專利名稱：一種藥物組合物的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種治療經(jīng)前期綜合癥的復(fù)方藥物的質(zhì)量控制方法。具體講是以高效液相色譜法同時(shí)檢測(cè)所含的三種主要成分對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴(Pamabrom)及順丁烯二酸新安替根(Pyrilamine Maleate)含量的方法。
背景技術(shù)：
含對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴及順丁烯二酸新安替根的組合物可用于育齡婦女在月經(jīng)前反復(fù)出現(xiàn)一系列精神、行為及體質(zhì)等方面的癥狀即經(jīng)前期綜合征(PMS)，控制含該三種成分的藥品質(zhì)量時(shí)，需準(zhǔn)確測(cè)定三種成分的含量，目前尚無有關(guān)其測(cè)定方法的文獻(xiàn)報(bào)道。
對(duì)乙酰氨基酚為常用非甾體抗炎藥，文獻(xiàn)報(bào)道的含量測(cè)定方法較多，分析方法有容量分析法、紫外分光光度法和高效液相色譜法。容量分析法需要從制劑中把各組分分別提取出來進(jìn)行測(cè)定，該方法操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，精密度和準(zhǔn)確度均較差。紫外分光光度法也需進(jìn)行樣品的前處理，以排除各組分間的相互干擾。
目前文獻(xiàn)報(bào)道采用HPLC法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚含量的條件也有多種。采用的色譜系統(tǒng)主要有甲醇-水、甲醇-乙腈-水或甲醇-乙腈-H3PO4溶液等幾種?！吨袊帉W(xué)雜志》2000，35(11)中伏光華、劉梅娟的“高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定復(fù)方氯唑沙宗片中兩組分血藥濃度”一文中，采用甲醇-水(45∶55)作流動(dòng)相可測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚的含量；《解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)》2000，16(5)中張躍新的“HPLC法測(cè)定復(fù)方感冒分散片中4種有效成分的含量”一文中，采用氰基柱，甲醇-乙腈-H3PO4-三乙醇胺(48∶26∶26∶0.25∶0.05)作流動(dòng)相，可同時(shí)測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚、偽麻黃堿、右美沙芬、氯苯那敏的含量；《牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)》2001，22(03)中于萬軍、周金霞的“HPLC法測(cè)定維C銀翹片中對(duì)乙酰氨基酚的含量”一文中，采用C18柱，乙腈-甲醇-水(10∶40∶50)作流動(dòng)相，可用于對(duì)乙酰氨基酚的含量測(cè)定等等。
上述條件均是針對(duì)對(duì)乙酰氨基酚及其與其它藥物組合物的分析方法，經(jīng)試驗(yàn)上述色譜系統(tǒng)對(duì)本發(fā)明中三種組分的分離度低，分析時(shí)間長，均不適用于該三種組分的含量測(cè)定，經(jīng)檢索亦未發(fā)現(xiàn)有同時(shí)測(cè)定這三組成分的檢測(cè)方法。
USP24-NF19 supplement2中pamabrom項(xiàng)下茶堿檢查的色譜條件為水-甲醇-冰醋酸(69∶30∶1)，Pyrilamine Maleate項(xiàng)下有關(guān)物質(zhì)檢查的色譜條件為0.01mol/L乙酸銨-甲醇-三乙胺(40∶60∶0.1)。經(jīng)試驗(yàn)每個(gè)色譜體系只能用于其中一種成分的含量測(cè)定，不能同時(shí)測(cè)定三種組分。
針對(duì)三種組分的含量測(cè)定進(jìn)行的試驗(yàn)研究中，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)，當(dāng)采用水相與有機(jī)相的混合溶劑，而且水相的PH值范圍為4.0～5.5之間時(shí)，三種組分均能得到較好分離，可應(yīng)用同一體系在30分鐘內(nèi)同時(shí)測(cè)定三種組分的含量，大大簡化了實(shí)驗(yàn)過程，節(jié)約大量的時(shí)間及人力、物力成本。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是研究一種操作簡便、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好，可同時(shí)測(cè)定含對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴及順丁烯二酸新安替根組合物含量的方法。
經(jīng)大量試驗(yàn)，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)，當(dāng)采用水相與有機(jī)相的混合溶劑，而且水相的PH值范圍為4.0～5.5時(shí)三種組分均能得到較好分離，準(zhǔn)確度高而且重現(xiàn)性好。
本發(fā)明采用高效液相色譜法，以特定PH值的水相與有機(jī)相的混合溶劑為流動(dòng)相進(jìn)行分離測(cè)定。其中水相PH值優(yōu)選為PH4.0～5.5，更優(yōu)選為4.3～5.2，最優(yōu)選為4.5～5.0。
本發(fā)明流動(dòng)相體系中，水相所占比例為40％～85％，優(yōu)選50％～80％，最優(yōu)選為55％～75％。
無論水相中是否含有鹽類，只要在特定PH條件下，均可同時(shí)測(cè)定這三種組分的含量。水相中若含有鹽類，優(yōu)選為醋酸鹽和磷酸鹽，但并不意味著只是這兩種鹽類。
本發(fā)明流動(dòng)相體系中，有機(jī)相為低級(jí)醇或腈類。低級(jí)醇優(yōu)選為甲醇、乙醇或異丙醇，更優(yōu)選為甲醇或乙醇，最優(yōu)選為甲醇。腈指乙腈。有機(jī)相可以是單一醇或腈，也可以是它們的混合。
采用本發(fā)明可一次同時(shí)測(cè)定藥物組合物中對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴及順丁烯二酸新安替根的含量。該藥物組合物的制劑劑型為片劑、膠囊劑或其它可藥用劑型。
