一種用于治療卵巢癌的三萜化合物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及從茅替的干燥根中分離得到的一種具有治療 卵巢癌作用的=祗類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 茅替，是廣東地區(qū)民間常用藥，別名蛇泡霸、紅梅消、S月泡、藤秩薦、天青地白草 等，為菩薇科懸鉤子屬植物茅替Rubusparvi化IiusL的干燥根。本品為落葉小灌木，生于 山坡、路旁、荒地灌叢和草叢中，適應(yīng)性強(qiáng)，資源豐富，分布廣泛。作為廣東地產(chǎn)藥材，主要W 南海、陽山、郁南等市縣出產(chǎn)較多。茅替具有清熱解毒、活血化疲、接骨生肌的功效，廣泛運(yùn) 用于中醫(yī)臨床如跌打損傷、感冒發(fā)熱、骨瘤、鼻咽癌、腎孟腎炎、急性咽喉炎等疾病的治療。
[0003] 近年來，國內(nèi)外研究學(xué)者對菩薇科懸鉤子屬植物研究已取得一定進(jìn)展，分離得到 的化合物主要有祗類、黃酬類、醬醇類化及揮發(fā)油、脂肪酸、芳香酸、酪酸、較質(zhì)等，其中立祗 類藥理活性較強(qiáng)，普遍存在于在懸鉤子屬植物中。
[0004] 文獻(xiàn)記載的茅替最引人注目的是其在屯、血管系統(tǒng)方面的藥理活性，特別是在抗腦 缺血方面的治療作用?！侗静菔斑z》記載茅替具有止血活血、散疲止痛的功效，可內(nèi)服外敷。 現(xiàn)代研究表明，茅替具有止血和活血化疲的作用，并且與在屯、血管疾病方面具有顯著治療 作用的活血化疲藥丹參的藥理作用相同。茅替對腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，主要體現(xiàn) 在抗自由基，減輕細(xì)胞內(nèi)巧超載及興奮性氨基酸的神經(jīng)毒性、抑制細(xì)胞調(diào)亡及影響相關(guān)蛋 白的表達(dá)等。鄭振巧等研究發(fā)現(xiàn)茅替總皂巧對體內(nèi)外黑色素瘤有良好的抗腫瘤作用，呈一 定的量效依賴關(guān)系，并能促進(jìn)黑色素瘤細(xì)胞的調(diào)亡。茅替在臨床上可用于痛經(jīng)的治療，提示 其在鎮(zhèn)痛方面也有一定的作用。此外茅替還可防治鉛中毒，其提取物能顯著升高鉛中毒大 鼠血清中的SOD活性，并且降低MDA的含量。 陽0化]茅替資源豐富，分布廣泛，具有多方面的藥理活性?，F(xiàn)代藥理研究表明，茅替在屯、 血管系統(tǒng)與抗腫瘤方面具有顯著的作用，有望開發(fā)成屯、血管系統(tǒng)及抗腫瘤方面的新藥。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種從茅替的干燥根中分離得到的一種具有治療卵巢癌作 用的=祗類化合物及其制備方法。
[0007] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得W實(shí)現(xiàn)的：
[0008] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0009]
[0010] 所述的化合物（I)的制備方法，包含W下操作步驟：(a)將茅替的干燥根粉碎， 用70~80%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水飽 和的正下醇萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；化）步驟（a) 中乙酸乙醋萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用80%乙醇洗脫10 個(gè)柱體積，收集80 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得80 %乙醇洗脫物浸膏；（C)步驟化）中80% 乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為75:1、45:1、25:1、15:1和1:1的二氯甲 燒-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟（C)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體 積比為20:1、15:1和8:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中組分2 用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70 %的甲醇水溶液等度洗脫，收 集10~12個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0011] 進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為DlOl大孔吸附樹脂。
[0012]進(jìn)一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為75%。
[0013]一種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的 載體。
[0014] 所述的化合物（I)在制備治療卵巢癌的藥物中的應(yīng)用。
[0015]所述的藥物組合物在制備治療卵巢癌的藥物中的應(yīng)用。
[0016]本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可W直接使用，或者W藥物組合物的形式使用。
