專利名稱：Parp抑制劑對脂肪酸合成的抑制及其治療方法
PARP抑制劑對脂肪酸合成的抑制及其治療方法
交叉引用
本申請要求2006年9月5日提交的美國臨時申請60/842489的優(yōu) 先權(quán)，該文獻(xiàn)通過引用全部引入本申請。
背景技術(shù)：
脂肪酸合酶(FAS)是將碳水化合物轉(zhuǎn)化成脂肪酸必需的酶。在正 常人體中，脂肪酸合成途徑由于膳食脂肪的水平足夠高而下調(diào)。但是， 在許多的人惡性腫瘤和它們的前期病變中，例如前列腺癌、卵巢癌和 乳腺癌，組織表達(dá)高水平的脂肪酸合酶，從而產(chǎn)生高水平的脂肪酸。 在大多數(shù)人類癌癥中的FAS上調(diào)導(dǎo)致FAS在惡性癌癥表型的形成、 維持和/或強(qiáng)化中發(fā)揮作用和FAS可以是抗癌藥物開發(fā)的靶標(biāo)的觀 念。
世界上大約12億人體重超重且其中至少3億人是肥胖的。在美 國，超過九千七百萬成人(即超過一半)是超重的且?guī)缀跷宸种坏某?人是肥胖的。減少肥胖者中的脂肪酸合成可能是肥胖癥的有效治療方 法。
在體外用淺藍(lán)菌素(FAS上的13 -酮脂酰合成酶反應(yīng)的共價滅活劑) 處理癌細(xì)胞導(dǎo)致細(xì)胞通過細(xì)胞凋亡而死亡，表明具有高度活躍的脂肪 酸合成的癌細(xì)胞需要有功能的途徑(Pizer等，(1996) Omcw i 仏56, 2745-2747)。但是，淺藍(lán)菌素具有有限的體內(nèi)活性。FAS顯示為被 Her-2Mew在轉(zhuǎn)錄、翻譯和生物合成活性水平上調(diào)節(jié)的基因中的一個 (Menedez等，(2005) i>wg 18(6), July/August)。 該
Her-2/"ew-誘導(dǎo)的乳腺癌相關(guān)FAS的上調(diào)可受到抗Her-2/"ew抗體(如 曲妥單抗)的抑制。采用C75 (脂肪酸合成的抑制劑)的研究已顯示通過 胂瘤組織中脂肪酸合成的抑制的抗腫瘤活性(Kuhajda等，(2000)尸roc.胸/. ^c^/. Sd. vol. 97, no. 7, 3450-3454)。 FAS抑制劑也顯示激活體重 減輕途徑(Loftus, T.M.等，(2000) Sc&"ce 288， 2379-2381)。
由于脂肪酸合成在癌癥和體重增加途徑中起作用，因此一直需要 開發(fā)高效的脂肪酸合成抑制劑。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個方面涉及治療脂肪酸合成和代謝相關(guān)疾病的方法， 包括對需要的患者施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物以抑制脂肪 酸合成，其中所述脂肪酸合成相關(guān)疾病是肥胖、糖尿病或心血管疾病。
本發(fā)明的另一個方面涉及治療對象的癌癥的方法，包括(i)確 定來自對象的樣品中的脂肪酸水平，和(ii)施用有效量的PARP抑制
劑或其代謝物以抑制脂肪酸合成，其中施用是基于所述脂肪酸水平， 從而治療對象的癌癥。
在本發(fā)明的一些實施方式中，脂肪酸是中鏈脂肪酸或長鏈脂肪 酸。中鏈脂肪酸包括C:6-C:12。長鏈脂肪酸包括大于12個碳的鏈長 度。在一些實施方式中，脂肪酸合成的抑制包括抑制葡萄糖途徑的至 少一種酶。在一些實施方式中，脂肪酸合成的抑制包括抑制脂肪酸生 物合成途徑的至少一種酶。在一些實施方式中，脂肪酸合成的抑制包 括抑制至少一種選自乙酰輔酶A、丙二酰輔酶A、乙酰輔酶A羧化酶 和脂肪酸合酶的酶。在一些實施方式中，脂肪酸合酶包括?；d體蛋 白、乙酰轉(zhuǎn)移酶、丙二酰轉(zhuǎn)移酶、3-酮-?；?ACP合成酶、3-酮?；?-ACP還原酶、3-羥基-酰基-ACP脫水酶和烯?；?ACP還原酶。在一 些實施方式中，脂肪酸合成的抑制包括抑制脂肪酸合酶的至少一種 酶。在一些實施方式中，脂肪酸合成的抑制包括抑制從葡萄糖合成乙 酰輔酶A。在一些實施方式中，脂肪酸合成的抑制包括抑制從乙酰輔 酶A合成脂肪酸。
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，長鏈脂肪酸為C:14-C:30。 在一些實施方式中，長鏈脂肪酸為C:14、 C:16、 C:18、 C:18-l、 C:20、 C.-22或C:24。在一些實施方式中，抑制通過分析葡萄糖途徑或脂肪
19酸生物合成途徑的代謝物或分子流確定。在一些實施方式中，代謝物
選自葡萄糖、糖原、乳酸、C02、脂肪酸、乙酰輔酶A、 RNA核糖和 DNA脫氧核糖。在一些實施方式中，代謝物為用于分析而進(jìn)行了化 學(xué)衍生化。在一些實施方式中，分析包括質(zhì)譜分析。在一些實施方式 中，質(zhì)i普分析是質(zhì)量同位體分布分析(mass isotopomer distribution analysis)。在一些實施方式中，脂肪酸水平是上調(diào)的。
在本發(fā)明前述方面的 一 些實施方式中，P ARP抑制劑或其代謝物 是式I的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥
<formula>formula see original document page 20</formula>
式I
其中，R4、 R2、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的 胺、羧基、目旨、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選 取代的(d-C6)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7) 雜環(huán)基、任選取代的芳基和含硫的基團(tuán)。在一些實施方式中，含硫的
基團(tuán)是-SR6，其中R6選自氫、C廣C6酰基、任選取代的(C廣C6)烷基、 任選取代的(C3-C》環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基和任選取代的芳基。
在本發(fā)明前述方面的 一 些優(yōu)選實施方式中，PARP抑制劑或其代 謝物是式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥
<formula>formula see original document page 20</formula>式II其中，Ri、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、閨素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代
的(d-C6)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)
基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中&、 R3、 R4和R5取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6為-SR6，其中R6選自 氬、d-C6?；?、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、 任選取代的(CVC7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。在 一 些 實施方式中，R6為任選取代的(d-C6)烷基，其為S-連接的半胱氨酸結(jié) 構(gòu)的殘基，該半胱氨酸結(jié)構(gòu)可以是單半胱氨酸氨基酸或可以形成包含 半胱氨酸的二肽、三肽、四肽、五肽或更高級肽的一部分。
在本發(fā)明前述方面的 一 些優(yōu)選實施方式中，PARP抑制劑是式III 的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、其代謝物或前藥
CONH
式III 。
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，癌癥選自結(jié)腸腺癌、食管 腺癌、肝細(xì)胞肝癌、鱗狀細(xì)胞癌、胰腺腺癌、胰島細(xì)胞瘤、直腸腺癌、 胃腸道基質(zhì)瘤、胃腺癌、腎上腺皮質(zhì)癌、濾泡性癌、乳頭狀癌、乳腺 癌、導(dǎo)管癌、小葉癌、導(dǎo)管內(nèi)癌、粘液癌、葉狀腫瘤、卵巢腺癌、子 宮內(nèi)膜腺癌、顆粒細(xì)胞瘤、粘液性嚢腺癌、子宮頸腺癌、外陰鱗狀細(xì) 胞癌、基底細(xì)胞癌、前列腺腺癌、骨巨細(xì)胞瘤、骨肉瘤、喉癌、肺腺 癌、腎癌、膀胱癌、韋爾姆瘤(Wilm，s tumor)和淋巴瘤。
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，治療選自口服給藥、經(jīng)粘 膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、皮
下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，來自對象的樣品選自腫瘤
21組織、頭發(fā)、血液、細(xì)胞、組織、器官、腦組織、血液、血清、痰、
唾液、血漿、乳頭吸出物(nippleaspirant)、滑液、腦脊液、汗水、尿、 糞便物、胰液、小梁液(trabecular fluid)、腦脊液、淚水、支氣管灌洗 液、拭子、支氣管吸出物(bronchial aspirant)、精液、前列腺液、腦室 液(precervicular fluid)、 陰道分泌物和射精前液(pre-ejaculate)。
本發(fā)明的再另 一個方面涉及一種監(jiān)測PARP抑制劑或其代謝物在 疾病治療中的療效的方法，包括(i)對患者施用有效量的PARP抑制 劑或其代謝物以抑制脂肪酸合成；(ii)比較來自患者的分別第一和第 二樣品中的第一和第二脂肪酸水平，其中第一水平和第一樣品在施用 PARP抑制劑或其代謝物之前獲得，而第二水平和第二樣品在施用 PARP抑制劑或其代謝物之后獲得；和(iii)基于比較結(jié)果確定在患者 中所述PARP抑制劑或其代謝物在疾病治療中的療效。
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，脂肪酸合成的抑制包括抑 制葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑的至少一種酶。在一些實施方式 中，當(dāng)?shù)诙悠分械牡诙舅崴降陀诘?一樣品中的第 一脂肪酸水 平時，PARP抑制劑或其代謝物是有治療效果的。在一些實施方式中， 當(dāng)?shù)诙悠分械牡诙舅崴礁哂诘?一樣品中的第 一脂肪酸水平 時，PARP抑制劑或其代謝物是沒有治療效果的。在一些實施方式中， 第一脂肪酸水平和第二脂肪酸水平通過分析技術(shù)測定。在一些實施方 式中，第一脂肪酸水平和第二脂肪酸水平通過質(zhì)譜分析測定。在一些 實施方式中，質(zhì)譜分析是質(zhì)量同位體分布分析。
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，PARP抑制劑或其代謝物 是式I的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥
<formula>formula see original document page 22</formula>其中，R^、 R2、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的
胺、羧基、酯、亞硝基、硝基、閨素、任選取代的(d-C6)烷基、任選 取代的(d-C6)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)
雜環(huán)基、任選取代的芳基和含硫的基團(tuán)。在一些實施方式中，含硫的
基團(tuán)是-SR6，其中R6選自氫、d-Q?；⑷芜x取代的(d-C6)烷基、 任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基和任選取代的芳基。
在本發(fā)明前述方面的 一 些實施方式中，PARP抑制劑或其代謝物 是式n的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥
其中，Rp R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、
羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(CrC6)烷基、任選取代
的(CrC6)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)雜環(huán) 基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中R!、 R3、 R4和Rs取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6為-SR6，其中116選自 氫、d-C6?；?、任選取代的(CrC6)烷基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、 任選取代的(CrC7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。在一些 實施方式中，R6為任選取代的(d-C6)烷基，其為S-連接的半胱氨酸結(jié) 構(gòu)的殘基，該半胱氨酸結(jié)構(gòu)可以是單半胱氨酸氨基酸或可以形成包含 半胱氨酸的二肽、三肽、四肽、五肽或更高級肽的一部分。
在本發(fā)明前述方面的 一 些實施方式中，PARP抑制劑是式III的化 合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 24</formula>
式III 。
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，疾病是癌癥、心血管疾病、 糖尿病和肥胖。在一些實施方式中，施用選自口服給藥、經(jīng)粘膜給藥、 口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、皮下給藥、 肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。在一些實施方式中， 第 一樣品中的第 一脂肪酸水平從患者的病史確定。
本發(fā)明的另一方面涉及一種治療Her-2相關(guān)癌癥的方法，包括對 需要的患者施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物，其中所述PARP 抑制劑或其代謝物抑制脂肪酸合成。本發(fā)明的再另 一方面涉及治療對 象的Her-2相關(guān)癌癥的方法，包括(i)確定來自對象的樣品中Her-2 表達(dá)的水平，和(ii)對對象施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物以 抑制脂肪酸合成，其中施用是基于Her-2表達(dá)水平的確定，從而治療 對象的Her-2相關(guān)癌癥。
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，脂肪酸合成的抑制包括抑 制葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑的至少一種酶。在一些實施方式 中，脂肪酸合成的抑制包括抑制脂肪酸合酶的至少一種酶，其中該酶 選自?；d體蛋白、乙酰轉(zhuǎn)移酶、丙二酰轉(zhuǎn)移酶、3-酮-?；?ACP合 成酶、3-酮?；?ACP還原酶、3-羥基-?；?ACP脫水酶和烯?；?ACP 還原酶。在一些實施方式中，Her-2表達(dá)水平是上調(diào)的。
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，P ARP抑制劑或其代謝物 是式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥式II
其中，R!、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代 的(d-C6)烷氧基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán) 基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中&、 R3、 R4和Rs取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6為-SR6，其中116選自 氫、d-C6?；?、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、 任選取代的(C3-C》雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。在 一些 實施方式中，R6為任選取代的(CrC6)烷基，其為S-連接的半胱氨酸結(jié) 構(gòu)的殘基，該半胱氨酸結(jié)構(gòu)可以是單半胱氨酸氨基酸或可以形成包含 半胱氨酸的二肽、三肽、四肽、五肽或更高級肽的一部分。
在本發(fā)明前述方面的一些優(yōu)選實施方式中，PARP抑制劑是式III 的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，治療選自口服給藥、經(jīng)粘 膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、皮 下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。在一些實施 方式中，樣品包括癌細(xì)胞。在一些實施方式中，該方法進(jìn)一步包括施 用Her-2抗體。在一些實施方式中，該方法進(jìn)一步包括手術(shù)、放射治
式III
25療、化療、基因治療、免疫治療或其組合。
本發(fā)明的再另 一 個方面涉及 一 種治療代謝疾病的方法，包括對需 要的患者施用有效量的式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前 藥
其中，Rj、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氬、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代
的(d-C6)烷氧基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)雜環(huán)
基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中&、 R3、 R4和Rs取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6是-SR6，其中R6選自
氫、d-C6?；?、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、 任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。在一些 實施方式中，R6為任選取代的(d-C6)烷基，其為S-連接的半胱氨酸結(jié)
構(gòu)的殘基，該半胱氨酸結(jié)構(gòu)可以是單半胱氨酸氨基酸或可以形成包含 半胱氨酸的二肽、三肽、四肽、五肽或更高級肽的一部分。在一些優(yōu) 選的實施方式中，式n的化合物、藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥抑制脂 肪酸合成，從而治療對象的代謝疾病。
本發(fā)明的再另一個方面涉及一種治療對象的癌癥的方法，包括 (i)確定來自對象的樣品中的脂肪酸水平；(ii)對對象施用有效量的式 II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥，其中施用是基于脂肪酸 水平的確定，其中式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥包括
式II式II
其中，R!、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代
的(d-C6)烷氧基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)雜環(huán)
