專利名稱：：甘西鼠尾草提取物在制備治療腎小球腎炎藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及甘西鼠尾草提取物在制備治療腎小球腎炎藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：腎小球腎炎是由多種病因引起的腎小球疾病，臨床可表現(xiàn)為蛋白尿、血尿、水腫、高血壓等，分為急性腎小球腎炎和慢性腎小球腎炎。急性腎小球腎炎起病急，病程短，以血尿、蛋白尿、尿少甚至氮質(zhì)血癥、水腫及高血壓等為主要癥狀，通過積極治療，預(yù)后良好；慢性腎小球腎炎病程長(zhǎng)，多有不同程度的腎功能損害，且反復(fù)發(fā)作，預(yù)后較差，如不積極治療，最后多數(shù)發(fā)展成慢性腎功能衰竭即尿毒癥。腎小球腎炎嚴(yán)重危害人類健康，一量患病，若治療不當(dāng)，隨著病情的發(fā)展，會(huì)逐漸出現(xiàn)腎功能減退，腎功能障礙，甚至腎功能衰竭，輕則影響患者正常的工作和學(xué)習(xí)，使患者喪失勞動(dòng)力，重則奪去患者寶貴的生命。目前，天然產(chǎn)物在治療腎臟疾病方面的研究方面取得了很大的進(jìn)展，如采用合適的天然產(chǎn)物制劑治療腎病，具有療效明顯，不易復(fù)發(fā)，痛苦少，毒副作用小，費(fèi)用低的特點(diǎn)，因而越來越受到臨床醫(yī)生和廣大患者的青睞。甘西鼠尾草/^e而Mz7Maxim.為唇形科鼠尾草屬植物，又名大紫丹參、紫丹參、甘肅丹參，藥用部位為根部，主要產(chǎn)自我國(guó)甘肅西部、四川西部、云南西北部及西藏等地，原為當(dāng)?shù)孛耖g草藥。甘西鼠尾草與常用中藥丹參為同屬植物，其主要化學(xué)成分為脂溶性二萜醌類化合物和水溶性多酚類化合物。近年來，科研人員對(duì)甘西鼠尾草的研究主要集中在心腦血管藥理作用及抗菌抗炎作用方面，例如甘西鼠尾草注射液對(duì)心肌缺血時(shí)血流動(dòng)力學(xué)的影響(中國(guó)民族民間醫(yī)藥雜志，2004，(1):35-39);滇丹參、甘西鼠尾草、褐毛甘西鼠尾草對(duì)離體豚鼠心臟的影響(昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，23(1):14-17);甘西鼠尾草注射液和丹參注射液抗大鼠急性腦缺血和抗脂質(zhì)過氧化作用的比較(中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2003，8(1):23-26);甘西鼠尾草水提物對(duì)實(shí)驗(yàn)性炎癥的影響(蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文，蘭州，2000);甘西鼠尾草根水提物抗腹瀉效果及對(duì)兔離體腸管的影響(甘肅畜牧獸醫(yī)，2000，(6):14-15);中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)200410073373.8治療奶牛乳房炎藥物組合物及其制備方法。目前尚無文獻(xiàn)報(bào)道甘西鼠尾草具有治療腎小球腎炎的作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種甘西鼠尾草提取物及其制備方法，以及甘西鼠尾草提取物在制備治療腎小球腎炎藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的甘西鼠尾草提取物是依照下述方法制備的甘西鼠尾草根部藥材干燥粉碎后過篩，以含水低級(jí)醇浸泡后滲漉或加熱提取，提取液濃縮后離心或過濾，棄去沉淀，取離心上清液或?yàn)V液，濃縮干燥后即得甘西鼠尾草提取物。本發(fā)明的甘西鼠尾草提取物主要含原兒茶酸、咖啡酸、紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸B等多種酚酸類化合物。