一種用于防治糖尿病視網(wǎng)膜病變的高含量葉黃素組合物及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于防治糖尿病視網(wǎng)膜病變膠丸組合物及其制備方法，具體是一種活性成分葉黃素與藥學上可結(jié)合輔料制備用于防治防治糖尿病視網(wǎng)膜病變膠丸組合物，其中包括膠丸組合物的制備方法。本發(fā)明的突出特點是為糖尿病視網(wǎng)膜病變患者提供了一種安全有效、質(zhì)量可控、使用方便的口服膠丸。
【專利說明】一種用于防治糖尿病視網(wǎng)膜病變的高含量葉黃素組合物及制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種高含量葉黃素組合物及其用途，具體是一種活性成分葉黃素與藥學上可結(jié)合輔料制備用于防治糖尿病視網(wǎng)膜病變的膠丸組合物，其中包括膠丸組合物的制備方法。
【背景技術】
[0002] 進入二十一世紀，全球正步入老齡化時代，糖尿病已成為繼心腦血管疾病、腫瘤等疾病之后的第四大疾病。目前，全球65歲以上人群中糖尿病視網(wǎng)膜病變患病率約為5 %，全球AD病人估計在2000-2500萬左右；與大部分其它疾病不同，糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)病機理極其復雜，目前還未明確何種原因是糖尿病視網(wǎng)膜病變的根本原因。
[0003]美國哈佛大學研究組于1988年發(fā)現(xiàn)人類視網(wǎng)膜中葉黃素濃度越高視覺敏感度越強，科研人員對老年性視網(wǎng)膜黃斑變性(AMD)和視網(wǎng)膜色素變性(RP)與葉黃素的攝入量關系作了研究。每日攝入30mg葉黃素達140天者，視網(wǎng)膜色素平均增加20~40%，老年性視網(wǎng)膜黃斑變性(AMD)和視網(wǎng)膜色素變性(RP)病變者的視力皆明顯增加。
[0004]1990年英國皇家研究組四年內(nèi)完成英國皇家支持的老年性視網(wǎng)膜黃斑變性(AMD)視力的研究，報告中均指出葉黃素的抗氧化作用能保護視網(wǎng)膜，防止AMD的發(fā)生。
[0005]俄羅斯國立醫(yī)學大學的生物物理學家認為，眼球的晶狀體細胞膜被自由基逐漸氧化是老年性白內(nèi)障的主要病因。
[0006]據(jù)2002年6月16日《新民晚報》報道，西方營養(yǎng)學家經(jīng)深入研究終于揭開了農(nóng)村學生近視率遠遠低于城市學生近視率這一謎底:近視的發(fā)生與一種名為“葉黃素”的營養(yǎng)物質(zhì)攝入過少大有關系。農(nóng)村孩子由于每天吃從地里直接采來的綠色蔬菜，故葉黃素攝入量十分充分。而城市孩子通常吃高蛋白、高營養(yǎng)食物，很少吃新鮮綠色蔬菜，故葉黃素攝入量相應要比農(nóng)村孩子少得多。這就是造成城鄉(xiāng)兒童視力巨大差異的主要原因。
[0007]眼病病例-對照研究(EDCC)組織調(diào)查了 391位患有濕性老年性黃斑變性的病人和578位作為對照的正常人。第一個報告發(fā)現(xiàn):老年性黃斑變性的風險隨血清中葉黃素濃度的增加而顯著減小。第二個報告發(fā)現(xiàn):葉黃素攝入量最高(6mg)人群和攝入量最低(2mg)的人群相比，老年性黃斑變性的風險明顯降低。在膳食調(diào)查結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)常食用菠菜和羽衣甘藍(膳食中最豐富的葉黃素來源)也會降低老年性黃斑變性風險。兩項研究調(diào)查的結(jié)果相當一致，表明老年性黃斑變性與葉黃素的攝入量有直接關系。
