一種糖肽的合成方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種糖肽的合成方法。該方法包括如下步驟：（1）Fmoc保護氨基酸與離子液體通過酯化反應得到離子液體支載的單元；（2）將所述離子液體支載的單元與下述任一種單體進行連接，然后脫去所述離子液體，得到所述糖肽；1）糖基化氨基酸；2）糖基化氨基酸與至少一種所述Fmoc保護氨基酸；Fmoc表示9-芴甲氧羰基。本發(fā)明具有如下優(yōu)點：離子液體是結構明確的小分子可溶性載體，因此可以利用常規(guī)分析手段如薄層色譜﹑核磁共振﹑質譜等實時監(jiān)測反應進程；離子液體載體還具有裝載容量高，易于合成，價格便宜等優(yōu)勢，因此可以實現糖肽的大量合成。
【專利說明】一種糖肽的合成方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種糖肽的合成方法，屬于有機化學領域。
【背景技術】
[0002]糖肽是糖蛋白和蛋白聚糖中寡糖與氨基酸或多肽鏈共價連接而形成的結構區(qū)域，是生物體內極為重要的生物信息分子。在細胞分裂、信號轉導、細胞識別、癌癥、免疫、炎癥、微生物感染等眾多的生命現象和疾病形成過程中，糖肽均扮演者非常重要的角色。研究糖肽的結構與功能之間的關系對于揭示其生物學功能以及糖肽類藥物的開發(fā)有重要作用。由于生物體內的糖肽含量低且具有微不均一性，從生物樣品中分離純化糖肽十分困難，常常需要合成糖肽作為模型分子來研究其構效關系，因此糖肽合成方法的研究成為糖生物學和糖化學領域的一大熱點。
[0003]目前糖肽的化學合成方法主要有液相合成和固相合成。傳統(tǒng)的液相合成具有均相反應的優(yōu)點，但是產物的分離純化需要繁瑣的柱層析操作，費時費力。糖肽的固相合成主要有兩種策略，一是使用預先制備好的糖基化氨基酸的糖肽合成策略，可以實現自動化合成；二是在固相載體支載的多肽或糖肽上進行糖基化的糖肽合成策略。糖肽固相合成的最大優(yōu)點是中間產物僅通過簡單的洗滌和過濾純化，不需要繁瑣的柱層析操作。但是，糖肽固相合成中的反應屬于異相反應，由此帶來了一些缺陷。在異相反應體系下，反應物的活性要比在均相體系中的低，常常需要使用大大過量的反應試劑促使反應完全；不能使用常規(guī)的分析手段如薄層色譜、核磁共振、質譜等實時監(jiān)測反應進程；固相載體的裝載容量小，限制了糖肽的大量合成。因此，開發(fā)新的糖肽合成技術，使之不僅具有液相合成的均相反應的優(yōu)點，還兼有固相合成的異相分離的優(yōu)點，是相關領域亟待解決的難點之一。
[0004]離子液體(1nic liquid，IL)是一種在室溫或接近室溫下呈液態(tài)，由有機陽離子和有機或無機陰離子組成的鹽，也稱低溫熔融鹽。離子液體的可設計性強，由于構成它的陰離子和陽離子的可選擇范圍大，因此可以根據需要，簡單改變離子的構成就可以調控它的熔點、粘度、密度、溶解性等物理化學特性。一般情況下，離子液體具有良好的熱穩(wěn)定性、不揮發(fā)、不可燃性、不爆炸及低毒性，因而在有機合成中是環(huán)境友好的。
【發(fā)明內容】
[0005]本發(fā)明的目的是提供一種糖肽的合成方法。
[0006]本發(fā)明首先提供了一種離子液體，其結構式如式I所示，
[0007]
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式I
[0008]本發(fā)明提供的離子液體具體可通過下述方法制備得到:在氮氣保護下，以乙腈作為溶劑，式I所示化合物、N-甲基咪唑和六氟磷酸鉀(KPF6)進行反應得到，所述反應在回流的狀態(tài)下進行；
[0009]
【權利要求】
1.一種離子液體，其結構式如式I所示，
2.一種糖肽的合成方法，包括如下步驟: (1)Fmoc保護氨基酸與離子液體通過酯化反應得到離子液體支載的單元； (2)將所述離子液體支載的單元與下述任一種單體進行連接，然后脫去所述離子液體，得到所述糖肽； 1)糖基化氨基酸； 2)糖基化氨基酸與至少一種所述Fmoc保護氨基酸； Fmoc表示9-荷甲氧羰基。
3.根據權利要求2所述的合成方法，其特征在于:所述離子液體為式I所示離子液體。
4.根據權利要求2或3所述的合成方法，其特征在于:步驟(1)中，所述酯化反應在EDCI和DMAP的作用下進行； 其中，EDCI表示1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽； DMAP表示4- 二甲氨基吡啶。
5.根據權利要求2-3中任一項所述的合成方法，其特征在于:步驟(2)中，所述離子液體支載的單元與所述單體依次通過Fmoc脫保護反應和多肽縮合實現連接； 在三氟乙酸和水的混合液中脫去所述離子液體。
6.根據權利要求5所述的合成方法，其特征在于:所述Fmoc脫保護反應在哌啶的作用下進行。
7.根據權利要求5或6所述的合成方法，其特征在于:所述多肽縮合在HBTU、HOBt和DIPEA的作用下進行； 其中，HBTU表示苯并三氮唑-N，N，N’，N’ -四甲基脲六氟磷酸鹽； HOBt表示1-羥基苯并三唑； DIPEA表示N，N- 二異丙基乙胺。
8.根據權利要求2-7中任一項所述的合成方法，其特征在于:所述糖肽的結構式如式II所示，
9.根據權利要求2-8中任一項所述的合成方法，其特征在于:所述糖基化氨基酸的結構式如式III所示，
【文檔編號】C07K1/06GK103923016SQ201410092568
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年3月13日 優(yōu)先權日:2014年3月13日
【發(fā)明者】李學兵, 李長庚, 張振興 申請人:中國科學院微生物研究所