一種抑制劑的合成方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥品技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種抑制劑的合成方法。
【背景技術(shù)】
[0002]男性勃起功能障礙(ED)的發(fā)病率高，尤其在中老年人群中更為常見，容易給患者帶來(lái)困擾，降低患者的生活質(zhì)量。據(jù)估計(jì)，到2025年，全世界的ED患者將超過(guò)3億人。他達(dá)拉非(Tadalafil)作為5_型磷酸二酯酶(PDE5)的可逆性抑制劑，于2003年被FDA批準(zhǔn)成為治療ED的藥物。它通過(guò)與TOE5可逆性結(jié)合而對(duì)其產(chǎn)生抑制作用，進(jìn)而達(dá)到治療ED的效果。他達(dá)拉非具有較好的安全性和耐受性，在患者的治療過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用。然而病人在服用該藥之后仍然會(huì)產(chǎn)生一些副作用，如頭痛、背痛、消化道癥狀等。
[0003]因此，尋找比他達(dá)拉非活性更好、副作用更小的藥物將具有較大的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明就是針對(duì)上述問(wèn)題，提供一種活性好、副作用小的一種抑制劑的合成方法。
[0005]為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案。
[0006]一種抑制劑的合成方法包括下步驟。
[0007](1)L-色氨酸甲酯鹽酸鹽與不同的對(duì)位取代苯甲酸發(fā)生Pictet-Spengler縮合反應(yīng)生成1系列化合物和2系列化合物，利用硅膠柱色譜即可實(shí)現(xiàn)分離；
(2 )進(jìn)行還原胺化反應(yīng)分別得到3系列化合物和4系列化合物；所有中間體及終產(chǎn)物都經(jīng)過(guò)了核磁共振氫譜、碳譜、Ν0Ε譜及質(zhì)譜的表征，1-位絕對(duì)構(gòu)型可通過(guò)Cl-Η與C3-H是否存在Ν0Ε效應(yīng)而進(jìn)行判斷；若Cl-Η與C3-H存在Ν0Ε效應(yīng)，則為順式構(gòu)型；反之則為反式構(gòu)型。將45%的正丁醇、30%的異丙醇、25%去離子水按對(duì)應(yīng)的體積比混合均勻，并加入2%的氨水溶液，配制層析液；在30°C下，層析分離；
(3)向100mL圓底燒瓶中依次加入L-色氨酸甲酯鹽酸鹽5mmol、對(duì)位取代苯甲酸5.5mmol、苯50mL、三氟乙酸lOmmol,氮?dú)獗Ｗo(hù)下回流反應(yīng)4小時(shí)；反應(yīng)液用乙酸乙酯80mL稀釋，攪拌下緩慢加入飽和碳酸氫鈉溶液約50mL，室溫?cái)嚢?小時(shí)，分液，水相用乙酸乙酯萃取2X30mL，合并有機(jī)相，飽和氯化鈉溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，將溶劑旋干；硅膠柱色譜分離純化，既得。
[0008]作為一種優(yōu)選方案，所述3a-3d或4a-4d合成方法為:將化合物la -1d或2a - 2d的純品lmmol溶于乙腈20mL，然后依次加入37%甲醛水溶液0.45g、乙酸65mg、三乙酰氧基硼氫化鈉0.9g，室溫?cái)嚢?小時(shí)；將大部分溶劑旋蒸除去，加入乙酸乙酯40mL稀釋，分液，水相用少量乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，將溶劑旋干硅膠柱色譜分離純化，得到3a - 3d或4a - 4d。
[0009]本發(fā)明有益效果:本發(fā)明設(shè)計(jì)了與他達(dá)拉非結(jié)構(gòu)類似的3系列化合物和4系列化合物，并將這些化合物與TOE5進(jìn)行了分子對(duì)接研究?；衔?b和4d的對(duì)接打分超過(guò)了他達(dá)拉非。隨后我們用化學(xué)方法實(shí)現(xiàn)了 3a - 3d、4a - 4d的合成。利用Pictet-Spengler反應(yīng)制備中間體la - ld、2a-2d，反應(yīng)在苯中回流進(jìn)行，加入兩倍當(dāng)量的三氟乙酸作催化劑。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，對(duì)于由色氨酸衍生、1-位連有取代基的THBC類化合物，在三氟乙酸催化下1-位的順式構(gòu)型會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)榉词?。