專利名稱：一種治療帕金森氏病的藥物組合物，其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種以刺五加為主的中藥組合物，尤其涉及一種治療帕金森病的以刺五加為主的中藥組合物及其制備方法，屬于治療帕金森病的中藥組合物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
帕金森病又稱震顫麻痹，是一種常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，臨床上以錐體外系運(yùn)動(dòng)障礙為特征，表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)遲緩，靜止震顫和強(qiáng)直，自主神經(jīng)功能障礙和癡呆，其發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)而增加。目前的治療方法以緩解癥狀為主，但復(fù)發(fā)率高預(yù)后并不理想，往往需要終身治療，給人類帶來了嚴(yán)重的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，所以迫切需求尋找預(yù)防和治療帕金森氏病有效的中藥。目前，市場(chǎng)上尚無治療帕金森病的有效中成藥。帕金森病的治療主要是手術(shù)治療和藥物治療兩大類。由于手術(shù)和多巴替代性治療存在嚴(yán)重的破壞性和副作用，尋找能夠預(yù)防和延緩疾病進(jìn)程的治療方法成為迫切需要。帕金森病是老年疾病，是人體老化狀態(tài)下神經(jīng)內(nèi)分泌諸多因素失調(diào)共同作用的結(jié)果，中醫(yī)藥是通過調(diào)節(jié)機(jī)體整體狀況而起作用，藥性平和，毒副作用小。如果單純用中醫(yī)藥能有效控制早期帕金森病癥狀，從而避免西藥的毒副作用，大大增強(qiáng)患者服藥的依從性，同時(shí)，中藥在保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，抗興奮性毒性等方面研究成果為長(zhǎng)期治療帕金森病，有效控制帕金森病進(jìn)程奠定了良好的基礎(chǔ)， 這或許是中醫(yī)藥治療帕金森病的發(fā)展方向。中醫(yī)對(duì)帕金森病的認(rèn)識(shí)可追溯到《黃帝內(nèi)經(jīng)》?！端貑栔琳嬉笳摗氛f“諸暴強(qiáng)直， 皆屬于風(fēng)”，“諸風(fēng)掉眩，皆屬于肝”，“諸痙項(xiàng)強(qiáng)，皆屬于濕”?！鹅`樞邪客篇》指出“邪氣惡血， 固不得住留，住留則傷筋絡(luò)骨機(jī)關(guān)，不得屈伸，故拘攣矣”。明代孫一奎《赤水玄珠》，首次把此病命名為“顫振癥”，并說顫振“乃木火上盛，腎陰不充，下虛上實(shí)，實(shí)為痰火，虛則腎虛”。 《醫(yī)宗必讀》說“然木即無虛，言補(bǔ)肝者，肝氣不可犯，肝血自養(yǎng)，血不足者濡之，水之屬也， 壯水之源，木賴以榮”。為“肝腎同源”之論。清代高鼓峰在《醫(yī)宗已任編》謂“大抵氣血俱虛，不能榮養(yǎng)筋骨，故為之振搖，而不能主持也”。本病的病理基礎(chǔ)是肝腎陰虛，氣血兩虛，也是形成風(fēng)、火、痰、瘀的基本根源。中老年以后，肝腎脾漸衰，精氣血漸虧，筋脈失于濡養(yǎng)，虛風(fēng)內(nèi)動(dòng)，虛火內(nèi)生，兼加痰濕內(nèi)蘊(yùn)，五志化火，形成風(fēng)、火、痰、瘀進(jìn)一步加重病情。因此，針對(duì)此病因病機(jī)，研究治療帕金森病的中藥治療方式顯得尤為重要。目前，刺五加復(fù)方和刺五加注射液已應(yīng)用于帕金森病的治療，并取得了一定療效，但是迄今為止，以刺五加為主藥配伍芍藥、鉤藤，提取精制三味中藥的有效成分，以刺五加總苷、鉤藤總堿、芍藥總苷為藥物組成治療帕金森病的藥物制劑未見報(bào)道。因此，以刺五加有效組分、鉤藤總堿、芍藥總苷為藥物組成治療帕金森病將有廣闊的市場(chǎng)開發(fā)前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種對(duì)于帕金森氏病具有顯著療效的藥物組合物。本發(fā)明一種治療帕金森病的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物的有效組分
3為刺五加總苷、芍藥總苷和鉤藤總堿，所述藥物組合物由刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物和鉤藤總堿提取物制成，其中刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物和鉤藤總堿提取物的重量比例為1-9 2-6 2-6。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，上述各原料的最佳重量比例是刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物和鉤藤總堿提取物的重量比例為6 3 3。本發(fā)明提供的配比充分利用了并綜合各種材料的藥理和性味功用，以獲得具有顯著療效的藥劑剌五力口Acanthopanax senticosus (Rupr. et MaXim.) Harms.基源為五加科刺五加的干燥根、根莖。成分和藥理內(nèi)含多種糖苷、維生素、芝麻素及多糖等，能增強(qiáng)機(jī)體的抵抗能力，延長(zhǎng)壽命，抗毒素，增強(qiáng)大腦皮層的抑制作用，增強(qiáng)體力、智力。性味功用辛、微苦、性溫、無毒，歸肝、腎經(jīng)，具有益腎健脾、補(bǔ)腎安神等功效。鉤藤Uncaria rhynchophylla (Miq, ) ex Havi 1.基源為為茜草科植物鉤藤或華鉤藤及其同屬多種植物的帶鉤枝條。成分和藥理內(nèi)含多種生物堿類，具有降壓、鎮(zhèn)靜、抗驚厥作用，提高智力，防治老
