專利名稱：新型副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種副豬嗜血桿菌多價(jià)疫苗，特別是指一種副豬嗜血桿菌4型JS株、5型ZJ株、12型HeB株的三價(jià)滅活疫苗及制備方法。
背景技術(shù)：
副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis, Hps)引起豬的多發(fā)性衆(zhòng)膜炎和關(guān)節(jié)炎，該病又稱為豬革拉澤氏病(Glsser’s Disease)，曾一度被認(rèn)為是由應(yīng)激所引起的散發(fā)性疾病，后來被證實(shí)是由副豬嗜血桿菌所引起。副豬嗜血桿菌可以影響從2周齡到4月齡的青年豬，主要在斷奶后和保育階段發(fā)病，通常見于5 8周齡的豬，發(fā)病率一般在10% 15%，嚴(yán)重時(shí)死亡率可達(dá)50%。主要臨床癥狀表現(xiàn)為咳嗽、呼吸困難、消瘦、跛行和被毛粗亂；主要剖檢病變表現(xiàn)為纖維素性胸膜炎、心包炎、腹膜炎、關(guān)節(jié)炎和腦膜炎等。此外，副豬嗜血桿菌還可引起敗血癥，并且在急性感染后可能留下后遺癥，即母豬流產(chǎn)、公豬慢性跛行。 早在1910年，德國(guó)科學(xué)家Glsser就發(fā)現(xiàn)了副豬嗜血桿菌與豬的多發(fā)性漿膜炎和關(guān)節(jié)炎之間的聯(lián)系。隨著世界養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，該病已成為全球范圍內(nèi)影響?zhàn)B豬業(yè)的典型細(xì)菌性疾病。西方發(fā)達(dá)國(guó)家在大量分離副豬嗜血桿菌的基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)該菌的血清型復(fù)雜多樣，按Kieletein-Rapp-Gabriedson(KRG)瓊脂擴(kuò)散血清分型方法,至少可將副豬嗜血桿菌分為15個(gè)血清型，另有20%以上的分離株血清型不可定；根據(jù)德國(guó)、美國(guó)、加拿大、日本和西班牙等國(guó)家的血清流行病學(xué)調(diào)查，以血清型4、5、13型最為流行；根據(jù)我國(guó)血清流行病學(xué)調(diào)查和分離菌株的鑒定，以4、5型最為流行，其次是12型、13型。近年來，各副豬嗜血桿菌血清群之間交互免疫力不強(qiáng)，接種的疫苗菌株血清群與當(dāng)時(shí)當(dāng)?shù)亓餍械母必i嗜血桿菌病的病原血清群不相符，給該病的預(yù)防和治療帶來了一定的難度。目前國(guó)內(nèi)用于副豬嗜血桿菌病免疫預(yù)防的疫苗有勃林格殷格翰動(dòng)物保健(美國(guó))有限公司生產(chǎn)的副豬嗜血桿菌病滅活疫苗(Z-1517株)；西班牙海博萊生物大藥廠生產(chǎn)的豬副豬嗜血桿菌病I型和6型滅活疫苗和華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司、中牧實(shí)業(yè)股份有限公司生產(chǎn)的副豬嗜血桿菌病4型和5型滅活疫苗；這些疫苗的應(yīng)用起到了一定的預(yù)防作用，而該病的病原流行株和多種血清型感染已經(jīng)使現(xiàn)有疫苗很難達(dá)到預(yù)期的免疫效果，尤其是還沒有副豬嗜血桿菌病12型，由于沒有合適的毒株制備，加上各個(gè)抗原之間存在干擾，一針能夠防治副豬嗜血桿菌新病原弓I起的副豬嗜血桿菌病為養(yǎng)殖業(yè)迫切需要解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明的主要目的在于提供一種解決目前技術(shù)缺陷的副豬嗜血桿菌病，由三種抗原和獸醫(yī)學(xué)可接受的佐劑組成，其中，所述的三種抗原為已滅活的副豬嗜血桿菌血清4型JS株、已滅活的副豬嗜血桿菌血清5型ZJ株、已滅活的副豬嗜血桿菌血清12型HeB株抗原。本發(fā)明使用的抗原來自副豬嗜血桿菌血清4型JS株，保藏號(hào)為CCTCC NO M2011172 ;副豬嗜血桿菌血清5型ZJ株，保藏號(hào)為CCTCC NO M 2011173 ;副豬嗜血桿菌血清12 型 HeB 株，保藏號(hào)為 CCTCC NO M 2011174。優(yōu)選地，本發(fā)明所述三種抗原的比例相等，副豬嗜血桿菌血清4型、5型、12型抗原含量各為 2. OX 109CFU/mL。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的獸醫(yī)學(xué)可接受的佐劑為白油佐劑、氫氧化鋁膠佐劑和Montanide IMS1313 VG,Montanide IMS 251C VG,Montanide ISA15A VG及Montanide GELPR聚合物佐劑的一種或幾種組成。優(yōu)選的，本發(fā)明所述的獸醫(yī)學(xué)可接受的佐劑為水性佐劑Montanide GEL PR。更優(yōu)地，本發(fā)明所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗中還含有疫苗總量O. 