基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中&、 R3、 R4和Rs取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6是-SR6，其中116選自 氫、d-C6酰基、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、 任選取代的(CrC7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。在一些 實施方式中，R6為任選取代的(CrC6)烷基，其為S-連接的半胱氨酸結(jié) 構(gòu)的殘基，該半胱氨酸結(jié)構(gòu)可以是單半胱氨酸氨基酸或可以形成包含 半胱氨酸的二肽、三肽、四肽、五肽或更高級肽的一部分。在一些優(yōu) 選的實施方式中，式II的化合物、藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥抑制脂 肪酸合成，從而治療對象的癌癥。
在本發(fā)明前述方面的 一 些實施方式中，脂肪酸合成的抑制包括抑 制葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑的至少一種酶。在一些實施方式 中，脂肪酸合成的抑制包括抑制脂肪酸合酶的至少一種酶，其中該酶 選自?；d體蛋白、乙酰轉(zhuǎn)移酶、丙二酰轉(zhuǎn)移酶、3-S同-?；?ACP合 成酶、3-酮?；?ACP還原酶、3-羥基-酰基-ACP脫水酶和烯?；?ACP 還原酶。在一些實施方式中，式II的化合物、藥學(xué)上可接受的鹽或其 前藥包括式III的化合物或其代謝物
27式III 。
在本發(fā)明前述方面的一些實施方式中，治療選自口服給藥、經(jīng)粘 膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、皮 下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。在一些實施 方式中，代謝疾病是心血管疾病、糖尿病或肥胖。在一些實施方式中， 癌癥是，例如Her-2相關(guān)癌癥、結(jié)腸腺癌、食管腺癌、肝細(xì)胞肝癌、 鱗狀細(xì)胞癌、胰腺腺癌、胰島細(xì)胞瘤、直腸腺癌、胃腸道基質(zhì)瘤、胃 腺癌、腎上腺皮質(zhì)癌、濾泡性癌、乳頭狀癌、乳腺癌、導(dǎo)管癌、小葉 癌、導(dǎo)管內(nèi)癌、粘液癌、葉狀腫瘤、卵巢腺癌、子宮內(nèi)膜腺癌、顆粒 細(xì)胞瘤、粘液性嚢腺癌、子宮頸腺癌、外陰鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌、 前列腺腺癌、骨巨細(xì)胞瘤、骨肉瘤、喉癌、肺腺癌、腎癌、膀胱癌、 韋爾姆瘤和淋巴瘤。
通過引證引入
本說明書中提到的所有公開出版物和專利申請在此通過引證引 入，就如各公開出版物和專利申請具體地和個別地說明通過引證引入 一樣。
附圖簡要說明
本發(fā)明的新特征在所附的權(quán)利要求中詳細(xì)地闡明。參照下面給出 示例性實施方式的詳細(xì)說明和附圖將獲得對本發(fā)明的特征和優(yōu)勢的 更好的理解，在這些實施方式中利用了本發(fā)明的原理。附圖中
圖1顯示了葡萄糖途徑的代謝流(metabolic flux)。
圖2顯示了葡萄糖途徑的戊糖循環(huán)和無效循環(huán)。
圖3A和3B表明3juM和IOjuM的3-硝基-4-碘苯甲酰胺抑制Hela
28細(xì)胞中肉豆蔻酸的合成。
圖4A和4B表明3pM和10|uM的3-硝基-4-碘苯曱酰胺抑制Hela 細(xì)胞中棕櫚酸的合成。
圖5A和5B表明3pM和10|liM的3-硝基-4-碘苯甲酰胺抑制Hela 細(xì)胞中硬脂酸的合成。
圖6A和6B表明3pM和10|iM的3-硝基-4-硤苯曱酰胺抑制Hela 細(xì)胞中油酸的合成。
圖7A和7B表明3|iM和10pM的3-硝基-4-碘苯甲酰胺抑制Hela 細(xì)胞中C:22脂肪酸的合成。
圖8A和8B表明3pM和10pM的3-硝基-4-碘苯曱酰胺抑制Hela 細(xì)胞中C:24脂肪酸的合成。
圖9A和9B表明3fiM和10|iM的3-硝基-4-碘苯曱酰胺抑制 OVCAR-3細(xì)胞中花生酸的合成。
圖10A和10B表明3pM和10|liM的3-硝基-4-碘苯曱酰胺抑制 OVCAR-3細(xì)胞中C:22脂肪酸的合成。
圖11 A和11B表明3pM和10pM的3-硝基-4-碘苯甲酰胺抑制 OVCAR-3細(xì)胞中C:24脂肪酸的合成。
具體實施方式
定義
術(shù)語"芳基"指的是任選取代的僅含碳原子的單環(huán)或二環(huán)芳香環(huán)。 該術(shù)語還包括與單環(huán)環(huán)烷基或單環(huán)環(huán)雜烷基稠合的苯基，其中連接點(diǎn) 是在芳香部分上。芳基的例子包括，例如苯基、萘基、茚滿基、茚基、 四氫萘基、2，3-二氫苯并呋喃基、1，4-苯并二噁烷基(benzodioxanyl)等等。
術(shù)語"雜環(huán)基"指的是任選取代的含有至少一個雜原子(碳以外 的原子，如N、 O和S)的單環(huán)或二環(huán)芳香環(huán)，各環(huán)含有大約5個到大 約6個原子。雜環(huán)基的例子包括，例如吡咯基、異噁唑基、異噻唑基、 吡唑基、吡咬基、噁唑基、噁二唑基、漆二峻基、噻唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、吹喃基、三溱基、p塞吩基、嘧。定基、p達(dá)。秦基、吡"秦 基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩
基(benzothiophenyl)、呋喃(2，3-b)吡啶基、會啉基、巧1咮基、異喹啉基 f寺。
術(shù)語"抑制"或其語法上的同義詞(如"抑制性的")并不意味著 需要完全降低所考慮的生物活性，如脂肪酸的合成。這一降低優(yōu)選為 降低了在不存在抑制效應(yīng)時(例如在不存在抑制劑如本發(fā)明公開的 PARA抑制劑時)分子活性的至少約50%、至少約75%、至少約90%, 且更優(yōu)選為至少約95%。最優(yōu)選地，該術(shù)語指的是脂肪酸合成的可觀 察的或可測量的降低。在治療的情況下，抑制作用優(yōu)選地足以對所治 療的狀態(tài)產(chǎn)生治療和/或預(yù)防效果。
這里使用的術(shù)語"藥學(xué)上可接受的鹽"意思是保持本發(fā)明的化 合物的生物學(xué)有效性和性能的那些鹽，其在生物學(xué)上或其它方面不是 不合需要的。
這里使用的術(shù)語"對象"或其語法上的同義詞指的是健康的或者 患有或懷疑患有疾病的溫血動物，如哺乳動物。優(yōu)選地，"對象"指 的是人。
這里使用的術(shù)語"治療"或其語法上的同義詞意思是實現(xiàn)治療效 果和/或預(yù)防效果。治療效果意思是進(jìn)行治療的基礎(chǔ)病癥的根除或緩 解。治療效果還通過一種或多種與基礎(chǔ)病癥相關(guān)的生理癥狀的根除或 緩解而獲得，從而在患者中觀察到改善，盡管事實是患者可能仍受到 基礎(chǔ)病癥的折磨。對于預(yù)防效果，可以對具有發(fā)生特定疾病的風(fēng)險的 患者，或者對盡管可能還沒有診斷出疾病但報告有這一疾病的一種或 多種生理學(xué)癥狀的患者施用該組合物。
定義
"硝基苯曱酰胺前體化合物"意思是式(Ia)化合物及其藥學(xué)上可 接受的鹽、溶劑合物、異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、代謝物、類似物或前藥，
30<formula>formula see original document page 31</formula>
其中，R4、 R2、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、氨基、硝基、
碘、(d-Q)烷基、(C廣C6)烷氧基、(C3-C7)環(huán)烷基和苯基，其中
R2、 R3、 R4和Rs五個取代基中的至少兩個總是為氫，五個取代基中 的至少 一個總是為硝基，且位置與硝基相鄰的至少 一個取代基總是為 碟。Rp R2、 R3、 R4和Rs也可以是如氯、氟或溴的鹵素。"前體化 合物"是經(jīng)歷生成代謝化合物的 一種或多種化學(xué)或生物化學(xué)過程(例 如，在細(xì)胞中或在生物體中)的化合物。術(shù)語"前體"、"前體化合 物，，、"苯曱酰胺前體"或"硝基苯甲酰胺前體"在這里可互換使用。
何體外或體內(nèi)代謝過程產(chǎn)生的化合物。換言之，術(shù)語"代謝物"包括 硝基苯甲酰胺代謝化合物。代謝物可以包括相對于前體化合物(例如 在式(Ia)中所示的前體化合物)存在于任何位置的不同數(shù)目或類型的 取代基。另外，代謝物可以在相對于這里所描述的化合物存在于任何 位置的取代基的類型數(shù)目上發(fā)生變化。另外，術(shù)語"代謝物"、"代 謝化合物"、"苯曱酰胺代謝化合物"或"硝基苯曱酰胺代謝化合物" 在這里可互換使用。
"手術(shù)，，意思是對人或其它哺乳動物的身體進(jìn)行的包括用手或手 和儀器一起的有序行為以產(chǎn)生治愈、治療或診斷效果的任何治療或診 斷過程。
"放射治療"意思是將患者暴露于高能射線，包括但不限于X射 線、伽馬射線和中子輻射。這一類型的治療包括，但不限于外照射療法、內(nèi)照射療法、植入物放射療法、近距放射療法、全身放射療法和
放射療法(radiotherapy)。
"化療"意思是通過各種方法(包括靜脈內(nèi)、口服、肌肉內(nèi)、腹 膜內(nèi)、膀胱內(nèi)、皮下、透皮、口腔或吸入，或者栓劑的形式)向癌癥 患者施用一種或多種抗癌藥物和/或其它物質(zhì)?；熆梢栽谑中g(shù)之前進(jìn) 行以使大的肺瘤縮小，隨后通過手術(shù)過程切除，或者在手術(shù)或放射治 療之后進(jìn)行以防止體內(nèi)任何殘留的癌細(xì)胞的生長。
術(shù)語"有效量"或"藥學(xué)有效量，，指的是無毒的但足以提供希望 的生物的、治療的和/或預(yù)防的結(jié)果的物質(zhì)量。該結(jié)果可以是疾病的征 兆、癥狀或誘因的減少和/或減輕，或者任何其它希望的生物系統(tǒng)的改 變。例如，用于治療用途的"有效量"是產(chǎn)生臨床上疾病的顯著減輕 所需的如這里所公開的硝基苯曱酰胺代謝化合物本身或包含這里的 硝基苯曱酰胺代謝化合物的組合物的量。在任何個別情況中的合適的 有效量可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員使用常^L的試-瞼確定。
術(shù)語"PARP抑制劑或其代謝物"包括其本身為PARP抑制劑的 化合物以及這些化合物的活性代謝物。在一些實施方式中，所述PARP 抑制劑的代謝物本身為PARP抑制劑，無論是否分離。在一些實施方 式中，所述PARP抑制劑的代謝物被分離和純化到至少50%、至少 55%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少90%、至少 92%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、至少99.5%、至少99.9%的純度或更純，之后與一種或多種藥 學(xué)上可接受的成分混合以制備如這里更詳細(xì)地描述的藥學(xué)上可接受 的劑型。PARP抑制劑的代謝物是這里更詳細(xì)地描述的PARP抑制劑 "前體化合物"或"前體"的經(jīng)代謝的形式。
"藥學(xué)上可接受的"或"藥理學(xué)上可接受的"意思是一種物質(zhì)在 生物學(xué)上或其它方面不是不合需要的，即該物質(zhì)可以施用于個體而不 引起任何不希望的生物學(xué)效應(yīng)或不以有害的方式與包含該物質(zhì)的組 合物中的任何成分發(fā)生相互作用。
術(shù)語"治療"及這里使用的其語法上的同義詞包括實現(xiàn)治療效果
32和/或預(yù)防效果。治療效果意思是進(jìn)行治療的基礎(chǔ)病癥的根除或緩解。 例如，在癌癥患者中，治療效果包括基礎(chǔ)癌癥的根除或緩解。治療效 果還通過一種或多種與基礎(chǔ)病癥相關(guān)的生理癥狀的根除或緩解而獲 得，從而在患者中觀察到改善，盡管事實是患者可能仍受到基礎(chǔ)病癥 的折磨。對于預(yù)防效果，可以在具有發(fā)生癌癥的風(fēng)險的患者身上，或 者盡管可能還沒有診斷出這些狀態(tài)，但報告有這些狀態(tài)的一種或多種 生理學(xué)癥狀的患者身上實行本發(fā)明的方法，或者對這些患者施用本發(fā) 明的組合物。
這里使用的"BA"意思是4-碘-3-硝基苯曱酰胺；"BNO"意思 是4-碘-3-亞硝基苯甲酰胺；"BNHOH"意思是4-碘-3-羥氨基苯甲酰胺。
硝基苯甲酰胺代謝化合物
本發(fā)明中使用的PARA抑制劑(前體化合物)是式Ia的化合物及其 藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、代謝物、類似 物或前藥
<formula>formula see original document page 33</formula>
其中，Rp R2、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、氨基、硝基、 碘、(C廣C6)烷基、(d-Q)烷氧基、(CVC7)環(huán)烷基和苯基，其中R" R2、 R3、 R4和Rs五個取代基中的至少兩個總是為氫，五個取代基中 的至少一個總是為硝基，且位置與硝基相鄰的至少一個取代基總是為 碘。R2、 R3、 R4和Rs也可以是如氯、氟或溴取代基的鹵素。
優(yōu)選的(PARP抑制劑)式Ia前體化合物是4-碘_3-硝基苯曱酰胺 (BA)
可用于本發(fā)明中的PARP抑制劑代謝物是式(IIa)的化合物及其藥 學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、代謝物、類似物 或前藥
o
C——NH;
(IIa)
其中，或者(l)Ri、 R2、 R3、 R4和Rs取代基中的至少一個總是為 含硫的取代基，且Rp R2、 R3、 R4和R5中其它的取代基獨(dú)立地選自 氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(CrC6)烷基、(C廣C6)烷氧 基、(C3-C7)環(huán)烷基和苯基，其中Ri、 R2、 R3、 R4和R5五個取代基中 的至少兩個總是為氫；或者(2)Rp R2、 R3、 R4和Rs取代基中的至少 一個不為含硫的取代基且五個取代基Ri、 R2、 R3、 R4和R5中的至少 一個總是為碘，且其中所述碘總是與為硝基、亞硝基、羥氨基、羥基 或氨基的R!、 R2、 R3、 R4或R5基團(tuán)相鄰。在一些實施方式中，(2)中
34的化合物中碘基總是與為亞硝基、羥氨基、羥基或氨基的Rp R2、 R3、 R4或R5基團(tuán)相鄰。在一些實施方式中，(2)中的化合物中碘基總 是與為亞硝基、幾氨基或氨基的R!、 R2、 R3、 R4或Rs基團(tuán)相鄰。在
一些實施方式中，含硫的取代基是-SR6，其中R6選自氫、C廣C6?；?、 任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)
雜環(huán)基和任選取代的芳基。
下面的成分為式IIa包含的一些優(yōu)選的PARP抑制劑代謝化合物， 各由以下化學(xué)式表示
MS472 M3601<formula>formula see original document page 36</formula>
Rs選自氫、烷基(CrQ)、烷氧基(d-Cs)、異喹啉酮 。引咮、遂唑、噁唑、噁二唑、噻吩或苯基
<formula>formula see original document page 36</formula><image>image see original document page 37</image>
盡管不限于任何一種特定的機(jī)理，下面纟是供經(jīng)由硝基還原酶或谷 胱甘肽結(jié)合機(jī)制的MS292代謝的實例 硝基還原酶機(jī)制<formula>formula see original document page 38</formula>谷胱甘肽結(jié)合和代謝
<formula>formula see original document page 39</formula>本發(fā)明提供前述硝基苯曱酰胺代謝化合物用于治療其它乳腺癌 (包括乳腺的導(dǎo)管癌)、其它形式的白血病(包括外周血中的急性早幼粒 細(xì)胞白血病)、卵巢癌、肺癌、膀胱癌、前列腺癌、胰腺癌和子宮頸 癌以及這里描述的其它癌癥類型的用途。
已報道硝基苯曱酰胺代謝化合物對惡性癌細(xì)胞具有選擇性細(xì)胞 毒性，但對非惡性癌細(xì)胞沒有。參見Rice等，Proc. Natl. USA 89: 7703-7707 (1992)。在一種實施方式中，本發(fā)明的方法中采用的硝基苯 甲酰胺代謝化合物對肺瘤細(xì)胞比對非肺瘤細(xì)胞可以表現(xiàn)出更高的選 擇性毒性。本發(fā)明的一個方面提供通過施用有效量的聚(ADP)核糖聚合酶 (PARP)抑制劑治療脂肪酸合成相關(guān)疾病的方法，其中PARP抑制劑抑 制脂肪酸合成。脂肪酸合成相關(guān)疾病包括，但不限于癌癥、糖尿病、 肥胖、尼曼-皮克病、高歇氏病、異染性腦白質(zhì)營養(yǎng)不良、彌漫性體 血管角質(zhì)瘤、透明膜病、泰-薩克斯病、桑德霍夫病、克拉伯病、巖 藻糖苷沉積癥、碌u脂沉積癥(sulfatide lipodosis)和Farber脂肪肉芽腫病 (Farber's lipogranulomatosis)。脂肪酸合成相關(guān)疾病包括脂肪酸代謝異 常的疾病。
脂肪酸合成還涉及炎癥(主要的是關(guān)節(jié)、皮膚和眼睛的炎癥)、生 殖功能(包括引產(chǎn)術(shù))、抑制胃酸分泌、通過血管舒張或收縮調(diào)節(jié)血壓 和抑制或激活血小板聚集和血栓形成。在一些優(yōu)選的實施方式中，脂 肪酸合成相關(guān)疾病包括肥胖、糖尿病或心血管疾病。
本發(fā)明的另 一方面涉及通過施用有效量的PARP抑制劑或其代謝 物治療對象的癌癥的方法，其中PARP抑制劑或其代謝物抑制脂肪酸 合成。該方法特別涉及通過確定對象的樣品中的脂肪酸水平和施用有 效量的PARP抑制劑或其代謝物以抑制脂肪酸合成而治療對象的癌癥 的方法，其中施用是基于所述脂肪酸水平，從而治療對象的癌癥。
測試樣品可以如從來源獲得的原樣直接使用或在進(jìn)行預(yù)處理以 改變樣品的特性后使用。樣品可以源自任何生物來源，如組織或提取 物(包括細(xì)胞)和生理液體，例如，舉例來il,全血、血漿、血清、唾 液、接目鏡液(ocularlensfluid)、腦脊液、汗水、尿、奶水、腹水(ascots fluid)、滑液、腹膜液等等。樣品從動物或人體獲得，優(yōu)選從人體獲得。 樣品可以在使用前進(jìn)行處理，如從血液制備血漿、稀釋粘稠流體等等。 處理樣品的方法可以包括過濾、蒸餾、提取、濃縮、滅活干擾性組分、 加入試劑等等。
通常，在正常人體中，脂肪酸生物合成途徑是下調(diào)的且身體中的 大部分脂肪酸來自于膳食脂肪。但是，在患有癌癥的人體中，脂肪酸 生物合成途徑是上調(diào)的，從而導(dǎo)致肺瘤組織中的脂肪酸水平升高。在 各種癌癥中上調(diào)的脂肪酸合成表明脂肪酸合成提供了腫瘤生長的有利條件。脂肪酸合成的抑制可以導(dǎo)致膜脂的耗竭，這可以引起細(xì)胞死
亡(Khaddar等，尸亂淑/. y^"d. 1994， vol. 91, p. 6379-6383)。本 發(fā)明提供用有效量的PARP抑制劑或其代謝物治療癌癥的方法，其中 PARP抑制劑或其代謝物抑制脂肪酸合成。各種癌癥包括，但不限于 膀胱、乳腺、結(jié)腸、直腸、前列腺、卵巢、唾液腺、皮膚附件、膽管、 宮頸內(nèi)膜、外宮頸、陰道、食道、鼻咽、口咽或生殖細(xì)胞起源的那些 癌癥，胃、子宮內(nèi)膜、腎、肝和肺的癌或腺癌，黑色素瘤和間皮瘤。
在本發(fā)明的一些實施方式中，該方法包括通過施用有效量的 PARP抑制劑或其代謝物治療Her-2相關(guān)癌癥，其中PARP抑制劑或 其代謝物抑制脂肪酸合成。不意圖限制本發(fā)明的范圍，脂肪酸合酶 (FAS)催化的脂肪酸的從頭(de novo)生物合成可能通過其特定地調(diào)節(jié) Her-2/neu (erB-2)癌基因的表達(dá)和活性的能力而有助于癌癥表型 (Menendez JA等，7Ve將2005, 18(6), 375-85; Menendez JA等，/ C"/腸cW 2005, 94(5)， 857-63)。 PARP抑制劑或其代謝 物對脂肪酸合成的抑制可以導(dǎo)致Her-2相關(guān)癌癥的治療。
