一株淡紫擬青霉PlTS01及其在防治煙粉虱中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一株淡紫擬青霉P1TS01及其在防治 煙粉虱中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 煙粉虱ifeazisiaiaAaci(Gennadius)是一類刺吸式口器的小型昆蟲，也是一個(gè)正 在快速進(jìn)化的復(fù)合種，其生物型B與生物型Q屬于世界性大害蟲。20世紀(jì)80年代以來，隨 著世界范圍內(nèi)的貿(mào)易往來，煙粉虱借助花卉、苗木及其他經(jīng)濟(jì)作物的迅速擴(kuò)散，在世界各地 廣泛傳播并爆發(fā)成災(zāi)，目前煙粉虱已廣泛分布于亞洲、歐洲、美洲、大洋洲、非洲等90多個(gè) 國(guó)家和地區(qū)，給全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。在我國(guó)，煙粉虱已蔓延為害至除西藏 以外的各省、市與自治區(qū)，嚴(yán)重影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。
[0003] 煙粉虱是多食性害蟲，寄主范圍廣泛，可危害農(nóng)作物、花卉植物、野生植物，如豆 科、十字花科、茄科、菊科、萌蘆科、旋花科、大戟科等。煙粉虱若蟲、成蟲通過口針直接刺吸 植物汁液，造成寄主營(yíng)養(yǎng)缺乏，導(dǎo)致植株衰弱、黃化等癥狀；其分泌的大量蜜露可誘發(fā)煤污 病，造成植物光合作用下降及果實(shí)等商品價(jià)值降低；最重要的是，煙粉虱又是植物病毒的傳 播媒介，其傳播的雙生病毒給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成嚴(yán)重的危害。
[0004] 防治煙粉虱依然以化學(xué)殺蟲劑為主，但是化學(xué)防治的安全性及抗藥性等問題越來 越突出，因此生物防治越來越受到人們的重視。淡紫擬青霉是 一類常見的土壤真菌，也是昆蟲、線蟲的重要病原真菌，已有一些有關(guān)淡紫擬青霉的發(fā)明專 利： 申請(qǐng)?zhí)枮?01310669589.X的專利公開了一種淡紫擬青霉菌株分生孢子用于防治溫室 蚜蟲、溫室白粉虱等刺吸式害蟲。
[0005] 申請(qǐng)?zhí)枮?01210358765. 3的專利公開了一種淡紫擬青霉菌株，并用于防治香蕉 根結(jié)線蟲。
[0006] 申請(qǐng)?zhí)枮?01310538318. 0的專利公開了淡紫擬青霉航天誘變突變株的微生物制 劑及其在防治根結(jié)線蟲生物中的應(yīng)用。
[0007] 申請(qǐng)?zhí)枮?01210074067. 0的專利公開了一種淡紫擬青霉的培養(yǎng)方法及其對(duì)線蟲 卵的應(yīng)用。
[0008] 申請(qǐng)?zhí)枮?01110289518. 8的專利公開了一種包含淡紫擬青霉和丁硫克百威的殺 線蟲組合物。
[0009] 申請(qǐng)?zhí)枮?01110024803. 7的專利公開了一種含阿維菌素和淡紫擬青霉的殺線蟲 組合物。
[0010] 申請(qǐng)?zhí)枮?01310117537. 1的專利公開了一株對(duì)柑橘木虱具強(qiáng)致病力的淡紫擬青 霉菌株。
[0011] 申請(qǐng)?zhí)枮?01210229012. 2的專利公開了一株具有抑菌活性的淡紫擬青霉。
[0012] 綜上可見，利用淡紫擬青霉防治線蟲的發(fā)明專利較多，防治害蟲的也有少量專利 申請(qǐng)，但是應(yīng)用于防治煙粉虱的卻未有報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是為開發(fā)新的真菌殺蟲劑提供材料，提供一株對(duì)煙粉虱 具有殺滅作用的淡紫擬青霉菌株。
[0014] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供所述淡紫擬青霉菌株在防治煙粉虱方面的應(yīng)用。
[0015] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過以下方案予以實(shí)現(xiàn)的： 一株淡紫擬青霉（Paecilomyceslilacinus)菌株P(guān)1TS01，所述菌株于2015年3月26 日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心（CCTCC)，保藏編號(hào)為CCTCCNO.M2015168,保藏地址為 中國(guó)武漢武漢大學(xué)。
