專利名稱：一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑及其制備方法，該復方制劑具有免疫增強作用，在腫瘤的預防和治療，體弱多病者的扶正，以及在病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性腎炎及腎功能衰竭、慢性支氣管炎等方面具有治療作用，屬于藥品制劑技術領域。
背景技術：
隨著人類生活環(huán)境、生活水平和生活方式的變化以及醫(yī)學的進步，人類疾病譜發(fā)生了顯著的變化，一般性傳染病逐漸被控制，而惡性腫瘤則成為日益常見且嚴重威脅人類生命和生活質量的主要疾病之一。世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計資料表明，世界癌癥每年發(fā)病1000萬人，死亡700萬人，是僅次于心血管病的人類第2殺手。
尋找有效的抗癌藥物與方法，徹底攻克癌癥，是世界醫(yī)學界重要的研究課題?；?、放療、手術治療是當今治療腫瘤的主要手段，但毒副作用較大。能否找到既能殺傷腫瘤細胞，毒副作用又比較小的藥物及治療方法，在腫瘤的治療中顯得尤其重要。
黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.vat.Mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。黃芪屬植物是一種多年生、深根性的草本藥用植物，別名綿芪，綿黃芪，在我國主要分布于北方地區(qū)，普遍生長在東北的東部山區(qū)的長白山、小興安嶺、完達山脈和遼寧東部山區(qū)及大興安嶺，部分平原地區(qū)亦可見到，此外河北、山西、山東、內蒙古、陜西、甘肅、寧夏、青海、新疆等省區(qū)均有，朝鮮、蒙古、蘇聯(lián)也有分布。
黃芪中提取的多糖類成分可刺激動物的T淋巴細胞體外增殖，從而增強其特異性免疫功能；黃芪多糖還可使小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬百分率和吞噬指數明顯升高，表明其可增強動物體內非特異性免疫功能；黃芪多糖還對多種病毒具有較強的抑制作用，可參見河南農業(yè)科學，2005年第4期，78-90頁。黃芪中提取的黃芪甲苷，具有益氣養(yǎng)血、扶正祛邪、養(yǎng)心通脈、健脾利濕之功效，常作為含黃芪的中藥制劑檢測的指標成分。
香菇多糖系從人工培養(yǎng)的傘菌科真菌香菇[Lentinus edodes(Berk)Sing]子實體中提取分離純化獲得的均一組分的多糖。香菇多糖(Lentinan)是一種免疫調節(jié)型靜脈給藥的免疫增強藥物，具有劑量低，療效好，毒副作用小等優(yōu)點。臨床上主要應用于不能手術的癌癥病人，能顯著延長患者的存活時間，以及防止手術后癌癥的復發(fā)。1966年日本首先從香菇子實體中獲得香菇多糖，20世紀70年代應用于臨床。我國于1988年從日本進口，取得良好的療效。但進口價格十分昂貴。1994年我國研制成功與日本香菇多糖同樣劑型的香菇多糖凍干粉針劑并投產。
香菇多糖是一種有效的腫瘤藥物。一般與化療藥物聯(lián)合使用。對于復發(fā)的胃癌和結腸癌患者的III期臨床4年跟蹤觀察，1、2、3和4年存活率分別較單獨使用化療藥物提高〔Tsuburs E.Rationale of Biological Response modifiersin cancer treatment.AmsterdanExcerpta Medica.1985151〕。香菇多糖與白介素-2聯(lián)合使用可大大增加抗腫瘤活性。香菇多糖的毒副作用與通常化療藥物比較，由于輕微，故可忽略不計。在實際應用中，香菇多糖因其主要表現為免疫增強作用，所以在臨床應用中通過和其它藥物配伍，有助于增強其它藥物的抗腫瘤、抗病毒、抗炎等作用。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種適于臨床應用的藥物劑型的黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑，同時具有在腫瘤的預防和治療、病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性腎炎及腎功能衰竭、慢性支氣管炎、體弱多病者的扶正等方面能起到協(xié)同的治療作用，使用方便。
