水飛薊賓迷迭香酸酯及其制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及水飛薊賓迷迭香酸酯及其制備方法和用途。本發(fā)明的化合物具有保護(hù) 肝細(xì)胞的作用，可以作為治療肝臟損傷及肝纖維化類疾病的藥物。
【背景技術(shù)】
[0002] 肝纖維化是大多數(shù)慢性肝病所共有的病理特征，也是慢性肝炎、肝硬化等進(jìn)一步 發(fā)展、惡化的重要中間環(huán)節(jié)。在國(guó)外、尤其是歐美國(guó)家，引起肝纖維化的病因以酒精中毒占 多數(shù)，約50%~80% ;在中國(guó)，導(dǎo)致肝纖維化的主要原因是感染肝炎病毒。我國(guó)是乙型肝 炎病毒（HBV)感染的高流行區(qū)，約7. 5億人感染過(guò)HBV，慢性HBV攜帶者約1. 2億人。丙型 肝炎病毒感染者更易引起慢性化，而慢性HCV感染者有20%~25%發(fā)展為肝纖維化、肝硬 化。近年來(lái)的研究證實(shí)，肝纖維化在未進(jìn)入肝硬化之前尚有逆轉(zhuǎn)可能，這為肝纖維化的有效 治療帶來(lái)新的希望。目前臨床中肝纖維化患者數(shù)量的不斷增加及病情的發(fā)展迫切需要一批 安全有效、質(zhì)量可控的藥物。
[0003] 天然產(chǎn)物一直是創(chuàng)新藥物和先導(dǎo)化合物的重要源泉。本發(fā)明利用前藥原理，針對(duì) 臨床治療肝纖維化療效較好、但存在生物利用度低等問(wèn)題的天然產(chǎn)物水飛薊賓進(jìn)行結(jié)構(gòu)改 造，以化學(xué)方法將其與同樣具有抗氧化、肝臟保護(hù)作用的天然產(chǎn)物迷迭香酸縮合形成新化 合物水飛薊賓迷迭香酸酯衍生物（Silb-RosA)，以期提高其生物利用度及生物活性。
[0004] 水飛薊賓（Silybin)是由菊科植物水飛薊果實(shí)中分離提取的有效成分，在治療肝 臟疾病領(lǐng)域已有多年的研究及臨床實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。由于其療效明確，安全性高，使其各種制劑 多用于肝病的治療。其主要通過(guò)減少巨噬細(xì)胞釋放促纖維化因子，抑制貯脂細(xì)胞增殖和膠 原合成，抑制了肝星狀細(xì)胞激活等機(jī)制而起到抗纖維化作用。其單用或與其他護(hù)肝藥物聯(lián) 用治療各種肝病，在降酶、保肝、防治肝纖維化等方面均取得一定療效。但由于水飛薊賓不 溶于水和油脂，生物利用度低，吸收不穩(wěn)定，從而影響臨床療效。
[0005] 迷迭香酸（Rosmarinic Acid)是一種在自然界廣泛分布的多酚羥基化合物，具有 抗氧化、抗菌、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)等藥理作用。近年的研究發(fā)現(xiàn)，迷迭香酸對(duì)肝臟的保護(hù)作用 主要通過(guò)以下作用實(shí)現(xiàn)：抑制肝星狀細(xì)胞增殖，降低TNF-α誘導(dǎo)的α-平滑肌肌動(dòng)蛋白、 TGF- β、CTGF表達(dá)，抑制肝線粒體腫脹，提高膜流動(dòng)性，降低丙二醛含量，增強(qiáng)琥珀酸脫氫酶 活性等。其對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷有顯著的保護(hù)作用，并能減輕肝纖維化模型 大鼠的肝纖維化程度和肝組織病理形態(tài)學(xué)改變。
[0006] 與水飛薊賓相比，水飛薊賓和迷迭香酸經(jīng)化學(xué)合成方法縮合得到的新化合物水飛 薊賓迷迭香酸酯（Silb-RosA)水溶性明顯增加，其生物利用度得以提高。初步研究顯示，水 飛薊賓迷迭香酸酯在體內(nèi)迅速分解為水飛薊賓和迷迭香酸，使其可以從各自不同靶點(diǎn)發(fā)揮 肝臟保護(hù)作用；并且其藥效活性明顯優(yōu)于同等摩爾濃度的水飛薊賓或迷迭香酸。
[0007] 綜上所述，本發(fā)明設(shè)計(jì)的水飛薊賓迷迭香酸酯衍生物作為一種前藥分子，在生物 利用度、療效、多靶點(diǎn)作用機(jī)制及安全性等方面有諸多優(yōu)勢(shì)，作為保肝及抗肝纖維化1. 1類 新藥具有較好的開發(fā)價(jià)值和廣闊的應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供式（I)所示的水飛薊賓迷迭香酸酯或其藥用鹽或溶劑 化物：
[0009]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 式（I)所示的水飛薊賓迷迭香酸酯或其藥用鹽或溶劑化物：
其中，式（I)所示的水飛薊賓迷迭香酸酯在立體化學(xué)方面處于以下三種形式之一 ：1〇、 11位的碳原子同時(shí)為R構(gòu)型或同時(shí)為S構(gòu)型，或是二者的混合物。
