專利名稱：：紫花牡荊素用于制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥、食品、飲料
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體地說(shuō)是涉及一種中藥提取物的新用途，更具體地說(shuō)是涉及一種以蔓荊子為原料制備的中藥提取物紫花牡荊素新的用途。
背景技術(shù)：
：(一)經(jīng)前期綜合征的研究概況經(jīng)前期綜合癥(premenstrualsyndrome，簡(jiǎn)稱PMS)是指婦女在月經(jīng)周期的后期(黃體期)表現(xiàn)出一系列生理、情感、認(rèn)知及習(xí)慣方面的不適癥狀，并在卵泡期緩解，又稱經(jīng)前期緊張綜合征(AmericanPsychiatricAssociation.DiagnosticandstatisticalmanualofmentalDisorder.4thed.Washington，DCAmericanPsychiatricAssociation，1994.714-718)。經(jīng)前期綜合癥是一組與月經(jīng)有關(guān)的，一個(gè)物理的周期的模型為特點(diǎn)，慢性的，在月經(jīng)的循環(huán)的第2個(gè)階段即黃體期，由于激素循環(huán)混亂而出現(xiàn)明顯的感情和物理體征，這種體征又隨月經(jīng)的開始之逐步減弱。在70年代他被命名為經(jīng)前期緊張癥(premenstrualsyndrometension，簡(jiǎn)稱PMT)(McPhersonA，WallerD.Women’sHealth.OxfordUniversityPress.1997.以及KorzekwaM，SteinerM.Premenstrualsyndromes.ClinObstetandGynecol1997；40(3)564-576.)。雖然經(jīng)前期綜合癥相對(duì)容易診斷并且大多數(shù)婦女可能被成功治愈，但是引發(fā)該病的具體因素和病理機(jī)制還不明確(FrankR.ThehormonalcausesofPMT.ArchNeurolPsychiatry1931；261053.)。經(jīng)前期綜合癥通常有3個(gè)重要的特征它是周期的；癥狀出現(xiàn)在排卵期間或在排卵之的在月經(jīng)的循環(huán)的黃體階段里發(fā)生；并且癥狀一定嚴(yán)重得足以干擾日常生活的一些方面。經(jīng)前期綜合癥有超過150種癥狀。按照其癥狀的輕重將PMS分為三類，第一類普通PMS它是指出現(xiàn)一邊的PMS相關(guān)的輕度身體癥狀如表格1所給的例如乳房輕度腫痛，頭痛和水腫等(FrankR.ThehormonalcausesofPMT.ArchNeurolPsychiatry1931；261053.以及SmithS.DiagnosisofPremenstrualSyndrome.SmithS，SchiffI，eds.Modern)；第二種是經(jīng)前期病理性煩躁不安綜合癥(PMDD--premenstrualdysphoricdisorder)患有這種病的婦女一般除了有嚴(yán)重的身體的癥狀外還伴隨明顯的情緒變化常常出現(xiàn)嚴(yán)重的精神癥狀。它在1985年被命名為L(zhǎng)LPDD(latelutealphasedysphoricdisorder)(DiagnosticandStatisticalManualofMentalDisorders.Thirdedition.WashingtonD.C.AmericanPsychiatricAssociation，1987.)，在1994年才被正式命名為PMDD其診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)DSM-IV(diagnosticandstatisticalmannalofmentaldisorders)(DiagnosticandStatisticalManualofMentalDisorders.Fourthedition.WashingtonD.C.AmericanPsychiatricAssociation，1994.)。表1、PMS常見癥狀與其密切相關(guān)病癥如周期性乳房痛、痛經(jīng)等是女性的常見病和多發(fā)病，是危害婦女身心健康的常見病、多發(fā)病。在30～50歲婦女中，約有90％以上的人在經(jīng)前7～14天會(huì)出現(xiàn)不同程度的煩躁易怒、全身乏力、乳房脹痛、頭痛、失眠多夢(mèng)、小腹脹痛、鈍性腰背痛及盆腔沉重感、浮腫、胃脘脹痛、惡心嘔吐、記憶力下降、工作理家能力下降等感覺，其中，20％～30％因癥狀嚴(yán)重干擾日常生活需要治療。目前，關(guān)于PMS的發(fā)病機(jī)制普遍認(rèn)為是精神社會(huì)因素與包括內(nèi)分泌調(diào)節(jié)軸、卵巢激素、腦神經(jīng)遞質(zhì)、前列腺素、維生素B6缺陷等生理因素復(fù)雜相互作用的結(jié)果(BancroftJ.Thepremenstrualsyndromeareappraisaloftheconceptandtheevidence.PsycholMedSuppl，1993，241)具體生理機(jī)制尚未明了，但有研究表明與體內(nèi)雌激素、泌乳素水平的升高有關(guān)(Wuttke，W.，Jarry，H.，Christoffel，V.，Spengler，B.，Seidlová-Wuttke，D.2003.Chastetree(Vitexagnus-castus)-Pharmacologyandclinicalindications.Phytomedicine10，348-357，吳萬(wàn)齡，實(shí)用內(nèi)分泌手冊(cè)，第一版，1991，14)。其相關(guān)癥狀大多與疼痛相關(guān)，表現(xiàn)為全身乏力、乳房脹痛、頭痛、小腹脹痛、鈍性腰背痛、盆腔沉重感及與泌乳素升高相關(guān)的浮腫、胃脘脹痛、惡心嘔吐、記憶力下降、工作理家能力下降等感覺。1.癥狀與診斷正確診斷PMS需要正確的收集各方面的信息。多數(shù)情況下可以通過研究收集病人的用藥的精神病史結(jié)合各項(xiàng)身體檢查獲得。如全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(簡(jiǎn)稱CBC)，電解質(zhì)檢查，甲狀腺素檢查，月經(jīng)21天孕激素，雌激素水平的檢查等(并將以上的結(jié)果作圖表以便直觀分析)。國(guó)際上通常使用VAS(VisualAnalogueScale)獲得不同病人的主要病理癥狀。具體方法是讓病人在每天的日歷上畫出自己相應(yīng)的癥狀，記錄至少兩個(gè)以上的月經(jīng)周期后對(duì)結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)得出結(jié)論。特別值得注意的是PMS的某些癥狀與其它一些疾病的某些癥狀類似應(yīng)予以區(qū)分。如慢性疲勞綜合癥，狂躁癥，精神抑郁癥，貧血，甲狀腺功能減退，纖維肌瘤，子宮內(nèi)膜異位癥等(MuzinaK，GonsalvesL.Commonlyaskedquestionsaboutpremenstrualdysphoricdisorder.CleveClinicJofMed1998；65(3)142-149.以及KorzekwaM，SteinerM.Premenstrualsyndromes.ClinObstetandGynecol1997；40(3)564-576.)。2.病因?qū)W研究至今PMS的發(fā)病機(jī)制上沒有統(tǒng)一定論。目前認(rèn)為他是有多種機(jī)制引起的，沒有明確的機(jī)理，目前認(rèn)可的六種主要發(fā)病機(jī)制為2.1性腺類固醇作用機(jī)制據(jù)研究表明短暫的雌激素與孕激素的比例失調(diào)與PMS相關(guān)(SondheimerS.Etiologyofpremenstrualsyndrome.SmithS，SchiffI，eds.Modernmanagementofpremenstrualsyndrome.NewYorkNortonMedicalBooks，199346-53.)。然而又有研究表明PMS患者與正常人相比性激素水平并沒有顯著的不同(RubinowD，HobanM，GorverG.Changesinplasmahormonesacrossthemenstrualcycleinpatienstwithmenstruallyrelatedmooddisorderandincontrolsubjects.AmJObstetGynecol1988；158(5).)。因此性激素類固醇機(jī)制與中樞神經(jīng)系統(tǒng)和神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)相關(guān)。研究還發(fā)現(xiàn)雖然PMS患者的孕激素水平并沒有下降，但其體內(nèi)孕激素的代謝發(fā)生了變化(RapkinA，MorganM，GoldmanL，etal.Progesteronemetaboliteallopregnaloneinwomenwithpremenstrualsyndrome.ObstetandGynecol1997；90709-714.)。體內(nèi)孕酮多代謝為兩種分別是孕烯醇酮(pregnenolone)和異孕烯醇酮(allopregnanolone)。他們共同作用于GABA受體。孕烯醇酮能阻礙GABA受體的功能，導(dǎo)致出現(xiàn)緊張焦慮癥狀異孕烯醇酮會(huì)促進(jìn)GABA受體的功能，從而消除緊張焦慮癥狀(BergaS.Understandingpremenstrualsyndrome.Lancet1998；351(9101)465-466.)。因此，研究者認(rèn)為PMS患者的孕酮大多代謝為孕烯醇酮，所以出現(xiàn)焦慮等神經(jīng)癥狀。2.2植物神經(jīng)信號(hào)機(jī)制研究調(diào)查PMS患者的身體狀況發(fā)現(xiàn)它們出現(xiàn)明顯的食欲增加(Both-OrthmanB，RubinowD，HobanM.Menstrualcyclephase-relatedchangesinappetiteinpatientswithpremenstrualsyndromeandincontrolsubiects.AmJPsychiatry1988；145628-631)。這種發(fā)現(xiàn)可能與5-HT神經(jīng)元遞質(zhì)有關(guān)。同時(shí)PMS患者在黃體期出現(xiàn)明顯的睡眠節(jié)律的改變，這與晝夜的退黑素分泌相關(guān)；研究發(fā)現(xiàn)在月經(jīng)的全過程中PMS患者的退黑素比正常人的低(MauriM，ReidR，MacLeanA.Sleepinthepremenstrualphaseaself-reportstudyofPMSpatientsandnormalcontrols.ActaPsychiatrScand1988；78(82-86).)。但還沒有發(fā)現(xiàn)其明確的相關(guān)機(jī)理。2.3神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)PMS還與體內(nèi)的甲狀腺素，泌乳素，蛻皮激素，葡萄糖水平有關(guān)。但不同研究對(duì)這些激素在體內(nèi)的水平在PMS患者與正常人間的區(qū)別究竟如何并沒有達(dá)成共識(shí)(Roy-ByrnneP，DR，QwirtsmanH.TSHandprolactinresponsestoTRHinpatientswithpremenstrualsyndrome.AmJPsych1987；144480-484.以及CasperR，Patel-ChristopherA，PowellA.Thyrotropinandprolactinresponsetothyrotropin-releasing-hormoneinpremenstrualsyndrome.JClinEndocrinolMetab1989；68608-612.)。但是通過在一些出現(xiàn)乳房腫痛的PMS病人中研究，發(fā)現(xiàn)用溴隱亭治療常有較好的效果；這可以說(shuō)明PMS的相關(guān)癥狀與泌乳素的分泌有密切的關(guān)系。它的作用機(jī)制是泌乳素受體的敏感度的改變(增加)，而不一定是其循環(huán)水平的改變(BjornA.Bromocriptineandpremenstrualsymptomsasurveyofdoubleblindtrials.ObstetandGynSurvey1983；38643-646.)。近年圍繞PRL排出量增多為PMS重要病因因素這一問題發(fā)生重大爭(zhēng)論。血漿PRL濃度有晝夜節(jié)律性，以睡眠時(shí)水平最高，每個(gè)人日與日之間也有顯著波動(dòng)。在排卵期PRL水平達(dá)峰值，黃體期PRL平均水平高于卵泡期。有些PMS病人血PRL平均濃度在整個(gè)月經(jīng)周期中均高于健康婦女，尤其在經(jīng)前期更為顯著。應(yīng)用溴隱亭治療以抑制PRL分泌，癥狀獲得明顯緩解。黃體期PRL水平升高可伴隨孕酮排出量下降或FSH/LH水平下降等，在理論上支持PRL水平增高在某些方面與PMS形成有關(guān)?？墒钦＜癙MS病人間多數(shù)未見PRL水平有明顯差異。PRL對(duì)滲透壓的調(diào)節(jié)作用在動(dòng)物比較顯著而在人類則影響不大，可能僅作用于乳腺，影響其局部滲透壓的平衡使乳房脹大、觸痛。此外，高PRL血癥婦女很少有PMS癥狀。應(yīng)用溴隱亭治療，僅減輕乳房癥狀，而對(duì)其他癥狀療效不顯著等，使PRL排出量增多學(xué)說(shuō)還缺乏可靠有力證據(jù)。2.4內(nèi)源性鴉片樣物質(zhì)作用機(jī)制內(nèi)源性鴉片樣物質(zhì)，特別是β-內(nèi)啡肽(與鎮(zhèn)痛有關(guān)的內(nèi)源性嗎啡樣物質(zhì)之一)能夠控制部分性激素的生成和釋放(SondheimerS.Etiologyofpremenstrualsyndrome.SmithS，SchiffI，eds.Modernmanagementofpremenstrualsyndrome.NewYorkNortonMedicalBooks，199346-53.)。它可以在通過調(diào)節(jié)下丘腦影響人的情緒。同時(shí)它可能與黃體期的促黃體生成素(簡(jiǎn)稱LH)的釋放有關(guān)。因此研究者假設(shè)性激素的減少加上與之相伴的β-內(nèi)啡肽的減少可能使機(jī)體出現(xiàn)一種類似麻醉藥戒斷綜合癥的癥狀(頭痛、焦慮、消化道不良反應(yīng)等)。由于這一機(jī)制的復(fù)雜性至今仍難以驗(yàn)證。2.55-羥色胺〔組織激素〕參與的作用機(jī)制在最近的研究中表明，5-羥色胺在PMDD的生理狀態(tài)下起重要的調(diào)節(jié)作用(EndicottJ，AmsterdamJ，ErikssonE.etal.Ispremenstrualdysphoricdisorderadistinctclinicalentity？JWomen’sHealth&Gender-BasedMedicine1999；8(5)663-679.)。雖然確切的作用機(jī)制還不知道，但5-羥色胺的確參與人體的沖動(dòng)控制、焦慮、性行為、疼痛、睡眠、食欲等多種活動(dòng)。在黃體生成期，PMS患者的5-羥色胺的吸收和在血中的濃度都比正常人低(AshbyC，CarrL，CookC.Alterationof5-HTuptakebyplasmafractionsinthepremenstrualsyndrome.JNeuralTransm1990；7941-50.)。目前還不知道這種機(jī)制是參與非正常的突觸后5-羥色胺能反應(yīng)還是與PMS患者的易感特性有關(guān)(ParryB.Biologicalcorrelatesofpremenstrualcomplaints.GoldJ，H.，ed.PremenstrualDysphorias-mythsandrealities.WashingtonD.C.AmericanPsychiatricPress，Inc.，199447-66.)。卵巢類固醇與5-羥色胺樣功能的相關(guān)性已被證明。雌激素、孕激素可以影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)和5-羥色胺的合成、循環(huán)、釋放和吸收。據(jù)報(bào)道雌激素可以提高大腦對(duì)5-羥色胺激動(dòng)劑的反應(yīng)(ClarkW，MaayaniS.Estrogeneffectson5-HT1Areceptorsinhippocampalmembranesfromvariectomizedratsfunctionalandbindingstudies.BrainRes1990；518287.)。很明顯，在PMDD患者中5-羥色胺的作用是非常重要的也是目前人們的研究熱點(diǎn)。2.6其它作用機(jī)制PMS還與體內(nèi)已知維生素和礦物質(zhì)相關(guān)。