專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種治療男性更年期綜合癥及延緩衰老的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種中藥組合物，特別涉及一種治療男性更年期綜合癥及延緩衰老、增強(qiáng)免疫力、緩解疲勞的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：人隨著年齡的增長(zhǎng)，表現(xiàn)有不同時(shí)期的生理現(xiàn)象，男性更年期是過(guò)渡到老年的一段較漫長(zhǎng)的不可回避的年齡階段，這一時(shí)期生理上的明顯改變是從生殖機(jī)能旺盛逐漸到減弱，男性某些生理改變或自覺(jué)癥狀不十分明顯，因此，對(duì)男性更年期生理變化和相關(guān)疾病容易被忽略。隨著社會(huì)的進(jìn)步和工作生活節(jié)奏的加快，男性更年期出現(xiàn)的相關(guān)癥狀和疾病有上升趨勢(shì)，如心血管疾病、糖尿病、老年癡呆，提醒加強(qiáng)對(duì)更年期男性的呵護(hù)具有緊迫性。男性在更年期生理性的性激素分泌減少，隨之而引起下丘腦、垂體、腎上腺等內(nèi)分泌腺體的變化，全身性激素的靶器官組織隨之發(fā)生一系列變化，出現(xiàn)更年期綜合癥相關(guān)病癥。表現(xiàn)出情緒、心理、志趣、精力、食欲和性欲等多方面的變化，歸納起來(lái)常見(jiàn)癥狀有受傷或患病后康復(fù)時(shí)間長(zhǎng)，緊張焦慮，易激惹；性欲下降及消失；感到時(shí)間過(guò)得快；記憶力下降、注意力不集中；焦慮感或恐懼感增加；感到肥胖、體重增加；睡眠欠佳；猶豫不決；失去興趣和自信心。如果注意保健調(diào)理，這些現(xiàn)象可以減輕或不出現(xiàn)。既往一般采用雄激素補(bǔ)充治療(TST)，但用量和使用時(shí)間不易調(diào)整，近幾年對(duì)男性更年期相關(guān)疾病較前有所關(guān)注，為中醫(yī)藥研究男性更年期健康提供了契機(jī)。中醫(yī)藥的防治研究多以肝腎陰虛、虛火上炎；肝郁脾虛，精血失調(diào)；腎精虛衰，陰陽(yáng)兩虛分型治療，采用知柏地黃丸、杞菊地黃丸、柴胡疏肝散、金匱腎氣丸等加減，但專(zhuān)用于男性更年期疾病的防治中藥制劑尚屬少見(jiàn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于提供一種藥物組合物，本發(fā)明另一目的在于提供該藥物組合物的用途。本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成為淫羊藿20-50重量份紅景天5-15重量份益智仁2-9重量份山藥2-9重量份靈芝孢子粉1-5重量份黃精2-9重量份枸杞子5-15重量份韭菜子2-9重量份上述原料藥優(yōu)選重量配比如下淫羊藿35重量份紅景天10重量份益智仁5重量份山藥5重量份靈芝孢子粉2.5重量份黃精5重量份枸杞子10重量份韭菜子5重量份上述原料藥優(yōu)選重量配比如下淫羊藿25重量份紅景天14重量份益智仁8重量份山藥4重量份靈芝孢子粉2重量份黃精7重量份枸杞子13重量份韭菜子3.5重量份上述原料藥優(yōu)選重量配比如下淫羊藿45重量份紅景天6重量份益智仁3重量份山藥7重量份靈芝孢子粉4重量份黃精4重量份枸杞子7重量份韭菜子2.5重量份取本發(fā)明藥物組合物上述原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制備成臨床可接受的各種劑型，如膠囊劑、顆粒劑、片劑、口服液體制劑、水針劑或凍干粉針劑。本發(fā)明藥物組合物是一種以中藥輔腎為主，用于男性更年期的產(chǎn)品，其特征是具有"藥食同源"、"防治同步"的中藥組方、對(duì)提高男性更年期健康質(zhì)量、改善男性更年期心腦血管功能、增強(qiáng)免疫力、抗衰老、增強(qiáng)記憶力、抗疲勞、改善性淡漠、增加骨密度均具明顯作用。如果在更年期階段積極和正確防治更年期綜合癥及相關(guān)疾病，將對(duì)老年癡呆的發(fā)生具有積極的意義。沙棘2-9重量份白果l-5重量份熟地2-9重量份黃芪5-15重量份沙棘5重量份白果2.5重量份熟地5重量份黃甚10重量份沙棘3重量份白果4重量份熟地2.5重量份黃芪6重量份沙棘8重量份白果2重量份熟地6重量份黃甚14重量份本發(fā)明藥物組合物制備的制劑，克服了中成藥服用量大的弊端，具有有效成份高、服用安全、針對(duì)性強(qiáng)、適宜人群廣泛的特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)研究表明本發(fā)明藥物組合物能提高小鼠臟器體重比值，小鼠的體液免疫功能、單核-巨噬細(xì)胞細(xì)能、NK細(xì)胞活性測(cè)定結(jié)果均為陽(yáng)性，具有增強(qiáng)免疫力的功能；能延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、降低疲勞小鼠血清尿素產(chǎn)生、增加小鼠肝糖原的儲(chǔ)備量，具有緩解體力疲勞功能。下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明藥物組合物增強(qiáng)免疫功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑，為內(nèi)裝棕褐色粉劑內(nèi)容物的膠囊。