年癡呆。性味功用甘、微寒，歸肝、心包經(jīng)，具有息風(fēng)止痙，清熱平肝等功效。白g :paeonia lactifIora (p. albiflora)基源為雙子葉植物藥毛茛科植物芍藥的根。成分和藥理內(nèi)含以芍藥苷為主的多種糖苷，沒食子鞣質(zhì)，沒食子酸等，具有解痙、 擴(kuò)張血管、抗炎、護(hù)肝等作用。性味功用苦、酸、甘，微寒。歸肝、脾經(jīng)。具有養(yǎng)血調(diào)經(jīng)，平肝止痛，斂陰止汗等功效。本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種本發(fā)明的藥物組合物的制備方法。本發(fā)明的治療帕金森氏病的藥物組合物可采用如下方法制得，包括如下步驟a、取刺五加原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50% -90% (w/w)的乙醇加熱回流提取2_3次， 按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的3-10倍，提取時(shí)間為0. 5-5小時(shí)，合并醇提液；采用大孔吸附樹脂富集純化，用原料用量2-10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%-80% (w/w)乙醇洗脫，洗脫速度l_2BV/h ；洗脫液減壓濃縮至相對(duì)密度在50-95°C為1. 1-1. 9的稠膏，在 40-80°C,-0. 02 -0. 12Mpa下真空干燥，粉碎，得到刺五加總苷提取物粉末，備用；b、取鉤藤原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50% -90% (w/w)的乙醇50_85°C條件下加熱回流提取2-3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的2-10倍，提取時(shí)間為0. 5-5小時(shí)， 減壓濃縮至相對(duì)密度在50-950C^ 1. 1-1. 9的稠膏，在40-80°C，_0. 02 -0. 12Mpa下真空干燥，粉碎，得到鉤藤總堿提取物粉末，備用；C、取白芍原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50% -90% (w/w)乙醇加熱回流提取2_3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的2-10倍，提取時(shí)間為0. 5-5小時(shí)，合并醇提液； 采用大孔吸附樹脂富集純化，用原料用量2-10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%-80% (w/w)乙醇洗脫，洗脫速度l_2BV/h;洗脫液減壓濃縮至相對(duì)密度在50-95°C為1. 1-1.9的稠膏，在 40-80-0. 02 -0. 12Mpa下真空干燥，粉碎，得到芍藥總苷提取物粉末，備用；
d、按本發(fā)明所述的藥物組合物的重量比例混合上述得到的三種細(xì)粉，干燥保存。本發(fā)明中的所有原料藥材，即刺五加原料、鉤藤原料以及白芍原料均可從市場(chǎng)上購得。本發(fā)明中，優(yōu)選的，步驟(a)、(c)中的大孔吸附樹脂選自AB-8大孔吸附樹脂、X_5 大孔吸附樹脂、DM-301大孔吸附樹脂或NKA-9大孔吸附樹脂其中至少一種，優(yōu)選的所述的大孔吸附樹脂為AB-8大孔吸附樹脂。本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供本發(fā)明的藥物組合物在制備治療帕金森氏病藥物中的用途。本發(fā)明的第四個(gè)目的是提供一種由本發(fā)明的藥物組合物所制成的中藥制劑。所述的中藥制劑由有效劑量以上所述的藥物組合物和藥學(xué)上接受的輔料組成，按照藥物制劑常規(guī)方法做成臨床上適宜的各種口服制劑；上述步驟d中所述的細(xì)粉經(jīng)常規(guī)中藥制劑的制備方法，可得滴丸劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑；其中輔料包括填充劑，潤(rùn)滑劑，粘合劑，崩解劑，稀釋劑等。輔料可以選擇羧甲基纖維素、硬脂酸鎂、PEG-8000、乳糖、糊精、微晶纖維素或淀粉等其中至少一種。本發(fā)明的中藥制劑可用于治療帕金森氏病藥物的制備中。本發(fā)明中藥制劑為使中藥有效成分更加富集，并且配比更加得當(dāng)，故采用三味中藥分別提取的提取方法。為了使藥效成分高度富集，雜質(zhì)去除得更徹底，有效降低服用劑量，提高原料藥的利用率，本發(fā)明采用了大孔吸附樹脂吸附技術(shù)。大孔吸附樹脂是一類新型的高分子分離材料，具有化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、選擇性吸附、再生簡(jiǎn)便等許多優(yōu)點(diǎn)，在天然產(chǎn)物的分離純化方面其應(yīng)用日趨廣泛。