本發(fā)明涉及一種對苯二酚類化合物及其制備方法與在抗腫瘤或免疫調(diào)節(jié)中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

實體腫瘤中除癌細(xì)胞外，還包括成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、多種免疫細(xì)胞和大量細(xì)胞外基質(zhì)等。其中，免疫細(xì)胞在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移和免疫逃逸的過程中均發(fā)揮了關(guān)鍵作用，其中腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associatedmacrophages，tams)在腫瘤間質(zhì)細(xì)胞中占有相當(dāng)大的比例，它們大部分由外周血單核細(xì)胞遷移、分化，并在腫瘤細(xì)胞及其微環(huán)境的影響下發(fā)育成熟。tams可以分泌多種生長因子、細(xì)胞因子、免疫抑制介質(zhì)和蛋白水解酶以促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移。

腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tams)可以極化為m1和m2兩種表型：m1型巨噬細(xì)胞，又稱為經(jīng)典活化型巨噬細(xì)胞，具有很強的促炎和病原體殺傷作用，并可促進(jìn)il12、il23等炎性因子介導(dǎo)的th1型細(xì)胞應(yīng)答；m2型巨噬細(xì)胞，也稱為非經(jīng)典活化型巨噬細(xì)胞，具有免疫調(diào)節(jié)、組織重塑、促血管生成等作用。越來越多的證據(jù)表明，腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tams)在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著“雙刃劍”的關(guān)鍵作用：m1能殺傷胖瘤細(xì)胞，而m2則表現(xiàn)為促進(jìn)胖瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移(cell2010，141:39-51.)。tams的極化與腫瘤微環(huán)境密切相關(guān)，且在惡性胖瘤中通常呈現(xiàn)m2樣極化狀態(tài)。因此，調(diào)節(jié)腫瘤的微環(huán)境，抑制tams的m2型極化可以改變腫瘤細(xì)胞的微環(huán)境，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的死亡，從而抑制腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。

最近研究表明2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(bha)，apocynin,tempo和nac等抗氧劑可以通過抑制活性氧自由基ros的產(chǎn)生，從而抑制單核細(xì)胞向m2巨噬細(xì)胞的分化，進(jìn)而抑制k-ras^la2模型小鼠肺癌的發(fā)生(cellresearch2013,23:898-914.)但是，也有不少研究表明抗氧劑會加速腫瘤的生長，這與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的體內(nèi)抗腫瘤活性不相符，因此，抑制ros的產(chǎn)生是2-叔丁基-4-甲氧基苯酚抑制tams的m2極化一個因素，而不是全部，bha抑制tams的m2極化，進(jìn)而抑制腫瘤發(fā)生、發(fā)展還存在其他機(jī)制(cancerres.1986,46,165-168；cancerres.,1985，45:1-8.)。然而，與此相矛盾的是，在早期的研究中，有證據(jù)表明2-叔丁基-4-甲氧基苯酚具有致癌作用(archivesofbiochemistryandbiophysics449(2006)171–177；regulatorytoxicologyandpharmacology47(2007)68–77；foodandchemicaltoxicology38(2000)1075±1084)。

文獻(xiàn)(cellresearch2013,23:898-914.)用含量0.75％飼料給藥，可以完全抑制k-ras^la2模型小鼠肺癌的發(fā)生。但是，按體表面積和種屬差異，該劑量折合成60kg體重的人的劑量約為7.5g/天。該劑量顯然大大超過歐盟和美國規(guī)定的的每天0.5mg/kg體重的攝入量，也超過我國對2-叔丁基-4-甲氧基苯酚在食品中的添加限量0.2g/kg。因此，2-叔丁基-4-甲氧基苯酚無法成為直接可用的腫瘤治療藥物。

因此，需要進(jìn)一步研究評估2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的腫瘤治療作用。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種對苯二酚類化合物及其制備方法與在抗腫瘤或免疫調(diào)節(jié)中的應(yīng)用。

本發(fā)明所提供的對苯二酚類化合物的結(jié)構(gòu)式如式ⅰ所示，其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑合物也是本發(fā)明保護(hù)的范圍，

式ⅰ中，x為c＝o或ch2，r選自下述基團(tuán)中任一種：至少1個碳原子的取代或未取代的烷基、至少含有3個碳原子的取代或未取代的環(huán)烷基、至少2個碳原子數(shù)的取代或未取代的烯基或炔基和取代或未取代的芳基或雜芳基；

式ⅰ中，y為nh、o或不存在；

r中的取代基為鹵素、氨基、硝基、酯基、羰基、氨基酸衍生物、天然黃酮、天然生物堿、聚乙二醇、多聚谷氨酸或多糖。

式ⅰ中，所述烷基的碳原子個數(shù)可為1～40，優(yōu)選為1～30，再優(yōu)選為1～25；所述環(huán)烷基的碳原子個數(shù)可為3～40，優(yōu)選為3～30，再優(yōu)選為3～25；所述烯基或炔基的碳原子個數(shù)可為2～40，優(yōu)選為2～30，再優(yōu)選為2～25。

式ⅰ中，所述芳基或雜芳基具體可為萘環(huán)、吲哚、苯環(huán)、吡啶、嘌呤、嘧啶、咪唑、呋喃、吡咯或苯并雜環(huán)等。

式ⅰ中，x和y的選擇如下述1)-3)中任一種：

1)當(dāng)x為c＝o時，y為nh；

2)當(dāng)x為ch2時，y為o；

3)x為c＝o或ch2，y不存在。

式ⅰ所示化合物包括但不限于下述1)-66)化合物中任一種：

1)(n-芐基)氨基甲酸-(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

2)(n-正丁基)氨基甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

3)(n-異丙基)氨基甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

4)(n-環(huán)己基)氨基甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

5)(n-苯乙基)氨基甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

6)特戊酰(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚氧基)甲基酯；

7)苯甲酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯，

8)乙酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯，

9)煙酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯，

10)異煙酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯，

11)環(huán)己烯甲酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯，

12)丙酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯，

13)丙烯酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯，

14)3,4-二甲氧基苯乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)-酯，

15)丁炔酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯，

16)2,2‘-聯(lián)苯二甲酸雙(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

17)2-氯-5-三氟甲基苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

18)3-氟苯乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

19)(1h-吲哚-3基)乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

20)3-(4-氟苯基)-丙酸-(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

21)n-叔定氧羰基哌啶-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

22)對苯二甲酸二(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

23)3-(3-硝基苯基)丙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

24)4-苯基苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

25)4-甲基吡啶-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

26)4-甲氧基吡啶-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

27)十六酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯，

28)n-叔丁氧羰基甘氨酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

29)3-氟-4-氯苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

30)n-叔丁氧羰基四氫吡咯、苯并雜環(huán)-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

31)3-氰基苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

32)n-叔丁氧羰基丙氨酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

33)2-萘甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

34)丙二酸二(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

35)3,6-二氯噠嗪-4-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

36)1-甲基環(huán)丙甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

37)2-吲哚甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

38)2-氯-3-吡啶甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

39)2-噻吩乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

40)3-(4-甲基苯基)-丙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

41)丙炔酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

42)2-苯基丙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

43)2-氟丙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

44)環(huán)己乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

45)環(huán)戊甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

46)金剛烷乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

47)環(huán)丙基乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

48)n-叔丁氧羰基哌啶-4-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

49)辛酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

50)7-氧代辛酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

51)環(huán)己-2-烯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

52)2,4,5-三氟苯乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

53)2-溴-5-碘苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

54)2-氟-4-硝基苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

55)n-叔丁氧羰基哌啶-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

56)對苯二乙酸二(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

57)4-苯甲酰丁酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

58)3,5-二甲氧基苯并烯酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

59)4-氯吡啶-2-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

60)n-甲基哌啶-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

61)、n-叔丁氧羰基-6-氨基戊酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

62)3,3,3-三氟丙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

63)嗎啉-4-基乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

64)3-(3,5-二叔丁基-4-羥基-苯基)丙酸-(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯，