[0016]P1TS01菌株的菌落特征：在察氏培養(yǎng)基上，起初菌落規(guī)則圓形，隆起，菌絲白色， 背面淡黃色或近米黃色；延長(zhǎng)培養(yǎng)，菌落仍呈圓形，形成淡粉色色孢子層；培養(yǎng)14天后，菌 落直徑44~46mm。
[0017] 顯微結(jié)構(gòu)：菌絲細(xì)長(zhǎng)，無(wú)色透明，具分隔，寬度1.58~3. 61μπι;分生孢子梗上著 生2~5個(gè)瓶梗，瓶梗橢圓形或梭形膨大，向上逐漸細(xì)管狀，長(zhǎng)6. 07~7. 44μm，寬2. 77~3. 66 ym;其上產(chǎn)大量分生孢子，分生孢子串生、無(wú)色透明，單胞子呈橢圓形至卵圓形，長(zhǎng) 2·51~3·66μπι，寬 1·77~2·66μπι。
[0018] 分子系統(tǒng)發(fā)育：采用通用引物ITS1、ITS4擴(kuò)增P1TS01菌株的rDNA-ITS基因序 列（如SEQIDNO:1所示)，測(cè)序后與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中已知序列比對(duì)，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果表 明，P1TS01菌株與淡紫擬青霉處在同一分支上，同源性為99%。
[0019] 通過上述生物學(xué)性狀及生理生化和分子鑒定可知，P1TS01菌株分類地位屬于 真菌界（半知菌亞門絲抱綱絲抱目 (iaJes)、叢梗抱科（iftwiiaceae)、擬青霉屬（〇
[0020] 本發(fā)明同時(shí)提供了所述淡紫擬青霉菌株P(guān)1TS01在防治煙粉虱中的應(yīng)用。
[0021]P1TS01菌株以濃度為IX10s個(gè)分生孢子/ml，在處理第10天，2齡B型煙粉虱若 蟲的累計(jì)校正死亡率達(dá)到92. 78%，半致死濃度LC5。為1. 66X10 6孢子/mL(處理后第6天)， 半致死時(shí)間LT5。為4. 35d(在1. 0X10 7孢子/mL劑量下）。
[0022] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果： 本發(fā)明所述淡紫擬青霉菌株對(duì)防治煙粉虱高效；本發(fā)明所述的菌株是一種昆蟲病原真 菌，作為一種生物活體農(nóng)藥，具有不同現(xiàn)有化學(xué)殺蟲劑的全新作用機(jī)理、對(duì)發(fā)展綠色生態(tài)控 制技術(shù)，為農(nóng)林業(yè)的可持續(xù)發(fā)展有促進(jìn)作用，具有非常好的推廣應(yīng)用價(jià)值。
【附圖說明】
[0023] 圖1為菌株在察氏培養(yǎng)基上培養(yǎng)14天的菌落形態(tài)，A :菌落正面；B :菌落背面。
[0024] 圖2為淡紫擬青霉P1TS01菌株產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)與分生孢子。
[0025] 圖3為P1TS01菌株及相關(guān)菌株的rDNA-ITS構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 下面結(jié)合說明書附圖和具體實(shí)施例來進(jìn)一步詳細(xì)闡述本發(fā)明。如下實(shí)施例為本發(fā) 明較佳的實(shí)施方式，本發(fā)明主要闡述所述菌株的發(fā)明思想，實(shí)施方式不一一在實(shí)施例中追 述，但并不因此限制本發(fā)明，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修 飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，應(yīng)被視為等效的置換方式，包含在本發(fā)明內(nèi)。
[0027] 實(shí)施例1淡紫擬青霉菌株P(guān)1TS01的分離、篩選 采集甘肅省永登縣中川鎮(zhèn)的土壤，土壤樣品過篩去掉石粒和雜物，取凈土 10g懸浮于 90mL0. 05%的吐溫80溶液中，搖勻，靜置15min，取其上清液2mL稀釋于8mL0. 05%吐 溫80中。
[0028] 選擇培養(yǎng)：將0. 1mL上述懸浮液接種于選擇培養(yǎng)基平板表面上，用三角玻棒均勻 涂抹。25°C下，恒溫培養(yǎng)3~6d，然后用接種環(huán)于單菌落上挑取菌絲，接種于PDA平板上繼 續(xù)培養(yǎng)，純化后保存于4°C冰箱中備用。