0030] 用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵時,按照公知的培養(yǎng)條件進(jìn)行即可,例如,可 W將用水調(diào)節(jié)成乳成分為1~20質(zhì)量%的物質(zhì)作為培養(yǎng)基,向其中接種乳酸菌0.0 l質(zhì) 量%~10質(zhì)量%,優(yōu)選為0. 1質(zhì)量%~5質(zhì)量%,在20°C~45°C、優(yōu)選37°C~42°C下培養(yǎng) 1小時~48小時,優(yōu)選培養(yǎng)4小時~30小時。需要說明的是,作為此時的其他的培養(yǎng)條件, 可列舉出:靜置、攬拌、振蕩、通氣等,也可W從它們中適宜選擇適合于培養(yǎng)的方法而進(jìn)行。
[0031] 另外,W向乳酸菌的培養(yǎng)中補(bǔ)充營養(yǎng)源為目的,也可W另外向含有乳成分的培養(yǎng) 基中配合通常使用的成分。作為運(yùn)樣的成分,可列舉出:酵母提取物;小球藻提取物;維生 素A、維生素B類、維生素C、維生素E等維生素類;包含各種膚類的蛋白分解物;氨基酸類; 巧、儀等的鹽類;聚山梨醇80等表面活性劑;油酸等脂肪酸;巧、儀、儘等金屬類。
[0032] 也可W對運(yùn)樣得到的乳酸菌發(fā)酵物(乳成分)實施公知的過濾、透析、沉淀、離屯、 分離等精制、分離處理;進(jìn)一步實施利用溶劑等的提取處理、加熱處理、冷凍干燥、濃縮干 固。
[0033] 對于本發(fā)明抑制劑,乳酸菌發(fā)酵物(乳成分)中,優(yōu)選為由用乳酸菌使含有乳成分 的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)得到的上清;特別優(yōu)選由用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而 成的物質(zhì)得到的上清的低分子級分、或者由用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物 質(zhì)得到的上清的高分子級分。
[0034] 由用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)得到的上清(W下,有時稱為 "乳酸菌發(fā)酵物(乳成分)上清")可W通過從如上述得到的乳酸菌發(fā)酵物(乳成分)中按 照離屯、分離、過濾等常規(guī)方法去除固體物質(zhì)來制造。
[0035] 另外,由用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)得到的上清的低分子級 分(W下,有時稱為"乳酸菌發(fā)酵物(乳成分)上清的低分子級分")是指上述乳酸菌發(fā)酵 物(乳成分)上清的分子量20000Da W下的級分。分子量20000Da W下的級分可W通過對 乳酸菌發(fā)酵物(乳成分)上清進(jìn)行超濾、凝膠過濾、透析等處理而采集。
[0036] 運(yùn)樣得到的乳酸菌發(fā)酵物(乳成分)上清的低分子級分的濃度W干燥固體成分計 為0. 05質(zhì)量%時,戊糖素生成抑制率為25% W上,優(yōu)選為26~40%。
[0037]另外,由用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)得到的上清的高分子級 分(W下,有時稱為"乳酸菌發(fā)酵物(乳成分)上清的高分子級分")是指上述乳酸菌發(fā)酵 物(乳成分)上清的分子量3500化W上的級分。分子量3500化W上的級分可W通過對乳 酸菌發(fā)酵物(乳成分)上清進(jìn)行超濾、凝膠過濾、透析等處理而采集。需要說明的是,在該 情況下去除固體物質(zhì)時,優(yōu)選將乳酸菌發(fā)酵物所包含的酪蛋白等蛋白質(zhì)預(yù)先用=氯乙酸、 乙醇等沉淀。通過事先運(yùn)樣做,乳酸菌發(fā)酵物上清的高分子級分中較多地包含多糖類。需 要說明的是,想要使用較多地包含多糖類的高分子級分時,用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng) 基發(fā)酵時,特別優(yōu)選在抑6~8的條件下、37~40°C下進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)基的抑的調(diào)節(jié)中可 W使用氨氧化鋼等。