比如VitB6，它參與體內(nèi)5-羥色胺、多巴胺、前列腺素等多種遞質(zhì)的合成(SondheimerS.Etiologyofpremenstrualsyndrome.SmithS，SchiffI，eds.Modemmanagementofpremenstrualsyndrome.NewYorkNortonMedicalBooks，199346-53.)。有研究證明大量的雌激素可以誘發(fā)VitB6的缺乏，從而影響多種遞質(zhì)的作用(WurtmanJ.Nutritionalinterventioninpremenstrualsyndrome.SmithS，SchiffI，eds.Modernmanagementofpremenstrualsyndrome.NewYorkNortonMedicalBooks，1993101-108.)。礦物質(zhì)中Ca也參與PMS病理過程，在月經(jīng)過程中由Ca調(diào)節(jié)的激素有明顯的變化如一種次生甲狀旁腺激素(25.Thys-JacobsS，AlvirJ.Calciumregulainghormonesacrossthemenstrualcycle-evidenceofsecondaryhyperparathyroidisminwomenwithPMS.JClinEndocrinolMetab1995；802227-2232.)。Ca除了影響激素外還參與了體內(nèi)單胺氧化酶的代謝；而這種酶在PMS患者中也有較大變化。此外Mg可以誘導(dǎo)某些神經(jīng)元的興奮性下，也可能參與PMS某些癥候?qū)W特征；但是總體研究表明PMS患者與正常人間并不存在VitB6、VitA、VitE的差異。因此這些維生素與礦物質(zhì)在PMS中的具體作用還有待進(jìn)一部研究。3.治療原則與治療用藥3.1治療目的目前由于PMS作用機(jī)制尚不明確，治療方法也處在研究實(shí)驗(yàn)階段，治療的藥物和方法多樣，但其共同的目的是減少病人的生理和心理上的呈現(xiàn)周期性的不良癥候群，從而提高病人的生活質(zhì)量。成功的治療和預(yù)防PMS的發(fā)展。由于PMS病人可以分成不同級(jí)別，對(duì)不同級(jí)別的病人應(yīng)采用不同的方法；對(duì)絕大部分較輕的患者，應(yīng)該調(diào)整他們的生活方式，并針對(duì)他們的個(gè)體癥狀進(jìn)行對(duì)癥治療；對(duì)較嚴(yán)重的患者特別是PMDD患者應(yīng)在給于對(duì)癥治療的同時(shí)給與對(duì)抗其精神癥狀的藥物治療；對(duì)某些特別嚴(yán)重的病人甚至應(yīng)給于抑制排卵治療。2000年美國(guó)婦產(chǎn)科大學(xué)提出了治療PMS的治療原則，它們認(rèn)為應(yīng)在考慮病人個(gè)體差異后制定治療原則(DavisA，JohnsonS.Clinicalmanagementguidelinesforpremenstrualsyndrome.ACOGPracticeBulletin，20001-8.)。3.2治療選擇和藥物作用機(jī)制對(duì)于以確診的PMS、PMDD|患者的主要治療方法如下3.21改變生活方式由統(tǒng)計(jì)表明30％PMS患者在改變了他們不良的生活習(xí)慣后期病理癥狀有明顯的改善。同時(shí)以用藥物治療的患者，可以通過改變生活方式而逐步停藥。生活方式的改變主要包括提高對(duì)該種疾病的認(rèn)識(shí)后，自我調(diào)節(jié)減少壓力，PMS患者的家人和朋友應(yīng)對(duì)患者所表現(xiàn)出的生理和心理上的體征給于理解和關(guān)懷，從而使病人減輕心理壓力和負(fù)擔(dān)所帶來(lái)的負(fù)面影響(心理壓力可以影響基因表達(dá)，從而改變?nèi)说那榫w和行為)(PostR.Transductionofpsychosocialstressintotheneurobiologyofrecurrentaffectivedisorder.AmJPsych1992；149999-1010)?；颊邞?yīng)該在意識(shí)和了解該病后，主動(dòng)紀(jì)錄自己每日的病理癥狀，以便根據(jù)自己的紀(jì)錄調(diào)整自己的生活。適度的規(guī)律的鍛煉在此過程中是十分重要的，特別是有氧運(yùn)動(dòng)(KorzekwaM，SteinerM.Premenstrualsyndromes.ClinObstetandGynecol1997；40(3)564-576.)?？梢赃x擇聽音樂，讀書，沉思療法，瑜伽等方式進(jìn)行放松。此外適度的節(jié)食對(duì)PMS患者也是有益的(WurtmanJ.Nutritionalinterventioninpremenstrualsyndrome.SmithS，SchiffI，eds.Modernmanagementofpremenstrualsyndrome.NewYorkNortonMedicalBooks，1993101-108.)。由于高脂飲食可以減緩體內(nèi)的水代謝(JonesD.Influenceofdietaryfatonself-reportedmenstrualsymptoms.PhysiolBehav1987；40483.)，碳水化合物則促進(jìn)5-HT活性，增加腦內(nèi)色氨酸的吸收，和腦內(nèi)5-HT的合成(WurtmanJ.Nutritionalinterventioninpremenstrualsyndrome.SmithS，SchiffI，eds.Modernmanagementofpremenstrualsyndrome.NewYorkNortonMedicalBooks，1993101-108.)。所以在黃體生成期采用低脂和高碳水化合物的飲食結(jié)構(gòu)有利于PMS病人某些癥狀的減輕和消除。同時(shí)由于高鹽高糖液增加體內(nèi)水潴留，使體重增加，咖啡因可使人的緊張易怒情緒增加，因此PMS患者也應(yīng)該避免其攝入(ReidR.Theresearch-orientedtreatmentunit.KeyeJrW，ed.ThePremenstrualSyndrome.PhiladelphiaW.B.SaundersCompany，1988154-164.)。3.22應(yīng)用維生素和礦物質(zhì)目前臨床上已經(jīng)證明了以Ca為補(bǔ)充劑每日劑量為1200mg，可以幫助PMS患者緩解疼痛、水潴留、食欲增加等癥狀(Thys-JacobsS，StarkeyP，BernsteinD，etal.Calciumcarbonateandthepremenstrualsyndromeeffectsonpremenstrualandmenstrualsymptoms.AmJObstetGynecol1998；179(2)444-452.)。它的代謝大部分經(jīng)糞便以原型排除，20％有腎臟排除。它的主要副作用是頭痛、便秘、腹痛等，同時(shí)由于它可以引起奶-堿綜合癥，不應(yīng)給于有腎臟損傷的人。VitB6曾廣泛用于治療PMS，但目前對(duì)是否該使用還用所爭(zhēng)議。它的作用機(jī)制是，它作為合成5-HT的輔因子，間接的參與PMS，雖然有研究表明使VitB6與對(duì)照組相比有一定的作用，但其應(yīng)用后的安全性仍然無(wú)法保證(WyattK，DimmockP，JonesP，etal.EfficacyofvitaminB-6inthetreatmentofpremenstrualsyndromesystematicreview.BMJ1999；318(7195)1375-1381.)。因?yàn)槟壳捌渲委烶MS的給藥劑量是每日100mg，但常規(guī)的給藥劑量只有每日2mg，而研究發(fā)現(xiàn)每日50-100mg的給藥劑量可以引起一神經(jīng)元損害為先兆的外周神經(jīng)障礙和某些神經(jīng)癥狀(SchaumbergH，KaplanJ，WindebankA.Sensoryneuropathyfrompyridoxineabuse-anewmegavitaminsnydrome.NEnglJMed1983；309445-448)。此外還有用每日服用200～400mg的Mg，或400IU的VitE也曾報(bào)道用抗PMS的作用(DavisA，JohnsonS.Clinicalmanagementguidelinesforpremenstrualsyndrome.ACOGPracticeBulletin，20001-8.)。3.23應(yīng)用利尿劑治療利尿劑治療PMS已有50年的歷史，其中以螺內(nèi)酯這類鉀保留劑治療PMS最為有效。月經(jīng)來(lái)潮練兩周每日給予100mg螺內(nèi)酯，可以用于治療PMS(JohnsonS.Premenstrualsyndrometherapy.ClinObstetGynecol1998；41(2)405-421.)。其作用機(jī)制是螺內(nèi)酯能夠競(jìng)爭(zhēng)抑制遠(yuǎn)端腎小管醛固酮受體，是氯化鈉和水的分泌增加，而使鉀離子和氫離子在體內(nèi)潴留；同時(shí)和雙氫睪丸酮抑制雄激素受體，抑制17-α羥化酶，從而限制孕酮的轉(zhuǎn)化，最終減少血清中睪丸素(GoldfienA.Thegonadalhormonesandinhibitors.KatzungB，ed.BasicandClinicalPharmacology.NorwalkAppletonandLange，1995608-636.)。此類藥物在1～3小時(shí)達(dá)最高血藥濃度經(jīng)肝臟代謝，在腎臟和膽汁中排除。其主要的副反應(yīng)為以引起意識(shí)混亂、咳嗽、腹瀉、口干、頭痛、高鉀血癥和性功能障礙。同時(shí)必須注意利尿劑可以血管內(nèi)流量減少，因此使用不當(dāng)可以導(dǎo)致腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)調(diào)節(jié)的反跳性的水潴留(SmithS.Treatmentforthephysicalsymptomsofpremenstrualsyndrome.SmithS，SchiffI，eds.ModernManagementofPremenstrualSyndrome.NewYorkNortonMedicalBooks，1993112-119.)。3.24應(yīng)用前列腺素抑制劑——非甾類抗炎藥(NSAID)制劑治療目前前列腺素衣被證明是一種有效的治療痛經(jīng)的常用藥。痛經(jīng)也是婦女見常見的一種疾病，她的主要癥狀是腹痛、肩痛、頭痛、惡心、腹瀉、疲勞等(Wise-BudoffP.Zomepiracsodiuminthetreatmentofprimarydysmenorrheasyndrome.NEnglJMed1982；307714.)。處了阿司匹林外，絕大部分的非甾類抗炎藥對(duì)治療PMS都是有效的。不同病人對(duì)不同的NSAID的反應(yīng)是不同的，通常選用的藥物和常用劑量為布洛芬(每日1200～3200mg)、酮洛芬(每日100～400mg)、萘普生(每日250～500mg)、消炎痛(每日50～75mg)、納布美酮(每日1000～2000mg)、羅啡咯啶(每日12.5～50mg)等。此類藥物的作用機(jī)制是可以抑制環(huán)氧合酶COX-1和COX-2的活性，使前列腺素的生成減少，以減少疼痛和炎癥反應(yīng)(LacyC，ArmstrongL，GoldmanM，etal.DrugInformationHandbook.Eighthedition.HudsonAPhA，2000.)。此類藥物在30～60分鐘一一種鎮(zhèn)痛藥物達(dá)到血藥濃度高峰，在腎臟排出。其主要的副反應(yīng)為頭暈、疲勞、惡心，消化道潰瘍或出血等不良反應(yīng)(Wise-BudoffP.UseofprostaglandininhibitorsinthetreatmentofPMS.ClinObstetandGynecol1987；30453-464.)。3.25溴隱亭治療雖然溴隱亭一直以來(lái)被用于治療乳腺痛，但日前的研究發(fā)現(xiàn)，每日給與1.25mg的藥物可以用于治療PMS(Wise-BudoffP.UseofprostaglandininhibitorsinthetreatmentofPMS.ClinObstetandGynecol1987；30453-464.)。溴隱亭是一種麥角生物堿衍生物，又多巴胺機(jī)動(dòng)作用，可以抑制泌乳素的生成(BjornA.Bromocriptineandpremenstrualsymptomsasurveyofdoubleblindtrials.ObstetandGynSurvey1983；38643-646.)。從而治療乳腺痛，這可能也是其對(duì)PMS有效的原因。它經(jīng)肝臟代謝在膽汁中消除。主要的副反應(yīng)為頭暈、惡心、眩暈、鼻塞，同時(shí)可以引起高或低血壓、昏厥、癲癇癥等。由外周血管疾病、冠狀動(dòng)疾病、腎臟肝臟損壞的病人都不能使用此藥。以上的各類方法主要針對(duì)輕度PMS或?qū)χ兄囟萈MS患者的身體癥狀進(jìn)行治療的，而對(duì)于嚴(yán)重PMDD的患者或?qū)σ陨细鞣N方法無(wú)明顯效果的病人主要的方法是給與選擇性5-HT重吸收抑制劑(簡(jiǎn)稱SSRIs)、阿普唑侖和激素治療。3.26選擇性5-HT重吸收抑制劑(SSRIs)研究表明SSRIs對(duì)于治療與情緒相關(guān)的PMDD療效很好。通常的給藥劑量是在月經(jīng)前7天到月經(jīng)開始前2天，不同藥物分別的給藥劑量為氟西汀(每日20～80mg)、舍曲林(每日25～50mg)、帕諾西汀(每日5～20mg)。多數(shù)的SSRIs不會(huì)促進(jìn)去甲腎上腺素、多巴胺的重吸收，也不能有效地結(jié)合α-腎上腺素、組胺、膽堿能受體(Sarafemfinallabeling.IndianapolisEliLillyandCompany，2000.)。所以SSRIs主要與中樞神經(jīng)對(duì)5-HT的再吸收抑制有關(guān)(FacchinettiF.Naproxensodiuminthetreatmentofpremenstrualsymptoms.GynecolObstetInvest1989；28205-208.)。其主要的副作用是頭痛、惡心眩暈、疲勞和性功能障礙。3.27阿普唑侖阿普唑侖原為一種抗焦慮的苯并二氮卓類藥物，但由于大有嚴(yán)重藥物成癮性，為了避免其濫用現(xiàn)象，通常不作為為治療PMDD的推薦用藥，而只作為二級(jí)用藥。只有在有嚴(yán)重患者精神癥狀的PMDD患者或?qū)ζ渌N藥出現(xiàn)明顯的副反應(yīng)是才使用。在月經(jīng)周期的第十五天開始，藥劑量是每日三次0.25～0.5mg，這中間斷時(shí)的給藥方式可以減少藥物的依賴性。它的作用機(jī)理是主要作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的某些位置，如邊緣系統(tǒng)、網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)區(qū)它可以與特異的立體專一的GABA受體結(jié)合產(chǎn)生抗焦慮作用。它在體內(nèi)1～2小時(shí)達(dá)到血藥濃度最高值，以尿液的形式排出體外。主要的副作用是嗜睡、記憶力損傷、疲勞、食欲改變和性欲減少等。3.28采用激素抑制排卵過程這是一種通過阻止女性排卵，停止月經(jīng)，使體內(nèi).激素不隨月經(jīng)周期的變化而變化，PMS患者不會(huì)因?yàn)閷?duì)體內(nèi)激素變化敏感，出現(xiàn)PMS癥狀，從而達(dá)到治療目的。常用的是口服避孕藥和促性腺釋放激素激動(dòng)劑?？诜茉兴幙梢杂糜谝种婆怕堰^程達(dá)到避孕效果，它可以調(diào)節(jié)體內(nèi)內(nèi)分泌，在治療痛經(jīng)方面的成果是肯定的，但是由于長(zhǎng)期服用或復(fù)合給藥會(huì)使人產(chǎn)生情緒變化(MortolaJ，F(xiàn)ischerU.Successfultreatmentofseverepremenstrualsyndromebycombineduseofgonadotropin-releasinghormoneagonistandestrogen/progestin.JClinEndocrinolMetab1991；72252A-252F.以及BancroftJ，RennieD.Theimpactoforalcontraceptivesontheexperienceofpremenstrualmood，clumsiness，foodcraving，andothersymptoms.JPsychosomRes1993；37195-202.以及46.BackstromM，Hansson-MalstromY，LindheB，etal.Oralcontraceptivesinpremenstrualsyndromearandomizedcomparisonoftriphasicandmonophasicpreparations.Contraception1992；46253-268.)