專利名稱：一種雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物及其制備與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種脂質(zhì)體制劑及其制備與應(yīng)用，特別涉及一種雙氫青蒿素磷脂復(fù)合 物與脂質(zhì)體制劑及其制備與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤在全球范圍內(nèi)已成為嚴(yán)重威脅人類生命健康的多發(fā)病和常見(jiàn)病。據(jù)統(tǒng) 計(jì)，目前我國(guó)每年有180萬(wàn)人新患惡性腫瘤，150萬(wàn)死于惡性腫瘤，其治療失敗的主要原因 是腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物產(chǎn)生的耐藥性，以及惡性腫瘤組織結(jié)構(gòu)功能異常引起的腫瘤快速增 生和轉(zhuǎn)移。雙氫青蒿素(Dihydroartemisinin，DHA)是青蒿素類藥物在體內(nèi)的最終活性代謝 產(chǎn)物，青蒿素是我國(guó)藥學(xué)工作者1971年從菊科植物黃花蒿葉中提取分離到的一種過(guò)氧橋 的倍半萜內(nèi)酯類化合物，并一直以來(lái)作為抗瘧藥使用；隨著技術(shù)進(jìn)步以及臨床的需要，青蒿 素以及其衍生物的其他藥理活性得到了廣泛的關(guān)注，尤其是青蒿素及其衍生物的抗腫瘤作 用方面，各國(guó)藥物學(xué)家進(jìn)行了廣泛的研究，其抗腫瘤作用的機(jī)理可以分成三個(gè)作用包括協(xié) 同、增效作用，逆轉(zhuǎn)腫瘤的多藥耐藥性，以及抑制腫瘤血管生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的作用；協(xié)同、增效作 用雙氫青蒿素可以與亞鐵原子發(fā)生反應(yīng)，延遲細(xì)胞周期，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，如中國(guó)專利二 氫青蒿素在增強(qiáng)化療藥物抗腫瘤療效中的應(yīng)用(申請(qǐng)?zhí)?00710071185. 5)中提到的二氫青 蒿素與環(huán)磷酰胺協(xié)同增效作用研究，以及青蒿素衍生物與長(zhǎng)春瑞濱的組合無(wú)及其應(yīng)用(申 請(qǐng)?zhí)?00810201607. 0)中提到的雙氫青蒿素可顯著增強(qiáng)長(zhǎng)春瑞濱對(duì)MCF-7人乳腺癌細(xì)胞、 A549人肺癌細(xì)胞、K562人白血病細(xì)胞等多種細(xì)胞的細(xì)胞毒性；逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥 性中國(guó)專利青蒿素在制備抗腫瘤多藥耐藥藥物中的應(yīng)用(申請(qǐng)?zhí)?00710143393. 1)公 開(kāi)了青蒿素及其衍生逆轉(zhuǎn)長(zhǎng)春新堿耐藥KB細(xì)胞的耐藥性；此外二氫青蒿素在增強(qiáng)化療藥 物抗腫瘤療效中的應(yīng)用(申請(qǐng)?zhí)?00710071185. 5)還公開(kāi)了二氫青蒿素可通過(guò)阻斷腫瘤血 管生成，阻斷腫瘤細(xì)胞的快速增殖及轉(zhuǎn)移，因此可作為血管生成抑制劑使用。這些研究結(jié)果 均表明，雙氫青蒿素作為化療藥物的增效劑具有廣闊的應(yīng)用前景，但是雙氫青蒿素作為青 蒿素的衍生物，在水和大豆油中的溶解度都差，分別為0. 132士0. 016和1. 63士0. 02mg/mL, 使用中，尤其是在作為增效劑以及血管生成抑制劑使用時(shí)，往往影響其藥效的發(fā)揮。磷脂復(fù)合物(phytosomes)的研究最早是由加拿大科學(xué)家Venkataram于1984報(bào) 道，他們發(fā)現(xiàn)將藥物Griseofulvin與磷脂共同溶于氯仿中，蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑得到的磷脂 沉淀物對(duì)藥物的溶出具有明顯的促進(jìn)作用，隨后人們對(duì)這種制劑形式進(jìn)行了大量的研究， 例如燈盞花素，黃芩苷，吲哚美辛等，這些磷脂復(fù)合物可改善藥物的親水親脂性質(zhì)，提高藥 物的溶出速度，從而使化合物的理化性質(zhì)和生物特性產(chǎn)生不同程度的改變。脂質(zhì)體(liposome)為一種新的藥物傳遞系統(tǒng)，小粒徑脂質(zhì)體可有效的增加藥物 在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間，增強(qiáng)藥物的作用效果，從而使藥物的毒性降低，耐受性提高，考慮到雙 氫青蒿素在用于抑制血管生長(zhǎng)時(shí)，所用劑量較大，將其制備成脂質(zhì)體，以方便給藥，且也有 研究表明以磷脂復(fù)合物制備脂質(zhì)體，可提高制劑的包封率和穩(wěn)定性。