AQA, AM’或ATAC保護(hù)的紅血細(xì)胞，和泳道4與泳道3是一樣的，但采用C9蛋白質(zhì)補(bǔ)充。結(jié)果表明，C6，C7，C8和C9在未經(jīng)處理的血清中容易檢測(cè)到。泳道2顯示，在無保護(hù)的被補(bǔ)體攻擊溶血的紅細(xì)胞中，只有C5b-9，完全形成的膜攻擊復(fù)合物，被檢測(cè)。泳道3，其中的細(xì)胞得到ATA，AQA, AHA或ATAC的保護(hù)，膜攻擊復(fù)合物不完全形成，而在CS階段被停止。C6抗體檢測(cè)C5b6, C5b67和C5b678。C7抗體檢測(cè)C5b67和C5b678,而C8抗體檢測(cè)C5b678。泳道4確認(rèn)了，阻斷僅發(fā)生在C9階段?？梢钥闯觯F(xiàn)在通過采用C6，C7，C8和C9探查而檢測(cè)C5b-9，從確定了，ATAC阻斷在C9階段。一個(gè)非常微弱的C9譜帶在印跡中仍然是可見的，表明不是所有添加的C9在過程中被消耗。
[0082]圖5.展示采用備解素，C3/C3b，因子B/Bb和因子D的抗體發(fā)展的膜的印跡，證明Cl抑制劑或C4b抗體抑制經(jīng)典途徑激活的效果，并顯示ATA抑制C3轉(zhuǎn)化酶。(a)正常血清顯示可檢測(cè)的備解素，C3，因子B和因子D的譜帶(泳道I)。在Cl抑制劑存在下激活酵母聚糖后，對(duì)應(yīng)PC3b，PC3bBb和PC3bBbC3b的譜帶出現(xiàn)在采用備解素和C3b抗體發(fā)展的印跡，并且PC3bBb和PC3bBb和PC3bBbC3b的譜帶出現(xiàn)在采用因子Bb抗體發(fā)展的印跡(泳道2)。這些數(shù)據(jù)表明，備解素是C3b結(jié)合所需的，以啟動(dòng)旁路途徑，C3和C5轉(zhuǎn)化酶被激活。ATA的加入導(dǎo)致譜帶，其只針對(duì)PC3b和PC3bB而出現(xiàn)，指示在結(jié)合的因子B的因子D裂解階段的阻斷(泳道3)。泳道4，其中備解素被加入，和泳道5，其中因子D被加入，都會(huì)顯示為PC3bBb和PC3bBbC3b弱譜帶再現(xiàn)，指示旁路途徑激活的部分恢復(fù)。在紅細(xì)胞膜上沒有檢測(cè)到因子D的譜帶，表明該蛋白酶沒有被結(jié)合，而仍在溶液中。進(jìn)行三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)，這些都是代表性的。(b)殘留血清蛋白質(zhì)印跡采用C5/C5a抗體發(fā)展。正常血清中容易檢測(cè)到C5譜帶(泳道I)。酵母聚糖和Cl抑制劑的處理導(dǎo)致C5譜帶的消失和激活產(chǎn)物C5a的出現(xiàn)(泳道2)。ATA和Cl抑制劑的加入(泳道3)防止C5的裂解，這是被采用備解素的處理部分拮抗(lmicrogm/ml,泳道 4)和因子 D (0.lmicrogm/ml,泳道 5)。(c)米用 C5/C5b,C6,C7，C8和C9的抗體處理殘留的膜。正常血清泳道I顯示，正常血清中檢測(cè)到每個(gè)補(bǔ)體蛋白。用酵母聚糖和Cl抑制劑血清處理后膜的泳道2導(dǎo)致的各個(gè)蛋白譜帶消失和MAC形成成分C5b6，C5b67，C5b678，和完全形成的C5b_9的出現(xiàn)。在其中添加ATA的泳道3顯示，完全阻斷出現(xiàn)，沒有激活譜帶出現(xiàn)在膜上。泳道4和5，其中血清補(bǔ)充了備解素和因子D，表明補(bǔ)體系統(tǒng)的部分激活，伴有C5b6，C5b67，和C5b678的較弱譜帶出現(xiàn)，但在C5b_9階段仍然存在阻斷，表明ATA也阻斷C9附著至C5b-8。
[0083]圖6.是ATA結(jié)合至因子D和C9的圖，但ATA不被結(jié)合至備解素，因子B，C2，C3，C4，C5，C6，C7，*C8。這些蛋白以l_32ng/ml的濃度被應(yīng)用于微孔板，隨后以100微克/ml加入ΑΤΑ。
