專利名稱：一種穗花牡荊提取物的制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物提取物的制備方法及其用途，特別涉及穗花牡荊提取物的制備方法及用途。
背景技術(shù)：
經(jīng)前期綜合癥是多發(fā)病，在育齡婦女中發(fā)病率高達(dá)30%_80%，尤其多發(fā)于30-40歲的女性。其癥狀表現(xiàn)為緊張、易怒、嗜睡、情緒低落、性冷淡、乳痛、頭痛、小腹疼痛等，癥狀于經(jīng)前期出現(xiàn)，經(jīng)后消失，以青壯年婦女最為常見。隨著經(jīng)前期綜合癥的臨床研究不斷進(jìn)展和深入，發(fā)現(xiàn)經(jīng)前期綜合癥影響育齡婦女的生活、學(xué)習(xí)、工作等，使家庭關(guān)系緊張，增加犯罪和沖動(dòng)性行為的發(fā)生，引起了廣泛的關(guān)注。經(jīng)前期綜合癥的發(fā)生不僅與生物因素相關(guān)，還與社會(huì)文化、心理等因素相關(guān)。而在我國國內(nèi)，治療經(jīng)前期綜合癥并無特效藥物，也缺少相應(yīng)的保健食品。臨床上常用利尿劑如螺內(nèi)酯或激素調(diào)節(jié)劑進(jìn)行治療，不但作用不明顯，而且副作用大(如嗜睡、惡心、焦慮、頭痛等)，無法有效治療此病癥。與經(jīng)前期綜合征相似，更年期綜合癥的發(fā)生與女性體內(nèi)激素分泌有關(guān)。更年期綜合癥是由雌激素水平下降而引起的一系列癥狀。更年期婦女，由于卵巢功能減退，垂體功能亢進(jìn)，分泌過多的促性腺激素，引起植物神經(jīng)功能紊亂，從而出現(xiàn)一系列程度不同的癥狀， 如月經(jīng)變化、面色潮紅、心悸、失眠、乏力、抑郁、多慮、情緒不穩(wěn)定、易激動(dòng)、注意力難于集中等。給更年期的女性造成較大的負(fù)面影響。穗花牡荊(Vitex Agnus-castus L.)是馬鞭草科植物，原產(chǎn)歐洲南部、地中海沿岸和中亞凹地與河岸，果實(shí)大小如胡椒子，呈深棕色至黑色。穗花牡荊中含多種黃酮類化合物，如紫花牡荊素等親脂性的黃酮類成分，以及葒草素、異牡荊黃素等親水性黃酮苷，其中紫花牡荊素在穗花牡荊中含量較高，研究結(jié)果表明，紫花牡荊素是穗花牡荊干果實(shí)中重要的藥用活性成分之一。在歐洲，穗花牡荊提取物有用于治療婦科病的歷史?，F(xiàn)有技術(shù)中，對穗花牡荊的提取一般僅采用乙醇為溶劑進(jìn)行簡單提取，所得產(chǎn)品有效成分含量較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種有效成分含量較高的穗花牡荊提取物及其制備方法，同時(shí)還提供一種穗花牡荊提取物在制備治療或輔助治療經(jīng)前期綜合癥和更年期綜合癥的藥物或保健食品上的用途。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為一種穗花牡荊提取物的制備方法，包括以下步驟
(1)稱取若干重量的穗花牡荊干果實(shí)，按照每千克穗花牡荊干果實(shí)需要纊20L乙醇溶液比例，稱取乙醇溶液，其中，所述乙醇溶液的濃度為30-95% ；
(2)將穗花牡荊干果實(shí)粉碎，采用冷浸、溫浸、滲漉或加熱回流進(jìn)行提取，提取后得提取
液；
