽。
6.權(quán)利要求1所述的糖攝取促進(jìn)劑，其以每100重量％促進(jìn)劑0.1-7重量％的比例含有嘌呤堿或其鹽。
7.權(quán)利要求1所述的糖攝取促進(jìn)劑，其中所述的糖為選自葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和果糖的至少一種。
8.權(quán)利要求1所述的糖攝取促進(jìn)劑，其pH范圍為2-8。
9.權(quán)利要求1所述的糖攝取促進(jìn)劑，其為外用形式。
10.一種促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取的方法，包括在皮膚上應(yīng)用嘌呤堿或其鹽。
11.權(quán)利要求10所述的方法，其中所述的嘌呤堿為選自腺嘌呤、鳥(niǎo)嘌呤、一磷酸腺苷、5’-二磷酸腺苷、5’-三磷酸腺苷、黃素腺嘌呤二核苷酸和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的至少一種。
12.權(quán)利要求10所述的方法，其中所述的嘌呤堿為一磷酸腺苷。
13.權(quán)利要求10所述的方法，其中所述的糖為選自葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和果糖的至少一種。
14.權(quán)利要求10所述的方法，包括在皮膚上應(yīng)用一種組合物，所述的組合物含有至少0.1重量％的嘌呤堿或其鹽。
15.權(quán)利要求10所述的方法，包括在皮膚上應(yīng)用一種組合物，所述的組合物含有0.1-10重量％的嘌呤堿或其鹽。
16.權(quán)利要求10所述的方法，包括在皮膚上應(yīng)用一種組合物，所述的組合物含有0.1-7重量％的嘌呤堿或其鹽。
17.權(quán)利要求10所述的方法，其中所述的組合物的pH范圍為2-8。
18.嘌呤堿或其鹽在制備表皮角化細(xì)胞的糖攝取促進(jìn)劑中的應(yīng)用。
19.嘌呤堿或其鹽在促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明的目的是提供可以活化表皮細(xì)胞的糖攝取，因此可以期待在促進(jìn)皮膚細(xì)胞新生和新陳代謝方面有效。本發(fā)明提供表皮角化細(xì)胞的糖攝取促進(jìn)劑，其含有嘌呤堿或其鹽作為有效成分。本發(fā)明另外提供促進(jìn)表皮角化細(xì)胞的糖攝取的方法，包括在皮膚上應(yīng)用嘌呤堿或其鹽。
文檔編號(hào)A61K8/49GK1503655SQ0280820
公開(kāi)日2004年6月9日 申請(qǐng)日期2002年3月20日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月13日
發(fā)明者奧男拓道, 森本千惠, 龜田健治, 原野史樹(shù), 惠, 樹(shù), 治 申請(qǐng)人:大塚制藥株式會(huì)社, 大 制藥株式會(huì)社