專(zhuān)利名稱(chēng)：用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于納米材料和生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及納米生物技術(shù)，具體地說(shuō)是一種用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微泡囊的制備方法。
背景技術(shù)：
對(duì)于生物和生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)，量子點(diǎn)是一種具有潛在應(yīng)用價(jià)值的熒光探針，傳統(tǒng)的熒光探針一般使用的是有機(jī)染料，有機(jī)染料作為生物檢測(cè)探針，它存在著許多弊端。主要表現(xiàn)在有機(jī)染料所發(fā)射的熒光光譜的半峰寬是量子點(diǎn)發(fā)射熒光光譜半峰寬的3-5倍左右，這將帶來(lái)光譜的重疊，影響檢測(cè)的靈敏度，同時(shí)有機(jī)染料的激發(fā)波長(zhǎng)要比量子點(diǎn)要窄，這就限制了激發(fā)光源的范圍，也就是一種染料必須用一種特定波長(zhǎng)的光激發(fā)，而量子點(diǎn)具有廣泛的激發(fā)光譜，所以可以用一個(gè)寬范圍內(nèi)的光作為激發(fā)光源而能使量子點(diǎn)均能發(fā)射熒光。并且有機(jī)染料在光輻射下是不穩(wěn)定的，一般量子點(diǎn)的熒光壽命大約是有機(jī)染料的20倍。
對(duì)于納米晶用于熒光免疫檢測(cè)國(guó)際上最早使用的是金納米晶，并且現(xiàn)在已經(jīng)商品化。它的基本原理主要利用金的金屬反射顏色，首先用化學(xué)溶膠-凝膠方法合成表面帶有負(fù)電荷的金納米晶，然后通過(guò)靜電相互作用使這種納米金與抗體的正電區(qū)連接。最后讓這種帶有抗體的納米金通過(guò)帶有抗原的層析試紙，抗體與抗原的特異性識(shí)別將抗體截住，金納米晶聚集而顯色。這種金標(biāo)的探針可以滿(mǎn)足一種抗體的檢測(cè)，但是對(duì)于多種抗體同時(shí)檢測(cè)是不能夠?qū)崿F(xiàn)的。
量子點(diǎn)(主要是CdSe納米晶)由于在達(dá)到納米尺寸范圍內(nèi)，其尺寸的變化會(huì)帶來(lái)發(fā)射熒光波長(zhǎng)的改變，因此通過(guò)控制合成條件，可以得到不同尺寸的CdSe納米晶，也就得到了在可見(jiàn)光范圍內(nèi)的發(fā)射不同波長(zhǎng)的納米晶，由此人們將CdSe納米晶開(kāi)發(fā)作為生物多色標(biāo)記的潛在的材料，但是對(duì)于解決它與生物的相容性問(wèn)題確是現(xiàn)在國(guó)際上所面臨一難點(diǎn)。早在1998年，聶書(shū)明和Alivasatos就在Science上發(fā)表了將CdSe納米晶用于生物檢測(cè)的文章，前者利用CdSe納米晶表面帶的巰基乙酸的羧基端與蛋白的氨基端通過(guò)縮合反應(yīng)偶連到一起，然后在Hela細(xì)胞中培養(yǎng)帶有轉(zhuǎn)鐵蛋白的和不帶蛋白的量子點(diǎn)，然后通過(guò)熒光顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)帶有轉(zhuǎn)鐵蛋白的量子點(diǎn)被帶進(jìn)了細(xì)胞中，細(xì)胞中出現(xiàn)了量子點(diǎn)的熒光。同時(shí)Alivasatos也用帶有表面功能團(tuán)的SiO2對(duì)CdSe進(jìn)行了表面修飾，再與生物連接，在檢測(cè)的過(guò)程中也得到了同樣的結(jié)果。但是這兩種方法的缺點(diǎn)在于量子點(diǎn)在與蛋白偶連的過(guò)程中，將帶來(lái)量子點(diǎn)和蛋白的聚集和沉降。