專利名稱：：花色苷磷脂復(fù)合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及花色苷磷脂復(fù)合物及其制備方法，包括花色苷磷脂復(fù)合物及其制備方法，屬于藥品保健品領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：花色苷(anthocyanin)是一類(lèi)廣泛存在于植物中的水溶性色素，也被稱作花色素類(lèi)物質(zhì)或花青素類(lèi)物質(zhì)，是植物的主要呈色物質(zhì)，花色苷類(lèi)色素也是自然界中大量存在的一種水溶性的植物色素物質(zhì)，化學(xué)結(jié)構(gòu)為2—苯基苯丙吡喃多羥基或多甲氧基取代物的糖苷，是一種類(lèi)黃酮物質(zhì)，通常包括天竺葵色素、矢車(chē)菊色素、飛燕草色素、芍藥色素、矮牽牛色素、錦葵色素化學(xué)成分，代表性成分為花青素(anthocyanidin)—3—0-葡萄糖苷(C3G)、花青素鼠李糖苷、花青素阿拉伯糖苷、花青素半乳糖糖苷。來(lái)源上花色苷色素包括越桔花色苷色素、葡萄皮花色苷色素、黑加侖花色苷色素、黑米花色苷色素、桑葚花色苷色素、玫瑰茄花色苷色素、花生衣花色苷色素等?；ㄉ丈鼐哂休^強(qiáng)的抗氧化和清除自由基作用，可以降低高血脂大鼠的甘油脂水平，改善高甘油脂脂蛋白的分解代謝；抑制膽固醇吸收，降低低密度脂蛋白膽固醇含量；抗變異、抗腫瘤、抗過(guò)敏、保護(hù)胃粘膜。能夠減輕眼疲勞、提高黑暗中視力以及視覺(jué)瞬間改變適應(yīng)能力，對(duì)人視覺(jué)具有保護(hù)作用，對(duì)近視、單純綠內(nèi)障、視網(wǎng)膜炎色盲具有改善作用?；ㄉ帐腔ㄇ嗨氐奶擒昭苌?，自然條件下游離的花青素(anthocyanidin)極少見(jiàn)，而常與一個(gè)或多個(gè)葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等通過(guò)糖苷鍵形成花色苷(anthocyanin)。花色苷基本結(jié)構(gòu)如下R1和R2是H、OH或者OCH3，R3是糖基或H，R4是糖基或OH。花色苷化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)羥基，具有較強(qiáng)的極性和一定的水溶性，脂溶性較差，化學(xué)穩(wěn)定性差，隨著存在環(huán)境的變化而發(fā)生轉(zhuǎn)變?；ㄉ疹?lèi)物質(zhì)通常生物利用度較低，不利于某些藥用制劑的應(yīng)用。為了提高其穩(wěn)定性和生物利用度，我們采用制備成磷脂復(fù)合物的方法，提高花色苷的化學(xué)穩(wěn)定性和生物利用度。磷脂普遍存在于動(dòng)植物細(xì)胞的原生質(zhì)和生物膜中，對(duì)生物膜的生理活性和機(jī)體的正常代謝有重要的調(diào)節(jié)功能。磷脂是含磷酸根的脂類(lèi)物質(zhì)，屬天然元素有機(jī)化合物，它既有表面活性，又具有生物活性，是特種表面活性劑。磷脂分子具有一個(gè)親水性的頭部和兩條疏水長(zhǎng)鏈，其結(jié)構(gòu)式如下式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中R，Rl是C14-C20的飽和或不飽和脂肪羧酸，而R2是膽堿、乙醇胺、絲氨酸等。磷原子上的羥基中的氧原子有較強(qiáng)的得電子的傾向，而氮原子有較強(qiáng)的失電子的傾向，因此磷脂在一定條件下可與某些特定結(jié)構(gòu)的藥物成分生成復(fù)合物。目前研究能與磷脂形成穩(wěn)定復(fù)合物且能有效改善母體藥物生物學(xué)特性和藥理活性的化學(xué)結(jié)構(gòu)有；有機(jī)酸類(lèi)化合物，如水楊酸、芳基乙酸、蛋白、多肽類(lèi)、金屬離子、以及中藥的皂苷、黃酮類(lèi)成分。關(guān)于花色苷磷脂復(fù)合物有關(guān)聯(lián)的專利有中國(guó)專利CN99814446.0，用作抗動(dòng)脈硬化的原花色素A2磷脂復(fù)合物，該專利未涉及本