在本發(fā)明的一些實施方式中，治療Her-2相關(guān)癌癥的方法包括確 定來自對象的樣品中Her-2表達(dá)的水平和對對象施用有效量的PARP 抑制劑或其代謝物以抑制脂肪酸合成，其中施用是基于來自對象的樣 品中Her-2表達(dá)水平的確定。在一些優(yōu)選的實施方式中，樣品包括腫 瘤細(xì)胞。如果樣品中Her-2表達(dá)水平較高，則患者用有效量的PARP 抑制劑或其代謝物進(jìn)行治療。并不限制本發(fā)明的范圍，PARP抑制劑 或其代謝物抑制脂肪酸合成并因此治療Her-2相關(guān)癌癥。在一些實施 方式中，PARP抑制劑或其代謝物通過抑制葡萄糖途徑或脂肪酸生物 合成途徑的一種或多種酶而抑制脂肪酸合成。在一些實施方式中， PARP抑制劑或其代謝物與Her-2抗體聯(lián)合施用。Her-2抗體的一個例 子是赫賽汀(herceptin)。
在本發(fā)明的 一 些優(yōu)選的實施方式中，該方法包括通過施用有效量 的PARP抑制劑或其代謝物治療肥胖癥，其中PARP抑制劑或其代謝 物抑制脂肪酸合成。肥胖是在成人中正變得更加普遍，且迅速地在兒童和青少年中增長的一種主要的健康問題。肥胖已經(jīng)與大范圍的生 理、情緒和社會經(jīng)濟(jì)問題相關(guān)聯(lián)。本發(fā)明的用于減輕肥胖的方法可應(yīng) 用于人和其它動物，包括脊推動物，特別是哺乳類動物。動物包括家 禽、豬、牛、羊和其它動物，其中減少脂肪聚積而不降低肌肉質(zhì)量對 于獸醫(yī)學(xué)健康或經(jīng)濟(jì)原因來說可能是理想的?？梢猿鲇讷F醫(yī)學(xué)健康的 原因按照本發(fā)明的方法對狗、貓、馬和其它動物施用PARP抑制劑。 在本發(fā)明的一些優(yōu)選的實施方式中，該方法包括通過施用有效量
的PARP抑制劑或其代謝物治療心血管疾病，其中PARP抑制劑或其 代謝物抑制脂肪酸合成。在一些人中，過量的身體脂肪導(dǎo)致患血管疾 病(包括心臟病和中風(fēng))的風(fēng)險增加。儲存在腹內(nèi)沉積物中的脂肪增加 可能與動脈粥樣硬化心血管病(ASCVD)的危險因素相關(guān)并可能引起 動脈粥樣硬化心血管病。ASCVD的危險因素包括高血壓、血液中 的膽固醇特別是LDL-膽固醇水平升高、糖尿病和高血糖癥。具有高 血壓的人可能發(fā)生葡萄糖耐量減低(一種糖尿病前的狀況)。
在一些優(yōu)選的實施方式中，該方法包括通過施用有效量的PARP 抑制劑或其代謝物治療糖尿病，其中PARP抑制劑或其代謝物抑制脂 肪酸合成?；加刑悄虿〉幕颊呖赡芫哂袔追N脂異常中的任一種?；加?糖尿病的患者中常見的脂特征包括甘油三酯、低密度脂蛋白(LDL)和 極低密度脂蛋白(VLDL)的水平升高，以及低于正常水平的高密度脂 蛋白(HDL)。這些因素的綜合效應(yīng)導(dǎo)致動脈粥樣硬化和血栓癥的生成。 其它疾病包括，但不限于高胰島素血癥、胰島素抵抗、心肌梗死、脂 肪肝、多嚢卵巢綜合征、血色素沉著癥、非酒精性脂肪性肝炎、糖尿 病性腎病等。
盡管優(yōu)選在用PARP抑制劑或其代謝物進(jìn)行治療前確定對象中的 脂肪酸水平，但有經(jīng)驗的醫(yī)生可以認(rèn)識到，這種確定并不總是必需的。 在癌癥患者使用PARP抑制劑或其代謝物治療后腫瘤負(fù)荷的降低將證 明治療前肺瘤中較高水平脂肪酸的存在。在癌癥患者可以成功地通過 本發(fā)明的方法治療的情況下，對象中脂肪酸水平的獨(dú)立確定可能不是 必需的。對通常發(fā)現(xiàn)表達(dá)升高水平的脂肪酸的癌癥類型的這種經(jīng)驗治療也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的另 一 方面涉及監(jiān)測PARP抑制劑或其代謝物在疾病治療 中的療效的方法，包括對患者施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物 以抑制脂肪酸合成；比較來自患者的第 一和第二樣品中的第 一和第二 脂肪酸水平，其中第一水平和第一樣品在施用PARP抑制劑或其代謝 物之前獲得，而第二水平和第二樣品在施用PARP抑制劑或其代謝物 之后獲得；和基于比較結(jié)果確定PARP抑制劑或其代謝物在患者中的 疾病治療療效。
第 一樣品的第一脂肪酸水平可以恰好在對患者施用PARP抑制劑 或其代謝物之前測定或者可以在對患者施用PARP抑制劑或其代謝物 之前數(shù)天、數(shù)周、數(shù)月或數(shù)年之前獲得。第一樣品的第一脂肪酸水平 可以從患者的病史獲得?？赡馨l(fā)現(xiàn)第二樣品的第二脂肪酸水平低于第 一樣品的第一脂肪酸水平，從而表明患者中的脂肪酸合成受到PARP 抑制劑或其代謝物的抑制并因此表明PARP抑制劑或其代謝物的療 效?？赡馨l(fā)現(xiàn)第二樣品的第二脂肪酸水平高于第一樣品的第一脂肪酸 水平，從而表明PARP抑制劑或其代謝物的較低療效。這種PARP抑 制劑或其代謝物療效的監(jiān)測可用于調(diào)節(jié)劑量和對患者的給藥方案進(jìn) 行個性化調(diào)整。這種監(jiān)測也可以用于臨床試驗中。
本發(fā)明的方法中的脂肪酸合成抑制可以包括抑制葡萄糖途徑或 脂肪酸生物合成途徑的一種或多種酶。并不限制本發(fā)明的范圍，這里 公開了葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑中涉及到的各種步驟和酶。 任何一個或多個步驟和/或酶可以受到本發(fā)明的PARP抑制劑或其代 謝物的抑制。
葡萄糖途徑
葡萄糖的氧化稱作糖酵解，其中葡萄糖被氧化為乳酸或丙酮酸。 在有氧條件下，大多數(shù)組織中的產(chǎn)物是丙酮酸且該途徑稱為有氧糖酵 解。當(dāng)氧耗盡時，例如在長時間的劇烈運(yùn)動過程中，在許多組織中的
主要糖酵解產(chǎn)物是乳酸，且該過程稱為無氧糖酵解。糖酵解的途徑可 以看作由兩個單獨(dú)的階段組成。在第一階段中，2當(dāng)量的ATP用于將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖1,6-二磚酸(Fl,6BP)。在第二階段中F1,6BP降解為 丙酮酸，產(chǎn)生4當(dāng)量的ATP和2當(dāng)量的NADH(參見圖1和2)。
ATP-依賴的葡萄糖磷酸化以形成葡萄糖6-磷酸(G6P)是糖酵解的 第一個反應(yīng)，且被稱作己糖激酶的組織特異性的同工酶催化。已知己 糖激酶有四種哺乳動物同工酶(I-IV型)，IV型同工酶通常稱作葡萄糖 激酶。葡萄糖激酶是在肝細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的該酶的形式。己糖激酶和葡萄 糖激酶活性的調(diào)節(jié)也是不同的。己糖激酶I、 II和III受到產(chǎn)物(G6P) 蓄積的變構(gòu)抑制，而葡萄糖激酶則不。盡管在需要葡萄糖對外周組織 提供能量時幫助外周葡萄糖利用，后者也進(jìn)一步確保在葡萄糖過量期 間葡萄糖的肝蓄積。
糖酵解的第二個反應(yīng)是異構(gòu)化，其中G6P轉(zhuǎn)化為果糖6-磷酸 (F6P)。催化該反應(yīng)的酶是磷酸己糖異構(gòu)酶(也稱作磷酸葡糖異構(gòu)酶)。 糖酵解的下一個反應(yīng)包括利用第二個ATP將F6P轉(zhuǎn)化為果糖1,6-二 磷酸(F1，6BP)。該反應(yīng)由6-磷酸果糖-l-激酶催化，該酶更多的稱為磷 酸果糖激酶-1或PFK-1。由于水解酶(果糖1，6-二磷酸酶，F(xiàn)-l，6-BPase) 的普遍存在，果糖單元很容易沿相反的(糖異生的)方向流動。在同一 細(xì)胞區(qū)域中存在這兩種酶提供了代謝無效循環(huán)的例子，其中如果不受 控制的話，將迅速地耗盡細(xì)胞能量儲存。但是，這兩種酶的活性受到 高度的調(diào)節(jié)，從而PFK-1被認(rèn)為是糖酵解的限速酶，F(xiàn)-l,6-BPase被 認(rèn)為是糖異生的限速酶。
醛縮酶催化F1,6BP水解成兩個3-碳產(chǎn)物二羥丙酮磷酸(DHAP) 和甘油醛3-磷酸(G3P)。醛縮酶反應(yīng)很容易沿相反的方向進(jìn)行，而被 用于糖酵解和糖異生作用。醛縮酶反應(yīng)的兩個產(chǎn)物很容易在丙糖磷酸 異構(gòu)酶催化的反應(yīng)中保持平衡。糖酵解的后續(xù)反應(yīng)利用G3P作為底 物，因此醛縮酶反應(yīng)通過質(zhì)量作用原理沿糖酵解方向推進(jìn)。
葡萄糖代謝的第二階段特征是產(chǎn)生ATP和NADH的產(chǎn)能糖分解 反應(yīng)。在這些反應(yīng)的第一個中，甘油醛3-P脫氫酶(G3PDH)催化G3P 的NAD、依賴氧化反應(yīng)而氧化成1,3-二磷酸甘油酸(l，3BPG)和 NADH。 G3PDH反應(yīng)是可逆的，相同的酶在糖異生作用中催化逆向反應(yīng)。
1，3BPG的高能磷酸用于通過磷酸甘油酸激酶形成ATP和3-磷酸 甘油酸(3PG)。與磷酸甘油酸激酶相關(guān)的是重要的紅細(xì)胞反應(yīng)，通過 二磷酸甘油酸變位酶形成2,3-二磷酸甘油酸(2,3BPG)。 2,3BPG是血紅 蛋白對氧的親和力的重要調(diào)節(jié)劑。2，3-二磷酸甘油酸磷酸酶將2,3BPG 降解為3-磷酸甘油酸，糖酵解的正常中間體。因此每個丙糖通過 2，3BPG支路時該支路消耗1當(dāng)量的ATP。
糖酵解的其它反應(yīng)旨在通過甘油酸磷酸酶變位酶將3PG轉(zhuǎn)化成 2PG，且烯醇酶催化2PG轉(zhuǎn)化成磷酸烯醇丙酮酸(PEP)。有氧糖酵解 的最終反應(yīng)是由高度調(diào)節(jié)的丙酮酸激酶(P K)催化的。在該放能反應(yīng) 中，PEP的高能磷酸化合物保存為ATP。 PEP喪失磷酸導(dǎo)致產(chǎn)生不穩(wěn) 定的烯醇式丙酮酸，其自動發(fā)生異構(gòu)變成更穩(wěn)定的酮式丙酮酸。在無 氧條件下和在有氧條件的紅細(xì)胞中，丙酮酸通過乳酸脫氫酶(LDH)被 轉(zhuǎn)化成乳酸，且乳酸輸送到細(xì)胞外進(jìn)入血液循環(huán)中。
在有氧條件下，大多數(shù)細(xì)胞中的丙酮酸進(jìn)一步通過TCA循環(huán)代 謝。丙酮酸在TCA循環(huán)中優(yōu)先氧化成C02和H20。當(dāng)輸送到線粒體 中時，丙酮酸遇到兩種主要的代謝酶丙酮酸羧化酶(一種糖異生酶) 和丙酮酸脫氬酶(PDH), PDH復(fù)合體的第一個酶。當(dāng)能荷較低時，CoA 不進(jìn)行?；狒然甘Щ?，且丙酮酸優(yōu)先通過PDH復(fù)合體和 TCA循環(huán)的酶代謝成CCb和H20。 PDH復(fù)合體由多份的3種獨(dú)立的 酶組成丙酮酸脫氫酶(20-30份)、二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙酰酶(60份)和二氫 硫辛酸脫氫酶(6份)。該復(fù)合酶還需要5種不同的輔酶CoA、 NAD+、 FAD+、硫辛酸和硫胺素焦磷酸(TPP)。 PDH復(fù)合體反應(yīng)的凈結(jié)果是 丙酮酸+ CoA+ NAD+ - C02 +乙酰畫CoA + NADH + H+
PDH復(fù)合體反應(yīng)用于將糖酵解、糖異生和脂肪酸合成的代謝途徑 相互連接到TCA循環(huán)上。
脂肪酸生物合成途徑
脂肪酸使用底物乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH通過脂肪酸 合酶(FAS)合成。因此，脂肪酸合成途徑通常被認(rèn)為包括四種酶，F(xiàn)AS和三種產(chǎn)生其底物的酶乙酰CoA羧化酶(ACC)、蘋果酸酶和檸檬酸 裂合酶。可以將底物送入該途徑中的其它酶，如通過己糖單磷酸支路 產(chǎn)生NADPH的酶，也可以影響脂肪酸合成的速率，并因此在細(xì)胞中 其依賴于內(nèi)源合成的脂肪酸。這些酶中任何酶的表達(dá)或活性的抑制可 能影響依賴于內(nèi)源合成的脂肪酸的癌細(xì)胞的生長。
丙二酰-CoA的合成是脂肪酸合成的第一步，催化該反應(yīng)的酶， 乙酰-CoA羧化酶(ACC)，是調(diào)節(jié)脂肪酸合成的部位。與將C02轉(zhuǎn)移到 底物上的其它酶一樣，ACC需要生物素輔因子。從乙酰-CoA和丙二 酰-CoA合成脂肪酸通過脂肪酸合酶(FAS)完成。該活性酶是相同亞單 元的二聚體。
脂肪酸合成的所有反應(yīng)通過FAS的多種酶活性完成。如脂肪氧 化反應(yīng)一樣，脂肪合成涉及四種酶活性。它們是P-酮-ACP合成酶、 |3畫酮畫ACP還原酶、3畫OH?；?ACP脫水酶和烯醇畫CoA還原酶。兩 種還原反應(yīng)需要NADPH氧化成NADP+。FAS合成的最初的脂肪酸是 棕櫚酸。
棕櫚酸是16:0的脂肪酸，即16個碳且沒有不飽和位。然后棕櫚 酸從酶上釋放且隨后可以經(jīng)歷單獨(dú)的延長和/或不飽和作用以產(chǎn)生其 它的脂肪酸分子。脂肪酸的延長和/或不飽和作用在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (微粒體膜)中都發(fā)生。這些過程的主要位置是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)膜中。 延長涉及?；?CoA基團(tuán)與丙二酰-CoA的縮合。所獲得的產(chǎn)物延長了 兩個碳(在FAS反應(yīng)中從丙二酰-CoA釋放C02),其經(jīng)歷還原、脫水 和還原而產(chǎn)生飽和脂肪酸。延長作用的還原反應(yīng)需要作為輔因子的 NADPH,正如FAS催化的類似反應(yīng)一樣。線粒體的延長作用涉及乙 酰-CoA單元且是氧化的逆轉(zhuǎn)，除了最后的還原利用NADPH而不是 FADH2作為輔因子。
去飽和作用在ER膜以及在哺乳動物細(xì)胞中發(fā)生，并涉及4種廣 泛特異性的脂肪?；?CoA去飽和酶(包含非血紅素鐵的酶)。這些酶在 C4、 C5、 Q或C9處引入非飽和化。在去飽和化期間從氧化的脂肪酸 轉(zhuǎn)移來的電子從去飽和酶轉(zhuǎn)移到細(xì)胞色素b5，然后轉(zhuǎn)移到NADH-細(xì)胞色素b5還原酶。 一些飽和脂肪酸包括，但不限于，月桂酸(C:12)、 肉豆蔻酸(C:14)、棕櫚酸(C:16)、硬脂酸(C:18)、油酸(C:18-1)、花生酸 (C:20)、 C:22和C:24。 一些不飽和酸包括，^f旦不限于，二十二石灰六烯 酸、二十石友五烯酸、花生四烯酸、油酸和芥酸。 分析技術(shù)
對象的樣品中脂肪酸水平的確定或用PARP抑制劑或其代謝物治 療后脂肪酸合成的抑制的確定可以采用本領(lǐng)域中已知的各種檢測技 術(shù)，包括，但不限于酶分析、質(zhì)譜分析如氣相色譜/質(zhì)鐠(GC/MS)、質(zhì) 量選擇性檢測分析(MSD)、化學(xué)離子化和選擇性離子監(jiān)測(SIM)、質(zhì)量 同位體分布分析、高效液相色譜(HPLC)或核磁共振(NMR)。
在對象用有效量的PARP抑制劑或其代謝物治療后脂肪酸抑制的 確定可以包括分析來自對象的樣品中的葡萄糖或脂肪酸生物合成途 徑的各種代謝物或分子流。該確定可以包括與參比樣品的 一 個或多個 對比。參比樣品通常從同一對象或從沒有該疾病(如正常對象)或作為 患者的不同對象獲得。參比樣品可以從一個對象、多個對象獲得或者 可以通過合成產(chǎn)生。確定也可以包括確認(rèn)數(shù)據(jù)與數(shù)據(jù)庫的比較。本發(fā) 明的一個實施方式涉及確定患有疾病(如癌癥)的對象中的脂肪酸水平 并使其與正常對象的脂肪酸水平聯(lián)系起來。如果在患有疾病的對象中 脂肪酸水平上調(diào)，則該對象用抑制脂肪酸合成的有效量的PARP抑制 劑或其代謝物治療。
在一些實施方式中，比較脂肪酸水平的步驟通過軟件算法進(jìn)行。 優(yōu)選地，產(chǎn)生的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)變成計算機(jī)可讀的形式；且運(yùn)行算法以按照用 戶輸入的參數(shù)對數(shù)據(jù)分類，用于檢測代表患病患者中的脂肪酸水平和 正常對象中的脂肪酸水平的信號。
可以在本發(fā)明的方法中分析的葡萄糖或脂肪酸生物合成途徑的 代謝物包括，但不限于，脂肪酸或其代謝物、酶、葡萄糖、谷氨酸、 糖原、乳酸、C02、乙酰Co-A、 RNA核糖和DNA脫氧核糖。葡萄糖 或脂肪酸生物合成途徑的分子流包括，但不限于從培養(yǎng)基攝取葡萄 糖、從葡萄糖產(chǎn)生乳酸(無氧糖酵解)、通過TCA循環(huán)從葡萄糖釋放13C02、 TCA循環(huán)回補(bǔ)流(anaplerotic flux)、糖原合成、脂肪酸/人頭合 成、延長、去飽和和乙酰-CoA合成、及戊糖循環(huán)一通過氧化和非氧 化反應(yīng)的RNA和DNA核糖合成。代謝物可以在提取后和分析前進(jìn)行 化學(xué)衍生化。分析技術(shù)是本領(lǐng)域中公知的且在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
分析技術(shù)包括活性分析或染色、采用抗體的免疫分析、測定酶 mRNA (如FAS mRNA)的分析等等。參與葡萄糖途徑或脂肪酸生物合 成途徑的酶的表達(dá)可以使用如免疫組織化學(xué)分析、胞質(zhì)酶免疫分析或 放射免疫分析、核酸探針與mRNA靶的原位雜交或酶活性的直接測 定的分析方法在通過如活體檢查、切除術(shù)或針抽吸的過程獲得的腫瘤 組樣品中直接測定。酶的表達(dá)可以使用任何合適的分析方法用乂人對象 獲得的生物液體樣品(如血液、尿、血清、淋巴、唾液、精液、腹水 或特別是血漿)間接測定。優(yōu)選的分析包括免疫分析或放射免疫分析。
在一些實施方式中，PARP抑制劑或其代謝物對于細(xì)胞、組織或 生物體的療效可以通過分析施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物后 細(xì)胞、組織或生物體中的多種代謝物(如脂肪酸)而測定。通過這種方 法，可以對PARP抑制劑或其代謝物對脂肪酸合成的抑制進(jìn)行監(jiān)測。
在本發(fā)明的一些優(yōu)選的實施方式中，葡萄糖途徑或脂肪酸生物合 成途徑的代謝物或分子流通過質(zhì)量同位體分布分析(MIDA)進(jìn)行分 析。在一些實施方式中，對所有或一部分細(xì)胞、組織或生物體中的多 種代謝物的分子流率進(jìn)行分析。 一種或多種同位素標(biāo)記的代謝物或代 謝物前體在足以使一種或多種同位素標(biāo)記進(jìn)入細(xì)胞、組織或生物體的 多種代謝物中的時間內(nèi)施用于細(xì)胞、組織或生物體。乂人細(xì)胞、組織或 生物體收集培養(yǎng)基或細(xì)胞沉淀。代表細(xì)胞沉淀或培養(yǎng)基中單個代謝物
的離子的多個質(zhì)量同位體組線(mass isotopomeric envelopes)通過質(zhì)語 鑒定。另外，在對應(yīng)于各鑒定的代謝物的同位素組線內(nèi)離子的相對和 絕對質(zhì)量同位體豐度通過質(zhì)譜鑒定。這些相對和絕對質(zhì)量同位體豐度 使得能夠計算各鑒定的代謝物的合成或去除的速率，因而多種代謝物 的分子流率得到確定。在一些實施方式中，代謝物可以在加入到質(zhì)譜 儀中之前進(jìn)行衍生化。衍生化可以是本領(lǐng)域中已知的任何方法，如生物化學(xué)降解代謝物或化學(xué)改變代謝物。
同位素標(biāo)記包括特定的存在于生物分子中的元素的重同位素，如
2H、 13C、 15N、 lsO、 35S、 34S,或者可以包含存在于生物分子中的元 素的其它同位素，如3H、 14C、 35S、 125I、 mI。同位素標(biāo)記的代謝物 包括，但不限于2H20、 15NH3、 13C02、 H13C03、 2fi-標(biāo)記的氨基酸、 13。標(biāo)記的氨基酸、"N-標(biāo)記的氨基酸、180-標(biāo)記的氨基酸、"S或"S-標(biāo)記的氨基酸、3H20、 3H-標(biāo)記的氨基酸、"C-標(biāo)記的氨基酸、14C02 和H"C02等。