常溫保存，供實(shí)驗(yàn)用。選用SPF級(jí)健康ICR小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，其中19.4-21.9g雌性小鼠60只，分為4組，每組15只，作為免疫I組，進(jìn)行臟器體重比值測(cè)定、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、半數(shù)溶血值(HC5。)的測(cè)定和抗體生成細(xì)胞數(shù)的測(cè)定18.1-19.8g雌性小鼠60只，分為4組，每組15只，作為免疫II組，進(jìn)行碳廓清實(shí)驗(yàn)；18.0-18.9g雌性小鼠60只，分為4組，每組15只，作為免疫III組，進(jìn)行ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和NK細(xì)胞活性測(cè)定。1.1劑量組選擇與受試物給予方式推薦劑量每人(按60kg體重計(jì))每日2.lg本發(fā)明藥物組合物，相當(dāng)于0.035g/kgBW。實(shí)驗(yàn)設(shè)人體推薦量的10倍，即每日0.350g/kgBW，上、下各設(shè)一個(gè)劑量組:1.050g/kgBW(30倍)和0.035g/kgBW(l倍)。樣品以消毒水配制，0.000g/kgBW劑量組以消毒水代替受試物。實(shí)驗(yàn)小鼠以遠(yuǎn)交系小鼠專(zhuān)用料喂詞，經(jīng)口每日一次灌胃給予小鼠受試物，連續(xù)給予30d后測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。小鼠灌胃量為20mL/kgBW。1.2主要儀器與試劑動(dòng)物天平、電子天平、潔凈工作臺(tái)、二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機(jī)、721分光光度計(jì)、恒溫水浴、酶標(biāo)儀、顯微鏡等。無(wú)菌手術(shù)器械、游標(biāo)卡尺(精密度0.01mm)、微量注射器、細(xì)胞計(jì)數(shù)器、24孔和96孔平底細(xì)胞培養(yǎng)板、96孔U型細(xì)胞培養(yǎng)板、96孔酶標(biāo)微孔板、玻璃平皿、紗布、試管、玻片架、計(jì)時(shí)器、血色素吸管、載玻片等。綿羊紅細(xì)胞(SRBC)、生理鹽水、Hank，s液(pH7.2-7.4)、RPMI1640培養(yǎng)液、小生血清、青鏈霉素、刀豆蛋白A(ConA)、1%冰醋酸、lmol/L的HCI溶液、酸性異丙醇(96mL異丙醇加lmol/L的HC1溶液4ml)、MTT、PBS緩沖液(pH7.2-7.4)、補(bǔ)體(豚鼠血清)、SA緩沖液、瓊脂糖、都氏試劑(碳酸氫納1.0g，高鐵氰化鉀0.2g，氰化鉀0.05g，加蒸餾水至1000mU、YAC-1細(xì)胞、乳酸鈉、硝基氯化四氮唑、吩嗪二甲酯硫酸鹽、氧化型輔酶I、0.2moI/L的Tris-HCl緩沖液(PH8.2)、2.5%Triton、印度墨汁、0.l%Na2C03、雞紅細(xì)胞、甲醇、Giemsa染液等。1.3實(shí)驗(yàn)方法1.3.l臟器體重比值的測(cè)定小鼠稱(chēng)重后脫臼處死，取脾臟和胸腺，去盡筋膜，用濾紙吸干臟器表面血污，稱(chēng)重，計(jì)算脾臟體重比值和胸腺體重比值。1,3.2半數(shù)溶血值(HCs。)的測(cè)定取羊血。生理鹽水洗滌3次，每只鼠經(jīng)腹腔注射2%(v/v，用生理鹽水配制)壓積SRBC0.2mL進(jìn)行免疫。5d后，摘除眼球取血于離心管內(nèi)，放置約lh，將凝固血與管壁剝離，使血清充分析出，6000rpm離心4min，收集血清。用SA緩沖液將血清稀釋400倍，取lmL置試管內(nèi)，依次加入10%(v/v，用SA緩沖液配制)壓積SRBC0.5mL，補(bǔ)體lmL(用SA緩沖液按1:8稀釋)。另設(shè)不加血清的對(duì)照管(以SA緩沖液代替)。置37'C恒溫水浴中保溫15min后，冰浴終止反應(yīng)。2000rpm離心10min，取上清lmL，加都氏試劑3mL。同時(shí)取10%(v/v，用SA緩沖液配制)的壓積SRBC0.25mL，加都氏試劑至4mL于另一試管中，充分混勻，放置10min后，于540nm處以對(duì)照管作空白，分別測(cè)定各管光密度值。溶血素的量以半數(shù)溶血值(HCs。)表示，所得數(shù)據(jù)為計(jì)量資料，若受試物組的半數(shù)溶血值明顯高于0.000g/kgBW組，且差異有顯著性(P〈0.05)，可判定該受試物有提高小鼠的半數(shù)溶血值的作用。1.3.3小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)小鼠尾靜脈注射稀釋的印度墨汁，待墨汁注入，立即計(jì)時(shí)。注入墨汁后2、10min，分別從內(nèi)眥靜脈叢取血20"L，并將其加到2mL化20)3溶液中。用721分光光度計(jì)在600nm波長(zhǎng)處測(cè)光密度值(0D),以化20)3溶液作空白對(duì)照。將小鼠處死，取肝臟和脾臟稱(chēng)重，所得數(shù)據(jù)為計(jì)量資料，若受試物組的吞噬指數(shù)明顯高于0.00g/kgBW組，且差異有顯著性(P<0.05)，可判定該受試物有提高小鼠單核-巨噬細(xì)胞的碳廓清能力的作用。