戊糖素生成抑制劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及W乳酸菌發(fā)酵物作為有效成分的戊糖素生成抑制劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 戊糖素是具有賴(lài)氨酸殘基和精氨酸殘基通過(guò)五碳糖交聯(lián)的結(jié)構(gòu)的高級(jí)糖基化終 產(chǎn)物（Advanced Glycation Elnd products :AGEs)。
[0003] 該戊糖素蓄積于人硬膜、皮膚膠原。另外，戊糖素對(duì)于風(fēng)濕、重癥的特應(yīng)性皮炎的 患者也能夠W高值被檢測(cè)出來(lái)，也掲示了與運(yùn)些疾病的關(guān)聯(lián)。
[0004] 因此，通過(guò)抑制戊糖素的生成，能夠進(jìn)行與戊糖素相關(guān)的疾病的預(yù)防、治療。 陽(yáng)〇化]然而，到目前為止，盡管作為具有抑制戊糖素生成的作用的成分已知有依達(dá)拉奉 (專(zhuān)利文獻(xiàn)1)等，但不能充分地滿(mǎn)足效果、安全性等。
[0006] 現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0007] 專(zhuān)利文獻(xiàn)
[0008] 專(zhuān)利文獻(xiàn)1 :日本特開(kāi)2004-300153號(hào)公報(bào)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 發(fā)巧要解決的間顆
[0010] 因此，本發(fā)明的課題在于，作為具有抑制戊糖素生成的作用的成分，提供具有更強(qiáng) 的作用、安全性高的物質(zhì)。
[0011] 用于解決間顆的方案
[0012] 本發(fā)明人等為了解決上述問(wèn)題，進(jìn)行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，乳酸菌發(fā)酵物意外地 具有抑制戊糖素生成的作用。另外，本發(fā)明人等發(fā)現(xiàn)，在乳酸菌發(fā)酵物中，用乳酸菌使含有 乳成分、蘆苔的培養(yǎng)基發(fā)酵而得到的乳酸菌發(fā)酵物作為有效成分的情況下，抑制戊糖素生 成的作用高，至此完成了本發(fā)明。
[0013] 目P，本發(fā)明為W乳酸菌發(fā)酵物作為有效成分的戊糖素生成抑制劑。
[0014]另外，本發(fā)明是W乳酸菌發(fā)酵物作為有效成分的戊糖素生成抑制劑，所述乳酸菌 發(fā)酵物是用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而得到的。
[0015] 進(jìn)而，本發(fā)明是W乳酸菌發(fā)酵物作為有效成分的戊糖素生成抑制劑，所述乳酸菌 發(fā)酵物是用乳酸菌使含有蘆苔的培養(yǎng)基發(fā)酵而得到的。
[0016] 另外，本發(fā)明是人的戊糖素生成的抑制方法，其特征在于，對(duì)人給予上述W乳酸菌 發(fā)酵物作為有效成分的戊糖素生成抑制劑。
[0017] 發(fā)巧的效果
[0018] 本發(fā)明的戊糖素生成抑制劑即便低濃度作用也強(qiáng)并且由于來(lái)自天然物而安全性 高，能夠進(jìn)行戊糖素相關(guān)疾病的預(yù)防、治療。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 本發(fā)明的戊糖素生成抑制劑（W下，稱(chēng)為"本發(fā)明抑制劑"）是W乳酸菌發(fā)酵物作 為有效成分。本說(shuō)明書(shū)中，乳酸菌發(fā)酵物是指將能夠用乳酸菌發(fā)酵的原料用乳酸菌發(fā)酵而 得到的物質(zhì)。另外，乳酸菌發(fā)酵物任選含有乳酸菌或不含有乳酸菌，也包括從乳酸菌的培養(yǎng) 物中通過(guò)過(guò)濾等而去除了乳酸菌的上清等。
[0020] 另外，本說(shuō)明書(shū)中，戊糖素生成抑制是指減少生成的戊糖素的量；戊糖素生成抑制 率是指根據(jù)論文 0. R. Sell and V. M. Monnier, J. Biol. Chem 264, 21597-21602,（1989))所 述的方法，在W等量混合了核糖、賴(lài)氨酸鹽酸鹽、精氨酸鹽酸鹽的底物溶液中，在待檢物質(zhì) 的存在下或非存在下，對(duì)生成的戊糖素的量進(jìn)行測(cè)定、比較而算出的值。更具體而言，在W 等量混合了核糖、賴(lài)氨酸鹽酸鹽、精氨酸鹽酸鹽的底物溶液中混合待檢物質(zhì)，在60°C下反應(yīng) 24小時(shí)之后，測(cè)定照射330皿的激發(fā)光產(chǎn)生的390皿的巧光強(qiáng)度，由實(shí)施例所述的數(shù)學(xué)式1 的式子算出的值。