(3)將步驟(2)中的提取液過濾，得過濾液；(4)將步驟(3)中所得過濾液減壓濃縮，操作溫度為30-70°C，得濃縮液；
(5)將步驟(4)中所得濃縮液除雜，干燥，得穗花牡荊提取物。優(yōu)選地，步驟(2)中采用多級(jí)連續(xù)逆流滲漉進(jìn)行提取。優(yōu)選地，步驟(4)中濃縮的操作溫度為35_50°C。優(yōu)選地，步驟(5)的除雜過程采用大孔樹脂或聚酰胺作為填料對濃縮液進(jìn)行吸附， 用乙醇溶液洗脫，收集洗脫液。優(yōu)選地，步驟(5)中除雜過程為在步驟(4)所得的濃縮液中加適量純化水稀釋， 得稀釋液，然后用水飽和正丁醇萃取4次，合并萃取液，其中，所加純化水的量以將所述濃縮液稀釋到比重為1.02-1.08 (25°C)為宜；稀釋后所得的稀釋液有利于除雜，可防止除雜過程中發(fā)生乳化、難分層的現(xiàn)象。 優(yōu)選地，用水飽和正丁醇萃取時(shí)，第一次水飽和正丁醇的體積為所述稀釋液體積的100%，第二、三、四次水飽和正丁醇的體積均為所述稀釋液體積的80%。優(yōu)選地，上述所述除雜過程還包括將所得萃取液減壓回收溶劑，所得固形物加適量純化水溶解，用水相微孔濾膜過濾，所得濾液采用反相制備液相分離。一種穗花牡荊提取物的制備方法，包括以下步驟
(1)稱取若干重量的穗花牡荊干果實(shí)，粉碎，過M目篩，裝入萃取釜中，將萃取釜升溫至50°C、解析釜52°C，每千克穗花牡荊干果實(shí)加入1-1. 5L濃度為95%的乙醇溶液作為夾帶劑；
(2)打開(X)2氣瓶對系統(tǒng)進(jìn)行加壓，當(dāng)操作壓力達(dá)到25MPa時(shí)，開始循環(huán)萃取，萃取1-2 小時(shí)；
(3)從解析釜中放出物料，減壓蒸去溶劑后得流膏，干燥，即得穗花牡荊提取物。根據(jù)上述方法所得穗花牡荊提取物中總黃酮苷的含量為20%_99%，所得穗花牡荊提取物中含有紫花牡荊素。根據(jù)上述方法所得穗花牡荊提取物，可用于制備治療或輔助治療經(jīng)前期綜合癥和更年期綜合癥的藥物或保健食品。本發(fā)明可有效富集穗花牡荊干果實(shí)中脂溶性成分，而且著眼于適于工業(yè)化生產(chǎn)的工藝，通過提取、分離工藝的合理使用，獲得較高的提取收率，采用較低的操作溫度，且不使用毒性大的溶劑，產(chǎn)品溶劑殘留少，安全性高。本發(fā)明穗花牡荊提取物的制備工藝易于操作，根據(jù)本發(fā)明所提供方法制備的穗花牡荊提取物的總黃酮含量較高，且可檢出含有紫花牡荊素。所得穗花牡荊提取物可與益母草、蘆薈、珍珠、枸杞子等中藥材的提取物配伍使用，也可與如維生素E、維生素B、維生素C、 維生素D等維生素類或鈣補(bǔ)充劑(如碳酸鈣、葡萄糖酸鈣等)配伍使用，對于治療經(jīng)前期綜合癥和更年期綜合癥有確切的療效，并可作為保健食品原料，制成改善女性經(jīng)前期不適應(yīng)癥狀或更年期不適癥狀的保健食品。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
本發(fā)明實(shí)施例一種穗花牡荊提取物的制備方法，包括以下步驟 (1)取30kg穗花牡荊干果實(shí)，60%的乙醇300L ；(2)將穗花牡荊干果實(shí)粉碎，過10目篩后置于多功能提取罐中，加入60%乙醇180L，加熱至回流，保持提取2小時(shí)，放出提取液，藥渣加60%乙醇120L再加熱至回流，保持提取1. 5 小時(shí)，放出提取液；