[0017]該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0018]所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料W及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物W單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0019] 圖I為化合物（I)結(jié)構(gòu)式；
[0020] 圖2為化合物（I)理論ECD值與實(shí)驗(yàn)ECD值比較。
【具體實(shí)施方式】
[0021] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不W此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可W對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。 陽02引實(shí)施例1:化合物（I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0023] 試劑來源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲燒為分析純，購自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0024] 制備方法：（a)將茅替的干燥根（IOkg)粉碎，用75%乙醇熱回流提?。?化X3 次），合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水 飽和的正下醇0LX3次）萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（431g)和正下醇 萃取物；化）步驟（a)中乙酸乙醋萃取物用DlOl大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個(gè)柱體 積，再用80 %乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集80 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得80 %乙醇洗脫物浸 膏（161g) ;(c)步驟化）中80%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為75:1(8個(gè) 柱體積）、45:1(8個(gè)柱體積）、25:1 (8個(gè)柱體積）、15:1 (10個(gè)柱體積）和1:1巧個(gè)柱體積） 的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟（C)中組分4 (52g)用正相硅膠進(jìn)一步 分離，依次用體積比為20:1(8個(gè)柱體積）、15:1 (10個(gè)柱體積）和8:1(8個(gè)柱體積）的二氯 甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中組分2(26g)用十八烷基硅烷鍵合的反 相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10-12個(gè)柱體積洗脫液， 洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I) (37mg)。 陽0巧]結(jié)構(gòu)確證：HR-ESIMS顯示[M+Na]+為m/z507. 3512,結(jié)合核磁特征可得分子式 為C31H4A，不飽和度為8。核磁共振氨譜數(shù)據(jù)5H(ppm，DMS0-de，600MHz) :H-2(6. 06,山J =9.8)，H-3 (6. 84,d，J= 9.8)，H-6(2. 74,dd，J= 14. 4, 7. 7)，H-6(2. 47,t，J= 14. 4)， H-7(1.72,m)，H-7(1.31，m)，H-8(2. 15,dd，J= 12. 1，2. 7)，02,d，J=6. 3)， H-12(1.89,dd，J= 15. 0,6. 4)，H-12(1.81，d，J= 15. 0)，H-15(1.23,m)，H-15(1.33， m)，H-16 (1.71，m)，H-16 (1.26,m)，H-17 (1.41，m)，H-18 (0.91，s)，H-19 (2.95,d，J= 14. 3)，H-19 (2. 48,d，J= 14. 3)，H-20 (I. 55,m)，H-21 (0. 90,d，J=6.6)，H-22 (3. 47,d， J= 10. 3)，H-23 (I. 07,m)，H-23 (I. 29,m)，H-24 (2. 39,m)，H-26 (4. 64,s)，H-27 (I. 53， s)，H-28 (0. 80,s)，H-29 (I. 26,s)，H-30 (I. 18,s)，H-31 (0. 98,d，J= 7. 0);核磁共振 碳譜數(shù)據(jù) 5C(卵m，DMSO-de，150MHz) : 185. 4 (C，1-C)，124. 3 (CH，2-C)，157. 5 (CH，3-C)， 40.I(C，4-C)，167. 2 (C，5-C)，29. 3 (邸2,6-C)，24.8(邸2, 7-C)，48. 2 (CH，8-C)，63.I(C，9-C)， 131. 7 (C，10-C)，61. 2 (CH，11-C)，34. 0 (邸2,12-C)，45.I(C，13-C)，46. 5 (C，14-C)，34.I(邸2， 15-C)，26. 9 (邸2, 16-C)，40.I(CH，17-C)，14. 4 (邸3, 18-C)，3