專(zhuān)利名稱(chēng)：：繁縷黃酮苷類(lèi)提取物、其制備方法及制藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥繁縷的黃酮苷提取物，其提取方法，含有該提取物的藥物組合物及其用于制備降血脂藥物的用途。
背景技術(shù)：
：繁縷[57e7/aWa/zzed/fl(L.)Cyr.]是石竹科(Ca，Mr/7aceae)繁縷屬(5Ye//ar/aL)植物，具有清熱解，活血止痛，消腫等功效，主治痢疾，癰瘡腫毒，乳癰，腸癰，療腫，跌打損傷，產(chǎn)后癡滯腹痛。繁縷為石竹科Cairo;Ar7/aceae繁縷屬L.植物繁縷5Ye/7ar/a/z/e&'a(L.)Cyr.的全草。別名蘞(《爾雅》)、蘩蔞(《別錄》)、滋草(《千金.食治》)、鵝腸菜、鵝兒腸菜(《綱目》)、五爪龍(《湖南藥物志》)、狗蚤菜(《廣西藥植名錄》)、鵝餛飩(蘇醫(yī)《中草藥手冊(cè)》)。繁縷屬植物，全世界約120種，中國(guó)產(chǎn)63種15變種和2變型，原植物繁縷為常見(jiàn)田間雜草，廣布全國(guó)(僅新疆、黑龍江未見(jiàn)記錄)，亦為世界廣布種。繁縷資源豐富，具有悠久的藥用歷史。多種醫(yī)藥古籍對(duì)繁縷均有記載，如《本草綱目》記載"活血，去瘀，下乳，催生。治產(chǎn)后瘀滯腹痛，乳汁不多，暑熱嘔吐，腸癰，淋病，惡瘙腫毒，跌打損傷"；《藥性論》記載"主治產(chǎn)后血塊，炒熱和童子小便服"；《本草拾遺》"主破血，下乳汁，下惡血，，；《湖南藥物志》"止小便利，遺尿，洗手足風(fēng)丹，遍身癢痛"；《貴州民間方藥集》記載"解熱利尿，催生，催乳，活血去痹。治跌打損傷，消傷腫，又治無(wú)名腫毒。貴州民間將其作為降血脂草藥使用，效果較好。對(duì)繁縷的化學(xué)成分研究始于20世紀(jì)70年代。研究表明，繁縷中含有以黃酉同(BudzianowskiJ.等人，StudiesontheantioxidativeactivityofsomeC-glycosylflavones，戶(hù)力aryMCo/戶(hù)力a/瓜，1991，43(5):395;KitanovG.PhenolicacidsandflavonoidsfromStellariamedia(L.)Vill.(Caryophyllaceae)，/.戶(hù)力ar則z/e，1992，47(6):470;陳興榮等人，繁縷的黃酮類(lèi)化學(xué)成分研究，詐^研《々秀減，2005,19(4)41;Budzia謂skiJ.等人，TwoC，O-glycosylflavonesfromStellariamedia,/.戶(hù)/"e廳，1991，57(3):290)、皂苷(HodisanV等人，TriterpenoidsaponinsfromStellariamedia(L.)Cyr，/.尸ar羅/s，1989，37(2):105)、甾體(陳興榮等人，繁縷的黃酮類(lèi)化學(xué)成分研究，觀A哞^^f《與^減，2005,19(4):41)、香豆素(TsotsoriyaGG，等人，StudyofStellariamediaforitscontentofbiologicallyactivecompounds[M].Russian:TbilisGos，歸/"化1977.172)、木脂素(SunB等人，BioactiveconstituentsfromChinesenaturalmedicines.XIV.Newglycosidesofbeta-carboline-typealkaloid,neolignan，andphenylpropanoidfromStellariadichotomaL.var.lanceolataandtheirantiallergicactivities,/.(7力e/z2.c"尸力ar鵬ceWcaj'^/"e"'/，2004，52(10):1194)、酚酸(KitanovG.PhenolicacidsandflavonoidsfromStellariamedia(L.)Vill.(Caryophyllaceae)，/.戶(hù)力sr則z/e，1992，47(6):470)、亞麻酸酯(HohmannJ等人，MonoacylgalactolipidsfromStellariamedia,/.