，出現(xiàn)與情緒改變相關(guān)的副反應(yīng)甚至精神癥狀，因此一般推薦治療PMS使用小劑量給藥或單一藥物給藥(MuzinaK，GonsalvesL.Commonlyaskedquestionsaboutpremenstrualdysphoricdisorder.CleveClinicJofMed1998；65(3)142-149.)。促性腺釋放激素激動(dòng)劑治療法如注射殼丙瑞林；植入戈舍瑞林；那法瑞林鼻腔噴霧等。這類藥物通過抑制黃體素和促卵泡生成素，通過下丘腦-丘體-性腺激素軸減少雌激素水平，造成假孕和停經(jīng)狀態(tài)。但長(zhǎng)期是用的副反應(yīng)是造成經(jīng)前期綜合征。針對(duì)它副反應(yīng)較嚴(yán)重的現(xiàn)象，臨床目前提出了激素反補(bǔ)充治療法(簡(jiǎn)稱HRT-)既在給與促性腺釋放激素的同時(shí)在月經(jīng)周期的前21天給與每天6mg雌激素，周期的22～28天給與每日6mg的炔諾酮，臨床雙盲試驗(yàn)表明這種方法可以明顯地減少單獨(dú)使用促性腺釋放激素激動(dòng)劑所帶來(lái)的副作用(LeatherA，StuddJ，WatsonN，etal.Thetreatmentofseverepremenstrualsyndromewithgoserelinwithandwithout‘a(chǎn)dd-back’estrogentherapyaplacebo-controlledstudy.GynecolEndocrinol1999；1348-55.)。除了這兩種藥物的使用外也有采用卵巢切除后給予HRT方法來(lái)治療PMS的方法(CassonP，HahnP，VanVugtD，etal.Lastingresponsetoovariectomyinsevereintractablepremenstrualsyndrome.AmJObstetGynecol1990；16299-105.)。3.3中藥療法除了以上討論的各類方法外，目前人們發(fā)現(xiàn)應(yīng)用中藥補(bǔ)充治療PMS越來(lái)越受到各國(guó)臨床醫(yī)生、患者和研究人員得關(guān)注。目前中藥補(bǔ)充療法所用的藥物主要有3.31穗花牡荊居記載歐洲應(yīng)用穗花牡荊治療PMS已有悠久的歷史，它不僅可以緩解子宮痙攣疼痛，調(diào)節(jié)食欲，也可用于調(diào)經(jīng)(MuzinaK，GonsalvesL.Commonlyaskedquestionsaboutpremenstrualdysphoricdisorder.CleveClinicJofMed1998；65(3)142-149.)。據(jù)報(bào)道穗花牡荊的果實(shí)提取物可以結(jié)合多巴胺-2受體，減少泌乳素的分泌(TheCompleteGermanCommisionEMonographs-TherapeuticGuidetoHerbalMedicines.AustinAmericanBotanicalCouncil，1998.以及HardyM.Women’shealthseriesherbsofspecialinteresttowomen.JAmPharmAssoc2000；40234-242.)；此外報(bào)道了它的一種化學(xué)成分亞油酸有雌激素樣作用(ILiu，-J；Burdette，-J-E；Sun，-Y；Deng，-S；Schlecht，-S-M；Zheng，-W；Nikolic，-D；Mahady，-G；an-Breemen，-R-B；Fong，-H-H；Pezzuto，-J-M；Bolton，-J-L；Famsworth，-N-R.SolationoflinoleicacidasanestrogeniccompoundfromthefruitsofVitexagnus-castusL.(chaste-berry).Phytomedicine.2004Jan；11(1)18-23)；他體內(nèi)的黃酮成分有選擇性的雌激素受體ERss的活性(Jarry，-H；Spengler，-B；Porzel，-A；Schmidt，-J；Wuttke，-W；Christoffel，-V.Evidenceforestrogenreceptorbeta-selectiveactivityofVitexagnus-castusandisolatedflavones.Planta-Med.2003Oct；69(10)945-7)。3.32月見草(夜櫻花)月見草的揮發(fā)油成分中含有大量的脂肪油這些脂肪油油時(shí)合成前列腺素E1的重要元素，前列腺E1又是一種抗炎前列腺素，因此月見草可以明顯地減少與PMS相關(guān)的炎癥反應(yīng)(HardyM.Women’shealthseriesherbsofspecialinteresttowomen.JAmPharmAssoc2000；40234-242.以及ILiu，-J；Burdette，-J-E；Sun，-Y；Deng，-S；Schlecht，-S-M；Zheng，-W；Nikolic，-D；Mahady，-G；van-Breemen，-R-B；Fong，-H-H；Pezzuto，-J-M；Bolton，-J-L；Farnsworth，-N-R.SolationoflinoleicacidasanestrogeniccompoundfromthefruitsofVitexagnus-castusL.(chaste-berry).Phytomedicine.2004Jan；11(1)18-23)。3.33當(dāng)歸提取物當(dāng)歸提取物中富含大量的VitB12、煙酸、葉酸、阿魏酸等物質(zhì)。阿魏酸可以抗炎和鎮(zhèn)痛，在傳統(tǒng)的中藥用藥法中，當(dāng)歸常與其他藥物配伍使用，而其治療PMS的購(gòu)銷可能與其鎮(zhèn)痛和抗炎機(jī)制有關(guān)。還應(yīng)注意由于當(dāng)歸有誘發(fā)出血的危險(xiǎn)，健康凝血病人不能使用。中藥用于治療PMS的優(yōu)點(diǎn)在于其副作用小，適于長(zhǎng)期服用和調(diào)理，但其作用機(jī)理還需要進(jìn)一步的研究證明。綜上所述，對(duì)于PMS的治療原則應(yīng)遵循先選擇用藥風(fēng)險(xiǎn)由小到大的原則?，F(xiàn)調(diào)節(jié)病人的生活習(xí)慣，改變其生活方式，然后采用對(duì)癥治療，多采用鎮(zhèn)痛、利尿劑等；若無(wú)效則采用SSRIs、阿普唑侖等、最后使用抑制排卵的措施。隨著對(duì)PMS致病機(jī)理的研究深入，結(jié)合臨床試驗(yàn)和病人本身的特性，將會(huì)出現(xiàn)療效更給確切副作用更小的方法至于PMS。(二)紫花牡荊素的研究概況1、概述紫花牡荊素(Casticin-5，3′-dihydroxy-3，6，7，4′-tetramethoxyflavon)是牡荊屬中多中藥材中的黃酮類成分，是中藥材蔓荊子中中藥黃酮成分?！吨袊?guó)藥典》將紫花牡荊素作為蔓荊子生藥的鑒別成分，因此可以將其作為藥材和原料藥品質(zhì)評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)成分。2、植物資源和應(yīng)用概況紫花牡荊素主要存在于馬鞭草科牡荊屬多種植物中如蔓荊(VitextrifoliaL)、單葉蔓荊(VitextrifoliaL.var.simplicifoliaCham)、黃荊(VitexnegundoL)、牡荊(Vitexnegundovar.cannabifolia(Sieb.etZucc.)Hand.-Mazz.)等。而藥典收載的蔓荊子為馬鞭草科植物單葉蔓荊(VitextrifoliavarsimplicifoliaCham.)或蔓荊(V.trifoliaL.)的干燥果實(shí)，具有疏風(fēng)散熱、清利頭目的功效，歷代本草典籍均有記載。2.1化學(xué)成分迄今研究表明蔓荊植物主要含有揮發(fā)油、黃酮類(苷元及苷)、環(huán)烯醚萜(苷元及苷)、二萜(苷元及苷)、生物堿、甾體等成分。其中紫花牡荊素作為其主要成分，能夠阻斷由組胺誘導(dǎo)的雄性豚鼠氣管的自發(fā)性收縮，通過穩(wěn)定細(xì)胞膜，從而抑制組胺從肥大細(xì)胞中的釋放，體外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)紫花牡荊素能夠選擇性地抑制小鼠T淋巴細(xì)胞的增生，能抑制腫瘤細(xì)胞系的生長(zhǎng)，還具有抑制淋巴細(xì)胞增殖的活性，對(duì)淋巴細(xì)胞瘤有治療潛力(Gemini，A.，Subagus，W.，Ibnu，G.G.，Lukman，H.，Timmerman，H.，RobVerpoorte.，2002.TracheospasmolyticactivityofViteosin-AandVitexcarpinisolatedfromVitextrifolia.PlantaMed.68，1047-1049)最新研究表明，紫花牡荊素能通過促使癌細(xì)胞發(fā)生G2/M期阻滯，并最終誘導(dǎo)其凋亡來(lái)發(fā)揮抑制癌細(xì)胞增殖的抗癌活性(Kobayakawa，J.，Sato-Nishimori，F(xiàn).，Moriyasu，M.，Matsukawa，Y.，2004.G2-MarrestandantimitoticactivitymediatedbyCasticin，aflavonoidisolatedfromViticisfructus(Vitexrotundifolialinnefil.).CancerLett.208，59-64.)。迄今為止尚未見紫花牡荊素用于治療與經(jīng)前期綜合癥相關(guān)的疼痛和高血清泌乳素等癥狀的報(bào)道。2.2藥理作用2.21解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗過敏鐘世同等研究牡荊屬4種植物的藥理活性，結(jié)果表明對(duì)2，4-二硝基酚所致大鼠發(fā)熱的解熱作用強(qiáng)度三葉蔓荊子＞單葉蔓荊子＞黃荊子＞牡荊子(12g/kgig)，對(duì)熱板所致小鼠疼痛反應(yīng)的抑制強(qiáng)度黃荊子＞單葉蔓荊子＞三葉蔓荊子＞牡荊子(8g/kgig)，對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的抑制強(qiáng)度單葉蔓荊子＞黃荊子＞三葉蔓荊子＞牡荊子(8g/kgig)(鐘世同，1996)。OkuyamaE等采用鎮(zhèn)痛活性跟蹤篩選，顯示環(huán)烯醚萜類化合物穗花牡荊甙和3″-methoxyagnuside灌胃給藥50mg/kg時(shí)顯示鎮(zhèn)痛效果。蔓荊子乙醇提取物具有抗炎作用，其主要活性成分為紫花牡荊素。蔓荊子甲醇提取物300～1000mg/kg，對(duì)小鼠腹腔內(nèi)色素滲出的抑制率分別為13.18％和16％，說(shuō)明對(duì)毛細(xì)血管的通透性有一定的抑制作用。單葉蔓荊果實(shí)水提取物呈現(xiàn)劑量依賴性的抗過敏反應(yīng)和降低血漿組胺水平的作用(Heraso，etal.，1996；Shinetal.，2000；Youetal.，1998)。2.22祛痰、平喘蔓荊子具有祛痰、平喘作用。蔓荊子水煎液及醇浸液灌胃給藥，在小鼠酚紅排泄法中均能顯示明顯的祛痰作用(陳奇1991)。蔓荊子水煎液、石油醚提取物均能使離體豚鼠氣管標(biāo)本舒張，并能對(duì)抗組胺引起的氣管收縮，水提液及醇浸液還可抑制離體豚鼠胃腸平滑肌的自發(fā)活動(dòng)。2.23抗菌蔓荊子水煎劑體外實(shí)驗(yàn)表明其對(duì)枯草桿菌、蠟樣芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌等多種細(xì)菌均有不同程度的抗菌作用(Heraso，etal.，1996；)。三葉蔓荊葉的正己烷提取物顯示出較強(qiáng)的抗半裸鐮刀菌(Fusariumsp.)活性。2.24細(xì)胞毒作用三葉蔓荊莖枝、葉的正己烷和二氯甲烷粗提物對(duì)顯示較強(qiáng)的細(xì)胞毒作用(Heraso，etal.，1996；)。從蔓荊植物中分得的黃酮類成分2′，3′，5-三羥基-3，6，7-三甲氧基黃酮、蔓荊子黃素、蒿亭對(duì)人骨髓白血病HL-60細(xì)胞株增殖呈劑量依賴性抑制作用，主要機(jī)制為誘導(dǎo)凋亡(Koetal.，2002)。紫花牡荊素抑制EL-4和815.9腫瘤細(xì)胞系的生長(zhǎng)，還具有抑制淋巴細(xì)胞增殖的活性(IC50＝0.25～0.3μmol/L)，對(duì)淋巴細(xì)胞瘤有治療潛力(Youetal.，1998)。2.25抗突變Miyazawa等在對(duì)單葉蔓荊進(jìn)行抗突變活性研究時(shí)，從中分得二萜(+)-polyalthicacid，在濃度小于0.32μmol/ml時(shí)，對(duì)SOS誘導(dǎo)Trp-P-1(0.70μmol/plate)的抑制率達(dá)90％，IC50為0.22μmol/plate(王本祥1997)。2.26改善微循環(huán)家兔眼球結(jié)膜和大鼠腸系膜微循環(huán)障礙模型表明，蔓荊葉蒸餾提取物不僅能夠改善外周循環(huán)，而且對(duì)內(nèi)臟微循環(huán)亦有較好的改善作用。歐長(zhǎng)興等對(duì)126種中藥進(jìn)行體外抗凝血酶作用篩選，結(jié)果顯示蔓荊子具有較強(qiáng)的抗凝血作用。EmiOkugama報(bào)道采用小鼠扭體法合尾加壓法實(shí)驗(yàn)，顯示單葉蔓荊子具有血管舒張和鎮(zhèn)痛作用，并以血管舒張活性為指標(biāo)分離得到了木犀草素、金腰酚D、噴杜素及(2S)-5，3′-二羥基-6，7，4′-三甲氧基二氫黃酮(Okuyamaetal.，1998)。2.27降壓作用蔓荊子具有降壓作用，麻醉貓注射蔓荊子醇浸液1g/kg，能引起血壓明顯下降，最終導(dǎo)致動(dòng)物死亡。十二指腸給藥120分鐘后，貓血壓下降幅度超過50％，但蔓荊子水提物對(duì)血壓無(wú)明顯影響。蔓荊子降壓作用，且維持時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)心電圖無(wú)明顯異常。單葉蔓荊水提物能使兔血壓降低，但此作用可被阿托品、氯異吲哚胺阻斷，被毒扁豆堿增強(qiáng)，不受普萘洛爾的影響，說(shuō)明其降壓作用與興奮副交感神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān)(王本祥，1997)。2.29抗氧化作用日本學(xué)者Ono等在篩選天然抗氧化劑時(shí)發(fā)現(xiàn)，結(jié)果顯示單葉蔓荊的甲醇提取物的活性強(qiáng)于合成抗氧化劑3-叔丁基-4-羥基苯甲醚(簡(jiǎn)稱BHA)，追蹤分離得到松香烷型二萜類成分彌羅松酚(ferruginol)具有較強(qiáng)的抗氧化作用，應(yīng)用硫氰酸鐵法測(cè)定其濃度為0.5mmol/L時(shí)抗氧化活性比BHA強(qiáng)，達(dá)到L-半胱酸的一半，且對(duì)穩(wěn)定的1，1-二苯基-2-間三硝基苯肼(簡(jiǎn)稱DPPH)有清除作用(Masateruetal.，1999)。2.210酪氨酸酶抑制作用日本人福島信等以酪氨酸酶抑制活性為指標(biāo)篩選治療黑斑的藥物，結(jié)果顯示蔓荊子50％甲醇粗提取物對(duì)酪氨酸酶具有較強(qiáng)的抑制作用(Watanabeetal.，1979)。2.211催眠牡荊屬植物的催眠效果比較表明，對(duì)小鼠閾下催眠劑量戊巴比妥鈉的促進(jìn)睡眠的作用強(qiáng)度是黃荊子＞單葉蔓荊子＞牡荊子＞三葉蔓荊子(8g/kgig)(鐘世同1996)。2.212驅(qū)蚊及雌激素調(diào)節(jié)單葉蔓荊的葉常被作為藥用部位利用，也有利用此植物的葉子和細(xì)枝作為驅(qū)蟲劑的報(bào)道，并從中分離到有驅(qū)蚊活性的環(huán)烯醚萜(R)-、(S)-rotundial(Watanabeetal.，1979)。3、臨床應(yīng)用傳統(tǒng)上常以蔓荊子為主治療以頭痛為主的多種疼痛。臨床上單獨(dú)或以蔓荊子為主治療鼻炎、眶上神經(jīng)痛、血管性頭痛、三叉神經(jīng)痛、坐骨神經(jīng)痛、神經(jīng)根型頸椎病眩暈及腦鳴癥。日本學(xué)者報(bào)道以蔓荊子復(fù)方治療中耳炎(劉永業(yè)1999；王士國(guó)2001；李觀榮2000；王萬(wàn)袒1997)，取得較好的療效。臨床上還采用蔓荊子治療老年性白內(nèi)障、胃炎、急性乳腺炎及習(xí)慣性便秘等(董俊峰2000)。毒性蔓荊子所含生物堿于腸道吸收少，故毒性低，其所含多種季胺堿胃腸道給藥毒性也小，但注射給藥則可有較大毒性。蔓荊子小鼠腹腔注射的LD50為2.7g/kg。(三)常用中草藥有效成分的提取分離方法1、溶劑提取法(1)原理溶劑提取法是根據(jù)中草藥中各種化學(xué)成分在溶劑中的溶解性質(zhì)，選用對(duì)活性成分溶解度大，對(duì)不需要溶出的成分溶解度小的溶劑，將有效成分從藥材組織內(nèi)溶解出來(lái)的方法。當(dāng)溶劑加到中草藥原料(需適當(dāng)粉碎)中時(shí)，溶劑由于擴(kuò)散、滲透作用逐漸通過細(xì)胞壁透入到細(xì)胞內(nèi)，溶解了可溶性物質(zhì)，而造成細(xì)胞內(nèi)外的濃度差，于是細(xì)胞內(nèi)的濃溶液不斷向外擴(kuò)散，溶劑又不斷進(jìn)入藥材組織細(xì)胞中，如此多次往返，直至細(xì)胞內(nèi)外溶液濃度達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡時(shí)，將此飽和溶液濾出，繼續(xù)多次加入新溶劑，就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出。