專利名稱：選擇性切斷生物體高分子的非共價(jià)鍵等并分析的方法和裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種選擇性切斷生物體高分子的非共價(jià)鍵、其它鍵并分析的方法和裝置。
背景技術(shù)：
在質(zhì)量分析裝置等離子分析裝置中，需要對待分析的樣品進(jìn)行電離。因而，在這些離子分析裝置的前段設(shè)有電離裝置。
電噴霧電離(ESIelectrospray ionization)法為離子分析裝置中使用的電離法之一。
電噴霧電離(ESI)法作為可以使DNA或蛋白質(zhì)等生物體高分子電離的方法之一被廣泛使用。ESI法可以溫和地電離DNA或蛋白質(zhì)，以非共價(jià)鍵形成的多個DNA或蛋白質(zhì)構(gòu)成的配位化合物也可以以原有的形式電離。由于具有這樣的特征，ESI法被用于生物體分子的結(jié)構(gòu)功能分析。
生命活動是通過各種生物體分子相互作用而實(shí)現(xiàn)的。因而，在理解生命現(xiàn)象的基礎(chǔ)上，利用生物體分子的相互作用形成的配位化合物的整個分子質(zhì)量是重要的信息，了解其相互作用的強(qiáng)度也很重要。
為了通過質(zhì)量分析來解析ESI法產(chǎn)生的配離子的分子間相互作用的強(qiáng)度，通常使用組合ESI法和碰撞活化的方法。該方法如下所述。即，用ESI法電離由多個生物體分子亞單元構(gòu)成的配位化合物，觀測配位化合物的分子量相關(guān)離子。接著，將該離子導(dǎo)入真空中，用電場加速該離子，使其與真空中的氣體分子碰撞，進(jìn)行碰撞活化，使其解離成形成配位化合物的各構(gòu)成要素，考察已賦予的碰撞活化能和鍵的強(qiáng)度的相關(guān)關(guān)系。
如同酶與輔酶或藥物受體與藥物等那樣，在是蛋白質(zhì)-低分子化合物配位化合物的情況下，在該方法中蛋白質(zhì)或低分子化合物不發(fā)生分解而只切斷非共價(jià)鍵，從而各分子解離，可以考察相互作用的強(qiáng)度。
然而，如同雙鏈DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的配位化合物那樣，靜電相互作用或氫鍵成為配位化合物形成的主要因素，而且構(gòu)成的分子的結(jié)構(gòu)不十分穩(wěn)定，此時，如果使用上述方法，不僅切斷非共價(jià)鍵，還切斷弱的共價(jià)鍵，其片斷(fragment)也被合在一起觀測。例如也可能切斷雙鏈DNA部分的共價(jià)鍵。這是因?yàn)椋糜谂鲎不罨哪芰勘幌脑谂湮换衔锏慕怆x和碎裂(fragmentation)兩方面。所以，得到的光譜變得復(fù)雜，在通常的ESI-碰撞活化的方法中，難以正確地定量解析相互作用的強(qiáng)度。例如參照下面的文獻(xiàn)。
Activation Energies for Dissociation of Double Strand OligonucleotideAnionsEvidence for Watson-Crick Base Paring in Vacuo Schnier PD，Klassen JS，Strittmatter EF and Williams ER JACS(1998)120，9605-9613。
生物體高分子的離子分析中的另一個問題是，有時生物體樣品溶液中會不可避免地含有界面活性劑。另外，為了提取例如脂溶性蛋白質(zhì)，需要界面活性劑。如果在生物體樣品溶液中含有界面活性劑，則ESI法難以氣化蛋白質(zhì)，難以電離。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種可以只選擇性地切斷生物體高分子的非共價(jià)鍵并分析的方法。
本發(fā)明還提供一種選擇性地切斷包括生物體高分子的非共價(jià)鍵的各種鍵并進(jìn)行分析的方法。