[0008]Olmedilla, B.等對白內(nèi)障、老年性黃斑變性患者作了補充葉黃素的長期研究,診斷患有白內(nèi)障(CA) (η = 5)和老年性黃斑變性(AMD) (η = 5)的患者每周服用3粒(每粒含12mg葉黃素)葉黃素膠囊，AMD平均補充時間為13個月(范圍4_20月)，CA的平均時間為26個月(范圍16-36個月)。每3個月采集血樣分析葉黃素水平，同時記錄視力水平。研究表明:3-6個月血清中葉黃素水平顯著提高；視力檢查顯示:視力平均增加0.4，視敏度也提聞了。[0009]GDagnelie，等驗證補充葉黃素對視敏度、中心視野以及對視網(wǎng)膜色素變性(RP)患者的視力影響。16名參與者(13名RP患者，3名其他視網(wǎng)膜炎患者)經(jīng)過26周補充葉黃素(前9周40mg/天，以后20mg/天)，參與者通過電腦屏幕自測視敏度和墻上的掛圖自測中心視野的擴展。結(jié)果:參與者的視敏度平均提高0.75dB,中心視野只有原來補充過葉黃素的患者能大大提高(0.55dB)。
[0010]在我國葉黃素為原料制成保健品或食品，目前已有片劑及軟膠囊產(chǎn)品上市，名稱為葉黃素軟膠囊或葉黃素片。
[0011 ]目前葉黃素制劑采用微囊包裹的方法，可提供成品的穩(wěn)定性，但得率不高，成本上升。采用軟膠囊的制備葉黃素制劑，普遍存在含量低，葉黃素會滲入膠皮中，存在穩(wěn)定性不足；不利于糖尿病視網(wǎng)膜病變的長期治療。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012]本發(fā)明目的是提供一種質(zhì)量穩(wěn)定的葉黃素高含量有預防及治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的膠丸組合物；本發(fā)明另一目的是提供一種用于防治糖尿病視網(wǎng)膜病變膠丸組合物的制備方法。
[0013]葉黃素又名“植物黃體素”，為棱格狀黃色晶體，易溶于乙醇、丙酮，不溶于水。有金屬光澤，對光和氫不穩(wěn)定，需貯存于陰涼干燥處，避光密封。在自然界中與玉米黃素共同存在，葉黃素與玉米黃素是構成玉米、蔬菜、水果、花卉等植物色素的主要組分，也是構成人眼視網(wǎng)膜黃斑區(qū)域的主要色素。自然界中葉黃素在甘藍、羽衣甘藍、菠菜等深綠色葉菜以及金蓋花、萬壽菊等花齊中含量最聞。
[0014]葉黃素結(jié)構是一種屬于類胡蘿卜素的黃色化學色素，具有增色和營養(yǎng)的雙重功效。分為酯化葉黃素和非酯化葉黃素兩種形式，酯化葉黃素是葉黃素的一種類型，其主要化學實體是葉黃素二棕櫚酸酯。Ig酯化葉黃素在腸道內(nèi)會水解為0.5g非酯化的葉黃素。在自然界中葉黃素主要存在于綠葉菜、桔黃色蔬菜、桔黃色水果以及蛋黃中，萬壽菊的干花瓣中含有高濃度的葉黃素。葉黃素和其他類胡蘿卜素的一個重要區(qū)別是葉黃素并不是維生素A原，人體內(nèi)自身也不能夠合成，需要完全依賴飲食攝取。
[0015]在人體內(nèi)，葉黃素存在于血漿和眼睛的黃斑區(qū)，是人眼中唯一存在的兩種胡蘿卜素之一。他的主要作用是抗氧化，其次，作為光保護成分，能夠有效地濾除陽光中導致視網(wǎng)膜損傷的藍光，防止視力退化和失明癥。除了對眼睛的健康起重要的作用外，葉黃素是預防心血管疾病、心肌梗死、肺癌的重要營養(yǎng)素。由于對過量紫外線的吸收，葉黃素對皮膚還有保護作用。
[0016]葉黃素是含紫羅酮環(huán)的二羥基類胡蘿卜素，在自然界廣泛存在。大量的流行病學證據(jù)表明，葉黃素在保護眼睛、預防癌癥和心血管疾病等方面起著重要作用，是目前國際上研究中的-個熱點。