中草藥成分在溶劑中的溶解度直接與溶劑性質(zhì)有關(guān)。溶劑可分為親水性有機(jī)溶劑及親脂性有機(jī)溶劑，被溶解物質(zhì)也有親水性及親脂性的不同。有機(jī)化合物分子結(jié)構(gòu)中親水性基團(tuán)多，其極性大而疏于油；有的親水性基團(tuán)少，其極性小而疏于水。各類溶劑的性質(zhì)，同樣也與其分子結(jié)構(gòu)有關(guān)。這樣，發(fā)明人就可以通過對(duì)中草藥成分結(jié)構(gòu)分析，去估計(jì)它們的此類性質(zhì)和選用的溶劑?？偟恼f(shuō)來(lái)，只要中草藥成分的親水性和親脂性與溶劑的此項(xiàng)性質(zhì)相當(dāng)，就會(huì)在其中有較大的溶解度，即所謂“相似相溶”的規(guī)律。這是選擇適當(dāng)溶劑自中草藥中提取所需要成分的依據(jù)之一。(2)溶劑的選擇運(yùn)用溶劑提取法的關(guān)鍵，是選擇適當(dāng)?shù)娜軇?。溶劑選擇適當(dāng)，就可以比較順利地將需要的成分提取出來(lái)。選擇溶劑要注意以下三點(diǎn)①溶劑對(duì)有效成分溶解度大，對(duì)雜質(zhì)溶解度?。虎谌軇┎荒芘c中藥的成分起化學(xué)變化；③溶劑要經(jīng)濟(jì)、易得、使用安全等。常見的提取溶劑可分為以下三類①水水是一種強(qiáng)的極性溶劑。中草藥中親水性的成分，如無(wú)機(jī)鹽、糖類、分子不太大的多糖類、鞣質(zhì)、氨基酸、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸鹽、生物堿鹽及苷類等都能被水溶出。為了增加某些成分的溶解度，也常采用酸水及堿水作為提取溶劑。②親水性的有機(jī)溶劑也就是一般所說(shuō)的與水能混溶的有機(jī)溶劑，如乙醇(又稱酒精)、甲醇(又稱木精)、丙酮等，以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比較好，對(duì)中草藥細(xì)胞的穿透能力較強(qiáng)。親水性的成分除蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、果膠、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。難溶于水的親脂性成分，在乙醇中的溶解度也較大。還可以根據(jù)被提取物質(zhì)的性質(zhì)，采用不同濃度的乙醇進(jìn)行提取。用乙醇提取比用水量較少，提取時(shí)間短，溶解出的水溶性雜質(zhì)也少。乙醇為有機(jī)溶劑，雖易燃，但毒性小，價(jià)格便宜，來(lái)源方便，有一定設(shè)備即可回收反復(fù)使用，而且乙醇的提取液不易發(fā)霉變質(zhì)。由于這些原因，用乙醇提取的方法是歷來(lái)最常用的方法之一。甲醇的性質(zhì)和乙醇相似，沸點(diǎn)較低(64℃)，但有毒性，使用時(shí)應(yīng)注意。③親脂性的有機(jī)溶劑也就是一般所說(shuō)的與水不能混溶的有機(jī)溶劑，如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等。這些溶劑的選擇性能強(qiáng)，不能或不容易提出親水性雜質(zhì)。但這類溶劑揮發(fā)性大，多易燃(氯仿除外)，一般有毒，價(jià)格較貴，設(shè)備要求較高，且它們透入植物組織的能力較弱，往往需要長(zhǎng)時(shí)間反復(fù)提取才能提取完全。如果藥材中含有較多的水分，用這類溶劑就很難浸出其有效成分，因此，大量提取中草藥原料時(shí)，直接應(yīng)用這類溶劑有一定的局限性。(3)提取方法用溶劑提取中草藥成分，常用浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法及連續(xù)回流提取法等。同時(shí)，原料的粉碎度、提取時(shí)間、提取溫度、設(shè)備條件等因素也都能影響提取效率，必須加以考慮。①浸漬提取法(簡(jiǎn)稱浸漬法)浸漬法系將中草藥粉末或碎塊裝入適當(dāng)?shù)娜萜髦?，加入適宜的溶劑(如乙醇、稀醇或水)，浸漬藥材以溶出其中成分的方法。本法比較簡(jiǎn)單易行，但浸出率較差，且如用水為溶劑，其提取液易發(fā)霉變質(zhì)，須注意加入適當(dāng)?shù)姆栏瘎?。②滲漉提取法(簡(jiǎn)稱滲漉法)滲漉法是將中草藥粉末裝在滲漉器中，不斷添加新溶劑，使其滲透過藥材，自上而下從滲漉器下部流出浸出液的一種浸出方法。當(dāng)溶劑滲進(jìn)藥粉、溶出成分比重加大而向下移動(dòng)時(shí)，上層的溶液或稀浸液便置換其位置，造成良好的濃度差，使擴(kuò)散能較好地進(jìn)行，故浸出效果優(yōu)于浸漬法。但應(yīng)控制流速，在滲渡過程中隨時(shí)自藥面上補(bǔ)充新溶劑，使藥材中有效成分充分浸出為止?；虍?dāng)滲滴液顏色極淺或滲涌液的體積相當(dāng)于原藥材重的10倍時(shí)，便可認(rèn)為基本上已提取完全。在大量生產(chǎn)中常將收集的稀浸出液作為另一批新原料的溶劑之用。③煎煮提取法(簡(jiǎn)稱煎煮法)煎煮法是中國(guó)最早使用的傳統(tǒng)的浸出方法。所用容器一般為陶器、砂罐或銅制、搪瓷器皿，不宜用鐵鍋，以免藥液變色。直火加熱時(shí)最好時(shí)常攪拌，以免局部藥材受熱太高，容易焦糊。有蒸汽加熱設(shè)備的藥廠，多采用大反應(yīng)鍋、大銅鍋、大木桶，或水泥砌的池子中通入蒸汽加熱。還可將數(shù)個(gè)煎煮器通過管道互相連接，進(jìn)行連續(xù)煎浸。④加熱回流提取法應(yīng)用有機(jī)溶劑加熱提取，需采用回流加熱裝置，以免溶劑揮發(fā)損失。小量操作時(shí)，可在圓底燒瓶上連接回流冷凝器。瓶?jī)?nèi)裝藥材約為容量的20％～60％，溶劑浸過藥材表面約1～2cm。在水浴中加熱回流，一般保持沸騰3～6小時(shí)，放冷過濾，再在藥渣中加溶劑，作第二、三次加熱回流分別約半小時(shí)，或至基本提盡有效成分為止。此法提取效率較冷浸法高，大量生產(chǎn)中多采用連續(xù)提取法。⑤連續(xù)回流提取法應(yīng)用揮發(fā)性有機(jī)溶劑提取中草藥有效成分，不論小型實(shí)驗(yàn)或大型生產(chǎn)，均以連續(xù)提取法為好，而且需用溶劑量較少，提取成分也較完全。實(shí)驗(yàn)室常用脂肪提取器或稱索氏提取器。連續(xù)提取法，一般需數(shù)小時(shí)才能提取完全。提取成分受熱時(shí)間較長(zhǎng)，遇熱不穩(wěn)定易變化的成分不宜采用此法。2、分離和純化方法上述提取法所得到的中草藥提取液或提取物仍然是混合物，需進(jìn)一步除去雜質(zhì)，分離并進(jìn)行精制。(1)溶劑分離法一般是將上述總提取物，選用三、四種不同極性的溶劑，由低極性到高極性分步進(jìn)行提取分離。水浸膏或乙醇浸膏常為膠狀物，難以均勻分散在低極性溶劑中，故不能提取完全，可拌入適量惰性填充劑，如硅藻土或纖維粉等，然后低溫或自然干燥，粉碎后，再以選用溶劑依次提取，使總提取物中各組成成分，依其在不同極性溶劑中溶解度的差異而得到分離。利用中草藥化學(xué)成分，在不同極性溶劑中的溶解度進(jìn)行分離純化，是最常用的方法。(2)溶劑萃取法①萃取法溶劑提取萃取法又簡(jiǎn)稱萃取法，是利用混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離的方法。萃取時(shí)如果各成分在溶劑中分配系數(shù)相差越大，則分離效率越高；如果在水提取液中的有效成分是親脂性的物質(zhì)，一般多用親脂性有機(jī)溶劑，如苯、氯仿或乙醚進(jìn)行萃取，如果有效成分是偏于親水性的物質(zhì)，在親脂性溶劑中難溶解，就需要改用弱親脂性的溶劑，例如乙酸乙酯、丁醇等。還可以在氯仿、乙醚中加入適量乙醇或甲醇以增大其親水性。提取黃酮類成分時(shí)，多用乙酸乙脂和水萃取。提取親水性強(qiáng)的皂苷則多選用正丁醇、異戊醇和水作萃取。不過，一般有機(jī)溶劑親水性越大，與水作萃取的效果就越不好，因?yàn)槟苁馆^多的親水性雜質(zhì)伴隨而出，對(duì)有效成分進(jìn)一步精制影響很大。②逆流連續(xù)萃取法是一種連續(xù)的溶劑萃取法。其裝置可具有一根、數(shù)根或更多的萃取管。管內(nèi)用小瓷圈或小的不銹鋼絲圈填充，以增加溶劑萃取時(shí)的接觸面。如果一種中草藥的水浸液需要用比水輕的苯、乙酸乙酯等進(jìn)行萃取，則需將水提濃縮液裝在萃取管內(nèi)，而苯、乙酸乙酯貯于高位容器內(nèi)。萃取是否完全，可取樣品用薄層層析、紙層析及顯色反應(yīng)或沉淀反應(yīng)進(jìn)行檢查。③逆流分配法逆流分配法又稱逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法。逆流分配法與溶劑逆流萃取法原理一致，但加樣量一定，并不斷在一定容量的溶劑中，經(jīng)多次移位萃取分配而達(dá)到混合物的分離。④液滴逆流分配法液滴逆流分配法又稱液滴逆流層析法。為近年來(lái)在逆流分配法基礎(chǔ)上改進(jìn)的溶劑萃取法。對(duì)溶劑系統(tǒng)的選擇基本同逆流分配法，但要求能在短時(shí)間內(nèi)分離成，并可生成有效的液滴。由于移動(dòng)相形成液滴，在細(xì)的分配萃取管中與固定相有效地接觸、摩擦不斷形成新的表面，促進(jìn)溶質(zhì)在溶劑中的分配，故其分離效果往往比逆流分配法好。(3)大孔吸附樹脂法大孔吸附樹脂是20世紀(jì)60年代發(fā)展起來(lái)的一類有機(jī)高聚物吸附劑，具有良好的吸附性能，近十余年來(lái)逐漸被應(yīng)用于中草藥化學(xué)成分的提取分離和中藥新藥的開發(fā)研制。大孔吸附樹脂為吸附和篩選原理相結(jié)合的分離材料。它的吸附性是由于范德華引力或生成氫鍵的結(jié)果。篩選原理是由于其本身多孔性結(jié)構(gòu)所決定。由于吸附和篩選原理，有機(jī)化合物根據(jù)吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附樹脂上經(jīng)一定的溶劑洗脫而分開。這使得有機(jī)化合物尤其是水溶性化合物的提純得以大大簡(jiǎn)化。大孔吸附樹脂的骨架由苯乙烯和二乙烯苯縮聚而生成，由于改性劑的加入，大孔吸附樹脂的極性發(fā)生改變，按照樹脂的表面性質(zhì)，吸附樹脂一般分為非極性、中極性和極性三類。非極性吸附樹脂是由偶極矩很小的單體聚合物制得的不帶任何功能基的吸附樹脂。典型的例子是苯乙烯-二乙烯苯體系的吸附樹脂，如D101、XAD-1、DiaionHP-10大孔吸附樹脂。中極性吸附樹脂指含酯基的吸附樹脂，如丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯與雙甲基丙烯酸酯等交聯(lián)的一類共聚物。它是在非極性大孔吸附樹脂的基礎(chǔ)上，加入丙烯酸甲酯或丙烯腈縮聚而成，如中國(guó)國(guó)內(nèi)經(jīng)常使用的AB-8大孔吸附樹脂。極性吸附樹脂是指含酰胺基、腈基、酚羥基等含氮、氧、硫極性功能基的吸附樹脂。此外，有時(shí)把含氮、氧、硫等配體基團(tuán)的離子交換樹脂稱作強(qiáng)極性吸附樹脂，強(qiáng)極性吸附樹脂與離子交換樹脂的界限很難區(qū)別。極性大孔吸附樹脂可以由甲基丙烯酸甲酯、丙烯酰胺或亞砜類縮聚而成，如日本三菱化工的DiaionHP2MG、美國(guó)Rohm-hass公司的XAD-10，XAD-9大孔吸附樹脂。與活性炭和其它吸附劑相比，大孔吸附樹脂具有很多的優(yōu)點(diǎn)，如對(duì)某種物質(zhì)的吸附選擇性較高；物理化學(xué)穩(wěn)定性和機(jī)械強(qiáng)度較好；品種規(guī)格較多，可根據(jù)需要改變樹脂物理或化學(xué)結(jié)構(gòu)；吸附樹脂一般為球狀顆粒，流體阻力較小等等。因而被廣泛應(yīng)用于化工、醫(yī)藥等領(lǐng)域，近年來(lái)關(guān)于大孔吸附樹脂在天然產(chǎn)物提取分離中的應(yīng)用研究報(bào)道越來(lái)越多。大孔吸附樹脂對(duì)中草藥化學(xué)成分如生物堿、黃酮、皂苷、香豆素及其他一些苷類成分都有一定的吸附作用。對(duì)糖的吸附能力很差，對(duì)色素的吸附能力較強(qiáng)。(4)沉淀法是在中草藥提取液中加入某些試劑使產(chǎn)生沉淀，以獲得有效成分或除去雜質(zhì)的方法。如鉛鹽沉淀法鉛鹽沉淀法為分離某些中草藥成分的經(jīng)典方法之一。由于醋酸鉛及堿式醋酸鉛在水及醇溶液中，能與多種中草藥成分生成難溶的鉛鹽或絡(luò)鹽沉淀，故可利用這種性質(zhì)使有效成分與雜質(zhì)分離。然后將鉛鹽沉淀懸浮于新溶劑中，通以硫化氫氣體，使分解并轉(zhuǎn)為不溶性硫化鉛而沉淀。(5)鹽析法鹽析法是在中草藥的水提液中，加入無(wú)機(jī)鹽至一定濃度，或達(dá)到飽和狀態(tài)，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而與水溶性大的雜質(zhì)分離。常用作鹽析的無(wú)機(jī)鹽有氯化鈉、硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等。(6)透析法透析法是利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過半透膜，而大分子物質(zhì)不能通過半透膜的性質(zhì)，達(dá)到分離的方法。反之也可將大分子的雜質(zhì)留在半透膜內(nèi)，而將小分子的物質(zhì)通過半透膜進(jìn)入膜外溶液中，而加以分離精制。(7)結(jié)晶、重結(jié)晶和分步結(jié)晶法鑒定中草藥化學(xué)成分，研究其化學(xué)結(jié)構(gòu)，必須首先將中草藥成分制備成單體純品。在常溫下，物質(zhì)本身性質(zhì)是液體的化合物，可分別用分餾法或?qū)游龇ㄟM(jìn)行分離精制。一般地說(shuō)，中草藥化學(xué)成分在常溫下多半是固體的物質(zhì)，都具有結(jié)晶體的通性，可以根據(jù)溶解度的不同用結(jié)晶法來(lái)達(dá)到分離精制的目的。3、常用干燥方法(1)真空干燥是基于這樣一基本原理水的飽和蒸氣壓與溫度緊密相關(guān)，在真空狀態(tài)下，水的沸點(diǎn)降低，即在真空下操作也就是在低溫下操作，可避免在高溫下營(yíng)養(yǎng)成分如維生素等的破壞，同時(shí)提高了干燥速度。真空干燥在食品、制藥、化工等行業(yè)有廣泛的應(yīng)用，中國(guó)也開發(fā)和引進(jìn)了各種真空干燥設(shè)備，其結(jié)構(gòu)形式多種多樣。常用的形式主要有箱式真空干燥器、雙錐式真空干燥器、帶式真空干燥器等。這些傳統(tǒng)的真空干燥裝置主要采用熱風(fēng)，蒸汽或電等加熱，利用熱傳導(dǎo)、對(duì)流或輻射原理將熱量從外部傳到物料內(nèi)部。真空干燥具有干燥溫度低，干燥室內(nèi)相對(duì)缺氧，可避免脂肪氧化，色素褐變等一系列優(yōu)點(diǎn)，適合于熱敏感性食品物料的干燥，此外設(shè)備成本、干燥費(fèi)用也相對(duì)較低。(2)噴霧干燥是流化技術(shù)用于液態(tài)物料干燥的一種方法。因是瞬間干燥，特別適用于熱敏性物料，故所得產(chǎn)品質(zhì)量好，保持原來(lái)的色香味，且易溶解。利用噴霧干燥來(lái)制備微囊的研究正在進(jìn)行，它是將心料混懸在衣料的溶液中，經(jīng)離心噴霧器將其噴入熱氣流中，所得的產(chǎn)品是衣料包心料而成的微囊，這種微囊粉末可采用于直接壓片，也可制備膠囊劑、糖漿劑或混懸劑。(3)冷凍干燥是將干燥液體物料冷凍成固體，在低溫減壓條件下利用冰的升華性能，使物料低溫脫水而達(dá)到干燥的一種方法。由于物料在高度真空及低溫條件下干燥，故對(duì)某些極不耐熱物品的干燥很適合。王大林報(bào)道了一種噴霧通氣凍干新技術(shù)，是利用冷的空氣或氮?dú)庾鳛榻橘|(zhì)，迅速流經(jīng)凍結(jié)物使水升華，噴霧凍干制得的產(chǎn)品微粒小、干燥快、時(shí)間短、均勻、流動(dòng)性好，并具良好的速溶性。近年來(lái)，對(duì)膏狀物料和粘稠物料干燥的研究取得了較大進(jìn)展，流態(tài)化技術(shù)、噴射技術(shù)、惰性載體技術(shù)，則是在此研究基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。旋轉(zhuǎn)閃蒸干燥機(jī)、熱噴射氣流干燥機(jī)、惰性載體干燥機(jī)均適合熱敏性物料和膏狀物料的干燥。這些新的研究成果用于中藥制劑生產(chǎn)，將大大改善中藥加工的技術(shù)水平，提高生產(chǎn)效率。(4)遠(yuǎn)紅外加熱干燥法是一項(xiàng)新的干燥技術(shù)，其干燥原理是將電能轉(zhuǎn)變?yōu)檫h(yuǎn)紅外輻射，從而被藥材的分子吸收，產(chǎn)生共振，引起分子和原子的振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)，導(dǎo)致物體變熱，經(jīng)過熱擴(kuò)散、蒸發(fā)和化學(xué)變化，最終達(dá)到干燥的目的。