尸/Wera/7/a，1996,67(4):381)等為主的多種化學(xué)成分。有關(guān)繁縷的現(xiàn)代藥理學(xué)研究和臨床應(yīng)用方面的報(bào)道較少。其藥理研究還很不充分，主要為解熱、抗炎作用(王英華等人，引種與野生銀柴胡化學(xué)成分比較研究，哞譚^夢(mèng)染,悉，1991.26(5):266)和抗氧化作用(BudzianowskiJ.等人，StudiesontheantioxidativeactivityofsomeC-glycosylflavones，/.戶(hù)力ar/z/aco/尸力ar瓜，1991,435):395)。從現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)可見(jiàn)，尚無(wú)關(guān)于繁縷系統(tǒng)化學(xué)成分及其活性的研究報(bào)道，尤其是沒(méi)有關(guān)于其降血脂活性成分的報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容為闡明繁縷藥理活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，本發(fā)明人對(duì)繁縷進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)研究，得到了系列黃酮苷類(lèi)化合物和其他成分。在此基礎(chǔ)上，對(duì)其中的一個(gè)黃酮苷部位進(jìn)行了降血脂藥理活性試驗(yàn)、制備工藝和質(zhì)量控制研究，并發(fā)現(xiàn)按照本發(fā)明所述工藝得到的繁縷的黃酮苷提取物能夠明顯地降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液總膽固醇和甘油三酯水平，具有顯著的降血脂作用，顯示出良好的治療高血脂相關(guān)疾病的廣闊應(yīng)用前景?；谝陨习l(fā)現(xiàn)，本發(fā)明得以完成。因此，本發(fā)明的一個(gè)方面涉及中藥繁縷的黃酮苷提取物，其中包括以提取物重量計(jì)18.69-28.03w/w。/q的芽菜素-6-D-半乳糖-8-C-a-L-阿拉伯糖苷(化合物1)和芽菜素-6-C-cr-L-阿拉伯糖-8-C-々-D-半乳糖苷(化合物2)。本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及中藥繁縷的黃酮苷提取物的提取方法。本發(fā)明的再一個(gè)方面涉及含有中藥繁縷黃酮苷提取物及一種或多種藥用載體或賦形劑的藥物組合物。本發(fā)明進(jìn)一步的一個(gè)方面涉及中藥繁縷黃酮苷提取物用于制備降血脂的藥物的用途。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，以提取物重量計(jì)，本發(fā)明提取物中含有9.64-14.46w/w%的芽菜素-6-C-/-D-半乳糖-8-C-"-L-阿拉伯糖苷。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，以提取物重量計(jì)，本發(fā)明提取物中含有9.05-13.57w/w%的芽菜素-cr-L-阿拉伯糖-8-C-/-D-半乳糖苷。根據(jù)本發(fā)明，所述的繁縷黃酮苷類(lèi)提取物可按照下面的工藝路線(xiàn)獲得繁縷全草醇提取過(guò)濾，藥渣棄掉，藥液濃縮，濃縮液水溶解，離心處理上清液大孔樹(shù)脂柱層析水洗脫極性有機(jī)溶劑洗脫水洗脫液有機(jī)溶劑洗脫液濃縮后冷凍干燥棕黃色粉末(黃酮苷類(lèi)提取物)具體來(lái)說(shuō)，將新鮮采集的繁縷全草晾干，揉碎。該揉碎藥材用含水醇提取，過(guò)濾，得提取液。提取液濃縮，除去醇，水溶解后離心，得到上清液。上清液進(jìn)行大孔吸附樹(shù)脂柱層析，依次用水和極性有機(jī)溶劑洗脫，極性有機(jī)溶劑洗脫部位濃縮除去溶劑后冷凍干燥，即得到繁縷黃酮苷提取物。