藥用菌有效成分的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品的制備或處理的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種藥用菌有效成分的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]藥用菌，含有效成分，具有藥理作用的一類菌物。近代醫(yī)學(xué)研宄表明，藥用菌不僅具有傳統(tǒng)的養(yǎng)生意義，還具增強(qiáng)免疫和抗腫瘤作用。此外，藥用菌在發(fā)揮功效的同時(shí)沒有毒副作用，很多可作為普通菜肴。隨著科學(xué)研宄的深入，藥用菌已成為具有無限開發(fā)潛能的種業(yè)，通過近20年的研宄，現(xiàn)已明確的藥用菌中有效成分有真菌多糖、腺苷、留體、皂甙、三萜類、氨基酸、靈芝酸、界墩果酸等。
[0003]真菌多糖是一種B-型結(jié)構(gòu)的多糖，有三股單聯(lián)結(jié)成的螺旋狀結(jié)構(gòu)物。其一級結(jié)構(gòu)為 B (1-3) (1-4)結(jié)構(gòu)，或?yàn)?B-(1-3) (1-6)結(jié)構(gòu)，或?yàn)?B_(l_4) (1-6)結(jié)構(gòu)，具有 B_(l_3)(1-6)連結(jié)方式的多糖都具有藥理活性。其二級構(gòu)造中得分枝鏈對其藥理活性亦有重大的影響，茯苓多糖是一種B-(1-3)直鏈葡萄糖聚糖并連接一些B-(1-6)的側(cè)鏈，這些側(cè)鏈的存在使其抗腫瘤活性大大下降，將這些側(cè)鏈用化學(xué)方法切除或羧甲基化則可使其具有強(qiáng)烈的抗腫瘤活性。螺旋狀的立體構(gòu)型對其活性的大小亦有重大的影響。所以，真菌多糖的藥理活性決定于其1-3級結(jié)構(gòu)的特性，因此，在提取加工時(shí)要注意加工工藝，防止其三級結(jié)構(gòu)的破壞，而使其活性下降，甚至失活。真菌多糖有胞內(nèi)糖，胞外糖二種，這二種多糖其分子結(jié)構(gòu)，特性略有差異，如云芝的胞內(nèi)糖大多為:B(l-3) (1-4)為主鏈，以B (1-4) (1-6)為側(cè)鏈，并含有30%左右蛋白質(zhì)，而胞外糖為B(l-3)為主鏈，以B(l-3) (1-6)為側(cè)鏈，不含蛋白質(zhì)的葡聚糖，子實(shí)體中的多糖構(gòu)造則為B(l-3)為主鏈，B(l-6)為側(cè)鏈，這三種多糖都有藥理活性。
[0004]腺苷是一種分子量較小的有機(jī)物，但活性很強(qiáng)，其功能是降低血凝，擴(kuò)張血管，改善機(jī)體血液循環(huán)。高血脂病人，血管狹窄常常會使機(jī)體血液循環(huán)受影響，從而出現(xiàn)頭暈、胸悶、記憶力衰退及眩暈，其病因是內(nèi)耳的前庭血管或別的血管血流受阻，使得平衡器官失靈，造成眩暈，嘔吐等癥，而少量的腺苷，一個(gè)成人只要服幾微克就能使前庭血管擴(kuò)張，血流順利通過而使眩暈的癥狀消失。
[0005]三萜類化合物是藥用菌的主要化學(xué)成分之一，具有抗腫瘤、抗病毒以及保肝等作用。
[0006]赤芝孢子內(nèi)酯A具有降膽固醇作用，赤芝孢子酸A具有降轉(zhuǎn)氨酶活性，靈芝堿甲、乙及乙酸化合物有抗炎活性，尿嘧啶及尿嘧啶核苷對肌強(qiáng)直癥小鼠血清醛縮酶有活性，腺嘌呤核苷具有鎮(zhèn)靜，抗缺氧，降血清膽固醇等作用，芥墩果酸具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈的功能，竹紅菌素具有活血化淤作用，甘露醇具有潤肺效果，三萜類具有止痛之效，麥角固醇，皂甙等有改善機(jī)體生理功能的效果。
[0007]目前藥用菌常規(guī)的提取方法如有機(jī)溶劑、煎煮法和浸漬法都存在不少問題:(I)得到的提取液成分單一，只提取了部分活性物質(zhì)，造成其他有效成分的流失，包括維生素在內(nèi)的活性物質(zhì)大部分被破壞；(2)各成分間在高溫提取條件下容易發(fā)生絡(luò)合、水解、氧化還原等化學(xué)反應(yīng)，使原始成分發(fā)生改變；(3)常溫下以水為溶劑提取時(shí)，提取液容易發(fā)生酶解和因微生物增殖而變質(zhì)；(4)石油醚和乙醇等有機(jī)溶劑在較高溫度下易揮發(fā)，甚至發(fā)生燃燒的危險(xiǎn)；(5)能耗高、收率低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種藥用菌有效成分的提取方法。解決當(dāng)前提取方法能耗高、酶解反應(yīng)時(shí)間長、有效成分提取率低、活性物質(zhì)在提取過程中被破壞較多的問題。