遠(yuǎn)紅外干燥可節(jié)省電能20％～50％，效果較好。(5)微波干燥法是一項(xiàng)20世紀(jì)60年代迅速發(fā)展起來(lái)的新技術(shù)，微波干燥實(shí)際上是通過感應(yīng)加熱和介質(zhì)加熱，使被干燥物中的水分和脂肪不同程度地吸收微波能量，并把它轉(zhuǎn)變?yōu)闊崃繌亩_(dá)到干燥的目的。微波干燥可殺滅微生物和霉菌，并具有消毒作用。目前中國(guó)生產(chǎn)的微波加熱成套設(shè)備有915mhz和2450mhz兩個(gè)頻率。4、超臨界CO2萃取方法(1)有關(guān)動(dòng)、植物脂肪油成分的提取方法有水煮法、水媒分離法、分子蒸餾和減壓蒸餾法、金屬加合法、萃取結(jié)晶法、分盤冷凍壓榨法和有機(jī)溶劑法等。采用水煮加熱法，因加熱時(shí)間長(zhǎng)、溫度高，易使對(duì)熱不穩(wěn)定的揮發(fā)成分發(fā)生變化，如一些不飽和脂肪酸的氧化。水媒分離法，此分離法的明顯優(yōu)點(diǎn)是消除了有機(jī)溶劑法造成的高費(fèi)用和公害，但是這種技術(shù)的缺點(diǎn)是得到的飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的純度或級(jí)別不如有機(jī)溶劑分離法高。分子蒸餾和減壓蒸餾法為減少熱變性，需用尿素加合物等方法來(lái)除去大部分飽和脂肪酸，在得到的產(chǎn)品中必須將其除去；雖然可得到較純的脂肪酸，但需幾步才能達(dá)到目標(biāo)，較費(fèi)時(shí)、費(fèi)力，增加了生產(chǎn)成本。金屬加合法分離需要較低的低溫處理，最后還要設(shè)法去除金屬離子，清除不盡還會(huì)造成金屬離子污染。萃取結(jié)晶法得到脂肪酸純度較高，在較低的溫度下進(jìn)行，能防止脂肪酸的氧化，但時(shí)間較長(zhǎng)，不太適用于大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。分盤冷凍壓榨法缺點(diǎn)是，安放盤架和液壓機(jī)的冷凍室需要數(shù)千平方米的面積和龐大的冷卻系統(tǒng)，大的設(shè)施需要多人操作，勞動(dòng)強(qiáng)度高，分離速度緩慢，效率低，不能連續(xù)操作。有機(jī)溶劑法是采用石油醚或乙醚有機(jī)溶劑在水浴上加熱情況下，進(jìn)行回流循環(huán)提取；由于所采用的有機(jī)溶劑如石油醚或乙醚等均為一種低沸點(diǎn)物質(zhì)，易燃易爆，同時(shí)，有機(jī)溶劑的使用一方面會(huì)污染環(huán)境，另一方面有機(jī)溶劑有可能在提取物中有殘留，會(huì)影響提取物在醫(yī)藥上的進(jìn)一步應(yīng)用。(2)有關(guān)動(dòng)、植物脂肪油成分的超臨界CO2萃取方法一種流體當(dāng)處在其臨界溫度和壓力狀態(tài)時(shí)，被稱為超臨界流體。由于超臨界流體的密度接近于液體，具有與液體溶劑相當(dāng)?shù)妮腿∧芰ΑＳ志哂信c氣體相當(dāng)?shù)牡驼扯?，擴(kuò)散能力比液體要大100倍，因而具有較高的傳質(zhì)性。采用超臨界萃取的時(shí)候，利用超臨界流體的這些性質(zhì)，使之與待分離的物質(zhì)相接觸穿透基體，從中萃取出目標(biāo)物質(zhì)。然后利用降壓和/或升溫的辦法降低其密度，從而降低溶質(zhì)在其中的溶解度，使被萃取物與溶劑分離。因?yàn)椴煌奈镔|(zhì)在相同的萃取條件下溶解度是不同的，因而有可能借助這種差異將它們進(jìn)一步分開。超臨界流體萃取常常選用CO2等臨界溫度低且化學(xué)惰性的物質(zhì)為萃取劑，它特別適用于熱敏物質(zhì)和易氧化物質(zhì)的分離，因此非常適用于對(duì)于動(dòng)物油脂的提取分離。因此，本發(fā)明采取該方法，能夠制備高純度的被提取物的脂肪油。超臨界CO2萃取方法是這樣提取的把干燥的被提取物的粗粉放在超臨界萃取設(shè)備中用CO2進(jìn)行萃取，減壓后即得被提取物的脂肪油，室溫條件下呈淺黃色透明油狀；提取的被提取物的脂肪油中總脂肪酸的純度在40以上，優(yōu)于其他提取方法；總脂肪酸一般包括油酸、亞油酸、棕櫚酸以及余量的其他組分等。超臨界CO2萃取被提取物的脂肪油的方法包括如下步驟(1)將干燥的被提取物粉碎至10～30目后，置于超臨界萃取釜中，連續(xù)地通入超臨界狀態(tài)下的CO2進(jìn)行萃取，優(yōu)選的條件一般是CO2流量10～55kg/h·kg原料、壓力5～50Mpa、溫度15～75℃、時(shí)間0.5～6h；進(jìn)一步優(yōu)選的條件一般是CO2流量45kg/h·kg原料、壓力35Mpa、溫度50℃、時(shí)間1h；(2)將萃取了被提取物的脂肪油的CO2減壓至1～12MPa，即可獲得在室溫條件下被提取物的脂肪油，被提取物的脂肪油中總脂肪酸的純度在40％以上，萃取物的理化性狀和脂肪酸純度都優(yōu)于其他提取方法。萃取條件的選擇是通過以下辦法實(shí)現(xiàn)的首先選定四因素、三水平，根據(jù)正交設(shè)計(jì)方法，按L9(34)交設(shè)計(jì)表安排實(shí)驗(yàn)(正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)安排參考郭祖超主編的《醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)》，人民軍醫(yī)出版社，1999年第一版)。從正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果，分析得到萃取工藝條件。對(duì)超臨界CO2萃取的被提取物的脂肪油進(jìn)行脂肪酸甲酯化后，進(jìn)行氣相色譜—質(zhì)譜分析。超臨界CO2萃取被提取物的脂肪油的制備方法不使用有機(jī)溶劑等物質(zhì)，不會(huì)污染環(huán)境，也不存在有害溶劑殘留等問題，而且操作簡(jiǎn)便、萃取時(shí)間短、產(chǎn)品純度高，使用的CO2廉價(jià)而且可重復(fù)循環(huán)使用，工業(yè)生產(chǎn)成本低廉。經(jīng)文獻(xiàn)檢索等，到目前為止，尚未發(fā)現(xiàn)有對(duì)以蔓荊子為原料制備的提取物紫花牡荊素新的用途方面的有關(guān)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所需要解決的技術(shù)問題是公開了一種中藥提取物紫花牡荊素新的用途，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷。也就是說(shuō)，本發(fā)明意在于明確一種中藥提取物紫花牡荊素的新用途；即本發(fā)明涉及一種以蔓荊子為原料制備的中藥提取物紫花牡荊素的新用途。經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，紫花牡荊素對(duì)與經(jīng)前期綜合征密切相關(guān)病癥如高泌乳素、周期性乳房痛、痛經(jīng)等，有降低血清泌乳素和鎮(zhèn)痛活性作用，可用于制備防治經(jīng)前期綜合征及與其密切相關(guān)病癥的藥物及食品等。所述的抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品是指用于診斷、檢測(cè)、預(yù)防、保護(hù)、治療或研究經(jīng)前期綜合征及相關(guān)病癥的產(chǎn)品；其中，所述的經(jīng)前期綜合征相關(guān)病癥是包括高泌乳素、周期性乳房痛或痛經(jīng)等中的一種或多種；所述的抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品是包括醫(yī)藥、食品或飲料領(lǐng)域產(chǎn)品中的一種或多種，優(yōu)選藥物、試劑、食品、保健食品、添加劑或飲料中的一種或多種，進(jìn)一步優(yōu)選抗經(jīng)前期綜合征藥物、抗經(jīng)前期綜合征試劑、抗經(jīng)前期綜合征食品或抗經(jīng)前期綜合征飲料等中的一種或多種，最優(yōu)選抗經(jīng)前期綜合征藥物。(一)技術(shù)構(gòu)思自主開發(fā)創(chuàng)新藥物是中國(guó)目前的一項(xiàng)緊迫任務(wù)。中國(guó)中醫(yī)藥學(xué)具有悠久的歷史，用中草藥預(yù)防和治療疾病方面也積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，尤其是發(fā)現(xiàn)中藥的有效成分或發(fā)現(xiàn)有效成分的新用途是一條有效的捷徑，對(duì)其進(jìn)行開發(fā)大有作為，將具有重大前景，因此中藥的開發(fā)利用是發(fā)揮中國(guó)藥物研制的優(yōu)勢(shì)之所在。我國(guó)中醫(yī)藥在治療PMS方面歷史悠久，積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，具有廣闊的前景。自明代《丹溪心法附余》始，及其后《證治要訣》、《醫(yī)學(xué)入門》、《濟(jì)陰綱目》、《醫(yī)宗金鑒》、《傅青主女科》等中醫(yī)典籍所述“經(jīng)行泄瀉”、“經(jīng)行浮腫”、“經(jīng)行頭痛”、“經(jīng)行發(fā)熱”、“經(jīng)前瀉水”、“經(jīng)前便血”等癥，現(xiàn)代婦科中醫(yī)典籍多所述月經(jīng)前后諸癥，都屬于PMS的范疇。病機(jī)以肝失疏泄為主，治療以疏肝理氣、活血通絡(luò)為法，用藥柴胡疏肝湯、逍遙散、血府逐瘀湯、坤月寧、經(jīng)前平。根據(jù)中醫(yī)理論，本病為經(jīng)行情志異常。主要發(fā)生原理在于，易怒傷肝，肝氣不舒，進(jìn)而造成肝心陰血不足，神不守舍。而蔓荊子有補(bǔ)肝升陽(yáng)之用，具有較好鎮(zhèn)痛、催眠、抗菌、抗炎、抗過敏、改善微循環(huán)、抗氧化等多種作用，可有效地針對(duì)PMS產(chǎn)生的乳房腫痛，腹痛，水腫等癥狀發(fā)揮作用。在化學(xué)成分上也與歐洲用于治療PNS的傳統(tǒng)中藥穗花牡荊相似。國(guó)外已將單葉蔓荊的同屬近緣植物穗花牡荊(Vitexagnus-castusL.)的提取物作為保健品用于治療PMS，取得了顯著的效果，在歐美具有較高的市場(chǎng)占有率，其最新產(chǎn)品Ze440已在德國(guó)上市(希雨2001)。穗花牡荊我國(guó)不產(chǎn)，但單葉蔓荊主產(chǎn)我國(guó)，且資源豐富，與穗花牡荊有較大的化學(xué)相似性，紫花牡荊素等有效成分含量高于穗花牡荊，品質(zhì)較穗花牡荊更優(yōu)。發(fā)明人對(duì)臨床廣泛應(yīng)用的中藥以及復(fù)方和提取物進(jìn)行調(diào)查研究，并結(jié)合前期研究的工作基礎(chǔ)，找到了具有防治經(jīng)前期綜合征作用的中藥提取物紫花牡荊素，提取比較簡(jiǎn)單，易于研究開發(fā)。該中藥從古自今應(yīng)用歷史悠久，安全性可得到保障。以前沒有用作防治經(jīng)前期綜合征的記錄，發(fā)明人目前發(fā)現(xiàn)了它的新用途，并對(duì)其使用方法、劑量等進(jìn)行了優(yōu)化。發(fā)明人研究后發(fā)現(xiàn)，紫花牡荊素具有鎮(zhèn)痛和降低血清泌乳素的功效，達(dá)到防治經(jīng)前期綜合征及其相關(guān)病癥的目的。根據(jù)發(fā)明人以上的見解，選擇經(jīng)現(xiàn)代藥理研究具有降低小鼠血清泌乳素作用的中藥提取物紫花牡荊素，來(lái)治療經(jīng)前期綜合征，并取得較好的臨床療效。發(fā)明人檢索了《新編國(guó)家中成藥》、《臨床常用方劑手冊(cè)》、《中國(guó)常用中成藥大全》等書籍，并對(duì)經(jīng)前期綜合征的醫(yī)院用藥和市售藥進(jìn)行了調(diào)查統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)由于對(duì)其化學(xué)成分研究不深入，藥理篩選不足，導(dǎo)致活性部位和活性成分不明確以及沒有可行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，限制了以蔓荊子為原料制備提取物的進(jìn)一步開發(fā)和利用。經(jīng)過化學(xué)成分研究，證明以蔓荊子為原料制備提取物活性部位主要以黃酮和萜類為主，其中黃酮類成分占45％，萜類成分占20％；采用色譜、波譜等分離、鑒定技術(shù)，與標(biāo)準(zhǔn)品比較后，分離得到了黃酮部分主要含紫花牡荊素(vitexcarpin)、木犀草素(Luteolin)、蔓荊子蒿素(Artemetin)等成分，以及萜類部分少量蔓荊呋喃(rotundifuran)、Vitexilactone、紫花牡荊苷Agnuside等成分。而根據(jù)文獻(xiàn)檢索，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)黃酮類具有抗氧化、抗菌消炎、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、舒張血管等多種藥理活性外，還發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)與己烯雌酚相似而具有雌性激素樣作用，它與甾類激素一樣具有興奮和抑制雙重效應(yīng)(董艷榮2006)；萜類成分的活性報(bào)道并不是很多，總黃酮類化合物大多具有多種顯著的藥理活性，而在總黃酮中紫花牡荊素占47.7％，發(fā)明人從而推測(cè)以蔓荊子為原料制備提取物紫花牡荊素具有防治經(jīng)前期綜合征及其相關(guān)病癥作用的臨床藥效，應(yīng)主要是通過活性部位以蔓荊子為原料制備的提取物紫花牡荊素藥效來(lái)發(fā)揮的，研究結(jié)果也證明和證實(shí)了一種中藥提取物紫花牡荊素具有顯著的藥理活性。也就是說(shuō)，本發(fā)明通過對(duì)包括以蔓荊子為原料制備的中藥提取物紫花牡荊素進(jìn)行系統(tǒng)的活性和應(yīng)用研究，并篩選和證明該提取物的新用途。(二)一種中藥提取物紫花牡荊素的制備方法發(fā)明人通過對(duì)以蔓荊子為原料制備提取物紫花牡荊素等進(jìn)行系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)研究和理論探索，包括化學(xué)成分分離、純化和結(jié)構(gòu)鑒定，藥理，藥劑，中藥配伍等實(shí)驗(yàn)研究和分析，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明以蔓荊子為主要原料制備的提取物紫花牡荊素對(duì)經(jīng)前期綜合征具有明顯的調(diào)節(jié)作用，能夠用于制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品，尤其是抗經(jīng)前期綜合征藥物。其提取物可采用的方法制備，經(jīng)藥理實(shí)驗(yàn)證明其對(duì)經(jīng)前期綜合征具有顯著的防治作用。該中藥提取物紫花牡荊素的組成為紫花牡荊素占47.4～99.9％，其他成分占0.1～52.6％；優(yōu)選紫花牡荊素占85.0～99.9％，進(jìn)一步優(yōu)選紫花牡荊素占98.0～99.9％。本發(fā)明提取物可采用以下方法制備(1)制備提取液稱取蔓荊子藥材干燥粗粉，用等體積60％乙醇浸泡過夜，60％滲漉至近無(wú)色及黃酮類檢定反應(yīng)陰性，收集滲漉液，得提取液；本步驟也可采用5～10倍提取溶劑回流提取一到多次，得提取液。本步驟所用提取溶劑優(yōu)選30～95％乙醇或甲醇，特別優(yōu)選70～95％乙醇?；亓魈崛r(shí)優(yōu)選8倍提取溶劑，回流3次，每次2小時(shí)。(2)精制濃縮干燥將上述提取液進(jìn)行濃縮如減壓回收溶劑等，得濃縮液。將濃縮液減壓濃縮至干，干燥后粉碎，即得本發(fā)明提取物的粉末。(3)分離純化濃縮液依次以二氯甲烷、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，分別減壓濃縮得相應(yīng)部位。將二氯甲烷部位經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜，洗脫溶劑選擇石油醚∶乙酸乙酯(30∶1～1∶1)及氯仿∶甲醇(20∶1～1∶1)，并以SephadexLH-20純化，得高純度的提取物(90％以上)。本發(fā)明所指大孔樹脂選自AB-8、D-101、ZTC-1、SP905、，優(yōu)選ZTC-1和SP-905。根據(jù)需要，還可以增加以下操作步驟(4)壓片若將所得提取物粉末或高純度的提取物(90％以上)與片劑常用輔料混合、壓片，即得片劑，也可按常規(guī)制成膠囊劑、滴丸劑、丸劑、注射劑、膏劑、合劑等不同劑型。因此，本發(fā)明提取物經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明具有顯著的防治經(jīng)前期綜合征的作用，故可用于制備防治經(jīng)前期綜合征的藥物或食品，例如其能夠與藥學(xué)上可接受的輔料制備成任何常用藥物劑型。