本發(fā)明涉及模擬酶超氧化物歧化酶(SOD)的金屬絡(luò)合物作為食品試劑的應(yīng)用以及它們作為化妝品的應(yīng)用，所述金屬絡(luò)合物記述在專(zhuān)利ES2355784中，并且由大環(huán)聚氮雜環(huán)吡啶烷化合物獲得。技術(shù)狀況抗氧化劑在皮膚保護(hù)和修復(fù)機(jī)制中起重要作用。它們可以作為食品或作為食品補(bǔ)充物消費(fèi)，或可以作為局部制劑涂覆在皮膚上。酶超氧化物歧化酶(SOD)屬于最重要的一組天然抗氧化物質(zhì)?，F(xiàn)有技術(shù)反映SOD在機(jī)體中行使重要功能，諸如，例如，針對(duì)細(xì)胞氧化應(yīng)激進(jìn)行保護(hù)和針對(duì)炎性或變性過(guò)程進(jìn)行保護(hù)。由SOD酶催化的超氧化物自由基(O2-)成為氧和過(guò)氧化氫(H2O2)的歧化反應(yīng)使得該酶在對(duì)暴露于氧的大部分細(xì)胞的抗氧化防御中是非常重要的。因此，SOD保護(hù)細(xì)胞免于O2-自由基的有害反應(yīng)。當(dāng)SOD活性失效時(shí)，氧化應(yīng)激增加，導(dǎo)致人體發(fā)展多種病癥或疾病，諸如，例如，炎性過(guò)程、致癌過(guò)程或變性過(guò)程。盡管還沒(méi)有詳細(xì)知曉這些物質(zhì)的潛在作用機(jī)制，但是，存在充分的關(guān)于抗氧化劑的分布、活性和調(diào)控的研究，以使得從營(yíng)養(yǎng)的觀點(diǎn)研發(fā)作用策略和涉及新抗氧化制劑的化妝品。這些新的項(xiàng)目包括減少由UV光誘發(fā)的癌癥危險(xiǎn)，由光作用引起的衰老，預(yù)防和治療引起皮膚脫皮的疾病以及維持良好的健康和改善衰老作用。一些植物天然產(chǎn)生SOD，諸如花椰菜、小麥和大麥，但是，當(dāng)人體消化SOD時(shí)，SOD被胃酸和腸道酶快速破壞，因此，其幾乎不能到達(dá)血流中。此外，人體在大約10歲的年齡具有SOD產(chǎn)生的最大峰。通過(guò)消費(fèi)適量的適當(dāng)前體分子的補(bǔ)充物，可能升高血液SOD水平。還已知，小麥新芽是這些前體的豐富來(lái)源。然而，仍然存在相同的消化過(guò)程導(dǎo)致的SOD破壞的問(wèn)題。因此，合成模擬SOD酶的化合物對(duì)于補(bǔ)償內(nèi)源性SOD活性的可能的缺乏或不存在是必要的，并且因此不僅能夠治療具有缺少或缺乏該酶活性的常見(jiàn)病因的多種病理或疾病，而且能夠利用它們作為食品或化妝品試劑的能力。理想地，合成的模擬化合物必須具有低毒性，并且還能夠以最低的可能的化合物濃度進(jìn)行歧化反應(yīng)。使用較低濃度或劑量的SOD模擬物將減少治療成本以及與副作用和免疫原性的發(fā)展相關(guān)的危險(xiǎn)。已知在美容產(chǎn)品中使用SOD以減少皮膚中自由基的傷害，例如，減少由于放療引起的纖維化。主要的專(zhuān)利ES2355784已經(jīng)提到與該作用相關(guān)的文獻(xiàn)目錄。最近也與美容效果相關(guān)的研究是CampanaF.,ZervoudisS.等,2004.Topicalsuperoxidedismutasereducespost-irradiationbreastcancerfibrosis(局部超氧化物歧化酶減輕輻射后乳腺癌纖維化).JCellMolMed.Jan-Mar；8(1):109-16?？赡芙忉孲OD作為能夠逆轉(zhuǎn)纖維化的試劑的作用的機(jī)制是肌成纖維細(xì)胞向成纖維細(xì)胞的可能的回復(fù)。用作化妝品的SOD模擬物的實(shí)例是lipocromano-6(EP2113242)或?qū)＠暾?qǐng)US20130287696中所述的那種，專(zhuān)利申請(qǐng)US20130287696公開(kāi)了通過(guò)使用有效量的聚乙二醇化的SOD模擬物，任選地與第二保存添加劑組合，防止食物變質(zhì)和氧化的方法。