專利名稱：基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以納米金為模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速含量測(cè)定方法，屬于分析化學(xué)和納米技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
可提供肉眼識(shí)別信號(hào)的比色法檢測(cè)，具有簡(jiǎn)單，快速，適用于實(shí)時(shí)和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)?；诩{米金的色度傳感器近年來得到了廣泛關(guān)注，其中的大部分均是基于納米金聚集或聚集再分散過程中的等離子體耦合而產(chǎn)生的顏色變化。納米金已越來越多地應(yīng)用于比色法檢測(cè)細(xì)胞、蛋白質(zhì)、DNA、金屬離子和小分子等。三聚氰胺(1，3，5-三嗪-2，4，6_三胺，C3H6N6)是一種常見的化學(xué)物質(zhì)，主要用于生產(chǎn)三聚氰胺甲醛樹脂。由于其氮含量高(66.6%)、成本低，三聚氰胺常被非法添加入食物中，以在傳統(tǒng)的凱氏或杜馬斯法測(cè)定中產(chǎn)生蛋白質(zhì)含量高的假象。長(zhǎng)期膳食攝入過量三 聚氰胺可導(dǎo)致嬰兒和寵物的腎功能衰竭和死亡。因此，需要建立可以提供現(xiàn)場(chǎng)實(shí)時(shí)檢測(cè)食品中三聚氰胺的可靠和高靈敏度方法。目前，三聚氰胺的檢測(cè)方法主要包括高效液相色譜(HPLC)、液相色譜-質(zhì)譜法(LC-MS )、氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS )、串聯(lián)質(zhì)譜法(MS/ MS )、毛細(xì)管電泳法(CE)、化學(xué)發(fā)光法(CL)、紅外光譜法(IR)、拉曼光譜法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、核磁共振法(NMR)等。然而，這些方法由于需要復(fù)雜的樣品預(yù)處理過程，相對(duì)費(fèi)時(shí)。此外，這些分析技術(shù)需要昂貴和先進(jìn)的檢測(cè)儀器，并由受過專業(yè)訓(xùn)練的人員操作，因此難以廣泛應(yīng)用。近來，I- (2-巰基)-I, 3，5-三嗪-2，4，6_三酮、冠醚、3 -巰基-I-丙烷磺酸鈉、核黃素、半胱胺、單鏈寡核苷酸修飾的納米金均被作為顯色探針用于原料奶和嬰幼兒配方奶粉中三聚氰胺檢測(cè)。這些方法大多表現(xiàn)出相當(dāng)高的靈敏度，但納米金復(fù)雜的修飾過程在一定程度上限制了它們的應(yīng)用。在納米金的形成過程中比色法檢測(cè)三聚氰胺的技術(shù)也有報(bào)道，但非常費(fèi)時(shí)。使用未改性的納米金(實(shí)際上為檸檬酸覆蓋的納米金)作為顯色探針已建立了更簡(jiǎn)單的三聚氰胺檢測(cè)方法，但均靈敏度欠佳。本發(fā)明利用納米金與三聚氰胺相互作用后其模擬過氧化物酶活性的變化，通過納米金催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色，提供了一種快速、簡(jiǎn)便、靈敏的三聚氰胺檢測(cè)新方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是利用納米金與三聚氰胺相互作用后其模擬過氧化物酶活性的變化，通過納米金催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色，提供了一種快速、簡(jiǎn)便、靈敏的三聚氰胺檢測(cè)新方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案
本發(fā)明所述的一種基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，包括如下步驟利用納米金與三聚氰胺相互作用后其模擬過氧化物酶活性的變化，通過納米金催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色，根據(jù)溶液顏色和紫外吸收光譜特征的