(3)將步驟(2)所得提取液用200目濾網(wǎng)過濾，得濾液；
(4)將步驟(3)所得濾液減壓濃縮(真空度為0.09MPa，濃縮溫度為70°C)，待蒸出液基本無醇味后，放出流膏；
(5)加適量水將步驟(4)所得流膏稀釋至比重小于1.05(25°C)，經(jīng)800目濾布過濾， 濾液上DlOl大孔樹脂柱，待達(dá)到吸附飽和，依次加水及20%的乙醇洗去親水性雜質(zhì)，用70% 乙醇洗脫黃酮苷，收集洗脫液，將洗脫液濃縮、干燥，得穗花牡荊提取物。實(shí)施例2
本發(fā)明實(shí)施例一種穗花牡荊提取物的制備方法，包括以下步驟
(1)取30kg穗花牡荊干果實(shí)，30%的乙醇360L；
(2)將穗花牡荊干果實(shí)粉碎，過12目篩后置于提取罐中，溫浸提取，溫度為50°C，保持提取8小時(shí)，放出提取液；
(3)將步驟(2)所得提取液用200目濾網(wǎng)趁熱過濾，然后將濾液放冷至30°C以下，再用 800目不銹鋼網(wǎng)過濾，得過濾液；
(4)將步驟(3)所得過濾液減壓濃縮(真空度為0.09MPa，濃縮溫度為50°C)，待蒸出液基本無醇味后，放出流膏；
(5)加適量水將步驟(4)中所得的流膏稀釋到比重為1.03(25°C)的稀釋液，所得稀釋液經(jīng)600目濾布過濾，水液上聚酰胺柱，待達(dá)到吸附飽和，依次加水及20%的乙醇洗去親水性雜質(zhì)，用50%乙醇洗脫黃酮苷，收集洗脫液，將洗脫液濃縮、干燥，得穗花牡荊提取物。實(shí)施例3
本發(fā)明實(shí)施例一種穗花牡荊提取物的制備方法，包括以下步驟
(1)取30kg穗花牡荊干果實(shí)，95%的乙醇MOL；
(2)將穗花牡荊干果實(shí)粉碎，過12目篩后置于提取罐中，冷浸提取，保持提取M小時(shí)， 放出提取液；
(3)將步驟(2)所得提取液用500目濾網(wǎng)過濾，得過濾液；
(4)將步驟(3)所得過濾液減壓濃縮(真空度0.09MPa，濃縮溫度為45°C)，待蒸出液基本無醇味后，放出流膏；
(5)加適量水將步驟(4)中所得的流膏稀釋到比重為1.04(25°C)的稀釋液，所得稀釋液經(jīng)500目無紡布濾膜過濾，水液上AB-8大孔樹脂柱，待達(dá)到吸附飽和，依次加水及20%的乙醇洗去親水性雜質(zhì)，用60%乙醇洗脫黃酮苷，收集洗脫液，將洗脫液濃縮、干燥，得穗花牡荊提取物。實(shí)施例4
本發(fā)明實(shí)施例一種穗花牡荊提取物的制備方法，包括以下步驟
(1)取30kg穗花牡荊干果實(shí)，60%的乙醇溶液適量，所述乙醇溶液的量以滿足步驟(2) 中的需要為宜；
(2)將穗花牡荊干果實(shí)粉碎，過12目篩后裝入多級(jí)連續(xù)逆流滲漉裝置，以60%的乙醇為提取溶媒，浸泡12小時(shí)，再用此濃度的乙醇溶液，以細(xì)1/ (kg-min)流速滲漉，收集最后一根柱的滲漉液，一共收集3倍柱體積的滲漉液；
(3)將步驟(2)所得滲濾液用200目濾網(wǎng)粗濾，然后將濾液再用600目濾布過濾，得過濾液；
(4)將步驟(3)所得過濾液減壓濃縮(真空度為0.09MPa，濃縮溫度為45°C)，待蒸出液基本無醇味后，放出流膏；
(5)加適量水將步驟(4)中所得的流膏稀釋到比重為1.02(25°C)的稀釋液，所得稀釋液經(jīng)600目濾布過濾，水液上DlOl大孔樹脂柱，待達(dá)到吸附飽和，依次加水及20%的乙醇洗去親水性雜質(zhì)，用60%乙醇洗脫黃酮苷，收集洗脫液，將洗脫液濃縮、干燥，得穗花牡荊提取物。實(shí)施例5