01% V的硫柳萊。本發(fā)明還提供了一種如上所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗的制備方法，包括 以下步驟 a.分別將副豬嗜血桿菌血清4型JS株、副豬嗜血桿菌血清5型ZJ株、副豬嗜血桿菌血清12型HeB株菌種繁殖培養(yǎng)，得到4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液；b.分別將步驟a培養(yǎng)得到的4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液進(jìn)行滅活，并濃縮菌液；c.將上述已滅活、濃縮的4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液等體積比例混合，并加入疫苗總量O. 01 % V的硫柳萊，然后和獸藥學(xué)上可接受的佐劑進(jìn)行乳化，其中，副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗抗原含量為滅活前副豬嗜血桿菌血清4型、5型、12型活菌數(shù)各為 2. OX 109CFU/mL。d.對(duì)步驟c得到的副豬嗜血桿菌病三聯(lián)滅活疫苗進(jìn)行分裝。優(yōu)選地，本發(fā)明的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗的制備方法中，所述獸醫(yī)學(xué)可接受的佐劑為白油佐劑、氫氧化鋁膠佐劑和Montanide IMS1313 VG、Montanide IMS 251C VG、Montanide ISA15A VG及Montanide GEL PR聚合物佐劑的一種或幾種組成。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的副豬嗜血桿菌病細(xì)菌為副豬嗜血桿菌血清4型JS株，保藏號(hào)為CCTCC NO M 2011172 ;副豬嗜血桿菌血清5型ZJ株，保藏號(hào)為CCTCC NO M 2011173 ；副豬嗜血桿菌血清12型HeB株，保藏號(hào)為CCTCC NO M 2011174。本發(fā)明的另一目的在于提供如上述的副豬嗜血桿菌病三聯(lián)滅活疫苗在預(yù)防和治療副豬嗜血桿菌相關(guān)病的應(yīng)用。技術(shù)效果發(fā)明人意外地分離獲得三株副豬嗜血桿菌血清4型、5型和12型的菌株，通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)這三株副豬嗜血桿菌4型JS株菌、5型ZJ株菌、12型HeB株菌制備獲得三聯(lián)滅活疫苗可以對(duì)我國(guó)目前流行的多種副豬嗜血桿菌血清型引起的副豬嗜血桿菌病有較好的預(yù)防和治療效果，特別是可以解決目前由于副豬嗜血桿菌新發(fā)病原而導(dǎo)致的現(xiàn)有疫苗治療效果不佳的問題。其次，多價(jià)疫苗常常由于抗原的相互影響而導(dǎo)致免疫失敗，特別是對(duì)于多血清型的副豬嗜血桿菌引起的疾病，由于血清型眾多，選擇抗原的種類和比例更加困難，而且對(duì)于大動(dòng)物(豬)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)往往時(shí)間漫長(zhǎng)、費(fèi)用昂貴，這也是一直以來市場(chǎng)上未出現(xiàn)有效的副豬嗜血桿菌多價(jià)疫苗的原因。而本發(fā)明在獲得了三株新的副豬嗜血桿菌基礎(chǔ)上，通過對(duì)這三種毒株制備的抗原的濃度含量及其相互比例進(jìn)行了大量工作和實(shí)踐，得到了一種抗原間配比及濃度適宜的三價(jià)疫苗，疫苗的免疫效果良好，可以有效治療和預(yù)防副豬嗜血桿菌相關(guān)疾病，解決了長(zhǎng)期以來的多血清型副豬嗜血桿菌相關(guān)疾病的多價(jià)疫苗制備困難的問題。最后，本發(fā)明的三價(jià)滅活疫苗使用了氧化鋁膠或水型佐劑，特別發(fā)現(xiàn)了水性佐劑制備獲得三價(jià)滅活疫苗)安全性和免疫效果最佳，而且配苗工藝簡(jiǎn)單，疫苗易注射，安全可靠，克服了以往常用的油性佐劑的缺點(diǎn)。菌株保藏說明本發(fā)明所用的菌株為副豬嗜血桿菌病血清4型JS株分類命名副豬嗜血桿菌病JS(Haemophilus parasuis JS),保藏號(hào)為CCTCCNO M 2011172 ；·副豬嗜血桿菌病血清5型ZJ株分類命名副豬嗜血桿菌病ZJ(Haemophilus parasuis ZJ),保藏號(hào)為CCTCCNO M 2011173 ；副豬嗜血桿菌病血清12型HeB株分類命名副豬嗜血桿菌病HeB(Haemophilus parasuis HeB),保藏號(hào)為:CCTCCNO Μ 2011174 ；以上三個(gè)菌株的保藏日期均為2011年5月18日，保藏地址均為中國(guó)武漢，武漢大學(xué)，中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏單位均為中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(簡(jiǎn)稱CCTCC)。