65)己二酸二(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯；

66)2-(2-叔丁基-4-甲氧基苯氧基)乙酸乙酯。

本發(fā)明進(jìn)一步提供了式ⅰ所示化合物的制備方法，包括如下(1)、(2)、(3)或(4)的步驟：

(1)當(dāng)x為c＝o時，y為nh時，包括如下步驟：

rch2與三光氣進(jìn)行反應(yīng)得到r-n＝c＝o；r-n＝c＝o與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚經(jīng)縮合反應(yīng)即得式ⅰ所示化合物；

式ⅰ、rch2和r-n＝c＝o中，r選自下述基團(tuán)中任一種：至少1個碳原子的取代或未取代的烷基、至少3個碳原子的取代或未取代的環(huán)烷基、至少2個碳原子數(shù)為的取代或未取代的烯基或炔基和取代或未取代的芳基或雜芳基；

r中取代基為鹵素、氨基、硝基、酯基、羰基、氨基酸衍生物、天然黃酮、天然生物堿、聚乙二醇、多聚谷氨酸或多糖；

式ⅰ中，x為c＝o，y為nh；

(2)當(dāng)x為ch2時，y為o時，包括如下步驟：

2-叔丁基-4-甲氧基苯酚鈉與式1所示化合物經(jīng)縮合反應(yīng)即得式ⅰ所示化合物；

式ⅰ和式1中，r選自下述基團(tuán)中任一種：至少1個碳原子的取代或未取代的烷基、至少3個碳原子的取代或未取代的環(huán)烷基、至少2個碳原子的取代或未取代的烯基或炔基和取代或未取代的芳基或雜芳基；

r中取代基為鹵素、氨基、硝基、酯基、羰基、氨基酸衍生物、天然黃酮、天然生物堿、聚乙二醇、多聚谷氨酸或多糖；

式ⅰ中，x為ch2，y為o；

(3)x為c＝o，y不存在時，即為式ⅱ所示化合物，包括如下1)或2)的步驟：

1)2-叔丁基-4-甲氧基苯酚鈉與式2所示酰氯經(jīng)縮合即得式ⅱ所示化合物；

式ⅱ和式2中，r選自下述基團(tuán)中任一種：至少1個碳原子的取代或未取代的烷基、至少3個碳原子的取代或未取代的環(huán)烷基、至少2個碳原子的取代或未取代的烯基或炔基和取代或未取代的芳基或雜芳基；

r中取代基為鹵素、氨基、硝基、酯基、羰基、氨基酸衍生物、天然黃酮、天然生物堿、聚乙二醇、多聚谷氨酸或多糖；

式ⅱ中，x為c＝o；

2)2-叔丁基-4-甲氧基苯酚鈉與式3所示羧酸經(jīng)縮合即得式ⅱ所示化合物；

式ⅱ和式3中，r選自下述基團(tuán)中任一種：至少1個碳原子的取代或未取代的烷 基、至少3個碳原子的取代或未取代的環(huán)烷基、至少2個碳原子的取代或未取代的烯基或炔基和取代或未取代的芳基或雜芳基；

r中取代基為鹵素、氨基、硝基、酯基、羰基、氨基酸衍生物、天然黃酮、天然生物堿、聚乙二醇、多聚谷氨酸或多糖；

式ⅱ中，x為c＝o；

(4)當(dāng)x為ch2，y不存在時，即式ⅱ所示化合物，包括如下步驟：

2-叔丁基-4-甲氧基苯酚鈉與式4所示化合物經(jīng)縮合反應(yīng)即得式ⅱ所示化合物；

式ⅱ和式4中，r選自下述基團(tuán)中任一種：至少1個碳原子的取代或未取代的烷基、至少3個碳原子的取代或未取代的環(huán)烷基、至少2個碳原子的取代或未取代的烯基或炔基和取代或未取代的芳基或雜芳基；

r中取代基為鹵素、氨基、硝基、酯基、羰基、氨基酸衍生物、天然黃酮、天然生物堿、聚乙二醇、多聚谷氨酸或多糖；

x為ch2。

上述制備方法中，所述縮合反應(yīng)可在常規(guī)的反應(yīng)條件，如室溫、加熱、回流或者冰浴等條件下進(jìn)行。

式ⅰ所示化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其水合物或其溶劑合物可應(yīng)用于抗腫瘤或免疫調(diào)節(jié)，即利用式ⅰ所示化合物在體內(nèi)能夠釋放為2-叔丁基-4-甲氧基苯酚.

本發(fā)明驗證了2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(bha)能夠抑制巨噬細(xì)胞m2極化的作用，并在her2乳腺癌小鼠模型上證實了2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用；her2小鼠模型，2-叔丁基-4-甲氧基苯酚劑量(50-1000mg/kgbw)分次給藥顯示明顯的抗腫瘤作用。

本發(fā)明優(yōu)勢在于：1)本發(fā)明提供的化合物可以在體內(nèi)緩釋釋放2-叔丁基-4-甲氧基苯酚，克服2-叔丁基-4-甲氧基苯酚直接給藥體內(nèi)半衰期短的缺點(t1/2＝0.5～1h)，保持平穩(wěn)的2-叔丁基-4-甲氧基苯酚血藥濃度(t1/2＝12～24h)。2)本發(fā)明提供的化合物等效劑量更低，達(dá)到相同血藥濃度和類似藥時曲線(auc)，本發(fā)明化合物的給藥劑量僅為2-叔丁基-4-甲氧基苯酚直接給藥劑量的1/100～1/5000，避免高劑量的2-叔丁基-4-甲氧基苯酚所致的毒性作用；3)本發(fā)明提供的化合物與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚相比細(xì)胞毒性更小，部分化合物小鼠急性毒性(ld50>1200mg/kg)，比2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(ld50＝1100mg/kg)；4)本發(fā)明提供的化合物保護(hù)了2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的 酚羥基，避免了在環(huán)境中的氧化作用，提高了藥物的環(huán)境穩(wěn)定性。

附圖說明

圖1為2-叔丁基-4-甲氧基苯酚抑制巨噬細(xì)胞m2極化作用的示意圖。

圖2為bha在小鼠體內(nèi)代謝的實驗結(jié)果。

圖3為本發(fā)明化合物在人體血漿中釋放bha的曲線。

圖4為本發(fā)明化合物在小鼠體內(nèi)釋放bha的曲線。

具體實施方式

下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為本專業(yè)領(lǐng)域常規(guī)方法。

下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。

本發(fā)明首先驗證了2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(bha)抑制巨噬細(xì)胞m2極化的作用，并在her2乳腺癌小鼠模型上證實了2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用，如圖1所示，在乳腺癌her發(fā)瘤模型上，bha給藥組小鼠腫瘤未見轉(zhuǎn)移頭部(左圖)，空白對照組小鼠頭部轉(zhuǎn)移明顯，以致雙目失明(右圖)。同時，通過藥物代謝試驗發(fā)現(xiàn)bha在體內(nèi)的半衰期很短只有30-60分鐘，如圖2所示。此外，本發(fā)明進(jìn)行毒理學(xué)實驗，發(fā)現(xiàn)小鼠600mg/kg給藥，僅見部分“宿醉”狀的中樞作用，半小時后可以恢復(fù)，1100mg/kg半數(shù)小鼠致死，存活的小鼠在30-60分鐘后，毒性反應(yīng)癥狀消失；低劑量小鼠長期給藥2年未見毒性作用；因此，結(jié)合文獻(xiàn)2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的代謝產(chǎn)物(具有dna損傷作用，foodandchemicaltoxicology1999，37:1027-1038)研究結(jié)果，本發(fā)明推斷2-叔丁基-4-甲氧基苯酚本身具有抗腫瘤作用，其代謝產(chǎn)物tert-butylhydroquinone(tbhq)與dna的作用可能是其副作用產(chǎn)生的原因。

