注射用重組人促紅素凍干粉針劑的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及重組人促紅素制備領域，特別是一種注射用重組人促紅素凍干粉針 劑。
【背景技術】
[0002] 重組人促紅素（rHuEPO)的穩(wěn)定劑常采用人血蛋白，但由于人血白蛋白為血液制 品，不可避免的存在潛在的病毒及交叉感染風險，還有可能發(fā)生蛋白過敏。近來來，眾多研 宄致力于開發(fā)替代人血蛋白的重組人促紅素穩(wěn)定劑。如CN 1832754A披露的一種不含清蛋 白的紅細胞生成素制劑，在藥用量的EPO中添加羥乙基淀粉（HES)，配以谷氨酸、谷氨酰胺 和/或甘氨酸，當制劑中不添加上述特定氨基酸時，需將輕乙基淀粉濃度控制在1-3%才能 獲得較高的高溫貯存穩(wěn)定性。但是，近年來有證據表明，HES存在腎毒性的危害，《美國醫(yī)學 會雜志》[JAMA2013,309(7) :678]披露了 HES增重癥患者急性腎衰和死亡風險，因此羥乙基 淀粉目前在使用過程中存在著較大的風險和爭議，為了提高制劑的安全可靠性，在不必要 的情況下應盡量避免使用。此外，目前的市售產品僅考察重組人促紅素制劑的耐溫度性能， 對于高濕、光照下的穩(wěn)定性鮮有考慮。此外，在復雜的貯存環(huán)境中，貯存溫度經常會出現變 化或反復，因此重組人促紅素制劑還應當可以在復雜多變的溫度下進行貯存，目前還沒有 變溫貯存的相關報道。申請人驚奇地發(fā)現，在采用特定的配伍和配比后，得到重組人促紅素 凍干粉針劑，可以在反復驟變的環(huán)境下貯存，從而得到了本發(fā)明。

【發(fā)明內容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種注射用重組人促紅素凍干粉針劑，不含人血白蛋白，可 常溫、高溫長期保存，特別是可以在溫度反復、多變的貯存環(huán)境下貯存，臨床應用沒有刺激 性以及過敏反應。
[0004] 為了實現上述目的，本發(fā)明提供的一種一種注射用重組人促紅素凍干粉針劑，包 括
[0005] 藥用量的重組人促紅素；
[0006] L-甘氨酸；
[0007] 甘露醇；
[0008] pH調節(jié)劑；
[0009] 不含有其他氨基酸類穩(wěn)定劑。
[0010] 進一步地，還包括吐溫80。
[0011] 優(yōu)選地，各組分的配比為：每1000 ml的凍干粉針劑水溶液中含有 2000000-20000000IU的重組人促紅素、4. 5-5. 5g的L-甘氨酸、45-55g甘露醇、40-45mg的 吐溫80、適量pH調節(jié)劑能夠將溶液pH值維持在6. 4-7. 4。
[0012] 更優(yōu)選地，各組分的配比為：每1000 ml的凍干粉針劑水溶液中含有10000IU的重 組人促紅素、5g的L-甘氨酸、50g甘露醇、43. 2mg的吐溫80、適量pH調節(jié)劑能夠將溶液pH 值維持在6. 9-7. O。
[0013] 優(yōu)選地，所述pH調節(jié)劑為磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉。
[0014] 優(yōu)選地，制備方法為：將準確稱取的磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉用一定體積的注射 用水溶解，溶解完全后，檢測pH值和內毒素；待磷酸鹽緩沖液pH值和內毒素檢測合格后，再 準確稱取或量取L-甘氨酸、吐溫-80、甘露醇、重組人促紅素原液加入到已檢測合格的磷酸 鹽緩沖液中，混合均勻即得配制好的半成品液；將配制好的半成品液用〇. 22 μπι濾膜進行 無菌過濾，對濾后的半成品液進行取樣檢測無菌、pH值、內毒素；待pH值、內毒素檢測結果 合格后，進行無菌灌裝，半加塞；將灌裝好的半成品轉移至凍干機箱體內，關閉凍干機門，啟 動凍干機進行凍干；凍干結束后，向箱體內進無菌高純氮氣，壓塞；將壓好塞的半成品進行 軋蓋；乳蓋結束后包裝。