本發(fā)明選用AB-8、X-5、DM-301、NKA-9四種大孔吸附樹脂對(duì)藥效成分進(jìn)行吸附特性的研究，通過4種樹脂對(duì)藥效成分水溶液的靜態(tài)和動(dòng)態(tài)吸附，比較4種樹脂的吸附特性，從而為刺五加、芍藥、鉤藤有效成分的分離提純提供依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在4種大孔吸附樹脂中，AB-8型樹脂對(duì)藥效成分的吸附性能優(yōu)于其他參比樹脂，飽和吸附量有明顯的差異，故AB-8型樹脂是4種樹脂中的首選吸附樹脂載體。在4種大孔吸附樹脂中，AB-8型樹脂對(duì)藥效成分的吸附性能較好，飽和吸附量有明顯的差異，洗脫率較高，故選擇AB-8型樹脂作為4種樹脂中首選吸附樹脂載體。根據(jù)所述藥物制劑的成型工藝要求，輔料可以選擇羧甲基纖維素、硬脂酸鎂、 PEG-8000、乳糖，糊精或微晶纖維素、淀粉等。本發(fā)明的制備工藝注重藥效成分先進(jìn)提取純化技術(shù)的應(yīng)用，如采用正交設(shè)計(jì)確定最佳的工藝條件，采用大孔樹脂吸附純化工藝和解析物質(zhì)的真空干燥工藝。本發(fā)明的制劑成型工藝采用擠縮制粒技術(shù)。擠縮制粒技術(shù)可增大顆粒堆密度，在不改變單服劑量的同時(shí)提高制劑的裝量。本發(fā)明藥效成分經(jīng)過提取純化后高度富集，經(jīng)過真空干燥、擠出制粒等技術(shù)處理， 解決內(nèi)容物易吸潮變質(zhì)等問題，以保證藥物的流動(dòng)性、色澤的一致性、裝量差異的穩(wěn)定性。 且本發(fā)明制劑不含生藥粉，防止了霉變的發(fā)生。因此，與常規(guī)技術(shù)相比，本發(fā)明所制備的固體制劑具有療效好，崩解時(shí)間短，溶出和吸收快，生物利用度高且不宜吸潮變質(zhì)，質(zhì)量穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)。經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)和細(xì)胞試驗(yàn)證明，本發(fā)明中藥組合物對(duì)治療帕金森病具有較好的臨床療效。治療過程中未發(fā)現(xiàn)其對(duì)心、肝、腎功能及血液系統(tǒng)有損害，本發(fā)明中藥組合物臨床應(yīng)用安全。本發(fā)明提供的中藥組合物由常見、價(jià)格低廉的中藥組成，由于充分利用并綜合了各種材料的藥理和性味作用，尤其是將其制備成口服固體制劑——滴丸劑、膠囊劑、片劑、 顆粒劑，發(fā)揮這幾種制劑起效快，患者服用量小，服用方便，生物利用度高等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的中藥制劑能夠治療震顫，對(duì)帕金森氏病的療效穩(wěn)定，見效迅速，可達(dá)到標(biāo)本兼治的效果。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會(huì)隨著描述而更為清楚。但這些實(shí)施例僅是范例性的，并不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。實(shí)施例1膠囊劑的制備a、取刺五加原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇加熱回流提取2次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的10倍，提取時(shí)間為2小時(shí)，合并醇提液。采用AB-8大孔樹脂富集純化，用原料用量的10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%乙醇洗脫，洗脫速度lBV/h。洗脫液減壓濃縮至相對(duì)密度在65°C為1. 2-1. 3的稠膏，在40-50°C，-0. 08 -0. IOMpa下真空干燥，粉碎，得到刺五加總苷提取物粉末，備用。b、取鉤藤原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇65°C條件下加熱回流提取3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的10倍，提取時(shí)間為2小時(shí)，減壓濃縮至相對(duì)密度在 65°C為1. 2-1. 3的稠膏，在40-50°C，-0. 08 -0. IOMpa下真空干燥，粉碎，得到鉤藤總苷提取物粉末，備用。C、取白芍原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%乙醇加熱回流提取3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的10倍，提取時(shí)間為2小時(shí)。采用AB-8大孔樹脂富集純化，用原料用量的10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%乙醇洗脫，洗脫速度1. 2BV/h。洗脫液減壓濃縮至相對(duì)密度在65°C為1. 2-1. 3的稠膏，在40-50°C，-0. 08 -0. IOMpa下真空干燥，粉碎，得到芍藥總苷提取物粉末，備用。d、按刺五加總苷提取物粉末、芍藥總苷提取物粉末、鉤藤總堿提取物粉末的重量比為9 6 6的比例混合三種細(xì)粉，干燥保存。e、細(xì)粉加入羧甲基纖維素混勻，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇溶液制粒，干燥，整粒， 加入硬脂酸鎂混勻，使用常規(guī)加工設(shè)備制成膠囊，膠囊每粒裝0. 