發(fā)明內(nèi)容。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，提供了一種花色苷磷脂復(fù)合物及其制備方法。本發(fā)明花色苷磷脂復(fù)合物的穩(wěn)定性好，改善了花色苷的脂溶性，使人體很容易吸收，最終增強(qiáng)其藥理作用及療效。為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種花色苷磷脂復(fù)合物，其組成包括花色苷與磷脂，花色苷與磷脂的重量比為1:1-20。所述花色苷磷脂復(fù)合物，其優(yōu)選組成包括花色苷與磷脂，花色苷與磷脂的重量比為1:2-4。所述的花色苷是葡萄花色苷、黑米花色苷，越桔花色苷，黑加侖花色苷、山楂花色苷或桑葚花色苷中的一種或它們的任意比例混合物。所述的花色苷是花青素鼠李糖苷、花青素半乳糖苷、花青素阿拉伯糖苷或花青素葡萄糖苷中的一種或它們的任意比例混合物。所述的磷脂是大豆磷脂、蛋黃磷脂或大豆磷脂和蛋黃磷脂或它們的混合物；磷脂是磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺或磷脂酰絲氨酸中的至少一種；磷脂是二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺或二棕櫚酰磷脂酰膽堿和二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺的混合物。一種所述花色苷磷脂復(fù)合物的制備方法，它包括如下步驟按所述重量比取花色苷與磷脂，于介電常數(shù)小的有機(jī)溶劑中混合，有機(jī)溶劑的使用量為1毫克花色苷不低于lml的有機(jī)溶劑，反應(yīng)的溫度為10-80°C，反應(yīng)時(shí)間為0.5-5小時(shí)，然后減壓干燥或冷凍干燥，除去有機(jī)溶劑，得花色苷磷脂復(fù)合物。所述的有機(jī)溶劑為氯仿、乙醚、丙酮、二氯甲烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、正己垸、CVC6直鏈或支鏈低級(jí)垸醇中的一種或一種以上混合物，其中d-C6直鏈或支鏈低級(jí)烷醇為甲醇、乙醇、丙醇或丁醇。所述的花色苷磷脂復(fù)合物加入常規(guī)輔料按常規(guī)方法制成顆粒劑、膠囊劑或片劑。所述的花色苷磷脂復(fù)合物加入乳化劑和中鏈脂肪酸液體油或植物油，經(jīng)乳化后制成花色苷磷脂復(fù)合物脂肪乳劑。所述的花色苷磷脂復(fù)合物加入乳化劑和固體脂質(zhì)、液體脂質(zhì)或他們的混合物，制成脂質(zhì)納米粒。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和效果如下本發(fā)明花色苷磷脂復(fù)合物，改善了花色苷的脂溶性，在正辛醇中的溶解度增加近十倍，具有類(lèi)似磷脂的理化性質(zhì)。花色苷磷脂復(fù)合物穩(wěn)定性好。由于磷脂復(fù)合物具有類(lèi)似磷脂的良好的粘膜透過(guò)性及緩慢釋放特性，因此可增加花色苷在胃腸道中吸收，使花色苷具有一定長(zhǎng)效作用。具體實(shí)施例方式下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受實(shí)施例所限。實(shí)施例1:取黑米花色苷50mg，加入95X乙醇200ml，加入大豆磷脂100mg，加熱至6(TC回流并攪拌反應(yīng)2小時(shí)，減壓除去乙醇，常規(guī)低溫真空干燥，得固體狀花色苷磷脂復(fù)合物。實(shí)施例2:取越桔花色苷100mg，加入四氫呋喃500ml,加入大豆磷脂2000mg，加熱至5(TC回流，攪拌反應(yīng)2小時(shí)，減壓除去反應(yīng)溶劑四氫呋喃，低溫真空干燥，得固體狀花色苷磷脂復(fù)合物。所述的四氫呋喃可以由乙酸乙酯、丙醇或丁醇中的任意一種或它們的任意比例混合物替代。實(shí)施例3:取葡萄花色苷100mg，加入丙酮200ml，加入蛋黃磷脂1000mg，加熱至60x:回流，攪拌反應(yīng)1小時(shí)，減壓除去反應(yīng)溶劑丙酮，加入正己烷溶解，過(guò)濾，濾液減壓回收溶劑正己烷，殘?jiān)蜏卣婵崭稍?