深入分析發(fā)現(xiàn)，2-叔丁基-4-甲氧基苯酚口服吸收和代謝都很快(達(dá)峰時間5min，小鼠t1/2＝20min)，每次給藥的血藥濃度都是一個時間跨度很小的“脈沖”，在藥物濃度峰值遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于最低有效藥物濃度，不僅不利于療效的發(fā)揮，而且導(dǎo)致不必要的毒副作用。

因此，如能控制2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的釋放，使之保持平穩(wěn)的血藥濃度，不僅可以在實現(xiàn)增效減毒的作用，而且可以有效降低2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的劑量。同時，由于2-叔丁基-4-甲氧基苯酚是一種抗氧劑，易被氧化，因此環(huán)境穩(wěn)定性和在肝臟中代謝(首過效應(yīng)嚴(yán)重)也是其成為藥物的直接障礙。本發(fā)明為了控制2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的釋放、提高環(huán)境穩(wěn)定性和盡量減少首過效應(yīng)、提高藥物安全性，提供了2-叔丁基-4-甲氧基苯酚前藥，并驗證了它們在體外、體內(nèi)的釋放特性，細(xì)胞毒性以及體內(nèi)安全性。

實施例1、苯甲酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯的制備(xh2005)

將2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(0.9g，5mmol)溶于無水四氫呋喃(20ml)中，滴加到0-5℃的氫化鈉(220mg，5.5mmol)/無水四氫呋喃混合液(10ml)中，加畢，保溫反應(yīng)1小時。將苯甲酰氯(0.58ml，5mmol)/二氯甲烷(10ml)滴加到上步所得的反應(yīng)液中，加畢保溫反應(yīng)2小時，然后室溫反應(yīng)3小時。減壓除去溶劑，殘余物加入乙酸乙酯(30ml)和冰水(10ml)，攪拌澄清，分液，取有機(jī)層，水洗10ml×3，無水硫酸鈉干燥過夜，柱層析(展開劑乙酸乙酯:石油醚＝4：1)得到白色固體1.14g。收率80％。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:1.30(s,9h),3.78(s,3h),6.86-6.92(m,2h),7.09-7.11(d,j＝8.4hz,1h),7.62-7.66(m,2h),7.75-7.79(m,1h),8.15-8.17(d,j＝7.2hz,2h)；¹³cnmr(100mhz,dmso-d6)δ:29.8,34.2,55.3,111.1,113.1,125.2,129.2,129.3,129.7,134.1,141.9,142.3,156.6,165.0.

實施例2、乙酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯的制備(xh2006)

按照實施例1中的方法進(jìn)行制備，2-叔丁基-4-甲氧基苯酚與氫化鈉反應(yīng)后，再與乙酰氯反應(yīng)，制備實施例2所述化合物，經(jīng)乙醇重結(jié)晶純化，收率90％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:1.33(s,9h),2.32(s,3h),3.79(s,3h),6.72-6.75(m,1h),6.91-6.93(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ:21.6,30.1,34.6,55.6,110.6,113.9,124.6,142.4,142.7,156.9,170.2.

實施例3、煙酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯(xh2010)

將煙酸(0.62g，5mmol)加入到二甲基甲酰胺(20ml)中，加入二環(huán)己基碳二亞胺(1200mg，6mmol)，攪拌5分鐘，加入2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(900mg，5mmol)，保溫35-40℃反應(yīng)過夜。減壓除去二甲基甲酰胺，殘余物加入乙酸乙酯(50ml)和水(2ml)，攪拌20分鐘，抽濾，濾液經(jīng)柱層析(洗脫劑位乙酸乙酯:石油醚＝3:1)純化得到產(chǎn)物。收率73％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:1.34(s,9h),3.81(s,3h),6.76-6.81(m,1h),6.97-7.03(m,2h),7.46-7.49(m,1h),8.44-8.47(dt,j1＝8.4hz,j2＝2.0hz,1h),8.84-8.86(dd,j1＝4.8hz,j2＝1.6hz,1h),9.41-9.42(d,j＝2.0hz,1h)；¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ:30.2,34.7,55.6,110.8,114.1,123.7,124.7,125.9,137.7,142.5,142.7,151.5,154.1,157.3,164.6.

實施例4、異煙酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯(xh2011)

制備方法與實施例3相同。異煙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率75％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:1.33(3,9h),3.81(s,3h),6.76-6.80(m,1h),6.97-7.01(m,2h),8.00-8.02(d,j＝6.2hz,2h),8.86-8.87(d,j＝6.2hz,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ:30.4,34.9,55.6,110.8,114.3,123.5,124.5,137.0,142.4,151.0,157.4,164.9.

實施例5、環(huán)己烯甲酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯的制備(xh2015)

制備方法與實施例3相同。環(huán)己烯甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯縮合，收率 75％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),1.83-1.87(m,1h),2.16-2.23(m,3h),2.43-2.45(m,2h),2.81-2.84(m,1h),3.79(s,3h),5.75(d,j＝1.1hz,2h),6.71-6.74(m,1h),6.85-6.87(d,j＝8.8hz,1h),6.92-6.93(d,j＝3.0hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):24.5,24.9,27.4,30.0,34.5,39.9,55.4,110.5,113.7,124.4,125.0,126.8,142.2,142.9,156.7,174.8.

實施例6、丙酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯(xh2016)

制備方法與實施例3相同。丙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率85％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:1.27-1.32(m,12h),2.59-2.63(q,j＝3.56hz,2h),3.79(s,3h),6.77-6.75(m,1h),6.89-6.93(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):9.0,28.3,30.1,34.6,55.5,110.5,113.8,124.5,142.3,142.8,156.8,173.4.

實施例7、丙烯酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯(xh2017)

制備方法與實施例3相同。丙烯酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率55％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):6.94-6.97(m,2h),6.77-6.75(m,1h),6.60(m,1h),6.36(m,1h),6.03-6.06(d,j＝24hz,1h),3.81(s,3h),1.33(s,9h)¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):156.8,142.5,132.6,128.5,124.5,113.9,110.5,55.5,34.6,30.0.

實施例8、3,4-二甲氧基苯乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)-酯(xh2018)

制備方法與實施例3相同。3,4-二甲氧基苯乙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率83％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):6.92-6.84(m,5h),6.72-6.68(m,1h),3.88(s,6h),3.82(s,2h),3.78(s,3h),1.27(s,9h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):170.8,157.0,149.1,148.4,142.9,142.5,125.7,124.5,122.0,113.9,112.7,111.3,110.6,56.1,56.0,55.6,41.8,34.6,30.0.

實施例9、丁炔酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯(xh2019)

制備方法與實施例3相同。丁炔酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率41％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:1.35(s,9h),2.07(s,3h),3.82(s,3h),6.77-6.75(m,1h),6.94-6.97(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):29.5,30.2,34.7,55.6,72.6,88.1,110.6,114.0,124.5,142.1,142.7,153.0,157.3.