另外，對(duì)于巰基修飾的量子點(diǎn)，巰基是過(guò)量的，這樣蛋白在與巰基乙酸的作用過(guò)程會(huì)造成蛋白與溶液中游離的巰基乙酸結(jié)合，這會(huì)影響檢測(cè)的靈敏度。接著在2000年聶又用聚苯烯小球?qū)α孔狱c(diǎn)進(jìn)行了包覆，但由于聚苯烯小球在溶液中會(huì)出現(xiàn)溶漲問(wèn)題，結(jié)果使得量子點(diǎn)泄露，這也限制了納米晶的應(yīng)用。因此發(fā)明能夠有效的包覆量子點(diǎn)，并且具有生物相容性的復(fù)合體系是解決目前問(wèn)題的關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明通過(guò)合成高熒光特性的半導(dǎo)體材料，選用具有雙親集團(tuán)的物質(zhì)并且與生物組織相接近的磷脂類(lèi)化合物對(duì)納米材料進(jìn)行包覆，目的是提供一種用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微泡囊的制備方法。
在結(jié)合國(guó)際上進(jìn)行量子點(diǎn)包覆的基礎(chǔ)上，本發(fā)明從兩個(gè)方面來(lái)考慮這個(gè)問(wèn)題，第一，合成的量子點(diǎn)表面帶有的配體是一種疏水基團(tuán)，這使得合成出的量子點(diǎn)必須在有機(jī)相中存在，但對(duì)于生物檢測(cè)則要求合成出的量子點(diǎn)應(yīng)轉(zhuǎn)移到水相，這就涉及到相轉(zhuǎn)移的過(guò)程。第二，量子點(diǎn)要與生物連接，那么所選用的量子點(diǎn)表面包覆材料必須是生物相容性的。基于這兩點(diǎn)，本發(fā)明在合成高熒光特性的半導(dǎo)體材料的基礎(chǔ)上，選用了具有雙親集團(tuán)的并且與生物組織相接近的磷脂類(lèi)化合物對(duì)納米材料進(jìn)行包覆。這種通過(guò)微乳反應(yīng)的包覆一方面解決了相轉(zhuǎn)移的問(wèn)題，另一方面包覆之后的復(fù)合材料表面會(huì)帶有很強(qiáng)的負(fù)電荷，這又形成了一種可直接與蛋白相連接的條件，通過(guò)靜電作用可以直接將泡囊與蛋白連接到一起。本發(fā)明對(duì)于油相合成CdSe的納米晶的相轉(zhuǎn)移及其與生物偶連等問(wèn)題提出具體的解決方案。
一、制備具有高熒光特性的CdSe半導(dǎo)體納米晶半導(dǎo)體納米晶是由數(shù)目極少的原子或分子組成的原子或原子團(tuán)簇。對(duì)于油相合成的CdSe納米粒子，通過(guò)改變反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)條件可以獲得不同尺寸的納米晶，因?yàn)榫w的尺寸是與發(fā)光相關(guān)的，不同發(fā)射波長(zhǎng)對(duì)應(yīng)不同的粒子尺寸，也就是對(duì)應(yīng)不同尺寸的納米晶，因此可以在可見(jiàn)區(qū)內(nèi)得到不同發(fā)射顏色的納米晶。
對(duì)于半導(dǎo)體CdSe納米晶的合成，首先稱(chēng)取CdO與硬脂酸同時(shí)放入到一個(gè)反應(yīng)容器中，混合攪拌并加熱，生成硬脂酸鎘，再將溫度降至室溫，使硬脂酸鎘固化。另稱(chēng)取三辛基氧化磷(TOPO)和十六烷基胺(HDA)放入到上述反應(yīng)容器中，并同時(shí)升溫，在此溫度下向反應(yīng)容器中注入Se的配體溶液。這些是常規(guī)的合成膠體的方法，彭笑剛等在2002年已在美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)雜志(JACS)發(fā)表過(guò)具體的合成方法。