變化，來測(cè)定三聚氰胺濃度。所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是利用目視觀察溶液顏色特征以判斷三聚氰胺的濃度。所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是利用吸光度值A(chǔ)652以判斷三聚氰胺的濃度。所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是所使用的納米金采用硼氫化鈉還原氯金酸的方法制備，將500 μ L濃度為0.1 g/L氯金酸水溶液用39. 5毫升的水稀釋，在劇烈攪拌下加入O. 8毫升濃度為O. I g/L的硼氫化鈉水溶液，反應(yīng)溶液顏色從淺黃色變成酒紅色，暗處繼續(xù)快速攪拌而形成納米金。 所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是按體積比為1:3將納米金溶液和含不同濃度三聚氰胺的磷酸鹽緩沖溶液混合，40°C反應(yīng)，10000 rpm離心后，取O. 2 ml上清液加入O. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、O. 05 ml濃度為16mmol/L的3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、O. 5 ml濃度為10 mmol/L、pH=4的磷酸鹽緩沖溶液，混合后37°C溫浴，目視觀察顏色特征或測(cè)定吸光度值A(chǔ)652,當(dāng)目視觀察顏色特征時(shí)，隨著三聚氰胺濃度的增大，顯色液的顏色逐漸由深藍(lán)色變?yōu)闇\藍(lán)色直至無色，目視觀察的檢測(cè)限為O. 02 mg/L ;當(dāng)測(cè)定吸光度值A(chǔ)652時(shí)，隨著三聚氰胺濃度的增大而吸光度值A(chǔ)652逐漸減小，在5 80 μ g/L范圍內(nèi)吸光度值A(chǔ)652與三聚氰胺濃度呈線性關(guān)系，檢測(cè)限為I. 2 yg/L0所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是所使用的裸納米金平均粒徑為8. I nm,最大吸收波長(zhǎng)為518 nm。所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是納米金溶液和含不同濃度三聚氰胺的磷酸鹽緩沖溶液的體積分別為O. I mL和O. 3 mL。本發(fā)明所述的一種基于納米金模擬過氧化物酶特性快速測(cè)定奶粉中三聚氰胺的方法，包括如下步驟按體積比為1:3將納米金溶液和奶粉樣品溶液混合，40°C反應(yīng)，10000rpm離心,取O. 2 ml上清液加入O. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、O. 05 ml濃度為16mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、O. 5 ml濃度為10 mmol/L、pH=4的磷酸鹽緩沖溶液，混合后37°C溫浴，目視觀察顏色特征或測(cè)定吸光度值A(chǔ)652，根據(jù)溶液顏色與比色標(biāo)準(zhǔn)系列比較或通過吸光度值標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量，獲得奶粉中的三聚氰胺含量。所述的基于納米金模擬過氧化物酶特性快速測(cè)定奶粉中三聚氰胺的方法，其特征是奶粉樣品的預(yù)處理為在2. O g奶粉中加入0. 2 mL濃度為lwt%三氯乙酸和2. O mL甲醇，振搖2分鐘后取其I. O mL的上清液，氮?dú)獯蹈?，加?.0 mL濃度為0. 01 mol/L、pH=3的磷酸鹽緩沖溶液溶解殘?jiān)?，得樣品溶液。所述的基于納米金模擬過氧化物酶特性快速測(cè)定奶粉中三聚氰胺的方法，其特征是所使用的納米金采用硼氫化鈉還原氯金酸的方法制備，將500 μ L濃度為0.1 g/L氯金酸水溶液用39. 5毫升的水稀釋，在劇烈攪拌下加入0. 8毫升濃度為0. I g/L的硼氫化鈉水溶液，反應(yīng)溶液顏色從淺黃色變成酒紅色，暗處繼續(xù)快速攪拌而形成納米金。本發(fā)明的具體方法如下
(一)納米金的制備以下過程中使用的所有玻璃器皿均經(jīng)過王水浸泡，并用雙蒸水徹底清洗，晾干。納米金的制備首先，500 μ L濃度為O. I g/L氯金酸水溶液用39. 5毫升的水稀釋，在劇烈攪拌下加入O. 8毫升濃度為O. I g/L的硼氫化鈉水溶液(加入時(shí)間控制在5分鐘內(nèi))，反應(yīng)溶液顏色從淺黃色變成酒紅色，暗處繼續(xù)快速攪拌I小時(shí)。所得的納米金平均粒徑為8. 1±1. Inm,最大吸收波長(zhǎng)為518 nm,4 °C保存,能保持至少兩個(gè)月的相對(duì)穩(wěn)定。(二)三聚氰胺的測(cè)定
O. 3 ml三聚氰胺樣品溶液中加入O. I ml步驟(一)制備的納米金溶液，混合后在40°C溫浴5分鐘，混合溶液IOOOOrpm離心5分鐘，取O. 2 ml上清液加入O. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、O. 05 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、O. 5 ml磷酸鹽緩沖溶液(pH=4)，混合后37°C溫浴10分鐘，目視觀察顏色的變化或測(cè)定652 nm波長(zhǎng)處的吸光度值(A652 )。根據(jù)溶液顏色與比色標(biāo)準(zhǔn)系列比較或通過吸光度值標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量。