[0021] 對(duì)于乳酸菌發(fā)酵物的原料，只要是能夠用乳酸菌發(fā)酵的物質(zhì)則沒(méi)有特別的限定， 可列舉出例如：含有蘆苔、豆乳等來(lái)自植物的原料的培養(yǎng)基；含有牛奶、人奶、山羊奶等動(dòng) 物奶、奶油、脫脂奶粉等來(lái)自動(dòng)物的原料的培養(yǎng)基；MRS(Man, Rogosa and化a巧e)培養(yǎng)基； M-17培養(yǎng)基等乳酸菌用培養(yǎng)基等。運(yùn)些原料中，特別優(yōu)選使用含有牛奶、人奶、山羊奶等動(dòng) 物奶、奶油、脫脂奶粉等乳成分的培養(yǎng)基；或者含有蘆苔的培養(yǎng)基。另外，對(duì)于運(yùn)些原料，也 可W進(jìn)行：過(guò)濾、離屯、分離處理；利用溶劑的溶解、稀釋處理；利用混合器等的粉碎處理；利 用淀粉酶、纖維素酶、果膠酶、蛋白酶等的酶處理；利用溶劑的提取處理。
[0022] 另外，對(duì)于發(fā)酵中使用的乳酸菌也沒(méi)有特別的限定，可列舉出例如：干酪乳 桿菌（Xactobacillus casei)、卷曲乳桿菌（Xactobacillus crispatus)、植物乳桿 菌（Xactobacillus plantarum)、隧淀粉乳桿菌（Xactobacillus amylovorus)、短乳 桿菌（Xactobacillus brevis)、布氏乳桿菌（Xactobacillus buchneri)、發(fā)酵乳桿 菌（Xactobacillus fermentum)、馬里乳桿菌（Xactobacillus mali)、類(lèi)布氏乳桿菌 (Xactobacillus par油uchneri)、擬干酪乳桿菌（Xactobacillus paracasei)、戊糖乳桿 菌（Xactobacillus pentosus)、鼠李糖乳桿菌（Xactobacillus rhamnosus)、小牛乳酸桿 菌（Xactobacillus vitulinus)、玉米乳桿菌（Xactobacillus zeae)等乳桿菌屬；乳酸乳 球菌（Xactococ州S Iactis)等乳球菌（Xactococ州S)屬；腸系膜明串珠菌（Xeuconostoc mesenteroides)、肉明串珠菌（Xeuconostoc carnosum)、巧樣明串珠菌（Xeuconostoc citreum)、腸膜明串珠菌（Xeuconostoc gelidum)、乳明串珠菌（Xeuconostoc Iactis) 等明串珠菌（Xeuconostoc)屬；戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus)等片球菌 (F*ediococcus)屬；糞腸球菌巧nterococcus faecalis)、尿腸球菌巧nterococcus faecium)等腸球菌巧nterococcus)屬；融合魏斯氏菌（Weissella confusa)、類(lèi)腸膜魏斯 氏菌（Weissella paramesenteroides)、綠色魏斯氏菌（Weissella viridescens)等魏斯氏 菌（Weissella)屬；嗜熱鏈球菌等鏈球菌屬等的乳酸菌。運(yùn)些乳酸菌可W使用一種或兩種 W上。
[0023] 對(duì)于用乳酸菌對(duì)含有上述的原料的培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵的條件，沒(méi)有特別的限定，例 如，對(duì)于前述培養(yǎng)基接種乳酸菌0.0 l~10質(zhì)量％，優(yōu)選接種0. 1~5質(zhì)量％，將其在20~ 45°C、優(yōu)選25~42°C下培養(yǎng)1~96小時(shí)，優(yōu)選培養(yǎng)3~96小時(shí)。
[0024] 進(jìn)一步，在上述發(fā)酵時(shí)，也可W向培養(yǎng)基中添加例如：酵母提取物、小球藻提取物、 維生素類(lèi)、蛋白分解物、氨基酸類(lèi)、礦物類(lèi)、鹽類(lèi)、表面活性劑、脂肪酸、金屬類(lèi)等。