該專(zhuān)利的SOD模擬物的具體實(shí)例顯示如下：還已知，口服服用SOD，以去除皺紋或重建組織，但是，沒(méi)有證據(jù)表明這些口服產(chǎn)品被機(jī)體吸收。在現(xiàn)有技術(shù)中沒(méi)有找到具體公開(kāi)主要專(zhuān)利ES2355784中開(kāi)發(fā)的金屬絡(luò)合物的文獻(xiàn)。因此，它們作為化妝品或作為食品試劑的應(yīng)用都沒(méi)有被公開(kāi)。主要專(zhuān)利中所述的金屬絡(luò)合物具有低毒性、低IC50值，并且不引起免疫原性的發(fā)展。這些金屬絡(luò)合物的低IC50值具有重要的含義，原因在于該值越低，引起需要的模仿效應(yīng)所需要的化合物的量越低。因此，使用較低量的絡(luò)合物實(shí)現(xiàn)歧化反應(yīng)將極大地減少副作用。此外，由于它們?cè)谘獫{中的穩(wěn)定性，前述金屬絡(luò)合物具有長(zhǎng)半衰期，并且它們?cè)谑┯煤蟛槐憩F(xiàn)出組織分布的問(wèn)題。發(fā)明描述本發(fā)明涉及模擬SOD的金屬絡(luò)合物，作為化妝品或食品試劑的應(yīng)用，所述金屬絡(luò)合物由具有連接到分子中心結(jié)構(gòu)上的雜環(huán)喹啉的中間大環(huán)聚氮雜環(huán)吡啶烷化合物獲得。術(shù)語(yǔ)“食品試劑”在本文件中涉及下述備選物中的任一種：食品添加劑、功能食品、膳食補(bǔ)充物或功能飲料。在本文件中，金屬絡(luò)合物涉及式1的中間化合物與至少一個(gè)金屬離子(優(yōu)選Cu(II)、Fe(II)或Mn(II))的任何分子連接，并且最優(yōu)選地，其中所述金屬離子是Mn(II)。在本發(fā)明中，SOD模擬絡(luò)合物涉及能夠模仿、補(bǔ)充并最終改善內(nèi)源性SOD酶的活性和/或功能的金屬絡(luò)合物，其作為化妝品、個(gè)人衛(wèi)生用品或食品試劑。ES2355784中所述的金屬絡(luò)合物可以包括在制劑中用于食品或化妝品應(yīng)用，并且按照現(xiàn)有技術(shù)中的已知技術(shù)以多種方式施用，諸如皮內(nèi)注射或通過(guò)膠囊、糖衣丸或片劑口服。作為用于化妝品的制劑或個(gè)人衛(wèi)生用品，它們可以形成除臭劑、止汗劑、頭發(fā)和皮膚護(hù)理產(chǎn)品的一部分，并且可以是，例如，保濕劑、清潔產(chǎn)品或二者的組合。用于化妝品的制劑或個(gè)人衛(wèi)生產(chǎn)品還可以以粉劑或固體條的形式，或其他固體形式，諸如，例如，乳劑、奶液、洗液、乳液、糊劑、液體、凝膠、氣霧劑、固體形式、膠狀物、油膏、面膜、分散液、混懸液、香波、泡沫劑、噴霧劑或無(wú)水液體。類(lèi)似地，用于化妝品應(yīng)用的固體形式可以在存在需要的賦形劑的條件下制備，所述賦形劑選自包括但不限于下述的組：甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、硅膠、滑石、硬脂酸鎂、氧化鈦、染料和抗氧化劑。因此，本發(fā)明更具體地涉及具有至少一個(gè)金屬離子的式1的模擬超氧化物歧化酶的金屬絡(luò)合物作為化妝品或食品試劑的應(yīng)用。所述金屬離子優(yōu)選選自Cu(II)、Fe(II)和Mn(II)，并且更優(yōu)選是Mn(II)。本發(fā)明還涉及具有至少一個(gè)金屬離子的式1的模擬SOD的金屬絡(luò)合物用于制備食品試劑的應(yīng)用(所述食品試劑可以是食品添加劑、功能食品、膳食補(bǔ)充劑或功能飲料)，或用于制備個(gè)人衛(wèi)生產(chǎn)品或化妝品制劑的應(yīng)用。所述金屬離子優(yōu)選選自Cu(II)、Fe(II)和Mn(II)，并且更優(yōu)選是Mn(II)。另外，本發(fā)明還涉及包含至少一種上文定義的具有至少一種金屬離子的式1的模擬SOD的金屬絡(luò)合物的化妝品制劑或個(gè)人衛(wèi)生產(chǎn)品。該化妝品制劑或個(gè)人衛(wèi)生產(chǎn)品可以配制成乳劑、糊劑、奶液、凝膠、洗液、油膏、混懸液、分散液、粉劑、香波、泡沫劑、噴霧劑或固體條。