實施例10、2,2’-聯(lián)苯二甲酸雙(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2020)

制備方法與實施例3相同。2,2’-聯(lián)苯二甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚按照摩爾比為1:2的投料比反應(yīng)，收率62％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.26(s,9h),3.76(s,6h),6.65-6.68(m,2h),6.77-6.79(m,2h),6.87-6.88(m,2h),7.26-7.29(m,2h),7.45-7.48(m,2h),7.55-7.58(m,2h),8.19-8.21(dd,j1＝7.8hz,j2＝1.4hz,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):28.8,33.2,54.2,109.2,112.4,123.2,126.2,127.6,129.1,130.7,141.3,141.5,142.8,155.4,164.4.

實施例11、2-氯-5-三氟甲基苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2021)

制備方法與實施例3相同。2-氯-5-三氟甲基苯甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率74％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.38(s,9h),3.83(s,3h), 6.80-6.82(m,1h),6.99(m,1h),7.06-7.08(m,1h),7.60-7.64(m,1h),7.74-7.78(m,1h),8.32(s,1h),¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.2,34.7,55.6,110.8,114.1,124.5,128.8,129.7,130.5,132.3,138.5,142.6,157.4,163.5.

實施例12、3-氟苯乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2022)

制備方法與實施例3相同。3-氟苯乙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率80％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.23(s,9h),3.78(s,3h),3.88(s,2h),6.68-6.71(m,1h),6.81-6.85(m,2h),6.90-7.10(m,1h),7.12-7.18(m,1h),7.32-7.38(m,1h),¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):29.9,34.5,41.7,55.5,110.5,113.8,114.3,114.5,116.6,124.3,125.3,130.1,130.2,135.3,135.4,142.3,142.6,156.9,161.9,164.1,169.8.

實施例13、(1h-吲哚-3基)乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2023)

制備方法與實施例3相同。1h-吲哚-3乙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率65％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),3.81(s,3h),6.66-6.70(m,2h),6.78-6.82(m,1h),6.85-6.90(m,1h),7.12-7.42(m,2h),7.67(m,1h),8.32(s,1h),¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.0,32.1,34.7,55.7,107.9,110.6,111.0,111.5,113.9,114.2,119.0,119.9,122.4,123.6,124.6,124.7,132.5,143.2,143.7,157.0,157.5,163.7,171.2.

實施例14、3-(4-氟苯基)-丙酸-(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2024)

制備方法與實施例3相同。3-(4-氟苯基)-丙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率64％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.28(s,9h),2.88(m,2h),3.06(m,2h),3.82(s,3h),6.52(m,1h),6.79(m,1h),6.91(m,1h),6.99(m,2h),7.25(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.0,34.4,36.6,55.4,110.5,111.7,113.7,115.2,115.4,124.4,129.9,135.7,142.2,142.5,156.8,160.3,162.8,171.6.

實施例15、n-叔定氧羰基哌啶-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2025)

制備方法與實施例3相同。n-叔定氧羰基哌啶-3-甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率60％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),1.47(s,9h),1.76-1.82(m,2h),2.22-2.26(m,1h),2.79(m,1h),2.84-2.88(m,1h),3.16-3.20(m,1h),3.82(s,3h),3.97-4.02(m,1h),4.33-4.36(m,1h),6.68(m,1h),6.83(m,1h),6.92(m,1h),¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):24.4,27.5,28.6,29.7,30.2,34.8,42.1,55.7,110.8,113.9,124.6,142.8,154.8,157.1,172.6.

實施例16、對苯二甲酸二(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2026)

制備方法與實施例3相同。對苯二甲酸(5mmol)與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(10mmol)縮合，收率55％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.37(s,18h),3.83(s,6h),6.80-6.83(m,2h),7.00-7.05(m,4h),8.38(s,4h),¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.1,34.6,55.5,110.7,113.9,124.5,130.4,134.1,142.5,142.6,157.1,164.5.

實施例17、3-(3-硝基苯基)丙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2028)

制備方法與實施例3相同。3-(3-硝基苯基)丙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率70％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.33(s,9h),2.94-2.99(t,j＝7.2hz,2h),3.14-3.20(t,j＝7.2hz,2h),3.78(s,3h),6.69-6.73(m,1h),6.80-6.83(d,j＝8.8hz,1h),6.89-6.90(d,j＝2.1hz,1h),7.45-7.50(m,1h),7.61-7.64(m,1h),8.08-8.11(m,1h),8.14-8.16(m,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.2,34.5,36.0,55.7,110.7,114.1,121.9,123.5,124.6,129.7,135.2,142.3,142.6,148.5,157.1,171.4.

實施例18、4-苯基苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2029)

制備方法與實施例3相同。4-苯基苯甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率80％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.38(s,9h),3.80(s,3h),6.78-6.80(m,1h),6.98-7.04(m,2h),7.18-7.22(m,2h),7.63-7.65(m,2h),7.72-7.74(m,2h),8.28-8.30(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.1,34.6,55.5,110.6,113.8,124.7,127.3,128.3,128.5,130.7,139.8,142.6,142.8,146.3,156.9,165.6.

實施例19、4-甲基吡啶-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2030)

制備方法與實施例3相同。4-甲基吡啶-3-甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率80％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.38(s,9h),2.68(s,3h),3.82(s,3h),6.78-6.81(m,1h),6.98-6.99(m,1h),7.02-7.04(m,1h),7.33-7.35(m,1h),8.34-8.36(m,1h),9.31-9.32(d,j＝1.68hz,1h),¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ:24.9,30.2,55.5,110.7,114.0,123.4,124.7,138.0,150.4,156.4,157.1,164.0,164.7.

實施例20、4-甲氧基吡啶-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2031)

制備方法與實施例3相同。4-甲氧基吡啶-3-甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率75％。由于鄰位甲氧基的影響，nmr可見手性面所致的立體異構(gòu)體的成對峰的出現(xiàn)，2個異構(gòu)體的比例為1:2。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:1.33(s,9h),3.81(s,3h),3.82&4.00(s,3h),6.76-6.81(m,1h),6.97-7.01(m,2h),7.47-7.48&8.04-8.05(m,1h),7.55-7.58&7.93-7.95(m,1h),8.35-8.37&8.63-8.64(m,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ:30.0,34.5,53.8,55.3,110.5,111.6,113.8,115.9,124.3,139.9,142.3,147.9,150.8,152.6,157.1,157.3,163.1,164.1,164.8.

實施例21、十六酸-2-叔丁基-4-甲氧基苯酚酯(xh2033)

制備方法與實施例3相同。十六酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率75％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):0.88(m,3h),1.25-1.33(m,34h),1.71-1.79(m,2h),2.55-2.59(m,2h),3.78(s,3h),6.71-6.74(m,1h),6.88-6.93(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):14.3,22.8,24.9,29.3,29.5,29.6,29.7,29.8,,30.1,32.034.8,35.0,55.5,110.5,113.9,124.6,142.3,142.8,156.8,172.9.

實施例22、n-叔丁氧羰基甘氨酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2034)

制備方法與實施例3相同。n-叔丁氧羰基甘氨酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率45％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.30(s,9h),1.46(s,9h),3.83(s,3h),4.20(s,2h),5.2(brs,1h),6.71-6.73(m,1h),6.92-6.94(m,2h),¹³cnmr(100mhz, cdcl3)δ(ppm):28.2,30.0,34.4,42.9,55.4,80.0,110.4,113.8,124.2,142.2,155.5,156.9,169.5.

實施例23、3-氟-4-氯苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2035)

制備方法與實施例3相同。3-氟-4-氯苯甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率78％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.34(s,9h),3.82(s,3h),6.71-6.73(m,1h),6.98-7.00(m,2h),7.56-7.60(m,1h),7.96-7.97(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ:30.2,34.7,55.6,110.8,114.1,118.4,124.6,126.6,130.4,131.2,142.6,156.9,157.3,159.4,164.1.