因此，本發(fā)明繁縷黃酮苷提取物的制備方法包括以下步驟i)將繁縷藥材用含水醇提取兩次，合并提取液；ii)濃縮除去醇，得到濃縮液；水溶解后離心，得到上清液；iii)將上清液進(jìn)行大孔吸附樹(shù)脂柱層析，依次用水和極性有機(jī)溶劑洗脫，洗脫液濃縮后冷凍干燥，得到本發(fā)明繁縷黃酮苷提取物。根據(jù)本發(fā)明，上述工藝路線(xiàn)中所用的大孔吸附樹(shù)脂可為任何型號(hào)的弱極性大孔吸附樹(shù)脂；提取所用的醇可為任何低級(jí)鏈烷醇，如甲醇、乙醇、正丙醇和異丙醇等，其中醇的濃度范圍為5%-85v/v%;大孔吸附樹(shù)脂層析洗脫所用的極性有機(jī)溶劑為大孔樹(shù)脂允許使用的任何有機(jī)溶劑，如甲醇、乙醇、丙醇和丙酮等，其濃度范圍為5%-95v/v%。.根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的繁縷黃酮苷提取物可按如下方法定性鑒別(1)cc-萘酚反應(yīng)(Molish反應(yīng))提取物以適量水溶解，加10。/。cx-萘酚乙醇溶液三滴，然后沿試管壁緩緩加入濃硫酸，使形成上下兩層，稍后在兩層界面處可見(jiàn)紫色環(huán)，表示有苷類(lèi)成分存在。(2)AlCh反應(yīng):提取物以適量水溶解，用毛細(xì)管點(diǎn)在層析紙上，噴灑1。/。A1C13乙醇溶液顯色，干燥后，黃色斑點(diǎn)于紫外熒光燈下顯明顯熒光，表示有黃酮成分。(3)FeCl3反應(yīng)提取物以適量水溶解，取lml于試管中，加入3滴3%FeCl3水溶液，溶液變?yōu)榛液稚?，表示有酴羥基。(4)提取物中以上述化合物1和2為代表的黃酮苷類(lèi)成分的定性檢查提取物適量10%乙醇溶解為待測(cè)液。以已經(jīng)分離提純的化合物1和2的10%乙醇溶液作為對(duì)照品。將待測(cè)液和對(duì)照液分別點(diǎn)樣于聚政胺層析薄膜上，以展開(kāi)劑(乙醇/水，40:60)展開(kāi)，噴灑1%A1C13乙醇溶液顯色，紫外燈下觀察，待測(cè)液中有與對(duì)照液相同Rf值的黃色焚光斑點(diǎn)。(5)繁縷黃酮苷提取物的HPLC-MS指紋圖譜及其中主要成分的分析'.液相色語(yǔ)條件高效液相分離條件乙腈-水(10:90);流速1.2ml/min;柱溫室溫(24°C)。質(zhì)鐠條件負(fù)離子檢測(cè)方式，IonSpray離子源，源電壓-4000V,DP電壓-60V，F(xiàn)P電壓-290V,NEB:8，CUR:11。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的繁縷黃酮苷提取物可按如下方法定量鑒別儀器與試劑高效液相色i脊儀HITACHIL-2130P,、HITACHIL-2420UV-VISDetector、天美T-2000L色"i瞽工作站、DikmaDiamonsilC18色譜柱(240x4.6mm，5jam)對(duì)照品斤菜素-D-平乳糖-8-C-"-L-阿拉伯糖苷(對(duì)照品1)和芽菜素-6-C-"-L-阿拉伯糖-8-D-半乳糖苷(對(duì)照品2)均由本實(shí)驗(yàn)室分離純化所得，并經(jīng)現(xiàn)代光譜技術(shù)確定結(jié)構(gòu)，HPLC面積歸一化法測(cè)得其純度在95.0%以上。試劑甲醇(色譜純)Fisher公司，水為去離子水。實(shí)驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制精密稱(chēng)取黃酮對(duì)照品1和2各2.Omg，分別置于25ml容量瓶中，加入水溶解并定容至刻度，得各對(duì)照品溶液(0.08mg/ml)。稱(chēng)取黃酮對(duì)照品1和2各2.Omg，混合置于5ml容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，得混合標(biāo)準(zhǔn)樣品。樣品溶液的配制精密稱(chēng)取繁縷黃酮苷提取物干燥品50.Omg，加入5ml30%曱醇水溶解，過(guò)濾，取lml，移至10ml容量瓶中定容至刻度，得樣品溶液(lmg/ml)。實(shí)驗(yàn)色語(yǔ)條件柱溫25X:,檢測(cè)波長(zhǎng)335nm，流速1.Oml/min。