2. 權(quán)利要求1中所述的水飛薊賓迷迭香酸酯的制備方法，包括將迷迭香酸和水飛薊賓 經(jīng)過(guò)酯化反應(yīng)得到式（I)化合物：
其中，酯化縮合劑為HOBt-EDCl ;溶劑為四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亞砜； 迷迭香酸與水飛薊賓的摩爾比為1:1至1:2 ;迷迭香酸、HOBt、EDCl三者的摩爾比為 1: (1-1. 5) : (1-1. 5);所用堿為三乙胺，迷迭香酸與三乙胺的摩爾比為1:1. 5至1:5 ;反應(yīng)溫 度為室溫至回流；反應(yīng)時(shí)間24-48小時(shí)。
3. 權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，向干燥的反應(yīng)瓶中加入迷迭香酸、水飛薊賓、EDCl和HOBt，用無(wú)水N，N-二 甲基甲酰胺溶解，緩慢滴加三乙胺，室溫?cái)嚢?4-48小時(shí)，停止反應(yīng)后，將反應(yīng)液傾入冰水 中，析出大量固體，固體抽濾干燥后經(jīng)硅膠柱層析純化得到水飛薊賓迷迭香酸酯（I)， 其中，迷迭香酸與水飛薊賓的摩爾比為1:1至1:2 ; 其中，迷迭香酸、HOBt、EDCl三者的摩爾比為I: (1-1. 5) : (1-1. 5); 其中，迷迭香酸與三乙胺的摩爾比為1:1. 5至1:5。
4. 權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，向干燥的反應(yīng)瓶中加入2. 77mmol迷迭香酸、3. 33mmol水飛薊賓、3. 6mmol EDCl和3. 6mmol HOBt，用無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺溶解，緩慢滴加6. 9mmol三乙胺，室溫?cái)?拌48小時(shí)，停止反應(yīng)后，將反應(yīng)液傾入冰水中，析出大量固體，固體抽濾干燥后經(jīng)硅膠柱層 析純化得到水飛薊賓迷迭香酸酯（I)。
5. 權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述硅膠柱層析過(guò)程中所用的洗脫劑為 二氯甲烷和甲醇的混合溶劑，二者的體積比為=50/1~10/1，優(yōu)選為20/1。
6. 權(quán)利要求1中所述的水飛薊賓迷迭香酸酯或其藥用鹽或溶劑化物在制備用于治療 和/或預(yù)防肝臟損傷及肝纖維化類疾病的藥物中的應(yīng)用。
7. 權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，是通過(guò)改善血清ALT、AST水平而實(shí)現(xiàn)的，或者 是通過(guò)抑制肝星狀細(xì)胞HSC-T6而實(shí)現(xiàn)的，或者是通過(guò)抑制TGF-β 1引起的細(xì)胞活化而實(shí)現(xiàn) 的。
8. 如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，所述藥物處于片劑、膠囊劑、注射劑、氣霧劑、栓劑、膜劑、 滴丸劑、口服液或軟膏劑的形式，并且所述藥物是控釋劑型或緩釋劑型。
9. 一種藥物制劑，所述藥物制劑包含權(quán)利要求1中所述的水飛薊賓迷迭香酸酯或其藥 用鹽或溶劑化物作為活性成分，同時(shí)含有藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
10. 如權(quán)利要求9所述的藥物制劑，所述藥物制劑處于片劑、膠囊劑、注射劑、氣霧劑、 栓劑、膜劑、滴丸劑、口服液或軟膏劑的形式，并且所述藥物是控釋劑型或緩釋劑型。
【專利摘要】本發(fā)明涉及式(I)的水飛薊賓迷迭香酸酯及其藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明還涉及式(I)化合物的制備方法及其藥物組合物和醫(yī)藥用途。本發(fā)明的式(I)化合物具有保護(hù)肝細(xì)胞的作用，可以作為治療肝臟損傷及肝纖維化類疾病藥物。。
【IPC分類】A61K31-357, C07D407-04, A61P1-16
【公開號(hào)】CN104744447
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410794771
【發(fā)明人】吳廼峰, 馬曉慧, 韓民, 顏璐璐, 張莉華, 王晶, 褚揚(yáng), 曹晶, 靳元鵬, 周水平, 朱永宏
【申請(qǐng)人】天士力制藥集團(tuán)股份有限公司
【公開日】2015年7月1日
【申請(qǐng)日】2014年12月18日