本發(fā)明還提供一種與是否存在界面活性劑無關(guān)而可以分析蛋白質(zhì)等生物體高分子的方法。
本發(fā)明還提供一種適用于上述的選擇性切斷的分析裝置。
利用本發(fā)明的生物體高分子的分析方法是，將含有生物體樣品的溶液導(dǎo)入毛細(xì)管中，在施加的電場下向從毛細(xì)管的頂端流出的樣品溶液照射第1紅外激光光，使溶液中的生物體高分子解離成構(gòu)成要素，將解離的構(gòu)成要素離子或生物體高分子離子導(dǎo)入到分析裝置的主要部分的方法。在生成的帶電液滴中也會發(fā)生生物體高分子向構(gòu)成要素的解離。分析裝置的主要部分是指產(chǎn)生對已解離的構(gòu)成要素離子或生物體高分子離子進(jìn)行鑒定的數(shù)據(jù)的部分(通常該主要部分被稱為分析裝置)。作為一個例子，紅外激光光是具有10.6μm的波長的激光。
利用電噴霧法，在電場下，從毛細(xì)管的頂端噴霧含有生物體高分子的樣品溶液。利用第1紅外激光光照射，由很多生物體分子構(gòu)成的配位化合物在溶液中被分解為其構(gòu)成要素(亞單元分子)。被分解的構(gòu)成要素利用第1紅外激光光照射，與電噴霧法相比，極大地促進(jìn)了氣相電離。另外，配位化合物只有其非共價(jià)鍵被紅外激光光照射選擇性地切斷，其它共價(jià)鍵等不被切斷。這樣，作為配位化合物的構(gòu)成要素的生物體分子不被斷片化，而從配位化合物解離，而且促進(jìn)氣相離子的產(chǎn)生，所以通過將其導(dǎo)入分析裝置的主要部分，配位化合物或生物體分子的高敏感度檢測及其解析成為可能。另外，即使在生物體樣品溶液中含有界面活性劑，通過第1紅外激光光照射，生物體樣品也容易氣化、電離，所以可以進(jìn)行其分析。
在切斷沒有被紅外激光光切斷的共價(jià)鍵等的情況下，向上述配位化合物或構(gòu)成要素照射第2激光光。第2激光光的波長可以根據(jù)欲切斷的鍵的種類等來確定。
根據(jù)需要，優(yōu)選對生物體樣品進(jìn)行加熱、冷卻等溫度控制。通過冷卻，可以處理用通常的溫度(例如室溫)難以觀測的非常弱的鍵構(gòu)成的配位化合物。
另外，使激光光的強(qiáng)度改變，將在各激光光強(qiáng)度中產(chǎn)生的構(gòu)成要素離子導(dǎo)入到分析裝置的主要部分即可。由于激光光強(qiáng)度產(chǎn)生的構(gòu)成要素離子不同，所以對闡明鍵的強(qiáng)度有幫助。
包括如下步驟即可將在未照射第1紅外激光光的狀態(tài)下電離的生物體高分子導(dǎo)入到分析裝置的主要部分的步驟；將在照射第1激光光的狀態(tài)下產(chǎn)生的構(gòu)成要素離子導(dǎo)入到分析裝置的主要部分的步驟。
利用本發(fā)明的分析裝置具備供給樣品溶液的毛細(xì)管；在上述毛細(xì)管的頂端部附近形成電場的機(jī)構(gòu)；調(diào)整上述毛細(xì)管內(nèi)或從上述毛細(xì)管噴霧的液滴的溫度的機(jī)構(gòu)；為了向上述毛細(xì)管的頂端部附近照射紅外激光光而配置的第1紅外激光光源；以及將從上述毛細(xì)管的頂端噴霧的樣品的離子或利用上述紅外激光光照射解離的構(gòu)成要素離子導(dǎo)入到分析裝置的主要部分的機(jī)構(gòu)。在毛細(xì)管的頂端部附近形成電場的機(jī)構(gòu)、調(diào)整溫度的手段包括后述的如實(shí)施例所示的各種形式。將樣品的離子或解離的構(gòu)成要素離子導(dǎo)入到分析裝置的主要部分的機(jī)構(gòu)也可以是打開分析裝置的離子導(dǎo)入孔的孔口(orifice)。
通過設(shè)置第2激光光源，共價(jià)鍵等鍵的切斷也成為可能。另外，設(shè)置監(jiān)視器裝置，可以拍攝毛細(xì)管頂端部附近的樣品溶液的噴霧狀態(tài)。還可以設(shè)置各種溫度調(diào)整裝置、結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明還提供一種納米激光噴霧裝置。