本發(fā)明的甘西鼠尾草提取物更佳的制備方法是甘西鼠尾草根部干燥藥材粉碎后過篩，以15%—65%含水乙醇常溫下浸泡24-48小時(shí)，于常溫下用15%一65%含水乙醇滲濾提取2—5次，合并浸泡液及提取液，濃縮后離心，棄去沉淀，過濾液進(jìn)行大孔樹脂吸附，以蒸餾水水淋除去雜質(zhì)，然后再以15%—65%含水乙醇進(jìn)行洗脫，合并洗脫液，濃縮至無醇味，干燥后即得甘西鼠尾草提取物。本發(fā)明還通過如下實(shí)驗(yàn)證明甘西鼠尾草提取物在制備治療腎小球腎炎藥物中的應(yīng)用效果使用Wistar大鼠注射牛血清白蛋白制作動(dòng)物腎炎模型，模型成功后分別灌胃給予高、中、低3種劑量的甘西鼠尾草提取物，每日l次，連續(xù)給藥，第20、40日時(shí)，眼眶取血、禁食但自由飲水，收集24h尿液，分別進(jìn)行生化檢測(cè)，最后解剖大鼠取其腎臟，做病理切片，觀察甘西鼠尾草提取物對(duì)腎炎大鼠病理組織的改善作用，而且稱量各組大鼠腎臟濕重，計(jì)算腎臟濕重系數(shù)。Wistar正常大鼠灌胃給予高、中、低3種劑量的甘西鼠尾草提取物，每日l次，連續(xù)15日，末次給藥lh后心臟取血觀察藥物對(duì)正常大鼠全血表觀粘度的影響。Wistar正常大鼠灌胃給予高、中、低3種劑量的甘西鼠尾草提取物，連續(xù)給藥3曰，在末次給藥lh后大鼠置于代謝籠內(nèi)，觀察并收集大鼠給藥后7h的平均200710048139.3說明書第3/12頁(yè)尿量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果甘西鼠尾草提取物治療中、高劑量組模型大鼠尿蛋白含量顯著性降低，腎小球腫脹顯著性減輕；甘西鼠尾草提取物各劑量組全血粘度均比空白對(duì)照組大鼠顯著降低；甘西鼠尾草提取物中、高劑量組與空白對(duì)照組比較，7h內(nèi)平均總尿量顯著增加，甘西鼠尾草提取物高劑量組13h內(nèi)尿量與空白對(duì)照組比較顯著性增加。實(shí)驗(yàn)證明甘西鼠尾草對(duì)慢性血清病性腎小球腎炎模型大鼠具有較好的治療作用。此外，甘西鼠尾草可以降低血液粘度，并具有顯著且溫和的利尿作用，可以調(diào)整腎臟疾病中的電解質(zhì)紊亂，對(duì)于治療和緩解腎臟疾病的發(fā)展有著積極的意義。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的實(shí)施并不僅限于此。實(shí)施例l甘西鼠尾草提取物的制備100kg的甘西鼠尾草根部干燥藥材粉碎后，過10目篩，投入提取罐，以40%含水乙醇200L常溫下浸泡24h，于常溫下用40%含水乙醇1500L滲濾提取3次，合并浸泡液及提取液，濃縮至100L，離心后過濾，棄去沉淀，過濾液進(jìn)行聚苯乙烯多孔性吸附大孔樹脂吸附，柱內(nèi)大孔樹脂裝量為200L，以1000L蒸餾水水淋除去雜質(zhì)，然后再以1500L的40%含水乙醇進(jìn)行洗脫，合并洗脫液濃縮至無醇味，并進(jìn)一步干燥，即得棕褐色粉末狀甘西鼠尾草提取物1.8kg。按生藥投藥量計(jì)算，甘西鼠尾草提取物得率為1.8%。實(shí)施例2甘西鼠尾草提取物對(duì)腎小球腎炎大鼠的治療作用本實(shí)驗(yàn)通過給大鼠灌胃給予不同劑量的甘西鼠尾草提取物，觀察其對(duì)腎小球腎炎的改善和治療作用。