本發(fā)明實(shí)施例一種穗花牡荊提取物的制備方法，包括以下步驟
(1)取30kg穗花牡荊干果實(shí)，50%的乙醇溶液適量，所述乙醇溶液的量以滿足步驟(2) 中的需要為宜；
(2)將穗花牡荊干果實(shí)粉碎，過10目篩后置于多級(jí)逆流滲漉裝置中，以50%的乙醇為提取溶媒，浸泡12小時(shí)，再用此濃度的乙醇溶液，以:3ml/ (kg-min)流速滲漉，收集最后一根柱的滲漉液，一共收集3倍柱體積的滲漉液；
(3)將步驟(2)所得滲漉液用300目濾布過濾，得過濾液；
(4)將步驟(3)所得過濾液減壓濃縮(真空度0.09MPa、濃縮溫度為50°C)，待蒸出液基本無醇味后，放出流膏；
(5)加適量純化水將步驟(4)所得流膏稀釋成20000ml，比重為1.04(25°C)，用水飽和正丁醇萃取4次，第一次水飽和正丁醇的體積為20000ml，第二、三、四次水飽和正丁醇的體積均為16000ml，合并萃取液，于65°C下減壓回收溶劑，減壓干燥，得穗花牡荊提取物。實(shí)施例6
本發(fā)明實(shí)施例一種穗花牡荊提取物的制備方法，包括以下步驟
(1)取3kg穗花牡荊干果實(shí)，60%的乙醇溶液適量，所述乙醇溶液的量以滿足步驟(2)中的需要為宜；
(2)將穗花牡荊干果實(shí)粉碎，過10目篩后置于多級(jí)逆流滲漉裝置中，以60%的乙醇為提取溶媒，浸泡12小時(shí)，再用此濃度的乙醇溶液，以:3ml/ (kg-min )流速滲漉，收集最后一根柱的滲漉液，一共收集3倍柱體積的滲漉液；
(3)將步驟(2)所得滲漉液用300目尼龍濾布過濾，得過濾液；
(4)將步驟(3)所得過濾液減壓濃縮(真空度0.09MPa、濃縮溫度為45°C)，待蒸出液基本無醇味后，放出流膏；
(5)在流膏中加純化水適量，稀釋至比重為1.05 (25°C)，得稀釋液3400ml，用水飽和正丁醇萃取四次，第一次:3400ml，第二、三、四次2700ml ；
(6)合并正丁醇層，減壓濃縮回收溶劑(真空度0.09MPa,溫度65°C )，殘?jiān)?倍量乙醇溶解；溶解后用中速濾紙過濾，濾液再用孔徑為0. 45um的有機(jī)相微孔濾膜過濾，所得濾液采用反相制備液相分離制備柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠(C18)，柱徑5cm，柱長55cm，有機(jī)相為甲醇，水相為0. 1%甲酸水溶液，梯度條件見表1。檢測波長348nm，流速為20ml/min，每次進(jìn)樣量為20ml處理好的濾液。以紫花牡荊素峰為目標(biāo)峰，收集相應(yīng)的流分，合并，于60°C下減壓回收溶劑，干燥，粉碎，得穗花牡荊提取物。
表1梯度條件
權(quán)利要求
1.一種穗花牡荊提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)稱取若干重量的穗花牡荊干果實(shí)，按照每千克穗花牡荊干果實(shí)需要纊20L乙醇溶液的比例，稱取乙醇溶液，其中，所述乙醇溶液的濃度為30-95% ；(2)將穗花牡荊干果實(shí)粉碎，采用冷浸、溫浸、滲漉或加熱回流進(jìn)行提取，提取后得提取液；(3 )將步驟(2 )中的提取液過濾，得過濾液；(4)將步驟(3)中所得過濾液減壓濃縮，操作溫度為30-70°C，得濃縮液；(5)將步驟(4)中所得濃縮液除雜，干燥，得穗花牡荊提取物。
