一種海洋真菌來(lái)源的聚酮類(lèi)化合物及其治療ii型糖尿病的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物化合物領(lǐng)域，具體涉及海洋真菌來(lái)源的藥物化合物，更具體地，涉 及一種海洋真菌來(lái)源的聚酮類(lèi)化合物及其治療II型糖尿病的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 醫(yī)藥科學(xué)的發(fā)展和人類(lèi)自我健康意識(shí)的增強(qiáng)，使人類(lèi)在戰(zhàn)勝疾病及維護(hù)自身健康 方面有了極大的提高，但是對(duì)艾滋病、乙肝、腫瘤、老年癡呆和糖尿病等廣泛、嚴(yán)重威脅人類(lèi) 健康的重大疾病，至今仍然缺乏根治的特效藥物。海洋真菌由于其生長(zhǎng)環(huán)境具有高壓、高 鹽、缺氧等特殊性，為了適應(yīng)這種不同于陸地的生境，形成了獨(dú)特的代謝途徑，進(jìn)而為結(jié)構(gòu) 新穎、生理活性顯著的各類(lèi)次級(jí)代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生提供了可能。目前，從包括海洋真菌在內(nèi)的 海洋微生物中尋找新的藥源已成為國(guó)際國(guó)內(nèi)研宄的熱點(diǎn)。
[0003] 糖尿病是一種由于胰島素分泌或作用缺陷而導(dǎo)致的慢性疾病。隨著經(jīng)濟(jì)的進(jìn)步， 城市化進(jìn)程的深入以及人類(lèi)生活方式的改變，糖尿病將會(huì)成為一個(gè)巨大且越來(lái)越突出的問(wèn) 題。據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟最新評(píng)估顯示，目前全球有3. 82億人患有糖尿病，至2035年患病人 數(shù)將增加到5. 92億。所有國(guó)家-無(wú)論貧窮或富有，都正在經(jīng)受糖尿病流行的影響。因此， 針對(duì)該類(lèi)重大疾病尋找和研發(fā)出新的，高效的，具有廣譜性的藥物具有必要性、緊迫性，并 將產(chǎn)生巨大的社會(huì)效益。
[0004] α -葡萄糖苷酶抑制劑是一類(lèi)以延緩腸道碳水化合物吸收而達(dá)到治療糖尿病的口 服降糖藥，其作用原理是：競(jìng)爭(zhēng)性抑制位于小腸的各種α -葡萄糖苷酶，使分解為葡萄糖的 速度減慢，從而減緩腸道內(nèi)葡萄糖的吸收，改善餐后血糖的高峰。研宄證實(shí)，α -葡萄糖苷酶 抑制劑可以防治餐后尚血糖癥和緩解尚膜島素血癥，同時(shí)可以提尚糖耐量。臨床上，α -匍 萄糖苷酶抑制劑用于治療II型糖尿病。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于針對(duì)目前II型糖尿病治療藥物存在的缺陷，提供一種海洋真 菌來(lái)源的聚酮類(lèi)化合物。
[0006] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種海洋真菌來(lái)源的聚酮類(lèi)化合物的制備方法。
[0007] 本發(fā)明的在一個(gè)目的是提供一種海洋真菌來(lái)源的聚酮類(lèi)化合物在制備治療II型 糖尿病藥物中的應(yīng)用。
[0008] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的： 一種海洋真菌來(lái)源的聚酮類(lèi)化合物，其結(jié)構(gòu)式如式（I )所示： 式（I )。
[0009] 本發(fā)明的聚酮化合物是從海洋真菌曲霉sp. 16-5B的發(fā)酵液中分 離獲得的；海洋真菌曲霉Asper價(jià)7ΛΛ5 sp. 16-5B于2015年4月6日保藏在中國(guó)典型培 養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國(guó)武漢市武漢大學(xué)，保藏編號(hào)為CCTCC NO :Μ 2015204。
[0010] 優(yōu)選地，所述聚酮類(lèi)化合物的制備方法包括如下步驟： 51. 將海洋真菌曲霉Asper價(jià)7ΛΛ5 sp. 16-5Β接入種子培養(yǎng)基，搖床培養(yǎng)，得到種子培 養(yǎng)液； 52. 將種子培養(yǎng)液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，靜置培養(yǎng)； 53. 將發(fā)酵產(chǎn)物過(guò)濾得到菌體，菌體用甲醇浸泡，減壓濃縮，得到浸膏，再經(jīng)層析分離， 得到聚酮類(lèi)化合物。
[0011] 作為一種優(yōu)選方案，上述制備方法中，步驟Sl所述種子培養(yǎng)基的組分為：葡萄糖 35~40g，蛋白胨4~5g，酵母膏4~5g，海鹽4~5g，水2L。步驟Sl所述搖床培養(yǎng)是26~28°C下， 搖床轉(zhuǎn)速150~200rpm，培養(yǎng)時(shí)間為60~72h。