[0017]萬壽菊鮮花采收-酶解-脫水-烘干-造粒-低溫浸出-葉黃素浸膏粗品。將葉黃素粗品進一步分離精制，可得到高含量的活性成分葉黃素。工藝過程采用陶瓷膜微濾(MF)對浸提液進行精濾提純，再用反滲透膜(RO)濃縮過濾液。這種工藝以膜分離技術為主體，替代了傳統(tǒng)的酒精提純和蒸發(fā)濃縮，工藝過程簡單、色素溶液基本處于常溫操作狀態(tài)，既節(jié)約能源，又保證了色素產(chǎn)品的質(zhì)量。原料提取也可以采用其他工藝，如用捶擊金盞花或者萬壽菊花瓣的方法，從中提取葉黃素。原料提取精制不限于上述方法，可以采用二氧化碳超臨界方法等方法，使葉黃素純度達到90%以上。 [0018]本發(fā)明的葉黃素原料，可采用葉黃素粗品重結(jié)晶方法，葉黃素產(chǎn)品含量均超過90%以上，最高可達到99.5%，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。除了從萬壽菊中提取純化葉黃素外，本發(fā)明葉黃素也可以從其他植物中獲得或采用合成、半合成的方法制得。采用HPLC檢測，以重量百分比計葉黃素含量大于90%，達到國家藥品注冊管理辦法有關中藥I類(單一成分>90% )要求。
[0019]本發(fā)明葉黃素原料的純度為90.0^-99.5?^為了制劑質(zhì)量穩(wěn)定，本發(fā)明原料藥的質(zhì)量標準為:葉黃素純度> 90%，有關物質(zhì)玉米黃素< 3.5%，其他單個雜質(zhì)峰面積
<1%主峰面積，總有關物質(zhì)峰面積<8%主峰面積。有關物質(zhì)的限量不限定上述百分比，可以更低，也可以適當提高。
[0020]制備葉黃素膠丸組合物常常選自明膠、增塑劑、遮光劑、防腐劑、共溶劑、表面活性劑、增稠劑、抗氧劑、生物利用度增加劑、PH穩(wěn)定劑等一種或多種組合。
[0021]以葉黃素為原料，與藥學上可接受的輔料制備高含量的葉黃素膠丸組合物對葉黃素的穩(wěn)定起到了意想不到的效果，葉黃素膠丸質(zhì)量穩(wěn)定。
[0022]制備葉黃素膠丸組合物可接受的輔料主要為水不溶性的共溶劑(助溶劑)如植物油、脂肪酸及脂肪酸甘油酯等制成混懸溶液，也可為不揮發(fā)性的液體如聚乙二醇和非離子表活劑制成澄明液體。所用的植物油與葉黃素的重量比為1:1~1: 0.005，優(yōu)化的比例植物油與葉黃素的重量比為1: 0.5~1: 0.01，更優(yōu)化的比例為植物油與葉黃素的重量比1: 0.5~1: 0.05。為了保持葉黃素均勻分布，可增加一定量的增稠劑調(diào)整油的稠度，以利于葉黃素均勻分布在油性輔料中。研究發(fā)現(xiàn)葉黃素50%以上未溶解在共溶劑中，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。采用0.45um微孔濾膜過濾，濾膜上的葉黃素即為未溶解在溶劑中的有效成分。
[0023]所用輔料包括膠皮及囊內(nèi)物，膠皮主要包括但不僅限于:(I)膠料(主要是明膠)、
(2)增塑劑如甘油、山梨醇等、(3)附加劑主要包括防腐劑、遮光劑(二氧化鈦、檸檬黃或氧化鐵等)、香料等和(4)水組成，常見的膠皮包括但不僅限于:明膠、甘油、富馬酸、鈦白粉及水。