流動(dòng)相為甲醇水=35:65(水中加入0.01%乙酸)，50min，這樣混合標(biāo)準(zhǔn)樣品中成分基本不受雜質(zhì)干擾。峰的歸屬以同樣的流動(dòng)相分析各對(duì)照品、混合標(biāo)準(zhǔn)樣品及樣品液，通過(guò)對(duì)照其保留時(shí)間來(lái)確定混合標(biāo)準(zhǔn)樣品及樣品液中各成分的相應(yīng)峰位，結(jié)果見(jiàn)表l。表l.峰的歸屬<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)精密稱(chēng)取黃酮對(duì)照品1和2各5.Omg，混合后用曱醇水溶解定容于5ml容量瓶中為標(biāo)準(zhǔn)液。稀釋成系列濃度作為代測(cè)液。在上述色譜條件下，取各待測(cè)液及標(biāo)準(zhǔn)液各20ni1依次進(jìn)樣，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)液和各待測(cè)液中各對(duì)照品的濃度，再分別計(jì)算出相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。結(jié)果見(jiàn)表2(X代表峰面積，Y代表進(jìn)樣濃度Mg/ml)。表2.對(duì)照品l、2的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)取混合標(biāo)準(zhǔn)樣品，按上述色鐠條件，每次進(jìn)樣20ju1，重復(fù)5次，計(jì)算各組分的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差USD)。結(jié)果見(jiàn)表3。表3.重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>精密度實(shí)驗(yàn)取混合標(biāo)準(zhǔn)樣品，按上述色語(yǔ)條件，每次進(jìn)樣20;a1，重復(fù)5次，計(jì)算各組分的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。結(jié)果見(jiàn)表4。表4.儀器精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一樣品溶液按色i普條件于0、1、2、3、4h進(jìn)樣，測(cè)定其中對(duì)應(yīng)對(duì)照品l、2的化合物的含量，結(jié)果表明該樣品溶液在4h內(nèi)穩(wěn)定性良好?；厥章蕦?shí)驗(yàn)精密稱(chēng)取繁縷黃酮苷提取物千燥品3份，每份20.Omg,分別加入對(duì)照品1和對(duì)照品2標(biāo)準(zhǔn)溶液lml，用甲醇水溶解定容于25ml容量瓶中，得到3份待測(cè)液，各待測(cè)液依次進(jìn)樣20ju1，計(jì)算添加回收率。結(jié)果表明對(duì)照品1、對(duì)照品2的平均回收率分別為105.33%和99.65%，RSD分別為1.91%和2.56%。繁縷黃酮苷提取物中兩個(gè)主要黃酮化合物(化合物1和化合物2)的含量測(cè)定精密稱(chēng)取繁縷黃酮苷提取物干燥品3份，每份15.0mg，加入10ml水溶解，過(guò)濾，取lml，移至25ml容量瓶中定容至刻度，得樣品溶液，按前面的色譜條件，每次進(jìn)樣20nl，測(cè)定各自峰面積，代入各自回歸方程，計(jì)算其含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果在上述色譜條件下，分別對(duì)2個(gè)對(duì)照品進(jìn)行HPLC分析，對(duì)照品1和2的保留時(shí)間分別為13.6-14.0和18.5-19.Omin。結(jié)果見(jiàn)圖5。對(duì)照品1的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程為Y-3.12x10—5X+5.47，r=0.999703,線(xiàn)性范圍0.04-20jug.ml—1;對(duì)照品2的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程為Y=2.11x10—5X+9.31r=0.999487,線(xiàn)性范圍0.04-20mg.ml一1。