[0038] 運(yùn)樣得到的乳酸菌發(fā)酵物(乳成分)上清的高分子級分的濃度W干燥固體成分計 為0. 05質(zhì)量%時,戊糖素生成抑制率為25% W上,優(yōu)選為35~60%。
[0039]另一方面,用乳酸菌使含有蘆苔的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)(W下,有時稱為"乳酸 菌發(fā)酵物(蘆苔)")如上所述,例如,可W通過用含有蘆苔的培養(yǎng)基培養(yǎng)乳酸菌而得到。
[0040] 培養(yǎng)基所含有的蘆苔是非洲原產(chǎn)的百合科植物的總稱,具有木立蘆苔、庫拉索蘆 苔等300種W上的品種。已知,該蘆苔除了大量含有黏蛋白、蘆苔甘露聚糖等多糖類之外, 還含有蘆苔素、蘆苔寧、蘆苔辛(aloecin)、蘆苔米嗦(alomicin)、蘆苔烏爾辛(aloeulcin) 等成分。本發(fā)明中使用的蘆苔只要是蘆苔類則沒有特別的限定,從入手的容易性、成本的觀 點(diǎn)等出發(fā),特別優(yōu)選使用木立蘆苔或庫拉索蘆苔。對于上述蘆苔的使用部位,沒有特別的限 定,除了葉、葉肉、芽、根之外,由于沒有纖維成分,也可W使用使后續(xù)的制造工序變得簡便 的前述部位的汁液、滴濾液、由其得到的各種成分等。
[0041] 然而,乳酸菌不能將上述蘆苔中的纖維成分、蛋白成分等同化,所W優(yōu)選按照常規(guī) 方法,在發(fā)酵處理前對蘆苔進(jìn)行纖維素酶處理、蛋白酶處理等分解處理等。通過進(jìn)行纖維素 酶處理,同化性提高,發(fā)酵進(jìn)行,乳酸菌發(fā)酵物中沒能同化的纖維素等不殘留而后續(xù)的制造 工序變得簡便。另外,通過進(jìn)行蛋白酶處理,在乳酸菌發(fā)酵物中蛋白成分等不殘留,因而不 產(chǎn)生渾濁,需要在發(fā)酵后進(jìn)行澄清化工序。進(jìn)一步,通過組合使用淀粉酶處理,乳酸菌的同 化性進(jìn)一步提高。酶分解處理中,優(yōu)選從纖維素酶、果膠酶等纖維質(zhì)分解酶(纖維素酶類); 酸性蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、無花果蛋白酶、渡蘿蛋白酶等蛋白酶; 膚酶、甘露聚糖酶等蛋白分解酶等(蛋白酶類);a-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶等淀粉分解酶 (淀粉酶類)中適宜選擇一種或兩種W上使用。另外,為了不有損乳酸菌發(fā)酵物的嗜好性W 及為了充分地同化蘆苔,優(yōu)選不向蘆苔中添加糖類。
[0042] 作為上述發(fā)酵中使用的乳酸菌,優(yōu)選為乳桿菌屬的乳酸菌,更優(yōu)選為植物乳桿菌。 需要說明的是,運(yùn)些乳酸菌可W使用一種或兩種W上。
[0043] 為了用乳酸菌使含有蘆苔的培養(yǎng)基發(fā)酵,按照公知的培養(yǎng)條件進(jìn)行即可,例如,向 將白利度度rix)調(diào)節(jié)為3. 0 W上、抑調(diào)節(jié)為4. 2 W下的蘆苔的提取物中接種乳酸菌0.0 l質(zhì) 量%~10質(zhì)量%、優(yōu)選為0.1質(zhì)量%~5質(zhì)量%,對其在20°C~40°C、優(yōu)選為25°C~40°C 下進(jìn)行6小時~96小時、優(yōu)選為24小時~96小時的培養(yǎng)。需要說明的是,作為此時的其 他的培養(yǎng)條件,可列舉出:靜置、攬拌、振蕩、通氣等,也可W從它們中適宜選擇適合于培養(yǎng) 的方法而進(jìn)行。
[0044] 需要說明的是,W向乳酸菌的培養(yǎng)中補(bǔ)充營養(yǎng)源為目的,也可W向含有蘆苔的培 養(yǎng)基中另外配合糖類W外的通常使用的成分。作為運(yùn)樣的成分,可列舉出:酵母提取物;小 球藻提取物;維生素A、維生素B類、維生素C、維生素E等維生素類;包含各種膚類的蛋白分 解物;氨基酸類;巧、儀等的鹽類;聚山梨醇80等表面活性劑;油酸等脂肪酸;巧、儀、儘等 金屬類。