[0084]圖7.是旁路補(bǔ)體途徑示意圖，說明在C3轉(zhuǎn)化酶和ATA在C9附著至C5b_8階段的阻斷。
[0085]圖8.顯示在ATAC和ATAC甲基衍生物的人血清中CH50結(jié)果的比較。甲基衍生物具有比ATA低的有效性，伴有估計(jì)的2.52miroM的IC5tl。
[0086]圖9.表明口服ATAC對(duì)小鼠血清補(bǔ)體活化的效果。六只喂正常飼料的B6SJL_Tg小鼠血清被合并，與六只喂ATAC補(bǔ)充飼料的B6SJL-Tg小鼠的血清相比較。血清進(jìn)行1_16倍稀釋。溶液(25微升)與100微升的抗體綴合的綿羊紅細(xì)胞(5X 16細(xì)胞)孵育lh。對(duì)混合物進(jìn)行離心，相對(duì)量的血紅蛋白釋放到100微升上清，其被在405納米的吸光度記錄。來自正常飲食喂養(yǎng)的小鼠的血清需要比ATAC喂養(yǎng)的小鼠更多的稀釋，為了溶血的發(fā)生。IC5tl分別為6.89和1.92倍，分別對(duì)應(yīng)于3.59倍的保護(hù)。
[0087]圖10.顯示ATAC喂養(yǎng)的B6SJL_Tg小鼠的記憶保留，與正常飼料喂養(yǎng)的B6SJL_Tg小鼠相比較，如通過在測(cè)試第6天去除隱藏的平臺(tái)后在隱藏的平臺(tái)附近搜索率所評(píng)估的。與飼喂正常飼料的小鼠相比，ATAC喂養(yǎng)的小鼠表現(xiàn)出在缺失平臺(tái)的正確的區(qū)域顯著更大的搜索時(shí)間，這表明更好的記憶保留。
[0088]表1.列出被用于在蛋白質(zhì)印跡中檢測(cè)補(bǔ)體的抗體。
[0089]實(shí)施本發(fā)明的最佳模式
[0090]最佳模式對(duì)有需要的人或動(dòng)物遞送ATA，AQA，AHA，其銨鹽或其他鹽，其甲基或其他衍生物，或它們的混合物的優(yōu)選模式是通過口服途徑。膠囊或丸劑與上述活性成分的任何組合可以采用可接受的常規(guī)藥物載體配制，以延長(zhǎng)活性成分的釋放，提高活性成分的效率，減少活性成分的代謝。這些可能包括，但不限于，乳糖，硬脂酸，丙二醇，纖維素或其他成分，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的。活性成分的劑量可以從50毫克到10克/天進(jìn)行變化，取決于每個(gè)特定主體的需要。
[0091]發(fā)明的模式
[0092]發(fā)明的模式:除了優(yōu)選模式，遞送的替代模式，包括靜脈內(nèi)，皮下，并直接注入關(guān)節(jié)或肌肉。這些模式會(huì)在以下情況下成為理想的:口服給藥是不可能，或在一些局部的部位高濃度是必要的或期望的。
[0093]工業(yè)適用性
[0094]本發(fā)明應(yīng)為腦和外周器官多種慢性退行性疾病開發(fā)了主要新治療領(lǐng)域，對(duì)于所述疾病目前尚無滿意的治療。這些疾病包括，但不限于，陣發(fā)性夜間血紅蛋白血癥，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，多發(fā)性硬化癥，瘧疾感染，阿爾茨海默病，老年性黃斑變性，與動(dòng)脈粥樣硬化。
[0095]不含序列列表的文本
[0096]序列列表的文本。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.醫(yī)療方法，所述方法在有需要的人或其它哺乳動(dòng)物物種中選擇性抑制補(bǔ)體膜攻擊復(fù)合物，所述方法通過口服或腸胃外施用有效量的分子量小于I千道爾頓的金精三羧酸復(fù)合物的成分。