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物與脂質(zhì)體制劑，該制劑改善了雙氫 青蒿素親水親脂的理化性質(zhì)，提高了雙氫青蒿素在使用中的耐受性，本發(fā)明還提供了雙氫 青蒿素磷脂復(fù)合物及其脂質(zhì)體制劑的制備方法及在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物，所述雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物為雙氫青蒿素與磷脂以 質(zhì)量比1 0. 1 10的復(fù)合物；所述磷脂為天然磷脂或合成磷脂。本發(fā)明所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物按以下方法制備按照配比量，將雙氫青蒿 素與磷脂加入有機(jī)溶劑A中，30 60V反應(yīng)0. 5 4h至反應(yīng)液澄清，將反應(yīng)液30 60°C減 壓旋蒸，除去有機(jī)溶劑，干燥，即得雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物；所述雙氫青蒿素與磷脂的質(zhì)量 比為1 0.1 10，所述有機(jī)溶劑A的用量以能夠溶解雙氫青蒿素及磷脂并澄清為準(zhǔn)，用量 沒(méi)有太大影響，所述的有機(jī)溶劑A為下列之一乙酸乙酯、四氫呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、 正己烷、環(huán)己烷、甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇或丙酮，所述的磷脂為天然磷脂或合成磷脂。所述的天然磷脂為大豆卵磷脂或蛋黃卵磷脂，或大豆卵磷脂與蛋黃卵磷脂的組 合；所述合成磷脂為二硬脂酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二 油酰磷脂酰膽堿或二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺，也可以是以上任意組合。本發(fā)明所述的有機(jī)溶劑A優(yōu)選為下列之一乙酸乙酯、二氯甲烷或丙酮。本發(fā)明還提供了一種雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物所制備的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂 質(zhì)體制劑，所述制劑由以下重量配比的藥用原料組成的組合物制成脂質(zhì)體，再與藥物可接 受的凍干保護(hù)劑制成雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑，所述藥用原料質(zhì)量組成如下 0. 1 10份雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物、1 80份磷脂或1 80份磷脂和0 50份膽固醇； 所述雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物中雙氫青蒿素與磷脂的質(zhì)量比為1 0.1 10，所述雙氫青蒿 素磷脂復(fù)合物中的磷磷與所述藥用原料中的磷脂各自獨(dú)立為天然磷脂或合成磷脂。所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑，所述的凍干保護(hù)劑為下列一種或兩種 以上任意比例的組合海藻糖、乳糖、蔗糖、甘露糖或葡萄糖，優(yōu)選為海藻糖、甘露糖或葡萄 糖。所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑按照以下步驟制得(1)按照雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物中的配比量，將雙氫青蒿素、磷脂加入有機(jī)溶劑A 中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，30 60°C水浴加熱攪拌0. 