專利名稱：S-腺苷-l-甲硫氨酸對甲苯磺酸硫酸雙鹽的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及生物工程的生化分離領域，更具體地說，本發(fā)明涉及一種S-腺苷-L-甲硫氨酸對甲苯磺酸硫酸雙鹽的制備方法。
背景技術：
S-腺苷-L-甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine，SAM, SAMe 或 AdoMet)是甲硫氨酸的有機四價硫形式(金屬锍)的磺?；衔铮环Q為“活性甲硫氨酸”，是廣泛存在于生物體內(nèi)的一種重要代謝中間體，1952年首先由Cantoni發(fā)現(xiàn)。SAM是雙手性物質(zhì)，具有2種異構(gòu)體(R，S) -SAM和(S，S) -SAM,只有(S，S) -SAM具有生物活性。在生物體內(nèi)，SAM是由L-甲硫氨酸(L-Met)和三磷酸腺苷(ATP)經(jīng) SAM 合成酶(S-adenosylmethionine synthetase) 催化合成。由于SAM含有一個能激活相鄰碳原子的親核攻擊反應的高能锍原子，因而具有轉(zhuǎn)甲基、轉(zhuǎn)硫基、轉(zhuǎn)氨丙基等作用。SAM參與了體內(nèi)40多種生化反應，與蛋白質(zhì)、核酸、神經(jīng)遞質(zhì)、磷脂質(zhì)和維生素的合成密切相關，并連接多胺和谷胱甘肽的轉(zhuǎn)化。在歐洲，SAM已作為處方藥廣泛用于肝病、抑郁癥、關節(jié)炎等疾病的治療；在美國，已經(jīng)成為一種暢銷的保健品。 我國有眾多的肝炎、關節(jié)炎以及抑郁癥患者，SAM的需求量也將不斷增長，產(chǎn)品的市場開發(fā)前景廣闊。SAM分子由于高能锍離子的存在，表現(xiàn)出極端的不穩(wěn)定性。無論是溶液或是干燥狀態(tài)，室溫或高于室溫，中性或堿性條件下，均能生成不同的降解產(chǎn)物。SAM的失活反應可按照 3種不同的機理進行，最主要的失活反應是通過氨基酸鏈上的羧基氧對Y-碳原子進行分子內(nèi)親核攻擊，從而裂解形成5’-甲硫腺苷(5’-methylthi0aden0Sine，MTA)和高絲氨酸內(nèi)酯(homoserine)，隨后內(nèi)酯水解；其次是(S，S)_SAM自發(fā)消旋為非生物活性的(R，S)_SAM。 此外，SAM進行水解，生成腺嘌呤(adenine)和S-戊糖甲硫氨酸(S-pentosylmethionine)。SAM硫酸鹽和SAM鹽酸鹽在干燥、低溫條件下，穩(wěn)定性仍較差，因此只能被用于一般生化研究。US3954726,US4028183證實SAM的對甲苯磺酸硫酸雙鹽的穩(wěn)定性比單純的SAM 鹽酸鹽、硫酸鹽有很大的提高，在45°C干燥條件下，前者6個月后基本沒有損失，而后兩者 6個月后全部損失；因此，臨床上使用的SAM鹽主要是SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽。目前有許多關于SAM雙鹽制備以及通過添加物來提高穩(wěn)定性的報道。US39547^、US4057686雖然均能夠制得較純的SAM雙鹽，但由于需要價格較高的反應物，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。EPA0141914 雖然提供了一種適合工業(yè)化生產(chǎn)的SAM雙鹽制備方法，但其破碎用的乙酸乙酯有機溶劑不易回收，且需要對廢菌絲體進行干燥，避免其上殘留的有機溶劑揮發(fā)。此外，樹脂的處理能力有限，相同處理量需要的樹脂量較大，洗脫液需要經(jīng)過另一種樹脂處理，以吸附其中的雜質(zhì)，步驟復雜。EPA1091001采用的破碎方式很環(huán)保，但其對設備要求嚴格。其選用的樹脂有較高的交換容量，但其除雜能力有限，洗脫后需要選用樹脂脫色。Cm907996其破碎需要用有機溶劑，回收困難；離子交換過程洗脫步驟復雜，耗水量大；需要過陰離子交換柱脫色濃縮；洗脫液產(chǎn)品濃度低，濃縮12倍后的濃度類似于本專利未濃縮的濃度。