(三)中藥提取物的成分驗(yàn)證方法及其結(jié)果取蔓荊子粉末5g，加石油醚(60～90℃)50ml，水浴上加熱回流提取2h，濾過，棄去石油醚液，殘?jiān)鼡]干石油醚，加丙酮80ml回流提取1.5h，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。另取蔓荊子黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》1995年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10L1，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G-0.1％CMC-Na薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯(3∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％三氯化鋁乙醇液，在自然光下觀察，供試品在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)(Rf＝0.5)。含量測(cè)定方法及結(jié)果1、儀器、試劑、材料Agilentseries1100高效液相色譜儀四元泵DAD檢測(cè)器乙腈(色譜純)磷酸(AR)國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司娃哈哈純凈水紫花牡荊素對(duì)照品2004年4月自提(純度98.94％)實(shí)驗(yàn)材料同前2、色譜條件色譜柱ZORBAX80A，EXTEND-C18，4.6×250mm流動(dòng)相0min乙腈∶0.5％磷酸＝45∶5510min乙腈∶0.5％磷酸＝53.25∶46.7510.1min乙腈∶0.5％磷酸＝100∶020min乙腈∶0.5％磷酸＝100∶020.1min乙腈∶0.5％磷酸＝45∶5530min乙腈∶0.5％磷酸＝45∶55流速1ml/min柱溫25℃檢測(cè)波長(zhǎng)258nm3、方法與結(jié)果3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取紫花牡荊素對(duì)照品15.20mg，加甲醇溶解并定容至25ml，搖勻，得對(duì)照品原液。將對(duì)照品原液以流動(dòng)相按2.5倍逐次稀釋為0.2432mg/ml、0.09728mg/ml、0.038912mg/ml、0.0155648mg/ml、0.0062259mg/ml、0.0024903mg/ml系列濃度對(duì)照品溶液，搖勻。將各對(duì)照品液分別進(jìn)樣20μl，測(cè)定，以紫花牡荊素質(zhì)量濃度(mg/ml)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程Y＝170.7+67712X，r＝0.9997，線性范圍0.0498μg～4.8640μg(見圖1)。3.2樣品液的制備將各產(chǎn)地蔓荊子藥材分別粉碎過40目篩，60℃恒溫干燥，準(zhǔn)確稱取上述樣品0.3g，分別以甲醇30.00ml40℃超聲提取2h，微孔濾膜過濾，吸取約10ml，冷藏，備用。3.3精密度試驗(yàn)精密吸取上述濃度為0.09728mg/ml對(duì)照品溶液20μl，重復(fù)進(jìn)樣6次，結(jié)果見表2-1。表2-1、精密度試驗(yàn)(n＝6)3.4加樣回收率試驗(yàn)精密吸取江西新建產(chǎn)蔓荊子樣品粉末100mg，共6份，分別加入定量對(duì)照品溶液，同法制備樣品液，分別吸取20μl，依上法測(cè)定，結(jié)果見表2-2。表2-2、加樣回收率試驗(yàn)(n＝6)3.5穩(wěn)定性試驗(yàn)取江西新建產(chǎn)蔓荊子樣品液，每隔1h進(jìn)樣20μl，共6次，測(cè)定，結(jié)果見表2-3。表2-3、穩(wěn)定性試驗(yàn)(n＝6)(四)該中藥提取物對(duì)經(jīng)前期綜合征功能的影響及有關(guān)實(shí)驗(yàn)1.供試品紫花牡荊素(自提，純度為98.63％)，以吐溫-80配制成0.4mg/ml，1mg/ml，2mg/ml的混懸液1.1材料1.1.1動(dòng)物ICR小鼠第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供1.1.2藥品試劑哌替啶注射液沈陽(yáng)第一制藥廠批號(hào)010524胃復(fù)安注射液上海禾豐制藥有限公司批號(hào)3A08001甲磺酸溴隱停片NovartisPharmSchweizAG，Switzerland批號(hào)T3009冰醋酸分析純中國(guó)醫(yī)藥(集團(tuán))上?；瘜W(xué)試劑公司批號(hào)20000319吐溫-80上海化學(xué)試劑公司批號(hào)9905151300大孔樹脂上海醫(yī)工院1.1.3大孔樹脂AB-8型(已預(yù)處理)天津南大水處理中心1.2方法1.2.1醋酸扭體實(shí)驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)將小鼠分為5組，每組10只?？瞻讓?duì)照組，給予與藥物實(shí)驗(yàn)組等量的生理鹽水；陽(yáng)性對(duì)照組，給予藥物消炎痛，劑量為10mg/kg，這是一種臨床具有較好療效的鎮(zhèn)痛藥；實(shí)驗(yàn)組，給予藥物紫花牡荊素，分為低，中，高三個(gè)劑量組，劑量分別為10mg/kg、25mg/kg、50mg/kg。按給藥劑量灌胃給藥1小時(shí)后，腹腔注射0.7％醋酸溶液致痛，同時(shí)開始記錄注射后20分鐘內(nèi)小鼠扭體次數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3-1。1.2.2高泌乳實(shí)驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)將小鼠分為5組，每組10只?？瞻讓?duì)照組，給予與藥物實(shí)驗(yàn)組等量的生理鹽水；陽(yáng)性對(duì)照組，給予藥物溴隱亭，劑量為1mg/kg，這是一種臨床具有較好療效的抗高泌乳素藥；實(shí)驗(yàn)組，給予藥物紫花牡荊素，分為低，中，高三個(gè)劑量組，劑量分別為10mg/kg、25mg/kg、50mg/kg。每天皮下注射滅吐靈注射液24mg/kg，每日3次，同時(shí)每天早上按給藥劑量給藥一次，造模4天后眼眶取血，血液離心8000轉(zhuǎn)/min，取血清，用RIA放免測(cè)定血清PRL濃度。具體結(jié)果見表3-2。1.3結(jié)果1.3.1醋酸扭體實(shí)驗(yàn)結(jié)果表3-1、紫花牡荊素小鼠鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)(n＝10)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，紫花牡荊素高、中、低劑量組都具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛作用，并且高劑量強(qiáng)于低劑量，呈現(xiàn)量效關(guān)系趨勢(shì)。1.3.2高泌乳實(shí)驗(yàn)結(jié)果表3-2、不同洗脫部分小鼠血清泌乳素實(shí)驗(yàn)(n＝10)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，紫花牡荊素高、中、低劑量組都具有較強(qiáng)的降低高催乳素動(dòng)物血清泌乳素水平的作用，并且高劑量降低幅度強(qiáng)于低劑量，呈現(xiàn)量效關(guān)系趨勢(shì)。(五)該中藥提取物的用途1、概述經(jīng)前期綜合征(PremenstrualSyndrome，PMS)是指婦女在月經(jīng)周期的后期(黃體期)表現(xiàn)出一系列生理、情感、認(rèn)知及習(xí)慣方面的不適癥狀，并在卵泡期緩解，又稱經(jīng)前期綜合癥、經(jīng)前期緊張綜合征、經(jīng)前期緊張綜合癥等。PMS最多見于30～40歲的育齡婦女，20％～30％的婦女經(jīng)前期有干擾日常生活的中至重度癥狀；其中2％～10％的癥狀嚴(yán)重影響日常生活。由于文化差異、醫(yī)療條件、生活水平等因素，很大程度上存在就醫(yī)不夠充分情況，PMS的實(shí)際發(fā)病率可能更高。PMS致病因素比較復(fù)雜，包括生物學(xué)、精神動(dòng)力學(xué)、家庭、社會(huì)以及認(rèn)知等多方面的因素。目前，PMS防治措施主要包括支持治療(如教育和情感治療、飲食治療及其它方面)、藥物治療(如性激素、達(dá)那唑、促性腺激素釋放激素增效劑、抗抑郁劑、抗焦慮劑、前列腺素抑制劑、溴隱亭、醛固酮受體拮抗劑等)及手術(shù)和放射措施等。除以上措施外，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上還有逍遙丸、經(jīng)前安、經(jīng)前平等復(fù)方中藥制劑用于PMS的預(yù)防及治療?？偟貋?lái)看，這些措施多數(shù)或僅能起到緩解癥狀的作用，或具有較高風(fēng)險(xiǎn)性，臨床應(yīng)用并不理想。近十幾年來(lái)，在PMS的病因理論和治療上取得重要的進(jìn)展，病因研究已深入到激素與應(yīng)激反應(yīng)，激素與腦神經(jīng)系統(tǒng)等的相互作用。目前，馬鞭草科牡荊屬植物穗花牡荊穗花牡荊(Vitexagnus-castusL.)相關(guān)產(chǎn)品在歐美國(guó)家被廣泛用來(lái)治療PMS及其相關(guān)病癥，效果顯著，備受青睞，其最新產(chǎn)品Ze440已經(jīng)在歐美上市，具有較高的市場(chǎng)占有率。由于穗花牡荊主產(chǎn)于歐洲，中國(guó)不產(chǎn)，因此尋找潛在的具有抗PMS活性，與穗花牡荊近緣的藥用植物作為替代資源，從而開發(fā)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)抗PMS新藥，具有十分重要的意義。本發(fā)明所指的該中藥提取物主要由中藥以蔓荊子為原料制備提取物等組成的，能清熱、祛風(fēng)、益氣、活血，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示該中藥提取物有較好療效，上述實(shí)驗(yàn)為該中藥提取物臨床用于治療經(jīng)前期綜合征提供了更多的藥理學(xué)依據(jù)。該中藥提取物及其組合物是一種安全的治療經(jīng)前期綜合征及其相關(guān)病癥的藥物，其原料的果實(shí)、全草、全草的地上部分或者其他部位等，或其原料的組合物，也可以直接或間接用于制備抗經(jīng)前期綜合征產(chǎn)品。2、該中藥提取物的使用方法與要求本發(fā)明該中藥提取物可以單獨(dú)或與其它活性組分聯(lián)合使用，包括用于制備用于診斷、檢測(cè)、預(yù)防、保護(hù)、治療或研究相關(guān)疾病的產(chǎn)品，包括藥物、試劑、食品或飲料等，尤其是藥物。在具體使用方面，本發(fā)明所述的該中藥提取物能夠單獨(dú)使用，還能夠與其他許多化學(xué)物質(zhì)一起使用。無(wú)論這些化學(xué)物質(zhì)是否具有生物活性或具有治療疾病的功能，包括輔助功能如協(xié)同放大作用、拮抗或緩解該中藥提取物的副作用等，這些化學(xué)物質(zhì)是包括醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體、食品、天然產(chǎn)物、化學(xué)合成藥物或人類用藥等中的一種或多種；優(yōu)選包括醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體或者食品等中的一種或多種；進(jìn)一步優(yōu)選醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體。所述的有活性的化學(xué)物質(zhì)是包括有治療作用的化學(xué)物質(zhì)，或者是對(duì)治療有輔助作用的化學(xué)物質(zhì)等中的一種或多種。有治療作用的化學(xué)物質(zhì)是包括雌激素、雙磷酸鹽類等中的一種或多種，對(duì)治療有輔助作用的化學(xué)物質(zhì)包括鈣劑、植物雌激素等物質(zhì)中的一種或多種。本文使用的“醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體”包括任何和所有的生理適用的溶劑、分散介質(zhì)、胞衣、抗菌劑和抗真菌劑、等滲劑或吸收延遲劑等中的一種或多種。醫(yī)藥學(xué)上可接受載體的例子包括一種或多種的水、鹽水、磷酸緩沖鹽水、葡萄糖、甘油或乙醇等等及其組合物中的一種或多種。在許多情況下，在該組合物中最好包括等滲劑，例如，糖、諸如甘露醇、山梨醇、山梨醇的多元醇或氯化鈉等中的一種或多種。醫(yī)藥學(xué)上可接受載體還可以包含少量的輔助物質(zhì)，例如潤(rùn)濕劑或乳化劑、防腐劑或緩沖液等中的一種或多種，它們?cè)鰪?qiáng)了該中藥提取物的有效期或效力。從具體的分類上看，所說(shuō)的醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體是指醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，包括賦形劑，如淀粉或水等中的一種或多種；潤(rùn)滑劑，如甘油或硬脂酸鎂等中的一種或多種；崩解劑，如微晶纖維素等；填充劑，如淀粉或乳糖等中的一種或多種；粘接劑，如預(yù)膠化淀粉、糊精、纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮等中的一種或多種；滲透壓調(diào)節(jié)劑，如葡萄糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇等中的一種或多種；稀釋劑，如水等；崩解劑，如瓊脂、碳酸鈣或碳酸氫鈉等中的一種或多種；吸收促進(jìn)劑，如季銨化合物等；表面活性劑，如十六烷醇等；吸附載體，如高嶺土或皂粘土等中的一種或多種；潤(rùn)滑劑，如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂或聚乙二醇等中的一種或多種；另外，還可以在組合物中加入其它輔劑，如香味劑或甜味劑等中的一種或多種。例如，將活性組分該中藥提取物溶解、混懸或乳化于適宜的水性溶劑中(例如，蒸餾水、生理鹽水或格林溶液等中的一種或多種)或油性溶劑中(例如，植物油例如橄欖油、芝麻油、棉籽油、玉米油或丙二醇等中的一種或多種)中，即可制得注射制劑，其中溶劑中可含有分散劑(例如，聚山梨酯80、聚氧乙烯硬化蓖麻油60、聚乙二醇、苯甲醇、氯代丁醇或苯酚等中的一種或多種)、滲透壓調(diào)節(jié)劑(例如，氯化鈉、甘油、D9-甘露糖、D-山梨醇或葡萄糖等中的一種或多種)。在這種情況下，如有必要，可加入添加劑，例如增溶劑(例如，水楊酸鈉或醋酸鈉等中的一種或多種)、穩(wěn)定劑(例如，人血清白蛋白等)、止痛劑(例如，苯甲醇等)等。本發(fā)明所述及的該中藥提取物還可以以組合物的形式聯(lián)合使用，特別是與用其它化學(xué)物質(zhì)如藥物對(duì)動(dòng)物尤其是哺乳動(dòng)物包括人或其他動(dòng)物進(jìn)行治療所用的組合物或者是類似的組合物。所述哺乳動(dòng)物，包括人、小鼠、大鼠、羊、猴、牛、豬、馬、兔、犬、黑猩猩、狒狒、狨、獼猴或恒河猴等中的一種或多種。例如，可以將本發(fā)明該中藥提取物加入適于給與受治療者的藥用組合物中。通常，該藥用組合物包含本發(fā)明該中藥提取物和藥學(xué)上可接受的載體。該中藥提取物的組合物特別是藥物組合物可以有各種形式，包括例如液體、半固體和固體等劑量形式中的一種或多種；其中所說(shuō)的藥物組合物包括治療有效量的該中藥提取物為活性成分，以及一種或多種醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體。該中藥提取物的藥物組合物可以采用本領(lǐng)域公知的常規(guī)生產(chǎn)方法制成各種劑型，例如使活性成分與一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。所述的劑型包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑或注射劑等中的一種或多種，采取口服或注射(包括靜脈注射、靜脈滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一種或多種)、粘膜透析等中的一種或多種給藥途徑進(jìn)行抗經(jīng)前期綜合征及相關(guān)病癥的診斷、檢測(cè)、治療或科學(xué)研究。藥物組合物優(yōu)選含有重量比為0.5～99％的活性成分該中藥提取物，進(jìn)一步優(yōu)選含有重量比為1～95％的活性成分該中藥提取物，最優(yōu)選含有重量比為5～90％的活性成分該中藥提取物。該中藥提取物的藥物組合物一般必須無(wú)菌且在生產(chǎn)儲(chǔ)存條件下穩(wěn)定?？