一種新的三萜類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及從夏枯草的干燥成熟果穗中分離得到的一種 具有治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤作用的=祗類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]夏枯草（拉下學(xué)名：Prunellavulgaris)，俗稱牛對(duì)頭，又稱九重樓、鐵色草、大頭 花、棒柱頭花、羊腸菜、鞍鍵草、六月干、棒頭柱等；多年生草本植物。甸筒莖，節(jié)上長有須根。 生長在山溝水濕地或河岸兩旁濕草叢、荒地、路旁，廣泛分布于中國各地，W河南、安徽、江 蘇、湖南等省為主要產(chǎn)地。臨床上主要W其干燥成熟果穗入藥，可W清火明目，能治目赤腫 痛、頭痛等作用。
[0003] 夏枯草具有多種活性成分，主要有=祗類、醬體類、黃酬類、香豆素類等化合物。目 前，研究人員已經(jīng)從不同種屬的夏枯草中分離并鑒定出眾多化學(xué)成分。
[0004] 夏枯草煎劑、水浸出液、乙醇-水浸出液及乙醇浸出液均可明顯降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血 壓，莖、葉、穗及全草均有降壓作用，但穗的作用較明顯；夏枯草水煎醇沉液小鼠腹腔注射， 有明顯的抗炎作用；夏枯草煎劑在體外對(duì)頻疾桿菌、傷寒桿菌、霍亂弧菌、大腸桿菌、變形桿 菌、葡萄球菌及人型結(jié)核桿菌均有一定的抑制作用。
[0005] 正常人體細(xì)胞分裂的速度是在一定范圍內(nèi)進(jìn)行的，當(dāng)機(jī)體受到外在因素的影響或 內(nèi)在環(huán)境的失衡，腫瘤細(xì)胞的分裂周期或細(xì)胞調(diào)亡速度改變，腫瘤細(xì)胞數(shù)量持續(xù)增加，腫塊 增大。因此，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖作用是抗腫瘤的一條重要途徑。目前，研究證明夏枯草提 取物具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種從夏枯草的干燥成熟果穗中分離得到的一種具有治療 神經(jīng)膠質(zhì)瘤作用的=祗類化合物及其制備方法。
[0007] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得W實(shí)現(xiàn)的：
[0008] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0009]
[0010] 所述的化合物（I)的制備方法，包含W下操作步驟：(a)將夏枯草的干燥成熟果 穗粉碎，用75~85 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸乙 醋和水飽和的正下醇萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；化） 步驟（a)中乙酸乙醋萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用75%乙 醇洗脫10個(gè)柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；（C)步驟化） 中75 %乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1、12:1和1:1的二 氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟（C)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次 用體積比為20:1、12:1和5:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中 組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗 脫，收集8~10個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0011] 進(jìn)一步地，步驟（a)中，用80%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0012] 進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0013] 藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的載體。
[0014] 所述的化合物（I)在制備治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 所述的藥物組合物在制備治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可W直接使用，或者W藥物組合物的形式使用。
[0017] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對(duì)人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0018] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料W及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物W單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0019] 圖1為化合物（I)結(jié)構(gòu)式；
[0020] 圖2為化合物（I)理論ECD值與實(shí)驗(yàn)ECD值比較；
[0021] 圖3為化合物（I)處理后U251細(xì)胞桐調(diào)亡率的變化。
【具體實(shí)施方式】
[0022] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不W此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可W對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[002引實(shí)施例1:化合物（I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0024] 試劑來源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲燒為分析純，購自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[00巧]制備方法：（a)夏枯草的干燥成熟果穗（IOkg)粉碎，用80 %乙醇熱回流提取 (2化X3次），合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋0LX3 次）和水飽和的正下醇（3LX3次）萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（398g) 和正下醇萃取物；(b)步驟（a)中乙酸乙醋萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇 洗脫8個(gè)柱體積，再用75 %乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75% 乙醇洗脫物浸膏（163g) ; (C)步驟化）中75%乙醇洗脫浸膏用200-300目正相硅膠分離，依 次用體積比為85:1 (8個(gè)柱體積）、45:1 (8個(gè)柱體積）、25:1 (8個(gè)柱體積）、12:1 (10個(gè)柱體 積）和1:1巧個(gè)柱體積）的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟（C)中組分 4 (49g)用200-300目正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1 (8個(gè)柱體積）、12:1 (10個(gè) 柱體積）和5:1巧個(gè)柱體積）的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；(e)步驟（d)中 組分2 (30g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠ODS-C18分離，用體積百分濃度為70 %的甲 醇水溶液等度洗脫，收集8~10個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I) (143mg)。
[0026] 結(jié)構(gòu)確證：HR-ESIMS顯示[M+Na]+為m/z525. 3210,結(jié)合核磁特征可得分子式 為〔3化6〇6,不飽和度為8。核磁共振氨譜數(shù)據(jù)5h(卵m，DMS0-de，500MHz) 31，m)， H-l(2. 17,m)，H-3(4. 16,s)，H-5(l. 31，dd，J= 13. 5,4. 1)，H-6(l. 81，m)，H-6(l. 62,br，t，J= 14. 7)，H-7(3. 16,d，J= 6. 5)，H-ll(1.78,m)，H-ll(1.94,m)，H-12(1.49,m)， H-12(1.91，m)，H-15(1.65,m)，H-15(1.27,ddd，J= 12. 5，12. 5,5. 3)，H-16(1.24,m)， H-16 (2. 03,m)，H-17 (I. 53,m)，H-18 〇). 91，s)，H-19 〇). 97,s)，H-20 (I. 32,m)，H-21 (0. 85， d，J= 6. 6)，H-22 (I. 17,m)，H-22 (I. 35,m)，H-23 (I. 79,m)，H-23 (I. 97,m)，H-24 巧.16， tt，J= 7. 1,1.4)，H-26(1.61，s)，H-27(1.63,s)，H-28(0. 91，s)，H-29(0. 89,s);核磁 共振碳譜數(shù)據(jù) 5c(卵m，DMS0-de，125MHz) :42. 1(CH2，1-C)，208. 2(C，2-C)，81. 5(CH，3-C)， 44. 9 (C，4-C)，41. 5 (CH，5-C)，21. 2 (邸2, 6-C)，71. 4 (CH，7-C)，82.I(C，8-C)，97. 2 (C，9-C)， 37.