姚進孝，等人，“熱水提取釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸的研究，生物加工過程，2008,6 (1)，74 77”，采用熱水法直接提取釀酒酵母胞內(nèi)產(chǎn)物S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)， 并對影響SAM抽提的反應條件進行了優(yōu)化，得出的最佳實驗條件為每30g濕菌體加入熱水 100mL、硫酸濃度0. 25mol/L、攪拌轉(zhuǎn)速160r/min，反應溫度70 76°C、反應時間lOmin。采用該方法SAM的抽提率可達90%以上。但是，SAM是一種熱不穩(wěn)定性物質(zhì)，當溶液溫度大于 60°C時，SAM的降解速率迅速增大。當反應時間超過30min時，SAM嚴重降解，SAM的抽提率降低到50%以下。尤其是隨著處理量增大，受熱不均勻程度增加，升溫和降溫速度減小，導致菌體大量降解，SAM的抽提率降低，造成較大的SAM損失。因此，為降低SAM降解率，減小 SAM的損失，SAM提取過程要求嚴格控制反應溫度和反應時間，并要求系統(tǒng)具有較高的升溫及降溫速度，對設備和操作要求較高，成本較高，該方法僅限于實驗室使用，不適于工業(yè)應用。目前，需要開發(fā)一種適合工業(yè)化生產(chǎn)的、低損耗、低成本、高收率、高純度的SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽的制備技術。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術問題是針對上述現(xiàn)有技術的不足，提供一種S-腺苷-L-甲硫氨酸對甲苯磺酸硫酸雙鹽的制備方法。該方法用于制備SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽，處理量大，純度高，收率高，成本低廉，并適于工業(yè)化生產(chǎn)。為此，本發(fā)明提供了 1. 一種S-腺苷-L-甲硫氨酸對甲苯磺酸硫酸雙鹽的制備方法，包括步驟A，收集菌體；步驟B，提取SAM，制得SAM萃取液； 步驟C，對SAM萃取液進行超濾，制得SAM濾液；步驟D，采用離子交換法對SAM濾液進行離子交換處理，制得SAM洗脫液；步驟E，對SAM洗脫液進行沉淀處理，制得SAM沉淀；步驟F，制備SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液；步驟G，干燥SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽；其中，步驟B采用酸熱法對步驟A所收集的菌體進行破碎及萃取，反應溫度為 30 60°C，反應時間控制在0. 5 池。步驟B的反應溫度優(yōu)選為45 55°C。在本發(fā)明的一個實施例中，在制備SAM的發(fā)酵過程中，采用釀酒酵母高密度發(fā)酵， 通過補加前體L-甲硫氨酸，使所得到的發(fā)酵液具有較高的富含SAM的菌體含量。步驟A，在 4°C條件下，以6000rpm的轉(zhuǎn)速將發(fā)酵液離心處理lOmin，收集菌體。根據(jù)本發(fā)明方法，步驟B的反應過程中均質(zhì)機的轉(zhuǎn)速控制在300 lOOOOrpm。步驟B中所述酸為硫酸溶液，其濃度為0. 1 0. 5M，用量為2 5L/kg濕菌體。采用冷水將細胞破碎液降溫，并在4°C條件下，以6000rpm轉(zhuǎn)速離心處理lOmin，收集上清液，得到SAM萃取液，SAM萃取液收率為85% 90%。在本發(fā)明的一個實施例中，步驟C采用超濾膜對SAM萃取液進行超濾處理，以除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。所述超濾膜為截留分子量為6000 10000的超濾膜。超濾步驟損失很少， SAM濾液收率大于98%。根據(jù)本發(fā)明方法，步驟D包括用離子交換樹脂處理SAM濾液，使SAM吸附于離子交換樹脂表面，然后用去離子水洗脫雜質(zhì)，再用洗脫劑洗脫SAM，其中，所述離子交換樹脂為大孔弱酸性離子交換樹脂。所述離子交換樹脂的交換容量為90 120g SAM/L樹脂。根據(jù)本發(fā)明方法，離子交換處理過程中通過15% 20%的NaOH將pH控制在4 7。該離子交換樹脂對雜質(zhì)吸附量少，除雜過程簡單。