梢詫⒃摻M合物配制成溶液、微乳液、分散液、脂質(zhì)體或其它適合于高藥物濃度的有序結(jié)構(gòu)。通過將所需量的該中藥提取物與所需上述成分的一種或組合一起加入適當(dāng)?shù)娜軇┲胁⒔又M(jìn)行除菌過濾制備無(wú)菌注射液。一般而言，通過將該中藥提取物加入含有基本分散介質(zhì)和所需的上述其它成分的無(wú)菌溶媒中制備分散液。在用于制備無(wú)菌注射液的無(wú)菌粉劑的情況下，推薦的制備方法是真空干燥和冷凍干燥劑。例如，通過諸如卵磷脂的包衣、在分散液的情況下通過保持所需顆粒大小和通過使用表面活性劑，可以保持溶液的適當(dāng)流動(dòng)性。通過在該組合物中包括延遲吸收的藥劑(例如單硬脂酸鹽或明膠)可以達(dá)到注射組合物的延長(zhǎng)吸收。用于患者時(shí)，本發(fā)明所述的該中藥提取物劑量為7～20mg/kg·d，該劑量或用量通常根據(jù)患者或使用者的年齡和體重以及身體狀況或患者癥狀的狀況來(lái)決定。本發(fā)明該中藥提取物及其藥用組合物可以包括“治療有效量”或“預(yù)防有效量”的本發(fā)明該中藥提取物?！爸委熡行Я俊笔侵冈诒匾膭┝亢蜁r(shí)間下有效達(dá)到所需治療效果的量。該中藥提取物的治療有效量可以根據(jù)諸如個(gè)體的病況、年齡、性別和體重以及該中藥提取物在該個(gè)體引起所需反應(yīng)的能力等因素而變化。治療有效量亦指該中藥提取物的有益治療效果超過其任何毒性或有害效果的量?！邦A(yù)防有效量”是指在必要?jiǎng)┝亢蜁r(shí)間下有效達(dá)到所需預(yù)防效果的量。因?yàn)轭A(yù)防劑量用于患病前或疾病早期的受治療者，預(yù)防有效量通常小于治療有效量。本發(fā)明該中藥提取物的治療或預(yù)防有效量的典型的非限制性范圍是7～15mg/kg，更優(yōu)選為10～15mg/kg。應(yīng)注意，劑量值將根據(jù)欲減輕的疾病類型和嚴(yán)重性變化，也就是說(shuō)用于患者時(shí)，本發(fā)明所述的該中藥提取物的劑量或用量，通常根據(jù)患者或使用者的年齡和體重以及身體狀況或患者癥狀的狀況來(lái)決定。另外，應(yīng)理解，對(duì)于任何特定受治療者，應(yīng)隨著時(shí)間根據(jù)個(gè)體需要和給與或監(jiān)督給與所述組合物的人的專業(yè)判斷調(diào)整特定劑量制度，并且本文設(shè)定的劑量范圍僅為例證性的，并不會(huì)限制要求保護(hù)的組合物的范圍或?qū)嵺`。也就是說(shuō)，需要根據(jù)治療的對(duì)象、給藥途徑、所治療疾病和狀況等，變化本發(fā)明該中藥提取物的每次和/或每日的劑量或用量。例如，經(jīng)靜脈給予哺乳動(dòng)物，尤其是成年人(如體重60kg)，所述該中藥提取物的單劑量約為7～15mg，優(yōu)選約15mg，優(yōu)選每日給藥1～3次?？梢哉{(diào)整劑量單位，以提拱最佳所需反應(yīng)(例如治療或預(yù)防應(yīng)答)。例如，可以單次大劑量給藥，可以在一段時(shí)間內(nèi)給予幾個(gè)均分量或根據(jù)治療情況的迫切性按比例降低或增加劑量。配制易于給藥和劑量統(tǒng)一的劑量單位形式的非腸道組合物尤其有利。本文使用的劑量單位形式，指適于欲治療的哺乳動(dòng)物受治療者的單元?jiǎng)┝康奈锢矸蛛x單位；每個(gè)單位含有預(yù)定量的計(jì)算用于與所需藥用載體一同產(chǎn)生所需治療效果的活性物該中藥提取物。本發(fā)明的劑量單位形式的規(guī)格，由以下確定并直接取決于以下(a)該中藥提取物的獨(dú)特特征和欲達(dá)到的特定治療或預(yù)防效果，和(b)在混合這種用于治療個(gè)體敏感性該中藥提取物的技術(shù)中的內(nèi)在限制。3、該中藥提取物的藥物劑型和給藥途徑本發(fā)明所述的該中藥提取物制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品，其中按照飲料、食品
技術(shù)領(lǐng)域：
的要求制備的產(chǎn)品能夠診斷、檢測(cè)、預(yù)防、保護(hù)、治療或研究經(jīng)前期綜合征及其并發(fā)癥；按照醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
的要求制備的產(chǎn)品能夠用于患者的治療或保健，既能夠單獨(dú)直接用于制備治療或保健的藥物，也能夠與許多化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行混合或組合，直接或間接用于制備治療或保健的藥物。這里所述的化學(xué)物質(zhì)與本節(jié)上文中所述的相同。在本發(fā)明中，所需物料包括本發(fā)明的原料、上述配套使用的化學(xué)物質(zhì)等，均應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況和需要，采用食品級(jí)或藥用級(jí)的物料。本發(fā)明所述的該中藥提取物，可以用本領(lǐng)域已知的各種方法給藥，盡管在許多治療用途中推薦的給藥途徑/給藥方式是口服給藥。但是，技術(shù)人員會(huì)理解給藥途徑/給藥方式隨所需的結(jié)果而變化。在某些具體實(shí)施中，該活性化合物可以與保護(hù)該化合物免于快速釋放的載體一同制備例如空釋制劑，包括移植物傳遞系統(tǒng)、透皮貼傳遞系統(tǒng)或微囊傳遞系統(tǒng)等中的一種或多種。此外，還可以使用生物可降解的、生物相容性聚合物，例如乙烯乙酸乙酯、聚酐、聚羥基乙酸、膠原蛋白、聚正酯或聚乳酸等中的一種或多種。制備這種制劑的許多方法均已申請(qǐng)專利或一般為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知(參見例如SustainedandControlledReleaseDrugDeliverySystems，J.R.Robinson編輯，MarcelDekker，Inc.，紐約，1978)。本發(fā)明所述的該中藥提取物，通常通過口服、直腸或腸胃外給藥等中的一種或多種方式，施用于需要這種治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成常規(guī)的固體制劑如片劑、粒劑或膠囊等中的一種或多種。在實(shí)施時(shí)，本發(fā)明該中藥提取物可以與例如惰性稀釋劑或可同化的食用載體一同口服。該中藥提取物(和共它成分，如果需要)亦可以包于硬或軟殼明膠膠囊、壓制成片劑或直接加入受治療者的膳食中。關(guān)于口服治療給藥，可以將所述該中藥提取物與賦形劑一起加入并以可食片劑、頰含片劑、酊劑、膠囊、懸液、糖漿或糯米紙囊劑等等中的一種或多種形式使用。為了以非腸道給藥之外給予本發(fā)明該中藥提取物，可能需要用防止其失活的材料對(duì)該中藥提取物包衣或與該中藥提取物一同給予。亦可以將補(bǔ)充的活性化合物加入該組合物中。在具體實(shí)施時(shí)，將本發(fā)明該中藥提取物與一種或多種可以用于治療疾病的其它治療藥物共配制和/或共給予。這種聯(lián)合使用，可以優(yōu)越地利用較低劑量的該給予的治療藥物，因此避免可能的毒性或與各種單一療法相關(guān)的并發(fā)癥。制成液體制劑如水劑、油懸浮劑或其它液體制劑中的一種或多種，如糖漿或酏劑等中的一種或多種；用于腸胃外給藥時(shí)，可將其制成注射用的溶液劑、水劑或油性懸浮劑等中的一種或多種。以上所述的使用形式中，優(yōu)選的形式是顆粒劑、片劑、包衣片劑、膠囊、栓劑或注射劑等中的一種或多種，進(jìn)一步優(yōu)選顆粒劑、片劑、包衣片劑或膠囊等中的一種或多種，特別優(yōu)選顆粒劑、膠囊。此外，該中藥提取物所使用的藥材原料在某些情況下也能夠單獨(dú)直接用于制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品，也能夠與許多化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行混合或組合，以組合物的形式直接或間接用于制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品。這里所述的化學(xué)物質(zhì)與本節(jié)上文中所述的相同。例如，該中藥提取物所使用的藥材原料的粉末用于制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品特別是藥物的各種劑型，或者是該中藥提取物所使用的藥材原料的粉末與有關(guān)的輔料用于制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品尤其是藥物的各種劑型，或者是該中藥提取物所使用的藥材原料的粉末與有關(guān)的制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品如藥物一起用于制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品如藥物的各種劑型，或者是該中藥提取物所使用的藥材原料的粉末與有關(guān)的輔助藥物一起用于制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品如藥物的各種劑型，如優(yōu)選顆粒劑、片劑、包衣片劑、膠囊、栓劑或注射劑等中的一種或多種，特別優(yōu)選膠囊。所述的方法之一是將該中藥提取物所使用的藥材原料的粉末灌裝為膠囊劑，方法之二是將該中藥提取物所使用的藥材原料的粉末與有關(guān)的制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品如藥物一起灌裝為膠囊劑，方法之三是將該中藥提取物所使用的藥材原料的粉末與有關(guān)的輔助藥物一起灌裝為膠囊劑；方法之四是將該中藥提取物所使用的藥材原料的粉末與有關(guān)的輔料一起按常規(guī)方法直接壓為片劑或顆粒劑，方法之五是將該中藥提取物所使用的藥材原料的粉末、有關(guān)的制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品如藥物一起與有關(guān)的輔料按常規(guī)方法直接壓為片劑或顆粒劑，方法之六是將該中藥提取物所使用的藥材原料的粉末、有關(guān)的輔助藥物一起與有關(guān)的輔料按常規(guī)方法直接壓為片劑或顆粒劑等。除上述的六種基本方法外，還能夠選擇該中藥提取物所使用的藥材原料的其他形式或?qū)υ撝兴幪崛∥锼褂玫乃幉脑线M(jìn)行本領(lǐng)域公知的方法處理后，制備各種劑型的含有該中藥提取物所使用的藥材原料的產(chǎn)品如藥物。但是，需要注意的是，在上述直接使用該中藥提取物所使用的藥材原料的時(shí)候，應(yīng)先根據(jù)所使用的該中藥提取物的劑量要求，換算得到所需要使用的該中藥提取物所使用的藥材原料的用量。綜上所述，本發(fā)明該中藥提取物可用于制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品，優(yōu)選藥物和食品，進(jìn)一步優(yōu)選藥物。(六)技術(shù)特長(zhǎng)本發(fā)明有針對(duì)性地研究一種中藥提取物，該原料使用安全，互為兼顧，最大限度地發(fā)揮了作用，而且使用范圍廣，因此容易推廣應(yīng)用，能夠在較短的時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生巨大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。也就是說(shuō)，本發(fā)明的研究結(jié)果可被進(jìn)一步深入開發(fā)為具有臨床應(yīng)用前景的防治經(jīng)前期綜合征產(chǎn)品尤其是新藥。該產(chǎn)品具有療效確切、有效劑量低、無(wú)毒副作用的優(yōu)點(diǎn)，與同類產(chǎn)品相比具有顯著的優(yōu)勢(shì)。經(jīng)前期綜合征為臨床常見病、多發(fā)病，隨著全球大氣污染的日益嚴(yán)重和環(huán)境的惡化，預(yù)計(jì)經(jīng)前期綜合征等疾病的發(fā)病率將不斷攀升。因此，本發(fā)明還可為后續(xù)的新藥研究打下良好的基礎(chǔ)，并進(jìn)一步產(chǎn)生較大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。經(jīng)過長(zhǎng)期的藥理學(xué)試驗(yàn)，該種中藥提取物的單體化合物具有降低泌乳素和鎮(zhèn)痛作用，作用更直接，從而克服了中藥給藥劑量難以控制的問題，并提高了生物利用度；而且該中藥提取物藥理作用較強(qiáng)，其原料來(lái)源豐富，制備工藝簡(jiǎn)單?？傊?，本發(fā)明積極適應(yīng)了現(xiàn)代醫(yī)療和科研領(lǐng)域的工作需要和人性化服務(wù)的需要，是用于抗經(jīng)前期綜合征及其并發(fā)癥的安全原料。圖1表示標(biāo)準(zhǔn)曲線圖橫坐標(biāo)表示濃度；單位mg/ml；縱坐標(biāo)表示峰面積；單位A。具體實(shí)施例方式本發(fā)明研究了一種新的中藥復(fù)方及其提取物和用途，提供了一種能夠用于制備抗經(jīng)前期綜合征及其并發(fā)癥產(chǎn)品如藥物的原料，便于醫(yī)療行業(yè)和相關(guān)行業(yè)如食品、飲料等領(lǐng)域的安全使用，包括疾病治療、科學(xué)研究等。下面以該中藥提取物的幾個(gè)典型提取方法為例，詳細(xì)闡述該中藥提取物的具體提取方法。方法一(1)將蔓荊子藥材洗凈，浸泡6～24小時(shí)后置入提取溶器內(nèi)煎煮2～6次，每次煎煮的時(shí)間為0.5～3小時(shí)。(2)將數(shù)次提取的藥液合并，一齊進(jìn)行濃縮成浸膏。(3)用氯仿萃取保留氯仿提取物。(4)濃縮成純浸膏，該純浸膏比重1.0～1.5(得率8～16％)(5)過凝膠柱后得到紫花牡荊素(90.1％)。(6)包裝成10～15g/袋，成品顆粒。方法二(1)將上述藥材浸泡6～24小時(shí)，置入提取容器中，煎煮2～6次，每次煎煮的時(shí)間為0.5～3小時(shí)。(2)過大孔樹脂，采用水洗后，以80％乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮，干燥，得蔓荊子總黃酮粗品。(3)粗品過凝膠柱后得到紫花牡荊素(93.7％)現(xiàn)有的研究表明，其他成分對(duì)藥效或藥物的使用等方面至少?zèng)]有負(fù)面的影響，而且分離這些成分成本較高，因此目前沒有進(jìn)一步純化的必要。下面以幾個(gè)典型的劑型為例，詳細(xì)闡述該中藥提取物各種劑型的具體制備方法。本發(fā)明制備粉針劑一般采用常規(guī)的冷凍干燥法，以水作為溶媒，其步驟為取該中藥提取物，加入賦形劑，加水溶解，加入活性炭，過濾除菌，灌裝，半軋塞，冷凍干燥，壓塞軋蓋即可。所用的賦形劑選自甘露醇、水解明膠、葡萄糖、乳糖或右旋糖苷等中的一種或幾種。每瓶含該紫花牡荊素7～15mg。本發(fā)明制備粉針劑也可采用噴霧干燥法，以水作為溶媒，其步驟為取該中藥提取物，加或不加賦形劑(賦形劑同上)，加水溶解，加入活性炭，過濾除菌，噴霧干燥，無(wú)菌分裝，壓塞軋蓋即可。每瓶含該紫花牡荊素7～15mg。本發(fā)明制備小針劑時(shí)，以注射用水作為溶媒配制即可，也可加適量輔料，輔料選自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸芐酯或二甲基乙酰胺等中的一種或幾種。每支含該紫花牡荊素7～15mg。本發(fā)明制備葡萄糖輸液或氯化鈉輸液，以注射用水作為溶媒，加入適量葡萄糖或氯化鈉配制即可，也可加適量輔料，輔料選自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸芐酯或二甲基乙酰胺等中的一種或幾種。每瓶含該中藥提取物10～100mg。本發(fā)明制備片劑、膠囊、顆粒劑、口服液等口服制劑，輔料可以是乳糖、淀粉、糊精、硬脂酸鹽等，按常規(guī)技術(shù)制備。該中藥提取物急性毒性試驗(yàn)一、試驗(yàn)?zāi)康挠^察紫花牡荊素48小時(shí)內(nèi)大量給小鼠口服后的毒性作用。二、材料1、受試藥物該中藥提取物由江西新建制定產(chǎn)區(qū)提供原藥材，提取單體制成膠囊。2、動(dòng)物ICR小鼠，雌性，18～22克，隨機(jī)分組，60只，分三組，每組20只。自由覓食和飲水，室溫(20±5)℃，自然光照，第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào)滬SCXK2004-2006。三、方法1、實(shí)驗(yàn)環(huán)境第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)室。環(huán)境溫度23℃。2、給藥途徑灌胃。3、給藥劑量和方法本實(shí)驗(yàn)將小鼠分為三組，每組20只，分別為空白對(duì)照組，給予與藥物實(shí)驗(yàn)組等量的生理鹽水；灌胃給藥組，給予最大體積(0.8ml/20g)最大濃度(11.5mg/ml)給藥劑量；腹腔注射組，給予最大體積(0.4ml/20g)最大濃度(11.5mg/ml)給藥劑量。表4、各組小鼠體重變化X±SD5、實(shí)驗(yàn)觀察給藥后立即觀察小鼠的反應(yīng)，并連續(xù)15天，每隔一天記錄體重，結(jié)果見表4。