35g。實(shí)施例2滴丸劑的制備a、取刺五加原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇加熱回流提取3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的8倍，提取時(shí)間為2小時(shí)，合并醇提液。采用AB-8大孔樹脂富集純化，用原料用量8倍量的的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%乙醇洗脫，洗脫速度1. 2BV/h。洗脫液減壓濃縮至相對(duì)密度在65°C為1. 2-1. 3的稠膏，在50-60°C，-0. 06 -0. 08Mpa下真空干燥，粉碎，得到刺五加總苷提取物粉末，備用。
b、取鉤藤原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%的乙醇75°C條件下加熱回流提取3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的5倍，提取時(shí)間為1小時(shí)，減壓濃縮至相對(duì)密度在 65°C為1. 2-1. 3的稠膏，在50-600C，-0. 06 -0. 08Mpa下真空干燥，粉碎，得到鉤藤總苷提取物粉末，備用。C、取白芍原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%乙醇加熱回流提取2次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的8倍，提取時(shí)間為3小時(shí)。采用AB-8大孔樹脂富集純化，用原料用量 8倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%乙醇洗脫，洗脫速度lBV/h。洗脫液減壓濃縮只相對(duì)密度在65°C 為1. 2-1. 3的稠膏，在50-60°C，-0. 06 -0. 08Mpa下真空干燥，粉碎，得到芍藥總苷提取物粉末，備用。d、按刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物、鉤藤總堿提取物的重量比為3:2:2
的比例混合三種細(xì)粉，干燥保存。e、細(xì)粉按1 1比例置入膠體磨粉碎劑并混勻，將PEG-8000送入90°C水浴鍋內(nèi)熔融，按照樣品:PEG-8000 = 1 0.6-0.8比例，充分?jǐn)嚢杌靹颍?6-92°C保溫存放。f、置入滴丸機(jī)滴液室內(nèi)，滴頭孔徑30-40mm，滴頭至冷卻液高度10-20cm，滴液滴制速度為25-36滴/分鐘，冷卻液為石蠟油，冷卻溫度為10-12°C，每滴丸重0. 03g。g、濾除冷卻液，離心機(jī)甩干，-15 -10°C冷卻處理12小時(shí)后，得成品。實(shí)施例3片劑的制備a、取刺五加原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%的乙醇加熱回流提取3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的5倍，提取時(shí)間為3小時(shí)，合并醇提液。采用AB-8大孔樹脂富集純化，用原料用量5倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%乙醇洗脫，洗脫速度lBV/h。洗脫液減壓濃縮至相對(duì)密度在65°C為1. 2-1. 3的稠膏，在40-50°C，-0. 04 -0. 06Mpa下真空干燥，粉碎， 得到刺五加總苷提取物粉末，備用。b、取鉤藤原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇50°C條件下加熱回流提取3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的5倍，提取時(shí)間為2小時(shí)，減壓濃縮至相對(duì)密度在 65°C為1. 2-1. 3的稠膏，在40-50°C，-0. 04 -0. 06Mpa下真空干燥，粉碎，得到鉤藤總苷提取物粉末，備用。C、取白芍原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%乙醇加熱回流提取3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的5倍，提取時(shí)間為2小時(shí)。采用AB-8大孔樹脂富集純化，用原料用量5倍量的的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%乙醇洗脫，洗脫速度1. 2BV/h。洗脫液減壓濃縮只相對(duì)密度在65V為1. 2-1. 3的稠膏，在40-50°C，-0. 04 -0. 06Mpa下真空干燥，粉碎，得到芍藥總苷提取物粉末，備用。d、按刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物、鉤藤總堿提取物的重量比為6 :2:2