圖I為副豬嗜血桿菌三價(jià)滅活疫苗工藝流程圖。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明提供的新型副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，所述副豬嗜血桿菌病滅活疫苗包含抗原和佐劑；其中抗原包含已滅活的副豬嗜血桿菌血清4型JS株、5型ZJ株、12型HeB株抗原；所述佐劑為獸醫(yī)學(xué)可接受的佐劑；作為本發(fā)明副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗的優(yōu)選實(shí)施方案，所述三種抗原的比例相等(即I : I : 1)，副豬嗜血桿菌血清4型、5型、12型抗原含量均為2. 0X109CFU/mL。其中，本發(fā)明的抗原含量是指在滅活前的活菌數(shù)的含量。作為本發(fā)明副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗的優(yōu)選實(shí)施方案，所述佐劑為白油佐齊U、氫氧化鋁膠佐劑和以卡波姆(Carbomer)為基礎(chǔ)的Montanide IMS1313 VG(包括同系列佐劑)、Montanide IMS 251C VG (包括同系列佐劑)、Montanide ISA15A VG (包括同系列佐齊[J)及Montanide GEL PR(包括同系列佐劑)聚合物佐劑。作為本發(fā)明副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗的優(yōu)選實(shí)施方案，所述疫苗中還含有疫苗總量O. 01% V的硫柳汞。新型副豬嗜血桿菌病滅活疫苗的制備方法，包含如下步驟a.分別將副豬嗜血桿菌血清4型JS株、5型ZJ株、12型HeB株菌種繁殖培養(yǎng)，得到4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液；
b.分別將步驟a培養(yǎng)得到的4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液中按總量加入O. 3%的甲醛溶液，放置37°C滅活，期間攪拌3 5次，根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果濃縮菌液；c.將上述已滅活、濃縮的4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液等比例混合，并加入疫苗總量O. 01 %的硫柳汞，然后和不同佐劑進(jìn)行乳化，成品副豬嗜血桿菌病滅活疫苗抗原含量為滅活前副豬嗜血桿菌血清4型、5型、12型活菌數(shù)各為2. OX 109CFU/mL ；d.以適量體積分裝副豬嗜血桿菌病滅活疫苗，蓋上瓶蓋，并壓鋁蓋。在上述新型副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗的制備過程中，從步驟a培養(yǎng)好的4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液取樣，進(jìn)行純粹性檢驗(yàn)和活菌計(jì)數(shù)；從步驟b已滅活好的4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液取樣進(jìn)行滅活檢驗(yàn)和安檢；對(duì)步驟c得到的副豬嗜血桿菌病滅活疫苗進(jìn)行無菌檢驗(yàn)、安全檢驗(yàn)和效力檢驗(yàn)，以確保疫苗的安全性、可靠性。本發(fā)明的新型副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，克服了現(xiàn)有商品化疫苗只能預(yù)防I·種或者2種副豬嗜血桿菌流行毒株引起的副豬嗜血桿菌感染的不足。本發(fā)明采用了不同的疫苗佐劑和適宜的配苗技術(shù)制備了副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，可以同時(shí)預(yù)防由副豬嗜血桿菌多種血清型引起的副豬嗜血桿菌病?？梢詽M足不同養(yǎng)殖戶和大型養(yǎng)殖場(chǎng)的需求，并達(dá)到了一針多防的效果。為使本發(fā)明更加容易理解，下面將進(jìn)一步闡述本發(fā)明的具體實(shí)施例。如未特別聲明，本發(fā)明的一般實(shí)驗(yàn)方法可使用本領(lǐng)域常用的試驗(yàn)方法進(jìn)行，或參考《中華人民共和國(guó)獸藥典(二〇〇五年版)》及附錄的試驗(yàn)方法完成。實(shí)施例I副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗的制備與效力實(shí)驗(yàn)副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，由已經(jīng)滅活、濃縮并且安全檢驗(yàn)合格的副豬嗜血桿菌病血清4型、5型、12型菌株制備獲得，即用副豬嗜血桿菌血清4型、5型、12型菌株制備抗原，分別與Montanide IMS1313 VG (包括同系列佐劑)、Montanide IMS 251C VG (包括同系列佐劑)、Montanide ISA15A VG(包括同系列佐劑)、Montanide GEL PR(包括同系列佐劑)、白油佐劑、氫氧化鋁膠佐劑混合配制疫苗，其中，所述三種抗原濃度比例相等。