1材料與方法1.1受試藥物依照實(shí)施例1方法制備的甘西鼠尾草提取物理化性質(zhì)棕褐粉末貯存條件室溫密閉保存質(zhì)量500g包裝塑料瓶配制方法0.8%羧甲基纖維素鈉碾磨混懸均勻，配成所需濃度1.2實(shí)驗(yàn)材料BSA(生工生物工程(上海)有限公司生產(chǎn)，25g/瓶，批號(hào)0409A09)弗氏佐劑(Sigma公司生產(chǎn)，10xlOml，批號(hào)122K8927)雷公藤多苷片(上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，100mgxlOO片，批號(hào)040901，有效期至2007年8月，用0.8%羧甲基纖維素鈉配成1.5mg/ml的溶液)1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar大鼠雌雄各半4~5周105135g72只，共分六組，每組12只，雌雄各半分組分為六組，分別為低、中、高三個(gè)甘西鼠尾草提取物劑量組，陽性藥對(duì)照組(灌胃給予雷公藤多苷片)，模型對(duì)照組，正常對(duì)照組來源上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，清潔級(jí)，動(dòng)物合格證號(hào)SCXK(滬)2003-0003飼養(yǎng)中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心動(dòng)物房，SPF級(jí)給藥容量lml/100g體重藥物濃度甘西鼠尾草提取物溶液劑量分別為5、10、20mg/ml，雷公藤多苷片溶液為1.5mg/ml給藥劑量甘西鼠尾草提取物低、中、高三個(gè)劑量組灌胃劑量分別為50、100、200mg/kg體重；雷公藤多苷片劑量為15mg/kg體重2試驗(yàn)方法動(dòng)物領(lǐng)回后，調(diào)整飼養(yǎng)1周，除正常對(duì)照組外大鼠用10%水合氯醛麻醉后切除一側(cè)腎臟。休養(yǎng)1周后。足墊注射BSA3mg和完全弗氏佐劑0.1ml，后又于1周末加強(qiáng)一次。2周末，以lh的間隔腹腔注射遞增劑量的BSA(分別為0.5、1.0、1.5、3.0mg)，次日腹腔注射2.0mgBSA，2日后改為每日腹腔注射3.0mgBSA。注射3周后，腹腔注射IOO嗎的大腸桿菌內(nèi)毒素(LPS)l次。BSA均溶于生理鹽水中注射，濃度為5mg/ml，至蛋白尿出現(xiàn)同時(shí)給藥。開始造模前，眼哐取血、收集尿液測(cè)定血清總蛋白(TP)、白蛋白(A)、球蛋白(G)、A/G、屬別齡重量種性年體數(shù)血清尿素氮、血清肌酐、總膽固醇、甘油三脂以及尿蛋白定量、尿素氮和尿肌酐含量。造模期間，于正式免疫第12日時(shí)經(jīng)眼眶取血、收集尿液分別檢測(cè)上述生化指標(biāo)，并根據(jù)結(jié)果分為5組(模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組、甘西鼠尾草提取物低、中、高劑量組)。給藥后第20日，眼眶取血、收集尿液檢測(cè)上述生化指標(biāo)。再于給藥后第40日眼眶缺血、收集尿液檢測(cè)血液及尿液的生化指標(biāo)。3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以I土SZ)表示，組間差異用方差分析法檢驗(yàn)。4實(shí)驗(yàn)結(jié)果甘西鼠尾草提取物對(duì)Wistar腎小球腎炎模型大鼠尿蛋白的影響實(shí)驗(yàn)中(見表l):給藥后20日與給藥后40日的甘西鼠尾草提取物低、中劑量組與模型對(duì)照組相比有顯著性差異，甘西鼠尾草提取物能使Wistar模型大鼠尿蛋白含量顯著降低；高劑量組與模型對(duì)照組相比未見顯著性差異，但對(duì)模型大鼠仍有降低尿蛋白含量的作用趨勢(shì)。甘西鼠尾草提取物對(duì)Wistar腎小球腎炎模型大鼠血生化指標(biāo)的影響實(shí)驗(yàn)中(見表2-表5):血清中總膽固醇含量與模型對(duì)照組相比有顯著性差異，低、高劑量組與模型對(duì)照組相比未見顯著性差異，但對(duì)模型大鼠仍有降低血清中總膽固醇含量的作用趨勢(shì)；在給藥后，治療組血清尿素氮均顯著降低；中、高劑量組血清中總蛋白、白蛋白在給藥后均顯著升高。