圖1是表示第1實(shí)施例的分析裝置的構(gòu)成圖。
圖2表示利用電噴霧使生物體高分子(配位化合物)電離、利用紅外激光照射解離成其構(gòu)成要素的一個例子。
圖3表示質(zhì)量光譜。
圖4是表示激光強(qiáng)度對離子強(qiáng)度特性的典型例子的曲線圖。
圖5表示含有界面活性劑的樣品溶液的質(zhì)量光譜。
圖6是表示第2實(shí)施例的分析裝置的構(gòu)成圖。
圖7是表示第3實(shí)施例的分析裝置的構(gòu)成圖。
圖8是表示硅毛細(xì)管的截面圖。
具體實(shí)施例方式
第1實(shí)施例圖1是表示包括在質(zhì)量分析裝置的離子導(dǎo)入口附近安裝的激光噴霧裝置的分析裝置的整體構(gòu)成圖。
在質(zhì)量分析裝置10的離子導(dǎo)入口的部分，安裝有開有微細(xì)的孔11a的第1孔口11。微細(xì)的孔11a為離子導(dǎo)入口。質(zhì)量分析裝置10內(nèi)被保持成真空。質(zhì)量分析裝置10內(nèi)還進(jìn)一步設(shè)置有在內(nèi)方開有微細(xì)的孔12a的第2孔口12。在第1孔口11與第2孔口12之間設(shè)置有環(huán)形透鏡(ring lens)13。在激光噴霧裝置20產(chǎn)生的離子通過第1孔口11的孔11a，利用透鏡13發(fā)生偏斜，通過第2孔口12的孔12a，向質(zhì)量分析裝置10的內(nèi)部導(dǎo)入。
在質(zhì)量分析裝置10的器壁，以包圍孔口11并將其覆蓋的方式安裝有激光噴霧裝置20的外殼(housing)21。由外殼21和孔口11包圍的空間為電離空間。電離空間內(nèi)可以為大氣壓。但也可以將電離空間內(nèi)保持為真空。整個質(zhì)量分析裝置10和激光噴霧裝置20相當(dāng)于本發(fā)明的分析裝置。質(zhì)量分析裝置10相當(dāng)于利用本發(fā)明的分析裝置的主要部分。
設(shè)置有貫通外殼21的壁并用于供給含有生物體高分子的生物體樣品溶液的毛細(xì)管(細(xì)管)22；和包圍該毛細(xì)管22的除了頂端部以外的外側(cè)的外筒23。毛細(xì)管22的頂端部位于外殼21內(nèi)的孔口11的孔11a的近旁。在外殼21的外部，毛細(xì)管22從外筒23向其外方導(dǎo)出。
在毛細(xì)管22的外周面與外筒23的內(nèi)表面之間有間隙(間隔)，通過該間隙供給用于調(diào)整溫度(加熱或冷卻用)(在促進(jìn)液體樣品的干燥的情況下，如果使氣體干燥，則效果更佳)的輔助氣體(N2氣)。外筒23的頂端部在外殼21的內(nèi)部，在毛細(xì)管22的頂端的若干靠近之處形成錐形形狀，直徑變細(xì)，上述間隙變窄。被供給到上述間隙的輔助氣體從外筒23的頂端部噴出到電離空間內(nèi)。
向毛細(xì)管22的頂端部附近施加正或負(fù)的高電壓?？梢杂脤?dǎo)體形成毛細(xì)管22，向毛細(xì)管22施加高電壓；在毛細(xì)管22為玻璃管那樣的絕緣體的情況下，也可以在毛細(xì)管22的外周面蒸鍍金屬膜，向該金屬膜施加高電壓。也可以在毛細(xì)管22的內(nèi)部插入施加了高電壓的導(dǎo)電線。也可以向外筒23施加高電壓。
這樣，通過毛細(xì)管22和外筒23構(gòu)成電噴霧裝置。利用輔助氣體(N2氣)冷卻毛細(xì)管22內(nèi)的溶液時，也可以將其稱為冷噴霧。冷噴霧使鍵較弱的配位化合物的解析成為可能。
在外殼21的外部配置紅外光激光裝置31，從該激光裝置31發(fā)射波長10.6μm的紅外激光光，利用透鏡33聚光，通過外殼21的開口或由透明體形成的窗，入射到外殼21內(nèi)。激光裝置31被配置成其發(fā)射的激光光沿著毛細(xì)管22的軸方向投射到毛細(xì)管22的頂端。也可以將激光裝置31配置在毛細(xì)管22的側(cè)方，將其發(fā)射的激光光從與毛細(xì)管22的軸方向垂直的方向投射到毛細(xì)管22的頂端部。在這種情況下，毛細(xì)管22的頂端部相對紅外光為透明的。也可以將激光光照射到相對于毛細(xì)管22的頂端稍微外方的位置。
