專利名稱：一種水飛薊賓的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及水飛薊賓的提取純化工藝，特別是一種應(yīng)用硅膠層析和結(jié)晶提取純化水飛薊賓的方法。
背景技術(shù)：
水飛薊賓別名益肝靈、奶薊素、西里馬靈化學(xué)名2, 3-Dihydro-3- (4-hydroxy-3-methoxyphenyl) ~2~ (hydroxymethyl) _6_ (3,5,7-trihydroxy-4-oxobenzopyran-2-yl)benzodioxin分子式和分子量C25H2201Q，482.44<formula>formula see original document page 3</formula>性質(zhì)類白色結(jié)晶性粉末。無(wú)臭、味微苦澀，有引濕性。易溶于丙酮、乙酸乙 酯、甲醇、乙醇，略溶于氯仿，幾乎不溶于水。一水合物(甲醇-水)，mp. 180°C ；無(wú)水物， mp. 1580C (180°C分解)。藥理作用水飛薊賓有明顯的保護(hù)和穩(wěn)定肝細(xì)胞的作用，用于治療急慢性肝炎、肝 硬化、肝中毒等病。對(duì)肝炎患者癥狀、肝功能均有明顯的改善。具有穩(wěn)定細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)生物 膜的作用。具有抗輻射的作用。能抑制甲醛引起的腹膜炎。水飛薊素(Silmyarin，水飛薊總黃酮)是指從菊科藥用植物水飛薊種子的種 皮中提取所得的一種黃酮木脂素類化合物，呈黃色粉末，味苦。主要的活性成分有水 飛薊賓(Silybin)、異水飛薊賓(Isosilybin)、水飛薊亭(Silychristin)和水飛薊寧 (Silydianin)等四種同分異構(gòu)體，有時(shí)也特指水飛薊賓，其中水飛薊賓含量為50 70%。我國(guó)水飛薊素生產(chǎn)廠家眾多，但技術(shù)工藝較為落后。水飛薊賓的制備通常是用乙 酸乙酯法提取，該法水飛薊賓含量少，收率低史勁松，孫達(dá)峰，顧龔平等.水飛薊素提取工 藝的改進(jìn)和探討[J]，中國(guó)野生植物資源.2006，12 (25) :52-54。張守勤等《常溫超高壓提 取水飛薊素的研究》報(bào)道了一種利用超高壓技術(shù)提取水飛薊素的方法，該法壓力條件對(duì)提 取器的要求很高，使得投資成本大大升高；中國(guó)專利CN1317486《丙酮法生產(chǎn)水飛薊素工藝》 報(bào)道了一種用丙酮提取，石油醚脫脂的制備水飛薊賓的方法，該法中脫脂在提取之后，油脂 類成分會(huì)影響提取效果，使提取時(shí)間增加，且石油醚毒性較大，不利于擴(kuò)大生產(chǎn)；又如中國(guó) 專利CN101260105《一種水飛薊賓的提取方法》報(bào)道了一種由水飛薊素開(kāi)始，乙醇回流提取 制水飛薊賓的方法，該法乙醇用量多，能耗大，生產(chǎn)成本高；再如王翠艷等《水飛薊賓提取方法的研究》敘述了回流提取和超聲提取兩種制備水飛薊賓的方法，脫脂都用石油醚且用量 大，用于生產(chǎn)對(duì)人體有很大危害。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了提供一種工藝簡(jiǎn)單，溶劑毒性小，生產(chǎn)成本低，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè) 化的水飛薊賓提取方法。本發(fā)明的目的是這樣來(lái)實(shí)現(xiàn)的①脫脂將水飛薊種子粉碎為20 40目，加入正己烷脫脂3次，得脫脂粗料；②提取脫脂粗料加入稀乙醇回流提取2 3次，合并得提取液；③萃取提取液減壓濃縮至無(wú)醇味，濃縮液用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯液；④硅膠層析將乙酸乙酯液與硅膠拌樣烘干后上柱，以苯、苯-乙酸乙酯洗脫，合 并得到水飛薊主要成分洗脫液；⑤脫色水飛薊賓洗脫液減壓濃縮為浸膏，以乙醇溶液攪拌加熱直至全部溶解，力口 入活性炭，脫色0. 5 1小時(shí)，過(guò)濾，得脫色液；⑥濃縮結(jié)晶將脫色液減壓濃縮至原體積的40 60%，放冷析出晶體，晶體用熱 乙醇飽和溶解，放冷，析出水飛薊賓，濾出水飛薊賓，重復(fù)2 4次，即得白色結(jié)晶產(chǎn)品。上述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述正己烷每次用量為原料質(zhì)量的8 10 倍量，每次脫脂時(shí)間為1. 5 2小時(shí)。上述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述稀乙醇濃度為40 50%，每次用量為 原料質(zhì)量的4 6倍量。上述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述乙酸乙酯用量為原料質(zhì)量的3 4倍量。上述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述硅膠柱體積為5L，硅膠為200 300目。