代謝流評價涉及揭示體內(nèi)生物化學(xué)反應(yīng)的穩(wěn)態(tài)速率。關(guān)于代謝流 的知識有助于代謝途徑的優(yōu)化以獲得目標(biāo)代謝產(chǎn)物的高產(chǎn)率。當(dāng)在兩 種代謝物之間存在一種以上替代途徑時，使用"C-標(biāo)記的底物是定量 細(xì)胞的胞內(nèi)流的方法。在本發(fā)明中，[1,2-"C2]-D-葡萄糖用于培養(yǎng)基 中作為葡萄糖的唯一來源。示蹤方法是基于測量同位體分布，即具有 其相對豐度的代謝物的不同"C-同位素形式。通過比較測量的同位體 分布和使用各替代途徑時預(yù)期的分布，可以推導(dǎo)出關(guān)于途徑間流分布 的信息。
有兩種確定原子的位置同位體分布的方法核爿磁共振(NMR)和質(zhì) 譜(MS)。 MS可以與液相(LC-MS)或氣相(GC-MS)色譜分離方法聯(lián)合。 這些方法也可以組合以獲得更多的關(guān)于位置同位體分布的信息并因 此也獲得關(guān)于流的信息。在本發(fā)明的一些優(yōu)選的實施方式中，原子的 同位體分布和代謝物流通過質(zhì)譜確定?？梢允褂玫馁|(zhì)譜方法是帶有電 子沖擊(EI)離子化和全掃描模式的GC-MS。代謝分子的質(zhì)量同位體由 于高能量而同時在電離箱中碎裂，且在譜中觀察到一系列的碎片離 子。當(dāng)使用GC-串聯(lián)質(zhì)譜方法(GC-MS/MS)時，可以選擇和碎裂(子離 子掃描)目標(biāo)同位體離子以得到額外的信息。許多分析的代謝物是極 性的，因而可能需要衍生化以將代謝物轉(zhuǎn)化成具有足夠的揮發(fā)性以進(jìn) 行GC-MS分析。在同位體分布計算中，也考慮來自衍生(dramatizing) 試劑的原子。通過LC-MS方法，當(dāng)電噴射離子化(ESI)用于分析極性 代謝物時，通常不需要衍生化。可從串聯(lián)質(zhì)譜數(shù)據(jù)確定的同位體分布的范圍可能取決于兩個方 面第一，可能需要使相應(yīng)的峰足以可靠地檢測的質(zhì)量同位體頻率。 第二，可能需要足夠的分子碎裂。為了完全確定各同位體的豐度，對 于每一對碳原子可能需要恰好出現(xiàn)其中一個碳的碎片。
用PARP抑制劑或其代謝物進(jìn)行治療
適用于本發(fā)明中的化合物是抑制脂肪酸合成的化合物。優(yōu)選抑制 劑(及其代謝物)是PARP抑制劑。這里提供的化合物對脂肪酸合成的 抑制可能包括抑制葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑的一種或多種 酶。本發(fā)明的優(yōu)選PARP抑制劑是式I的化合物、其藥學(xué)上可接受的 鹽或其前藥
其中，Rp R2、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的 胺、羧基、目旨、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選
取代的(d-C6)烷氧基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)
雜環(huán)基、任選取代的芳基和含硫的基團(tuán)。在一些實施方式中，含硫的 基團(tuán)是-SR6，其中R6選自氫、d-C6?；⑷芜x取代的(Q-Q)烷基、
任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基和任選取代的芳基。
另一優(yōu)選的PARP抑制劑是式n的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽
或其前藥<formula>formula see original document page 51</formula>
其中，R!、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代
的(CrC6)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)
基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中R!、 R3、
R4和R5取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6為-SR6，其中R6選自 氫、d-C6?；⑷芜x取代的(d-C6)烷基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、 任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。在一些
實施方式中，R6是任選取代的(CrC6)烷基，其為S-連接的半胱氨酸結(jié)
構(gòu)的殘基，該半胱氨酸結(jié)構(gòu)可以是單半胱氨酸氨基酸或可以形成包含 半胱氨酸的二肽、三肽、四肽、五肽或更高級肽的一部分。
一種優(yōu)選的PARP抑制劑是式III的3-硝基-4-碘苯甲酰胺、其藥 學(xué)上可接受的鹽或其前藥
<formula>formula see original document page 51</formula>
本發(fā)明的一些實施方式涉及治療代謝疾病的方法，包括對需要的 患者施用有效量的式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 52</formula> 式II
其中，R!、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、
羧基、目旨、亞硝基、硝基、囟素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代 的(d-C6)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)雜環(huán)
基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中R!、 R3、 R4和Rs取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6是-SR6，其中116選自 氫、CrQ?；⑷芜x取代的(CrQ)烷基、任選取代的(CVC。環(huán)烷基、 任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基；且其中 式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前鹽抑制脂肪酸合成，從而 治療對象的代謝病。在 一 些實施方式中，R6為任選取代的(C!《6)烷基， 其為S-連接的半胱氨酸結(jié)構(gòu)的殘基，該半胱氨酸結(jié)構(gòu)可以是單半胱氨 酸氨基酸或可以形成包含半胱氨酸的二肽、三肽、四肽、五肽或更高 級肽的一部分。
本發(fā)明進(jìn)一步包括式I化合物的代謝物的用途。用于本發(fā)明的一 些代謝物為式(IIa)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、異構(gòu) 體、互變異構(gòu)體、代謝物、類似物或前藥其中，或者(1)&、 R2、 R3、 R4和Rs取代基中的至少一個總是為 含硫的取代基，且Rp R2、 R3、 114和R5中其它的取代基獨(dú)立地選自 氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(Q-Q)烷基、(d-C6)烷氧 基、(CVC7)環(huán)烷基和苯基，其中R!、 R2、 R3、 R4和Rs五個取代基中 的至少兩個總是為氫；或者(2)Ri、 R2、 R3、 R4和Rs取代基中的至少 一個不為含硫的取代基且五個取代基Ri、 R2、 R3、 R4和R5中的至少 一個總是為碘，且其中所述碘總是與為硝基、亞硝基、羥氨基、羥基 或氨基的Ri、 R2、 R3、 R4或R5基團(tuán)相鄰。在一些實施方式中，(2)中 的化合物中碘基總是與為亞硝基、羥氨基、羥基或氨基的Rt、 R2、 R3、 R4或Rs基團(tuán)相鄰。在一些實施方式中，(2)中的化合物中碘基總 是與為亞硝基、羥氨基或氨基的Rp R2、 R3、 R4或R5基團(tuán)相鄰。
下面的成分為優(yōu)選的代謝化合物，各由以下化學(xué)式表示
<formula>formula see original document page 53</formula><formula>formula see original document page 54</formula><formula>formula see original document page 55</formula>在一些實施方式中，這里提供的化合物的代謝物可以用于本發(fā)明
的方法中。例如，所述代謝物包括如名稱為"Treatment of Cancer"、 發(fā)明者為Ernest Kun、 Jerome Mendeleyev、 Carol Basbaum、 Hassan Lemjabbar畫Alaoui和Valeria Ossovskaya的2006年9月5日才是交的 理人巻號為28825-729.101的美國申請中描述的那些，該文獻(xiàn)通過引 用全部引入本申請。
本發(fā)明的一些實施方式涉及治療對象的癌癥的方法，包括確定來 自對象的樣品中的脂肪酸水平和對對象施用有效量的式II的化合物、 其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥，其中施用是基于脂肪酸水平的確定。 式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥抑制脂肪酸合成，從而 治療對象的癌癥。
典型的鹽是無機(jī)離子的鹽，例如，舉例來說，鈉、鉀、鈣、鎂離 子等等。這些鹽包括與無機(jī)酸或有機(jī)酸生成的鹽，如鹽酸、氫溴酸、 磷酸、硝酸、硫酸、曱磺酸、對曱苯磺酸、乙酸、富馬酸、琥珀酸、 乳酸、苦杏仁酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸或馬來酸。另外，如果化 合物包含羧基或其它酸性基團(tuán)，它可以與無機(jī)堿或有機(jī)堿轉(zhuǎn)化成藥學(xué) 上可接受的加成鹽。合適的堿的例子包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水、 環(huán)己胺、二環(huán)己基胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺等等。
這里描述的PARP抑制劑可以包含一個或多個不對稱中心并因 此產(chǎn)生外消旋體和外消旋混合物、單對映異構(gòu)體、單個非對映異構(gòu)體 和非對映異構(gòu)體混合物。這些化合物的所有這些同分異構(gòu)體形式明顯 地包括在本發(fā)明中。這里描述的PARP抑制劑也可以以互變異構(gòu)形式 表示，它們都包括在本發(fā)明中。PARP抑制劑也可以為順式-或反式-或 E-或Z-雙鍵同分異構(gòu)體形式。這些抑制劑的所有這些同分異構(gòu)體 形式明顯地包括在本發(fā)明中。這里描述的PARP抑制劑的所有晶形明 顯地包括在本發(fā)明中。PARP抑制劑也可以以其藥學(xué)上可接受的鹽、 衍生物或前藥存在。
現(xiàn)有本領(lǐng)域中已知其它PARP抑制劑且它們在本發(fā)明的范圍內(nèi)。PARP抑制劑已設(shè)計為苯甲酰胺的類似物，其在PARP的催化位點(diǎn)與 天然底物NAD竟?fàn)幮缘亟Y(jié)合。PARP抑制劑包括，但不限于苯酰胺 類、喹諾酮類和異喹諾酮類、苯并吡喃酮類、3，5-二碘-4-(4，-曱氧基苯 氧基)苯甲酸曱酯和3，5-二碘-4-(4，-曱氧基苯氧基)苯乙酮(US 5,464,871、 US 5,670,518、 US 6,004,978、 US 6,169,104、 US5，922,775、 US 6,017,958、 US 5,736,576和US 5,484,951，所有文獻(xiàn)通過引用全部 引入本申請)。PARP抑制劑包括多種環(huán)狀苯甲酰胺類似物(即內(nèi)酰胺 類)，其為NAD位點(diǎn)的強(qiáng)抑制劑。其它PARP抑制劑包括，但不限于 苯并咪唑類和吲哚類(EP 841924、 EP 1127052、 US 6,100,283、 US 6,310,082、 US 2002/156050、 US 2005/054631、 WO 05/012305、 WO 99/11628和US 2002/028815)。本領(lǐng)域中已知的其它PARP抑制劑也 可以抑制脂肪酸合成且在本發(fā)明的范圍內(nèi)(2006年6月12日提交的美 國申請60/804563，其通過引用全部引入本申請)。 癌癥類型
本發(fā)明中的癌癥包括，但不限于結(jié)腸腺癌、食管腺癌、肝細(xì)胞肝 癌、鱗狀細(xì)胞癌、胰腺腺癌、胰島細(xì)胞瘤、直腸腺癌、胃腸道基質(zhì)瘤、 胃腺癌、腎上腺皮質(zhì)癌、濾泡性癌、乳頭狀癌、乳腺癌、導(dǎo)管癌、小 葉癌、導(dǎo)管內(nèi)癌、粘液癌、葉狀腫瘤、卵巢腺癌、子宮內(nèi)膜腺癌、顆 粒細(xì)胞瘤、粘液性嚢腺癌、子宮頸腺癌、外陰鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞 癌、前列腺腺癌、骨巨細(xì)胞瘤、骨肉瘤、喉癌、肺腺癌、腎癌、膀胱 癌、韋爾姆瘤和淋巴瘤。
癌癥的其它例子包括，但不限于腎上腺皮質(zhì)癌、肛門癌、再生障 礙性貧血、膽管癌、膀胱癌、骨癌、骨轉(zhuǎn)移、成人CNS腦腫瘤、兒 童CNS腦腫瘤、乳腺癌、血管濾泡性淋巴組織增生(Castleman病)、 子宮頸癌、幼年期非霍奇金淋巴瘤、結(jié)腸直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、食道 癌、尤文氏(Ewing，s)腫瘤家族、眼癌、膽嚢癌、胃腸道類癌腫瘤、胃 腸道基質(zhì)腫瘤、妊娠性滋養(yǎng)層細(xì)胞病、霍奇金氏病、卡波濟(jì)肉瘤、腎 癌、喉和下咽癌、急性淋巴細(xì)胞性白血病、急性骨髓性白血病、兒童 白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性骨髓性白血病、肝癌、肺類癌瘤、非霍奇金淋巴瘤、男性乳腺癌、惡性間皮瘤、多發(fā)性骨髓瘤、骨 髓發(fā)育異常綜合征、鼻腔和鼻旁癌、鼻咽癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、口腔和 口咽癌、骨肉瘤、胰腺癌、陰莖癌、垂體瘤、前列腺癌、視網(wǎng)膜母細(xì) 胞瘤、橫紋肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤(成人軟組織癌)、黑色素皮膚癌、 非黑色素皮膚癌、胃癌、睪丸癌、胸腺癌、甲狀腺癌、子宮肉瘤、陰 道癌、外陰癌和瓦爾登斯特倫巨球蛋白血癥。
本發(fā)明提供的方法可以包括與其它療法結(jié)合施用PARP抑制劑。
療的狀態(tài)。例如，對于治療急性骨髓性白血病，PARP抑制劑可以與 放射治療、單克隆抗體治療、化療、骨髓移植、基因治療、免疫治療 或其組合結(jié)合使用。 Her-2相關(guān)癌癥
在一個方面中，本發(fā)明提供通過施用有效量的PARP抑制劑治療 Her-2相關(guān)癌癥的方法。Her-2疾病是乳腺癌的類型。以侵略性的生長 和較差的預(yù)后為特征，它可以由腫瘤細(xì)胞中存在過量數(shù)目的稱為 HER2(人表皮生長因子受體-2)的基因引起。可以與這里公開的PARP 抑制劑聯(lián)合使用的療法包括，但不限于Her-2抗體(例如赫賽汀)、抗 激素類(例如，選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM)它莫西芬)、化療和放 射治療、芳香酶抑制劑(例如，阿那曲唑、來曲唑和依西美坦)和抗雌 激素類(例如，氟維司群(Faslodex))。
乳腺癌
在一個方面中，本發(fā)明提供治療乳腺癌的方法，包括，但不限于 乳腺導(dǎo)管組織中的導(dǎo)管癌。
原位小葉癌和原位導(dǎo)管癌是分別在小葉和導(dǎo)管中發(fā)生，但可能不 擴(kuò)散到環(huán)繞乳腺的脂肪組織或身體的其它區(qū)域的乳腺癌。浸潤性(或 擴(kuò)散性)小葉和導(dǎo)管癌是分別在小葉和導(dǎo)管中發(fā)生并擴(kuò)散到乳腺的脂 肪組織和/或身體的其它部分的癌癥。可以從本發(fā)明的方法提供的治療 中獲得益處的其它癌癥是髓樣癌、膠樣癌、小管癌和炎性乳腺癌。
在一些實施方式中，本發(fā)明提供所謂的"三陰性"乳腺癌的治療。有幾種通過典型生物標(biāo)志識別的乳腺癌亞類，如雌激素受體(ER)和/ 或黃體酮受體(PR)陽性肺瘤、HER2-擴(kuò)增腫瘤和ER/PR/HER2-陰性腫 瘤。這三種亞型已經(jīng)通過多種乳腺癌中的基因表達(dá)分布型可再現(xiàn)地識 別，并表現(xiàn)出基底細(xì)胞樣(basal-like)亞型表達(dá)分布和較差的預(yù)后。三 陰性乳腺癌的特征在于ER/PR/HER2-陰性肺瘤。 卵巢癌
在另一方面中，本發(fā)明提供治療卵巢癌的方法，包括，但不限于 上皮性卯巢肺瘤、卵巢中的腺癌和已經(jīng)從卵巢轉(zhuǎn)移到腹腔中的腺癌。 可以與本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)合使用的卵巢癌的治療包括，但不限 于手術(shù)、免疫治療、化療、激素治療、放射治療或其組合。 一些可能 的手術(shù)方法包括肺瘤減積術(shù)(debulking),及單側(cè)或雙側(cè)卵巢切除術(shù)和/ 或單側(cè)或雙側(cè)輸卵管切除術(shù)。
可以在聯(lián)合療法中使用的抗癌藥物包括環(huán)磷酰胺、依托泊苷、六 曱蜜胺和異環(huán)磷酰胺。采用藥物它莫西芬的激素治療可以用于縮減卵 巢肺瘤。放射治療可以是外照射療法和/或近距放射療法。
子宮頸癌
在另一方面中，本發(fā)明提供治療子宮頸癌的方法，包括，但不限 于子宮頸上皮中的腺癌。這一癌癥存在兩個主要的類型鱗狀細(xì)胞癌 和腺癌。某些子宮頸癌同時具有這兩者的特征并被稱為腺鱗癌或混合癌。
前列腺癌
在一個另外的方面中，本發(fā)明提供治療前列腺癌的方法，包括， 但不限于腺癌或已轉(zhuǎn)移到骨骼的腺癌。前列腺癌在男性的環(huán)繞尿道第 一部分的前列腺器官中發(fā)生。
在另一方面中，本發(fā)明提供治療胰腺癌的方法，包括，但不限于 胰腺導(dǎo)管組織中的上皮樣癌和胰腺導(dǎo)管中的腺癌。
