專利名稱：水飛薊賓二偏琥珀酸酯及其藥用鹽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及用于治療肝病的水飛薊賓二偏琥珀酸酯及其藥用鹽，以及其制備方法，還涉及一種包含該水飛薊賓二偏琥珀酸酯或其藥用鹽的藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物具有期望的良好性質(zhì)。
背景技術(shù)：
近年來，隨著人們生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的變化，我國(guó)脂肪肝發(fā)病率己接近乙肝病毒攜帶率，并呈明顯上升趨勢(shì)。其中，30 40歲的男性是脂肪肝患者大軍中的“主力”，基本占到全部脂肪肝患者的1/4。據(jù)估計(jì)，現(xiàn)在脂肪肝發(fā)病率較20世紀(jì)80年代以前增加了 30倍左右。據(jù)報(bào)道15%脂肪肝患者會(huì)發(fā)展成肝硬化，3%的脂肪肝患者會(huì)死于肝衰竭。因此脂肪肝及早預(yù)防和治療具有非常重要的意義。肝炎是指由于不同病因的肝臟炎癥，日常生活中病毒性肝炎最常見，它具有發(fā)病率高，病程長(zhǎng)，病勢(shì)反復(fù)性強(qiáng)，危害性大的特點(diǎn)，若不進(jìn)行及時(shí)治療，有轉(zhuǎn)變?yōu)楦斡不案伟┑目赡堋Ｎ覈?guó)又是肝炎高發(fā)的國(guó)家，據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)有超過1.2億人感染乙肝病毒，慢性乙肝病人約3000萬，3800萬人攜帶丙肝病毒，僅從乙肝病毒攜帶者的數(shù)字來說，差不多占國(guó)民十分之一。

目前，雖然肝病藥物種類很多，但尚無一種藥物能真正殺滅乙肝病毒。目前多采用抑制病毒復(fù)制、或改善癥狀、控制病情發(fā)展兩種治療思路。前者雖然能快速抑制病毒復(fù)制，但存在長(zhǎng)期用藥風(fēng)險(xiǎn)。如肝病一線藥物拉米夫定雖可以將乙肝病毒抑制在較低水平(DNA〈103拷貝/ml)，但需要長(zhǎng)期用藥(通常2_3年)，并不能隨意停用，不僅費(fèi)用高昂，而且長(zhǎng)期用藥直接導(dǎo)致部分患者乙肝病毒出現(xiàn)耐藥變異株，病情更趨復(fù)雜。因此，研制一種能有效改善肝病癥狀、適合長(zhǎng)期用藥、且價(jià)格合理的藥物，用于肝臟疾病的預(yù)防和治療，符合當(dāng)前的國(guó)情，滿足臨床需要。水飛薊，菊科，是優(yōu)良的護(hù)肝植物，其主要成分為水飛薊賓(silybin)。藥理實(shí)驗(yàn)證明，水飛薊賓有保護(hù)肝細(xì)胞膜，改善肝功能的作用，預(yù)防多種肝臟毒物所致的肝損傷，促進(jìn)肝細(xì)胞再生，主要用于治療各種急慢性肝炎、初期肝硬化和肝中毒等癥。水飛薊賓非常難溶于水，限制了其口服吸收，成鹽后水溶性明顯增加。目前，主要研究集中在水飛薊賓葡甲胺鹽和水飛薊賓磷脂復(fù)合物。西利賓安片的主要成分即是水飛薊賓葡甲胺，但仍存生物利用度不高的缺點(diǎn)。水林佳的主要成分是水飛薊賓卵磷脂復(fù)合物，雖然通過改善脂溶性在一定程度上提高了生物利用度，但是其水溶性仍較差。影響體內(nèi)生物利用度的因素包括劑型因素和生理因素兩個(gè)方面:劑型因素如藥物的脂溶性、水溶性和PKa值，藥物的劑型特性(如崩解時(shí)限、溶出速率)及一些工藝條件的差別；生理因素包括胃腸道內(nèi)液體的作用，藥物在胃腸道內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)情況，吸收部位的表面積與局部血流，藥物代謝的影響，腸道菌株及某些影響藥物吸收的疾病等。由此，一個(gè)藥物在體內(nèi)的吸收情況不僅與藥物本身的脂溶性有關(guān)，而且水溶性也是一關(guān)鍵參數(shù)。水飛薊賓二偏琥珀酸酯鈉鹽是一種水飛薊賓的衍生物，其在水溶性方面顯著優(yōu)于水飛薊賓，據(jù)信其具有降低血清中游離脂肪酸和甘油三酯的含量、調(diào)節(jié)磷脂代謝的紊亂、清除氧自由基、抑制脂質(zhì)過氧化、穩(wěn)定肝細(xì)胞膜、減輕脂肪變性、對(duì)抗肝細(xì)胞壞死的功能，可用于鬼筆鵝膏引起的急性肝中毒的治療，還可用于急性、慢性肝損傷的治療，以及用于脂肪肝和酒精肝所造成的肝功能異常的恢復(fù)。CN101302212A公開了水飛薊賓二偏琥珀酸酯及其鹽類的制備方法和用途，這種據(jù)說有效的制備方法是使水飛薊賓在適合的有機(jī)溶劑中與丁二酸酐反應(yīng)合成得到水飛薊賓丁二酯單甲酯，然后在特定的介質(zhì)中與氫氧化鈉反應(yīng)生成氟苯尼考丁二酸酯鈉鹽而實(shí)現(xiàn)的。CN101244041A公開了一種用于預(yù)防及治療急性肝損傷的藥物及其制備方法。該發(fā)明專利文獻(xiàn)具體涉及一種成分為水飛薊賓丁二酸鈉凍干粉針的制備方法，包括以下步驟:(1)將水飛薊賓丁二酸鈉溶解于注射用水中，充分?jǐn)嚢璩扇芤海?2)于上述溶液加入甘露醇或乳糖使溶解；(3)將上述溶解用活性炭加熱脫色并用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH7 9，過濾；(4)濾液無菌分裝，冷凍干燥，即得。盡管人們?cè)谑褂盟w薊賓產(chǎn)品例如水飛薊賓或其衍生物如水飛薊賓二偏琥珀酸酯或其鹽等方面，然而人們?nèi)匀黄诖幸环N改進(jìn)的方法來治療或預(yù)防肝臟等與水飛薊賓或其衍生物所治療的相關(guān)疾病，特別是期待有一種改進(jìn)的方法使用水飛薊賓二偏琥珀酸酯或其鹽來治療與肝臟相關(guān)的疾病