為實現以上目的，本發(fā)明的技術方案是提供一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑，其特征在于黃芪提取物與香菇多糖的重量比為1∶0.1-5，適于臨床應用的藥物劑型包括片劑、膠囊劑、粉針劑、凍干粉針劑、水針劑、輸液劑。
一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑，其特征在于，將香菇多糖的免疫增強作用與抗病毒和抗炎的黃芪提取物聯(lián)合使用，其制備方法為
(1)按重量計稱取香菇多糖0.1-5份，放入容器中用0.3-1mol/L的氫氧化鈉水溶液室溫溶解；(2)在步驟(1)溶解液中加入香菇多糖100-300倍重量10-30％甘露醇注射液，攪勻；(3)在步驟(2)溶解液中加入黃芪提取物1份，然后用酸液調pH至6-10，過濾，按照中藥凍干粉針劑的操作要求制得復方黃芪—香菇多糖凍干粉針；(4)或在步驟(1)溶解液中加入黃芪提取物1份，攪拌溶解，用酸液調pH至6-10，過濾，按照中藥水針劑的操作要求制得復方黃芪—香菇多糖水針劑；(5)或在步驟(1)溶解液中加入黃芪提取物1份，溶解后加入等當量鹽酸溶液，再用相同濃度的氫氧化鈉溶液或鹽酸溶液調pH至6-10，過濾，按照中藥輸液劑的操作要求制得復方黃芪—香菇多糖輸液劑；(6)或在步驟(1)溶解液中加入黃芪提取物1份，加入黃芪提取物10-100倍重量的淀粉，以水或60-90％的乙醇水溶液為粘合劑，按膠囊劑的操作要求制得復方黃芪—香菇多糖膠囊。
所述的黃芪提取物是從中藥黃芪中按常規(guī)方法提取純化后得到的水溶性成分，其中黃芪多糖的含量在30％-100％(W/W)；所述的黃芪提取物或者是從中藥黃芪中按常規(guī)方法提取純化后得到的脂溶性成分，其中黃芪甲苷的含量在10％-100％(W/W)；所述的黃芪提取物或者是將從中藥黃芪中按常規(guī)方法分別提取純化后得到的水溶性成分和脂溶性成分再進行混合后得到的混合物，其重量比為1∶0.1-5；步驟(3)、(4)中所述的調節(jié)pH至6-10的酸液為鹽酸溶液或檸檬酸水溶液。
本發(fā)明所述的由黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑在腫瘤的預防和治療、病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性腎炎及腎功能衰竭、慢性支氣管炎、體弱多病者的扶正等方面的應用。
本發(fā)明的香菇多糖是指從香菇子實體[Lentinus edodes(Berk)Sing]提取、精制的，符合國家藥品質量標準WS-320(X-263)-94的注射用香菇多糖。
本發(fā)明針對現有技術，提供的復方制劑能使黃芪中增強免疫作用的有效提取物與香菇多糖組合后能發(fā)揮更強大的協(xié)同的免疫增強作用；同時通過與香菇多糖的配伍，還能更好發(fā)揮黃芪中有效提取物抗病毒和抗炎等作用。
在研究黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑的過程中發(fā)現，當黃芪的水溶性提取物中黃芪多糖的含量低于30％時，該黃芪提取物與香菇多糖所組成的復方制劑如水針劑在存放過程中會出現澄明度不合格的現象，所以本發(fā)明的特征之一是從黃芪中按常規(guī)方法提取純化后得到的水溶性成分中黃芪多糖的含量應在30％-100％(W/W)。
在研究黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑的過程中同樣發(fā)現，當黃芪的脂溶性提取物中黃芪甲苷的含量低于10％時，該黃芪提取物與香菇多糖所組成的復方制劑如水針劑在存放過程中會出現澄明度不合格的現象，所以本發(fā)明的特征之一是從黃芪中按常規(guī)方法提取純化后得到的脂溶性成分中黃芪甲苷的含量應在10％-100％(W/W)。