[0012] 作為一種優(yōu)選方案，上述制備方法中，步驟S2所述發(fā)酵培養(yǎng)基的組分為硝酸鈉 3g，磷酸氫二鉀lg，硫酸鎂0.5g，氯化鉀lg，硫酸亞鐵0.018，蔗糖208，瓊脂2(^，蒸餾水 1000mL。步驟S2所述靜置培養(yǎng)的時(shí)間為28~30天，靜置培養(yǎng)的溫度為25~28°C。
[0013] 作為一種優(yōu)選方案，上述制備方法中，步驟S3所述發(fā)酵物過(guò)濾得發(fā)酵液和菌體， 菌體用體積為1 :1的甲醇浸泡提取三次，提取液在低于50°C下濃縮至1L，濃縮液用體積比 為1:1的乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液在低于50°C下減壓濃縮得浸膏6.9 g。該浸膏經(jīng) 硅膠柱層析進(jìn)行分離，分別用〇%，10%，20%，30%，40%，50%，60%，70%，100%的乙酸乙酯-石油 醚梯度淋洗，其中40%乙酸乙酯-石油醚洗脫部分經(jīng)葡聚糖S印hadex LH-20凝膠柱，用純 甲醇為洗脫劑進(jìn)行洗脫，經(jīng)多次重結(jié)晶得到該化合物（5. 8mg)。
[0014] 本發(fā)明分離得到的聚酮類(lèi)化合物對(duì)α-葡萄糖苷酶具有顯著地抑制作用，因此， 可用于制備α-葡萄糖苷酶抑制劑。
[0015] 因?yàn)棣?-葡萄糖苷酶是一類(lèi)能夠從含有α -葡萄糖苷鍵底物的非還原端催化水解 α -葡萄糖基的酶，廣泛分布于生物體中，參與食物消化、糖蛋白的生物合成，多糖及糖復(fù)合 物的合成與分解代謝等許多生物過(guò)程，所以本發(fā)明分離得到的聚酮化合物可用于制備防治 II型糖尿病藥物。
[0016] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果： 本發(fā)明從海南島東寨港紅樹(shù)林國(guó)家自然保護(hù)區(qū)紅樹(shù)植物iia ia/a的葉中 分離獲得一株真菌sp. 16-5B，并從該菌株的發(fā)酵液中首次分離獲得一種聚 酮類(lèi)化合物，本發(fā)明所述的聚酮類(lèi)化合物來(lái)源于海洋真菌，從真菌提取分離的方法簡(jiǎn)單，成 本低廉；而且，聚酮類(lèi)化合物對(duì)α -葡萄糖苷酶具有顯著抑制活性，應(yīng)用前景廣闊。
【附圖說(shuō)明】
[0017] 圖1為聚酮類(lèi)化合物的α -葡萄糖苷酶抑制作用的雙倒數(shù)酶動(dòng)力學(xué)曲線。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合說(shuō)明書(shū)附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作出進(jìn)一步地詳細(xì)闡述，所述實(shí)施例 只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。下述實(shí)施例中所使用的試驗(yàn)方法如無(wú)特 殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法；所使用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，為可從商業(yè)途徑得到的試劑 和材料。
[0019] 實(shí)施例1 本發(fā)明的化合物，可以從海洋真菌sp. 16-5Β的發(fā)酵液中分離得到。 海洋真菌Asper價(jià)7ΛΛ5 sp. 16-5B是從海南島東寨港紅樹(shù)林國(guó)家自然保護(hù)區(qū)紅樹(shù)植物 的葉中分離得到。海洋真菌曲霉sp. 16-5Β菌株已于 2015年4月6日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國(guó)武漢市武漢大學(xué)，保藏號(hào) 為 CCTCC M 2015204。
[0020] 聚酮化合物的分離方法如下： SI.種子培養(yǎng)： S11.配制種子培養(yǎng)基：葡萄糖40g,蛋白胨4g，酵母膏4g，海鹽5g，自來(lái)水2000mL，平 均分裝于8個(gè)500mL錐形瓶，121°C滅25分鐘。
[0021] 種子的培養(yǎng)：將海洋真菌AsperpVAAs sp. 16-5B的菌株接入種子培養(yǎng)基，在 28°C的溫度下，置搖床上以150rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)60小時(shí)得種子培養(yǎng)液。
[0022] .發(fā)酵培養(yǎng)： S21.配制發(fā)酵培養(yǎng)基：硝酸鈉3g，磷酸氫二鉀lg，硫酸鎂0.5g，氯化鉀lg，硫酸亞鐵 〇. 〇lg，蔗糖20g，瓊脂20g，蒸餾水1000 mL，121°C滅25分鐘。
[0023] 發(fā)酵培養(yǎng)： 無(wú)菌操作下將