此外，本發(fā)明涉及包含至少上文定義的具有至少一種金屬離子的式1的模擬SOD的金屬絡(luò)合物的食品添加劑、膳食補(bǔ)充物、功能食品或功能飲料。由于它們具有降低的毒性和低IC50值，本發(fā)明的金屬絡(luò)合物克服了現(xiàn)有技術(shù)中列出的問(wèn)題。本發(fā)明的金屬絡(luò)合物的低IC50具有重要的含義，原因在于，該值越低，引起需要的模仿效應(yīng)所需要的絡(luò)合物的量越小。因此，使用較少量的絡(luò)合物實(shí)現(xiàn)歧化反應(yīng)極大地減少了副作用。另外，本發(fā)明的金屬絡(luò)合物具有高穩(wěn)定性(如主要專(zhuān)利ES2355784中所示的)和半衰期，避免了施用后在組織中的分布問(wèn)題以及免疫原性的發(fā)展。本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案涉及模擬化合物的應(yīng)用，其中結(jié)合在式1的化合物上的金屬離子選自Cu(II)、Fe(II)和Mn(II)。附圖描述圖1:將8期青鳉魚(yú)(Medaka)胚胎與氧化劑H2O2和化合物Pytren-4Q+Mn溫育72小時(shí)后獲得的結(jié)果的圖示，詳見(jiàn)實(shí)施例。圖2:將8期青鳉魚(yú)(Medaka)胚胎與氧化劑H2O2和化合物Pytren-4Q+Mn溫育14天后獲得的結(jié)果的圖示，如實(shí)施例所述。實(shí)施例1.材料和方法1.1青鳉魚(yú)胚胎將個(gè)體成體(品種Cab,CarolinaBiologicalSupply,(NorthCarolina))放在具有連續(xù)的水流的27℃的水箱中，并且有14小時(shí)光和10小時(shí)黑暗的光周期。每天用鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體(Artemianauplii)喂魚(yú)兩次，鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體每天從商購(gòu)的囊孢孵化，并且每天用干食物喂一次。每天收集受精卵，保存在Yamamoto溶液(0.13MNaCl,2.7mMKCl,1.8mMCaCl2和0.24mMNaHCO3,pH7.3)(YamamotoT.,Medaka(killifish):Biologyandstrains.1975,Tokyo:KeigakuPub.Co)中，并且在培養(yǎng)箱中在26℃保持。按照Iwamatsu的描述(IwamatsuT.,StagesofnormaldevelopmentinthemedakaOryziaslatipes.MechDev.2004,Vol.121,第605-618頁(yè))確定胚胎階段。1.2使用青鳉魚(yú)胚胎進(jìn)行存活分析將8期青鳉魚(yú)胚胎(早期桑葚胚階段，Iwamatsu,2004)分成2個(gè)60個(gè)胚胎的組和一個(gè)30個(gè)胚胎的組。將一個(gè)60個(gè)胚胎的組用以250μM的濃度溶解在Yamamoto溶液中的Pytren-4Q+Mn處理4天。將另一個(gè)60個(gè)胚胎的組在Yamamoto溶液中溫育4天。該組用作陰性對(duì)照。將30個(gè)胚胎的組，即，陽(yáng)性對(duì)照組，用濃度為100μM的維生素C(抗氧化性化合物)的Yamamoto溶液處理4天。溫育4天后，將胚胎用Yamamoto溶液清洗。將60個(gè)胚胎的組逐一分成兩個(gè)30個(gè)胚胎的組。將所有組的胚胎單獨(dú)放置在96孔板的孔中，每個(gè)孔包含200μl含有不同濃度的H2O2的Yamamoto溶液，濃度取決于觀察死亡率的溫育時(shí)間的延長(zhǎng)。當(dāng)在放置到H2O2Yamamoto溶液中后72小時(shí)觀察死亡率時(shí)，所用的H2O2濃度為22.5mM。將每個(gè)60個(gè)胚胎的原始組的三十個(gè)胚胎和用維生素C處理的組的30個(gè)胚胎用濃度為22.5mM的H2O2Yamamoto溶液處理。