本發(fā)明的優(yōu)點是適于臨床應用，同時具有在腫瘤的預防和治療、病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性腎炎及腎功能衰竭、慢性支氣管炎、體弱多病者的扶正等方面能起到協(xié)同的治療作用，使用方便。
具體實施例方式
以下結合實施例對本發(fā)明作進一步說明。
實施例1取注射用香菇多糖2克，放入容器中用0.6mol/L的氫氧化鈉水溶液700ml室溫溶解，溶解后加入普通20％甘露醇注射液400ml，攪勻，加入含黃芪多糖50％的黃芪提取物4克，溶解后用稀酸溶液調pH為7-9，過濾，減壓濃縮至1000ml，無菌過濾，消毒，測含量，分裝，1ml/瓶，冷卻干燥，封口，得復方黃芪—香菇多糖凍干粉針。
實施例2取注射用香菇多糖1克，放入容器中用0.2mol/L的氫氧化鈉水溶液700ml室溫溶解，溶解完全后，加入含黃芪甲苷20％的黃芪提取物0.5克，溶解后用稀酸溶液調pH為7-9，過濾，加注射用水至1200ml，無菌過濾，消毒，分灌于適當容器中，封口，即得復方香菇多糖水針。
實施例3取注射用香菇多糖0.1克，放入容器中用1mol/L的氫氧化鈉水溶液923ml室溫溶解，溶解完全后，加入含黃芪甲苷30％的黃芪提取物0.2克及含黃芪多糖70％的黃芪提取物0.3克，溶解后加入1mol/L鹽酸溶液923ml，再用相同濃度的氫氧化鈉溶液或鹽酸溶液調pH至7-9，過濾，加注射用水至6000ml，無菌過濾，滅菌，分灌于適當容器中，即得復方黃芪—香菇多糖輸液。
實施例4取香菇多糖10克，放入容器中用加入含黃芪甲苷10％的黃芪提取物60克及含黃芪多糖30％的黃芪提取物30克，加入淀粉3000克，混合均勻后，以75％的乙醇水溶液為粘合劑，制成軟材。放入顆粒機中，制成顆粒。干燥后整粒，裝膠囊即得復方黃芪—香菇多糖膠囊。
本發(fā)明進行了系列藥理實驗來驗證黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑的藥效。
1.腫瘤抑制試驗以含黃芪甲苷0.15mg/ml及含香菇多糖1mg/ml的復方水針劑為實驗藥品。4～5周齡昆明種小鼠，體重在20±5g，雌雄兼用，隨機分組，每組平均10-12只，各組均在相同條件下飼養(yǎng)，自由飲水。實驗設陰性對照組小鼠接種相應的瘤株后不做處理；陽性對照組小鼠接種相應的瘤株后第二天腹腔內(ip)給予市售黃芪注射液，1ml/只，每天一次，連用二周；實驗組小鼠接種相應的瘤株后第二天腹腔內(ip)給予含黃芪甲苷1mg/ml及含香菇多糖1mg/ml的復方水針，1ml/只，每天一次，連用二周。將S180、H22腹水型瘤株經昆明小鼠ip傳代，用注射器從腹腔抽取后，生理鹽水稀釋成適當濃度的細胞懸液，細胞量為5×106/0.2ml，小鼠ip注入，然后根據腹水消長程度來判定其抑瘤作用。最后結果表明該復方水針劑對小鼠移植瘤有顯著的抑制作用，能顯著延長荷瘤小鼠的生存時間，并且實驗組荷瘤小鼠的生存時間明顯長于陽性對照組。
復方黃芪香菇多糖水針劑與黃芪注射液對荷瘤小鼠的生存時間影響對比表

2.淋巴細胞增殖試驗以含黃芪甲苷0.15mg/ml、黃芪多糖1.5mg/ml及香菇多糖1.5mg/ml的復方黃芪香菇多糖水針劑為實驗藥品，以市售黃芪注射液為對照。無菌采雞心臟外周血，肝素抗凝。Percoll細胞分層液分離淋巴細胞。制備好的淋巴細胞加入到96孔細胞培養(yǎng)板，50μL/孔，然后加入待測藥液(水針)50μL，以刀豆素A、細菌脂多糖分別作為T、B淋巴細胞絲裂原，濃度分別為45、22.5μg/ml。每個處理3個復孔，置40℃、5％ CO2條件下培養(yǎng)60h后，Brdu-ELISA試劑盒(Bioehringer Mannheim公司)標記、顯色，用318～MC酶標儀測定OD450nm值。數據用SPSS軟件進行統(tǒng)計。結果如下

結果表明該復方水針劑對刀豆素A誘導的雞T淋巴細胞增殖及對細菌脂多糖誘導的雞B淋巴細胞增殖均有明顯的促進作用。
權利要求