1.3.4小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(滴片法)用頸椎脫臼法處死小鼠，腹腔注射加小牛血清的Hank's液4mL/只，輕輕按揉腹部20次，以充分洗出腹腔巨噬細(xì)胞，然后將腹壁剪開(kāi)一個(gè)小口，用注射器吸取腹腔洗液2mL于試管內(nèi)。用lmL加樣器吸取腹腔洗液0.5mL加入盛有0.5mLP/。雞血紅細(xì)胞懸液的試管內(nèi)，混勻。用注射器(裝大針頭)吸取0.5mL混合液。加入玻片的瓊脂圈內(nèi)。放置孵箱內(nèi)37。C孵育15min。孵育結(jié)束后迅速用生理鹽水將未貼壁細(xì)胞沖掉，于甲醇液中固定lmin，Giemsa液染色15min。用蒸餾水沖洗干凈，晾干，用40X顯微鏡計(jì)數(shù)吞噬率和吞噬指數(shù)。所得數(shù)據(jù)為計(jì)量資料，若受試物組的吞噬率或吞噬指數(shù)明顯高于0.000g/kgBW組，且差異有顯著性(p〈0.05)?？膳卸ㄔ撌茉囄镉刑岣咝∈缶奘杉?xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的作用。1.3.5NK細(xì)胞活性的測(cè)定(乳酸脫氫酶LDH測(cè)定法)實(shí)驗(yàn)前24h將靶細(xì)胞YAC-1進(jìn)行傳代培養(yǎng)，應(yīng)用前以Hank's液洗3次，用含10%小牛血清的RPMI1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為4X1()5個(gè)/inL。受試小鼠頸椎脫臼處死，無(wú)菌取脾，制成脾細(xì)胞懸液，用Hank's液洗2次，每次離心10min(1000r/min)。裂解紅細(xì)胞后，再用lmL含10%小牛血清的RPMI1640完全培養(yǎng)液重懸，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)(應(yīng)在95%以上)，調(diào)整細(xì)胞濃度為2X107個(gè)mL，使效靶比為50:1。取靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞各100uL，加入U(xiǎn)形96孔培養(yǎng)板中；靶細(xì)胞自然釋放孔加靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各100uL，靶細(xì)胞最大釋放孔加靶細(xì)胞和2.5%Triton各100uL;上述各項(xiàng)均設(shè)三個(gè)平行孔，37°C，5%0)2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h，將96孔板以1500rpm離心5min，每孔吸取上清100uL置96孔酶標(biāo)板中，加入LDH基質(zhì)液100uL，反應(yīng)10min，然后每孔加入lmol/L的HC1溶液30uL終止反應(yīng)，在酶標(biāo)儀490nm處測(cè)OD值LDH基質(zhì)液的配制乳酸鈉5X10—2mol/L硝基氯化四氮唑6.6X10-4mol/L吩嗪二甲酯硫酸鹽2.8X10—4mol/L氧化型輔酶I1.3X10-3mol/L將上述試劑溶于0.2mol/L的Tris-HCl緩沖液中(pH8.2)所得數(shù)據(jù)為計(jì)量資料,若受試物組的NK細(xì)胞活性明顯高于0.000g/kgBW組，且差異有顯著性(p〈0.05)，可判定該受試物有提高小鼠NK細(xì)胞活性的能力。1.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.4.1本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠臟器體重比值的影響表l本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠脾臟體重比值的影響()C士SD)劑量組(g/kgBW)動(dòng)物數(shù)(只)脾臟體重比值(mg/g)P值0.000155.71±0.850.035156.61±1.00*0.0140.350156.39±1.150.0611.050156.15±0.880.221郵〈0.05經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑(由實(shí)施例l制成)30d，原始數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表1可見(jiàn)，在0.035g/kgBW組與0.000g/kgBW組間比較，差異有顯著性(P〈0.05)。在其余各劑量組與0.000g/kgBW組間比較，差異均無(wú)顯著性(P〉0.05)。即本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑在0.035g/kgBW組能提高小鼠的脾臟體重比值。