[0009]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
[0010]一種藥用菌有效成分的提取方法，其特征在于，包括如下步驟:
[0011](I)將藥用菌原料粉碎，粉碎后直徑為75 μπι?300 μπι ;
[0012](2)向粉碎后的藥用菌原料中加入混合酶進(jìn)行酶解，加入混合酶的量為藥用菌原料的1_3%，同時(shí)加入酶激活劑，酶解溫度為20°C -45°C, pH值為4-9，酶解反應(yīng)進(jìn)行40min_100min ；
[0013](3)將酶解后所得產(chǎn)物過濾，收集提取液，得藥用菌有效成分。
[0014]優(yōu)選地，所述步驟(2)中的混合酶選自纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、無花果蛋白酶、葡萄糖淀粉酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、異淀粉酶中的兩種以上。
[0015]優(yōu)選地，所述步驟(2)中酶激活劑為金屬離子或氯離子。
[0016]優(yōu)選地，所述步驟(I)中將新鮮的藥用菌原料進(jìn)行粉碎。
[0017]優(yōu)選地，所述步驟(3)中過濾孔徑為0.15μηι?150 μπι。
[0018]優(yōu)選地，所述酶激活劑的加入量為混合酶量的0.1-0.4%。
[0019]優(yōu)選地，所述藥用菌為經(jīng)海洋性培養(yǎng)基培養(yǎng)的藥用菌，所述海洋性培養(yǎng)基包括魚鱗蛋白混合粉。
[0020]優(yōu)選地，所述藥用菌選自靈芝、猴頭菇、云芝、茯苓、豬苓、桑黃。
[0021]本發(fā)明提供的藥用菌有效成分提取方法，在20°C _45°C的溫度范圍內(nèi)以混合酶進(jìn)行酶解，輔以酶激活劑，反應(yīng)40min-100min，過濾得含藥用菌有效成分的提取液，提取率達(dá)70% _90%，本發(fā)明提供的提取方法產(chǎn)率高能耗低、對藥用菌的有效成分的破壞小，提取時(shí)間較現(xiàn)有提取方法明顯縮短，提取物中的三萜和腺苷含量較現(xiàn)有提取方法大幅度提高，且操作簡單、成本較低。
【具體實(shí)施方式】
[0022]下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步描述。
[0023]實(shí)施例1
[0024]藥用菌有效成分的提取方法，包括如下步驟:
[0025](I)將Ikg藥用菌原料粉碎，粉碎后直徑為75 μπι?300 μπι ;
[0026](2)向粉碎后的藥用菌原料中加入酶進(jìn)行酶解，加入酶的量為總反應(yīng)體系的1_2%，同時(shí)加入酶激活劑，提取過程溫度為20°C -45°C, pH值為4-9，酶解反應(yīng)進(jìn)行40min_100min ；
[0027](3)將酶解后所得產(chǎn)物過濾，收集提取液，得藥用菌有效成分。
[0028]本實(shí)施例中的藥用菌為桑黃，加入纖維素酶和果膠酶各I %，加入酶激活劑為金屬離子，如Mg2+、Na+或Ca2+，加入量為酶量的0.1%。反應(yīng)體系中可加入2_5倍水為酶解反應(yīng)料液，將藥用菌原料進(jìn)行粉碎，粉碎后直徑達(dá)150 μπι?？蛇x的，藥用菌原料為新鮮的或經(jīng)過干燥處理，優(yōu)選新鮮的藥用菌。
[0029]本實(shí)施例中提取過程溫度為45°C，反應(yīng)時(shí)間為lOOmin，分別采用pH值為4、5、6、
7、8、9進(jìn)行提取。酶解后對產(chǎn)物進(jìn)行過濾，可通過孔徑為10 μ m，收集濾液即含藥用菌有效成分的提取液。進(jìn)一步濃縮、脫蛋白后得提取物，通過提取物重量比上原料重量計(jì)算獲得有效成分的比率，計(jì)算方法參見“應(yīng)用原態(tài)提取法提取食藥用菌活性物質(zhì)的抗衰老功效研宄”(《食用菌學(xué)報(bào)》，2008.15(1):42-46)中1.3.3提取方法對比試驗(yàn)部分。
[0030]以pH 為 6，反應(yīng)時(shí)間為 10min，溫度分別為 20 °C、25 °C、30 °C、35 °C、40 °C、45 °C，進(jìn)行提??；以溫度為 40°C，pH為 6，反應(yīng)時(shí)間分別為 20min、30min、40min、50min、60min、70min、80min、90min、lOOmin，進(jìn)行提??；所得有效成分均為70%以上，最高可達(dá)90%。
[0031]此外，本實(shí)施例中酶還可以選用纖維素酶、半