從毛細(xì)管22向其頂端部供給生物體樣品溶液，該溶液與輔助氣體一起從毛細(xì)管頂端噴霧。此時，生物體樣品在由多種生物體分子(構(gòu)成要素)構(gòu)成的配位化合物(生物體高分子)的狀態(tài)下被電離。通過在毛細(xì)管22的頂端部附近向含有配位化合物的生物體樣品溶液照射紅外激光光，配位化合物在其共價(jià)鍵不被切斷的情況下，被選擇性地切斷非共價(jià)鍵，解離成其構(gòu)成要素的離子。利用紅外激光光照射也可以促進(jìn)電離。配離子或已解離的構(gòu)成要素的離子被從孔口11的孔11a導(dǎo)入到質(zhì)量分析裝置20內(nèi)。
如果顯示一個例子，如圖2所示，利用電噴霧，生成樣品中的雙鏈DNA-蛋白質(zhì)配離子。該配離子通過紅外激光光照射，只被切斷氫鍵(非共價(jià)鍵)，解離成蛋白質(zhì)離子和2條單鏈DNA離子。單鏈DNA離子在紅外激光光照射下不完全分解。此外，為了在第2圖中容易理解，描繪成按照電離和向構(gòu)成要素的解離這樣的順序發(fā)生，但實(shí)際上這些是同時發(fā)生的，或者在向構(gòu)成要素解離之后發(fā)生電離的情況居多。配位化合物利用紅外激光光照射在溶液(液滴)中解離成構(gòu)成要素。
圖3表示將紅外激光光的輸出從零(OFF)改變?yōu)?.2W、1.4W時得到的質(zhì)量光譜。
如果加強(qiáng)照射的紅外激光光的強(qiáng)度，則進(jìn)行從雙鏈DNA-蛋白質(zhì)配離子向蛋白質(zhì)離子的解離，在1.4W的激光照射下幾乎觀測不到配離子。表明DNA分子的共價(jià)鍵被切斷的離子完全觀測不到，可觀測到2條單鏈DNA離子。
這樣，利用紅外激光光照射選擇性地切斷氫鍵或基于靜電相互作用的非共價(jià)鍵。接著，通過改變照射的激光光的強(qiáng)度，可以解析依賴于分子間的靜電相互作用的鍵或氫鍵的強(qiáng)度。
上述方法如下所述可以用于很多有效解析。
不僅是DNA-蛋白質(zhì)配位化合物，而且在藥物-DNA或藥物-蛋白質(zhì)的相互作用中，有靜電相互作用或氫鍵成為主要原因而形成配位化合物的情況。特別是在造藥中，從多個候補(bǔ)化合物篩選相互作用的藥物時，如質(zhì)量分析那樣，只要可以使用混合物也適用且生產(chǎn)量高的方法，就可以縮短藥品的候補(bǔ)化合物的縮減所需要的時間，是極為有效的。例如混合分子量不同的10種候補(bǔ)化合物和作為目標(biāo)的雙鏈DNA，首先，用ESI法檢測配位化合物的離子。從觀測的分子量相關(guān)離子的質(zhì)量進(jìn)行判斷，在該階段分清可以由10種候補(bǔ)化合物構(gòu)成的配位化合物的化合物。接著，進(jìn)行紅外光激光照射，改變此時照射的激光強(qiáng)度，解析配離子解離的形態(tài)。可以從激光強(qiáng)度的變化，對配離子的解離容易度進(jìn)行排序。
圖4是表示對于某種特定離子，離子強(qiáng)度的激光光強(qiáng)度依賴性的典型例子的曲線圖(毛細(xì)管22為不銹鋼制，其內(nèi)徑為0.1mm、外徑為0.2mm、激光點(diǎn)直徑0.3mm的情況)。根據(jù)生物體樣品的種類或生物體樣品中解離的離子，激光光強(qiáng)度不同，激光光強(qiáng)度對離子強(qiáng)度大致顯示如圖4所示的特性。如果激光強(qiáng)度比某值大，離子強(qiáng)度急劇地減少。這是因?yàn)?，如果從毛?xì)管22的頂端出來的樣品溶液被激光光照射而氣化，則不銹鋼制毛細(xì)管的內(nèi)部幾乎不存在電場，所以樣品溶液作為帶電液滴已經(jīng)變成不從毛細(xì)管22頂端噴霧。
在改變紅外激光光輸出(激光光強(qiáng)度)，檢測目標(biāo)離子中，發(fā)現(xiàn)最佳激光光強(qiáng)度很重要。