[0024]膠丸囊內(nèi)物包括，但不僅限于:(1)共溶劑(助溶劑)如植物油包括豆油、玉米油、橄欖油、棉籽油、花生油、葵花油、可可油、棕櫚油、菜籽油等、甘油三乙酸酯、PEG400、二甲基異山梨醇、甘油、丙二醇、檸檬酸三乙酯等；(2)表面活性劑如吐溫20、吐溫80、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油、十二烷基硫酸鈉、司盤20、司盤60、司盤80、Crodet04(聚氧乙烯月桂酸)、Cithrol2MS(聚氧乙烯硬脂酸)、聚氧乙烯化玉米油等；(3)抗氧劑，如Butylatedhydroxyanisole (BHA)，維生素 E、Butylatedhydroxytolune (BHT)、培酸丙酯(Propyl gallate)等；(4)生物利用度增加劑等；(5)防腐劑:如羥苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、苯甲酸鈉等；(6)增稠劑:淀粉、瓊脂、明膠、羧甲基纖維素鈉等；(7)pH穩(wěn)定劑為二乙酸、門冬氨酸、甘氨酸、賴氨酸、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、油酸、亞麻酸、棕櫚酸、L-鹽酸賴氨酸、苯甲酸、硼酸、乙酸等化合物中的任一種或幾種以任意比例組
口 ο
[0025]葉黃素在膠丸組合物中的重量比(含膠皮)為2.5%~50%，比如取25mg葉黃素，制成1000mg的膠丸組合物，則原料占膠丸組合物中的重量比為2.5% ;如取400mg原料，制成采800mg膠丸組合物，則原料占膠丸組合物中的重量比為50%。
[0026]葉黃素對光線非常敏感，為了防濕遮光，在膠丸組合物外常采用胃溶性包衣材料進行包衣，常見包衣材料包括，但不僅限于羥丙甲纖維素(HPMC)、羥丙纖維素(HPC)、聚維酮K30(PVP)、聚乙二醇類(PEG)、聚乙烯縮乙醛二乙胺醋酸酯(AEA)、胃溶性丙烯酸樹脂類、歐巴代(Opadry)、天然高分子材料玉米朊(Zein)、聚乙烯-乙烯吡啶共聚體等。包衣溶液常加入增塑劑、遮光材料混合使用，以起到較滿意的包衣效果。
[0027]制備葉黃素膠丸組合物的方法包括以下特征:(I)膠皮處方:明膠7.5kg，甘油
2.5kg，羥苯乙酯0.006kg, 二氧化鈦0.07kg,純化水5kg ； (2)制備工藝:先將純化水投入鍋內(nèi)并加熱至100°C，待用；將甘油和遮光劑至調(diào)膠鍋中，開汽攪拌加溫至75°C，攪拌均勻后緩慢投入明膠及羥苯乙酯，同時以每分鐘200轉(zhuǎn)速度攪拌至溶化；在明膠加入的同時要繼續(xù)加熱至調(diào)膠罐中心溫度達90°C時停止加熱，保溫30-40分鐘，趁熱過濾，冷卻至65°C左右備用；(3)配料:食用植物油、投入攪拌鍋內(nèi)，攪拌均勻，備用；(4)填充制丸:調(diào)配均勻的褐色乳狀液和膠料通過滴丸機，以每分約3-4轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速制成無縫橢球狀膠丸；膠液溫度控制在48-50°C，滴丸頭的溫度一般要比膠的溫度高，為50-52°C，室溫要保持在10~15°C，濕度45-65%，以保證制出的膠丸不變形；(5)干燥工藝:滴丸機噴頭滴出的膠丸經(jīng)液體石蠟冷卻后送入揩丸機和紗布一起轉(zhuǎn)動0.5h，以擦去表面粘附的石蠟；隨后在10~15°C溫度下吹風4~6h ; (6)撿丸工藝:待膠丸收縮定形后升溫至30~35°C繼續(xù)吹風2~3h,至膠丸變硬后挑選出合格膠丸，用乙醚洗滌2次，再用醫(yī)用酒精純度為95%洗滌、消毒；消毒后的膠丸鋪于篩網(wǎng)上，用45°C左右的干燥空氣進行常溫烘干處理，當膠皮水分含量低于13%時停止吹風。
[0028]照崩解時限測定法(中國藥典2010年版一部附錄)，本發(fā)明制成葉黃素膠丸組合物測定崩解時限，以水900ml為溶劑，轉(zhuǎn)速每分鐘50轉(zhuǎn)，應在60分鐘內(nèi)全部崩解。