5 池至溶液澄清透明，將反應(yīng)液減壓旋蒸除 去有機(jī)溶劑A，干燥得到雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物；有機(jī)溶劑A為下列之一乙酸乙酯、四氫 呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、正己烷、環(huán)己烷、甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇或丙酮，優(yōu)選乙酸乙 酯、二氯甲烷或丙酮；( 將步驟(1)得到的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物與藥用原料組成中組方 量的磷脂或組方量的磷脂和膽固醇混合，加入有機(jī)溶劑B，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，30 60°C水浴加 熱攪拌，使溶液澄清透明，所得溶液轉(zhuǎn)移至茄型瓶中，減壓蒸發(fā)，除去有機(jī)溶劑B，并在瓶壁 形成一層透明薄膜，加入PH5. 0 7. 4的緩沖溶液充分水化，過(guò)聚碳酸酯膜或微射流進(jìn)行均 質(zhì)處理，制得雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體；所述有機(jī)溶劑B為下列之一氯仿、甲醇或丙 酮；所述的聚碳酸脂膜為孔徑優(yōu)選200nm;(:3)將步驟( 制得的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂 質(zhì)體，加入凍干保護(hù)劑，并使其充分溶解，混勻，隨后分裝，凍干，即得雙氫青蒿素脂質(zhì)體凍干制劑，所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體與凍干保護(hù)劑的質(zhì)量比為1 1 20 ；所述 凍干保護(hù)劑的加入不需要加熱和攪拌，能夠溶解于脂質(zhì)體中。所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑的制備中，步驟(1)所制備的雙氫青蒿 素磷脂復(fù)合物反應(yīng)液也可以直接除去有機(jī)溶劑，不進(jìn)行干燥直接加入磷脂進(jìn)行后續(xù)的反應(yīng)。所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑的制備方法中步驟(2)加入pH5. 0 7. 4的緩沖溶液充分水化，所述的緩沖溶液為下列之一磷酸鹽緩沖液、蒸餾水、生理鹽水 或5%葡萄糖注射液。優(yōu)選的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑，制備方法步驟(3)按照以下步驟進(jìn) 行將雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體中加入凍干保護(hù)劑，充分溶解，過(guò)聚碳酸酯膜或者微射 流進(jìn)行均質(zhì)處理，使脂質(zhì)體平均粒徑< 300nm，分裝，凍干，即得雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì) 體制劑；所述的聚碳酸脂膜為粒徑200nm，連續(xù)過(guò)膜均化10 20次；本發(fā)明還可以微射流 進(jìn)行均質(zhì)處理的方法代替過(guò)聚碳酸酯膜，所述的微射流均質(zhì)先以5000psi處理3個(gè)循環(huán)，然 后以10000 15000psi處理6 10個(gè)循環(huán)。所述的凍干保護(hù)劑為下列一種或兩種以上任意比例的組合海藻糖、甘露糖或葡 萄糖，最優(yōu)選為甘露糖。本發(fā)明所述的有機(jī)溶劑A、有機(jī)溶劑B均為有機(jī)溶劑，為便于區(qū)分不同步驟加入的 有機(jī)溶劑不同而命名為有機(jī)溶劑A、有機(jī)溶劑B，所述的有機(jī)溶劑A、有機(jī)溶劑B的加入量沒(méi) 有限制，能夠溶解雙氫青蒿素及雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物、磷脂及膽固醇即可。所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物及其脂質(zhì)體制劑的在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑還可以以藥學(xué)上可接受的輔料載體制成注射 給藥或口服給藥劑型。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物可顯著增強(qiáng)雙氫青蒿素的親水親脂性，將其與阿霉素組合 應(yīng)用，可增強(qiáng)阿霉素的細(xì)胞毒性，降低阿霉素的使用量，從而降低化療藥物在治療過(guò)程中的 毒副作用；此外雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物的親脂性增強(qiáng)，也表現(xiàn)為其對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的 毒性作用進(jìn)一步增強(qiáng)，與雙氫青蒿素原料藥相比，其IC50降低，毒性增大，更適合作為血管 生成抑制劑使用，制成脂質(zhì)體制劑后其體內(nèi)耐受性更好；同時(shí)，本發(fā)明雙氫青蒿素磷脂復(fù)合 物脂質(zhì)體制劑與阿霉素聯(lián)用時(shí)，磷脂復(fù)合物可以更好的逆轉(zhuǎn)阿霉素耐藥株MCF-7細(xì)胞的耐 藥性，雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑比雙氫青蒿素具有顯著的優(yōu)勢(shì)。