甘西鼠尾草提取物對(duì)Wistar腎小球腎炎模型大鼠腎臟系數(shù)的影響實(shí)驗(yàn)中(見表6):甘西鼠尾草提取物各劑量組及雷公藤多苷組腎臟系數(shù)均小于模型組，甘西鼠尾草提取物中劑量組與模型對(duì)照組相比有顯著性差異，甘西鼠尾草提取物能顯著性抑制腎臟的炎性浸潤(rùn)和腫大。在HE10x20電鏡下觀察病理切片，病理結(jié)果顯示模型對(duì)照組，血管球纖維化，腎小管上皮壞死后鈣化，部分腎小管上皮新生，管型；血管球纖維化，腎管上皮變性壞死，部分腎管上皮新生，間質(zhì)重度纖維化。雷公藤組，血管球明顯腫脹，腎管上皮變性，間質(zhì)有炎癥。50mg/kg組，血管球腫脹，腎小管上皮變性，管型多；血管球腫脹，腎小管上皮變性，間質(zhì)炎癥。100mg/kg組，血管球腫脹，腎管上皮變性，管型多。200mg/kg組，血管球僅輕微腫大，個(gè)別管型，腎小管上皮輕微變性。正常對(duì)照組，血管球及腎小管正常。表l甘西鼠尾草提取物對(duì)腎炎模型大鼠尿蛋白的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與模型對(duì)照組表2.比'*p<0,05,**p<0.01<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與模型對(duì)照組比，*p<0.05表3甘西鼠尾草提取物對(duì)腎炎模型大鼠血清白蛋白的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與模型對(duì)照組比，*p<0.05表4甘西鼠尾草提取物對(duì)腎炎模型大鼠血清膽固醇的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與模型對(duì)照組比，*p<0.05,**p<0.01表5甘西鼠尾草提取物對(duì)腎炎模型大鼠血清尿素氮的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>與模型對(duì)照組比，*p<0.05,**p<0.015結(jié)論分別給Wistar腎小球腎炎模型大鼠灌胃給予50、100、200mg/kg的甘西鼠尾草提取物藥液，中劑量的甘西鼠尾草提取物能使尿蛋白含量顯著降低，高劑量的甘西鼠尾草提取物也有降低尿蛋白含量作用的趨勢(shì)；甘西鼠尾草提取物有降低模型大鼠血清總膽固醇含量的趨勢(shì)；中劑量的甘西鼠尾草提取物能顯著減少腎臟系數(shù)，低、高劑量的甘西鼠尾草提取物也具有抑制作用的趨勢(shì)。以上提示甘西鼠尾草提取物具有降低腎小球腎炎模型大鼠蛋白尿、調(diào)節(jié)模型大鼠脂代謝紊亂的功能，以及可改善模型大鼠腎臟組織，減少炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，延緩腎小球硬化增殖的作用。實(shí)驗(yàn)例3甘西鼠尾草提取物對(duì)正常大鼠血液粘度的影響本實(shí)驗(yàn)通過給大鼠灌胃給予不同劑量的甘西鼠尾草提取物，觀察其對(duì)正常大鼠血液流變學(xué)的影響。1材料與方法1.1受試藥物依照實(shí)施例1方法制備的甘西鼠尾草提取物理化性質(zhì)棕褐粉末貯存條件室溫密閉保存質(zhì)量500g包裝塑料瓶配制方法0.8%羧甲基纖維素鈉碾磨混懸均勻，配成所需濃度1.2實(shí)驗(yàn)材料雷公藤多苷片(上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，100mgxl00片，批號(hào)040卯1，有效期至2007年8月，用0.8。/。羧甲基纖維素鈉配成1.5mg/ml的溶液)阿司匹林腸溶片(上海信誼百路達(dá)藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，25mgx60片，批號(hào)041104，有效期至2006年IO月，用0.8。/。