表2本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠胸腺體重比值的影響()(士SD)劑量組(g/kgBW)動(dòng)物數(shù)(只)胸腺體重比值(mg/g)P值0.000152.46±0.630.035152.99±0.60*0.0300.350152.33±0.700.5741.050152.55±0.630.704*P〈0.05經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑(由實(shí)施例1制成)30d，原始數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表2可見(jiàn)，在0.035g/kgBW組與0.OOOg/kgBW組間比較，差異有顯著性(p〈0.05)。在其余各劑量組與0.OOOg/kgBW組間比較，差異均無(wú)顯著性(p>0.05)。即本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑在0.035g/kgBW組能提高小鼠的胸腺體重比值。1.4.2本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠體液免疫功能的影響表3本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠半數(shù)溶血值(HC5。)的影響(又土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*p〈0.05經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑(由實(shí)施例2制成)30d，原始數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表3可見(jiàn)，在0.035g/kgBW組、1.050g/kgBW組與0.000g/kgBW組間比較，差異均有顯著性(p<0.05)。在0350g/kgBW組與0.OOOg/kgBW組間比較，差異無(wú)顯著性(P>0.05)。即本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑在0.035g/kgBW組、1.050g/kgBW組均能提高小鼠的半數(shù)溶血值。由表3可見(jiàn)，本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑小鼠體液免疫功能測(cè)定結(jié)果陽(yáng)性。1.4.3本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響表4本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)單核-巨噬細(xì)胞碳廓清能力的影響(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*p<0.05經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑(由實(shí)施例3制成)30d，原始數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方差進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。表4可見(jiàn)，在0.350g/kgBW組與0.000g/kgBW組間比較，差異有顯著性(p〈0.05)。在其余各劑量組與0.000g/kgBW組間比較，差異均無(wú)顯著性(p〉0.05)。即本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑在0.350g/kgBW組能提高小鼠單核-巨噬細(xì)胞碳廓清能力。表5本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞雞紅細(xì)胞吞噬率的影響(X土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>*p〈0.05經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑(由實(shí)施例3制成)30d，原始數(shù)據(jù)進(jìn)行平方根反正弦轉(zhuǎn)換后，方差不齊，再進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后，經(jīng)過(guò)方差齊性檢驗(yàn)，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表5可見(jiàn)，在0.035g/kgBW組與0.000g/kgBW組間比較，差異有顯著性(p<0.05)。在其余各劑量組與0.000g/kgBW組間比較，差異均無(wú)顯著性(p>0.05)。即本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑在0.035g/kgBW組能提高小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的吞噬率。表6本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞雞紅細(xì)胞吞噬指數(shù)的影響(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>*p〈0.05經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑(由實(shí)施例1制成)30d，原始數(shù)據(jù)方差不齊，進(jìn)行對(duì)數(shù)和平方根等參數(shù)轉(zhuǎn)換后，仍不符合方差齊的要求，再進(jìn)行秩次轉(zhuǎn)換后，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表6可見(jiàn)，在0.035g/kgBW組與0.000g/kgBW組間比較，差異有顯著性(p<0.05)。