實施例24、n-叔丁氧羰基四氫吡咯、苯并雜環(huán)-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2036-1)

制備方法與實施例3相同。n-叔丁氧羰基四氫吡咯、苯并雜環(huán)-3-甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率70％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),1.46(s,9h),2.30-2.32(m,2h),3.28-3.34(m,1h),3.38-3.44(m,1h),3.52-3.58(m,1h),3.72-3.82(m,2h),3.82(s,3h),6.70-6.74(m,1h),6.85-6.88(m,1h),6.92-6.93(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):28.4,30.0,34.5,43.4,45.1,47.8,55.5,79.5,110.5,113.8,124.3,142.1,142.5,154.2,156.9,172.0.

實施例25、3-氰基苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2036-2)

制備方法與實施例3相同。3-氰基苯甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率70％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.35(s,9h),3.82(s,3h),6.78-6.81(m,1h),6.99-7.01(m,2h),7.67-7.71(t,j＝3.84hz,1h),7.92-7.95(m,1h),8.44-8.47(m,2h),8.50(s,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.1,34.5,55.6,110.7,113.3,113.9,117.7,124.4,129.8,131.1,133.7,134.1,136.5,142.4,157.2,163.9.

實施例26、n-叔丁氧羰基丙氨酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2036-3)

制備方法與實施例3相同。n-叔丁氧羰基丙氨酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率37％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)1.32(s,9h),1.40(s,9h),1.43(d,2h),3.73(s,3h),4.61(m,1h),6.99-7.01(m,2h),6.78-6.81(m,1h).

實施例27、2-萘甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2036-4)

制備方法與實施例3相同。2-萘甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率77％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),3.73(s,3h),6.84(m,1h),6.88-6.89(m,2h),7.46-7.49(m,3h),7.82-7.85(m,4h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.0,34.6,42.4,55.5,110.6,113.9,124.5,126.4,127.6,127.8,128.6,130.7,131.7,133.6,142.4,142.9,157.0,170.5.

實施例28、丙二酸二(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2037)

制備方法與實施例3相同。丙二酸(5mmol)與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(10mmol)縮合反應(yīng)制備，收率70％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.35(s,18h),3.80(s,6h),3.88(s,2h),6.75(m,2h),6.94(m,2h),6.99-7.01(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ (ppm):30.2,34.7,42.6,55.5,110.8,114.0,124.4,142.5,142.6,157.3,165.4.

實施例29、3,6-二氯噠嗪-4-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2038-1)

制備方法與實施例3相同。3,6-二氯噠嗪-4-甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率77％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.36(s,9h),3.82(s,3h),6.76-6.79(m,1h),6.97-7.02(m,2h),7.99(s,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.2,34.7,55.6,110.8,114.1,124.4,131.5,137.8,138.8,142.3,142.6,157.5,158.0,161.4.

實施例30、1-甲基環(huán)丙甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2038-2)

制備方法與實施例1相同。1-甲基環(huán)丙甲酸與氯化亞砜反應(yīng)，再與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚鈉縮合反應(yīng)制備，收率87％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):0.83-0.85(m,2h),1.33(s,9h),1.40-1.42(m,2h),1.46(s,3h),3.78(s,3h),6.72-6.73(m,1h),6.84-6.87(m,1h),6.90-6.92(m,1h),¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):17.3,19.1,19.7,30.1,34.6,55.6,110.6,113.7,124.7,142.4,143.2,156.7,175.2.

實施例31、2-吲哚甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2038-3)

制備方法與實施例3相同。2-吲哚甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率67％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.33(s,3h),3.77(s,3h),7.08-7.11(m,1h),7.16-7.20(m,1h),7.32-7.40(m,2h),7.43-7.44(m,1h),7.74-7.77(m,1h),9.36(s,1h),¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.1,34.6,55.5,109.9,110.5,112.1,113.9,121.0,122.7,124.6,125.8,126.8,127.4,137.3,142.3,142.7,157.0,161.3.

實施例32、2-氯-3-吡啶甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2038-4)

制備方法與實施例3相同。2-氯-3-吡啶甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率87％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.34(s,9h),3.83(s,3h),6.79-6.82(m,1h),6.98-6.99(m,1h),7.05-7.07(m,1h),7.43(m,1h),8.37-8.39(m,1h),8.61(s,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.2,34.7,55.6,110.9,114.1,122.4,124.5,126.7,140.5,142.5,142.6,150.7,152.5,157.4,163.7.

實施例33、2-噻吩乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2038-5)

制備方法與實施例3相同。2-噻吩乙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率70％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.27(s,9h),3.78(s,3h),4.10(s,2h),6.70-6.73(m,1h),6.87(m,1h),6.90-.92(m,2h),6.98-7.07(m,1h),7.04-7.06(m,2h),7.24(m,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.1,34.6,36.1,55.5,110.6,113.9,124.4,125.4,127.1,127.5,134.2,142.4,142.8,157.0,169.4.

實施例34、3-(4-甲基苯基)-丙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2039-1)

制備方法與實施例3相同。3-(4-甲基苯基)-丙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率65％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.29(s,9h),2.32(s,3h),2.88-2.90(t,j＝8.2hz,2h),3.03-3.05(t,j＝8.2hz,2h),3.78(s,3h),6.69-6.72(m,1h),6.81-6.84(m,1h),6.90-.92(m,1h),7.12-7.15(m,4h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):21.0,30.3,34.5,36.6,55.4,110.4,113.7,124.4,128.3,129.2,135.8,137.0,142.2, 142.6,156.7,171.8.

實施例35、2-苯基丙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2039-3)

制備方法與實施例3相同。2-苯基丙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率65％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.16(s,9h),1.63-1.67(d,j＝8.8hz,3h),3.76(s,3h),3.93-3.97(q,j＝8.8hz,1h),6.68-6.70(m,2h),6.75-6.77(m,1h),6.87-6.88(m,1h),7.20-7.45(m,5h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):18.1,29.7,34.4,46.1,55.4,110.4,113.6,124.1,127.4,127.8,128.7,139.5,142.3,142.9,156.7,173.3.

實施例36、2-氟丙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2039-4)

制備方法與實施例3相同。2-氟丙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率60％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.33(s,9h),1.72-1.80(m,3h),3.80(s,3h),5.19-5.31(m,1h),6.73-6.76(m,1h),6.92-6.95(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):18.0,18.2,29.9,34.6,55.4,84.9,86.7,110.5,113.9,123.9,142.0,142.3,157.1,169.4.

實施例37、環(huán)己乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2039-5)

制備方法與實施例3相同。環(huán)己乙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率68％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.00-1.20(m,3h),1.20-1.40(m,11h),1.63-1.76(m,3h),1.90-2.00(m,1h),1.83-1.87(m,2h),2.44-2.46(m,2h),3.77(s,3h),6.70-6.73(m,1h),6.88-6.92(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):26.0,26.1,30.0,33.1,34.5,34.6,42.6,55.4,110.4,113.7,124.5,142.2,142.7,156.6,171.9.

實施例38、環(huán)戊甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2039-6)

制備方法與實施例3相同。環(huán)戊甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率78％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.33(s,9h),1.63-1.70(m,2h),1.74-1.82(m,2h),1.93-2.07(m,4h),3.78(s,3h),6.71-6.73(m,1h),6.86-6.88(d,j＝8.8hz,1h),6.91-6.92(d,j＝2.8hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):25.7,29.9,34.5,44.4,55.4,110.4,113.6,124.4,142.2,142.9,156.6,175.6.