本發(fā)明色譜體系中，樣品僅需用流動(dòng)相溶解，過濾后即可直接進(jìn)樣，測(cè)定一次不超過30分鐘，三種組分峰的理論板數(shù)均大于2000。本方法精密度高，穩(wěn)定性好，樣品輔料不影響測(cè)定，高、中、低濃度的回收率均較好，重現(xiàn)性較好，方法操作簡便，穩(wěn)定可靠，實(shí)用性強(qiáng)，非常適合用于此類復(fù)方制劑產(chǎn)品質(zhì)量控制。
對(duì)比例1采用高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6×150mm)，以甲醇-水(45∶55)為流動(dòng)相，流速1ml/min，檢測(cè)波長280nm。取樣品(約含對(duì)乙酰氨基酚0.5mg/ml，帕馬溴0.025mg/ml，順丁烯二酸新安替根0.015mg/ml)20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖(

圖1)，三種成分未得到有效分離，調(diào)節(jié)甲醇與水的不同配比，三種成分均不能得到有效分離，可見單純的甲醇-水系統(tǒng)不能用于該三種成分的分離。
對(duì)比例2用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6×150mm)，以乙腈-水(20∶80)為流動(dòng)相，流速1ml/min，檢測(cè)波長280nm。取樣品(約含對(duì)乙酰氨基酚0.5mg/ml，帕馬溴0.025mg/ml，順丁烯二酸新安替根0.015mg/ml)20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，三種成分未得到有效分離。調(diào)節(jié)乙腈與水的不同配比，三種成分均不能得到有效分離，可見單純的乙腈-水系統(tǒng)也不能用于該三種成分的分離。
對(duì)比例3用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-乙腈-水(用醋酸調(diào)節(jié)PH值為3.9)(48∶26∶26)為流動(dòng)相，流速1ml/min，檢測(cè)波長280nm。取樣品(約含對(duì)乙酰氨基酚0.5mg/ml，帕馬溴0.025mg/ml，順丁烯二酸新安替根0.015mg/ml)20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖(圖2)，三種成分未得到有效分離。調(diào)節(jié)甲醇、乙腈和水的不同配比，三種成分均不能得到有效分離，可見不同配比的甲醇、乙腈和調(diào)節(jié)PH值為3.9水的組合也不能用于該三種成分的分離。
對(duì)比例4用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-0.005mol/L磷酸鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)PH值為5.7)(30∶70)為流動(dòng)相，流速1ml/min，檢測(cè)波長280nm。取樣品(約含對(duì)乙酰氨基酚0.5mg/ml，帕馬溴0.025mg/ml，順丁烯二酸新安替根0.015mg/ml)20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，三種成分未得到有效分離。調(diào)節(jié)甲醇、乙腈和水的不同配比，三種成分均不能得到有效分離，可見不同配比的甲醇、乙腈和PH值為5.7的磷酸鉀溶液的組合也不能用于該三種成分的分離。
實(shí)施例1用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6×150mm)，以0.005mol/L醋酸銨溶液(用醋酸調(diào)PH值為4.6)-甲醇(50∶50)為流動(dòng)相，流速0.8ml/min，檢測(cè)波長280nm。取樣品，精密稱定適量(約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚500mg，帕馬溴25mg，順丁烯二酸新安替根15mg)，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積；另取對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴及順丁烯二酸新安替根對(duì)照品，同樣測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算即得。本法對(duì)乙酰氨基酚回收率為99.70％，RSD＝0.41％，帕馬溴回收率為100.1％，RSD＝0.47％，順丁烯二酸新安替根回收率為100.0％，RSD＝0.59％。
試驗(yàn)證明該三組分應(yīng)用上述方法可獲得良好的分離檢測(cè)效果。
實(shí)施例2用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6×150mm)，以0.05mol/L醋酸銨溶液(含三乙胺0.05mol/L，用醋酸調(diào)PH值為4.9)-甲醇(70∶30)為流動(dòng)相，流速1ml/min，檢測(cè)波長280nm。取樣品，精密稱定適量(約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚500mg，帕馬溴25mg，順丁烯二酸新安替根15mg)，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積；另取對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴及順丁烯二酸新安替根對(duì)照品，同樣測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算即得。本法對(duì)乙酰氨基酚回收率為99.70％，RSD＝0.22％，帕馬溴回收率為100.4％，RSD＝0.64％，順丁烯二酸新安替根回收率為99.89％，RSD＝0.62％。
試驗(yàn)證明該三組分應(yīng)用上述方法可獲得良好的分離檢測(cè)效果。
實(shí)施例3