由于CdSe納米晶的發(fā)光是在可見(jiàn)光范圍內(nèi)，不同尺寸的納米晶會(huì)發(fā)出不同波長(zhǎng)的熒光。這些使得人們致力于開(kāi)發(fā)CdSe納米晶用于生物熒光標(biāo)記，這種熒光納米晶用于熒光標(biāo)記與傳統(tǒng)的熒光染料相比具有許多的優(yōu)越性，例如窄的發(fā)射波長(zhǎng)，寬的激發(fā)波長(zhǎng)，光化學(xué)的穩(wěn)定性。但是，按上述方法合成的CdSe由于其表面有懸鍵，這些懸鍵構(gòu)成了無(wú)輻射發(fā)射的中心，因此降低了CdSe發(fā)射熒光的效率。為了提高納米晶的熒光效率，要對(duì)CdSe納米晶的表面進(jìn)行修飾。本發(fā)明是在傳統(tǒng)的兩步法合成核殼納米晶的基礎(chǔ)上，提出了一步法控制合成不同熒光效率的核殼納米晶的方法。具體做法是在按上述方法合成CdSe納米晶的過(guò)程中，注入的Se配體是過(guò)量的，注入Se的量比Cd多20％～30％。在完成CdSe納米晶的生長(zhǎng)之后，直接向體系中注入硬脂酸鋅甲苯溶液。由于體系中Se是過(guò)量的并吸附在CdSe表面，當(dāng)硬脂酸鋅注入后，鋅將直接與Se結(jié)合形成ZnSe殼層，ZnSe層抑制了無(wú)輻射發(fā)射，提高了CdSe晶體的熒光效率。
對(duì)于晶體尺寸的控制，主要是利用晶體生長(zhǎng)過(guò)程是一個(gè)吸熱的過(guò)程，控制Se溶液的注入溫度，并選定在注入溫度之下的一定范圍內(nèi)的生長(zhǎng)溫度，就可以得到一系列尺寸的CdSe納米晶，反應(yīng)在光譜上是對(duì)應(yīng)著不同波長(zhǎng)的熒光光譜。它們所發(fā)射的熒光顏色主要是從蘭色到紅色的八種，這對(duì)于生物熒光標(biāo)記是非常有意義的。具體的合成反應(yīng)如下。
二、制備復(fù)合有CdSe/ZnSe納米晶的熒光囊泡為了獲得生物兼容性的并且熒光可調(diào)的標(biāo)記材料，需要將脂溶性的CdSe/ZnSe熒光納米晶轉(zhuǎn)移到水相，囊泡對(duì)脂溶性熒光納米晶的包覆完成了相轉(zhuǎn)移，并同時(shí)使其具有生物相溶性。囊泡的熒光性質(zhì)由囊泡中納米晶的性質(zhì)及熒光納米晶的比例所決定。本發(fā)明采用的是擠壓法制備囊泡包覆的熒光納米晶。
擠壓法合成囊泡包覆熒光納米晶的具體步驟如下(1)首先將脂溶性的CdSe/ZnSe納米晶與磷脂、膽固醇、高分子材料共同溶在非極性有機(jī)溶劑中，然后將混合體系用常規(guī)的方法在氮?dú)鈼l件下吹干，在容器表面形成薄的單層膜，單層膜需繼續(xù)在通氮的條件下干燥卜2小時(shí)。所述的磷脂是電中性的卵磷脂(PC)、磷脂酰胺(PE)和帶負(fù)電性如磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰肌醇(PI)。在形成囊泡的過(guò)程中，磷脂是主要成分，電中性的磷脂可以單獨(dú)使用，也可以將電中性的磷脂與負(fù)電性的磷脂混合使用，不同做法最終決定所形成囊泡的表面電勢(shì)。膽固醇是一種中性脂質(zhì)，主要作用是與磷脂相結(jié)合，阻止磷脂凝結(jié)成晶體結(jié)構(gòu)。所述的高分子材料主要的作用是阻止囊泡之間的非特異性吸附，從而導(dǎo)致囊泡聚集。高分子材料可以是聚乙烯醇(PEG)，也可以是聚丙烯酰胺。
(2)向上述含有單層磷脂膜的溶液中加入10～40ml的PBS緩沖溶液，并加入1～5ml的非極性有機(jī)溶劑，然后用磁力攪拌器劇烈攪拌，直至攪拌到形成奶樣母液。
(3)將此母液倒入擠壓裝置的壓力室中，擠壓裝置的中央是壓力室，由不銹鋼材料制成，能持續(xù)耐受137.824kpa～275.648kpa的壓力。在0～40℃，137.824～275.648kpa的壓力下，流速保持在20～40ml/min的條件下，母液幾秒中內(nèi)在壓力室中形成乳白色分散液，4～5個(gè)循環(huán)后即可得到所需的囊泡。然后打開(kāi)擠壓裝置的閥門(mén)使得分散的囊泡溶液從出口中流出。該方法制備的囊泡的大小依賴(lài)與所用的脂質(zhì)的成分，溫度，尤其是壓力的大小。此方法操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，制備量大。