圖1為實(shí)施例1所制備的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體(DHA-LP))的透射電鏡 圖；圖2為實(shí)施例10以實(shí)施例1所制備的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物(DHA-P)與阿霉素 (DOX)聯(lián)合治療荷S180肉瘤小鼠腫瘤抑瘤率；圖3為實(shí)施例11以實(shí)施例1所制備的DHA-P與DOX聯(lián)合治療B16黑色素瘤小鼠 模型腫瘤實(shí)體圖其中A為空白組，B為DHA單用藥組，C為DHA-P單用藥組，D為DOX單用 藥組，E為D0X+DHA聯(lián)合用藥組，F(xiàn)為D0X+DHA-P聯(lián)合用藥組。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于 此實(shí)施例1 雙氫青蒿素磷酸復(fù)合物的制備稱取雙氫青蒿素0. 50g，大豆磷脂2. 56g，加入乙酸乙酯40mL，40°C反應(yīng)Ih至反應(yīng) 液澄清，30°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，20°C真空干燥12小時(shí)，即得粉末狀雙氫青蒿素磷脂 復(fù)合物3. 06g，密封包裝，放入4°C冰箱保存。實(shí)施例2 雙氫青蒿素磷酸復(fù)合物的制備稱取雙氫青蒿素0. 50g，二硬脂酰磷脂酰甘油0. 50g，加入四氫呋喃40mL，40°C反 應(yīng)池反應(yīng)液澄清，將反應(yīng)液60°c旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，30°C真空干燥M小時(shí)，即得粉末狀雙 氫青蒿素磷脂復(fù)合物lg，密封包裝，放入4°c冰箱保存。實(shí)施例3 雙氫青蒿素磷酸復(fù)合物的制備稱取雙氫青蒿素0. 50g，大豆卵磷脂0. 50g，加入丙酮20mL，40°C反應(yīng)4h反應(yīng)液澄 清，將反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，20°C真空干燥12小時(shí)，即得淺黃色粉末狀雙氫青蒿素磷 脂復(fù)合物lg，密封包裝，放入4°C冰箱保存。實(shí)施例4 雙氫青蒿素磷酸復(fù)合物的制備稱取雙氫青蒿素0. 50g，二硬脂酰磷脂酰甘油0. 50g，加入丙酮20mL，40°C反應(yīng)4h 反應(yīng)液澄清，將反應(yīng)液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，30°C真空干燥M小時(shí)，即得淺黃色粉末狀雙氫 青蒿素磷脂復(fù)合物lg，密封包裝，放入4°C冰箱保存。實(shí)施例5 雙氫青蒿素磷酸復(fù)合物脂質(zhì)體制劑的制備取實(shí)施例3所制備的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物lg、大豆卵磷脂5g、膽固醇2g，加入 20mL氯仿中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，40°C水浴加熱攪拌lh，使溶液澄清透明，所得溶液轉(zhuǎn)移至茄形瓶 中，減壓蒸發(fā)除去溶劑氯仿，并在瓶壁形成一層透明薄膜，加入PH7. 4的磷酸鹽緩沖液20mL 充水化，過(guò)200nm的聚碳酸酯膜10次進(jìn)行均質(zhì)化處理，隨后加入甘露糖20g，使之充分溶解， 所得的脂質(zhì)體溶液過(guò)200nm的聚碳酸酯膜10次進(jìn)行均質(zhì)化處理，隨后分裝凍干，即得雙氫 青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體凍干制劑27. 9g，粒徑256nm。實(shí)施例6 雙氫青蒿素磷酸復(fù)合物脂質(zhì)體制劑的制備取實(shí)施例4所制備的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物0. 5g、大豆卵磷脂2g、膽固醇0. 5g， 加入IOmL氯仿中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，40°C水浴加熱攪拌lh，使溶液澄清透明，所得溶液轉(zhuǎn)移至茄 形瓶中，減壓蒸發(fā)出去溶劑氯仿，并在瓶壁形成一層透明薄膜，加入PH7. 