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種改進(jìn)的方法來治療或預(yù)防肝臟等與水飛薊賓或其衍生物所治療的相關(guān)疾病，特別是期待有一種改進(jìn)的方法使用水飛薊賓二偏琥珀酸酯(亦可稱為水飛薊賓二琥珀酸半酯)或其鹽來治療與肝臟相關(guān)的疾病。本發(fā)明人出人意料的發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明水飛薊賓二偏琥珀酸或其鹽顯示出積極的生物和/或物理和/或化學(xué)方面的效果。本發(fā)明基于此發(fā)現(xiàn)而得以完成。因此，本發(fā)明第一方面提供了一種化合物，其為下述式I化合物的四種異構(gòu)體的組合:
權(quán)利要求
1.一種化合物，其為下述式I化合物的四種異構(gòu)體的組合:
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述金屬離子是堿金屬離子或者堿土金屬離子；或者，其中X各自獨(dú)立地表示氫、鈉離子、鉀離子、鋰離子、鎂離子、或鈣離子。
3.根據(jù)權(quán)利要求1至2的化合物，其中包含式I化合物的四種異構(gòu)體，所述四種異構(gòu)體占該化合物總重量的95%以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3的化合物，照高效液相色譜法測(cè)定，其在色譜圖中按出峰先后順序依次出現(xiàn)稱之為第一色譜峰和第二色譜峰以及第三色譜峰和第四色譜峰的四個(gè)主要色譜峰，所述第一色譜峰和第二色譜峰以及第三色譜峰和第四色譜峰四者的峰面積之和占總峰面積的95%以上。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4的化合物，照高效液相色譜法測(cè)定，其在色譜圖中按出峰先后順序依次出現(xiàn)稱之為第一色譜峰和第二色譜峰以及第三色譜峰和第四色譜峰的四個(gè)主要色譜峰，其中所述第二色譜峰峰面積是所述第一色譜峰峰面積的0.5^1.5倍，所述第三色譜峰峰面積是所述第一色譜峰峰面積的4.5^13.5倍，所述第四色譜峰峰面積是所述第一色譜峰峰面積的4.5^13.5倍；或者，所述E峰、F峰、G峰、H峰四者峰面積比為1: (0.5^1.5):(4.5 13.5):(4.5 13.5)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其中所述第一色譜峰和第二色譜峰在所述高效液相色譜法測(cè)定條件下二者的分離度大于0.8 ;和/或，其中所述第三色譜峰和第四色譜峰在所述高效液相色譜法測(cè)定條件下二者的分離度大于1.0。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6的化合物，其中高效液相色譜法具有使所述第一色譜峰和第二色譜峰能夠達(dá)到分離度大于0.8的高效液相色譜法測(cè)定條件；和/或，其中高效液相色譜法具有使所述第三色譜峰和第四色譜峰能夠達(dá)到分離度大于1.0的高效液相色譜法測(cè)定條件。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7的化合物，其中所述高效液相色譜法測(cè)定是按包括如下“⑴色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)”方式進(jìn)行的: (i)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以.0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液(用磷酸調(diào)pH值至4.0)—甲醇(50:50)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為288nm，柱溫為30° C ;取參比品水飛薊賓適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每Iml中含水飛薊賓200 μ g的溶液，作為參比品貯備液；另取該參比品貯備液用流動(dòng)相稀釋成20 μ g/ml的溶液，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液，取該系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液20 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖；該色譜圖中按出峰先后順序依次出現(xiàn)稱之為A峰和B峰的兩個(gè)主要色譜峰，調(diào)整A峰的保留時(shí)間在6-9min之間，并且A峰和B峰的分離度應(yīng)大于1.0 (例如大于1.2，例如大于1.5,例如大于2)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8的化合物，其中色譜純度和峰面積比測(cè)定的一個(gè)典型實(shí)例是按包括如下“(ii)色譜純度和峰面積比測(cè)定法”方式進(jìn)行的: ( )色譜純度和峰面積比測(cè)定法:取本發(fā)明化合物適量，加流動(dòng)相溶解并制成濃度為.0.5mg/ml的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置IOOml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液；采用本發(fā)明所述(i)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)中的方法，取對(duì)照溶液20 μ I注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分H色譜峰的峰高約為滿量程的20% ；精密量取供試品溶液和對(duì)照溶液各20 μ 1，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至H色譜峰保留時(shí)間的2倍；供試品溶液色譜圖中任何小于對(duì)照溶液色譜圖中H色譜峰面積0.05倍的色譜峰忽略不計(jì)；記錄供試品溶液色譜圖中主峰E峰、F峰、G峰和H峰的峰面積以及各雜質(zhì)峰面積，E峰、F峰、G峰和H峰的峰面積之和除以全部峰面積之和的百分?jǐn)?shù)，即為本發(fā)明化合物色譜純度，另外分別以F峰、G峰和H峰的峰面積除以E峰峰面積可以分別算得F峰、G峰和H峰與E峰之間的峰面積比。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至9的化合物，照高效液相色譜法測(cè)定，以水飛薊賓為參比品，并以水飛薊賓的A峰作為計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間的參比峰，本發(fā)明化合物的第一色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間(RRt)為1.7 2.4，本發(fā)明化合物的第二色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間(RRt)為1.85 2.55，本發(fā)明化合物的第三色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間(RRt)為2.Γ3.2，本發(fā)明化合物的第四色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間(RRt)為2.8^3.6。
11.根據(jù)權(quán)利要求1 至10的化合物，照高效液相色譜法測(cè)定，以水飛薊賓為參比品，并以水飛薊賓的A峰作為計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間的參比峰，本發(fā)明化合物的第一色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間(RRt)為1.7 2.4，本發(fā)明化合物的第二色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間(RRt)為.1.85^2.55，本發(fā)明化合物的第三色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間(RRt)為2.Γ3.2，本發(fā)明化合物的第四色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間(RRt)為2.8 3.6，所述高效液相色譜法測(cè)定相對(duì)保留時(shí)間是按包括如下的方式進(jìn)行的: (i)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以.0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液(用磷酸調(diào)pH值至4.0)—甲醇(50:50)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為288nm，柱溫為30° C ;取參比品水飛薊賓適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每Iml中含水飛薊賓200 μ g的溶液，作為參比品貯備液；另取該參比品貯備液用流動(dòng)相稀釋成20 μ g/ml的溶液，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液，取該系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液20 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖；該色譜圖中按出峰先后順序依次出現(xiàn)稱之為A峰和B峰的兩個(gè)主要色譜峰，調(diào)整A峰的保留時(shí)間在6-9min之間，并且A峰和B峰的分離度應(yīng)大于1.0 (例如大于1.2，例如大于1.5,例如大于2)； (iii)相對(duì)保留時(shí)間(RRt)的測(cè)定:取本發(fā)明化合物適量，加流動(dòng)相溶解并制成濃度為0.5mg/ml的溶液，作為供試品貯備液；精密量取供試品貯備液1ml，置IOml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，制成包含本發(fā)明化合物濃度約為50μ g/ml的溶液，作為供試品測(cè)試溶液I ;另精密量取供試品貯備液Iml和參比品貯備液2.5ml，置IOml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，制成包含本發(fā)明化合物和參比品水飛薊賓濃度分別約為50 μ g/ml的溶液，作為供試品測(cè)試溶液II ;精密量取20 μ I的供試品測(cè)試溶液II，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至H色譜峰保留時(shí)間的2倍；記錄色譜圖中由水飛薊賓產(chǎn)生的兩個(gè)主要色譜峰A峰和B峰以及由本發(fā)明化合物產(chǎn)生的四個(gè)主要色譜峰E峰、F峰、G峰和H峰的保留時(shí)間，用E峰的保留時(shí)間除以A峰的保留時(shí)間即為E峰的相對(duì)保留時(shí)間，用F峰的保留時(shí)間除以A峰的保留時(shí)間即為F峰的相對(duì)保留時(shí)間，用G峰的保留時(shí)間除以A峰的保留時(shí)間即為G峰的相對(duì)保留時(shí)間，用H峰的保留時(shí)間除以A峰的保留時(shí)間即為H峰的相對(duì)保留時(shí)間。
12.根據(jù)權(quán)利要求1至11的化合物,其為下述式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的四種異構(gòu)體的組合:
13.根據(jù)權(quán)利要求1至12的化合物，其為下述式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的四種異構(gòu)體的組合:.CH2OCOCH2CH2COOX
14.根據(jù)權(quán)利要求1至13的化合物，其為下述式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的四種異構(gòu)體的組合:
15.一種藥物組合物，其中包含權(quán)利要求1-14任一項(xiàng)所述化合物以及任選的藥用輔料。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的藥物組合物，其中包含作為活性成分的下述式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的四種異構(gòu)體以及任選的藥用輔料:
17.根據(jù)權(quán)利要求15至16的藥物組合物，其中包含作為活性成分的下述式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的四種異構(gòu)體以及任選的藥用輔料:
18.根據(jù)權(quán)利要求15至17的藥物組合物，其中包含作為活性成分的下述式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的四種異構(gòu)體以及任選的藥用輔料:
19.根據(jù)權(quán)利要求15至18的藥物組合物，其照高效液相色譜法測(cè)定，不計(jì)輔料色譜峰，在色譜圖中按出峰先后順序依次出現(xiàn)稱之為第一色譜峰和第二色譜峰以及第三色譜峰和第四色譜峰的四個(gè)主要色譜峰，所述第一色譜峰、第二色譜峰、第三色譜峰和第四色譜峰四者的峰面積之和占總峰面積的95%以上。
20.制備權(quán)利要求1至14任一項(xiàng)所述化合物的方法，其包括以下步驟: (a)酯化步驟:使下式所示水飛薊賓:
21.權(quán)利要求1至14任一項(xiàng)所述化合物在制備用于治療、改善或預(yù)防肝臟疾病的藥物中的用途。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的用途，其中所述肝臟疾病選自:因鬼筆鵝膏引起的急性肝中毒，急慢性肝炎，初期肝硬化 ，中毒性肝損害，脂肪肝所致肝功能異常，酒精肝所致肝功能異常。
全文摘要
本發(fā)明涉及水飛薊賓二偏琥珀酸酯及其藥用鹽。具體講，本發(fā)明提供了一種化合物，其為下述式I化合物四種異構(gòu)體的組合其中各個(gè)X各自獨(dú)立地表示氫或金屬離子。本發(fā)明還提供了制備所述化合物的方法以及所述化合物的制藥用途。本發(fā)明化合物具有積極的生物和/或物理和/或化學(xué)方面的效果。
文檔編號(hào)G01N30/02GK103113359SQ20131005706
公開日2013年5月22日 申請(qǐng)日期2013年2月22日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月22日
發(fā)明者曾韶輝, 王偉, 梅丹, 傅衛(wèi)國(guó), 甘劍征 申請(qǐng)人:西安安健藥業(yè)有限公司