[0015] 本發(fā)明提供注射用重組人促紅素凍干粉針劑復溶性良好，無需震蕩即可快速溶 解，在常溫、中溫、高溫下均具有優(yōu)秀的穩(wěn)定性，此外，在高濕和光照條件的穩(wěn)定性能也極 佳，能夠更廣泛地適應不同的貯存環(huán)境。
【具體實施方式】
[0016] 為了使本技術領域的人員更好地理解本發(fā)明方案，下面結合【具體實施方式】對本發(fā) 明作進一步的詳細說明。
[0017] 實施例1
[0019] 制備方法：將準確稱取的磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉用一定體積的注射用水溶解， 溶解完全后，取樣送質檢檢測pH值和內毒素；待磷酸鹽緩沖液pH值和內毒素檢測合格后， 再準確稱取或量取L-甘氨酸、吐溫-80、甘露醇、重組人促紅素原液加入到已檢測合格的磷 酸鹽緩沖液中，混合均勻即得配制好的半成品液；將配制好的半成品液用〇. 22 μπι濾膜進 行無菌過濾，對濾后的半成品液進行取樣送質檢測無菌、pH值、內毒素；待pH值、內毒素檢 測結果合格后，進行無菌灌裝，半加塞；將灌裝好的半成品轉移至凍干機箱體內，關閉凍干 機門，啟動凍干機進行凍干；凍干過程為預凍、抽空、干燥；凍干結束后，向箱體內進無菌高 純氮氣，壓塞；將壓好塞的半成品轉移至軋蓋間進行軋蓋；乳蓋結束后交接給包裝間，包裝 人員對半成品進行燈檢、包裝。
[0020] 上述制備過程中，各物料的配比按照上表的成分稱取或量取。（w/ν)表示組分與溶 液質量/體積比，（V/V)表示組分與溶液的體積/體積比（下同）。
[0021] 實施例2
[0027] 制備方法同實施例1。
[0028] 對比例1
[0029]
[0030] 本對比例產品pH值維持在6· 8~7· 0。
[0031] 試驗例1
[0032] 對實施例1中的重組人促紅素凍干粉針劑復溶于注射用水中進行穩(wěn)定性測試，結 果記錄在如下各表中：
[0033] 表1高溫試驗結果
[0035] 表2高濕試驗及光照試驗結果
[0036]
[0037] 表3高溫加速及常溫長期試驗結果
[0038] 注射用重組人促紅素穩(wěn)定性試驗結果一一體外活性（IU/支）
[0040] 試驗例2
[0041] 復溶性檢測：
[0042] 將實施例1產品與市售產品分別溶于等量注射用水中，定性分析溶解效果，見下 表：
[0043] 表4復溶性定性試驗結果
[0044]
[0045] 試驗例3
[0046] 臨床及動物實驗發(fā)現，本發(fā)明中提供的重組人促紅制劑在刺激性、過敏性、溶血性 三方面均無給藥局部毒性，安全可靠。
[0047] 試驗例4
[0048] 變溫貯存試驗
[0049] 試驗方法：取待測凍干粉針劑，以4000IU每支的標準復溶于注射用水中，在變化 的溫度環(huán)境下貯存，溫度變化的方式為：
[0050] 0 ~5 天：32°C;
[0051] 6 ~10 天：45°C;
[0052] 11 ~15 天：25°C;
[0053] 16 ~20 天：32 °C ;
[0054] 21 ~25 天 45°C;
[0055] 從第26天開始按照第0天的溫度設置依次循環(huán)，直至200天結束。