三、復(fù)合熒光囊泡與蛋白的偶連通過(guò)改變囊泡溶液的PH，來(lái)調(diào)節(jié)囊泡的表面電位，得到不同表面電位的囊泡。通過(guò)靜電作用可以使囊泡與蛋白或核酸的帶電區(qū)結(jié)合從而形成熒光生物探針。利用這種生物探針可以實(shí)施對(duì)病毒，毒品，多基因片段的生物免疫檢測(cè)。
本發(fā)明主要是利用免疫層析試紙(硝酸纖維素膜)對(duì)乙肝病毒，蔬菜中殘留農(nóng)藥，以及對(duì)毒品的檢測(cè)。試紙條證明了這種復(fù)合熒光囊泡能夠用于生物檢測(cè)。這一發(fā)明首次選用囊泡作為包覆材料，并通過(guò)層析試進(jìn)行免疫檢測(cè)的方法。它將親脂性表面CdSe納米晶進(jìn)行了相轉(zhuǎn)移并構(gòu)建使之具有生物相容性。


圖1為通過(guò)在不同的溫度下生長(zhǎng)而得到不同尺寸的CdSe納米晶所對(duì)應(yīng)的不同波長(zhǎng)的發(fā)射光譜；圖2為用于免疫檢測(cè)的層析試紙條基本構(gòu)造的示意圖；圖3為帶有納米晶抗體與抗原的特異性識(shí)別的示意圖；圖4為French擠壓裝置模型示意圖，圖中1為活塞，2池體，3樣品，4壓力活塞，5出口，6尼龍球，7膠皮。微小的囊泡可以在20000帕的壓力下通過(guò)小孔擠出。
具體實(shí)施例方式
選取99.9％的CdO0.0128-0.0150g；Se粉0.079-0.158g；脂酸鋅0.114-0.328g。
在溫度140-150℃之間，CdO與硬脂酸反應(yīng)生成硬脂酸鎘，再將生成物的反應(yīng)容器降至室溫，并在室溫的條件下向容器中加入TOPO和HDA，然后將反應(yīng)器的溫度升至300-320℃。在此溫度下向體系中注入TOPSe，注入之后迅速降溫，降溫區(qū)間為250-280℃，不同降溫時(shí)間可以得到不同尺寸的納米晶，即得到了尺寸從3-5nm的納米晶。晶體的熒光顏色隨著時(shí)間的加長(zhǎng)逐漸紅移，即從綠色逐漸變?yōu)榧t色。圖1顯示了在上述條件下合成的不同尺寸的熒光光譜。在合成不同CdSe納米晶的基礎(chǔ)上，向體系中直接注入Zn，Zn與CdSe表面上過(guò)量的Se結(jié)合生成CdSe/ZnSe核殼結(jié)構(gòu)。
復(fù)合熒光囊泡的制備。選用的材料是90％蛋黃卵磷脂(PC)、磷脂酰氨(PE)，膽固醇(Ch)和聚乙烯醇(PEG)。首先按重量比PC50-70％、Ch20-30％、PE5-10％、PEG0.5-1％的比例關(guān)系稱(chēng)取，并將這些材料溶在3ml氯仿中并放入一反應(yīng)容器中，同時(shí)取0.5-3mgCdSe/ZnSe核殼納米晶溶入上述體系中。將混合溶液吹干，然后直接向容器中加入40mlPBS緩沖溶液，并加入體積比為40∶1的水和氯仿混合液，然后用磁力攪拌器劇烈攪拌，直至攪拌到形成奶樣母液。
(3)將此母液倒入如圖4所示的French擠壓裝置的壓力室中，在0～40℃，137.824～275.648kpa的壓力下，流速保持在20～40ml/min的條件下，母液幾秒中內(nèi)在壓力室中形成乳白色分散液，5個(gè)循環(huán)后即可得到所需的囊泡。然后打開(kāi)尼龍球閥使得分散的囊泡溶液從出口中流出。
本發(fā)明選取PH為8-9的磷酸緩沖溶液(PBS)作為囊泡的母液，用電位分析儀測(cè)定表面電勢(shì)平均為-30～-48mev。
復(fù)合熒光囊泡同蛋白的偶連。