為了制備化合?a-3d、4a_4d，我們需要足夠量的中間體la -1d,2a - 2d,因此必須嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間，以防止反應(yīng)過(guò)程中生成的順式異構(gòu)體la -1d過(guò)多地轉(zhuǎn)變?yōu)榉词疆悩?gòu)體2a - 2d。反應(yīng)時(shí)間為4h時(shí)，結(jié)果較好，1系列化合物和2系列化合物的收率都在37%以上。我們最初采用碘甲烷作為甲基化試劑來(lái)制備3系列化合物和4系列化合物，總是難以避免地會(huì)有少量的產(chǎn)物繼續(xù)發(fā)生甲基化生成相應(yīng)的銨鹽。后來(lái)使用還原胺化反應(yīng)，產(chǎn)物純度很高，無(wú)銨鹽生成，收率達(dá)到85%以上。
【具體實(shí)施方式】
[0010]一種抑制劑的合成方法包括下步驟。
[0011 ] (1)L-色氨酸甲酯鹽酸鹽與不同的對(duì)位取代苯甲酸發(fā)生Pictet-Spengler縮合反應(yīng)生成1系列化合物和2系列化合物，利用硅膠柱色譜即可實(shí)現(xiàn)分離；
(2)進(jìn)行還原胺化反應(yīng)分別得到3系列化合物和4系列化合物；所有中間體及終產(chǎn)物都經(jīng)過(guò)了核磁共振氫譜、碳譜、Ν0Ε譜及質(zhì)譜的表征，1-位絕對(duì)構(gòu)型可通過(guò)Cl-Η與C3-H是否存在Ν0Ε效應(yīng)而進(jìn)行判斷；若Cl-Η與C3-H存在Ν0Ε效應(yīng)，則為順式構(gòu)型；反之則為反式構(gòu)型。將45%的正丁醇、30%的異丙醇、25%去離子水按對(duì)應(yīng)的體積比混合均勻，并加入2%的氨水溶液，配制層析液；在30°C下，層析分離；
(3)向100mL圓底燒瓶中依次加入L-色氨酸甲酯鹽酸鹽5mmol、對(duì)位取代苯甲酸5.5mmol、苯50mL、三氟乙酸lOmmol,氮?dú)獗Ｗo(hù)下回流反應(yīng)4小時(shí)；反應(yīng)液用乙酸乙酯80mL稀釋，攪拌下緩慢加入飽和碳酸氫鈉溶液約50mL，室溫?cái)嚢?小時(shí)，分液，水相用乙酸乙酯萃取2X30mL，合并有機(jī)相，飽和氯化鈉溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，將溶劑旋干；硅膠柱色譜分離純化，既得。
[0012]所述3a - 3d或4a - 4d合成方法為:將化合物la -1d或2a - 2d的純品lmmol溶于乙腈20mL，然后依次加入37%甲醛水溶液0.45g、乙酸65mg、三乙酰氧基硼氫化鈉0.9g，室溫?cái)嚢?小時(shí)；將大部分溶劑旋蒸除去，加入乙酸乙酯40mL稀釋，分液，水相用少量乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，將溶劑旋干硅膠柱色譜分離純化，得到3a - 3d或4a - 4d。
[0013]他達(dá)拉非的分子是以四氫-β -咔啉(THBC)作為母核，再稠合一個(gè)二酮哌嗪環(huán)而構(gòu)成。本文設(shè)計(jì)了與他達(dá)拉非結(jié)構(gòu)類似的3系列化合物和4系列化合物。當(dāng)取代基R相同時(shí)，這兩個(gè)系列的化合物對(duì)應(yīng)為差向異構(gòu)體。它們的基本骨架與他達(dá)拉非保持一致，都含有THBC母核。他達(dá)拉非的2-位為甲基化的氮原子，化合物3a - 3d、4a - 4d的哌啶環(huán)的氮原子也被甲基化，這兩種N-甲基結(jié)構(gòu)空間位置類似，都位于分子的哌啶環(huán)一側(cè)。我們先將這些化合物與TOE5進(jìn)行分子對(duì)接研究，發(fā)現(xiàn)它們的對(duì)接打分較高，然后進(jìn)一步用化學(xué)方法合成了這些化合物，為后續(xù)即將進(jìn)行的TOE5抑制活性的研究奠定了基礎(chǔ)。
[0014]殘基是除他達(dá)拉非之外其它一些TOE5抑制劑的重要的結(jié)合位點(diǎn)。與他達(dá)拉非相t匕，化合物3b的對(duì)接構(gòu)象的中心骨架發(fā)生了 180度的翻轉(zhuǎn)，通過(guò)酯基與Tyr612形成氫鍵?；衔?d的對(duì)接構(gòu)象與他達(dá)拉非相似，它的NH基團(tuán)同樣與70Gln817形成氫鍵?；衔?b和4d的吲哚核與Phe820側(cè)鏈芳環(huán)平行且距離較近，適于形成堆積作用，而他達(dá)拉非對(duì)接構(gòu)象的吲哚核與Phe820側(cè)鏈芳環(huán)距離較遠(yuǎn)，堆積作用較弱?？赡苷沁@一原因使得4d與PDE5的親和力更好、對(duì)接打分更高；而化合物3b打分最高可能是因?yàn)樗扰cTyr612存在氫鍵作用，又與Phe820存在堆積作用。