，得花色苷磷脂?fù)合物。實(shí)施例4:取桑葚花色苷100mg，加入二氯甲烷300ml，加入蛋黃磷脂600mg，加熱至4(TC回流，攪拌反應(yīng)2小時(shí)，減壓除去反應(yīng)溶劑，低溫真空干燥，得花色苷磷脂復(fù)合物。所述的蛋黃磷脂可以由大豆磷脂和蛋黃磷脂的任意比例混合物替代。實(shí)施例5:取山楂花色苷100mg，加入40%甲醇300ml，加入二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)1000mg，加熱至60。C，攪拌反應(yīng)2小時(shí)，減壓除去反應(yīng)溶劑，低溫真空干燥，得花色苷磷脂復(fù)合物。所述的山楂花色苷可以由黑米花色苷、桑葚花色苷和越桔花色苷的任意比例混合物替代。實(shí)施例6:取黑加侖花色苷100mg，加入正己烷50ml，加入二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)1000mg，加熱至30。C，攪拌反應(yīng)3小時(shí)，減壓除去反應(yīng)溶劑正己烷，低溫真空千燥，得固體狀花色苷磷脂復(fù)合物。實(shí)施例7:取越桔花色苷色素100mg，葡萄色素100mg，黑加侖色素100mg，加入無(wú)水乙醇600ml，加入合成磷脂二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)600mg,加熱至60。C，攪拌反應(yīng)1小時(shí)，減壓除去反應(yīng)溶劑無(wú)水乙醇，低溫真空干燥，得固體狀花色苷磷脂復(fù)合物。實(shí)施例8:取花青素葡萄糖苷(C3G)50mg，加入70%丙酮150ml，加入大豆卵磷脂1000mg，加熱至50。C，攪拌反應(yīng)l小時(shí)，減壓除去反應(yīng)溶劑丙酮，低溫真空干燥，得固體狀花青素磷脂復(fù)合物。所述的70%丙酮可以由氯仿或乙醚替代。所述的花青素葡萄糖苷可以由花青素半乳糖苷、花青素鼠李糖苷或花青素阿拉伯糖苷來(lái)替代。實(shí)施例9:取花青素半乳糖苷50mg，花青素鼠李糖苷50mg，花青素阿拉伯糖苷50mg，花青素葡萄糖苷50mg，加入70X丙酮200ml，加入大豆卵磷脂1000mg，加熱至5(TC，攪拌反應(yīng)l小時(shí)，減壓除去反應(yīng)溶劑丙酮，低溫真空干燥，得固體狀花青素磷脂復(fù)合物。所述的大豆卵磷脂可以由磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺或磷脂酰絲氨酸中的一種或它們的任意比例混合物來(lái)替代。實(shí)施例10:取實(shí)施例1中花色苷磷脂復(fù)合物及磷脂和花色苷及進(jìn)行DSC分析，結(jié)果，花色苷磷脂復(fù)合物DSC譜圖明顯不同于磷脂和花色苷和它們物理混合物圖譜，證明形成花青素磷脂復(fù)合物。在正辛醇中的溶解度是黑米色素的10倍。紅外光譜中，黑米花色苷與磷脂復(fù)合物IR譜圖明顯不同于兩者混合物，也不同于兩者單獨(dú)圖譜。薄層色譜，展開(kāi)劑為乙酸乙酯乙酸2mol/L鹽酸=88:7:5，硅膠G薄層板，顯色劑為鹽酸或冰醋酸，展開(kāi)顯色后結(jié)果，黑米花色苷磷脂復(fù)合物顯示斑點(diǎn)Rf值同黑米花色苷與磷脂斑點(diǎn)Rf值一致，證明磷脂復(fù)合物中含有磷脂和黑米色素。實(shí)施例ll:用花色苷磷脂復(fù)合物(按實(shí)施例1方法制備)制備顆粒劑的處方組成為花色苷磷脂復(fù)合物20g，蔗糖粉100g，香精適量。顆粒劑制備工藝過(guò)程為將花色苷磷脂復(fù)合物與蔗糖粉混合均勻，用溶解香精的30%乙醇水制軟材，并過(guò)20目篩制顆粒，于5(TC通風(fēng)干燥，得顆粒劑。實(shí)施例12用花色苷磷脂復(fù)合物(按實(shí)施例l方法制備)制備片劑的處方組成為花色苷磷脂復(fù)合物200mg，可壓性淀粉0.37g，硬脂酸鎂10mg，交聯(lián)PVP(PPVP)50mg，微粉硅膠10mg，羥丙基甲基纖維素適量。