在本發(fā)明的一個實施例中，步驟D中所述SAM濾液的進料濃度為4 10g/L，進料速度為1 4BV/h (BV為柱體積)，進料量為12 22. 5BV。所述去離子水的流速為1 4BV/ h，用量為4 6BV。所述洗脫劑為硫酸溶液，其濃度為0. 05 0. 25M，流速為1 4BV/h。 所制得的洗脫液中SAM濃度為22 35g/L，SAM洗脫液回收率為93 96%。在本發(fā)明的另一個實施例中，步驟E將相當于洗脫液體積6 10倍的丙酮加入 SAM洗脫液進行沉淀處理，靜止陳化Mh，濾去上清液，制得SAM沉淀。根據(jù)本發(fā)明方法，步驟F采用對甲苯磺酸/硫酸溶液將SAM沉淀溶解，制得SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液，其中SAM/對甲苯磺酸/硫酸的比例為1 1 1.5 1 3 3。 所述對甲苯磺酸/硫酸溶液的濃度為0. 5M 2M。在本發(fā)明的一個實施例中，步驟G采用冷凍干燥或者真空干燥法，將SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽干燥，制得純度為96 98wt%的SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽，產(chǎn)品為白色粉末。本發(fā)明在30 60°C條件下，采用酸熱法進行細胞破碎和SAM萃取，萃取過程對系統(tǒng)升溫和降溫速度要求不高，菌體處理量大，細胞破碎率和SAM提取率高，且所制得的萃取液中不含殘留有機溶劑，使本發(fā)明所選樹脂實現(xiàn)了對SAM較大的吸附容量和較強的吸附專一性。根據(jù)本發(fā)明方法所制得的洗脫液所含的SAM與硫酸根、對甲苯磺酸的配比可調(diào)控為符合成鹽的比例，且雜質(zhì)含量少、SAM濃度高，從而可以省略脫色除雜以及濃縮步驟，大大簡化了分離過程。沉淀用的丙酮進行回收后可重復使用。本發(fā)明工藝路線簡單，處理量大，產(chǎn)品回收率高達75 % 80 %，產(chǎn)品中活性成分(S，S) -SAM所占比例大于90 %，產(chǎn)品純度高達 96 98%，相應指標符合藥典要求，且生產(chǎn)成本低，可實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式下面將結(jié)合實施例來詳細說明本發(fā)明，這些實施例僅起說明性作用，并不局限于本發(fā)明的應用范圍。實施例實施例1 (1)在制備SAM的發(fā)酵過程中，采用釀酒酵母高密度發(fā)酵，通過補加前體L-甲硫氨酸，使所得到的發(fā)酵液具有較高的富含SAM的菌體含量。發(fā)酵結(jié)束后，在4°C條件下，以 6000rpm的轉(zhuǎn)速將30L發(fā)酵液離心處理lOmin，得到約IOkg濕菌體。(2)取8kg步驟(1)中所制得的濕菌體，加入24L50°C、0. IM H2SO4溶液，在50°C 條件下，均質(zhì)處理lh，均質(zhì)器轉(zhuǎn)速為500rpm。菌體破碎后用冷水降溫，并在4°C條件下以 6000rpm的轉(zhuǎn)速離心處理IOmin去除菌體碎片，得到SAM萃取液，其產(chǎn)量、濃度及收率見表 1。(3)采用截留分子量為10000的超濾膜對步驟( 所制得的SAM萃取液進行超濾處理，去除蛋白質(zhì)類雜質(zhì)，制得SAM濾液。(4)用15 %的NaOH溶液將步驟(3)所制得的SAM濾液的pH調(diào)節(jié)至5，送入柱體積約為1.9L的離子交換柱進行離子交換處理，其樹脂的交換容量為110g/L樹脂，SAM的進料濃度為7. 2g/L，進料速度為1. 5BV/h，進料量為15. 3BV ；進料結(jié)束后用6BV的去離子水洗脫雜質(zhì)，去離子水的流速為4BV/h ；最后用0. 15M的H2SO4溶液作洗脫劑洗脫離子交換樹脂表面所吸附的SAM，H2SO4溶液的流速為2BV/h，得到SAM洗脫液，其產(chǎn)量及濃度見表1。(5)加入相當于步驟⑷所制得的SAM洗脫液7倍體積的丙酮對步驟⑷所制得的SAM洗脫液進行沉淀處理，靜止陳化Mh，濾去上清液，收集SAM沉淀。(6)采用濃度為IM的對甲苯磺酸/硫酸溶液溶解步驟(5)中所制得的SAM沉淀， 制得SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液，其SAM/對甲苯磺酸/硫酸的比例為1 1 2。