上述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述分段洗脫過(guò)程為流速均保持5L/h， 先用苯洗脫硅膠直至流出液無(wú)色，再用6 4 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯洗脫至無(wú)色，最后 用2 1 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯洗脫至無(wú)色，2 1 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯洗脫以每 份200ml分段收集，洗脫結(jié)束后用紫外光檢測(cè)，將顯色相同的水飛薊主要成分洗脫液合并。上述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述脫色步驟乙醇溶液濃度為50 60%， 用量為洗脫液濃縮浸膏質(zhì)量的6 8倍量。上述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述脫色步驟活性炭用量為溶液量的 0. 5 1%。上述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述結(jié)晶步驟熱乙醇濃度為70 80%，溫 度為60 70°C。本發(fā)明存在以下優(yōu)點(diǎn)1)選用正己烷取代石油醚、工業(yè)汽油、氯仿等安全性較差的脫脂溶劑，使生產(chǎn)更安全。2)用硅膠層析和分段洗脫的方法能夠以較小的能耗完成水飛薊賓的初級(jí)純化；3)乙醇重復(fù)結(jié)晶可以提高產(chǎn)品純度，同時(shí)比甲醇的毒性更低。
下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 將水飛薊種子粉碎為20目，取10kg(水飛薊賓含量0.96% )加入80L正己烷，脫 脂3次，每次1. 5小時(shí)，濾出藥渣為脫脂粗料。脫脂粗料中加40L40%稀乙醇回流提取3次， 合并提取液后減壓濃縮至無(wú)醇味，加30L乙酸乙酯萃取，得萃取液。將萃取液與200 300 目硅膠拌樣后上5L硅膠柱，以5L/h的流速先后用苯、4 1和2 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯 分段洗脫，各自以流出液無(wú)色為終點(diǎn)，以每份200ml分段收集2 l(v/v)的苯-乙酸乙酯 洗脫液，洗脫結(jié)束后用紫外光檢測(cè)，將顯色相同的13 21段洗脫液合并，減壓回收溶劑，得 浸膏113g。浸膏加入800ml 50%乙醇溶液加熱攪拌至全部溶解，再加入8g活性炭，回流攪 拌，脫色0. 5小時(shí)，濾出活性炭，脫色液減壓濃縮至約480ml，用60°C的70%熱乙醇飽和溶 解，靜置放冷，析出水飛薊賓晶體，濾出晶體，再用相同狀態(tài)熱乙醇重復(fù)結(jié)晶2次，陰干得針 晶成品67g(水飛薊賓含量98. 2% )。實(shí)施例2 將水飛薊種子粉碎為40目，取10kg(水飛薊賓含量0.99% )加入90L正己烷，脫 脂3次，每次1. 5小時(shí)，濾出藥渣為脫脂粗料。脫脂粗料中加50L45%稀乙醇回流提取3次， 合并提取液后減壓濃縮至無(wú)醇味，加35L乙酸乙酯萃取，得萃取液。將萃取液與200 300 目硅膠拌樣后上5L硅膠柱，以5L/h的流速先后用苯、5 1和1 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯 分段洗脫，各自以流出液無(wú)色為終點(diǎn)，以每份200ml分段收集1 l(v/v)的苯-乙酸乙酯 洗脫液，洗脫結(jié)束后用紫外光檢測(cè)，將顯色相同的13 21段洗脫液合并，減壓回收溶劑，得 浸膏119g。浸膏加入900ml 55%乙醇溶液加熱攪拌至全部溶解，再加入6g活性炭，回流攪 拌，脫色0. 6小時(shí)，濾出活性炭，脫色液減壓濃縮至約450ml，用65°C的75%熱乙醇飽和溶 解，靜置放冷，析出水飛薊賓晶體，濾出晶體，再用相同狀態(tài)熱乙醇重復(fù)結(jié)晶3次，陰干得針 晶成品69g(水飛薊賓含量98. 5% )。實(shí)施例3 將水飛薊種子粉碎為40目，取10kg(水飛薊賓含量0.98%)加入100L正己烷，脫 脂3次，每次2小時(shí)，濾出藥渣為脫脂粗料。脫脂粗料中加55L50%稀乙醇回流提取2次， 合并提取液后減壓濃縮至無(wú)醇味，加35L乙酸乙酯萃取，得萃取液。將萃取液與200 300 目硅膠拌樣后上5L硅膠柱，以5L/h的流速先后用苯、6 1和2 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯 分段洗脫，各自以流出液無(wú)色為終點(diǎn)，以每份200ml分段收集2 l(v/v)的苯-乙酸乙酯 洗脫液，洗脫結(jié)束后用紫外光檢測(cè)，將顯色相同的13 21段洗脫液合并，減壓回收溶劑，得 浸膏124g。浸膏加入1000ml 60%乙醇溶液加熱攪拌至全部溶解，再加入5g活性炭，回流 攪拌，脫色1小時(shí)，濾出活性炭，脫色液減壓濃縮至約400ml，用70°C的80%熱乙醇飽和溶 解，靜置放冷，析出水飛薊賓晶體，濾出晶體，再用相同狀態(tài)熱乙醇重復(fù)結(jié)晶4次，陰干得針 晶成品68g(水飛薊賓含量98. 7% )。