I.菌種a.副豬嗜血桿菌血清4型JS株，由普萊柯生物工程股份有限公司分離、鑒定，已在中國(guó)典型培養(yǎng)物中心進(jìn)行保藏，保藏日期2011年5月18日，保藏號(hào)為CCTCC M 2011172。b.副豬嗜血桿菌血清5型ZJ株，由普萊柯生物工程股份有限公司分離、鑒定，已在中國(guó)典型培養(yǎng)物中心進(jìn)行保藏，保藏日期2011年5月18日，保藏號(hào)為CCTCC M 2011173。c.副豬嗜血桿菌血清12型HeB株，由普萊柯生物工程股份有限公司分離、鑒定，已在中國(guó)典型培養(yǎng)物中心進(jìn)行保藏，保藏日期2011年5月18日，保藏號(hào)為CCTCC M2011174。2.菌種的繁殖a. 一級(jí)種子的繁殖上述凍干菌種，劃線接種于TSA/NAD平板上，置37°C培養(yǎng)18 24小時(shí)，選取符合要求的菌落，接種于TSB/NAD液體培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)12小時(shí)，作為一級(jí)種子。b. 二級(jí)種子的繁殖取一級(jí)種子的培養(yǎng)物，按I % V的量加入TSB/NAD液體培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)12小時(shí)，經(jīng)檢驗(yàn)純粹后作為二級(jí)種子。3.菌液的培養(yǎng)在副豬嗜血桿菌培養(yǎng)基(商售TSB)中，加入O. 01% O. 05% (V/V)的NAD、5% 10% (V/V)的血清、O. I % 5% (V/V)的葡萄糖，將副豬嗜血桿菌血清4型、5型、12型菌種分別按1% (V/V)的量加進(jìn)培養(yǎng)基中分別培養(yǎng)，混勻后置37°C培養(yǎng)18小時(shí)，得到三種菌液。4.純粹檢驗(yàn)從上述培養(yǎng)好的三種菌液中取樣，用TSA/NAD培養(yǎng)基依《中華人民共和國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行純粹檢驗(yàn)，結(jié)果為純粹。5.活菌計(jì)數(shù)
從上述培養(yǎng)好的三種菌液取樣，用TSA/NAD平板培養(yǎng)進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，以確定培養(yǎng)的菌數(shù)。6.滅活向上述三種培養(yǎng)好的菌液中，按總量的O. 3% (V/V)加入甲醛溶液，放置于37°C滅活24h，期間攪拌3 5次。7.滅活檢驗(yàn)滅活后，取上述三種已經(jīng)滅活的菌液5mL接種于IOOmL含O. 01% O. 05% (V/V)NAD、5% 10% (V/V)的血清、0.1% 5% (V/V)的葡萄糖的副豬嗜血桿菌TSB培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)18小時(shí)，再移植于上述IOOmL培養(yǎng)基中37°C培養(yǎng)18小時(shí)。取滅活的菌液O. ImL劃線接種于TSA/NAD平板培養(yǎng)基，37°C培養(yǎng)24小時(shí)。以上兩種培養(yǎng)基培養(yǎng)后，均無菌生長(zhǎng)。8.安全檢測(cè)取上述三種已滅活的菌液靜脈注射18 22g的Balb/C小鼠5只，每只O. 2mL,結(jié)果為三天內(nèi)5/5健活,為滅活徹底。9.疫苗的配制a.油佐劑苗的配制具體成分配比如下表
主要材料組分含量(％)
獸用白油93
司本-806
硬脂酸紹I
吐溫-804
水相油相(體積比) I 1.5以白油為佐劑制成的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗。具體方法如下油相的制備白油93份，加入硬脂酸鋁I份，邊加邊攪拌，再加入6份司本-80，充分混均，121°C，30分鐘。水相制備參照菌落計(jì)數(shù)結(jié)果，將各個(gè)菌液以超濾器濃縮為5.0X1010CFU/mL·將三種血清型滅活并檢驗(yàn)合格的菌液等比例混合，加入終濃度為4%滅菌吐溫-80，邊加邊攪拌，至完全溶解。乳化水相與油相的比例為I : 1.5，即I份水相配
I.5份油相在高速攪拌器中乳化2-5分鐘，在終止攪拌前加入疫苗總量的O. 01% V的硫柳汞，使得疫苗中三種抗原的含量均為2. OX 109CFU/ml。b.鋁膠佐劑苗的配制具體成分配比如下
權(quán)利要求