4的磷酸鹽緩沖液 IOmL充水化，過(guò)微射流處理器，微射流以5000psi循環(huán)3次，然后以12000psi循環(huán)10次進(jìn) 行均質(zhì)化處理，隨后加入蔗糖2g，使之充分溶解，得到的脂質(zhì)體溶液加入微射流處理器，微 射流以5000psi循環(huán)3次，然后以12000psi循環(huán)10次進(jìn)行均質(zhì)化處理，隨后將其分裝凍干， 即得雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體凍干制劑4. 9g，粒徑80nm。實(shí)施例7 阿霉素，雙氫青蒿素，雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物對(duì)MCF-7阿霉素敏感株細(xì) 胞以及MCF-7阿霉素耐藥株細(xì)胞的抑制實(shí)驗(yàn)1、樣品配置(1)藥品液的配制①阿霉素藥液取阿霉素(海南滿方圓化工有限公司)，加入RPMI1640培養(yǎng)液配制成0. 05、0. 5、1、4、8、50、100μβ/ιΛ的阿霉素藥品液；②雙青蒿素藥品 液雙氫青蒿素(重慶華立武陵山制藥有限公司)，加入RPMI1640培養(yǎng)液配制成1、2、5、10、 20,40,80 μ g/mL的雙氫青蒿素藥品液；③取實(shí)施例1所制備的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物，加 Λ RPMI1640培養(yǎng)液，分別配制成1、2、5、10、20、40、80μ g/mL的藥品液。(2) 10%胎牛血清的1640培養(yǎng)液的配制將10%胎牛血清(GIBC0，美國(guó))加入 RPMI1640培養(yǎng)液(杭州四季青生物科技有限公司)中，制成實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)液。(3)5mg/mLMTT液的配制四氮唑藍(lán)(MTT，上海普飛生物技術(shù)有限公司)，用時(shí)以生 理鹽水現(xiàn)配制成5mg/mL，過(guò)濾除菌，4°C避光保存。2、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)分別取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7乳腺癌細(xì)胞阿霉素敏感株(中科院上海細(xì)胞生物學(xué) 研究所提供)與MCF-7乳腺癌細(xì)胞阿霉素耐藥株(中科院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所提供)， 用含10%胎牛血清的1640培養(yǎng)液制成一定濃度的細(xì)胞懸液，加入96孔培養(yǎng)板中，每孔 細(xì)胞數(shù)為0. 5X 104，37°C培養(yǎng)M小時(shí)，細(xì)胞貼壁后，除去培養(yǎng)液，分別加入不同濃度的阿 霉素(0. 05,0. 5、1、4、8、50、100μ g/mL)100uL、不同濃度的雙氫青蒿素(1、2、5、10、20、40、 80 μ g/mL) IOOuL及不同濃度的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物(1、2、5、10、20、40、80 μ g/mL)藥品 液lOOuL，以培養(yǎng)液及不加藥細(xì)胞作空白對(duì)照，每組設(shè)六個(gè)平行孔，置于37°C恒溫培養(yǎng)箱 (HERAEUS,德國(guó))中培養(yǎng)Mh，每孔加入5mg/mLMTT液20uL同樣條件下繼續(xù)培養(yǎng)4h，棄去 上清后，每孔加入二甲基亞砜(DMS0)200uL，37°C恒溫培養(yǎng)箱放置lOmin，酶標(biāo)儀(Thermo MK3，美國(guó))檢測(cè)570nm下光密度值(0D值)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)4次，取均值，根據(jù)公式(1)計(jì)算不 同濃度阿霉素、雙氫青蒿素及雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞阿霉素敏感株與 MCF-7乳腺癌細(xì)胞阿霉素耐藥株的抑制率，根據(jù)公式(1)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率計(jì)算IC5(I(即細(xì)胞 生長(zhǎng)抑制率為50%時(shí)的藥物濃度)，各組數(shù)值均以i 士SD圖示，P < 0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué) 意義，P <0.01為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，結(jié)果見(jiàn)表1 表6。細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率IR(%) = ； ^ rF-r-r^TT^I - 二’-公式⑴1)阿霉素對(duì)MCF-7阿霉素耐藥及敏感株細(xì)胞的抑制率不同濃度的阿霉素(DOX)對(duì)MCF-7耐藥及敏感株的抑制效果，結(jié)果見(jiàn)表1、表2 表1阿霉素對(duì)MCF-7阿霉素敏感株細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率( ± SD )