(7)將步驟(6)中所制得的濃縮SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液進行冷凍干燥，得到白色粉末狀SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽，其純度、產(chǎn)量及SAM的總回收率見表1。實施例2 實施例2與實施例1不同的是(2)取Ikg步驟(1)中所制得的濕菌體，加入5L30°C、0· 2M的H2SO4溶液，在30°C 條件下，均質(zhì)處理池，均質(zhì)器轉(zhuǎn)速為300rpm，結(jié)果見表1。(3)采用截留分子量為6000的超濾膜對步驟( 所制得的SAM萃取液進行超濾處理。 (4)用20 %的NaOH溶液將步驟(3)所制得的SAM濾液的pH調(diào)節(jié)至7，送入柱體積約為0. 3L的離子交換柱進行離子交換處理，其樹脂的交換容量為90g/L樹脂，SAM的進料濃度為4. Og/L，進料速度為4. OBV/h，進料量為22. 5BV ；去離子水的用量為5BV，流速為IBV/ h ；硫酸溶液的濃度為0. 05M，流速為lBV/h，結(jié)果見表1。(5)加入相當于步驟(4)所制得的SAM洗脫液6倍體積的丙酮對步驟(4)所制得的SAM洗脫液進行沉淀處理。(6)采用濃度為0.5M的對甲苯磺酸/硫酸溶液溶解步驟(5)中所制得的SAM沉淀，制得SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液，其SAM/對甲苯磺酸/硫酸的比例為1 1 1.5。(7)將步驟(6)中所制得的濃縮SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液進行真空干燥，結(jié)果見表1。實施例3 實施例3與實施例1不同的是(2)取IOkg步驟⑴中所制得的濕菌體，加入20L60°C、0. 5M的溶液，在60°C 條件下，均質(zhì)處理0.證，均質(zhì)器轉(zhuǎn)速為600rpm，結(jié)果見表1。(3)采用截留分子量為6000的超濾膜對步驟( 所制得的SAM萃取液進行超濾處理。(4)用20 %的NaOH溶液將步驟(3)所制得的SAM濾液的pH調(diào)節(jié)至4，送入柱體積約為2. IL的離子交換柱進行離子交換處理，其樹脂的交換容量為120g/L樹脂，SAM的進料濃度為10. Og/L，進料速度為1. OBV/h，進料量為12. OBV ；去離子水的用量為4BV，流速為 2BV/h ；硫酸溶液的濃度為0. 25M，流速為4BV/h，結(jié)果見表1。(5)加入相當于步驟⑷所制得的SAM洗脫液8倍體積的丙酮對步驟⑷所制得的SAM洗脫液進行沉淀處理。(6)采用濃度為2. OM的對甲苯磺酸/硫酸溶液溶解步驟(5)中所制得的SAM沉
6淀，制得SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液，其SAM/對甲苯磺酸/硫酸的比例為1 3 3。(7)將步驟(6)中所制得的濃縮SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液進行真空干燥，結(jié)果見表1。實施例4 實施例4與實施例1不同的是(2)取5kg步驟(1)中所制得的濕菌體，加入20L45°C、0. 2M H2SO4溶液，在45°C 條件下，均質(zhì)處理池，均質(zhì)器轉(zhuǎn)速為500rpm。菌體破碎后用冷水降溫，并在4°C條件下以 6000rpm的轉(zhuǎn)速離心處理IOmin去除菌體碎片，結(jié)果見表1。(3)采用截留分子量為10000的超濾膜對步驟( 所制得的SAM萃取液進行超濾處理，去除蛋白質(zhì)類雜質(zhì)，制得SAM濾液。(4)用20 %的NaOH溶液將步驟(3)所制得的SAM濾液的pH調(diào)節(jié)至6，送入柱體積約為1. 3L的離子交換柱進行離子交換處理，其樹脂的交換容量為100g/L樹脂，SAM的進料濃度為5. 8g/L，進料速度為2BV/h，進料量為17. 