的比例混合三種細(xì)粉，干燥保存。e、細(xì)粉加入羧甲基纖維素混勻，用的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80 %的乙醇溶液制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，使用常規(guī)加工設(shè)備制成片劑，每片重0. 35g。實(shí)施例4顆粒劑的制備a、取刺五加原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%的乙醇加熱回流提取3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的8倍，提取時(shí)間為1小時(shí)，合并醇提液。采用AB-8大孔樹脂富集純化，用原料用量10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)70%乙醇洗脫，洗脫速度lBV/h。洗脫液減壓濃縮至相對(duì)密度在65°C為1. 7-1. 8的稠膏，在60-70°C，-0. 02 -0. 04Mpa下真空干燥，粉碎， 得到刺五加總苷提取物粉末，備用。b、取鉤藤原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%的乙醇80°C條件下加熱回流提取2次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的10倍，提取時(shí)間為1小時(shí)，減壓濃縮至相對(duì)密度在 65°C為1. 7-1. 8的稠膏，在60-70°C，-0. 02 -0. 04Mpa下真空干燥，粉碎，得到鉤藤總苷提取物粉末，備用。C、取白芍原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%乙醇加熱回流提取2次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的10倍，提取時(shí)間為1小時(shí)。采用AB-8大孔樹脂富集純化，用原料用量10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%乙醇洗脫，洗脫速度1. 2BV/h。洗脫液減壓濃縮只相對(duì)密度在 65°C為1. 7-1. 8的稠膏，在60-70°C，-0. 02 -0. 04Mpa下真空干燥，粉碎，得到芍藥總苷提取物粉末，備用。d、按刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物、鉤藤總堿提取物的重量比為6 :3:3 的比例混合三種細(xì)粉，干燥保存。e、細(xì)粉加入羧甲基纖維素混勻，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇溶液制粒，干燥，整粒， 裝袋，每袋重5g。實(shí)驗(yàn)例1 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株P(guān)C12細(xì)胞購自中科院上海細(xì)胞所2、實(shí)驗(yàn)藥物MPP+購自SIGMA-RBI公司、本發(fā)明藥物組合物粉末(按照實(shí)施例4提取方法提取的刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物以及鉤藤總堿提取物，按刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物、鉤藤總堿提取物的重量比為6 3 3的重量比例混合三種細(xì)粉。)3、實(shí)驗(yàn)方法將PC12細(xì)胞配成單細(xì)胞懸液，以5X104/ML接種于96孔培養(yǎng)板，連續(xù)培養(yǎng)M小時(shí)后換液，在每孔中分別加入不同濃度的本發(fā)明藥物組合物粉末稀釋液，使其終濃度分別為2. 5、5、10、20、40、80μ g/ml，同時(shí)加入終濃度300 μ mo 1/LMPP+溶液。再繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)后，每孔加入MTT溶液(5mg/ml) 20 μ 1，37°C孵育4小時(shí)。終止培養(yǎng)后小心吸空培養(yǎng)基，每孔加入150 μ 1 DMS0,振蕩10分鐘，使結(jié)晶充分溶解。酶標(biāo)儀檢測(cè)每孔在490nm處吸收值，計(jì)算細(xì)胞存活率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1、表2。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(χ士 s) 表示，用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。表1不同濃度的本發(fā)明藥物組合物對(duì)MPP+誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的影響()
組別濃度OD值存活率(％)對(duì)照組0.43±0.06*100模型組MPP+300pmol/L0.37±0.0685.02.5pg/ml+ MPP+30(^mol/L0.41±0.0696.3給藥組5pg/ml+ MPP+30(^mol/L0.34±0.0378.1lOpg/ml+ MPP+30(^mol/L0.35±0.0383.4注與模型組比較，*p < 0. 05表2不同濃度的本發(fā)明藥物組合物對(duì)MPP+誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的影響()
權(quán)利要求