實(shí)施例4 將水飛薊種子粉碎為40目，取10kg(水飛薊賓含量0.98%)加入100L正己烷，脫脂3次，每次2小時(shí)，濾出藥渣為脫脂粗料。脫脂粗料中加60L50%稀乙醇回流提取2次，合并提取液后減壓濃縮至無(wú)醇味，加40L乙酸乙酯萃取，得萃取液。將萃取液與200 300 目硅膠拌樣上5L硅膠柱，以5L/h的流速先后用苯、4 1和1 l(v/v)的苯-乙酸乙酯 分段洗脫，各自以流出液無(wú)色為終點(diǎn)，以每份200ml分段收集1 l(v/v)的苯-乙酸乙酯 洗脫液，洗脫結(jié)束后用紫外光檢測(cè)，將顯色相同的13 21段洗脫液合并，減壓回收溶劑，得 浸膏126g。浸膏加入1000ml 60%乙醇溶液加熱攪拌至全部溶解，再加入IOg活性炭，回流 攪拌，脫色1小時(shí)，濾出活性炭，脫色液減壓濃縮至約400ml，用60°C的70%熱乙醇飽和溶 解，靜置放冷，析出水飛薊賓晶體，濾出晶體，再用相同狀態(tài)熱乙醇重復(fù)結(jié)晶3次，陰干得針 晶成品71g(水飛薊賓含量99. 2% )。
權(quán)利要求
一種水飛薊賓的制備方法，其特征在于包括以下幾個(gè)步驟①脫脂將水飛薊種子粉碎為20～40目，加入正己烷脫脂3次，得脫脂粗料；②提取脫脂粗料加入稀乙醇回流提取2～3次，合并得提取液；③萃取提取液減壓濃縮至無(wú)醇味，濃縮液用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯液；④硅膠層析將乙酸乙酯液與硅膠拌樣烘干后上柱，以苯、苯-乙酸乙酯洗脫，合并得到水飛薊主要成分洗脫液；⑤脫色水飛薊賓洗脫液減壓濃縮為浸膏，以乙醇溶液攪拌加熱直至全部溶解，加入活性炭，脫色0.5～1小時(shí)，過(guò)濾，得脫色液；⑥濃縮結(jié)晶將脫色液減壓濃縮至原體積的40～60％，放冷析出晶體，晶體用熱乙醇飽和溶解，放冷，析出水飛薊賓，濾出水飛薊賓，重復(fù)2～4次，即得白色結(jié)晶產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述正己烷每次用量為原料 質(zhì)量的8 10倍量，每次脫脂時(shí)間為1. 5 2小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述稀乙醇濃度為40 50%，每次用量為原料質(zhì)量的4 6倍量。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述乙酸乙酯用量為原料質(zhì) 量的3 4倍量。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述硅膠柱體積為5L，硅膠 為200 300目。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述分段洗脫過(guò)程為流速 均保持5L/h，先用苯洗脫硅膠直至流出液無(wú)色，再用6 4 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯洗脫 至無(wú)色，最后用2 1 1 (ν/ν)的苯-乙酸乙酯洗脫至無(wú)色，2 1 1(ν/ν)的苯-乙酸 乙酯洗脫以每份200ml分段收集，洗脫結(jié)束后用紫外光檢測(cè)，將顯色相同的水飛薊主要成 分洗脫液合并。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述脫色步驟乙醇溶液濃度 為50 60%，用量為洗脫液濃縮浸膏質(zhì)量的6 8倍量。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述脫色步驟活性炭用量為 溶液量的0.5 1%。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述水飛薊賓的制備方法，其特征在于所述結(jié)晶步驟熱乙醇濃度為 70 80%，溫度為60 70°C。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種水飛薊賓的制備方法。工藝步驟包括水飛薊種子粉碎為20～40目，用正己烷脫脂3次。脫脂粗料用稀乙醇回流提取。提取液減壓濃縮至無(wú)醇味，用乙酸乙酯萃取，酯相與硅膠拌樣烘干后上柱，以苯、苯-乙酸乙酯洗脫，分段收集，合并得到水飛薊主要成分洗脫液，減壓濃縮，用乙醇溶液溶解，加活性炭攪拌脫色0.5～1小時(shí)，脫色液濾除活性炭，減壓濃縮到原體積40～60％，放冷析出晶體，晶體用熱乙醇結(jié)晶并重復(fù)2～4次，得到產(chǎn)品。采用本發(fā)明生產(chǎn)水飛薊賓，工藝簡(jiǎn)單，溶劑毒性小，生產(chǎn)成本低，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。
文檔編號(hào)C07D407/04GK101817816SQ200910264449
公開(kāi)日2010年9月1日 申請(qǐng)日期2009年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月23日
發(fā)明者劉東鋒, 張翼, 楊成東 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司