五、結(jié)論以上實(shí)驗(yàn)各組藥物，竟幾度欲實(shí)驗(yàn)給予最大劑量的藥物，觀察48小時(shí)，無(wú)小鼠死亡，因此LD50無(wú)法確定。最大耐受實(shí)驗(yàn)表明，此劑量為藥效劑量的230倍，據(jù)此認(rèn)為，紫花牡荊素在有效劑量范圍內(nèi)無(wú)毒性。該中藥提取物對(duì)大鼠的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)一、試驗(yàn)?zāi)康挠^察連續(xù)反復(fù)給予該中藥提取物對(duì)大鼠所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，確定無(wú)毒反應(yīng)的劑量。二、材料l、受試藥物該中藥提取物由江西新建制定產(chǎn)區(qū)提供原藥材，提取單體制成膠囊，系為藥效學(xué)試驗(yàn)和長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)專門制備的受試物，批號(hào)030420。2、動(dòng)物SD大鼠，6周齡，雌雄各半，第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào)滬SCXK2004-2008。三、方法1、分組根據(jù)新藥審批辦法和《中藥新藥研究的技術(shù)要求》(國(guó)家藥品監(jiān)督管理局中藥新藥研究的技術(shù)要求199922)的規(guī)定，本試驗(yàn)設(shè)三個(gè)劑量組和一個(gè)對(duì)照組。取6周齡SD大鼠，雌，實(shí)驗(yàn)前先飼養(yǎng)適應(yīng)一周，取健康正常的動(dòng)物120只，隨機(jī)分為四組大劑量組，30只，300mg/kg·d(約相當(dāng)于臨床劑量的60倍)中劑量組，30只，150mg/kg·d(約相當(dāng)于臨床劑量的30倍)小劑量組，30只，50mg/kg·d(實(shí)驗(yàn)有效劑量，約相當(dāng)于臨床劑量的10倍)蒸餾水組，30只，灌服等容積蒸餾水1ml/100g體重。2、實(shí)驗(yàn)程序大鼠各給藥組每組20只(全雌)，連續(xù)口服紫花牡荊素3個(gè)月后，每組宰殺10只大鼠，停藥后30天各組宰殺10只大鼠。實(shí)驗(yàn)期間分別觀察了體重、食量及糞便等8項(xiàng)一般臨床體征，檢測(cè)了13項(xiàng)血液學(xué)指標(biāo)，16項(xiàng)血液生化指標(biāo)，并對(duì)26項(xiàng)器官或組織進(jìn)行了病理學(xué)觀察。3、檢測(cè)結(jié)果結(jié)果表明一般臨床體征在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間未見明顯改變。血液學(xué)及血液生化指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)波動(dòng)，未發(fā)現(xiàn)與受試藥物相關(guān)的毒性反應(yīng)。病理學(xué)檢查尸檢、器官重量及組織病理學(xué)光鏡檢查，未發(fā)現(xiàn)受檢臟器，尤其肝、腎、心和腦等臟器與受試藥物有關(guān)的毒性病理改變。個(gè)別動(dòng)物的肝、肺部及支氣管的炎性病變，分布在包括空白對(duì)照組在內(nèi)的各個(gè)劑量組內(nèi)，屬動(dòng)物的自發(fā)性病變，與實(shí)驗(yàn)藥物無(wú)關(guān)。結(jié)果表明，雌性大鼠連續(xù)3個(gè)月口服紫花牡荊素對(duì)所設(shè)各劑量均有較好的耐受性。紫花牡荊素對(duì)大鼠的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)安全劑量＞300mg/kg(相當(dāng)于推薦臨床劑量的60倍)。在本發(fā)明中，以上所述的具體實(shí)施方式和以下所述的實(shí)例均是為了更好地闡述本發(fā)明，并不是用來(lái)限制發(fā)明的范圍。在本發(fā)明中，以上所述的具體實(shí)施方式和以下所述的實(shí)例均是為了更好地闡述本發(fā)明，并不是用來(lái)限制發(fā)明的范圍。下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)描述。實(shí)施例1、該中藥提取物膠囊劑的制備(1)處方該中藥提取物1000.0g微晶纖維素1000g羧甲基淀粉鈉140g無(wú)水乙醇適量滑石粉80g共制成10000膠囊(2)制備工藝按以上處方分別取原料藥該中藥提取物及處方中其它輔料分別過100目篩，置60℃烘干，稱取處方量該中藥提取物與微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉等量遞加法混合均勻，用適量無(wú)水乙醇制軟材，30目篩制粒，50～60℃干燥2小時(shí)，用30目篩整粒，加入處方量的滑石粉和羧甲基淀粉鈉混合均勻。實(shí)施例2、該中藥提取物粉針劑的制備取該中藥提取物紫花牡荊素30mg，加入右旋糖苷30g，加500ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至2000ml，加3.0g針用活性炭，充分?jǐn)嚢?0分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；灌裝到無(wú)菌的西林瓶中，每瓶2ml，半軋塞；冷凍干燥，再壓塞軋蓋即可。實(shí)施例3、該中藥提取物粉針劑的制備取該提取物紫花牡荊素60mg，加500ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至1000ml，加1g針用活性炭，充分?jǐn)嚢?0分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；冷凍干燥得無(wú)菌粉末，分裝成1000瓶。實(shí)施例4、蔓荊子有效成分的提取分離方法蔓荊子藥材干燥粗粉7.1kg，用等體積60％乙醇浸泡過夜，60％滲漉至近無(wú)色及黃酮類檢定反應(yīng)陰性，減壓回收溶劑得濃縮液。濃縮液依次以二氯甲烷、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，分別減壓濃縮得相應(yīng)部位。將二氯甲烷部位經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜，洗脫溶劑選擇石油醚∶乙酸乙酯(30∶1～1∶1)及氯仿∶甲醇(20∶1～1∶1)，并以SephadexLH-20純化，得化合物紫花牡荊素。采用真空干燥的方法進(jìn)行干燥。實(shí)施例5、臨床統(tǒng)計(jì)病例統(tǒng)計(jì)方法采用SAS8.0統(tǒng)計(jì)分析系統(tǒng)進(jìn)行，計(jì)量資料用方差分析、t檢驗(yàn)；等級(jí)資料用Ridit分析、Kruskal-Wallis法秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較用X2檢驗(yàn)。臨床統(tǒng)計(jì)病例選擇68例前期綜合征患者，全部為門診病人，年齡25～45歲。隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，兩組一般情況比較，差異無(wú)顯著性意義(P＞0.05)，具有可比性。對(duì)照組給予溴隱亭，1粒/次，每日2次，治療組給予中藥提取物紫花牡荊素膠襄，3個(gè)月后觀察兩組的療效。結(jié)果治療組總有效率為88.24％(顯效20例，有效10例，無(wú)效4例)，對(duì)照組為58.82％(顯效6例，有效14例，無(wú)效14例)，治療組與對(duì)照組比較，P＜0.01，差異有顯著性意義。通過上述的理論和實(shí)驗(yàn)研究的多角度闡述，發(fā)明人需要強(qiáng)調(diào)的是，從表面上看，本發(fā)明是一種以蔓荊子為原料制備的中藥提取物是紫花牡荊素，但是實(shí)際上本發(fā)明是通過長(zhǎng)期的藥理學(xué)試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)該種中藥提取物的單體化合物紫花牡荊素具有降低泌乳素和鎮(zhèn)痛作用，具有了新的用途，而且目前的技術(shù)已經(jīng)能夠通過提取或合成的辦法得到紫花牡荊素的單體，從而將其用于制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品；至于本發(fā)明一直重點(diǎn)闡述以蔓荊子為原料來(lái)制備中藥提取物，是為了利于本發(fā)明的推廣使用而提供了來(lái)源豐富、價(jià)格低廉的原料及其制備方法；也就是說(shuō)，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)具有新用途的紫花牡荊素的來(lái)源不僅限于以上的原料來(lái)源，當(dāng)然也能夠采用目前本領(lǐng)域公知的提取或合成的辦法來(lái)得到紫花牡荊素，并用于抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品特別是藥物。權(quán)利要求1.紫花牡荊素在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用。2.紫花牡荊素的組合物在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的紫花牡荊素的應(yīng)用，其特征在于，所述的抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品是指用于診斷、檢測(cè)、預(yù)防、保護(hù)、治療或研究經(jīng)前期綜合征及相關(guān)病癥的產(chǎn)品。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的紫花牡荊素的應(yīng)用，其特征在于，所述的抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品是包括醫(yī)藥、食品或飲料領(lǐng)域產(chǎn)品中的一種或多種。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的紫花牡荊素的應(yīng)用，其特征在于，所述的抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品是包括藥物、試劑、食品、保健食品、添加劑或飲料中的一種或多種。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的紫花牡荊素的應(yīng)用，其特征在于，所述的抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品是抗經(jīng)前期綜合征藥物。7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的紫花牡荊素的應(yīng)用，其特征在于，所述的經(jīng)前期綜合征相關(guān)病癥是包括高泌乳素、周期性乳房痛或痛經(jīng)中的一種或多種。8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的紫花牡荊素的應(yīng)用，其特征在于，所述的紫花牡荊素的制備方法包括如下步驟(1)制備提取液稱取蔓荊子藥材干燥粗粉，用提取溶劑提取一到多次，得提取液；(2)精制濃縮干燥將上述提取液進(jìn)行濃縮，得濃縮液；將濃縮液減壓濃縮至干，干燥后粉碎，即得本發(fā)明提取物的粉末；(3)分離純化濃縮液依次以二氯甲烷、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，分別減壓濃縮得相應(yīng)部位；將二氯甲烷部位經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜，洗脫溶劑選擇石油醚∶乙酸乙酯(30∶1～1∶1)及氯仿∶甲醇(20∶1～1∶1)，并以SephadexLH-20純化，得高純度的提取物(90％以上)。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的紫花牡荊素的應(yīng)用，其特征在于，所述的紫花牡荊素的制備方法中步驟“(1)制備提取液”中所述的提取溶劑是30～95％乙醇或甲醇；步驟“(2)精制濃縮干燥”中所述的濃縮方法是減壓回收溶劑；步驟“(3)分離純化”中所述的的大孔樹脂是選自AB-8、D-101、ZTC-1或SP905中的一種。10.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的紫花牡荊素的原料在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用。11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的紫花牡荊素的原料在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的紫花牡荊素的原料是包括果實(shí)、全草、全草的地上部分或者其他部位中的一種。12.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的紫花牡荊素的原料的組合物在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用。13.根據(jù)權(quán)利要求10所述的紫花牡荊素的原料在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的紫花牡荊素的原料是包括果實(shí)、全草、全草的地上部分或者其他部位中的一種。14.根據(jù)權(quán)利要求7所述的紫花牡荊素的原料在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用。15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的紫花牡荊素的原料在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的紫花牡荊素的原料是包括果實(shí)、全草、全草的地上部分或者其他部位中的一種。16.根據(jù)權(quán)利要求7所述的紫花牡荊素的原料的組合物在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的紫花牡荊素的原料在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的紫花牡荊素的原料是包括果實(shí)、全草、全草的地上部分或者其他部位中的一種。18.根據(jù)權(quán)利要求8所述的紫花牡荊素的原料在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用。19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的紫花牡荊素的原料在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的紫花牡荊素的原料是包括果實(shí)、全草、全草的地上部分或者其他部位中的一種。20.根據(jù)權(quán)利要求8所述的紫花牡荊素的原料的組合物在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用。21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的紫花牡荊素的原料在制備抗經(jīng)前期綜合癥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的紫花牡荊素的原料是包括果實(shí)、全草、全草的地上部分或者其他部位中的一種。全文摘要本發(fā)明涉及一種以蔓荊子為原料制備的中藥提取物紫花牡荊素新的用途。以蔓荊子為原料制備的提取物活性部位紫花牡荊素具有防治經(jīng)前期綜合癥及其相關(guān)病癥作用的臨床藥效，而經(jīng)前期綜合癥及其相關(guān)病癥已逐漸成為影響人口生活質(zhì)量的重要致病原因。該提取物藥理作用較強(qiáng)，其原料來(lái)源豐富，制備工藝簡(jiǎn)單，提取效率高；該提取物性質(zhì)穩(wěn)定，安全低毒，質(zhì)量可控；該種中藥提取物的單體化合物具有降低泌乳素和鎮(zhèn)痛作用，作用更直接，從而克服了中藥給藥劑量難以控制的問題，并提高了生物利用度；本發(fā)明為預(yù)防、診斷、檢測(cè)、保護(hù)、治療和研究該類疾病提供了一種新的藥物來(lái)源。文檔編號(hào)A61K36/185GK101028261SQ200710038980公開日2007年9月5日申請(qǐng)日期2007年4月3日優(yōu)先權(quán)日2007年4月3日發(fā)明者秦路平,胡園,韓婷,張宏申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)