(1)復(fù)合熒光囊泡用于乙肝病毒免疫檢測(cè)，這里分三個(gè)步驟進(jìn)行(a)將帶有抗乙肝單抗的硝酸纖維素膜的干的試紙條的低部吸水區(qū)(試紙條的結(jié)構(gòu)如圖2所示)放入到合成的熒光復(fù)合囊泡溶液中，由于毛吸作用，囊泡被吸附到試紙條上，同時(shí)在檢測(cè)限位置由靜電作用被檢測(cè)限上的抗體攔截而使囊泡非特異性吸附在試紙條上。這樣在檢測(cè)線上用熒光分光光度計(jì)可以探測(cè)到有熒光。這一步的目的是檢測(cè)囊泡與試紙條上的孔隙的匹配性。(b)采用1％牛血清白蛋白(BSA)溶液使其與囊泡在4℃的冰柜中攪拌12小時(shí)，此時(shí)BSA作為封閉劑已與囊泡結(jié)合，這樣囊泡的表面完全被BSA所包覆。然后在將同樣的試紙條侵入到此溶液中，發(fā)現(xiàn)在檢測(cè)限上無(wú)熒光，這可以認(rèn)為泡囊與BSA結(jié)合，并被封閉上了。(c)最后將泡囊與乙肝抗原在4℃冰柜中再反應(yīng)12小時(shí)，然后用BSA封閉，再重復(fù)將相同的試紙條侵入到此溶液中，這時(shí)在檢測(cè)限觀察到熒光，由此可確定囊泡已與抗體偶連，并可以用此來(lái)進(jìn)行乙肝病毒的檢測(cè)。
(2)將培植的抗農(nóng)藥單抗1毫克/毫升，滴加于硝酸纖維素膜上3微升，空氣干燥后采用1％PEG封閉，將封閉后的侵入待檢測(cè)的蔬菜的洗液中，侵入大約1小時(shí)，經(jīng)4次洗滌后，烘干。再制備的抗農(nóng)藥抗原-熒光復(fù)合囊泡偶連體。將含有抗農(nóng)藥單抗的硝酸纖維素膜侵入到上述得到的熒光偶連體物溶液中，在侵1小時(shí)，再用PBS緩沖溶液洗滌5次，采用熒光分光光度計(jì)探測(cè)膜上的熒光強(qiáng)度，以判定蔬菜中農(nóng)藥的含量。
另在制備囊泡的過(guò)程中選用了中性磷脂PC與負(fù)電性的磷脂PG結(jié)合，并按上述制備囊泡的過(guò)程制備囊泡得到的囊泡表面帶負(fù)電，這種方法直接通過(guò)調(diào)節(jié)PG的含量，并不需要調(diào)節(jié)PH即可得到表面帶負(fù)電的囊泡。其中PC的重量含量為70-80％，PG為10-20％，Ch為10-20％，PEG為0.5％-1％。
權(quán)利要求
1.一種用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡的制備方法，包括制備具有熒光特性的納米晶，該納米晶與蛋白的氨基端通過(guò)縮合反應(yīng)偶連等過(guò)程，其特征是在制備CdSe納米晶的過(guò)程中，注入過(guò)量的Se配體，對(duì)CdSe納米晶的表面進(jìn)行修飾，注入Se的量比Cd多20％～309％，形成結(jié)構(gòu)為CdSe/ZnSe-TOPO的脂溶性CdSe熒光納米晶；用反相膠束法包覆CdSe熒光納米晶合成囊泡；通過(guò)改變上述囊泡溶液的PH來(lái)調(diào)節(jié)囊泡的表面電位，得到不同表面電位的囊泡。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡的制備方法，其特征是在合成核殼納米晶的基礎(chǔ)上，直接向體系中注入硬脂酸鋅甲苯溶液，使Se比Cd過(guò)量，其過(guò)程可表示為所述的反相膠束法包覆過(guò)程是，將脂溶性的熒光納米晶與磷脂、膽固醇、高分子材料共同溶在非極性有機(jī)溶劑中，混合體系用常規(guī)的方法在氮?dú)鈼l件下吹干，在容器表面形成薄的單層膜，單層膜繼續(xù)在通氮的條件下干燥1-2小時(shí)，然后將上述形成的單層膜加入上述非極性的有機(jī)溶劑，使單層膜溶解，再加入10～40mlPB緩沖溶液，并加入1～5ml的非極性有機(jī)溶劑，然后用磁力攪拌器劇烈攪拌，直至攪拌到形成奶樣母液；將此母液倒入擠壓裝置的壓力室中，在0～40℃，137.824～275.648kpa的壓力下，流速保持在20～40ml/min的條件下，母液在壓力室中形成乳白色分散液，4～5個(gè)循環(huán)后得到所需的囊泡，然后打開(kāi)擠壓裝置的閥門(mén)使得分散的囊泡溶液從出口中流出。