在其余各劑量組與O.OOOg/kgBW組間比較，差異均無(wú)顯著性(p〉0.05)。即本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑在0.035g/kgBW組能提高小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的吞噬指數(shù)。由表4、5、6可見(jiàn)，本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑小鼠單核-巨噬細(xì)胞功能測(cè)定結(jié)果陽(yáng)性。1.4.4本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響表7本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響(X士SD)劑量組(g/kgBW)動(dòng)物數(shù)(只)NK細(xì)胞活性(％)NK細(xì)胞活性平方根反正弦轉(zhuǎn)換值P值0.0001444.6±8.041.9±4.70.0351447.0±4.843.3±2.80.4180.3501550.6±8.945.4±5.3*0.0411.0501457.0±8.549.1±5.0**0.000氺p〈0.05林p〈0.01經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑(由實(shí)施例2制成)30d,原始數(shù)據(jù)進(jìn)行平方根反正弦轉(zhuǎn)換后，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表7可見(jiàn)，在0.350g/kg組與0.000g/kgBW組間比較，差異有顯著性(p〈0.05),在1.050g/kgBW組與0.000g/kgBW組間比較，差異有極顯著性(p〈0.01)，在0.035g/kgBW與0.000g/kgBW組間比較，差異無(wú)顯著性(p〉0.05)。即本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑在0.350g/kgBW組、1.050g/kgBW組均能提高小鼠的NK細(xì)胞活性，即小鼠NK細(xì)胞活性測(cè)定結(jié)果陽(yáng)性。1.5實(shí)驗(yàn)小結(jié)經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑30d，能提高小鼠臟器體重比值和胸腺比值，小鼠的體液免疫功能、單核-巨噬細(xì)胞細(xì)能、NK細(xì)胞活性測(cè)定結(jié)果為陽(yáng)性。由此可見(jiàn)，本發(fā)明藥物組合物具有增強(qiáng)免疫力的功能。實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明藥物組合物緩解體力疲勞功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)選用SPF級(jí)健康ICR小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，其中21.022.Og雄性小鼠60只，分為4組，每組15只，作為I組，進(jìn)行血乳酸測(cè)定、血清尿素測(cè)定；19.221.2g雄性小鼠60只，分為4組，每組15只，作為II組，進(jìn)行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)；18.019.8g雄性小鼠60只，分為4組，每組15只，作為III組，進(jìn)行肝糖原測(cè)定。2.1劑量選擇與受試物給予方式本發(fā)明藥物組合物推薦量為2.1g/日，相當(dāng)于0.035g/日/kgBW。實(shí)驗(yàn)設(shè)人體推薦量的10倍，即每日0.350g/kgBW，上、下設(shè)二個(gè)劑量組1.050g/kgBW(30倍)和0.035g/kgBW(1倍)。樣品以消毒水配制，0.OOOg/kgBW組以消毒水代替受試物。實(shí)驗(yàn)小鼠以遠(yuǎn)交系小鼠專(zhuān)用料喂飼，經(jīng)口每日一次灌胃給予小鼠受試物。連續(xù)灌胃30d后測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。小鼠灌胃量為20mL/kgBW。2.2主要儀器與試劑動(dòng)物天平、電子天平、離心機(jī)、高速分散器、沸水浴、振蕩器、生物傳感分析儀、可見(jiàn)光分光光度計(jì)。游泳箱(大小約50cmX50cmX40cm)、鉛皮、計(jì)時(shí)器、血色素吸管、微量移液器、吸量管、試管、具塞試管。乳酸測(cè)定膜、溶血?jiǎng)?