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水(用醋酸調(diào)PH值為5.3)-甲醇(70∶30)為流動(dòng)相，流速1ml/min，檢測(cè)波長280nm。取樣品，精密稱定適量(約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚500mg，帕馬溴25mg，順丁烯二酸新安替根15mg)，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積；另取對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴及順丁烯二酸新安替根對(duì)照品，同樣測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算即得。本法對(duì)乙酰氨基酚回收率為100.2％，RSD＝0.44％，帕馬溴回收率為99.8％，RSD＝0.38％，順丁烯二酸新安替根回收率為100.1％，RSD＝0.37％。
試驗(yàn)證明該三組分應(yīng)用上述方法可獲得良好的分離檢測(cè)效果。
實(shí)施例4用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.005mol/L的磷酸銨溶液(用磷酸調(diào)PH值為4.8)-甲醇(60∶40)為流動(dòng)相，流速1ml/min，檢測(cè)波長280nm。取樣品，精密稱定適量(約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚500mg，帕馬溴25mg，順丁烯二酸新安替根15mg)，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積；另取對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴及順丁烯二酸新安替根對(duì)照品，同樣測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算即得。本法對(duì)乙酰氨基酚回收率為100.1％，RSD＝0.44％，帕馬溴回收率為100.4％，RSD＝0.63％，順丁烯二酸新安替根回收率為100.1％，RSD＝0.55％。
試驗(yàn)證明該三組分應(yīng)用上述方法可獲得良好的分離檢測(cè)效果。
實(shí)施例5用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.005mol/L的磷酸銨溶液(用磷酸調(diào)PH值為4.7)-乙腈(80∶20)為流動(dòng)相，流速1ml/min，檢測(cè)波長280nm。取樣品，精密稱定適量(約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚500mg，帕馬溴25mg，順丁烯二酸新安替根15mg)，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積；另取對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴及順丁烯二酸新安替根對(duì)照品，同樣測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算即得。本法對(duì)乙酰氨基酚回收率為99.8％，RSD＝0.37％，帕馬溴回收率為100.1％，RSD＝0.50％，順丁烯二酸新安替根回收率為100.0％，RSD＝0.56％。
試驗(yàn)證明該三組分應(yīng)用上述方法可獲得良好的分離檢測(cè)效果。
實(shí)施例6用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.005mol/L的磷酸銨溶液(用磷酸調(diào)PH值為5.0)甲醇(60∶40)為流動(dòng)相，流速1ml/min，檢測(cè)波長280nm。取樣品，精密稱定適量(約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚500mg，帕馬溴25mg，順丁烯二酸新安替根300mg)，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖(圖3，1#對(duì)乙酰氨基酚，2#帕馬溴，3#新安替根，4#順丁烯二酸)，量取峰面積；另取對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴及順丁烯二酸新安替根對(duì)照品，同樣測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算即得。本法對(duì)乙酰氨基酚回收率為99.9％，RSD＝0.41％，帕馬溴回收率為100.3％，RSD＝0.47％，順丁烯二酸新安替根回收率為100.1％，RSD＝0.52％。
試驗(yàn)證明三種成分在上述混合溶劑也可獲得良好的分離檢測(cè)效果。
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)含對(duì)乙酰氨基酚、帕馬溴及順丁烯二酸新安替根組合物的方法，其特征在于采用高效液相色譜法，以適當(dāng)PH值的水相與有機(jī)相的混合溶劑為流動(dòng)相的體系中進(jìn)行分離測(cè)定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述，其特征在于水相PH值為4.0～5.5。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述，其特征在于水相PH值為4.3～5.2。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述，其特征在于水相PH值為4.5～5.0。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述，其特征在于有機(jī)相為低級(jí)醇類或腈類，或低級(jí)醇與腈的混合。
全文摘要
本發(fā)明是一種藥物組合物的檢測(cè)方法，可同時(shí)測(cè)定三種組分的含量。采用高效液相色譜法，以適當(dāng)pH值的水相與有機(jī)相的混合溶劑為流動(dòng)相進(jìn)行分離測(cè)定。本測(cè)定方法專屬性強(qiáng)，分離效果好，可大大簡化試驗(yàn)過程。
文檔編號(hào)G01N30/00GK1603815SQ0315448
公開日2005年4月6日 申請(qǐng)日期2003年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月30日
發(fā)明者向東, 王映輝, 李梅 申請(qǐng)人:北京東方凱恩醫(yī)藥科技有限公司