羧甲基纖維素鈉配成0.5mg/ml的溶液)普利生LBY-N6B型自動(dòng)血流變儀(北京普利生儀器有限公司)1.3試驗(yàn)動(dòng)物種屬Wistar大鼠性別雄性年齡45周體重U0135g數(shù)量60只，共分六組，每組10只分組分為六組，分別為甘西鼠尾草提取物低、中、高三個(gè)劑量組、雷公藤多苷組、陽性藥對(duì)照組(灌胃給予阿司匹林腸溶片)、空白對(duì)照組來源上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，清潔級(jí)，動(dòng)物合格證號(hào)SCXK(滬)2003-0003飼養(yǎng)中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心動(dòng)物房，SPF級(jí)1.4給藥方法給藥方式灌胃給藥給藥容量lml/100g體重藥物濃度甘西鼠尾草提取物溶液劑量分別為5、10、20mg/ml，雷公藤多苷片溶液為1.5mg/ml，阿司匹林腸溶片溶液為0.5mg/ml給藥劑量甘西鼠尾草提取物高、中、低三個(gè)劑量組，灌胃劑量分別為50、100、200mg/kg體重；雷公藤多苷片劑量為15mg/kg體重；阿司匹林腸溶片劑量為5mg/kg體重2試驗(yàn)方法動(dòng)物領(lǐng)回后，適應(yīng)飼養(yǎng)1周，按照體重隨機(jī)分為低、中、高劑量組、雷公藤多苷片組、陽性藥對(duì)照組、空白對(duì)照組，分別以lml/100g體重灌胃給予5、10、20mg/ml的甘西鼠尾草提取物溶液，0.5mg/ml阿司匹林腸溶片溶液和0.8%的羧甲基纖維素鈉空白對(duì)照溶液，每日1次，連續(xù)給藥15日。末次給藥lh后心臟抗凝取血，用普利生LBY-N6B型自動(dòng)血流變儀檢測(cè)各組全血表觀粘度。3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以IiSZ)表示，組間差異用方差分析法檢驗(yàn)。4實(shí)驗(yàn)結(jié)果甘西鼠尾草提取物對(duì)Wistar正常大鼠全血粘度的影響實(shí)驗(yàn)中(見表7)，連續(xù)給藥15日后，甘西鼠尾草提取物低、中、高劑量組全血粘度與空白對(duì)照組比較有顯著性差異，甘西鼠尾草提取物能使Wistar正常大鼠血液粘度降低，改善血液循環(huán)狀態(tài)。表7甘西鼠尾草提取物對(duì)正常大鼠全血粘度的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>與空白對(duì)照組比，*p<0.05,**p<0.01，***p<0.0015結(jié)論由上表可以看出，甘西鼠尾草提取物治療組的低、中、高三個(gè)劑量都有顯著降低正常大鼠全血粘度的作用，提示該藥具有改善血液循環(huán)狀態(tài)，緩解腎小球腎炎所伴隨的血液的高凝癥狀，對(duì)腎小球腎炎的治療可以起到更好的治療作用。實(shí)驗(yàn)例4甘西鼠尾草提取物對(duì)大鼠的利水滲濕作用本實(shí)驗(yàn)通過給大鼠灌胃給予不同劑量的甘西鼠尾草提取物，觀察其對(duì)水負(fù)荷大鼠的利尿作用。1材料與方法1.1受試藥物依照實(shí)施例1方法制備的甘西鼠尾草提取物理化性質(zhì)棕褐粉末貯存條件室溫密閉保存質(zhì)量500g包裝塑料瓶配制方法0.8%羧甲基纖維素鈉碾磨混懸均勻，1%鹽水配制成所需濃度1.2實(shí)驗(yàn)材料雷公藤多苷片(上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，100mgxlOO片，批號(hào)040901，有效期至2007年8月，用0.8%羧甲基纖維素鈉配成1.5mg/ml的溶液)氫氯噻嗪片(上海醫(yī)藥(集團(tuán))有限責(zé)任公司信誼制藥總廠生產(chǎn)，25mgxl00片，批號(hào)040601，有效期至2007年5月，用1%鹽水配成0.24mg/ml的溶液)1.3試驗(yàn)動(dòng)物種屬Wistar大鼠