腿ol/L乳酸標(biāo)準(zhǔn)液、緩沖液、5%三氯醋酸溶液(用蒸餾水配制)(TCA)、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液(100mg/dL)、95%乙醇、72%H2S04溶液(用蒸餾水配制)、蒽酮試劑(含0.05%的蒽酮，1%的硫脲，用72%的H2S04溶液配制)。2.3實(shí)驗(yàn)方法2.3.1負(fù)重游泳試驗(yàn)水溫末次給小鼠受試物30min后，置于游泳箱中游泳，水深約30cm，水溫25°C±0.5°C，鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛皮。記錄小鼠自游泳開(kāi)始至死亡的時(shí)間，作為小鼠負(fù)重游泳時(shí)間(s)。游泳時(shí)間為計(jì)量資料，若受試物游泳時(shí)間明顯長(zhǎng)于0.000g/kgBW組游泳時(shí)間，且差異有顯著性(P〈0.05)，可判定該受試物有延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的作用。2.3.2血清尿素測(cè)定末次給小鼠受試物30min后，在溫度為30°C±0.5T:的水中游泳90min。運(yùn)動(dòng)后休息60rain后立即拔眼球采血0.5mL。于4。C置3h后2000rpm離心15min，吸取100uL血清加入200uL生理鹽水中，稀釋混勻后，按全自動(dòng)生化分析儀說(shuō)明書(shū)操作，所得數(shù)值乘以3，即為血清尿素值。所得數(shù)據(jù)為計(jì)量資料，若受試物組血清尿素含量明顯低于O.OOOOg/kgBW組，且差異有顯著性(P〈0.05)，可判定該受試物有減少疲勞小鼠尿素產(chǎn)生的作用。2.3.3肝糖原測(cè)定蒽酮法末次給小鼠受試物30min后，立即處死，取肝臟經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，精確稱(chēng)取肝臟100mg置試管中，用刻度吸管加入4mLTCA,勻漿后以3000rpm離心15min，取上清夜0.5mL，加95%乙醇2mL，混勻，4。C過(guò)夜，次日以3000rpm離心15min，棄上清，揮發(fā)至干，用2mL蒸餾水將管底糖原洗至另一試管內(nèi)，同時(shí)取0.5mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液，加入1.5mL蒸餾水作為標(biāo)準(zhǔn)管。取2mL蒸餾水加入另一試管中作為試劑空白。各試管中加入lOmL蒽酮試劑，煮沸15min，冷卻后在620nm波長(zhǎng)比色測(cè)定，計(jì)算肝糖原含量，所得數(shù)據(jù)為計(jì)量資料，若受試物組肝糖原含量明顯高于0.0000g/kgBW組，且差異有顯著性(P<0.05)，可判定該受試物有促進(jìn)小鼠肝糖原儲(chǔ)備的作用。2.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.4.1本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響表8本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響(x士SD)劑量(g/kgBW)動(dòng)物數(shù)(只)游泳時(shí)間(s)游泳時(shí)間對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換值P值0.000155107±56763.32±0.640.035154901±62513.29±0.620.8590.350155528±57023.46±0.530.4831.050149811±50483.90±0.34**0.006*P〈0.01經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑(由實(shí)施例1制成)30d，原始數(shù)據(jù)非正態(tài)分布，經(jīng)過(guò)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后，進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，符合正態(tài)方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表8可見(jiàn)，在1.0500g/kgBW組與.000g/kgBW組間比較，差異有極顯著性(P<0.01),在其余各劑量組與O.OOOg/kgBW組間比較，差異均無(wú)顯著性(P>0.05)，即本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑在1.050g/kgBW組能延長(zhǎng)小鼠的負(fù)重游泳時(shí)間。2.4.2本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)疲勞小鼠血清尿素的影響表9本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑對(duì)疲勞小鼠血清尿素的影響(x土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>*P<0.05經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑(由實(shí)施例1制成)30d，原始數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表9可見(jiàn)，在1.050gAgBW組與0.OOOg/kgBW組間的比較，差異有顯著性(P<0.05)，在其余各劑量組與0.OOOg/kgBW組間比較，差異均無(wú)顯著性(P>0.05)。