目視觀察的檢測(cè)限為20 μ g/L，吸光度比值測(cè)定的檢測(cè)限為1.2 μ g/L。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn) (I)本發(fā)明利用納米金與三聚氰胺相互作用后其模擬過氧化物酶活性的變化，通過納米金催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色，從而表現(xiàn)出溶液顏色和紫外吸收光譜特征的變化，通過奶粉樣品簡(jiǎn)單的預(yù)處理，可以直接用于三聚氰胺的含量檢測(cè)。(2)本方法所使用的納米金直接由硼氫化鈉還原氯金酸得到，無需進(jìn)行進(jìn)一步的修飾，制備過程簡(jiǎn)單快速。(3)本發(fā)明對(duì)樣品的處理要求低，奶粉樣品僅需加入三氯乙酸和甲醇，沉淀蛋白并提取三聚氰胺，上清液除去甲醇用緩沖液溶解后即可測(cè)定。(4)本發(fā)明的檢測(cè)靈敏度高，通過肉眼觀察顏色變化的檢測(cè)限為20 μ g/L，分光光度法測(cè)定的檢測(cè)限為I. 2 μ g/L。


圖I為納米金的粒徑分布圖。圖2為納米金的紫外吸收光譜圖。圖3為納米金催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色的紫外吸收光譜圖。圖4為離心轉(zhuǎn)速對(duì)顯色體系吸光度的影響圖。圖5為離心時(shí)間對(duì)顯色體系吸光度的影響圖。圖6為不同濃度三聚氰胺存在時(shí)顯色體系的顏色變化圖，具體顏色變化從左到右顯示為，當(dāng)不含三聚氰胺時(shí)，溶液顯深藍(lán)色，隨著三聚氰胺濃度的增大，溶液顏色逐漸變淺，三聚氰胺濃度為O. 08 mg/L時(shí)，溶液基本無色。圖7為不同濃度三聚氰胺存在時(shí)顯色體系的吸光度值變化圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :
500 μ L濃度為O. I g/L氯金酸水溶液用39. 5 ml的水稀釋，在劇烈攪拌下加入O. 8ml濃度為O. I g/L的硼氫化鈉水溶液(加入時(shí)間控制在5分鐘內(nèi))，反應(yīng)溶液顏色從淺黃色變成酒紅色，暗處繼續(xù)快速攪拌I小時(shí)。所得的納米金平均粒徑為8. 1±1. I nm (見圖1)，最大吸收波長(zhǎng)為518 nm (見圖2)，4 °C保存，納米金能保持至少兩個(gè)月、相對(duì)穩(wěn)定。以上過程中使用的所有玻璃器皿均經(jīng)過王水浸泡，并用雙蒸水徹底清洗，晾干。實(shí)施例2:
取O. 05 ml實(shí)施例I制得的納米金溶液加入O. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、O. 05ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、O. 65 ml濃度為10 mmol/L的磷酸鹽緩沖溶液(pH=4)，混合后37 °C溫浴10分鐘，混合溶液變?yōu)樗{(lán)色，最大吸收波長(zhǎng)為652nm (見圖3)。實(shí)施例3 在O. 3 ml含有O. 02 mg/L三聚氰胺的磷酸鹽緩沖溶液(磷酸鹽緩沖溶液濃度為O. 01mol/L, pH=3)中加入O. I ml實(shí)施例I制得的納米金溶液，混合后在40 °C溫浴5分鐘，混合溶液離心5分鐘(0-15000 rpm),取O. 2 ml上清液加入O. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、0. 05 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、0. 5 ml濃度為10mmol/L的磷酸鹽緩沖溶液(pH=4)，混合后37°C溫浴10分鐘，測(cè)定652 nm波長(zhǎng)處的吸光度值?？瞻讓?duì)照中以0. 3 ml磷酸鹽緩沖溶液(磷酸鹽緩沖溶液濃度為0. 01 mol/L, pH=3)代替三聚氰胺溶液。如圖4所示，隨著離心轉(zhuǎn)速的增大，Λ A652 (空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)A652減去顯色實(shí)驗(yàn)A652 )增大，轉(zhuǎn)速達(dá)到10000 rpm時(shí)ΔΑ652達(dá)到最大值。實(shí)施例4