性別雄性年齡5~6周體重130150g數(shù)量60只，共分6組，每組10只分組分為四組，分別為高、中、低三個(gè)受試藥劑量組，雷公藤多苷組，陽性藥對(duì)照組(灌胃給予氫氯噻嗪片)，空白對(duì)照組來源上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，清潔級(jí)，動(dòng)物合格證號(hào)SCXK(滬)2003-0003飼養(yǎng)中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心動(dòng)物房，SPF級(jí)1.4給藥方法給藥方式灌胃給藥給藥容量前2日為lmg/100g，留尿觀察時(shí)5ml/100g體重藥物濃度甘西鼠尾草提取物溶液劑量分別為5、10、20mg/ml，雷公藤多苷片溶液為1.5mg/ml，氫氯噻嗪片溶液為1.2mg/ml;甘西鼠尾草提取物溶液劑量分別為l、2、4mg/ml，雷公藤多苷片溶液為0.3mg/ml，氫氯噻嗪片溶液為0.24mg/ml給藥劑量甘西鼠尾草提取物高、中、低三個(gè)劑量組，灌胃劑量分別為50、100、200mg/kg體重；雷公藤多苷片劑量為15mg/kg體重；氫氯噻嗪片劑量為12mg/kg體重2試驗(yàn)方法Wistar大鼠預(yù)先使適應(yīng)代謝籠環(huán)境1~2日，觀察自由飲水條件下尿量是否穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)前18h禁食不禁水，按2.5ml/100g體重灌以蒸餾水，使動(dòng)物體內(nèi)水平衡。收集2h尿液，篩選尿量超過40%水負(fù)荷大鼠，并按照體重隨機(jī)分為高、中、低三個(gè)劑量組、雷公藤多苷片組、陽性藥對(duì)照組、空白對(duì)照組等六組，適應(yīng)飼養(yǎng)l日后開始灌胃給藥。第3日時(shí)，給藥后立即將大鼠置于代謝籠內(nèi)，并且末次給藥前18h給各組大鼠禁食不禁水。分別以5ml/100g體重灌胃給予1、2、4mg/ml的甘西鼠尾草提取物P/。鹽水溶液，0.3mg/ml的雷公藤多苷1%鹽水溶液和0.24mg/ml氫氯噻嗪的1%鹽水溶液以及1%鹽水溶液，然后壓迫大鼠下腹，使膀胱內(nèi)余尿排盡。給藥后的lh內(nèi)、l到3h內(nèi)、3到5h內(nèi)、5到7h內(nèi)各收集尿液一次并測(cè)量尿液體積。以各組大鼠7h內(nèi)平均尿量評(píng)價(jià)，同時(shí)比較各個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)尿量的變化情況。3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以7士SD表示，組間差異用方差分析法檢驗(yàn)。4實(shí)驗(yàn)結(jié)果甘西鼠尾草提取物對(duì)Wistar水負(fù)荷大鼠尿量的影響實(shí)驗(yàn)中(見表8-表9)，給藥后7h內(nèi)的平均總尿量和不同時(shí)間段的尿量差異情況。甘西鼠尾草提取物中、高劑量組給藥后7h內(nèi)的平均總尿量與空白對(duì)照組比較有顯著性差異；其中甘西鼠尾草提取物高劑量組在l-3h內(nèi)的尿量與空白對(duì)照組此時(shí)間段的尿量相比有顯著性差異，甘西鼠尾草提取物能使Wistar水負(fù)荷大鼠尿量顯著增加。