即本發(fā)明藥物組合物膠囊制劑在1.050g/kgBW組能降低疲勞小鼠血清尿素的產(chǎn)生。2.4.3本發(fā)明藥物組合物顆粒制劑對(duì)小鼠肝糖原儲(chǔ)備量的影響表10本發(fā)明藥物組合物顆粒制劑對(duì)小鼠肝糖原儲(chǔ)備量的影響(x±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>*P<0.05^^P<0.01經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物顆粒制劑(由實(shí)施例4制成)30d，原始數(shù)據(jù)方差不齊，經(jīng)過(guò)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后，進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，符合方差齊的要求，用單因素方差分析方法和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。由表10可見(jiàn)，在0.350g/kgBW組與0.OOOg/kgBW組間比較，差異有顯著性(P<0.05)，在1.050g/kgBW組與0.OOOg/kgBW組比較，差異有極顯著性(P<0.01)。在0.035g/kgBW組與0,OOOg/kgBW組間比較，差異無(wú)顯著性(P>0.05)。即本發(fā)明藥物組合物在0.350g/kgBW組、1.050g/kgBW組均能增加小鼠肝糖原的儲(chǔ)備量。實(shí)驗(yàn)小結(jié)經(jīng)口給予小鼠不同劑量的本發(fā)明藥物組合物30d，能延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、降低疲勞小鼠血清尿素產(chǎn)生、增加小鼠肝糖原的儲(chǔ)備量。由此可見(jiàn)本發(fā)明藥物組合物具有緩解體力疲勞功能。實(shí)驗(yàn)例3本發(fā)明水煎劑治療男性更年期綜合征40例臨床觀察男性在更年期生理性的性激素分泌減少，隨之而引起下丘腦、垂體、腎上腺等內(nèi)分泌腺體的變化，全身性激素的靶器官組織隨即之發(fā)生一系列變化，出現(xiàn)更年期綜合癥相關(guān)病癥。表現(xiàn)出情緒、心理、志趣、精力、食欲和性欲等多方面的變化，歸納起來(lái)常見(jiàn)癥狀有受傷或患病后康復(fù)時(shí)間長(zhǎng)，緊張焦慮，易激惹；性欲下降及消失；感到時(shí)間過(guò)得快；記憶力下降、注意力不集中；焦慮感或恐懼感增加；感到肥胖、體重增加；睡眠欠佳；猶豫不決；失去興趣和自信心。研究者在門(mén)診觀察本發(fā)明水煎劑治療男性更年期綜合征40例總結(jié)報(bào)告如下本組40例病人年齡在50至65歲之間，平均年齡為57.5歲。臨床表現(xiàn)目前國(guó)內(nèi)尚無(wú)統(tǒng)一的男性更年期癥狀標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)國(guó)際JedDiamondg歸納的癥狀:a.緊張焦慮、易激惹；b.記憶力下降、注意力不集中；c.焦慮感或恐懼感增加；d.睡眠欠佳；e.猶豫不決；f.性欲下降及消失；g.受傷或患病后康復(fù)時(shí)間表；h.失去興趣和自信心；i.感到時(shí)間過(guò)得快；j.感到肥胖、體重增加排除它病的類(lèi)似癥狀。實(shí)驗(yàn)室檢查:男性生殖內(nèi)分泌檢查、骨質(zhì)代謝、心血管相關(guān)檢查。治療方法由醫(yī)院統(tǒng)一監(jiān)制的本發(fā)明水煎劑，療程與服用方法每天服用三次，四周為一療程。治愈:服藥后癥狀完全消失，實(shí)驗(yàn)室陽(yáng)性指標(biāo)恢復(fù)正常；好轉(zhuǎn):主癥明顯減輕，其它癥狀消失或減輕，陽(yáng)性指標(biāo)改善；無(wú)效癥狀及檢査指標(biāo)無(wú)改變。治療結(jié)果:療程最長(zhǎng)為8個(gè)月，最短為兩周，停藥兩周后統(tǒng)計(jì)分析,治愈21例,好轉(zhuǎn)15例，無(wú)效4例，總有效率92%。下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例所述的效果。具體實(shí)施方式實(shí)施例l:膠囊劑的制備淫羊藿35kg紅景天10kg沙棘5kg山藥5kg白果2.5kg靈芝孢子粉2.5kg韭菜子5kg按照常規(guī)工藝水煮、熟地5kg枸杞子10kg取上述原料藥，加入常規(guī)輔料成粉劑入膠囊。實(shí)施例2:膠囊劑的制備淫羊藿25kg紅景天14kg山藥4kg白果4kg熟地2.5kg枸杞子13kg取上述原料藥，加入常規(guī)輔料成粉劑入膠囊。實(shí)施例3:膠囊劑的制備淫羊藿45kg紅景天6kg山藥7kg白果2kg熟地6kg枸杞子7kg取上述原料藥，加入常規(guī)輔料成粉劑入膠囊。