[00巧]對(duì)于如上述得到的乳酸菌發(fā)酵物，可W直接用作本發(fā)明抑制劑，進(jìn)一步，也可W使 用進(jìn)行了公知的過(guò)濾、透析、沉淀、離屯、分離等精制、分離處理，進(jìn)一步進(jìn)行了利用溶劑等的 提取處理、加熱處理的物質(zhì)。另外，也可W實(shí)施冷凍干燥、濃縮干固。
[00%] 運(yùn)樣得到的乳酸菌發(fā)酵物的戊糖素生成抑制活性高、乳酸菌發(fā)酵物的濃度W干燥 固體成分計(jì)為0. 05質(zhì)量％時(shí)，戊糖素生成抑制率為25% W上，優(yōu)選為26~60%。
[0027] 作為本發(fā)明中使用的乳酸菌發(fā)酵物優(yōu)選的方式，可列舉出：用乳酸菌使含有乳成 分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)；或者用乳酸菌使含有蘆苔的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)。需要說(shuō) 明的是，此處所述的蘆苔不僅包含蘆苔自身還包含來(lái)自蘆苔的成分。用乳酸菌使含有乳成 分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)中，優(yōu)選為由用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì) 得到的上清；特別優(yōu)選由用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)得到的上清的低 分子級(jí)分、由用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)得到的上清的高分子級(jí)分。 另外，用乳酸菌使含有蘆苔的培養(yǎng)基發(fā)酵的物質(zhì)特別優(yōu)選由用乳酸菌使含有蘆苔的培養(yǎng)基 發(fā)酵而成的物質(zhì)得到的上清。
[0028] W下，對(duì)于作為本發(fā)明中使用的乳酸菌發(fā)酵物優(yōu)選的方式的、用乳酸菌使含有乳 成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)、W及用乳酸菌使含有蘆苔的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)進(jìn)行說(shuō) 明。
[0029] 作為用乳酸菌使含有乳成分的培養(yǎng)基發(fā)酵而成的物質(zhì)（W下，有時(shí)稱(chēng)為"乳酸菌 發(fā)酵物（乳成分）"）所使用的乳酸菌，優(yōu)選例如，嗜熱鏈球菌等鏈球菌屬；干酪乳桿菌、植 物乳桿菌等乳桿菌屬等的乳酸菌。運(yùn)些乳酸菌中，優(yōu)選鏈球菌屬的乳酸菌，更優(yōu)選嗜熱鏈球 菌。另外，其中優(yōu)選嗜熱鏈球菌門(mén)T2084株（陽(yáng)RM BP-10879、保藏日：2006年8月18日）、 嗜熱鏈球菌YIT2085株（陽(yáng)RM BP-10880、保藏日：2006年8月18日）、嗜熱鏈球菌YIT2021 株（陽(yáng)RM BP-7537、保藏日：平成8年（1996年）11月1日）、嗜熱鏈球菌Y口2059株（陽(yáng)RM BP-10878、保藏日：2006年8月18日）、嗜熱鏈球菌YIT2001株（陽(yáng)RM BP-7538、保藏日：平 成13年（2001年）1月31日）等，特別優(yōu)選嗜熱鏈球菌Y口2084株師RM BP-10879、保藏 日：2006年8月18日）。需要說(shuō)明的是，運(yùn)些乳酸菌可W使用一種或兩種W上。另外，上 述保藏號(hào)的乳酸菌株被保藏于獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所專(zhuān)利生物保藏中屯、（日 本國(guó)茨城縣筑波市東1下目1番地1中央第6 (郵政編碼305-8566))，于平成25年4月1 日，由獨(dú)立行政法人制品評(píng)價(jià)技術(shù)基盤(pán)機(jī)構(gòu)專(zhuān)利生物保藏中屯、（日本國(guó)千葉縣木更津市上 總鑲足2下目5番地8120號(hào)室（郵政編碼292-0818))接管。
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