[0015]本發(fā)明是他達(dá)拉非的結(jié)構(gòu)類似物，并利用Sybyl軟件進(jìn)行分子對(duì)接研究。其中化合物225 3b、4d與TOE5的殘基側(cè)鏈存在堆積作用，3b還通過(guò)酯基與Tyr612形成氫鍵；這兩個(gè)化合物的對(duì)接構(gòu)象比他達(dá)拉非更為穩(wěn)定。隨后從L-色氨酸甲酯鹽酸鹽出發(fā)，用兩步反應(yīng)以較高的收率合成得到了 3系列化合物和4系列化合物，為后續(xù)即將進(jìn)行的的TOE5抑制活性的測(cè)試奠定了基礎(chǔ)；通過(guò)活性測(cè)試將有望找到比他達(dá)拉非更強(qiáng)的TOE5抑制劑。
[0016]以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作的進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說(shuō)明，對(duì)于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明所提交的權(quán)利要求書確定的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種抑制劑的合成方法，其特征在于，包括下步驟: (1)L-色氨酸甲酯鹽酸鹽與不同的對(duì)位取代苯甲酸發(fā)生Pictet-Spengler縮合反應(yīng)生成1系列化合物和2系列化合物，利用硅膠柱色譜即可實(shí)現(xiàn)分離； (2)進(jìn)行還原胺化反應(yīng)分別得到3系列化合物和4系列化合物；所有中間體及終產(chǎn)物都經(jīng)過(guò)了核磁共振氫譜、碳譜、NOE譜及質(zhì)譜的表征，1-位絕對(duì)構(gòu)型可通過(guò)Cl-Η與C3-H是否存在NOE效應(yīng)而進(jìn)行判斷；若Cl-Η與C3-H存在NOE效應(yīng)，則為順式構(gòu)型；反之則為反式構(gòu)型；將45%的正丁醇、30%的異丙醇、25%去離子水按對(duì)應(yīng)的體積比混合均勻，并加入2%的氨水溶液，配制層析液；在30°C下，層析分離； (3)向100mL圓底燒瓶中依次加入L-色氨酸甲酯鹽酸鹽5mmol、對(duì)位取代苯甲酸5.5mmol、苯50mL、三氟乙酸lOmmol,氮?dú)獗Ｗo(hù)下回流反應(yīng)4小時(shí)；反應(yīng)液用乙酸乙酯80mL稀釋，攪拌下緩慢加入飽和碳酸氫鈉溶液約50mL，室溫?cái)嚢?小時(shí)，分液，水相用乙酸乙酯萃取2X30mL，合并有機(jī)相，飽和氯化鈉溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，將溶劑旋干；硅膠柱色譜分離純化，既得。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種抑制劑的合成方法，其特征在于:所述3a- 3d或4a - 4d合成方法為:將化合物la -1d或2a - 2d的純品lmmol溶于乙腈20mL，然后依次加入37%甲醛水溶液0.45g、乙酸65mg、三乙酰氧基硼氫化鈉0.9g，室溫?cái)嚢?小時(shí)；將大部分溶劑旋蒸除去，加入乙酸乙酯40mL稀釋，分液，水相用少量乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，將溶劑旋干硅膠柱色譜分離純化，得到3a - 3d或4a - 4do
【專利摘要】<b>一種抑制劑的合成方法</b><b>屬于</b><b>藥品技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種抑制劑的合成方法。本發(fā)明提供一種活性好、副作用小的一種抑制劑的合成方法。一種抑制劑的合成方法包括下步驟。（1）L-色氨酸甲酯鹽酸鹽與不同的對(duì)位取代苯甲醛發(fā)生Pictet-Spengler縮合反應(yīng)生成1系列化合物和2系列化合物，利用硅膠柱色譜即可實(shí)現(xiàn)分離；（2）進(jìn)行還原胺化反應(yīng)分別得到3系列化合物和4系列化合物，所有中間體及終產(chǎn)物都經(jīng)過(guò)了核磁共振氫譜、碳譜；（3）向100mL圓底燒瓶中依次加入L-色氨酸甲酯鹽酸鹽5mmol，將溶劑旋干；硅膠柱色譜分離純化，既得。</b>
【IPC分類】A61P15/10, C07D471/04
【公開號(hào)】CN105315276
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410359557
【發(fā)明人】牛譽(yù)博
【申請(qǐng)人】牛譽(yù)博
【公開日】2016年2月10日
【申請(qǐng)日】2014年7月27日