1.一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑，其特征在于黃芪提取物與香菇多糖的重量比為1∶0.1-5，適于臨床應用的藥物劑型包括片劑、膠囊劑、粉針劑、凍干粉針劑、水針劑、輸液劑。
2.一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑，其特征在于，將香菇多糖的免疫增強作用與抗病毒和抗炎的黃芪提取物聯(lián)合使用，其制備方法為(1)按重量計稱取香菇多糖0.1-5份，放入容器中用0.3-1mol/L的氫氧化鈉水溶液室溫溶解；(2)在步驟(1)溶解液中加入香菇多糖100-300倍重量的10-30％甘露醇注射液，攪勻；(3)在步驟(2)溶解液中加入黃芪提取物1份，然后用酸液調pH至6-10，過濾，按照中藥凍干粉針劑的操作要求制得復方黃芪—香菇多糖凍干粉針；(4)或在步驟(1)溶解液中加入黃芪提取物1份，攪拌溶解，用酸液調pH至6-10，過濾，按照中藥水針劑的操作要求制得復方黃芪—香菇多糖水針劑；(5)或在步驟(1)溶解液中加入黃芪提取物1份，溶解后加入等當量鹽酸溶液，再用相同濃度的氫氧化鈉溶液或鹽酸溶液調pH至6-10，過濾，按照中藥輸液劑的操作要求制得復方黃芪—香菇多糖輸液劑；(6)或在步驟(1)溶解液中加入黃芪提取物1份，加入黃芪提取物10-100倍重量的淀粉，以水或60-90％的乙醇水溶液為粘合劑，按膠囊劑的操作要求制得復方黃芪—香菇多糖膠囊。
3.根據權利要求1或2所述的一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑及制備方法，其特征在于，所述的黃芪提取物是從中藥黃芪中按常規(guī)方法提取純化后得到的水溶性成分，其中黃芪多糖的含量在30％-100％(W/W)。
4.根據權利要求1或2所述的一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑及制備方法，其特征在于，所述的黃芪提取物或者是從中藥黃芪中按常規(guī)方法提取純化后得到的脂溶性成分，其中黃芪甲苷的含量在10％-100％(W/W)。
5.根據權利要求1或2所述的一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑及制備方法，其特征在于，所述的黃芪提取物或者是將從中藥黃芪中按常規(guī)方法分別提取純化后得到的水溶性成分和脂溶性成分再進行混合后得到的混合物，其重量比為1∶0.1-5。
6.根據權利要求2所述的復方香菇多糖制劑的制備方法，其特征在于，步驟(3)、(4)中所述的調節(jié)pH至6-10的酸液為鹽酸溶液或檸檬酸水溶液。
7.根據權利要求1或2所述的一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑，其特征在于，所述的黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑可用于腫瘤的預防和治療、病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性腎炎及腎功能衰竭、慢性支氣管炎、體弱多病者的扶正等方面的治療應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種黃芪提取物與香菇多糖組成的復方制劑及制備方法，其特征在于，按重量計稱取香菇多糖，用氫氧化鈉水溶液室溫溶解，溶解液中加入甘露醇注射液，攪勻；再加入黃芪提取物份，然后用酸液調pH，無菌過濾，制得復方黃芪與香菇多糖凍干粉針、水針劑、輸液劑和膠囊。本發(fā)明的優(yōu)點是適于臨床應用，同時具有在腫瘤的預防和治療、病毒性心肌炎、病毒性肝炎、免疫功能低下、慢性腎炎及腎功能衰竭、慢性支氣管炎、體弱多病者的扶正等方面能起到協(xié)同的治療作用，使用方便。
文檔編號A61P37/04GK1850149SQ200610024289
公開日2006年10月25日 申請日期2006年3月2日 優(yōu)先權日2006年3月2日
發(fā)明者金幸 , 湯磊, 陳林祥, 朱益峰 申請人:上海慈瑞醫(yī)藥科技有限公司