在0. 3 ml含有0. 02 mg/L三聚氰胺的磷酸鹽緩沖溶液(磷酸鹽緩沖溶液濃度為0. 01mol/L，pH=3)中加入0. I ml實(shí)施例I制得的納米金溶液，混合后在40 °C溫浴5分鐘，混合溶液10000 rpm離心(0-15分鐘),取0. 2 ml上清液加入0. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、0. 05 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、0. 5 ml濃度為10mmol/L的磷酸鹽緩沖溶液(pH=4)，混合后37°C溫浴10分鐘，測(cè)定652 nm波長(zhǎng)處的吸光度值。空白對(duì)照中以0. 3 ml磷酸鹽緩沖溶液(磷酸鹽緩沖溶液濃度為0. 01 mol/L, pH=3)代替三聚氰胺溶液。如圖5所示，隨著離心時(shí)間的增大，Λ A652 (空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)A652減去顯色實(shí)驗(yàn)A652 )增大，AA652在離心時(shí)間達(dá)到5分鐘時(shí)達(dá)到最大值。實(shí)施例5
在0.3 ml含有不同濃度三聚氰胺的磷酸鹽緩沖溶液(磷酸鹽緩沖溶液濃度為0.01mol/L，pH=3)中加入0. I ml實(shí)施例I制得的納米金溶液，混合后在40 °C溫浴5分鐘，混合溶液10000 rpm離心5分鐘,取0. 2 ml上清液加入0. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、0. 05 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、0. 5 ml濃度為10 mmol/L的磷酸鹽緩沖溶液(pH=4)，混合后37°C溫浴10分鐘，目視觀察顏色的變化，結(jié)果如圖6所示。當(dāng)不含三聚氰胺時(shí)，溶液顯深藍(lán)色，隨著三聚氰胺濃度的增大，溶液顏色逐漸變淺，三聚氰胺濃度為0. 08 mg/L時(shí)，溶液基本無色，檢測(cè)限為0. 02 mg/L。實(shí)施例6
在0.3 ml含有不同濃度三聚氰胺的磷酸鹽緩沖溶液(磷酸鹽緩沖溶液濃度為0.01mol/L，pH=3)中加入0. I ml實(shí)施例I制得的納米金溶液，混合后在40 °C溫浴5分鐘，混合溶液10000 rpm離心5分鐘,取0. 2 ml上清液加入0. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、0. 05 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、0. 5 ml濃度為10 mmol/L的磷酸鹽緩沖溶液(pH=4)，混合后37°C溫浴10分鐘，測(cè)定吸收光譜，結(jié)果如圖7所示。隨著三聚氰胺濃度的增大，最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度(A652 )逐漸減小,在5 80 μ g/L范圍內(nèi)A652與三聚氰胺濃度呈線性關(guān)系，檢測(cè)限為I. 2 μ g/L。實(shí)施例7
在2. O g奶粉中加入O. 2 ml lwt%三氯乙酸和2. O ml甲醇，振搖2分鐘。取I. O ml上清液，氮?dú)獯蹈桑尤隝. O ml磷酸鹽緩沖溶液(濃度為O. 01 mol/L, pH=3)溶解殘?jiān)?，得樣品溶液。在O. I ml實(shí)施例I制得的納米金溶液中加入O. 3 ml上述的樣品溶液，混合后 在40 °C溫浴5分鐘，混合溶液10000 rpm離心5分鐘，取O. 2 ml上清液加入O. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、O. 05 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、O. 5 ml濃度為10 mmol/L的磷酸鹽緩沖溶液(pH=4)，混合后37°C溫浴10分鐘，目視觀察顏色變化或測(cè)定吸光度A652。結(jié)合實(shí)施例6計(jì)算奶粉中三聚氰胺的含量，樣品的測(cè)定回收率為99. 8% 110%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2. Γ3. 4%。
權(quán)利要求
1.一種基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是利用納米金與三聚氰胺相互作用后其模擬過氧化物酶活性的變化，通過納米金催化過氧化氫氧化3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色，根據(jù)溶液顏色和紫外吸收光譜特征的變化，來測(cè)定二聚氰胺濃度。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于納米 金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是利用目視觀察溶液顏色特征以判斷三聚氰胺的濃度。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是利用吸光度值A(chǔ)652以判斷三聚氰胺的濃度。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2或3所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是所使用的納米金采用硼氫化鈉還原氯金酸的方法制備，將500 μ L濃度為0.1g/L氯金酸水溶液用39. 