2.權(quán)利要求1中所述的方法，其中膜攻擊復(fù)合物的選擇性抑制是劑金精三羧酸。
3.權(quán)利要求1中所述的方法，其中膜攻擊復(fù)合物的選擇性抑制劑是金精四羧酸。
4.權(quán)利要求1中所述的方法，其中膜攻擊復(fù)合物的選擇性抑制劑是金精六羧酸。
5.權(quán)利要求1中所述的方法，其中膜攻擊復(fù)合物的選擇性抑制劑是分子量小于I千道爾頓的金精三羧酸復(fù)合物的酯。
6.權(quán)利要求1中所述的方法，其中膜攻擊復(fù)合物的選擇性抑制劑是需要的病癥是年齡相關(guān)性黃斑變性。
7.權(quán)利要求1中所述的方法，其中膜攻擊復(fù)合物的選擇性抑制劑是需要的病癥是阿爾茨海默病。
8.權(quán)利要求1中所述的方法，其中膜攻擊復(fù)合物的選擇性抑制劑是需要的病癥是動(dòng)脈粥樣硬化。
9.權(quán)利要求1中所述的方法，其中在所有疾病中，可以明確地確定的是，在所述疾病中，補(bǔ)體膜攻擊復(fù)合物在宿主細(xì)胞組裝，導(dǎo)致自我損害。
10.醫(yī)療方法，所述方法在有需要的人或其它哺乳動(dòng)物物種中選擇性抑制補(bǔ)體旁路途徑的C3轉(zhuǎn)化酶步驟，所述方法通過口服或腸胃外施用有效量的分子量小于I千道爾頓的金精三羧酸復(fù)合物的成分。
11.權(quán)利要求10中所述的方法，其中在C3轉(zhuǎn)化酶的選擇性抑制劑是金精三羧酸。
12.權(quán)利要求10中所述的方法，其中在C3轉(zhuǎn)化酶的選擇性抑制劑是金精四羧酸。
13.權(quán)利要求10中所述的方法，其中C3轉(zhuǎn)化酶的選擇性抑制劑是金精六羧酸。
14.權(quán)利要求10中所述的方法，其中C3轉(zhuǎn)化酶的選擇性抑制劑是需要的病癥是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
15.權(quán)利要求10中所述的方法，其中C3轉(zhuǎn)化酶的選擇性抑制劑是需要的病癥是陣發(fā)性夜間血紅蛋白血癥。
16.權(quán)利要求10中所述的方法，其中C3轉(zhuǎn)化酶的選擇性抑制劑是需要的病癥是瘧疾感染。
17.權(quán)利要求10中所述的方法，其中C3轉(zhuǎn)化酶的選擇性抑制劑是需要的病癥是多發(fā)性硬化癥。
18.權(quán)利要求10中所述的方法，其中在所有疾病中，能明確地確定的是，在所述疾病中，C3轉(zhuǎn)化酶在宿主細(xì)胞組裝，導(dǎo)致自我損害。
【專利摘要】采用分子量小于1千道爾頓的金精三羧酸復(fù)合物成分，選擇性抑制哺乳動(dòng)物物種優(yōu)選人中的補(bǔ)體膜攻擊復(fù)合物。優(yōu)選抑制劑是金精三羧酸，金精四羧酸，和金精六羧酸。通過選擇性抑制補(bǔ)體膜攻擊復(fù)合物而治療的優(yōu)選的病癥是與年齡相關(guān)的黃斑變性，阿爾茨海默病，動(dòng)脈粥樣硬化，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，陣發(fā)性夜間血紅蛋白血癥，瘧疾感染，與多發(fā)性硬化。
【IPC分類】A61K31-194, A61P37-02, C12N9-64
【公開號(hào)】CN104661660
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201280075715
【發(fā)明人】P·麥克格爾, M·李, 郭建平, C·施瓦伯
【申請(qǐng)人】奧林生物技術(shù)股份有限公司
【公開日】2015年5月27日
【申請(qǐng)日】2012年7月13日
【公告號(hào)】CA2878734A1, EP2872130A1, WO2014009779A1