可以與本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)合使用的治療包括，但不限于手 術(shù)、免疫治療、放射治療和化療?？赡艿氖中g(shù)治療選擇包括胰末端切除或胰全切除和胰十二指腸切除術(shù)(惠普爾手術(shù))。放射治療可以是胰 腺癌患者的選擇，例如，通過體外的儀器使射線聚焦于腫瘤上的外照 射放射。另一種選擇是在手術(shù)過程中采用的術(shù)中電子束照射。 膀胱癌在另一方面中，本發(fā)明提供治療膀胱癌的方法，包括，但不限于 膀胱中的移行細(xì)胞癌。膀胱癌是尿道上皮癌(移行細(xì)胞癌)或襯于膀胱 內(nèi)的尿道上皮細(xì)胞中的腫瘤。膀胱癌的其它情況有鱗狀上皮細(xì)胞癌、 腺癌和小細(xì)胞癌。尿道上皮癌的幾種亞型取決于它們是否是擴(kuò)散性的 和它們是乳頭狀的還是扁平的。非擴(kuò)散性的腫瘤是在尿道上皮(膀胱 的最內(nèi)層)中，而擴(kuò)散性的腫瘤從尿道上皮擴(kuò)散到膀胱的主肌肉壁的 更深層中。擴(kuò)散性的乳頭狀尿道上皮癌是分叉到膀胱的中空中心中的 細(xì)長手指樣突起，且還向外生長到膀胱壁中。非擴(kuò)散性的乳頭狀尿道 上皮腫瘤朝向膀胱的中心生長。盡管非擴(kuò)散性的扁平尿道上皮腫瘤 (也稱作原位扁平癌)限制于最靠近膀胱的內(nèi)部中空部分的細(xì)胞層，但 擴(kuò)散性的扁平尿道上皮癌侵入膀胱的更深層，特別是肌肉層?？梢耘c本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)合用于治療膀胱癌的療法包括手 術(shù)、放射治療、免疫治療、化療或其組合。 一些手術(shù)選擇是經(jīng)尿道切 除術(shù)、膀胱切除術(shù)或根治性膀胱切除術(shù)。膀胱癌的放射治療可以包括 外照射和近距放射療法。免疫療法是可以用于治療膀胱癌患者的另 一種方法。 一種方法是 卡介苗(BCG),其中有時用于結(jié)核病疫苗的細(xì)菌通過導(dǎo)管直接給予膀 胱。身體發(fā)動對細(xì)胞的免疫應(yīng)答，從而攻擊和殺死癌細(xì)胞。免疫治療 的另一方法是施用調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的干擾素類、糖蛋白類。干擾素cc經(jīng) 常用于治療膀胱癌?？梢杂糜诼?lián)合治療膀胱癌的抗癌藥物包括塞替哌、氨曱蝶呤、長 春花堿、阿霉素、環(huán)磷酰胺、紫杉醇、卡鉑、順鉑、異環(huán)磷酰胺、吉 西他濱或其組合。急性骨髓性白血病在另 一 方面中，本發(fā)明提供治療急性骨髓性白血病(AML)的方法，優(yōu)選為外周血中的急性早幼粒細(xì)胞白血病。AML在骨髓中開始， 但可以擴(kuò)散到身體的其它部分，包括淋巴結(jié)、肝臟、脾臟、中樞神經(jīng) 系統(tǒng)和睪丸。AML的特征是可以持續(xù)增殖和聚集的未成熟骨髓細(xì)胞， 通常是粒細(xì)胞或單核細(xì)胞。AML可以通過與本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)用的其它療法治療。 這些療法包括，但不限于免疫治療、放射治療、化療、骨髓或外周血 干細(xì)胞移植或其組合。放射治療包括外照射且可能具有副作用?？梢?用于治療AML的化療中的抗癌藥物包括阿糖胞苷、蒽環(huán)類抗生素、 蒽二酮、脫甲氧柔紅霉素、柔紅霉素、伊達(dá)比星、米托蒽醌、硫鳥嘌 呤、長春新堿、潑尼松、依托泊苷或其組合。單克隆抗體治療可以用于治療AML患者。為了提供殺死身體中 的白血病細(xì)胞的手段，小分子或放射性化學(xué)物質(zhì)可以在施用于患者之 前連接到這些抗體上。結(jié)合AML細(xì)胞上的CD33的單克隆抗體，吉 姆單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin ),可以用于治療不能耐受 現(xiàn)有的化療方案的AML患者。骨髓或外周血干細(xì)胞移植可以用于治 療AML患者。 一些可能的移植方法是同種異體或自體移植。可以通過本發(fā)明提供的方法治療的白血病的其它類型包括，但不 限于急性淋巴細(xì)胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白 血病、慢性骨髓性白血病、毛細(xì)胞白血病、脊髓發(fā)育不良和骨髓增生 4生疾病。肺癌在另一方面中，本發(fā)明提供治療肺癌的方法。肺癌的常見類型是 非小細(xì)胞肺癌(NSCLC),其分成鱗狀細(xì)胞癌、腺癌和大細(xì)胞未分化癌。 與本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)用的肺癌的治療選擇包括手術(shù)、免疫治療、 放射治療、化療、光動力學(xué)治療或其組合。用于治療肺癌的一些可能 的手術(shù)選擇是分段或楔形切除術(shù)、肺葉切除術(shù)或肺切除術(shù)。放射治療 可以是外照射療法或近距放射療法?？捎糜谥委煼伟┑幕熤械囊恍┛拱┧幬锇樸K、卡鉑、紫杉 醇、多西他賽、吉西他濱、長春瑞濱、依立替康、依托泊苷、長春花堿、埃羅替尼、吉非替尼、異環(huán)磷酰胺、氨曱蝶呤或其組合。光動力 學(xué)治療(PDT)可以用于治療肺癌患者。 皮膚癌在另一方面中，本發(fā)明提供治療皮膚癌的方法。有幾種開始于皮 膚的癌癥類型。最常見的類型是基底細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌，其為非黑 素瘤皮膚癌。光線性角化病為有時發(fā)展成鱗狀細(xì)胞癌的皮膚狀態(tài)。非 黑素瘤皮膚癌很少擴(kuò)散到身體的其它部分。黑色素瘤(皮膚癌中最少 見的形式)更可能侵入附近組織并擴(kuò)散到身體的其它部分。可以與本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)用的不同類型的治療包括，但不 限于手術(shù)、放射治療、化療和光動力學(xué)治療。治療皮膚癌的一些可能 的手術(shù)選擇是莫氏顯微手術(shù)、簡單切除、電干燥法和刮除術(shù)、冷凍手 術(shù)、激光手術(shù)。放射治療可以是外照射療法或近距放射療法。其它類 型的治療包括生物治療或免疫治療、化學(xué)免疫治療、采用氟尿嘧啶的 局部化療和光動力學(xué)治療。眼癌，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤在另一方面中，本發(fā)明提供治療眼視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的方法。視網(wǎng) 膜母細(xì)胞瘤是視網(wǎng)膜的惡性腫瘤。該肺瘤可以僅在 一 只眼睛中或在兩 只眼睛中發(fā)生?？梢耘c本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)用的治療選擇包括摘 出術(shù)(摘除眼睛的手術(shù))、放射治療、冷凍治療、光凝固術(shù)、免疫治療、 溫?zé)嶂委熀突煛?；故射治療可以是外照射療法或近距放射療法。眼癌，眼?nèi)黑色素瘤在另一方面中，本發(fā)明提供治療眼內(nèi)(眼)黑色素瘤的方法。眼內(nèi) 黑色素瘤是在稱為葡萄膜的眼部分中發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞的疾病。葡萄膜包括 虹膜、睫狀體和脈絡(luò)膜。眼內(nèi)黑色素瘤最經(jīng)常在中年人群中發(fā)生?？?以與本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)用的治療包括手術(shù)、免疫治療、放射治 療和激光治療。手術(shù)是最常見的眼內(nèi)黑色素瘤治療方法。 一些可能的 手術(shù)選擇是虹膜切除術(shù)、虹膜小梁切除術(shù)、虹膜睫狀體切除術(shù)、脈絡(luò) 膜切除術(shù)、摘出術(shù)和眶內(nèi)容摘除術(shù)。放射治療可以是外照射療法或近 距放射療法。激光治療可以是用于毀滅肺瘤的強(qiáng)有力的光束、溫?zé)岑煼ɑ蚬饽绦g(shù)。 子宮內(nèi)膜癌在另一方面中，本發(fā)明提供治療子宮內(nèi)膜癌的方法。子宮內(nèi)膜癌 是開始于子宮內(nèi)膜(子宮的內(nèi)村)中的癌癥。子宮癌和子宮內(nèi)膜癌的一 些實例包括，但不限于腺癌、腺棘皮瘤、腺鱗狀細(xì)胞癌、乳頭狀漿液 性腺癌、透明細(xì)胞腺癌、子宮肉瘤、基質(zhì)瘤、惡性混合中胚葉腫瘤和 平滑肌肉瘤。肝癌在另一方面中，本發(fā)明提供治療原發(fā)肝癌(在肝臟中開始的癌癥)的方法。原發(fā)肝癌在成人和兒童中都可發(fā)生?？梢耘c本發(fā)明的PARP 抑制劑聯(lián)用的不同類型的治療包括手術(shù)、免疫治療、放射治療、化療 和經(jīng)皮乙醇注射?？梢允褂玫氖中g(shù)類型是冷凍手術(shù)、部分肝切除術(shù)、 全肝切除術(shù)和射頻消蝕(radiofrequency ablation)。放射治療可以是外照 射療法、近距放射療法、放射致敏劑或放射標(biāo)記抗體。其它類型的治 療包括高溫治療和免疫治療。 腎癌在另一方面中，本發(fā)明提供治療腎癌的方法。腎癌(也稱作腎細(xì) 胞癌或腎腺癌)是在腎臟的小管內(nèi)襯中發(fā)現(xiàn)惡性細(xì)胞的疾病?？梢耘c 本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)用的治療包括手術(shù)、放射治療、化療和免疫 治療。 一些可能的治療腎癌的手術(shù)選擇是腎部分切除術(shù)、簡單腎切除 術(shù)和根治性腎切除術(shù)。放射治療可以是外照射療法或近距放射療法。 干細(xì)胞移植可用于治療腎癌。曱狀腺癌在另一方面中，本發(fā)明提供治療曱狀腺癌的方法。曱狀腺癌是在 甲狀腺組織中發(fā)現(xiàn)癌(惡性)細(xì)胞的疾病。甲狀腺癌的四種主要類型是 乳頭狀甲狀腺癌、濾泡性甲狀腺癌、曱狀腺髓樣癌和甲狀腺間變癌。 曱狀腺癌可以通過手術(shù)、免疫治療、放射治療、激素治療和化療進(jìn)行 治療?？梢杂糜谂c本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)用的 一 些可能的手術(shù)選擇 包括，但不限于葉切除術(shù)、甲狀腺近全切除術(shù)、甲狀腺全切除術(shù)和淋巴結(jié)清掃術(shù)(lymph node dissection)。放射治療可以是外照射療法或可 能需要攝入含有放射性碘的液體。激素治療使用激素阻止癌細(xì)胞生 長。在治療甲狀腺癌時，激素可以用于阻止身體產(chǎn)生可能使癌細(xì)胞生 長的其它激素。AIDS相關(guān)癌癥AIDS-相關(guān)淋巴瘤在另一方面中，本發(fā)明提供治療AIDS-相關(guān)淋巴瘤的方法。AIDS-相關(guān)淋巴瘤是在患有獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的患者的淋巴系 統(tǒng)中形成惡性細(xì)胞的疾病。AIDS是由攻擊和削弱人體的免疫系統(tǒng)的 人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的。然后免疫系統(tǒng)不能夠迎擊感染和侵 襲人體的疾病?；加蠬IV疾病的人具有發(fā)生感染、淋巴瘤和其它類型 癌癥的較大風(fēng)險。淋巴瘤是影響淋巴系統(tǒng)的白細(xì)胞的癌癥。淋巴瘤分 成兩個總的類型霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤?；羝娼鹆馨土龊?非霍奇金淋巴瘤都可以在AIDS患者中發(fā)生，但非霍奇金淋巴瘤更常 見。當(dāng)患有AIDS的人具有非霍奇金淋巴瘤時，這稱為AIDS-相關(guān)淋 巴瘤。非霍奇金淋巴瘤可以是進(jìn)展緩慢的(生長遲緩的)或侵襲性的(生 長快速的)。AIDS-相關(guān)淋巴瘤通常是侵襲性的。AIDS-相關(guān)淋巴瘤的 三種主要類型是彌漫性大B-細(xì)胞淋巴瘤、B-細(xì)胞免疫母細(xì)胞淋巴瘤和 小無裂細(xì)胞淋巴瘤。高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(HAART)用于減緩HIV的進(jìn)展。也使用 防止和治療(可能是嚴(yán)重的)感染的藥品。AIDS-相關(guān)淋巴瘤可以通過 化療、免疫治療、放射治療和伴隨干細(xì)胞移植的高劑量化療進(jìn)行治療。 放射治療可以是外照射療法或近距放射療法。AIDS-相關(guān)淋巴瘤可以 通過單克隆抗體療法進(jìn)行治療?？ú?jì)肉瘤在一個方面中，本發(fā)明提供治療卡波濟(jì)肉瘤的方法?？ú?jì)肉瘤 是在皮膚或內(nèi)襯于口 、鼻和肛門的粘膜下的組織中發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞的疾 病。卡波濟(jì)肉瘤可以在服用免疫抑制劑的人中發(fā)生。在患有獲得性免 疫缺陷綜合征(AIDS)的患者中的卡波濟(jì)肉瘤被稱為流行性卡波濟(jì)肉瘤。卡波濟(jì)肉瘤可以用手術(shù)、化療、放射治療和免疫療法治療。外照 射療法是卡波濟(jì)肉瘤的常用治療方法?？梢杂糜谂c本發(fā)明的PARP抑 制劑聯(lián)用的治療包括，但不限于局部切除術(shù)、電干燥法和刮除術(shù)、及 冷凍療法。病毒i秀導(dǎo)的癌癥在另一方面中，本發(fā)明提供治療病毒誘導(dǎo)的癌癥的方法。主要的病毒-惡性腫瘤系統(tǒng)包括乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)和 肝細(xì)胞癌；1型人嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV-1)和成體T-細(xì)胞白血病/ 淋巴瘤；和人乳頭狀瘤病毒(HPV)和子宮頸癌。 病毒誘導(dǎo)的肝細(xì)胞癌HBV和HCV兩種病毒與肝細(xì)胞癌或肝癌都通過引起細(xì)胞死亡和 隨后的再生經(jīng)由肝臟中的慢性復(fù)制而發(fā)揮作用?？梢杂糜谂c本發(fā)明的 PARP抑制劑聯(lián)用的治療包括，但不限于手術(shù)、免疫療法、放射療法、 化療和經(jīng)皮乙醇注射?？梢允褂玫氖中g(shù)的類型是冷凍手術(shù)、部分肝切 除術(shù)、全肝切除術(shù)和射頻消蝕。放射治療可以是外照射療法、近距放 射療法、放射致敏劑或放射標(biāo)記抗體。其它類型的治療包括高溫治療 和免疫治療。病毒誘導(dǎo)的成體T-細(xì)胞白血病/淋巴瘤成體T-細(xì)胞白血病是血液和骨髓的癌癥?？梢杂糜谂c本發(fā)明的 PARP抑制劑聯(lián)用的成體T-細(xì)胞白血病/淋巴瘤的治療包括，但不限于 放射治療、免疫治療和化療。放射治療可以是外照射療法或近距放射 療法。治療成體T-細(xì)胞白血病/淋巴瘤的其它方法包括免疫治療和具 有干細(xì)胞移植的高劑量化療。病毒誘導(dǎo)的子宮頸癌子宮頸被人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染是子宮頸癌的原因。可以用 于與本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)用的治療包括，但不限于手術(shù)、免疫治 療、放射治療和化療?？梢允褂玫氖中g(shù)的類型是宮頸錐形切除術(shù)、全 子宮切除術(shù)、雙側(cè)輸卵管卵巢切除術(shù)、子宮根治術(shù)、盆腔廓清術(shù)、冷 凍手術(shù)、；敫光手術(shù)和環(huán)形電夕卜牙+切除術(shù)(loop electrosurgical excisionprocedure)。放射治療可以是外照射療法或近距放射療法。 CNS癌癥腦和脊髓腫瘤是在作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)主要部分的顱骨或骨 質(zhì)脊柱內(nèi)部發(fā)現(xiàn)的組織的非正常生長。良性腫瘤是非癌性的，而惡性 腫瘤是癌性的。源于腦或脊髓的腫瘤被稱為原發(fā)腫瘤。原發(fā)腫瘤可以 由特定的遺傳疾病(例如，神經(jīng)纖維瘤病、結(jié)節(jié)性硬化癥)引起或由于 暴露于輻射或致癌化學(xué)物質(zhì)而引起。成人中的原發(fā)腦肺瘤來自于被稱為星形纟田月包的腦纟田胞，星形細(xì)胞 構(gòu)成血腦屏障并有助于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的營養(yǎng)。這些肺瘤被稱為神經(jīng)膠 質(zhì)瘤(星形細(xì)胞瘤、間變星形細(xì)胞瘤或多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤)。這些腫 瘤中的一些包括，但不限于少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、室管膜瘤、腦脊膜 瘤、淋巴瘤、神經(jīng)鞘瘤和成神經(jīng)管細(xì)胞瘤。CNS的神經(jīng)上皮胂瘤星形細(xì)胞肺瘤，如星形細(xì)胞瘤；間變(惡性)星形細(xì)胞瘤，如大腦 半球的、間腦的、眼的、腦干的、小腦的；多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤；毛 細(xì)月包性星形細(xì)月包瘤，如大腦半J求的、間腦的、目艮的、腦干的、小腦的； 室管膜下的巨細(xì)胞星形細(xì)胞瘤；和多形性黃色瘤型星形細(xì)胞瘤。少突 神經(jīng)膠質(zhì)腫瘤，如少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤和間變(惡性)少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì) 胞瘤。室管膜細(xì)胞腫瘤，如室管膜瘤、間變性室管膜瘤、粘液乳頭形 室管膜瘤和亞室管膜瘤(subependymoma)?；旌仙窠?jīng)膠質(zhì)瘤，如混 合性少突星形細(xì)胞瘤、間變(惡性)少突星形細(xì)胞瘤和其它的(例如，室 管膜星形細(xì)胞瘤)。起源不確定的神經(jīng)上皮腫瘤，如極性成膠質(zhì)細(xì)胞 瘤、星形母細(xì)胞瘤和大腦膠質(zhì)瘤病。脈絡(luò)叢的腫瘤，如脈絡(luò)叢乳頭狀 瘤和脈絡(luò)叢癌(間變性脈絡(luò)叢乳頭狀瘤)。神經(jīng)細(xì)胞和混合神經(jīng)細(xì)胞神 經(jīng)膠質(zhì)肺瘤，如神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤；小腦發(fā)育不良性神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤 (Lhermitte-Duclos);神經(jīng)節(jié)神經(jīng)力交質(zhì)瘤；間變(惡性)神經(jīng)節(jié)神經(jīng)力交質(zhì) 瘤；嬰兒型促纖維增生型神經(jīng)節(jié)神經(jīng)膠質(zhì)瘤，如嬰兒型促纖維增生型 星形細(xì)胞瘤；中樞神經(jīng)細(xì)胞瘤；胚胎發(fā)育不良性神經(jīng)上皮腫瘤；嗅神 經(jīng)母細(xì)胞瘤(成感覺神經(jīng)細(xì)胞瘤)。松果體實質(zhì)(Pineal Parenchyma)腫瘤，如松果體瘤、成松果體細(xì)胞瘤和混合松果體瘤/成松果體細(xì)胞瘤。 帶有成神經(jīng)細(xì)胞或成神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞因素的腫瘤(胚胎性腫瘤)，如髓上皮瘤；具有多能分化的原始神經(jīng)外胚層腫瘤，如成神經(jīng)管細(xì)胞瘤；大 腦原始神經(jīng)外胚層肺瘤；神經(jīng)母細(xì)胞瘤；視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤和成室管膜 細(xì)月包瘤。其它CNS腫瘤鞍區(qū)(SellarRegion)的腫瘤，如垂體腺瘤、垂體腺癌和顱咽管瘤。 造血系統(tǒng)肺瘤，如原發(fā)惡性淋巴瘤、漿細(xì)胞瘤和粒細(xì)胞肉瘤。生殖細(xì) 胞肺瘤，如生殖細(xì)胞瘤、胚胎性癌、卵黃嚢瘤(內(nèi)胚層竇瘤)、絨毛膜 癌、畸胎瘤和混合生殖細(xì)胞肺瘤。腦脊膜的腫瘤，如腦脊膜瘤、非典 型腦脊膜瘤和間變(惡性)腦脊膜瘤。腦脊膜的非腦膜上皮腫瘤，如良 性間充質(zhì)胂瘤；惡性間充質(zhì)胂瘤；原發(fā)黑色素細(xì)胞性病變；造血系統(tǒng) 胂瘤；和組織發(fā)生不確定的胂瘤，如成血管細(xì)胞瘤(毛細(xì)血管成血管 細(xì)胞瘤)。腦神經(jīng)和脊神經(jīng)的腫瘤，如許旺氏細(xì)胞瘤(神經(jīng)鞘瘤 (neurinoma),神經(jīng)鞘瘤(neurilemoma));神經(jīng)纖維瘤；惡性外周神經(jīng)鞘 胂瘤(惡性神經(jīng)鞘瘤)，如上皮樣的、不同的間質(zhì)或上皮分化的和黑變 病的腫瘤。區(qū)域性腫瘤的局部擴(kuò)展，如副神經(jīng)節(jié)瘤(化學(xué)感受器瘤)、 脊索瘤、chodroma、軟骨肉瘤和癌。轉(zhuǎn)移性腫瘤，未分類腫瘤及嚢腫 和腫瘤樣病變，如Rathke裂嚢腫、表皮樣瘤、皮樣嚢腫、第三腦室 的膠樣嚢腫、腸原嚢腫、神經(jīng)膠質(zhì)嚢腫、粒細(xì)胞腫瘤(迷芽瘤、垂體 細(xì)胞瘤)、下丘腦神經(jīng)細(xì)胞錯構(gòu)瘤、鼻部神經(jīng)膠質(zhì)異位(nasal glial herterotopia)和漿細(xì)胞肉芽腫。可用的化學(xué)治療劑包括，但不限于烷化劑，如環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷 酰胺、美法侖、苯丁酸氮芥、BCNU、 CCNU、氮烯唑胺(Decarbazine)、 甲爺肼、白消安和瘞替派；抗代謝物，如曱氨蝶呤(Methotraxate)、 5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、吉西他濱(Gemzar⑧)、6-巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤、 氟達(dá)拉濱和克拉屈濱；蒽環(huán)類，如柔紅霉素、阿霉素、伊達(dá)比星、表 柔比星和米托蒽醌；抗生素類，如博來霉素；喜樹堿類，如依立替康 和托泊替康；紫杉烷類，如紫杉醇和多西他賽；及鉑類，如順鉑、卡柏和奧沙利鉬。