圖5是表示對于含有界面活性劑10mM(摩爾)的10-5M的細(xì)胞色素C，在激光光的輸出為零(OFF即電噴霧)的情況和為1.0W的情況下得到的質(zhì)譜圖。
在激光光為OFF的情況下，只有雜質(zhì)離子(例如m/z 229.22630)占優(yōu)勢。
與此相對，如果照射1.0W的紅外激光光，表現(xiàn)出在細(xì)胞色素C分子附加n個質(zhì)子的多價(jià)離子(M+nH)n+(n＝5～12)的光譜(m/z 607.32437為雜質(zhì)離子)。
即使存在這樣的界面活性劑，也可以通過照射紅外激光光，高敏感度地檢測出蛋白質(zhì)等生物體(高)分子離子。
第2實(shí)施例圖6是表示第2實(shí)施例的激光噴霧裝置的圖。向與圖1所示的結(jié)構(gòu)相同的部件附加相同的符號，避免重復(fù)說明。
在毛細(xì)管22的外側(cè)，除了第1外筒23之外，在毛細(xì)管22的頂端部，第2外筒24設(shè)置在第1外筒23的外側(cè)并隔著間隔。兩外筒23、24的頂端部在毛細(xì)管22的頂端部附近變?yōu)榧饧?xì)開口。
在該實(shí)施例中，溫度調(diào)整裝置40具備液氮的桶(tank)41。已氣化的氮?dú)鈴耐?1被送至供給管42。供給管42分支為2個支管43、44。這些支管43、44與外筒23、24連接。在各支管43、44，以可以分別獨(dú)立地操作、控制的方式設(shè)置有流量調(diào)節(jié)閥45、46和加熱器47、48。
最典型的使用方法是，與供給到第1外筒23的氮?dú)庀啾?，供給到第2外筒24的氮?dú)飧?例如0℃左右)。用流向第1外筒23的氮?dú)忸A(yù)冷被導(dǎo)入到毛細(xì)管22的生物體樣品溶液，在從毛細(xì)管22噴霧時，用從第2外筒24噴射的氮?dú)饫鋮s到需要的溫度(例如0℃)。
在外殼21的壁設(shè)置Peltier元件50。將整個電離空間(室)內(nèi)冷卻到需要的溫度。
也可以與上述相反，使供給到第1、第2外筒23、24的氣體高于室溫，加熱樣品。對于電離空間也是一樣。這樣，電離空間也進(jìn)行溫度調(diào)整，所以其外殼21在孔口11的附近借助熱絕緣體14，被安裝在質(zhì)量分析裝置10的器壁上。
設(shè)置用于將在毛細(xì)管22的頂端部產(chǎn)生的配離子或構(gòu)成要素離子導(dǎo)入到孔口11的孔11a的彎曲的筒狀引導(dǎo)機(jī)構(gòu)38。在該筒狀引導(dǎo)機(jī)構(gòu)38開有使紅外激光光通過的孔。
為了觀察毛細(xì)管22的頂端部的樣品的噴霧狀態(tài)，在外殼21安裝包括CCD攝像元件的監(jiān)視器裝置60，毛細(xì)管22的頂端部的狀態(tài)被拍攝為動態(tài)圖像，并顯示出來。
在該實(shí)施例的激光噴霧裝置設(shè)置有第2激光裝置32。從第2激光裝置32發(fā)射的激光光通過透鏡34，在面對孔口11的孔11a的電離空間側(cè)的位置。
在毛細(xì)管頂端部產(chǎn)生的配離子或其構(gòu)成要素離子從引導(dǎo)機(jī)構(gòu)38通過孔口11的孔11a，被導(dǎo)入到質(zhì)量分析裝置10內(nèi)，在即將被導(dǎo)入到質(zhì)量分析裝置10內(nèi)之前，通過照射第2激光光，切斷上述非共價(jià)鍵以外的鍵、例如蛋白質(zhì)的共價(jià)鍵。這樣，例如氨基酸序列的解析成為可能。
第2激光32可以使用與應(yīng)該切斷的鍵的種類相對應(yīng)的波長的(紅外、紫外或可見)光。
此外，在圖6中，第1激光裝置31的第1激光光與第2激光裝置32的第2激光光被平行圖示，這是因?yàn)?，為了便于圖示，第2激光裝置32優(yōu)選被配置為第2激光光垂直于紙面。
第3實(shí)施例圖7表示納米激光噴霧裝置。
毛細(xì)管22A通過玻璃被形成得極細(xì)，頂端部的內(nèi)徑為1～10μm左右。極少的樣品溶液被裝入到毛細(xì)管22A內(nèi)，毛細(xì)管22A的后端為栓22a。