片劑的制備工藝過(guò)程為將花色苷磷脂復(fù)合物與可壓性淀粉混合均勻后，用溶解HPMC的20X乙醇制軟材，并過(guò)18目篩制顆粒，于50C通風(fēng)干燥，再用18目篩整粒，所得顆粒中加入PPVP、微粉硅膠、硬脂酸鎂，混合均勻后壓片，即得。實(shí)施例13:用花色苷磷脂復(fù)合物(按實(shí)施例1方法制備)制備硬膠囊劑的處方組成為-花色苷磷脂復(fù)合物200g，淀粉150g，微晶纖維素50g，微粉硅膠10g。膠囊劑的制備過(guò)程為將復(fù)合物與淀粉、微晶纖維素、微粉硅膠混合均勻后裝硬膠囊劑，即得。實(shí)施例14:用花色苷磷脂復(fù)合物(按實(shí)施例4方法制備)制備軟膠囊劑的處方組成為花色苷磷脂復(fù)合物20g，油酸乙酯100g，大豆油100g。軟膠囊的制備過(guò)程為將復(fù)合物溶于油酸乙脂和大豆油的混合液中，得一透明藥液取明膠、甘油、山梨醇、水配制明膠溶液，置鋪展箱中備用。在室溫23±2°。、相對(duì)濕度40%的條件下用滴制法制成膠丸，且在23士2。C、相對(duì)濕度40%的條件下冷風(fēng)干燥24小時(shí)即得。實(shí)施例15:花色苷磷脂復(fù)合物乳化劑的制備工藝如下取按照實(shí)施例7方法制得的花色苷磷脂復(fù)合物lg，大豆油10g，卵磷脂1.5g，油酸0.5g，甘油2g,，注射用水適量，合計(jì)100g。采用高剪切機(jī)制備初乳，然后采用高壓均質(zhì)機(jī)以80兆帕循環(huán)5次，以0.45um濾膜過(guò)濾，灌裝得到乳劑。實(shí)施例16:花色苷磷脂復(fù)合物的脂質(zhì)納米粒的制備工藝如下取實(shí)施例4制得的花色苷磷脂復(fù)合物lg，山崳酸甘油脂5g，中鏈油lg，卵磷脂1.5g，伯洛沙姆0.5g，吐溫(80)0.5g,，注射用水適量，合計(jì)100g。將上述配料加熱至70。C，剪切5分鐘，然后在高壓均質(zhì)機(jī)中以100兆帕壓力循環(huán)5次，放冷至室溫，灌裝即得。實(shí)施例17:穩(wěn)定性試驗(yàn)取按實(shí)施例1方法制備的花色苷磷脂復(fù)合物和同批次黑米花色苷原料，按照光照影響因素試驗(yàn)做穩(wěn)定性考察。光照影響因素試驗(yàn)，取上述樣品各10g分成若干份，置于4500LX燈箱中，分別與0時(shí)，6時(shí)，12時(shí)，24時(shí)，3天，5天，10天取樣測(cè)定吸光度下降率結(jié)果見(jiàn)表l。表l光照(4500LX)對(duì)葉黃素微囊穩(wěn)定性影響:<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>結(jié)果證明，磷脂復(fù)合物光穩(wěn)定性好。實(shí)施例18.生物吸收代謝研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)藥物黑米色素(含花青素葡萄糖苷75%)，按照實(shí)施例l方法制備的花色苷磷脂復(fù)合物(含C3G30%)。實(shí)驗(yàn)方法將大鼠12只，隨機(jī)分成2組，每組6只。給藥前禁食12小時(shí)，自用飲水。第一組黑米色素(含花青素葡萄糖苷C3G75%)，給藥濃度為lmmol/kg;第二組花色苷磷脂復(fù)合物組，給藥濃度為2mmol/kg。各組動(dòng)物給藥后，不同時(shí)間點(diǎn)在大鼠眼眶底靜脈叢采血，置肝素化的試管內(nèi)，分離血漿，采用液相-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定C3G含量。結(jié)果，在給藥20分鐘后黑米色素組血漿樣品即有微量C3G成分檢出，黑米色素磷脂復(fù)合物(含C3G30%)組樣品峰面積明顯大于黑米色素組。但在1小時(shí)后黑米色素組血漿樣品沒(méi)有檢出C3G成分，而黑米色素磷脂復(fù)合物(含C3G30X)組樣品在6小時(shí)后仍可檢出。本試驗(yàn)提示黑米花色苷磷脂復(fù)合物具有比原型藥物更好的吸收和長(zhǎng)效性。權(quán)利要求1、一種花色苷磷脂復(fù)合物，其特征在于其組成包括花色苷與磷脂，花色苷與磷脂的重量比為1∶1-20。