當(dāng)在放置到H2O2Yamamoto溶液中后14天觀察死亡率時(shí)，所用的H2O2濃度為7.5mM。將每個(gè)60個(gè)胚胎的原始組的三十個(gè)胚胎用濃度為7.5mM的H2O2Yamamoto溶液處理。該實(shí)驗(yàn)在72小時(shí)的檢測(cè)中共重復(fù)6次，在14天的檢測(cè)中共重復(fù)3次。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析為了評(píng)估存活差異，在比較這3個(gè)檢測(cè)組時(shí)，使用單向方差分析統(tǒng)計(jì)學(xué)檢測(cè)(ANOVA)確定是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。然后，使用Tukey′spost-hoc檢驗(yàn)確定這3個(gè)組中哪一組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。當(dāng)比較2個(gè)檢測(cè)組時(shí)，使用統(tǒng)計(jì)學(xué)斯氏(Student’s)t檢驗(yàn)。在所有情形中，將顯著性水平設(shè)為p<0.05。所有這些分析使用GraphPadPrism5.0a程序進(jìn)行。2.結(jié)果使用對(duì)胚胎無(wú)毒的250μM濃度的化合物Pytren-4Q+Mn進(jìn)行檢測(cè)，并且在兩個(gè)不同的測(cè)定中測(cè)量它們的抗氧化能力。第一個(gè)檢測(cè)測(cè)量在用22.5μMH2O2溫育72小時(shí)后的死亡率(顯示在圖1中)。第二個(gè)檢測(cè)測(cè)量在用22.5μMH2O2溫育14天后的死亡率(顯示在圖2中)。兩個(gè)檢測(cè)表明響應(yīng)由H2O2引起的氧化應(yīng)激的死亡率的顯著下降。在72小時(shí)進(jìn)行的檢測(cè)表明Pytren-4Q+Mn和維生素C二者都降低死亡率，在對(duì)照中為48.44±4.40％，在用Pytren-4Q+Mn處理的胚胎中為24.96±7.11％，并且在用維生素C處理的胚胎中為25.99±5.25％(表1)。因此，本發(fā)明的化合物Pytren-4Q+Mn在所檢測(cè)的濃度發(fā)揮與維生素C相似的抗氧化活性。表1.在溫育72小時(shí)的本發(fā)明的實(shí)施例檢測(cè)中獲得的數(shù)據(jù)。72小時(shí)對(duì)照Pytren-4Q+Mn維生素C重復(fù)162.55040.63重復(fù)256.2543.7543.75重復(fù)35012.915.63重復(fù)443.7515.6314.3重復(fù)546.918.7520.8重復(fù)631.258.720.8平均值48.4424.9625.99標(biāo)準(zhǔn)偏差10.7817.4112.87標(biāo)準(zhǔn)誤差4.407.115.25在14天進(jìn)行的檢測(cè)表明Pytren-4Q+Mn降低死亡率，在對(duì)照中為51.27±3.12％，在用Pytren-4Q+Mn處理的胚胎中為41.47±1.52％(表2)。主要的差異歸因于這樣的事實(shí)：在14天的檢測(cè)盡管更久，但是其更靈敏，原因在于可以在以后檢測(cè)到小的致死性作用。表2.在溫育14天的本發(fā)明的實(shí)施例檢測(cè)中獲得的數(shù)據(jù)。14天對(duì)照Pytren-4Q+Mn重復(fù)146.939.3重復(fù)257.340.7重復(fù)349.644.4平均值51.2741.47標(biāo)準(zhǔn)偏差5.402.64標(biāo)準(zhǔn)誤差3.121.52獲得的數(shù)據(jù)表明化合物Pytren-4Q+Mn在250μM的濃度具有與100μM的維生素C相似的抗氧化特性。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3