[0029]采用高效液相色譜法(HPLC)測定葉黃素軟膠囊中葉黃素的含量。色譜柱為Waters_C18 (4.6X 250mm ;5 μ m),流動相為乙腈-甲醇(95: 5),流速為 1.0ml/min,用紫外檢測器檢測波長為446nm，柱溫為25°C。結(jié)果為:葉黃素在0.66-10.56 μ g/ml范圍內(nèi)線性良好，檢測限為0.015 μ g/ml,相關系數(shù)為r = 0.9992。此方法快速,且操作簡單、準確,可用作葉黃素含量的測定。
[0030]本發(fā)明提供一種能預防及治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的口服膠丸組合物，以葉黃素為原料，其日有效量(以葉黃素C4tlH56O2計)在15mg至4000mg之間，最有效量為日服用葉黃素劑量大于300mg，即每天葉黃素服用量大于300mg。
[0031 ] 膠丸組合物的規(guī)格在15mg~800mg之間，如每粒膠丸可含15mg、25mg、50mg、lOOmg、150mg>200mg>250mg>350mg>400mg>500mg>800mg 等不同劑量的葉黃素。
[0032]具體葉黃素膠丸的規(guī)格可根據(jù)藥理藥效及臨床試驗的日劑量而定，如每日1000mg葉黃素為成人(60kg)給藥劑量，按每天4粒膠丸組合物為給藥，則新藥處方設計為每粒膠丸組合物規(guī)格200mg,按每天8粒膠丸組合物給藥,則新藥處方設計為每粒膠丸組合物規(guī)格IOOmg0為了服用方便，葉黃素膠丸規(guī)格為50mg至200mg更佳。
[0033]本發(fā)明膠丸質(zhì)量標準為:本品含葉黃素(C4tlH56O2)應為標示量的85%~115% ;有關物質(zhì)玉米黃素<4%。對規(guī)格為IOOmg的膠丸進行加速6個月穩(wěn)定性試驗(40°C，相對濕度75% ),產(chǎn)品符合質(zhì)量標準規(guī)定。葉黃素膠丸標準的標示量也調(diào)整為90%~110%,有關物質(zhì)的限量可以增加或減少一定的幅度。
[0034]按中國食品藥品監(jiān)督管理局《藥品注冊管理辦法》(局令第28號)規(guī)定，當單一活性成分葉黃素含量大于90%，達到中藥新藥I類(有效成分)原料要求，制成的膠丸組合物為中藥I類新藥制劑。
[0035]本發(fā)明的突出優(yōu)點是:(1)提供了一種服用安全、質(zhì)量可控、使用方便的口服膠丸組合物，用于預防及治療糖尿病視網(wǎng)膜病變，膠丸質(zhì)量標準為:本品含葉黃素(C4tlH56O2)應為標示量的85%~115% ;有關物質(zhì)玉米黃素< 4%。
[0036](2)克服了葉黃素易氧化、穩(wěn)定性較差等不足，更有利糖尿病視網(wǎng)膜病變患者使用。
【具體實施方式】
[0037]實施例1葉黃素膠丸組合物的制備
[0038]
膠皮處方:純化水5000g
甘油2500g
二氧化鈦70g
明膠7500g
輕苯乙酷6g
內(nèi)容物處方:葉黃素100g
橄欖油200g
糊精30g

維生素E0.2g
[0039](I)膠皮的制備:先將純化水5kg投入鍋內(nèi)并加熱至100°C，待用，將2.5kg甘油和二氧化鈦0.07kg至調(diào)膠鍋中，開汽攪拌加溫至75°C，攪拌均勻后緩慢投入7.5kg明膠及羥苯乙酯0.006kg,同時以每分鐘200轉(zhuǎn)速度攪拌至溶化；在明膠加入的同時要繼續(xù)加熱至調(diào)膠罐中心溫度達90°C時停止加熱，保溫30-40分鐘，趁熱過濾，冷卻至65°C左右備用；
[0040](2)配料:橄欖油100g、糊精30g及維生素E 0.2g混合均勻，再加入葉黃素100g，攪拌均勻，備用；