2.如權(quán)利要求1所述穗花牡荊提取物的制備方法，其特征在于步驟(2)中采用多級(jí)連續(xù)逆流滲漉進(jìn)行提取。
3.如權(quán)利要求1所述的穗花牡荊提取物的制備方法，其特征在于步驟(4)中濃縮的操作溫度為35-50°C。
4.如權(quán)利要求1所述的穗花牡荊提取物的制備方法，其特征在于步驟(5)的除雜過程采用大孔樹脂或聚酰胺作為填料對濃縮液進(jìn)行吸附，用乙醇溶液洗脫，收集洗脫液。
5.如權(quán)利要求1所述的穗花牡荊提取物的制備方法，其特征在于步驟(5)中除雜過程為在步驟(4)所得的濃縮液中加適量純化水稀釋，得稀釋液，然后用水飽和正丁醇萃取4 次，合并萃取液。
6.如權(quán)利要求5所述的穗花牡荊提取物的制備方法，其特征在于用水飽和正丁醇萃取時(shí)，第一次水飽和正丁醇的體積為所述稀釋液體積的100%，第二、三、四次水飽和正丁醇的體積均為所述稀釋液體積的80%。
7.如權(quán)利要求5或6所述的穗花牡荊提取物的制備方法，其特征在于所述的除雜過程還包括將所得萃取液減壓回收溶劑，所得固形物加適量純化水溶解，用水相微孔濾膜過濾， 所得濾液采用反相制備液相分離。
8.一種穗花牡荊提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)稱取若干重量的穗花牡荊干果實(shí)，粉碎，過M目篩，裝入萃取釜中，將萃取釜升溫至50°C、解析釜52°C，每千克穗花牡荊干果實(shí)加入1-1. 5L濃度為95%的乙醇溶液作為夾帶劑；(2)打開C02氣瓶對系統(tǒng)進(jìn)行加壓，當(dāng)操作壓力達(dá)到25MPa時(shí)，開始循環(huán)萃取，萃取1-2 小時(shí)；(3)從解析釜中放出物料，減壓蒸去溶劑后得流膏，干燥，即得穗花牡荊提取物。
9.如權(quán)利要求1或8所述方法制備的穗花牡荊提取物，其特征在于所述穗花牡荊提取物中總黃酮苷的含量為20%-99%，所述穗花牡荊提取物中含有紫花牡荊素。
10.如權(quán)利要求9所述穗花牡荊提取物的用途，其特征在于所述穗花牡荊提取物在制備治療或輔助治療經(jīng)前期綜合癥和更年期綜合癥的藥物或保健食品上的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開一種穗花牡荊提取物的制備方法及用途。一種穗花牡荊提取物的制備方法，稱取若干重量的穗花牡荊干果實(shí)，按照每千克穗花牡荊干果實(shí)需要8~20L乙醇溶液的比例，稱取乙醇溶液，其中，所述乙醇溶液的濃度為30-95%，采用冷浸、溫浸、滲漉、加熱回流或CO2超臨界萃取進(jìn)行提取，過濾、濃縮、除雜、干燥后，即得穗花牡荊提取物。采用本發(fā)明公開方法制得的穗花牡荊提取物中總黃酮含量較高，且檢測含有紫花牡荊素。所得穗花牡荊提取物可用于制備治療或輔助治療經(jīng)前期綜合癥和更年期綜合癥的藥物或保健食品。
文檔編號(hào)A61K36/85GK102228565SQ201110123759
公開日2011年11月2日 申請日期2011年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月13日
發(fā)明者葉志明, 張奮鵬, 陳麟林 申請人:潮州市澤潤制藥有限公司