PNS癌癥外周神經(jīng)系統(tǒng)由從腦和脊髓分枝的神經(jīng)組成。這些神經(jīng)形成CNS 和身體部分之間的通訊網(wǎng)絡(luò)。外周神經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)一 步細(xì)分成軀體神經(jīng)系統(tǒng)和植物性神經(jīng)系統(tǒng)。軀體神經(jīng)系統(tǒng)由到達(dá)皮膚和肌肉并參與意識活 動的神經(jīng)組成。植物性神經(jīng)系統(tǒng)由將CNS連接到臟器(如心臟、胃和 腸)的神經(jīng)組成。它介導(dǎo)非意識活動。聽神經(jīng)瘤是從平衡神經(jīng)(也稱為第八腦神經(jīng)或前庭蝸神經(jīng))產(chǎn)生的 良性纖維性生長。惡性外周神經(jīng)鞘瘤(MPNST)是良性軟組織瘤(如神 經(jīng)纖維瘤和神經(jīng)鞘瘤)的惡性對應(yīng)體。它最常見于深部軟組織中，通 常在神經(jīng)干的極近處。最常見的位置包括坐骨神經(jīng)、臂叢和骶叢(sarcal plexus)。MPNST可以分成具有上皮樣的、間充質(zhì)的或腺性的特征的三個 主要類別。MPNST中的一些包括，但不限于帶軟骨分化的皮下惡性 上皮樣神經(jīng)鞘瘤、腺性的惡性神經(jīng)鞘瘤、帶神經(jīng)束膜分化的惡性外周 神經(jīng)鞘瘤、帶桿狀特征的皮下上皮樣惡性神經(jīng)鞘瘤、表皮的上皮樣 MPNST、蠑螈瘤(帶成橫紋肌細(xì)胞分化的MPNST)、帶成橫紋肌細(xì)胞 分化的神經(jīng)鞘瘤。稀有MPNST病例包含多種肉瘤性組織類型，特別 是骨肉瘤、軟骨肉瘤和血管肉瘤。這些腫瘤有時不能與軟組織的惡性 間質(zhì)瘤區(qū)分開。其它類型的PNS癌癥包括，但不限于惡性纖維性細(xì)胞瘤、惡性 纖維性組織細(xì)胞瘤、惡性腦脊膜瘤、惡性間皮瘤和惡性混合苗勒氏肺瘤。口腔和口咽癌癥口腔癌癥包括，4旦不限于下咽癌、喉癌、鼻咽癌和口咽癌。 胃癌有三種主要類型的胃癌淋巴瘤、胃基質(zhì)瘤和類癌瘤。淋巴瘤是 有時在胃壁中發(fā)現(xiàn)的免疫系統(tǒng)組織的癌癥。胃基質(zhì)瘤從胃壁的組織發(fā) 生。類癌瘤是胃的激素產(chǎn)生細(xì)胞的腫瘤。睪丸癌睪丸癌是通常在年輕男性的一個或兩個睪丸中發(fā)生的癌癥。睪丸 的癌癥在被稱為生殖細(xì)胞的特定細(xì)胞中發(fā)生。在男性中發(fā)生的生殖細(xì)胞腫瘤(GCT)的兩個主要類型是精原細(xì)胞瘤(60%)和非精原細(xì)胞瘤 (40%)。腫瘤也可以在睪丸的支持和激素產(chǎn)生組織或基質(zhì)中發(fā)生。這 類腫瘤被稱為性腺基質(zhì)細(xì)胞瘤。兩個主要類型是睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤和睪 丸支持細(xì)胞瘤。繼發(fā)睪丸瘤是在另一器官中開始，然后擴(kuò)散到睪丸的 肺瘤。淋巴瘤是繼發(fā)睪丸瘤。 胸腺癌胸腺是位于胸腔上/前部中的小器官，從喉基部延伸到心臟前部。 胸腺包含兩種主要類型的細(xì)胞，胸腺上皮細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。胸腺上皮 細(xì)胞可以是胸腺瘤和胸腺癌的起源。淋巴細(xì)胞(不論是在胸腺中還是 在淋巴結(jié)中)可以變成惡性的并發(fā)展成被稱為霍奇金氏病和非霍奇金 淋巴瘤的癌癥。胸腺癌包括嗜銀(Kulchitsky)細(xì)胞或神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞， 其通常釋放特定的激素。這些細(xì)胞可以引起被稱為類癌或類癌瘤的癌 癥?？梢耘c本發(fā)明的PARP抑制劑聯(lián)用的治療包括，但不限于手術(shù)、 免疫治法、化療、放射治法、化療和放射治療的組合或生物學(xué)治療。 已經(jīng)用于胸腺瘤和胸腺癌治療的抗癌藥物為阿霉素(亞德里亞霉素)、 順鉑、異環(huán)磷酰胺和皮質(zhì)激素類(潑尼松)。營養(yǎng)和代謝障礙營養(yǎng)和代謝障礙的例子包括，但不限于尿崩癥、Fabry病、脂肪 酸代謝障礙、半乳糖血癥、戈謝病、葡萄糖-6-磷酸脫氧酶(G6PD)、 戊二酸尿、赫爾勒-沙利氏綜合征(hurler-scheie)、 Hunter綜合征、低 磷酸鹽血癥、I細(xì)月包、克拉伯病、乳酸性酸中毒、長鏈3羥?；鵆oA 脫氫酶缺失(LCHAD)、溶酶體貯積癥、甘露糖苷貯積癥、槭糖尿病、 Maroteaux-Lamy綜合征、異染性腦白質(zhì)營養(yǎng)不良、線粒體病、Morquio 病、祐多糖貝±積癥、腦神經(jīng)新陳代謝病(neuro-metabolic)、尼曼-皮克 病、有機(jī)酸血癥、嘌呤、苯丙酮酸尿(PKU)、龐佩氏病、假hurler病、丙酮酸脫氫酶缺失、桑德霍夫病、桑菲利波綜合征、席耶氏綜合征、
Sly綜合征、泰-薩克斯病、三甲基胺尿癥(臭魚癥)、尿素循環(huán)狀態(tài)、 維生素D缺乏佝僂病、肌肉代謝病、遺傳性代謝障礙、酸-堿失衡、 酸中毒、堿中毒、尿黑酸尿、a-甘露糖苷貯積癥、淀粉樣變性、貧 血癥、鐵質(zhì)缺乏、抗壞血酸缺乏、維生素缺乏癥、腳氣病、生物素酰 胺酶缺乏癥、缺乏糖蛋白綜合征、肉堿障礙、胱氨酸貯積癥、胱氨酸 尿、法布里病、脂肪酸氧化障礙、巖藻糖苷貯積癥、半乳糖血癥、戈 謝病、吉爾伯特氏綜合征、葡萄糖磷酸脫氧酶缺失、戊二酸血癥、糖 原貯積癥、哈特納普病、血色素沉積癥、含鐵血黃素沉著癥、肝豆?fàn)?核變性、組氨酸血癥、同型胱氨酸尿癥、高膽紅素血癥、高鈣血癥、 高胰島素血癥、高鉀血癥、高脂血癥、高草酸尿、維生素A過多癥、 低4丐血癥、低血糖癥、低鉀血癥、低鈉血癥、低磷酸酯酶癥 (hypophosphotasia)、胰島素抵抗、碘缺乏、鐵過載、黃疸，慢性先天 性的、利氏病、萊施-奈恩綜合征、亮氨酸代謝障礙、溶酶體貯積癥、 鎂缺乏、楓糖尿癥、MELAS綜合征、Menkes巻發(fā)綜合征、代謝綜合 征X、粘脂貯積病、粘多糖貯積癥(mucopolysacchabridosis)、尼曼畫皮 克病、肥胖癥、鳥氨酸氨曱?；D(zhuǎn)移酶缺乏病、骨軟化癥、糙皮病、 過氧物酶體病、p卜啉癥、紅細(xì)月包生成的、斑巖(porphyries)、 ^暇戈i射病、 雷夫敘姆病、急性腦病綜合征、佝僂病、桑德霍夫病、丹吉爾病、泰 -薩克斯病、四氫生物蝶呤缺乏、三曱基胺尿癥(臭魚癥)、酪氨酸血癥、 尿素循環(huán)障礙、水-電解質(zhì)失衡、韋尼克腦病、維生素A缺乏、維生 素B12缺乏、維生素B缺乏、沃爾曼病和澤韋格綜合征。
在一些優(yōu)選的實施方式中，代謝疾病包括糖尿病和肥胖癥。
使用方法
適用于本發(fā)明中的化合物是抑制脂肪酸合成的化合物。優(yōu)選地該 抑制劑是PARP抑制劑。在用有效量的PARP抑制劑治療之前和/或之 后對脂肪酸水平的分析具有各種治療和診斷應(yīng)用。臨床應(yīng)用包括，例 如疾病的檢測、區(qū)分疾病狀態(tài)以為診斷提供信息、療法的選擇(如用 有效量的PARP抑制劑進(jìn)行治療)、治療反應(yīng)的預(yù)測、疾病分期、病程的鑒定、PARP抑制劑療效的預(yù)測、患者軌跡的監(jiān)測(例如，發(fā)病之 前)、PARP抑制劑副反應(yīng)的預(yù)測、治療相關(guān)效力和毒性的監(jiān)測及復(fù)發(fā) 的^r測。對象的脂肪酸水平的鑒定也可以用于為PARP抑制劑治療的 對象選擇療法和個性化給藥方案。
對象的脂肪酸水平的鑒定和隨后有效量PARP抑制劑的治療可用 于使得能夠或有助于治療藥劑的藥物開發(fā)過程。脂肪酸水平的鑒定可 以用于選擇加入到PARP抑制劑的臨床試驗中的對象。脂肪酸水平的 進(jìn)一步鑒定可以指明進(jìn)行臨床試驗的治療的對象的疾病狀態(tài)，并顯示 PARP抑制劑治療過程中狀態(tài)的變化。脂肪酸水平的鑒定可以表明 PARP抑制劑治療的效力，并可用于按照其對于各種療法的反應(yīng)對對 象分類。脂肪酸水平的鑒定也可以用于為PARP抑制劑治療的對象選 擇個性化給藥方案。
在一些實施方式中，患者、衛(wèi)生保健提供者(如醫(yī)生和護(hù)士)或衛(wèi) 生保健管理者基于來自對象的樣品中的脂肪酸水平選擇有效量的 PARP抑制劑對對象的治療。該方法可用于評價隨時間的治療效力。 例如，生物樣品可以隨著患者用PARP抑制劑進(jìn)行治療在一段時間內(nèi) 獲得。不同樣品中的脂肪酸水平可以彼此比較以確定療效。另外，這 里描述的方法可以用于比較不同疾病療法(包括用PARP抑制劑進(jìn)行 治療)的效力和/或不同群體(例如，種族、家族歷史等)對一種或多種 治療的反應(yīng)。
制劑和藥物組合物
本發(fā)明提供的方法可以包括與其它療法聯(lián)合施用有效量的如這 里提供的抑制劑?？梢耘c本發(fā)明的組合物共同施用的療法的選擇將部 分依賴于進(jìn)行治療的狀態(tài)。例如，對于治療急性骨髓性白血病，本發(fā) 明一些實施方式的化合物可用于與放射治療、單克隆抗體治療、化療、 骨髓移植或其組合聯(lián)用。
放射致敏劑可以與治療有效量的PARP抑制劑結(jié)合施用，其中 PARP抑制劑可以促進(jìn)》文射致敏劑加入到輩巴細(xì)月包中或PARP抑制劑可 控制到耙細(xì)胞的治療藥物、營養(yǎng)物和/或氧流。類似地，化學(xué)致^t劑也已知增加癌細(xì)胞對化學(xué)治療化合物的毒性作用的敏感性?？梢耘c
PARP抑制劑結(jié)合使用的示例性化學(xué)藥物包括，但不限于阿霉素、喜 樹堿、氮烯唑胺、卡鉑、順鉑、柔紅霉素、多西他奇、亞德里亞霉素、 干擾素(a、 p、 Y)、白介素2、伊立替康、紫杉醇、鏈脲菌素、替 莫唑胺、托泊替康及其治療有效的類似物和書t生物。另外，可以與 PARP抑制劑結(jié)合使用的其它治療劑包括，但不限于5-氟尿嘧啶、甲 酰四氫葉酸、5，-氨基-5，-脫氧胸苷、氧、卡波金(carbogen)、紅細(xì)胞輸 血、全氟化碳(例如，F(xiàn)luosol-DA)、 2,3-DPG、 BW12C、 4丐通道阻斷劑、 己酮可可堿(pentoxyfylline)、血管生成抑制化合物、肼苯噠。秦和 L隱BSO。
已知放射致敏劑提高癌細(xì)胞對電磁輻射的毒性作用的敏感性。許 多癌癥治療方案目前采用X-射線的電磁輻射活化的放射致敏劑。X-射線活化的放射致敏劑的例子包括，但不限于以下物質(zhì)曱硝唑、米 索硝唑、去曱基醚醇硝唑、哌莫硝唑、依他硝唑、尼莫唑、絲裂霉素 C、 RSU 1069、 SR 4233、 E09、 RB 6145、煙酰胺、5-溴脫氧尿苷(BUdR)、 5-碘脫氧尿苷(IUdR)、溴脫氧胞苷、氟脫氧尿苷(FudR)、羥基脲、順 鈿及其治療有效的類似物和衍生物。
腫瘤的光動力學(xué)治療(PDT)采用可見光作為敏化劑的放射活化 劑。光動力學(xué)放射致敏劑的例子包括，但不限于以下物質(zhì)血卟啉衍 生物、光口卜啉、苯p卜啉衍生物、NPe6、錫初p卜啉SnET2、 pheoborbide、 細(xì)菌葉綠素、酞菁染料、鋅酞菁染料及其治療有效的類似物和衍生物。
這里公開的治療方法可以通過口服給藥、經(jīng)粘膜給藥、口腔給藥、 鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、 舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。
非侵入性給藥包括(l)以軟膏或乳膏的形式局部涂覆到皮膚上； (2)直接局部涂覆到口咽組織上；(3) 口服；(4)作為氣溶膠鼻腔給藥； (5)以栓劑、乳膏或泡沫形式在陰道內(nèi)應(yīng)用抑制劑；(6)直接涂覆到 子宮頸上；(7)通過栓劑、沖洗或其它合適的形式直腸施用；(8)膀 胱沖洗；和(9)對肺施用抑制劑的氣溶膠化制劑。用于本發(fā)明方法的p ARP抑制劑的藥物組合物包括以治療或預(yù)防 有效量包含活性成分的組合物。特定應(yīng)用有效的實際量尤其取決于治 療的狀態(tài)和給藥途徑。有效量的確定在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍 內(nèi)。藥物組合物包含PARP抑制劑、 一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、 稀釋劑或賦形劑和任選的其它治療藥物。該組合物可以配制成持續(xù)或 延遲釋放形式。
在一些實施方式中，PARP抑制劑可以以凝膠、油膏、溶液、浸 漬繃帶、脂質(zhì)體或生物可降解的微膠嚢形式區(qū)域地或局部地施用。用 于局部涂覆的組合物或劑型可以包括溶液、洗劑、油膏、乳膏、凝膠、 栓劑、噴霧劑、氣霧劑、懸浮液、樸粉、浸漬繃帶和敷料、脂質(zhì)體、 生物可降解聚合物和人工皮膚。制備前述組合物的典型的藥物載體包 括藻酸鹽、羧曱基纖維素、甲基纖維素、瓊脂糖、果膠、明膠、膠原、 植物油、礦物油、硬脂酸、硬脂醇、礦脂、聚乙二醇、聚山梨醇酯、 聚乳酸、聚乙二醇酯、聚酸酐、磷脂、聚乙烯吡咯烷酮等等。
組合物可通過注射、局部i也、經(jīng)口地、透皮地、經(jīng)直腸;也或通過 吸入施用。施用治療藥物的口服形式可以包括粉末、片劑、膠嚢、溶 液或乳液。有效量可以以單劑量或相隔適宜的時間間隔(如數(shù)小時)的 一系列劑量施用。藥物組合物可以使用 一種或多種生理可接受的載體 (包括賦形劑和有助于將活性化合物加工成可作為藥物使用的制劑的 輔劑)以常規(guī)方式配制。合適的制劑依賴于選擇的給藥途徑。用于制 備本發(fā)明的藥劑的藥物組合物的合適技術(shù)是本領(lǐng)域中公知的。
在患者之間變化。確定最佳劑型 一般包括使治療效果的水平與本發(fā)明 的治療的任何風(fēng)險或有害的副作用平衡。選擇的劑量水平取決于多種 因素，包括，但不限于特定PARP抑制劑的活性、給藥途徑、給藥時 間、化合物的排泄率、治療的持續(xù)時間、其它組合使用的藥物、化合 物和/或材料、及患者的年齡、性別、體重、狀態(tài)、總體健康和先前的 病史。化合物的量和給藥途徑最終由醫(yī)生決定，雖然一般地說，劑量 將在作用部位達(dá)到獲得希望的效果而不引起實質(zhì)性的有害副作用的局部濃度。
體內(nèi)施用可以以單劑量連續(xù)地或間斷地(例如，按適當(dāng)?shù)拈g隔以分 離的劑量)在整個治療過程中實行。確定最有效的施用手段和劑量的 方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的并隨用于治療的劑型、治療目的、治療 的靶細(xì)胞和治療的對象發(fā)生變化。單次或多次施用可以通過由治療醫(yī) 生選擇劑量水平和模式完成。
實施例
實施例I
目的本研究涉及分析3-硝基-4-碘苯曱酰胺(式III的化合物)對使 用[l，2-。C2]-D-葡萄糖作為唯一葡萄糖源培養(yǎng)的OVCAR-3細(xì)胞和Hela 細(xì)胞的代謝物流的體外效應(yīng)。該分析包括將代謝物流與細(xì)胞生長改變 效應(yīng)相聯(lián)系，分析抗增殖作用的機(jī)理并分析潛在的毒性、選擇性和效 力。目標(biāo)代謝物包括葡萄糖(培養(yǎng)基和粒糖原)、乳酸(培養(yǎng)基)、13(:02(培 養(yǎng)基)、C:14(肉豆蔻酸)、C:16(棕櫚酸)、C:18(硬脂酸)、C:18-l(油酸)、 C:20、 C:22、 C:24 (細(xì)胞沉淀)、脂肪酸的乙酰-CoA合成(細(xì)胞沉淀)、 及RNA核糖和DNA脫氧核糖(細(xì)胞沉淀)。目標(biāo)流包括從培養(yǎng)基攝取 葡萄糖、從葡萄糖產(chǎn)生乳酸(無氧糖酵解)、通過TCA循環(huán)由葡萄糖釋 放I3C02、糖原合成、脂肪酸的從頭合成、延長、去飽和和乙酰-CoA 合成及戊糖循環(huán)一通過氧化和非氧化反應(yīng)的RNA和DNA核糖合成。
材料和方法具有〉99%的純度和每個位置具有>99%的同位素富 集的用于該代謝物分布研究的示蹤劑(穩(wěn)定的同位素[l,2"C2]-D-葡萄 糖)從Cambridge Isotope Laboratories, Inc. (Andover, Massachusetts)購 買。
細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng):OVCAR3和Hela細(xì)胞購自美國典型培養(yǎng)物保 藏中心(ATCC)。細(xì)胞按照從ATCC獲得的說明進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)胞在37 °C、 5%的C02和95%的濕度下孵育并在乂人ATCC收到細(xì)月包后和在用 于該研究之前使用0.25。/o的胰蛋白酶(Gibco/BRL)傳代不超過十次。
750/o鋪滿培養(yǎng)的細(xì)胞在含[l，2少C2]-D-葡萄糖的培養(yǎng)基(100 mg/dl 的總濃度-5mM, 50%同位素富集-即一半未標(biāo)記的葡萄糖， 一半用穩(wěn)定同位素^C示蹤劑標(biāo)記)中孵育。細(xì)胞以每個T75培養(yǎng)瓶106個細(xì)胞 的密度接種且3-硝基-4-碘苯甲酰胺以0.3-3jLiM的濃度加入培養(yǎng)基中。 對照培養(yǎng)物僅用溶劑(vehicle)處理。用于本研究的3-硝基-4-碘苯曱 酰胺的劑量基于表明該藥物在葡萄糖存在或不存在的情況下有效地 控制人細(xì)胞中糖原磷酸化酶活性的體外試驗進(jìn)行選擇(Andersen B等， 2002，腸c/^m 367: 443畫450)。培養(yǎng)基中的葡萄糖和乳酸水平使用 Cobas Mira化學(xué)分析儀(Roche Diagnostics, Pleasanton, CA， USA)測量。
RNA核糖穩(wěn)定同位素研究:RNA核糖在細(xì)胞提取物的Trizol純 化后通過細(xì)胞RNA的酸水解分離?？俁NA量在一式三份的培養(yǎng)物中 通過光譜光度的測定評價。在質(zhì)譜分析之前，核糖使用吡啶中的羥胺 與乙酸酐(Supelco, Bellefonte， PA)衍生化成其醛腈乙酸酯(aldonitrile acetate)形式。離子簇在m厶Z56 (核糖的I-5碳)(化學(xué)離子化，CI)及 m/z"7 (核糖的3-5碳)和(核糖的1-4石友)(電沖擊離子化，EI) 附近監(jiān)測以確定核糖中13C的摩爾富集和位置分布。按照慣例，通過 質(zhì)譜測量的12(%化合物的基本質(zhì)量(與其衍生化劑一起)給定為w0 (Boros LG等，2002, Drug Discov. Today 7: 364-372)。
從RNA回收的用單BC原子在第一碳位置(ml)標(biāo)記的核糖分子用 于測量通過葡萄糖經(jīng)G6PD途徑的直接氧化產(chǎn)生的核糖部分。用13C 在最先的兩個碳位置(w2)標(biāo)記的核糖分子用于測量通過轉(zhuǎn)酮醇酶產(chǎn) 生的部分。在第四和第五碳位置雙標(biāo)記(m2和m4)的核糖分子用于測 量通過丙糖磷酸異構(gòu)酶和轉(zhuǎn)酮醇酶產(chǎn)生的摩爾分?jǐn)?shù)。
乳酸:在用HC1酸化后通過氯乙烯從細(xì)胞培養(yǎng)基(0.2 ml)中提取乳 酸。乳酸衍生化成其丙胺-七氟丁酸酯形式且監(jiān)測m/z32S (乳酸的1-3 碳)(化學(xué)離子化，CI)以檢測ml (通過PC的循環(huán)乳酸)和m2 (通過 Embden-Meyerhof-Parnas途徑產(chǎn)生的乳酸)用于估計戊糖循環(huán)活性 (Lee WN等，1998,爿m J尸/^Wo/ 274: E843 - E851)。記錄OVCAR3和 Hela細(xì)胞釋放的乳酸產(chǎn)生的wl/m2比率以確定響應(yīng)于3-硝基-4-碘苯 甲酰胺處理的相對于無氧糖酵解的戊糖循環(huán)活性。
谷氨酸:來自葡萄糖的谷氨酸標(biāo)記分布適用于確定相對于TCA循環(huán)中合成代謝葡萄糖利用的葡萄糖氧化，也稱作回補(bǔ)流。組織培養(yǎng)