[0041](3)填充制丸:調(diào)配均勻的褐色乳狀液和膠料通過滴丸機，以每分約3-4轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速制成無縫橢球狀膠丸；膠液溫度控制在48-50°C，滴丸頭的溫度一般要比膠的溫度高，為50-52°C，室溫要保持在10~15°C，濕度45-65 %，以保證制出的膠丸不變形；(4)干燥工藝:滴丸機噴頭滴出的膠丸經(jīng)液體石蠟冷卻后送入揩丸機和紗布一起轉(zhuǎn)動0.5h，以擦去表面粘附的石蠟；隨后在10~15°C溫度下吹風4~6h ; (5)撿丸工藝:待膠丸收縮定形后升溫至30~35°C繼續(xù)吹風2~3h，至膠丸變硬后挑選出合格膠丸，用乙醚洗滌2次，再用醫(yī)用酒精純度為95%洗滌、消毒；消毒后的膠丸鋪于篩網(wǎng)上，用45°C左右的干燥空氣進行常溫烘干處理，當膠皮水分含量低于13%時停止吹風，每丸重0.Sg，規(guī)格lOOmg，即得。
[0042]經(jīng)檢查，本膠丸葉黃素含量:98.2%，玉米黃素:2.0%，總雜質(zhì)之和:4.8%，崩解時間:25分鐘。[0043]實施例2葉黃素膠丸組合物的制備
[0044]膠皮處方:同實施例1
[0045]內(nèi)容物處方:葉黃素100g
大豆油200g
淀粉20g
BHA0.2g
[0046](I)膠皮的制備:同實施例1 ;
[0047](2)大豆油200g、淀粉20g及BHA 0.2g混合均勻，再加入葉黃素100g，攪拌均勻，
備用;
[0048](3)填充制丸:同實施例1。
[0049]經(jīng)檢查，本膠丸葉黃素含量:96.6%，玉米黃素:2.2%，總雜質(zhì)之和:4.5%，崩解時間:28分鐘。
【權利要求】
1.一種用于防治糖尿病視網(wǎng)膜病變的膠丸組合物及其制備方法，包括一種活性成分葉黃素與藥學上可結(jié)合輔料制成膠丸組合物以及膠丸組合物的制備方法。
2.如權利要求1所述的活性成分葉黃素，其特征在于葉黃素原料的純度為90.0%~99.5%。
3.如權利要求1所述的膠丸組合物，其特征在于葉黃素在組合物中的重量比為2.5%~50%。
4.如權利要求1所述的膠丸組合物，其特征在于用于防治糖尿病視網(wǎng)膜病變膠丸的成人(60kg) 一天劑量(以葉黃素C40H56O2計)為15mg至4000mg。
5.如權利要求1所述的膠丸組合物，其特征在于膠丸的規(guī)格(以葉黃素C4tlH56O2計)為15mg 至 800mg。
6.如權利要求1所述的膠丸組合物，其特征在于膠丸的規(guī)格(以葉黃素C4tlH56O2計)為50mg 至 200mg。
7.如權利要求1所述的膠丸組合物，其特征在于制備葉黃素膠丸組合物可接受的輔料主要為植物油等制成混懸溶液，所用的植物油與葉黃素的重量比為1:1~1: 0.005，優(yōu)化的比例植物油與葉黃素的重量比為1: 0.5~1: 0.01，更優(yōu)化的比例為植物油與葉黃素的重量比為1: 0.5~1: 0.05。
8.如權利要求1所述的膠丸組合物，其特征在于膠丸內(nèi)容物中葉黃素不能通過0.45um的顆粒大于50%?！?br> 9.如權利要求1所述的膠丸組合物，其特征在于膠丸中含有能產(chǎn)生預防及治療糖尿病視網(wǎng)膜病變有效劑量的葉黃素。
10.如權利要求9所述的膠丸組合物，其特征在于預防及治療糖尿病視網(wǎng)膜病變每天服用葉黃素的劑量(以葉黃素C4tlH56O2計)大于300mg。
【文檔編號】A61P27/02GK103536573SQ201210243310
【公開日】2014年1月29日 申請日期:2012年7月13日 優(yōu)先權日:2012年7月13日
【發(fā)明者】湯瑞梅, 劉茶香, 饒品昌 申請人:上海藍藥實業(yè)有限公司