實施例39、金剛烷乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2040-1)

制備方法與實施例3相同。金剛烷乙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率70％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),1.66-1.76(m,12h),2.01(brs,3h),2.32(s,2h),3.79(s,3h),6.71-6.74(m,1h),6.91-6.94(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):28.7,30.1,33.3,34.6,36.8,42.6,49.2,55.6,110.5,113.8,124.6,142.4,142.7,156.8,170.8.

實施例40、環(huán)丙基乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2040-2)

制備方法與實施例3相同。環(huán)丙基乙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率73％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):0.25-0.29(m,2h),0.61-0.66(m,2h),1.19-1.23(m,1h),1.33(s,9h),2.47-2.49(d,j＝7.2hz,2h),3.79(s,3h),6.72-6.75(m,1h),6.91-6.93(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):4.77,6.92,30.1,40.2,55.6, 110.6,113.9,124.7,142.4,142.9,156.9,172.2.

實施例41、n-叔丁氧羰基哌啶-4-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2040-3)

制備方法與實施例3相同。n-叔丁氧羰基哌啶-4-甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率73％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),1.47(s,9h),1.73-1.84(m,2h),2.05-2.10(m,2h),2.66-2.73(m,1h),2.85-2.93(m,2h),3.79(s,3h),4.11-4.16(m,2h),6.71-6.74(m,1h),6.82-6.84(d,j＝8.8hz,1h),6.92-6.93(d,j＝3.2hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):28.0,28.5,30.1,34.7,41.8,43.4,55.6,79.8,110.7,113.8,124.5,142.3,142.8,154.7,156.9,173.7.

實施例42、辛酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2040-4)

制備方法與實施例3相同。辛酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率63％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):0.87-0.91(m,3h),1.27-1.43(m,18h),1.73-1.81(m,2h),2.55-2.59(t,j＝7.6hz,2h),6.71-6.74(m,1h),6.88-6.90(d,j＝8.8hz,1h),6.92-6.93(d,j＝3.2hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):14.2,22.7,24.9,29.0,29.3,30.1,31.8,34.7,35.0,55.6,110.5,113.8,124.6,142.3,142.8,156.8,172.9.

實施例43、7-氧代辛酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2040-5)

制備方法與實施例3相同。7-氧代辛酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率60％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.30-1.44(m,13h),1.60-1.66(m,2h),1.74-1.80(m,2h),2.16(s,3h),2.45-2.49(t,j＝7.2hz,2h),2.57-2.60(t,j＝7.6hz,2h),3.79(s,3h),6.71-6.74(m,1h),6.88-6.90(d,j＝8.8hz,1h),6.92-6.93(d,j＝3.2hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):23.4,24.6,28.7,29.5,30.1,34.6,34.7,43.5,55.6,110.6,111.8,124.6,142.3,142.7,156.8,172.6,209.0.

實施例44、環(huán)己-2-烯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2041-1)

制備方法與實施例3相同。環(huán)己-2-烯甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率57％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.31(s,9h),2.78-2.86(m,4h),3.36-3.41(m,1h),3.79(s,3h),5.72(s,2h),6.71-6.74(m,1h),6.88-6.90(d,j＝8.8hz,1h),6.92-6.93(d,j＝3.2hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.1,34.6,36.2,42.4,55.6,110.6,113.8,124.5,129.1,142.3,143.1,156.8,175.1.

實施例45、2,4,5-三氟苯乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2041-2)

制備方法與實施例3相同。2,4,5-三氟苯乙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率77％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.27(s,9h),3.78(s,3h),3.87(s,2h),6.71-6.74(m,1h),6.88-6.91(m,2h),6.95-7.01(m,1h),7.19-7.25(m,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):29.8,34.4,55.4,105.4,105.6,105.7,105.9,110.5,113.8,119.1,119.3,124.2,142.2,142.5,157.0,168.7.

實施例46、2-溴-5-碘苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2041-3)

制備方法與實施例3相同。2-溴-5-碘苯甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率87％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.34(s,9h),3.82(s,3h),6.78-6.80 (m,1h),6.97-6.98(d,j＝2.8hz,1h),7.05-7.07(d,j＝8.8hz,1h),7.45-7.47(d,j＝8.4hz,1h),7.69-7.71(dd,j1＝8.4hz,j2＝2.0hz,1h),8.28(d,j＝2.0hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.4,34.8,55.7,92.1,110.9,114.2,122.4,124.5,133.7,136.5,140.3,142.1,142.8,157.4,164.1.

實施例47、2-氟-4-硝基苯甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2041-4)

制備方法與實施例3相同。2-氟-4-硝基苯甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率85％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),3.83(s,3h),6.78-6.81(dd,j1＝8.4hz,j2＝3.2hz,1h),6.98-6.99(d,j＝3.2hz,1h),7.02-7.05(d,j＝8.4hz,1h),8.09-8.12(dd,j1＝9.6hz,j2＝2.0hz,1h),8.15-8.18(m,1h),8.30-8.34(m,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.0,34.5,55.5,110.7,113.1,113.4,114.0,119.1,123.9,124.0,124.3,133.7,142.2,142.4,151.3,157.3,160.3,162.0,163.0.

實施例48、n-叔丁氧羰基哌啶-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2041-5)

制備方法與實施例3相同。n-叔丁氧羰基哌啶-3-甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率65％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),1.47(s,9h),1.50-1.67(m,2h),1.76-1.82(m,2h),2.22-2.26(m,1h),2.67-2.73(m,1h),2.82-2.89(m,1h),3.10-3.16(m,1h),3.79(s,3h),3.98-4.01(m,1h),4.33(brs,1h),6.71-6.74(dd,j1＝8.8hz,j2＝2.8hz,1h),6.83-6.85(d,j＝8.8hz,1h),6.91-6.92(d,j＝2.8hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):14.1,24.2,27.2,28.3,29.4,30.1,34.5,41.8,55.4,79.8,110.5,113.7,124.4,142.2,142.6,154.6,156.8,172.4.

實施例49、對苯二乙酸二(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2042)

制備方法與實施例3相同。對苯二乙酸(5mmol)與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(10mmol)縮合反應(yīng)制備，收率65％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.23(s,18h),3.74(s,6h),6.67–6.71(dd,j1＝8.8hz,j2＝3.2hz,2h),6.83-6.86(d,j＝8.8hz,2h),6.89-6.90(d,j＝3.2hz,2h),7.39(s,4h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.1,34.6,41.9,55.6,110.7,114.0,124.6,130.1,132.5,142.5,142.9,157.1,170.5.

實施例50、4-苯甲酰丁酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2043-1)

制備方法與實施例3相同。4-苯甲酰丁酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率75％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),2.20-2.23(m,2h),2.71-2.75(t,j＝8.8hz,2h),3.14-3.17(t,j＝7.0hz,2h),3.79(s,3h),6.72-6.75(m,1h),6.91-6.93(m,2h),7.44-7.49(m,2h),7.55-7.59(m,1h),7.97-7.99(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):19.4,30.2,34.1,34.7,37.6,55.7,110.7,114.0,124.7,128.2,128.9,133.4,136.9,142.4,142.8,157.0,172.5,199.6.

實施例51、3,5-二甲氧基苯丙烯酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2043-2)

制備方法與實施例3相同。3,5-二甲氧基苯丙烯酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率60％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.35(s,9h),3.81(s,3h),6.53-6.54(t,j＝2.3hz,1h),6.61-6.65(d,j＝16hz,1h),6.73-6.78(m,3h),6.95-7.00(m, 2h),7.77-7.81(d,j＝16hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.3,34.8,55.7,103.1,106.4,110.7,114.0,118.4,124.8,136.2,142.7,146.8,157.1,161.3,166.2.