1.一種副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，其特征在于，由三種副豬嗜血桿菌抗原和獸醫(yī)學(xué)可接受的佐劑組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗其中所述抗原為已滅活的副豬嗜血桿菌血清4型JS株、已滅活的副豬嗜血桿菌血清5型ZJ株、已滅活的副豬嗜血桿菌血清12型HeB株抗原。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，其特征在于，所述的副豬嗜血桿菌血清4型JS株，保藏號(hào)為CCTCC NO M 2011172 ;副豬嗜血桿菌血清5型ZJ株，保藏號(hào)為CCTCC NO :M2011173 ;副豬嗜血桿菌血清12型HeB株，保藏號(hào)為CCTCC NO M 2011174。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，其特征在于，所述三種抗原的比例相等，副豬嗜血桿菌血清4型、5型、12型抗原的含量各為2. OX 109CFU/mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，其特征在于，所述獸醫(yī)學(xué)可接受的佐劑為白油佐劑、氫氧化鋁膠佐劑和Montanide IMS1313 VG、Montanide IMS 251CVG、Montanide ISA15A VG、Montanide GEL PR 佐劑的一種或幾種組成。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，其特征在于，所述的獸醫(yī)學(xué)可接受的佐劑為水性佐劑Montanide GEL PR。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，其特征在于，所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗中還含有疫苗總量O. 01% V/V的硫柳汞。
8.—種權(quán)利要求I所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 a.分別將副豬嗜血桿菌血清4型JS株、副豬嗜血桿菌血清5型ZJ株、副豬嗜血桿菌血清12型HeB株菌種繁殖培養(yǎng)，得到4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液； b.分別將步驟a培養(yǎng)得到的4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液進(jìn)行滅活，并濃縮囷液； c.將上述已滅活、濃縮的4型JS株菌液、5型ZJ株菌液、12型HeB株菌液等體積比例混合，并加入疫苗總量O. 01 % (V/V)的硫柳汞，然后和獸藥學(xué)上可接受的不同佐劑進(jìn)行乳化，其中，副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗抗原含量為滅活前副豬嗜血桿菌血清4型、5型、12型活菌數(shù)各為2. OX 109CFU/mL。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗的制備方法，其特征在于，所述獸醫(yī)學(xué)可接受的佐劑為白油佐劑、氫氧化鋁膠佐劑和Montanide IMS1313 VG,MontanideIMS 251C VG,Montanide ISA15A VG 及 Montanide GEL PR 聚合物佐劑的一種或幾種組成。
10.一種副豬嗜血桿菌，其特征在于，所述的副豬嗜血桿菌為副豬嗜血桿菌血清4型JS株，保藏號(hào)為CCTCC NO M 2011172 ;副豬嗜血桿菌血清5型ZJ株，保藏號(hào)為CCTCC NO M2011173 ;副豬嗜血桿菌血清12型HeB株，保藏號(hào)為CCTCC NO M 2011174。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-7任意一項(xiàng)所述的三聯(lián)滅活疫苗在制備預(yù)防和治療副豬嗜血桿菌相關(guān)病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種副豬嗜血桿菌病三價(jià)滅活疫苗，含抗原的比例相等的已滅活的副豬嗜血桿菌血清4型JS株、已滅活的副豬嗜血桿菌血清5型ZJ株、已滅活的副豬嗜血桿菌血清12型HeB株抗原與制備方法。本發(fā)明人分離獲得三株副豬嗜血桿菌血清4型、5型和12型的菌株，這三種毒株制備的抗原的濃度含量及其相互比例進(jìn)行了大量工作和實(shí)踐，得到了一種抗原間配比及濃度適宜的三價(jià)疫苗，可以對(duì)我國(guó)目前流行的多種副豬嗜血桿菌血清型引起的副豬嗜血桿菌病有較好的預(yù)防和治療效果，特別是可以解決目前由于副豬嗜血桿菌新發(fā)病原而導(dǎo)致的現(xiàn)有疫苗治療效果不佳的問題。
文檔編號(hào)A61K39/39GK102908615SQ20111021883
公開日2013年2月6日 申請(qǐng)日期2011年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月1日
發(fā)明者張?jiān)S科, 孫進(jìn)忠, 白朝勇 申請(qǐng)人:普萊柯生物工程股份有限公司