通過栓22a，金屬線(導(dǎo)電線、代表性的鉑線)70從毛細(xì)管22A的后端被插入到毛細(xì)管22A內(nèi)。金屬線70只要被插入到毛細(xì)管22A的長度方向的中間附近就足夠。利用高電壓發(fā)生裝置71向金屬線70施加高電壓。只要金屬線70與毛細(xì)管22A內(nèi)的樣品溶液相接觸，該高電壓通過具有導(dǎo)電性的樣品溶液，被施加到其頂端部。也可以代替插入金屬線，而在毛細(xì)管22A的頂端部的外面蒸鍍金屬膜，向該金屬膜施加高電壓。
利用在毛細(xì)管22A的頂端部施加的高電壓，保持樣品溶液從毛細(xì)管11A的頂端突出的狀態(tài)。向從毛細(xì)管22A的頂端朝外方突出的樣品溶液，照射來自紅外光激光裝置31的紅外激光光。紅外激光光不被照射到毛細(xì)管22A的頂端，即使照射，為相當(dāng)于其周邊的一部分的程度即可。
毛細(xì)管22A被保持在支持器72內(nèi)，該支持器72被保持在溫度調(diào)整模塊(block)73內(nèi)。在模塊73內(nèi)安裝有Peltier元件74，控制模塊73的溫度。這樣，將毛細(xì)管22A內(nèi)的樣品溶液保持在需要的溫度。
代替使用玻璃毛細(xì)管，如圖8所示，也可以在硅基板80形成一個或多個毛細(xì)管80A。毛細(xì)管80A為與硅基板80形成一體的極細(xì)(內(nèi)徑10μm左右)的筒狀體，與在基板80開的孔連通。在該孔中，利用細(xì)管81，從基板80的內(nèi)側(cè)，將樣品溶液導(dǎo)入到毛細(xì)管80A。紅外激光光如A所示從毛細(xì)管80A的橫向(與毛細(xì)管80A的軸方向正交的方向)向毛細(xì)管80A(的頂端部)照射，或者如B所示從斜前方向毛細(xì)管80A(的頂端部)照射。由于硅幾乎不吸收10.6μm的紅外光，所以紅外激光光即使直接照射硅毛細(xì)管80A，毛細(xì)管80A也不被破壞。紅外激光光照射硅毛細(xì)管80A的頂端部，加熱毛細(xì)管80A的內(nèi)部的樣品溶液，使非共價(jià)性配位化合物分解。分解產(chǎn)生的構(gòu)成要素(亞單元分子)利用被施加到硅毛細(xì)管頂端的高電場增大電離的效率。只要向硅基板80施加高電壓即可。另外，可以利用Peltier元件等對硅基板80進(jìn)行溫度調(diào)節(jié)。
權(quán)利要求
1.一種分析方法，其中，將含有生物體樣品的溶液導(dǎo)入到毛細(xì)管，在已施加的電場作用下，向從毛細(xì)管的頂端流出的樣品溶液照射第1紅外激光光，使生物體高分子在所述溶液中解離成其構(gòu)成要素，將已解離的構(gòu)成要素離子或生物體高分子離子導(dǎo)入到分析裝置的主要部分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其中，進(jìn)一步向電離的生物體高分子或解離的構(gòu)成要素照射第2激光光，將在照射第2激光光的狀態(tài)下產(chǎn)生的構(gòu)成要素離子導(dǎo)入到分析裝置的主要部分。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分析方法，其中，在毛細(xì)管內(nèi)或噴霧時冷卻生物體樣品。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分析方法，其中，控制生物體樣品的溫度。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其中，包括將在未照射第1紅外激光光的狀態(tài)下電離的生物體高分子導(dǎo)入到分析裝置的步驟；和將在照射第1紅外激光光的狀態(tài)下產(chǎn)生的構(gòu)成要素離子導(dǎo)入到分析裝置的步驟。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或者5所述的分析方法，其中，包括改變照射的激光光的強(qiáng)度并將在各激光光強(qiáng)度下產(chǎn)生的構(gòu)成要素離子導(dǎo)入到分析裝置的步驟。