實施例52、4-氯吡啶-2-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2043-3)

制備方法與實施例3相同。4-氯吡啶-2-甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率65％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.36(s,9h),3.82(s,3h),6.78-6.81(dd,j1＝9.2hz,j2＝3.0hz,1h),6.98-6.99(d,j＝3.0hz,1h),7.04-7.06(d,j＝9.2hz,1h),7.56-7.58(dd,j1＝5.2hz,j2＝2.3hz,1h),8.27-8.28(m,1h),8.75-8.76(d,j＝5.2hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.4,34.9,55.7,110.9,114.2,124.6,126.4,127.7,142.8,145.8,149.3,151.3,157.4,163.7.

實施例53、n-甲基哌啶-3-甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2043-4)

制備方法與實施例3相同。n-甲基哌啶-3-甲酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率60％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.34(s,9h),1.51-1.61(m,1h),1.65-1.74(m,1h),1.80-1.85(m,1h),1.99-2.05(m,1h),2.13-2.18(m,1h),2.24-2.31(m,1h),2.34(s,3h),2.79-2.92(m,2h),3.14-3.16(brd,1h),3.78(s,3h),6.70-6.74(dd,j1＝8.4hz,j2＝3.2hz,1h),6.84-6.86(d,j＝8.4hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):24.6,26.3,29.9,34.5,42.3,46.4,55.4,55.5,57.1,110.5,113.7,124.4,142.2,142.6,156.7,172.9.

實施例54、n-叔丁氧羰基-6-氨基戊酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2043-5)

制備方法與實施例3相同。n-叔丁氧羰基-6-氨基戊酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率60％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,9h),1.45(s,9h),1.57-1.65(m,2h),1.75-1.83(m,2h),2.59(t,j＝7.6hz,2h),3.16-3.19(t,j＝6.8hz,2h),3.79(s,3h),6.71-6.74(dd,j1＝8.8hz,j2＝2.8hz,1h),6.87-6.89(d,j＝8.8hz,1h),6.92-6.93(d,j＝2.8hz,1h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):22.1,28.6,29.8,30.2,34.6,34.8,40.4,55.7,110.7,114.0,124.7,142.5,142.9,156.2,157.0,172.6.

實施例55、3,3,3-三氟丙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2044-1)

制備方法與實施例3相同。3,3,3-三氟丙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率60％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.33(s,9h),3.41-3.48(q,j＝19.9hz,2h),3.79(s,3h),6.72-6.75(m,1h),6.91-6.94(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.2,34.8,40.3,55.7,110.9,114.2,124.4,142.5,157.5,163.5.

實施例56、嗎啉-4-基乙酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2044-2)

制備方法與實施例3相同。嗎啉-4-基乙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率68％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:1.30(s,9h),2.65-2.68(t,j＝4.4hz,4h),3.47(s,2h),3.75-3.79(m,7h),6.70-6.73(m,1h),6.89-6.92(m,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.3,34.7,53.5,55.7,60.2,67.0,110.7,114.1,124.6,142.4,157.1,169.2.

實施例57、3-(3,5-二叔丁基-4-羥基-苯基)丙酸-(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯 (xh2045-2)

制備方法與實施例3相同。3-(3,5-二叔丁基-4-羥基-苯基)丙酸與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚縮合反應(yīng)制備，收率68％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.29(s,9h),1.45(s,18h),2.86-2.90(m,2h),2.99-3.03(m,2h),3.78(s,3h),5.10(brs,1h),6.69-6.72(m,1h),6.80-6.83(d,j＝8.8hz,1h),6.90-6.91(d,j＝3.0hz,1h),7.06(s,2h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):30.0,30.2,30.8,34.2,34.5,37.0,55.4,110.4,113.7,124.5,124.9,130.7,135.9,142.2,142.7,152.3,156.7,172.1.

實施例58、己二酸二(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(xh2046-3)

制備方法與實施例3相同。己二酸(5mmol)與2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(10mmol)縮合反應(yīng)制備，收率65％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ(ppm):1.32(s,18h),1.89-1.93(m,4h),2.64-2.68(m,4h),3.79(s,6h),6.71-6.74(m,2h),6.89-6.93(m,4h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ(ppm):24.3,30.1,34.6,55.6,110.6,113.9,124.6,142.4,142.7,156.9,172.3.

實施例59、碳酸-(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚氧基)甲酯異丙酯(xjp2005)

2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(5mmol)溶于四氫呋喃(15ml)，再滴加到氫化鈉(5.5mmol)/四氫呋喃(10ml)的溶液中，加畢，攪拌30分鐘。滴加氯甲基碳酸異丙酯(5mmol)，加畢，室溫反應(yīng)24小時。柱層析純化(乙酸乙酯:石油醚＝1:9)，得到無色油狀物，收率75％。¹h-nmr(cdcl3)δ(ppm):(ppm)1.32(s,9h),1.35(d,j＝6.4hz,6h),3.78(s,3h),4.31(m,1h),5.26(s,2h),6.71-6.74(m,1h),6.90-6.91(d,j＝3.0hz,1h),6.96-6.97(d,j＝8.6hz,1h).

實施例60、n-(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚氧羰基)甘氨酸乙酯(xjp2006)

甘氨酸乙酯(5.10mmol)溶于100ml二氯甲烷中，加入的飽和碳酸氫鈉溶液，冰水浴攪拌5min。然后加入三光氣(530mg,1.786mmol)，劇烈攪拌15min。二氯甲烷萃取四次，無水na2so4干燥1h，減壓濃縮蒸干，得到d-天冬氨酸芐酯異氰酸酯(1-1)，備用。將2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(1.28mmol)加入到100ml無水四氫呋喃中，加入三乙胺(386mg,3.83mmol)，室溫攪拌30min，將上述制備的異氰酸酯(1-1)用2ml二氯甲烷溶解，加入到反應(yīng)液中，升溫至40℃，攪拌過夜。結(jié)束反應(yīng)，直接加入硅膠蒸干，經(jīng)硅膠柱層析純化(乙酸乙酯:石油醚＝1:3)，得到，收率56.8％。¹h-nmr(cdcl3)δ(ppm):(ppm)1.28-1.32(t,j＝7.0hz,3h),1.34(s,9h),3.79(s,3h),4.06-4.08(d,j＝5.3hz,2h),4.22-4.28(q,j＝7.0hz,2h),5.53-5.56(t,j＝5.3hz,1h),6.71-6.74(m,1h),6.90-6.91(d,j＝3.0hz,1h),6.96-6.97(d,j＝8.6hz,1h).

實施例61、2-(2-叔丁基-4-甲氧基苯氧基)乙酸乙酯(xjp1005)

2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(5mmol)溶于四氫呋喃(15ml)，再滴加到氫化鈉(5.5mmol)/四氫呋喃(10ml)的溶液中，加畢，攪拌30分鐘。滴加溴乙酸乙酯(5mmol)，加畢，室溫反應(yīng)24小時。柱層析純化(乙酸乙酯:石油醚＝1:9)，得到無色油狀物，收率75％。¹h-nmr(cdcl3)δ:(ppm)1.28-1.32(t,j＝7.2hz,3h),1.40(s,9h),3.77(s,3h), 4.24-4.30(q,j＝7.2hz,2h),4.59(s,2h),6.65-6.66(m,2h),6.88-6.91(m,1h).