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的花色苷磷脂復(fù)合物，其特征在于其組成包括花色苷與磷脂，花色苷與磷脂的重量比為1:2-4。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的花色苷磷脂復(fù)合物，其特征在于所述的花色苷是葡萄花色苷、黑米花色苷，越桔花色苷，黑加侖花色苷、山楂花色苷或桑葚花色苷中的一種或它們的任意比例混合物。4、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的花色苷磷脂復(fù)合物，其特征在于所述的花色苷是花青素鼠李糖苷、花青素半乳糖苷、花青素阿拉伯糖苷或花青素葡萄糖苷中的一種或它們的任意比例混合物。5、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的花色苷磷脂復(fù)合物，其特征在于所述的磷脂是大豆磷脂、蛋黃磷脂或大豆磷脂和蛋黃磷脂或它們的混合物；磷脂是磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺或磷脂酰絲氨酸中的至少一種；磷脂也可以是二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺或二棕櫚酰磷脂酰膽堿和二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺的混合物。6、一種權(quán)利要求1或2所述的花色苷磷脂復(fù)合物的制備方法，其特征在于它包括如下步驟按所述重量比取花色苷與磷脂，于介電常數(shù)小的有機(jī)溶劑中混合，有機(jī)溶劑的使用量為1毫克花色苷不低于lml的有機(jī)溶劑，反應(yīng)的溫度為10-8(TC，反應(yīng)時(shí)間為0.5-5小時(shí)，然后減壓干燥或冷凍干燥，除去有機(jī)溶劑，得花色苷磷脂復(fù)合物。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的花色苷磷脂復(fù)合物制備方法，其特征在于所述的有機(jī)溶劑為氯仿、乙醚、丙酮、二氯甲烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、正己垸、crc6直鏈或支鏈低級(jí)垸醇中的一種或一種以上混合物，其中Q-C6直鏈或支鏈低級(jí)烷醇為甲醇、乙醇、丙醇或丁醇。8、根據(jù)權(quán)利要求6所述的花色苷磷脂復(fù)合物制備方法，其特征在于所述的花色苷磷脂復(fù)合物加入常規(guī)輔料按常規(guī)方法制成顆粒劑、膠囊劑或片劑。9、根據(jù)權(quán)利要求6所述的花色苷磷脂復(fù)合物制備方法，其特征在于所述的花色苷磷脂復(fù)合物加入乳化劑和中鏈脂肪酸液體油或植物油，經(jīng)乳化后制成花色苷磷脂復(fù)合物脂肪乳劑。10、根據(jù)權(quán)利要求6所述的花色苷磷脂復(fù)合物制備方法，其特征在于所述的花色苷磷脂復(fù)合物加入乳化劑和固體脂質(zhì)、液體脂質(zhì)或他們的混合物，制成脂質(zhì)納米粒。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種花色苷磷脂復(fù)合物及其制備方法，包括花色苷磷脂復(fù)合物及其制備方法，屬于藥品保健品領(lǐng)域。其組成包括花色苷與磷脂，花色苷與磷脂的重量比為1∶1-20；制備方法采用介電常數(shù)小的有機(jī)溶劑溶解花色苷與磷脂混合物，經(jīng)蒸發(fā)溶劑等工藝過(guò)程制成花色苷磷脂復(fù)合物。本發(fā)明花色苷磷脂復(fù)合物具有脂溶性，容易吸收，具有較高的生物利用度，可以制成乳劑等特點(diǎn)。文檔編號(hào)A61K47/48GK101537187SQ200810010689公開(kāi)日2009年9月23日申請(qǐng)日期2008年3月18日優(yōu)先權(quán)日2008年3月18日發(fā)明者穆英俊,莉艾,董英杰申請(qǐng)人:沈陽(yáng)皓天萬(wàn)嘉醫(yī)藥科技有限公司