7.根據(jù)權(quán)利要求1～6中任意一項(xiàng)所述的分析方法，其中，生物體樣品為脂溶性蛋白質(zhì)，該溶液中含有界面活性劑。
8.一種分析裝置，其中，具備供給樣品溶液的毛細(xì)管；在所述毛細(xì)管的頂端部附近形成電場的機(jī)構(gòu)；調(diào)整所述毛細(xì)管內(nèi)或從所述毛細(xì)管噴霧的液滴的溫度的機(jī)構(gòu)；為了向所述毛細(xì)管的頂端部附近照射紅外激光光而配置的第1紅外激光光源；以及將從所述毛細(xì)管的頂端噴霧的樣品的離子或通過所述紅外激光光照射而解離的構(gòu)成要素離子導(dǎo)入到分析裝置的主要部分的機(jī)構(gòu)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的分析裝置，其中，還具備第2激光光源，所述第2激光光源被配置成向被導(dǎo)入到所述分析裝置的主要部分的樣品的離子或其構(gòu)成要素的離子照射第2激光光。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的分析裝置，其中，還具備監(jiān)視器裝置，所述監(jiān)視器裝置被配置成對在所述毛細(xì)管頂端部附近的樣品溶液的噴霧狀態(tài)進(jìn)行拍攝。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的分析裝置，其中，所述溫度調(diào)整機(jī)構(gòu)是，具備配置在所述毛細(xì)管的外側(cè)且與所述毛細(xì)管的外周面有間隔的外筒，通過所述毛細(xì)管與所述外筒之間，向所述毛細(xì)管的頂端部供給已進(jìn)行溫度調(diào)整的輔助氣體的機(jī)構(gòu)。
12.根據(jù)權(quán)利要求8所述的分析裝置，其中，所述溫度調(diào)整機(jī)構(gòu)是，具備配置在所述毛細(xì)管的外側(cè)且與所述毛細(xì)管的外周面有間隔的第1外筒、和配置在所述毛細(xì)管的頂端部附近且在其與所述第1外筒的外側(cè)之間有間隔的比所述第1外筒短的第2外筒，分別通過所述毛細(xì)管與所述第1外筒之間、以及所述第1外筒與所述第2外筒之間，向所述毛細(xì)管的頂端部附近供給已被調(diào)整成不同溫度的輔助氣體的機(jī)構(gòu)。
13.根據(jù)權(quán)利要求8所述的分析裝置，其中，所述溫度調(diào)整機(jī)構(gòu)是，調(diào)整所述毛細(xì)管的至少頂端部和已配置所述分析裝置的離子導(dǎo)入口的電離室的外殼內(nèi)的溫度的機(jī)構(gòu)。
14.一種帶有納米激光噴霧裝置的權(quán)利要求8所述的分析裝置，其中，所述毛細(xì)管為極細(xì)的毛細(xì)管，所述溫度調(diào)整機(jī)構(gòu)調(diào)整保持所述毛細(xì)管的構(gòu)件的溫度，所述第1紅外激光光源是照射在比所述毛細(xì)管的頂端更外方的位置聚光的紅外激光光而配置的機(jī)構(gòu)。
全文摘要
本發(fā)明提供一種分析方法，其特征在于，通過利用電噴霧電離生物體樣品溶液，同時向樣品溶液照射紅外激光光，使生物體高分子解離為其構(gòu)成要素。這樣，可以只選擇性地切斷生物體高分子的非共價(jià)鍵而進(jìn)行分析。
文檔編號G01N1/28GK1961210SQ20058001576
公開日2007年5月9日 申請日期2005年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月18日
發(fā)明者平岡賢三, 明石知子, 高見澤淳, 楊·安·沙納 申請人:株式會社山梨Tlo