基首先用6yo高氯酸處理且上清液通過3cr^Dowex-50(H+)柱。氨基 酸用15ml的2N氫氧化銨洗脫。為進(jìn)一步分離谷氨酸和谷氨酰胺，氨 基酸混合物通過3 cm3 Dowex-l(乙酸鹽)柱，然后用15ml的0.5N乙酸 收集。來自培養(yǎng)基的谷氨酸部分轉(zhuǎn)化成其三氟乙酰丁基酯(TAB)。在 EI條件下，TAB-谷氨酸的離子化產(chǎn)生兩個碎片，m/W卵和m/z"2， 對應(yīng)于谷氨酸的C2-C5和C2-C4 (Lee WN等.1996, Deve/o/7me"M/ A^wrwde"ce 18: 469 - 477)。在4-5碳位置上標(biāo)記的谷氨酸指示丙酮 酸脫氬酶活性，而在2-3碳位置上標(biāo)記的谷氨酸指示使葡萄糖碳進(jìn)入 TCA循環(huán)的丙酮酸羧化酶活性。TCA循環(huán)合成代謝葡萄糖利用基于 谷氨酸的m1/ m2比率計算(Leimer KR等，1977, , CArawWogra/ /^ 141: 121 -144)。
脂肪酸:棕櫚酸、硬脂酸、膽固醇和油酸在30。/oKOH和100%乙 醇對細(xì)胞沉淀進(jìn)行皂化后使用石油醚提取。脂肪酸使用0.5N的甲醇 -HC1轉(zhuǎn)化成其甲基化衍生物。椋櫚酸、硬脂酸和油酸分別在m/z270, m/z29S和w/W"進(jìn)行監(jiān)測，如通過不同同位體的質(zhì)量同位體分布分 析(MIDA)所確定的，4吏反映新脂部分的合成、延長和去飽和的^C標(biāo) 記的乙酰單元發(fā)生富集(Lee WN,等，1998， 所o/. CT ew. 273: 20929-20934; Lee WN等，1995， X即/Aoc/iem 226: 100 - 112)。
氣相色譜/質(zhì)譜(GC/MS):質(zhì)譜數(shù)據(jù)在連接到HP6890氣相色譜上 的HP5973質(zhì)量選擇檢測器上獲得。設(shè)置如下GC入口溫度250。C, 輸送線280。C, MS源230。C, MSQuadl50。C。 HP-5毛細(xì)柱(30m長， 250pm直徑，0.25nm膜厚)用于葡萄糖、核糖和乳酸分析。轉(zhuǎn)酮醇酶 在戊糖循環(huán)的非氧化分支中具有最高的代謝控制系數(shù)(Sabate L等, 1995， T^o/. Ce// Szoc/^m. 142: 9-17; Comin-Anduix B等，2001， / 肌oc&m, 268:4177 -4182)?？墒菓?yīng)該注意到，除其它的酶外，轉(zhuǎn)酮醇 酶和轉(zhuǎn)醛醇酶都可以參與人體細(xì)胞中的非氧化戊糖循環(huán)代謝。
數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計方法對于在每項試驗中的各種條件，每個試驗 采用三重細(xì)胞培養(yǎng)完成，且試驗重復(fù)一次。質(zhì)譜分析通過自動進(jìn)樣器三次獨(dú)立地自動注射lpl樣品完成，且^又接受標(biāo)準(zhǔn)樣品誤差小于標(biāo)準(zhǔn)
化峰強(qiáng)度的1%時的結(jié)果。統(tǒng)計分析采用不配對樣品的Student's t-檢 驗進(jìn)行。99%置信區(qū)間的雙側(cè)顯著性(^+/-2.58 5)， pO.01表明在對照 和3-硝基-4-碘苯曱酰胺中葡萄糖碳代謝具有顯著性差異。
結(jié)果在Hela細(xì)胞中成功地進(jìn)行了示蹤劑處理，且所有培養(yǎng)物的 示蹤劑標(biāo)記的葡萄糖部分在O.O分時在總葡萄糖的45%-55%之間。示 蹤劑孵育20小時、48小時和72小時足以產(chǎn)生Hela細(xì)胞特異的代謝 物標(biāo)記分布。Hela細(xì)胞響應(yīng)于3-硝基-4-碘苯甲酰胺的葡萄糖代謝具 有差異。效應(yīng)是劑量-響應(yīng)性的，且與由葡萄糖從頭合成中鏈和長鏈 脂肪酸的減少保持很大的一致?；ㄉ?C:20)的從頭合成被3-硝基-4-碘苯曱酰胺的抑制作用減弱。從葡萄糖富集乙酰-CoA用于花生酸合 成在3-硝基-4-碘苯甲酰胺處理的Hela培養(yǎng)物中較高。
葡萄糖在TCA循環(huán)中氧化成C02和ATP不受3-硝基-4-碘苯甲酰 胺的影響。從葡萄糖到長鏈飽和脂肪酸(C:20-C:24)的乙酰-CoA貢獻(xiàn) 存在劑量依賴的提高。3-硝基-4-碘苯曱酰胺在Hela細(xì)胞中是代謝活 性化合物。中鏈到長鏈脂肪酸(C:14-C:18)的從頭合成隨著從葡萄糖對 乙酰-CoA合成的貢獻(xiàn)降低而減少。3-硝基-4-碘苯甲酰胺通過限制脂 肪酸的從頭合成作為其在Hela細(xì)胞中抗增殖作用的基礎(chǔ)機(jī)制而減少 細(xì)胞膜形成。3-硝基-4-碘苯曱酰胺增加從葡萄糖形成的乙酰-CoA以 用于形成花生酸，因此它可以刺激前列腺素合成。3-硝基-4-碘苯甲酰 胺對細(xì)胞能量產(chǎn)生、核酸更新和糖原合成沒有毒性效應(yīng)。3-硝基-4-碘苯甲酰胺對底物(葡萄糖)攝取和活化(磷酸化)沒有抑制效應(yīng)。
在0VCAR-3細(xì)胞中成功地進(jìn)行了示蹤劑處理，且所有培養(yǎng)物的 示蹤劑標(biāo)記的葡萄糖部分在O，O分時在總葡萄糖的45%-55%之間。示 蹤劑孵育72小時足以產(chǎn)生Hela細(xì)胞特異的代謝物標(biāo)記分布。 OVCAR-3細(xì)胞響應(yīng)于3-硝基-4-碘苯曱酰胺的葡萄糖代謝具有顯著差 異。該效應(yīng)是劑量-響應(yīng)性的，且與由葡萄糖從頭合成中鏈和長鏈脂 肪酸的減少以及葡萄糖的乙酰-CoA合成的減少保持很大的一致。
OVCAR-3細(xì)胞中中鏈到長鏈脂肪酸(C:14-C:18)的從頭合成被3-硝基—4-碘苯曱酰胺的抑制作用減弱。在OVCAR-3細(xì)胞中脂肪酸的從 頭合成相對較低(<30%)。醛縮酶和丙糖磷酸異構(gòu)酶在DNA合成期間 是活性的，且轉(zhuǎn)酮醇酶以及G6PDH是3-硝基-4-碘苯甲酰胺處理的目 標(biāo)酶。通過直接途徑的糖原合成和裂解受到3-硝基-4-碘苯甲酰胺的抑制。
從葡萄糖到長鏈飽和脂肪酸(C:20-C:24)的乙酰-CoA貢獻(xiàn)存在劑 量依賴性的提高。3-硝基-4-碘苯曱酰胺在OVCAR-3細(xì)胞中是代謝活 性化合物。中鏈到長鏈脂肪酸(C:14-C:18)的從頭合成略微增加，從葡 萄糖合成乙酰-CoA沒有顯著的改變。3-硝基-4-碘苯甲酰胺通過限制 長鏈脂肪酸(C:20-C:24)的乂人頭合成作為其在OVCAR-3細(xì)胞中抗增殖 作用的基礎(chǔ)機(jī)制而減少細(xì)胞膜形成。3-硝基-4-碘苯甲酰胺還抑制用于 DNA脫氧核糖合成和直接糖原合成的G6PDH和轉(zhuǎn)酮醇酶流。3-硝基 -4-碘苯甲酰胺對細(xì)胞能量產(chǎn)生和核酸RNA更新沒有毒性效應(yīng)。這些 研究的結(jié)果顯示于圖3A、 3B(72小時時nC-標(biāo)記的肉豆蔻酸(C:14))、 4A、 4B(72小時時^C-標(biāo)記的棕櫚酸(C:16))、 5A、 5B(72小時時13C-標(biāo)記的硬脂酸(C:18))、 6A、 6B(72小時時"C-標(biāo)記的油酸(C:18-1))、 7A、 7B(72小時時13(3-標(biāo)記的C:22脂肪酸)、8A、 8B(72小時時13C-標(biāo)記的C:24脂肪酸)、9A、 9B(72小時時"C-標(biāo)記的花生酸(C:20))、 10A、 10B(72小時時130標(biāo)記的C:22脂肪酸)和IIA、 11B(72小時 時13。標(biāo)記的C:24脂肪酸)。在各種情況中，"A，，圖顯示摻入細(xì)胞 沉淀中的脂肪酸量，而"B，，圖顯示來自葡萄糖的13乙酰CoA富集(左) 和新的脂肪酸合成部分(右)。這些結(jié)果表明PARP-1抑制劑3-硝基-4-碘苯甲酰胺在細(xì)胞中抑制脂肪酸合成。
盡管這里顯示和描述的本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，但本領(lǐng)域技術(shù)人 員很清楚，這些實施方式僅以舉例的方式提出。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以 想到許多的變形、變化和替換而不脫離本發(fā)明的范圍。應(yīng)當(dāng)理解，可 以在本發(fā)明的實施中采用這里描述的本發(fā)明實施方式的各種改變形 式。下面的權(quán)利要求限定本發(fā)明的范圍且本發(fā)明包括這些權(quán)利要求的 范圍內(nèi)的方法和結(jié)構(gòu)及它們的等同物。
權(quán)利要求
1、一種治療脂肪酸合成相關(guān)疾病的方法，包括對需要的患者施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物以抑制脂肪酸合成，其中所述脂肪酸合成相關(guān)疾病是肥胖、糖尿病或心血管疾病。
2、 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂肪酸是中鏈脂肪酸或 長鏈脂肪酸。
3、 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包括 抑制葡萄糖途徑的至少 一 種酶。
4、 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包括 抑制脂肪酸生物合成途徑的至少一種酶。
5、 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包括 抑制選自乙酰輔酶A、丙二酰輔酶A、乙酰輔酶A羧化酶和脂肪酸合 酶的至少一種酶。
6、 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包括 抑制脂肪酸合酶的至少一種酶。
7、 如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述脂肪酸合酶包括?；d 體蛋白、乙酰轉(zhuǎn)移酶、丙二酰轉(zhuǎn)移酶、3-酮-酰基-ACP合成酶、3-酮 酰基-ACP還原酶、3-羥基-?；?ACP脫水酶和烯酰基-ACP還原酶。
8、 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包括 抑制從葡萄糖合成乙酰輔酶A。
9、 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包括 抑制從乙酰輔酶A合成所述脂肪酸。
10、 如權(quán)利要求l所述的方法，其中所述抑制通過分析葡萄糖途 徑或脂肪酸生物合成途徑的代謝物或分子流確定。
11、 如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述代謝物選自葡萄糖、 糖原、乳酸、C02、脂肪酸、乙酰輔酶A、 RNA核糖和DNA脫氧核 糖。
12、 如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述代謝物為用于所述的分析而進(jìn)行化學(xué)衍生化。
13、 如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述分析包括質(zhì)譜分析。
14、 如權(quán)利要求13所述的方法，其中所述質(zhì)譜分析是質(zhì)量同位 體分布分析。
15、 如權(quán)利要求l所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代謝 物是式I的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥其中，R!、 R2、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的 胺、羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(CrC6)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)雜環(huán)基、任選取代的芳基和含硫基團(tuán)。
16、如權(quán)利要求15所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代 謝物是式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥.'其中，R!、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(d-C6)烷氧基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中R4、 R3、 R4和Rs取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6為-SR6，其中R6選自式II氫、CrQ?；?、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。
17、如^l利要求16所述的方法，其中所述PARP抑制劑是式III 的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 4</formula>式III 。
18、 如權(quán)利要求l所述的方法，其中所述治療選自口服給藥、經(jīng) 粘膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、 皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。
19、 一種監(jiān)測PARP抑制劑或其代謝物在疾病治療中的療效的方 法，包括(i)對患者施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物以抑制脂 肪酸合成；(ii)比較來自所述患者的第一和第二樣品中的第一和第二 脂肪酸水平，其中所述第一水平和所述第一樣品在施用所述PARP抑 制劑或其代謝物之前獲得，而所述第二水平和所述第二樣品在施用所 述PARP抑制劑或其代謝物之后獲得；和(iii)基于所述比較結(jié)果確定 在所述患者中所述PARP抑制劑或其代謝物在疾病治療中的療效。
20、 如權(quán)利要求19所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑的至少一種酶。
21、 如權(quán)利要求19所述的方法，其中當(dāng)所述第二樣品中的所述 第二脂肪酸水平低于所述第一樣品中的所述第一脂肪酸水平時，所述 PARP抑制劑或其代謝物是有治療效果的。
22、 如權(quán)利要求19所述的方法，其中當(dāng)所述第二樣品中的所述 第二脂肪酸水平高于所述第一樣品中的所述第一脂肪酸水平時，所述 PARP抑制劑或其代謝物是沒有治療效果的。
23、 如權(quán)利要求19所述的方法，其中所述第一脂肪酸水平和所述第二脂肪酸水平通過分析技術(shù)測定。
24、 如權(quán)利要求19所述的方法，其中所述第一脂肪酸水平和所述第二脂肪酸水平通過質(zhì)語分析測定。
25、 如權(quán)利要求24所述的方法，其中所述質(zhì)譜分析是質(zhì)量同位 體分布分析。
26、 如權(quán)利要求19所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代 謝物是式I的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 5</formula>式I其中，R^、 R2、 R3、 R4和R5獨(dú)立地選自氫、羥基、任選:f又代的 胺、羧基、酯、亞硝基、硝基、由素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(d-Q)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)雜環(huán)基、任選取代的芳基和含硫基團(tuán)。
27、如權(quán)利要求26所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代 謝物是式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 5</formula>式II其中，R^、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(C廣C6)烷基、任選取代的(CrQ)烷氧基、任選取代的((VC7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)雜環(huán) 基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中R4、 R3、R4和Rs取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6為-SR6，其中116選自 氫、CrQ酰基、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的((VC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。
28、如權(quán)利要求27所述的方法，其中所述PARP抑制劑是式III 的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 6</formula>式III 。
29、 如權(quán)利要求19所述的方法，其中所述疾病是癌癥、心血管 疾病、糖尿病或肥胖。
30、 如權(quán)利要求19所述的方法，其中所述施用選自口服給藥、 經(jīng)粘膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、 皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。
31、 如權(quán)利要求19所述的方法，其中所述第一樣品中的所述第 一脂肪酸水平從所述患者的病史確定。
32、 一種治療Her-2相關(guān)癌癥的方法，包括對需要的患者施用有 效量的PARP抑制劑或其代謝物，其中所述PARP抑制劑或其代謝物 抑制脂肪酸合成。
33、 如權(quán)利要求32所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑的至少一種酶。
34、 如權(quán)利要求32所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制脂肪酸合酶的至少一種酶，其中所述酶選自酰基載體蛋白、乙 酰轉(zhuǎn)移酶、丙二酰轉(zhuǎn)移酶、3-S同-?；?ACP合成酶、3-酮酰基-ACP還 原酶、3-羥基-酰基-ACP脫水酶和烯?；?ACP還原酶。
35、 如權(quán)利要求32所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代 謝物是式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥式II其中，Rp R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、面素、任選取代的(C廣C6)烷基、任選取代 的(d-Q)烷氧基、任選取代的((VC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中&、 R3、 R4和Rs取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6為-SR6，其中116選自 氫、d-C6?；?、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、 任選取代的(CVC7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。
36、 如權(quán)利要求35所述的方法，其中所述PARP抑制劑是式III的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥CONH2N02I式III 。
37、 如權(quán)利要求32所述的方法，其中所述治療選自口服給藥、 經(jīng)粘膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、 皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。
