，并以乙醇、乙醚依次以1:1、2:1、3:1、4:1、5:1不同體積比例進行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集黑胡蘿卜花青素各階段洗脫液；
[0035](9)將收集的洗脫液在70?85°C之間進行噴霧干燥，得黑胡蘿卜花青素成品，其含量在25%以上。
[0036]實施例2:利用微波逆流萃取和大孔樹脂技術純化黑胡蘿卜花青素的方法。其步驟如下:
[0037](I)前期處理:將新鮮黑胡蘿卜去掉根部，清洗，備用；
[0038](2)將黑胡蘿卜粉碎，過80目篩，進行壓榨，加入濃度為80 %的乙醇溶液進行微波逆流提取，加入乙醇的量為黑胡蘿卜粉碎體積的10倍;微波功率在600W，萃取時間為10min，萃取溫度為60°C，正向進料、反向進水，物料與水的流動為逆向連續(xù)動態(tài)流動，萃取二次；
[0039 ] (3)萃取液經(jīng)粗濾，濾去固體物，合并兩次濾液，得到過濾液；
[0040](4)將過濾液進行減壓濃縮，回收乙醇，得黑胡蘿卜花青素粗提物；
[0041](5)將所得粗提物用天津南開大學所生產(chǎn)的NKA-1I型樹脂進行吸附；
[0042](6)用 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90% 不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂層柱中依次進行梯度洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集黑胡蘿卜花青素各階段洗脫液；
[0043](7)將黑胡蘿卜花青素各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得黑胡蘿卜花青素半成品；
[0044](8)將所得黑胡蘿卜花青素半成品溶于乙酸乙酯加適量硅膠攪拌，烘干過60目篩，干法上樣，上工業(yè)級柱200-300目硅膠柱層析，并以乙醇、乙醚依次以1:1、2:1、3:1、4:1、5:1不同體積比例進行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集黑胡蘿卜花青素各階段洗脫液；
[0045](9)將收集的洗脫液在70?85°C之間進行噴霧干燥，得黑胡蘿卜花青素成品，其含量在25%以上。
[0046]實施例3:利用微波逆流萃取和大孔樹脂技術純化黑胡蘿卜花青素的方法。其步驟如下:
[0047](I)前期處理:將新鮮黑胡蘿卜去掉根部，清洗，備用；
[0048](2)將黑胡蘿卜粉碎，過80目篩，進行壓榨，加入濃度為80 %的乙醇溶液進行微波逆流提取，加入乙醇的量為黑胡蘿卜粉碎體積的8倍;微波功率在500W，萃取時間為80min，萃取溫度為70°C，正向進料、反向進水，物料與水的流動為逆向連續(xù)動態(tài)流動，萃取二次；
[0049 ] (3)萃取液經(jīng)粗濾，濾去固體物，合并兩次濾液，得到過濾液；
[0050](4)將過濾液進行減壓濃縮，回收乙醇，得黑胡蘿卜花青素粗提物；
[0051](5)將所得粗提物用天津南開大學所生產(chǎn)的NKA-1I型樹脂進行吸附；
[0052](6)用 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90% 不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂層柱中依次進行梯度洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集黑胡蘿卜花青素各階段洗脫液；
[0053](7)將黑胡蘿卜花青素各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得黑胡蘿卜花青素半成品；
[0054](8)將所得黑胡蘿卜花青素半成品溶于乙酸乙酯加適量硅膠攪拌，烘干過60目篩，干法上樣，上工業(yè)級柱200-300目硅膠柱層析，并以乙醇、乙醚依次以1:1、2:1、3:1、4:1、5:1不同體積比例進行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集黑胡蘿卜花青素各階段洗脫液；
[0055](9)將收集的洗脫液在70?85°C之間進行噴霧干燥，得黑胡蘿卜花青素成品，其含量在25%以上。
【主權項】
1.本發(fā)明提供利用微波逆流萃取和大孔樹脂技術純化黑胡蘿卜花青素的方法，其步驟包括； (1)前期處理:將新鮮黑胡蘿卜去掉根部，清洗，備用； (2)將黑胡蘿卜粉碎，壓榨，加入濃度為80%的乙醇溶液進行微波逆流提取，微波功率在300?800W，萃取時間為80min?120min，萃取溫度為70?80°C，正向進料、反向進水，物料與水的流動為逆向連續(xù)動態(tài)流動，萃取二次； (3)萃取液經(jīng)粗濾，濾去固體物，合并兩次濾液，得到過濾液； (4)將過濾液進行減壓濃縮，回收乙醇，得黑胡蘿卜花青素粗提物； (5)將所得粗提物用大孔吸附樹脂進行吸附； (6)用不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂進行洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集黑胡蘿卜花青素各階段洗脫液； (7)將黑胡蘿卜花青素各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得黑胡蘿卜花青素半成品； (8)將所得黑胡蘿卜花青素半成品溶于乙酸乙酯加適量硅膠攪拌，烘干過60-80目篩，干法上樣，上工業(yè)級柱200-300目硅膠柱層析，并以乙醇、乙醚以不同體積比例進行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集黑胡蘿卜花青素各階段洗脫液； (9)將收集的洗脫液在70?85°C之間進行噴霧干燥，得黑胡蘿卜花青素成品，其含量在25%以上。 所述的步驟(2)中，黑胡蘿卜粉碎后過60?80目篩； 所述的步驟(2)中，加入乙醇的體積為黑胡蘿卜粉碎體積的8?10倍； 所述的步驟(5)中所用的大孔吸附樹脂為天津南開大學所產(chǎn)生的NKA-1I型樹脂，吸附為靜態(tài)吸附或動態(tài)吸附； 所述的步驟(6)中洗脫用10?90%的乙醇進行洗脫； 所述的步驟(6)和(8)中，所采取的檢測方法均為薄層色譜法跟蹤檢測； 所述的步驟(8)中，加入乙酸乙酯的量按體積計算為提取物溶解后的10?20倍； 所述的步驟(8)中所采取的乙醇與乙醚的體積為1?5:1。
【專利摘要】本發(fā)明屬于天然有機化學領域，涉及一種黑胡蘿卜花青素的純化方法，特別是涉及一種利用微波逆流萃取和膜分離技術純化黑胡蘿卜花青素的方法。國內(nèi)提取黑胡蘿卜素大多采用有機溶劑提取法，其存在提取率相對較低，且提取時間長等缺點，而采用微波逆流萃取，大孔樹脂技術可以提高產(chǎn)品純度，縮短了提取時間，可以得到25％以上純度的黑胡蘿卜花青素。大孔樹脂再生方便迅速，適合大生產(chǎn)，且成本大大降低，水洗脫除去大部分雜質(zhì)，容易操作；同時提高有效成分含量。
【IPC分類】C07D311/62
【公開號】CN105418571
【申請?zhí)枴緾N201510760025
【發(fā)明人】姚德坤, 萬莉, 姚德利
【申請人】大興安嶺林格貝寒帶生物科技股份有限公司
【公開日】2016年3月23日
【申請日】2015年11月6日