實(shí)施例4:顆粒劑的制備淫羊藿35kg紅景天10kg山藥5kg白果2.5kg熟地5kg枸杞子10kg益智仁5kg黃精5kg黃芪10kg醇沉、烘干粉碎制沙棘3kg靈芝孢子粉2kg韭菜子3.5kg按照常規(guī)工藝水煮-益智仁8kg黃精7kg黃芪6kg醇沉、烘干粉碎制沙棘8kg靈芝孢子粉4kg韭菜子2.5kg按照常規(guī)工藝水煮-益智仁3kg黃精4kg黃芪14kg醇沉、烘干粉碎制沙棘5kg靈芝孢子粉2.5kg韭菜子5kg益智仁5kg黃精5kg黃芪10kg取上述原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成顆粒劑。實(shí)施例5:片劑的制備淫羊藿25kg紅景天14kg沙棘3kg益智仁8kg山藥4kg白果4kg靈芝孢子粉2kg黃精7kg熟地2.5kg枸杞子13kg韭菜子3.5kg黃芪6kg取上述原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成片劑。實(shí)施例6:口服液的制備淫羊藿45kg紅景天6kg沙棘8kg益智仁3kg山藥7kg白果2kg靈芝孢子粉4kg黃精4kg熟地6kg枸杞子7kg韭菜子2.5kg黃芪14kg取上述原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成口服液。實(shí)施例7:水針劑的制備淫羊藿45kg紅景天14kg沙棘3kg益智仁4kg山藥7kg白果4kg靈芝孢子粉2kg黃精3kg熟地8kg枸杞子14kg韭菜子2.5kg黃芪6kg取上述原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制備成水針劑。實(shí)施例8:膠囊劑的制備淫羊藿25kg紅景天6kg沙棘8kg益智仁7kg山藥3kg白果2kg靈芝孢子粉4kg黃精7kg熟地2.5kg枸杞子6kg韭菜子8kg黃芪14kg取上述原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝水煮、醇沉、烘干粉碎制成粉劑入膠囊。權(quán)利要求1、一種治療男性更年期綜合癥及延緩衰老的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物原料藥組成為淫羊藿20-50重量份紅景天5-15重量份沙棘2-9重量份益智仁2-9重量份山藥2-9重量份白果1-5重量份靈芝孢子粉1-5重量份黃精2-9重量份熟地2-9重量份枸杞子5-15重量份韭菜子2-9重量份黃芪5-15重量份。1、一種治療男性更年期綜合癥及延緩衰老的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物原料藥組成為紅景天5-15重量份山藥2-9重量份黃精2-9重量份韭菜子2-9重量份2、如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物原料藥組成為紅景天10重量份山藥5重量份黃精5重量份韭菜子5重量份3、如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物原料藥組成為紅景天14重量份山藥4重量份黃精7重量份韭菜子3.5重量份4、如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物原料藥組成為紅景天6重量份山藥7重量份黃精4重量份韭菜子2.5重量份5、如權(quán)利要求1-4任一所述的藥物組合物，其特征在于取上述組合物原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成膠囊劑、顆粒劑、片劑、口服液體制劑、水針劑或凍干粉針劑。淫羊藿25重量份益智仁8重量份靈芝孢子粉2重量份枸杞子13重量份沙棘3重量份白果4重量份熟地2.5重量份黃芪6重量份。淫羊藿45重量份益智仁3重量份靈芝孢子粉4重量份枸杞子7重量份沙棘8重量份白果2重量份熟地6重量份黃芪14重量份,6、如權(quán)利要求1-4任一所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為取原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成膠囊劑、顆粒劑、片劑、口服液體制劑、水針劑或凍干粉針劑。7、如權(quán)利要求1-4任一所述的藥物組合物在制備治療男性更年期綜合癥的藥物中的應(yīng)用。8、如權(quán)利要求1-4任一所述的藥物組合物在制備具有延緩衰老、增強(qiáng)免疫力或緩解疲勞的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)一種治療男性更年期綜合癥及延緩衰老的藥物組合物，該藥物組合物由淫羊藿、紅景天、沙棘、益智仁、山藥、白果、靈芝孢子粉、黃精、熟地、枸杞子、韭菜子、黃芪制成。上述原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制備成臨床可接受的各種劑型，如膠囊劑、顆粒劑、片劑、口服液體制劑等。本發(fā)明還提供了該藥物組合物制劑在制備治療男性更年期綜合癥及延緩衰老、增強(qiáng)免疫力、緩解疲勞藥物中的用途。文檔編號(hào)A61K36/9062GK101461918SQ20071030204公開(kāi)日2009年6月24日申請(qǐng)日期2007年12月20日優(yōu)先權(quán)日2007年12月20日發(fā)明者劉敏如,李嘉音申請(qǐng)人:漢生堂藥業(yè)有限公司