阿霉素(ug/mL)IR(%)0.0523.48 + 1.430.574.81 +3.73169.31 +2.64484.86 ±3.92893.67 ±2.69注阿霉素對(duì)MCF-7阿霉素敏感株抑制的IC50為0. 221 士0. 045ug/mL表2阿霉素對(duì)MCF-7阿霉素耐藥株細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率(S ± SD )
權(quán)利要求
1.一種雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物，其特征在于所述雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物為雙氫青蒿素 與磷脂以質(zhì)量比1 0. 1 10的復(fù)合物；所述磷脂為天然磷脂或合成磷脂。
2.如權(quán)利要求1所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物，其特征在于所述的復(fù)合物按照以下方 法制備按照配比量，將雙氫青蒿素與磷脂加入有機(jī)溶劑A中，30 60°C反應(yīng)0. 5 4h至 反應(yīng)液澄清，將反應(yīng)液30 60°C減壓旋蒸，除去有機(jī)溶劑，干燥，即得雙氫青蒿素磷脂復(fù)合 物；所述雙氫青蒿素與磷脂的質(zhì)量比為1 0.1 10，所述的有機(jī)溶劑A為下列之一乙酸 乙酯、四氫呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、正己烷、環(huán)己烷、甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇或丙酮， 所述的磷脂為天然磷脂或合成磷脂。
3.如權(quán)利要求1所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物，其特征在于所述的天然磷脂包括大豆 卵磷脂和蛋黃卵磷脂；所述合成磷脂包括二硬脂酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕 櫚酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰膽堿或二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺。
4.如權(quán)利要求2所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物，其特征在于所述的有機(jī)溶劑A為下列 之一乙酸乙酯、二氯甲烷或丙酮。
5.一種如權(quán)利要求1所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物所制備的脂質(zhì)體制劑，其特征在于 所述脂質(zhì)體制劑由以下重量配比的藥用原料組成的組合物制成脂質(zhì)體，再與藥物可接受的 凍干保護(hù)劑制成雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑，所述藥用原料質(zhì)量組成如下0.1 10份雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物、1 80份磷脂或1 80份磷脂和0 50份膽固醇；所述雙 氫青蒿素磷脂復(fù)合物中雙氫青蒿素與磷脂的質(zhì)量比為1 0.1 10，所述雙氫青蒿素磷脂 復(fù)合物中的磷脂與所述藥用原料中的磷脂各自獨(dú)立為天然磷脂或合成磷脂。
6.如權(quán)利要求5的所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑，其特征在于所述的凍干 保護(hù)劑為下列一種或兩種以上任意比例的組合海藻糖、乳糖、蔗糖、甘露糖或葡萄糖。