表8甘西鼠尾草提取物對(duì)水負(fù)荷大鼠尿量的影響分組劑量(mg/kg)動(dòng)物數(shù)(n)給藥后7h的平均總尿量(ml)空白對(duì)照組氫氯噻嗪對(duì)照組雷公藤多苷組甘西鼠尾草組甘西鼠尾草組0155010010101010106.48±0.7310.39±0.97***7.09±0.846.94±0.827.31±0.65*甘西鼠尾草組200107.44±1.12*與空白對(duì)照組比，*p<0.05;***p<0.001表9甘西鼠尾草提取物對(duì)水負(fù)荷大鼠各個(gè)時(shí)間內(nèi)尿量的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>5結(jié)論連續(xù)給Wistar正常大鼠灌胃給予50、100、200mg/kg劑量的甘西鼠尾草提取物溶液，100、200mg/kg兩個(gè)劑量的甘西鼠尾草提取物均能顯著增加水負(fù)荷實(shí)驗(yàn)大鼠7h內(nèi)的平均尿量，并且甘西鼠尾草提取物高劑量組在l-3h內(nèi)的尿量與空白對(duì)照組此時(shí)間段的尿量相比有顯著性差異；提示甘西鼠尾草提取物具有利尿作用。權(quán)利要求1、甘西鼠尾草提取物在制備治療腎小球腎炎藥物中的應(yīng)用，所述的甘西鼠尾草提取物是依照下述方法制備的甘西鼠尾草根部藥材干燥粉碎后過篩，以含水低級(jí)醇浸泡后滲漉或加熱提取，提取液濃縮后離心或過濾，棄去沉淀，取離心上清液或?yàn)V液，濃縮干燥后即得甘西鼠尾草提取物。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘西鼠尾草提取物在制備治療腎小球腎炎藥物中的應(yīng)用，其中的甘西鼠尾草提取物是依照下述方法制備的甘西鼠尾草根部干燥藥材粉碎后過篩，以15%_65%含水乙醇常溫下浸泡24—48小時(shí)，于常溫下用15%—65%含水乙醇滲濾提取2—5次，合并浸泡液及提取液，濃縮后離心，棄去沉淀，過濾液進(jìn)行大孔樹脂吸附，以蒸餾水水淋除去雜質(zhì)，然后再以15%—65%含水乙醇進(jìn)行洗脫，合并洗脫液，濃縮至無醇味，干燥后即得甘西鼠尾草提取物。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的甘西鼠尾草提取物在制備治療腎小球腎炎藥物中的應(yīng)用，其中的甘西鼠尾草提取物是依照下述方法制備的100kg的甘西鼠尾草根部干燥藥材粉碎后，過10目篩，投入提取罐，以40。/。含水乙醇200L常溫下浸泡24h，于常溫下用40%含水乙醇1500L滲濾提取3次，合并浸泡液及提取液，濃縮至100L，離心后過濾，棄去沉淀，過濾液進(jìn)行聚苯乙烯多孔性吸附大孔樹脂吸附，柱內(nèi)大孔樹脂裝量為200L，以1000L蒸餾水水淋除去雜質(zhì)，然后再以1500L的40。/。含水乙醇進(jìn)行洗脫，合并洗脫液濃縮至無醇味，并進(jìn)一步干燥，即得棕褐色粉末狀甘西鼠尾草提取物1.8kg。全文摘要本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
。腎小球腎炎臨床表現(xiàn)為蛋白尿、血尿、水腫、高血壓等，其中慢性腎小球腎炎病程長(zhǎng)，多有不同程度的腎功能損害，且反復(fù)發(fā)作，預(yù)后較差。本發(fā)明的目的是提供甘西鼠尾草提取物在制備治療腎小球腎炎藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種將甘西鼠尾草根部藥材干燥粉碎后，以含水低級(jí)醇浸泡后滲漉或加熱提取，提取液濃縮干燥后制得的甘西鼠尾草提取物。上述甘西鼠尾草提取物經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，能夠顯著降低血清病型腎小球腎炎模型大鼠的尿蛋白含量，并能顯著減輕其腎小球腫脹，還具有降低血液粘度和利水滲濕的治療作用。本發(fā)明不僅為甘西鼠尾草提供了一種新用途，也為廣大腎炎患者提供了一種新的治療藥物。文檔編號(hào)A61K36/185GK101181349SQ200710048139公開日2008年5月21日申請(qǐng)日期2007年11月13日優(yōu)先權(quán)日2007年11月13日發(fā)明者姜遠(yuǎn)英,孫連娜,鳳張,曹永兵,威來,陽楊,陳萬生申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)