1.一種治療帕金森病的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物的有效組分為刺五加總苷、芍藥總苷和鉤藤總堿，所述藥物組合物由刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物和鉤藤總堿提取物制成，其中刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物和鉤藤總堿提取物的重量比例為 1-9 2-6 2-6。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療帕金森氏病的藥物組合物，其特征在于所述的刺五加總苷提取物、芍藥總苷提取物和鉤藤總堿提取物的重量比例為6 3 3。
3.制備權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物的方法，其特征在于包括如下步驟a、取刺五加原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%-90%的乙醇加熱回流提取2-3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的3-10倍，提取時(shí)間為0. 5-5小時(shí)，合并醇提液； 采用大孔吸附樹脂富集純化，用原料用量2-10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20% -80%乙醇洗脫，洗脫速度l_2BV/h ；洗脫液減壓濃縮至相對(duì)密度在50-95 °C為1. 1-1. 9的稠膏，在 40-80°C,-0. 02 -0. 12Mpa下真空干燥，粉碎，得到刺五加總苷提取物粉末，備用；b、取鉤藤原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%-90%的乙醇50-85°C條件下加熱回流提取2-3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的2-10倍，提取時(shí)間為0. 5-5小時(shí)，減壓濃縮至相對(duì)密度在50-950C^ 1. 1-1. 9的稠膏，在40-80°C，_0. 02 -0. 12Mpa下真空干燥，粉碎，得到鉤藤總堿提取物粉末，備用；c、取白芍原料加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%-90%乙醇加熱回流提取2-3次，按重量計(jì)，每次乙醇溶液的用量為原料用量的2-10倍，提取時(shí)間為0. 5-5小時(shí)，合并醇提液；采用大孔吸附樹脂富集純化，用原料用量2-10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20% -80%乙醇洗脫，洗脫速度l-2BV/h ；洗脫液減壓濃縮至相對(duì)密度在50-950C^ 1. 1-1. 9的稠膏，在40-80°C，_0. 02 -0. 12Mpa下真空干燥，粉碎，得到芍藥總苷提取物粉末，備用；d、按權(quán)利要求1或2所述的比例混合步驟a、b、c分別得到的三種細(xì)粉，干燥保存。
4.按照權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于步驟(a)、(c)中所述的大孔吸附樹脂選自AB-8大孔吸附樹脂、X-5大孔吸附樹脂、DM-301大孔吸附樹脂或NKA-9大孔吸附樹脂其中至少一種。
5.按照權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述的大孔吸附樹脂為AB-8大孔吸附樹脂。
6.權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物在制備治療帕金森氏病藥物中的用途。
7.一種治療帕金森氏病的中藥制劑，其特征在于由有效劑量權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物和藥學(xué)上接受的輔料組成，按照藥物制劑常規(guī)方法做成臨床上適宜的各種中藥口服制劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的中藥制劑，其特征在于，所述中藥口服制劑為滴丸劑、膠囊劑、片劑或顆粒劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的中藥制劑，其特征在于，所述輔料選自羧甲基纖維素、硬脂酸鎂、PEG-8000、乳糖、糊精、微晶纖維素或淀粉其中至少一種。
10.權(quán)利要求7-9任一項(xiàng)所述的中藥制劑在制備治療帕金森氏病藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療帕金森氏病的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用，本發(fā)明的藥物組合物是以刺五加總苷、鉤藤總堿、芍藥總苷為有效組分所制成的組合物。其制備方法是將三種藥材分別用乙醇提取，得到的稠膏干燥粉碎后，按比例混合，得到的粉末經(jīng)中藥制劑常規(guī)制備方法即可制得臨床上適宜的各種口服制劑，包括膠囊劑、片劑、顆粒劑、滴丸劑等。本發(fā)明治療帕金森氏病中藥制劑，無副作用，能有效治療帕金森氏病，提高帕金森氏病患者的生活質(zhì)量。
文檔編號(hào)A61P25/16GK102283920SQ20111026053
公開日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年9月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月5日
發(fā)明者劉樹民 申請(qǐng)人:劉樹民