[0057] 由上表結果可知，實施例1中的凍干粉針劑在溫度跨度大且多次反復的變溫條件 貯存下仍能保持較高的生物學活性，而對比例1中的凍干粉針劑在變溫環(huán)境貯存能力差， 在90天時活性便損失將近75%，200天后降低一個數量級。
[0058] 以上對本發(fā)明所提供的一種注射用重組人促紅素凍干粉針劑進行了詳細介紹。本 文中應用了具體個例對本發(fā)明的原理及實施方式進行了闡述，以上實施例的說明只是用于 幫助理解本發(fā)明的核心思想。應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本 發(fā)明原理的前提下，還可以對本發(fā)明進行若干改進和修飾，這些改進和修飾也落入本發(fā)明 權利要求的保護范圍內。
【主權項】
1. 一種注射用重組人促紅素凍干粉針劑，其特征在于，包括 藥用量的重組人促紅素； L-甘氨酸； 甘露醇以及 pH調節(jié)劑； 不含有其他氨基酸類穩(wěn)定劑。2. 根據權利要求1所述的注射用重組人促紅素凍干粉針劑，其特征在于，還包括吐溫 80 〇3. 根據權利要求2所述的注射用重組人促紅素凍干粉針劑，其特征在于，各組分的 配比為：每1000 ml的凍干粉針劑水溶液中含有2000000-20000000IU的重組人促紅素、 4. 5-5. 5g的L-甘氨酸、45-55g甘露醇、40-45mg吐溫80、適量pH調節(jié)劑能夠將溶液pH值 維持在6. 4-7. 4。4. 根據權利要求2所述的注射用重組人促紅素凍干粉針劑，其特征在于，各組分的配 比為：每1000 ml的凍干粉針劑水溶液中含有10000000IU的重組人促紅素、5g的L-甘氨酸、 50g甘露醇、43. 2mg吐溫80、適量pH調節(jié)劑能夠將溶液pH值維持在6. 9-7. 0。5. 根據權利要求1-4中任一所述的注射用重組人促紅素凍干粉針劑，其特征在于，所 述PH調節(jié)劑為磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉。6. 根據權利要求2所述的注射用重組人促紅素凍干粉針劑，其特征在于，制備方法為： 將準確稱取的磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉用注射用水溶解，溶解完全后形成磷酸鹽緩沖液， 檢測其pH值和內毒素；待磷酸鹽緩沖液pH值和內毒素檢測合格后，再準確稱取L-甘氨酸、 吐溫-80、甘露醇和重組人促紅素原液加入到已檢測合格的磷酸鹽緩沖液中，混合均勻即得 配制好的半成品液；將配制好的半成品液用〇. 22 ym濾膜進行無菌過濾，對濾后的半成品 液取樣進行無菌檢測并檢測pH值和內毒素；待pH值和內毒素檢測結果合格后，進行無菌灌 裝，半加塞；將灌裝好的半成品轉移至凍干機箱體內，關閉凍干機門，啟動凍干機進行凍干； 凍干結束后，向箱體內進無菌高純氮氣，壓塞；將壓好塞的半成品進行軋蓋；乳蓋結束后包 裝。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種注射用重組人促紅素凍干粉針劑，包括藥用量的重組人促紅素；L-甘氨酸；甘露醇；pH調節(jié)劑；不含有其他氨基酸類穩(wěn)定劑。該產品不含人血白蛋白，可常溫、高溫長期保存，特別是可以在溫度反復、多變的貯存環(huán)境下貯存。臨床應用沒有刺激性以及過敏反應。
【IPC分類】A61K38/18, A61K9/19, A61K47/18
【公開號】CN104984323
【申請?zhí)枴緾N201510324553
【發(fā)明人】程度勝, 桑建彬, 龍應國, 韓明娣, 薛霞, 郭峰
【申請人】北京四環(huán)生物制藥有限公司
【公開日】2015年10月21日
【申請日】2015年6月12日