[0045] 也可W對運(yùn)樣得到的乳酸菌發(fā)酵物(蘆苔)實施公知的過濾、透析、沉淀、離屯、分 離等精制、分離處理;進(jìn)一步實施利用溶劑等的提取處理、加熱處理、冷凍干燥、濃縮干固。
[0046] 對于本發(fā)明抑制劑,乳酸菌發(fā)酵物(蘆苔)中特別優(yōu)選由用乳酸菌使含有蘆苔成 分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)得到的上清。
[0047] 從用乳酸菌使含有蘆苔成分的培養(yǎng)基發(fā)酵的物質(zhì)中得到的上清(W下,有時稱為 "乳酸菌發(fā)酵物(蘆苔)上清")可W通過從如上述得到的乳酸菌發(fā)酵物(蘆苔)中按照離 屯、分離、過濾等常規(guī)方法去除固體物質(zhì)來制造。
[0048] 運(yùn)樣得到的從用乳酸菌使含有蘆苔成分的培養(yǎng)基發(fā)酵的物質(zhì)中得到的上清的濃 度W干燥固體成分計為0. 05質(zhì)量%時,戊糖素生成抑制率為25% W上,優(yōu)選為28~50%。
[0049] W上說明的本發(fā)明抑制劑可W配合于化妝品、藥品、準(zhǔn)藥物等皮膚外用劑組合物 中,也可W制成例如:化妝水、乳液、各種霜、面膜、美容液等基礎(chǔ)化妝品;香波、護(hù)發(fā)素、煽 油膏、生發(fā)油、整發(fā)液、頭膏、潤發(fā)奶化air milk)等頭發(fā)用產(chǎn)品;入浴劑等浴用化妝品;粉 底、口紅、睫毛膏、眼影等彩妝化妝品;防曬等特殊化妝品等。對于作為本發(fā)明的戊糖素生 成抑制劑的乳酸菌培養(yǎng)上清的配合量,沒有特別的限定,可W根據(jù)皮膚外用劑組合物的形 態(tài)等適宜設(shè)定,優(yōu)選W干燥固體成分換算計為0. 003質(zhì)量%~1質(zhì)量%,優(yōu)選為0. 015質(zhì) 量%~0. 6質(zhì)量%,特別優(yōu)選為0. 03質(zhì)量%~0. 3質(zhì)量%。
[0050] 上述皮膚外用劑組合物可W在不有損本發(fā)明的效果的范圍配合化妝品、藥品、準(zhǔn) 藥物等領(lǐng)域中使用的公知成分。作為運(yùn)些公知成分,可列舉出例如:水、醇類、油成分、表面 活性劑、防腐劑、香料、色素、保濕劑、增稠劑、抗氧化劑、馨合劑、抑調(diào)節(jié)劑、發(fā)泡劑、紫外線 吸收?散射劑、粉體、維生素類、氨基酸類、抗菌劑、植物提取物、海藻提取物、各種試劑等。
[0051] 本發(fā)明抑制劑可W直接將上述乳酸菌發(fā)酵物制劑化而調(diào)制,或者與公知的藥品載 體組合進(jìn)行制劑化而調(diào)制。
[0052] 進(jìn)一步,本發(fā)明抑制劑由于W有飲食經(jīng)驗的乳酸菌發(fā)酵物作為有效成分,所W可 W配合于各種飲食品中。例如,可W向乳酸菌發(fā)酵物中添加適當(dāng)?shù)闹鷦┲?,使用慣用的手 段成型為適合于食用的形態(tài)例如顆粒狀、粒狀、片劑、膠囊、糊劑等供于食用,或者向各種食 品例如:火腿、香腸等肉食加工食品;魚糕、筒狀魚卷等水產(chǎn)加工食品;面包、點(diǎn)屯、等中添加 而使用,或者可W向水、果汁、牛奶、清涼飲料等飲料中添加而使用。
[0053] W上說明的本發(fā)明抑制劑通過對人給予,能夠抑制人的戊糖素生成,因此能夠進(jìn) 行與戊糖素相關(guān)的疾患的預(yù)防、治療。對于本發(fā)明抑制劑對人的給予方法,沒有特別的限 定,例如,對于人的戊糖素生成的部位,通過適合于該部位的給予路徑,給予能夠進(jìn)行上述 預(yù)防、治療的量。作為戊糖素生成的部位,可列舉出例如皮膚、硬膜等。另外,對于適合于前 述部位的給予路徑,可列舉出例如:對上述部位的涂布、經(jīng)口給予、注射等。
[0054] 實施例
[0055] W下,列舉實施例等對本發(fā)明詳細(xì)地進(jìn)行說明,但本發(fā)明不限定于運(yùn)些實施例。
[0056] 實施例1
[0057] 乳酸菌發(fā)酵物(乳成分)上清的低分子級分的戊糖素生成抑制活性:
[0058] 將嗜熱鏈球菌YIT2084株師RM BP-10879)的-80°C保存菌株向2血