5毫升的水稀釋，在劇烈攪拌下加入O. 8毫升濃度為O. I g/L的硼氫化鈉水溶液，反應(yīng)溶液顏色從淺黃色變成酒紅色，暗處繼續(xù)快速攪拌而形成納米金。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是按體積比為1:3將納米金溶液和含不同濃度三聚氰胺的磷酸鹽緩沖溶液混合，40°C反應(yīng)，10000印111離心后,取0.2 ml上清液加入O. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、O. 05 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、O. 5 ml濃度為10 mmol/L、pH=4的磷酸鹽緩沖溶液，混合后37°C溫浴，目視觀察顏色特征或測(cè)定吸光度值A(chǔ)652 ,當(dāng)目視觀察顏色特征時(shí)，隨著三聚氰胺濃度的增大，顯色液的顏色逐漸由深藍(lán)色變?yōu)闇\藍(lán)色直至無色，目視觀察的檢測(cè)限為O. 02 mg/L ;當(dāng)測(cè)定吸光度值A(chǔ)652時(shí)，隨著三聚氰胺濃度的增大而吸光度值A(chǔ)652逐漸減小，在5 80 μ g/L范圍內(nèi)吸光度值A(chǔ)652與三聚氰胺濃度呈線性關(guān)系，檢測(cè)限為 I. 2 μ g/L ο
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是所使用的裸納米金平均粒徑為8. I nm,最大吸收波長(zhǎng)為518 nm。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺快速測(cè)定方法，其特征是納米金溶液和含不同濃度三聚氰胺的磷酸鹽緩沖溶液的體積分別為O. I mL和O. 3 mL。
8.一種基于納米金模擬過氧化物酶特性快速測(cè)定奶粉中三聚氰胺的方法，包括如下步驟按體積比為1:3將納米金溶液和奶粉樣品溶液混合，40°C反應(yīng)，10000 rpm離心，取0.2 ml上清液加入O. 25 ml濃度為8 mol/L的過氧化氫、O. 05 ml濃度為16 mmol/L的3，3’，5，5’ -四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽、O. 5 ml濃度為10 mmol/L、pH=4的磷酸鹽緩沖溶液，混合后37°C溫浴，目視觀察顏色特征或測(cè)定吸光度值A(chǔ)652，根據(jù)溶液顏色與比色標(biāo)準(zhǔn)系列比較或通過吸光度值標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量，獲得奶粉中的三聚氰胺含量。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的基于納米金模擬過氧化物酶特性快速測(cè)定奶粉中三聚氰胺的方法，其特征是奶粉樣品的預(yù)處理為在2. O g奶粉中加入0.2 mL濃度為lwt% 二氯乙酸和2. O mL甲醇，振搖2分鐘后取其I. O mL的上清液，氮?dú)獯蹈?，加入I. O mL濃度為0.01mol/L、pH=3的磷酸鹽緩沖溶液溶解殘?jiān)?，得樣品溶液?br> 10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的基于納米金模擬過氧化物酶特性快速測(cè)定奶粉中三聚氰胺的方法，其特征是所使用的納米金采用硼氫化鈉還原氯金酸的方法制備，將500 μ L濃度為0. I g/L氯金酸水溶液用39. 5毫升的水稀釋，在劇烈攪拌下加入0. 8毫升濃度為0. I g/L的硼氫化鈉水溶液,反應(yīng)溶液顏色從淺黃色變成酒紅色，暗處繼續(xù)快速攪拌而形成納米金。
全文摘要
本發(fā)明公開一種基于納米金模擬過氧化物酶的三聚氰胺測(cè)定方法，利用納米金與三聚氰胺相互作用后其模擬過氧化物酶活性的變化，通過納米金催化過氧化氫氧化3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽顯色，從而表現(xiàn)出溶液顏色和紫外吸收光譜特征的變化。目視觀察的檢測(cè)限為0.02mg/L。吸光度值測(cè)定的線性范圍為5~80μg/L，檢測(cè)限為1.2μg/L。奶粉樣品可通過簡(jiǎn)單的預(yù)處理后，采用該方法能很好地測(cè)定其中的三聚氰胺含量。
文檔編號(hào)G01N21/31GK102768207SQ201210273368
公開日2012年11月7日 申請(qǐng)日期2012年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月1日
發(fā)明者李光文, 林新華, 洪磊, 鄧豪華, 陳偉 申請(qǐng)人:福建醫(yī)科大學(xué)