3BV ；進料結(jié)束后用6BV的去離子水洗脫雜質(zhì)，去離子水的流速為:3BV/h ；最后用0. IM的H2SO4溶液作洗脫劑洗脫離子交換樹脂表面所吸附的SAM，H2SO4溶液的流速為1. 5BV/h,結(jié)果見表1。(5)加入相當于步驟(4)所制得的SAM洗脫液6倍體積的丙酮對步驟(4)所制得的SAM洗脫液進行沉淀處理，靜止陳化Mh，濾去上清液，收集SAM沉淀。(6)采用濃度為IM的對甲苯磺酸/硫酸溶液溶解步驟(5)中所制得的SAM沉淀， 制得SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液，其SAM/對甲苯磺酸/硫酸的比例為1 2 2。(7)將步驟(6)中所制得的濃縮SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液進行冷凍干燥，結(jié)果見表1。實施例5:(2)取7kg步驟(1)中所制得的濕菌體，加入17L55°C、0. 3M H2SO4溶液，在55°C 條件下，均質(zhì)處理lh，均質(zhì)器轉(zhuǎn)速為400rpm。菌體破碎后用冷水降溫，并在4°C條件下以 6000rpm的轉(zhuǎn)速離心處理IOmin去除菌體碎片，結(jié)果見表1。(3)采用截留分子量為6000的超濾膜對步驟( 所制得的SAM萃取液進行超濾處理，去除蛋白質(zhì)類雜質(zhì)，制得SAM濾液。(4)用15 %的NaOH溶液將步驟(3)所制得的SAM濾液的pH調(diào)節(jié)至5，送入柱體積約為1. 6L的離子交換柱進行離子交換處理，其樹脂的交換容量為112g/L樹脂，SAM的進料濃度為8. 5g/L，進料速度為2. 5BV/h，進料量為13. 2BV ；進料結(jié)束后用5BV的去離子水洗脫雜質(zhì)，去離子水的流速為3BV/h ；最后用0. 2M的H2SO4溶液作洗脫劑洗脫離子交換樹脂表面所吸附的SAM，H2SO4溶液的流速為2. 5BV/h,結(jié)果見表1。(5)加入相當于步驟(4)所制得的SAM洗脫液7倍體積的丙酮對步驟(4)所制得的SAM洗脫液進行沉淀處理，靜止陳化Mh，濾去上清液，收集SAM沉淀。(6)采用濃度為1.5M的對甲苯磺酸/硫酸溶液溶解步驟(5)中所制得的SAM沉淀，制得SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液，其SAM/對甲苯磺酸/硫酸的比例為1 2 3。(7)將步驟(6)中所制得的濃縮SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液進行冷凍干燥，結(jié)果見表1。對比例1
對比例1與實施例1不同的是(2)取Ikg步驟(1)中所制得的濕菌體，采用500ml、50%的乙酸乙酯水溶液處理 40min,再加入2BV (1000ml)的0. 4mol/L硫酸溶液處理90min，然后對菌體進行破碎及離心處理。其他反應條件與實施例1相同，結(jié)果見表1。以對比例1步驟(2)所獲得的萃取液制備與實施例1相同配比、相同質(zhì)量及純度的SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽產(chǎn)品，相同樹脂的用量需增加50wt%。從上述實施例和對比例及表1可以看出，根據(jù)本發(fā)明方法進行細胞破碎和SAM萃取，由于過程中沒有使用乙酸乙酯類有機溶劑，所獲得的SAM萃取液中沒有殘留有機溶劑， 離子交換過程中不存在有機溶劑對于擴散的不良影響，樹脂對目標產(chǎn)物SAM具有較大的吸附容量和較強的吸附專一性，由此樹脂的單位處理量和樹脂利用率都有較大提高，目標產(chǎn)品的收率和純度也有較大提高，且制備成本降低。對比例2:對比例2與實施例1不同的是(2)取Ikg步驟(1)中所制得的濕菌體，采用3L70°C、0. IM H2SO4溶液，在70°C條件下，均質(zhì)處理30min，其他反應條件與實施例1相同，結(jié)果見表1。從上述實施例和對比例及表1可以看出，在70°C條件下提取SAM，由于處理量較大，菌體受熱不均勻，系統(tǒng)升溫和降溫不夠迅速，即使反應時間為30min，也會造成大量SAM 降解，從而降低SAM萃取液收率，并最終降低SAM的總回收率；根據(jù)本發(fā)明方法提取SAM， 由于反應溫度較低，菌體受熱較均勻，對系統(tǒng)升溫和降溫速度要求不高，不會造成SAM的降解，即使反應時間延長至3h，處理量增大到10kg，仍能獲得較高的細胞破碎率和SAM提取率，從而獲得較高的SAM總回收率。表 權利要求