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡的制備方法，其特征是所述的磷脂是電中性的卵磷脂(PC)、磷脂酰胺(PE)和帶負(fù)電性的磷脂，高分子材料可以是聚乙烯醇(PEG)、也可以是聚丙烯酰胺，非極性有機(jī)溶劑為氯仿、乙醚或正己烷。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡的制備方法，其特征是所述的磷脂是電中性的卵磷脂(PC)、磷脂酰胺(PE)。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡的制備方法，其特征是帶負(fù)電性的磷脂為磷脂酰甘油(PG)或磷脂酰肌醇(PI)。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡的制備方法，其特征是所用的蛋黃卵磷脂PC重量比50-70％，膽固醇Ch重量比20-30％，磷脂酰氨P(pán)E重量比5-10％，聚乙烯醇PEG重量比0.5-1％；將上述材料溶在3ml氯仿中并放入一反應(yīng)容器中，同時(shí)取0.5-3mg的CdSe/ZnSe核殼納米晶溶入上述體系中；混合溶液吹干，再次向瓶中加入體積比為40∶1的水和氯仿混合液，接下來(lái)劇烈攪拌2小時(shí)形成奶樣母液；將此母液倒入French擠壓裝置的壓力室中，在0～40℃，137.824～275.648kpa的壓力下，流速保持在20～40ml/min的條件下，母液在壓力室中形成乳白色分散液，5個(gè)循環(huán)后得到所需的囊泡，然后打開(kāi)尼龍球閥使得分散的囊泡溶液從出口中流出。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡的制備方法，其特征是選取PH為8-9的磷酸緩沖溶液PBS作為囊泡的母液，調(diào)節(jié)囊泡溶液的PH從6-9。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡的制備方法，其特征是選用中性卵磷脂PC與負(fù)電性的磷脂酰甘油PG作為磷脂，其中卵磷脂PC的重量含量為70-80％，磷脂酰甘油PG為9-20％，膽固醇Ch為9-20％，聚乙烯醇PEG為0.5-1％。
全文摘要
本發(fā)明屬于納米材料和生物技術(shù)領(lǐng)域，是一種用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡的制備方法。通過(guò)合成高熒光特性的半導(dǎo)體材料，選用具有雙親集團(tuán)的物質(zhì)并且與生物組織相接近的磷脂類(lèi)化合物對(duì)納米材料進(jìn)行包覆，合成用于熒光免役檢測(cè)的CdSe納米晶復(fù)合脂質(zhì)體微囊泡。本發(fā)明包括制備油性CdSe半導(dǎo)體納米晶，合成復(fù)合油性納米晶囊泡及通過(guò)改變pH值來(lái)調(diào)節(jié)表面電位從而使囊泡與生物蛋白通過(guò)靜電連接等三個(gè)步驟。本發(fā)明主要是利用免疫層析試紙如硝酸纖維素膜對(duì)乙肝病毒，蔬菜中殘留農(nóng)藥，以及對(duì)毒品的檢測(cè)。試紙條證明了這種復(fù)合熒光囊泡能夠用于生物檢測(cè)，將親脂性表面CdSe納米晶進(jìn)行了相轉(zhuǎn)移并構(gòu)建使之具有生物相容性。
文檔編號(hào)G01N33/84GK1542450SQ200310109999
公開(kāi)日2004年11月3日 申請(qǐng)日期2003年11月6日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月6日
發(fā)明者孔祥貴, 單桂曄, 馮力蘊(yùn) 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春光學(xué)精密機(jī)械與物理研究所, 中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春光學(xué)精密機(jī)械與物理研