7.如權(quán)利要求5所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑，其特征在于所述脂質(zhì)體制 劑按照以下步驟制得(1)按照配比量，將雙氫青蒿素、磷脂加入有機(jī)溶劑A中，氮?dú)獗Ｗo(hù) 下，30 60°C水浴加熱攪拌0. 5 池至溶液澄清透明，將反應(yīng)液減壓旋蒸除去有機(jī)溶劑A， 干燥得到雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物；所述的有機(jī)溶劑A為下列之一乙酸乙酯、四氫呋喃、二 氯甲烷、三氯甲烷、正己烷、環(huán)己烷、甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇或丙酮；(2)將步驟(1)得到 的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物與組方量的磷脂或組方量的磷脂和膽固醇混合，加入有機(jī)溶劑B， 在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，30 60°C水浴加熱攪拌，使溶液澄清透明，所得溶液轉(zhuǎn)移至茄型瓶中，減壓 蒸發(fā)，除去有機(jī)溶劑B，并在瓶壁形成一層透明薄膜，加入pH5. 0 7. 4的緩沖溶液充分水 化，過(guò)聚碳酸酯膜或微射流進(jìn)行均質(zhì)處理，制得雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體；所述的有機(jī) 溶劑B為下列之一氯仿、甲醇或丙酮；(3)將步驟(2)制得的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì) 體，加入凍干保護(hù)劑，并使其充分溶解，混勻，隨后分裝，凍干，即得雙氫青蒿素脂質(zhì)體凍干 制劑，所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體與凍干保護(hù)劑的質(zhì)量比為1 1 20。
8.如權(quán)利要求7所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑，其特征在于所述的制備方 法中步驟(2)加入pH5. 0 7. 4的緩沖溶液充分水化，所述的緩沖溶液為下列之一磷酸鹽 緩沖液、蒸餾水、生理鹽水或5%葡萄糖注射液。
9.如權(quán)利要求7所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑，其特征在于所述的制備 方法中步驟C3)按照以下步驟進(jìn)行將雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體中加入凍干保護(hù)劑， 充分溶解，過(guò)聚碳酸酯膜或者微射流進(jìn)行均質(zhì)處理，使脂質(zhì)體平均粒徑< 300nm，分裝，凍干，即得雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑；所述的聚碳酸脂膜為粒徑200nm，連續(xù)過(guò)膜 均化10 20次；所述的微射流均質(zhì)處理是先以5000psi處理3個(gè)循環(huán)，然后以10000 15000psi處理6 10個(gè)循環(huán)。
10.如權(quán)利要求1所述的雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。n
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物與脂質(zhì)體制劑及其制備與應(yīng)用，所述雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物為雙氫青蒿素與磷脂以質(zhì)量比1∶0.1～10的復(fù)合物；所述脂質(zhì)體制劑由以下重量配比的藥用原料組成的組合物制成脂質(zhì)體，再與藥物可接受的凍干保護(hù)劑制成雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體制劑，所述藥用原料質(zhì)量組成如下0.1～10份雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物、1～80份磷脂或1～80份磷脂和0～50份膽固醇；本發(fā)明雙氫青蒿素磷脂復(fù)合物可顯著增強(qiáng)雙氫青蒿素的親水親脂性，將其與阿霉素組合應(yīng)用，可增強(qiáng)阿霉素的細(xì)胞毒性，降低阿霉素的使用量，從而降低化療藥物在治療過(guò)程中的毒副作用。
文檔編號(hào)A61K31/357GK102078317SQ20111002197
公開(kāi)日2011年6月1日 申請(qǐng)日期2011年1月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月19日
發(fā)明者吉順莉, 李博, 李貞 , 王成潤(rùn), 金 一 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)