1.一種S-腺苷-L-甲硫氨酸對甲苯磺酸硫酸雙鹽的制備方法，包括步驟A，收集菌體；步驟B，提取SAM，制得SAM萃取液；步驟C，對SAM萃取液進行超濾，制得SAM濾液；步驟D，采用離子交換法對SAM濾液進行離子交換處理，制得SAM洗脫液；步驟E，對SAM洗脫液進行沉淀處理，制得SAM沉淀；步驟F，制備SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液；步驟G，干燥SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽；其中，步驟B采用酸熱法對步驟A所收集的菌體進行破碎及萃取，反應溫度為30 600C，反應時間控制在0. 5 汕。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于步驟B的反應溫度為45 55°C。
3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于步驟B中所述酸為硫酸溶液，其濃度為 0. 1 0. 5M，用量為2 5L/kg濕菌體。
4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于步驟D包括用離子交換樹脂處理SAM濾液，使SAM吸附于離子交換樹脂表面，然后用去離子水洗脫雜質(zhì)，再用洗脫劑洗脫SAM，其中，所述離子交換樹脂為大孔弱酸性離子交換樹脂。
5.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于所述離子交換樹脂的交換容量為90 120g SAM/L 樹脂。
6.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于步驟D中所述SAM濾液的進料濃度為4 10g/L，進料速度為1 4BV/h，進料量為12 22. 5BV。
7.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于步驟D中所述去離子水的流速為1 4BV/ h，用量為4 6BV。
8.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于步驟D中所述洗脫劑為硫酸溶液，其濃度為0. 05 0. 25M,流速為1 4BV/h0
9.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于步驟F采用對甲苯磺酸/硫酸溶液將 SAM沉淀溶解，制得SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽溶液，其中SAM/對甲苯磺酸/硫酸的比例為 1 1 1. 5 1 3 3。
10.根據(jù)權利要求9所述的方法，其特征在于所述對甲苯磺酸/硫酸溶液的濃度為 0. 5M 2M。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種S-腺苷-L-甲硫氨酸對甲苯磺酸硫酸雙鹽的制備方法。該方法包括將經(jīng)菌體收集、酸熱法細胞破碎、提取和分離純化制得的S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)進行沉淀，調(diào)控硫酸根與對甲苯磺酸根比例，并經(jīng)干燥制得高純度SAM對甲苯磺酸硫酸雙鹽。本發(fā)明工藝路線簡單，處理量大，產(chǎn)品回收率高為75％～80％，產(chǎn)品中活性成分所占比例大于90％，產(chǎn)品純度高為96～98％，相應指標符合藥典要求，且生產(chǎn)成本低，可實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07H1/00GK102321136SQ201110277200
公開日2012年1月18日 申請日期2011年9月19日 優(yōu)先權日2011年9月19日
發(fā)明者姚進孝, 孫龍, 李曉楠, 王崢, 王杰鵬, 譚天偉 申請人:北京化工大學