實施例62、(n-芐基)氨基甲酸-(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯制備(zxy1025-2)

2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(0.9g，5mmol)溶于二氯甲烷(15ml)，加入三乙胺(0.1ml)，滴加芐基異氰酸酯(5mmol)/二氯甲烷溶液(10ml)，加畢，攪拌反應(yīng)4-10小時，水洗，柱層析得到白色固體，收率85％。¹h-nmr(cdcl3)δ(ppm)1.32(s,3h),3.78(s,3h),4.47-4.48(d,j＝2.2hz,2h),5.32-5.34(brt,j＝2.2hz,1h),6.71-6.74(m,1h),6.89-6.90(d,j＝3.2hz,1h),6.98-7.01(d,j＝8.4hz,1h),7.30-7.38(m,5h).

實施例63、(n-正丁基)氨基甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯制備(zxy1025-3)

制備方法同實施例62，由2-叔丁基-4-甲氧基苯酚與丁基異氰酸酯反應(yīng)制備，收率90％。¹h-nmr(cdcl3)δ(ppm)0.92-0.95(t,j＝8.0hz,3h),1.32-1.41(m,11h),1.51-1.58(m,2h),3.25-3.30(q,j＝6.8hz,2h),3.78(s,3h),4.99(brt,1h),6.70-6.73(m,1h),6.88-6.89(d,j＝3.2hz,1h),6.94-6.97(d,j＝8.8hz,1h).

實施例64、(n-異丙基)氨基甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(zxy1025-4)

制備方法同實施例62，收率85％。¹h-nmr(cdcl3)δ(ppm)1.21-1.23(d,j＝6.4hz,6h),1.32(s,9h),3.78(s,3h),3.88-3.93(m,1h),4.82-4.84(brd,j＝8.0hz,1h),6.70-6.73(m,1h),6.88-6.89(d,j＝3.2hz,1h),6.94-6.97(d,j＝8.8hz,1h).

實施例65、(n-環(huán)己基)氨基甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(zxy1025-5)

制備方法同實施例62，收率87％。¹h-nmr(cdcl3)δ(ppm)1.13-1.25(m,2h),1.32-1.42(m,12h),1.60-1.64(m,1h),1.72-1.75(m,2h),1.99-2.03(m,2h),3.54-3.61(m,1h),3.78(s,3h),4.87-4.89(d,j＝8.4hz,1h),6.70-6.73(m,1h),6.88-6.89(d,j＝2.0hz,1h),6.95-6.97(d,j＝8.4hz,1h).

實施例66、(n-苯乙基)氨基甲酸(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚)酯(zxy1025-6)

制備方法同實施例62，收率87％。¹h-nmr(cdcl3)δ(ppm)1.30(s,9h),2.87-2.90(t,j＝6.4hz,2h),3.52-3.57(m,2h),3.77(s,3h),5.03(m,1h),6.69-6.72(m,1h),6.88-6.94(m,2h),7.22-7.25(m,3h),7.30-7.34(m,2h).

實施例67、特戊酰(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚氧基)甲基酯(xjp1041)

2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(5mmol)溶于四氫呋喃(15ml)，再滴加到氫化鈉(5.5mmol)/四氫呋喃(10ml)的溶液中，加畢，攪拌30分鐘。滴加特戊酰氯甲酯(5mmol)，加畢，室溫反應(yīng)24小時。柱層析純化(乙酸乙酯:石油醚＝1:9)，得到類白色固體，收率75％。¹h-nmr(cdcl3)δ(ppm)1.24(s,9h),1.32(s,9h),3.78(s,3h),5.30(s,2h),6.69-6.72(m,1h),6.88-6.94(m,2h).

實施例69、化合物體外釋放評價

1、分析條件

流動相：梯度洗脫；a：水；b：甲醇；

色譜柱：capcelpakmfph-1；

檢測儀器：tq-s；離子源：apci；離子檢測模式：mrm；

2、目標(biāo)化合物在pbs緩沖溶液(ph＝7.4)中的釋放試驗

將一定質(zhì)量的化合物溶于pbs緩沖液中，渦旋混勻，按照每份0.3ml等分出10等份，于37℃孵育，在不同的時間(0h、1h、2h、6h、12h、24h和48h等)取樣，hplc檢測。以0h時目標(biāo)化合物峰面積為標(biāo)準(zhǔn)，其它時間點化合物峰面積與標(biāo)準(zhǔn)峰面積相比，計算藥物釋放度。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)所有實施例化合物在水溶液中均保持穩(wěn)定，未見bha釋放。

3、目標(biāo)化合物在人血漿中釋放實驗

用dmso溶解目標(biāo)化合物，然后用0.9％的生理鹽水稀釋至5μg/ml。分裝后的人空白血漿在-70℃保存，使用時在4℃冰箱解凍。取空白血漿20μl，加入20μl上述配置的目標(biāo)化合物溶液，渦旋15s，置37℃水浴，分別于5min，20min，40min，1.5h，3h，6h，9h時間點取樣，每個時間點平行三份樣品，再向不同水浴時間點的樣本中加入100μl甲醇，沉淀蛋白，渦旋1min，13000r·min-1低溫離心15min，取上清進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為10μl。

結(jié)果顯示所有化合物均能釋放bha，但是釋放速率和持續(xù)時間不同，如圖3所示。

實施例69、小鼠體內(nèi)藥物代謝實驗

1、實驗方法

180-200g大鼠，灌胃給藥；給藥劑量：100mg/kg；給藥溶液：2.5mg/ml(溶酶是玉米油)；給藥前禁食12h，自由飲水。取不同采血點的大鼠血漿20μl，加入20μl的去離子水，然后加入100μl甲醇，渦旋1min，13000rpm轉(zhuǎn)速下離心15min，取10μl進(jìn)樣，進(jìn)行l(wèi)c-ms/ms分析。共11個取血點:0min、5min、20min、40min、1h、1.5h、2h、4h、8h、12h、24h。

2、分析測試條件

流動相：a：水；b：甲醇，(二元梯度)；

洗脫條件如表1中所示：

表1洗脫條件

離子源：apci；離子檢測模式：mrm.

3、代表性化合物實驗結(jié)果

根據(jù)血漿bha釋放實驗結(jié)果，本發(fā)明選取代謝性質(zhì)量好的化合物進(jìn)行體內(nèi)代謝實驗，結(jié)果顯示本發(fā)明涉及的前藥可以在體內(nèi)持續(xù)釋放bha(圖4)，血藥濃度可以平穩(wěn)維持12小時。

實施例70、細(xì)胞毒活性測試

以mts方法檢測化合物對永生化的小鼠骨髓巨噬細(xì)胞(ibmm)、小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(nih3t3)和人源胚胎腎細(xì)胞(hek293)細(xì)胞的毒性實驗，結(jié)果顯示實施例化合物細(xì)胞毒性均較輕微，ic50均在20毫摩爾以上，尤其對巨噬細(xì)胞毒性較小，調(diào)控巨噬細(xì)胞分化的藥物安全窗較大(si>1000)，亦可以證明本實施例化合物的抗腫瘤作用與細(xì)胞毒無關(guān)系，與現(xiàn)有的抗腫瘤藥的機(jī)制完全不同。結(jié)果見下表2。

表2部分化合物的細(xì)胞毒性試驗結(jié)果

實施例71、小鼠急性毒性試驗

1、實驗方法

采用上下法測定部分化合物的急性毒性。20～22g小鼠，灌胃給藥；溶酶為玉米油，給藥前禁食12h，自由飲水。

2、實驗結(jié)果

結(jié)果如表3中所示，由表3中的數(shù)據(jù)可知，與細(xì)胞毒性試驗結(jié)果相一致，本發(fā)明制備的代表性化合物xh2006,xh2010,xh2011,xh2044-2的急性毒性均小于2-叔丁基-4-甲氧基苯酚氧基(bha)，顯示了更優(yōu)的安全性。

表3部分化合物的小鼠急性毒性試驗結(jié)果