38、 如權(quán)利要求32所述的方法，進(jìn)一步包括施用Her-2抗體。
39、 如權(quán)利要求32所述的方法，進(jìn)一步包括手術(shù)、放射治療、 化療、基因治療、免疫治療或其組合。
40、 一種治療代謝疾病的方法，包括對需要的患者施用有效量的 式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 8</formula>其中，R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(d-C6)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基、任選取代的芳基和-SR6，其中R6選自氫、(d-C6)?；?、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)雜環(huán)基和任選取代的芳基；Rz是硝基或亞硝基；且其中R!、 R3、 R4和R^取 代基中的至少兩個總是為氫；且其中所述式II的化合物、所述藥學(xué)上可接受的鹽或所述其前藥抑 制脂肪酸合成，從而治療所述對象的所述代謝疾病。
41、 如權(quán)利要求40所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑的至少 一種酶。
42、 如權(quán)利要求40所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制脂肪酸合酶的至少一種酶，其中所述酶選自酰基載體蛋白、乙 酰轉(zhuǎn)移酶、丙二酰轉(zhuǎn)移酶、3-酮-酰基-ACP合成酶、3-酮?；?ACP還 原酶、3-羥基-?；?ACP脫水酶和烯?；?ACP還原酶。
43、 如^又利要求40所述的方法，其中所述式II的化合物、所述藥學(xué)上可接受的鹽或所述其前藥包括式III的化合物<formula>formula see original document page 8</formula>
44、 如權(quán)利要求40所述的方法，其中所述治療選自口服給藥、 經(jīng)粘膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、 皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。
45、 如權(quán)利要求40所述的方法，其中所述代謝疾病是糖尿病或 肥胖。
46、 一種治療對象的癌癥的方法，包括(i)確定來自所述對象 的樣品中的脂肪酸水平；和(ii)施用有效量的PARP抑制劑或其代謝 物以抑制脂肪酸合成，其中所述施用是基于所述脂肪酸水平，從而治 療所述對象的所述癌癥。
47、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述脂肪酸是中鏈脂肪酸 或長鏈脂肪酸。
48、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制葡萄糖途徑的至少 一種酶。
49、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制脂肪酸生物合成途徑的至少 一 種酶。
50、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制選自乙酰輔酶A、丙二酰輔酶A、乙酰輔酶A羧化酶和脂肪酸 合酶的至少一種酶。
51、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制脂肪酸合酶的至少 一 種酶。
52、 如權(quán)利要求51所述的方法，其中所述脂肪酸合酶包括酰基 載體蛋白、乙酰轉(zhuǎn)移酶、丙二酰轉(zhuǎn)移酶、3-酮-酰基-ACP合成酶、3-酮?；?ACP還原酶、3-羥基-酰基-ACP脫水酶和烯?；?ACP還原酶。
53、 如權(quán)利要求52所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制從葡萄糖合成乙酰輔酶A。
54、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制從乙酰輔酶A合成所述脂肪酸。
55、 如權(quán)利要求47所述的方法，其中所述長鏈脂肪酸為 C:14-C:30。
56、 如權(quán)利要求55所述的方法，其中所迷長鏈脂肪酸為C:14、 C:16、 C:18、 C:18畫l、 C:20、 C:22或C:24。
57、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述抑制通過分析葡萄糖 途徑或脂肪酸生物合成途徑的代謝物或分子流確定。
58、 如權(quán)利要求57所述的方法，其中所述代謝物選自葡萄糖、 糖原、乳酸、C02、脂肪酸、乙酰輔酶A、 RNA核糖和DNA脫氧核 糖。
59、 如權(quán)利要求58所述的方法，其中所述代謝物為用于所述的 分析而進(jìn)行化學(xué)衍生化。
60、 如權(quán)利要求59所述的方法，其中所述分析包括質(zhì)譜分析。
61、 如權(quán)利要求60所述的方法，其中所述質(zhì)譜分析是質(zhì)量同位 體分布分析。
62、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述脂肪酸水平是上調(diào)的。
63、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代 謝物是式I的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥其中，R2、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的 胺、羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(C廣C6)烷基、任選取代的(CrC6)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基、任選取代的芳基和含硫基團(tuán)。
64、如權(quán)利要求63所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代 謝物是式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥式II其中，Rp R3、 R4和R5獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代 的(d-C6)烷氧基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán) 基、任選取代的芳基和-SR6; 112是硝基或亞硝基；且其中&、 R3、 R4和R5取代基中的至少兩個總是為氬；其中R6為-SR6，其中116選自 氫、d-C6?；⑷芜x取代的(d-C6)烷基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。
65、如權(quán)利要求64所述的方法，其中所述PARP抑制劑是式III 的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥
66、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述癌癥選自結(jié)腸腺癌、 食管腺癌、肝細(xì)胞肝癌、鱗狀細(xì)胞癌、胰腺腺癌、胰島細(xì)胞瘤、直腸 腺癌、胃腸道基質(zhì)瘤、胃腺癌、腎上腺皮質(zhì)癌、濾泡性癌、乳頭狀癌、 乳腺癌、導(dǎo)管癌、小葉癌、導(dǎo)管內(nèi)癌、粘液癌、葉狀腫瘤、卵巢腺癌、 子宮內(nèi)膜腺癌、顆粒細(xì)胞瘤、粘液性嚢腺癌、子宮頸腺癌、外陰鱗狀 細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌、前列腺腺癌、骨巨細(xì)胞瘤、骨肉瘤、喉癌、肺 腺癌、腎癌、膀胱癌、韋爾姆瘤和淋巴瘤。
67、 如權(quán)利要求46所述的方法，其中所述治療選自口服給藥、式III經(jīng)粘膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、 皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。
68、 一種監(jiān)測PARP抑制劑或其代謝物在疾病治療中的療效的方 法，包括(i)對患者施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物以抑制脂 肪酸合成；(ii)比較來自所述患者的第一和第二樣品中的第一和第二 脂肪酸水平，其中所述第 一水平和所述第 一樣品在施用所述PARP抑 制劑或其代謝物之前獲得，而所述第二水平和所述第二樣品在施用所 述PARP抑制劑或其代謝物之后獲得；和(iii)基于所述比較結(jié)果確定 在所述患者中所述PARP抑制劑或其代謝物在疾病治療中的療效。
69、 如權(quán)利要求68所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑的至少一種酶。
70、 如權(quán)利要求69所述的方法，其中當(dāng)所述第二樣品中的所述 第二脂肪酸水平低于所述第一樣品中的所述第一脂肪酸水平時，所述 PARP抑制劑或其代謝物是有治療效果的。
71、 如權(quán)利要求69所述的方法，其中當(dāng)所述第二樣品中的所述 第二脂肪酸水平高于所述第一樣品中的所述第一脂肪酸水平時，所述 PARP抑制劑或其代謝物是沒有治療效果的。
72、 如權(quán)利要求69所述的方法，其中所述第一脂肪酸水平和所 述第二脂肪酸水平通過分析技術(shù)測定。
73、 如權(quán)利要求69所述的方法，其中所述第一脂肪酸水平和所 述第二脂肪酸水平通過質(zhì)譜分析測定。
74、 如權(quán)利要求73所述的方法，其中所述質(zhì)譜分析是質(zhì)量同位 體分布分析。
75、 如;^又利要求69所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代 謝物是式I的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 13</formula>式I其中，R2、 R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的 胺、羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(d-C6)烷氧基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基、任選取代的芳基和含硫基團(tuán)。
76、如^f又利要求75所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代 謝物是式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 13</formula>式II其中，Rp R3、 R4和R5獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、卣素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代 的(Q-C6)烷氧基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(CVC7)雜環(huán) 基、任選取代的芳基和-SR6; R2是硝基或亞硝基；且其中R!、 R3、 R4和Rs取代基中的至少兩個總是為氫；其中R6為-SR6，其中R6選自 氫、CrC6?；⑷芜x取代的(CrC6)烷基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基和任選取代的芳基及任選的取代基。
77、如權(quán)利要求76所述的方法，其中所述PARP抑制劑是式III 的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 14</formula>式III 。
78、 如權(quán)利要求69所述的方法，其中所述疾病是癌癥、心血管 疾病、^唐尿病或"巴胖。
79、 如權(quán)利要求69所述的方法，其中所述施用選自口服給藥、 經(jīng)粘膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、 皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。
80、 如權(quán)利要求69所述的方法，其中所述第一樣品中的所述第 一脂肪酸水平從所述患者的病史確定。
81、 一種治療對象的Her-2相關(guān)癌癥的方法，包括(i)確定來自 對象的樣品中Her-2表達(dá)的水平，和(ii)對所述對象施用有效量的 PARP抑制劑或其代謝物以抑制所述對象的脂肪酸合成，其中所述施 用是基于所述Her-2表達(dá)水平的確定，從而治療所述對象的Her-2相 關(guān)癌癥。
82、 如權(quán)利要求81所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑的至少 一 種酶。
83、 如權(quán)利要求81所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制脂肪酸合酶的至少一種酶，其中所述酶選自酰基載體蛋白、乙 酰轉(zhuǎn)移酶、丙二酰轉(zhuǎn)移酶、3-酮-?；?ACP合成酶、3-酮?；?ACP還 原酶、3-羥基-?；?ACP脫水酶和歸酰基-ACP還原酶。
84、 如權(quán)利要求81所述的方法，其中所述Her-2表達(dá)水平是上調(diào)的。
85、 如權(quán)利要求81所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代 謝物是式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 15</formula>式II其中，R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、酯、亞硝基、硝基、自素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代 的(d-C6)烷氧基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán) 基、任選取代的芳基和-SR。其中R6選自氫、(d-C6)?；?、任選取代 的(d-C6)烷基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基 和任選取代的芳基；R2是硝基或亞硝基；且其中R,、 R3、 R4和R5取 代基中的至少兩個總是為氫。
86、 如沖又利要求80所述的方法，其中所述PARP抑制劑或其代 謝物是式m的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥<formula>formula see original document page 15</formula>式III 。
87、 如權(quán)利要求86所述的方法，其中所述治療選自口服給藥、 經(jīng)粘膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、 皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。
88、 如纟又利要求86所述的方法，其中所述樣品包括癌細(xì)月包。
89、 如權(quán)利要求85所述的方法，進(jìn)一步包括施用Her-2抗體。
90、 如權(quán)利要求85所述的方法，進(jìn)一步包括手術(shù)、放射治療、 化療、基因治療、免疫治療或其組合。
91、 一種治療對象的癌癥的方法，包括(i)確定來自對象的樣品中的脂肪酸水平；(ii)對所述對象施用有效量的式II的化合物、其 藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥，其中所述施用是基于所述脂肪酸水平的 確定，其中所述式II的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥包括<formula>formula see original document page 16</formula>其中，R3、 R4和Rs獨(dú)立地選自氫、羥基、任選取代的胺、 羧基、S旨、亞硝基、硝基、面素、任選取代的(d-C6)烷基、任選取代的(CrC6)烷氧基、任選取代的(C3-C7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C》雜環(huán) 基、任選取代的芳基和-SR6，其中R6選自氫、(d-C6)?；?、任選取代 的(d-C6)烷基、任選取代的(CVC7)環(huán)烷基、任選取代的(C3-C7)雜環(huán)基 和任選取代的芳基；R2是硝基或亞硝基；且其中R!、 R3、 R4和Rs取 代基中的至少兩個總是為氫；且其中所述式II的化合物、所述藥學(xué)上 可接受的鹽或所述其前藥抑制脂肪酸合成，從而治療所述對象的所述 癌癥。
92、 如權(quán)利要求91所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制葡萄糖途徑或脂肪酸生物合成途徑的至少 一種酶。
93、 如權(quán)利要求91所述的方法，其中所述脂肪酸合成的抑制包 括抑制脂肪酸合酶的至少一種酶，其中所述酶選自?；d體蛋白、乙酰轉(zhuǎn)移酶、丙二酰轉(zhuǎn)移酶、3-酮-?；?ACP合成酶、3-酮?；?ACP還原酶、3-羥基-?；?ACP脫水酶和烯?；?ACP還原酶。
94、 如權(quán)利要求91所述的方法，其中所述式II的化合物、所述 藥學(xué)上可接受的鹽或所述其前藥包括式III的化合物CONH式III 。
95、 如權(quán)利要求91所述的方法，其中所述治療選自口服給藥、 經(jīng)粘膜給藥、口腔給藥、鼻腔給藥、吸入、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、 皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、舌下給藥、透皮給藥和直腸給藥。
96、 如權(quán)利要求91所述的方法，其中所述癌癥選自Her-2相關(guān)癌 癥、結(jié)腸腺癌、食管腺癌、肝細(xì)胞肝癌、鱗狀細(xì)胞癌、胰腺腺癌、胰 島細(xì)胞瘤、直腸腺癌、胃腸道基質(zhì)瘤、胃腺癌、腎上腺皮質(zhì)癌、濾泡 性癌、乳頭狀癌、乳腺癌、導(dǎo)管癌、小葉癌、導(dǎo)管內(nèi)癌、粘液癌、葉 狀肺瘤、卯巢腺癌、子宮內(nèi)膜腺癌、顆粒細(xì)胞瘤、粘液性嚢腺癌、子 宮頸腺癌、外陰鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌、前列腺腺癌、骨巨細(xì)胞瘤、 骨肉瘤、喉癌、肺腺癌、腎癌、膀胱癌、韋爾姆瘤和淋巴瘤。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療脂肪酸合成相關(guān)疾病的方法，包括向需要的患者施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物以抑制脂肪酸合成，其中所述脂肪酸合成相關(guān)疾病是肥胖、糖尿病或心血管疾病。本發(fā)明還涉及治療對象的癌癥的方法，包括(i)確定來自對象的樣品中的脂肪酸水平，和(ii)施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物以抑制對象中的脂肪酸合成，其中所述施用是基于所述脂肪酸水平，從而治療對象的癌癥。本發(fā)明進(jìn)一步涉及通過向需要的患者施用有效量的PARP抑制劑或其代謝物以抑制脂肪酸合成而治療Her-2相關(guān)癌癥的方法。
文檔編號A61K31/70GK101534836SQ200780037101
公開日2009年9月16日 申請日期2007年9月5日 優(yōu)先權(quán)日2006年9月5日
發(fā)明者B·舍曼, V·奧索維斯卡亞 申請人:彼帕科學(xué)公司