樣品含量測(cè)定結(jié)果表明，以提取物重量計(jì)，樣品中對(duì)應(yīng)對(duì)照品1和2的化合物1和2的平均含量范圍分別為9.64-14.46w/w°/。和9.05-13.57w/w%，二者總和為18.69-28.03w/w%。如前所述，根據(jù)本發(fā)明所述工藝得到的繁縷的黃酮苷提取物能夠明顯地降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液總膽固醇和甘油三酯水平，具有顯著的降血脂作用。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明繁縷黃酮苷提取物可單獨(dú)或以藥物組合物的形式使用，給藥方式可根據(jù)具體情況而定，并可根據(jù)需要按照藥劑學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制成適合口服、直腸給藥、肌肉注射等給藥方式的劑型，如片劑、膠嚢、青劑、貼劑、懸浮液，注射液，滴注液等劑型。本發(fā)明藥物組合物中含有的載體或賦形劑包括藥劑學(xué)常規(guī)應(yīng)用的栽體和賦形劑，例如填充劑、粘合劑、防腐劑、矯味劑、稀釋劑、著色劑等。本發(fā)明藥物組合物可按本領(lǐng)域已知方法制備。作為活性成分的本發(fā)明繁縷黃酮苷提取物的用量取決于使用對(duì)象的年齡、體重和疾病的類(lèi)型及嚴(yán)重程度等因素。圖1為以繁縷黃酮苷提取物的總離子流色譜圖表示的該提取物的指紋圖譜。圖2(-)ESI方式下繁縷黃酮苷提取物的選擇離子色譜圖(左上圖為選擇593至594質(zhì)量單位，左下圖為選擇563至564質(zhì)量單位)和相應(yīng)的質(zhì)譜圖(中上下和右上下)。圖3繁縷黃酮苷提取物中m/z593的黃酮苷的二級(jí)質(zhì)譜掃描色鐠圖(左上)和各譜峰相應(yīng)的質(zhì)譜圖。圖4繁縷黃酮苷提取物中m/z563的二級(jí)質(zhì)譜掃描色譜圖(左上)和各鐠峰相應(yīng)的質(zhì)譜圖。圖5繁縷黃酮苷提取物中兩個(gè)主要成分芹菜素-6-C-"-D-半乳糖-8-C-a-L-阿拉伯糖苷和齊菜素-6-C-"-L-阿拉伯糖-8-C-/5-D-半乳糖苷的HPLC圖譜。具體實(shí)施例方式下面的實(shí)施例和生物活性實(shí)驗(yàn)，是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但不意味著對(duì)本發(fā)明構(gòu)成任何限制。實(shí)施例1:繁縷黃酮苷提取物的制備(1)將繁縷全草晾干，揉碎。該繁縷揉碎物6公斤，加8倍量70v/v。/。乙醇回流提取，過(guò)濾，得到乙醇提取液。同法再提取一次，合并兩次提取液，濃縮除去乙醇，得到浸青。浸骨用水溶解，離心處理(2500轉(zhuǎn)/分，25min)，除去不溶物，上清液進(jìn)行HP-20大孔吸附樹(shù)脂柱層析，樹(shù)脂柱床體積(毫升)與上樣量(克)比為10:1。水洗脫后，再用35v/v。/。乙醇洗脫，該洗脫部位濃縮除去溶劑后冷凍干燥，得到80克棕黃色粉末，為繁縷黃酮苷提取物，其具有前述的定性反應(yīng)特征，表明繁縷黃酮苷提取物中含有系列黃酮碳苷類(lèi)化合物。具體結(jié)果見(jiàn)附圖1-4。按照前述描述的方法測(cè)得本實(shí)施例所得提取物中兩個(gè)主要黃酮苷化合物1和化合物2的含量分別為12.05w/w°/。和11.31w/w%，RSD分別為2.23%和3.62%。實(shí)施例2:繁縷黃酮苷提取物的制備(2)將繁縷全草晾千，揉碎，稱(chēng)取12公斤，加8倍量60v/v。/o乙醇回流提取，過(guò)濾，得到乙醇提取液。同法再提取一次，合并兩次提取液，濃縮除去乙醇，得到浸骨。浸骨用水溶解，離心處理(2500轉(zhuǎn)/分，25min)，除去不溶物，上清液進(jìn)行HP-20大孔吸附樹(shù)脂柱層析，樹(shù)脂柱床體積(毫升)與上樣量(克)比為10:1。水洗脫后(用7個(gè)柱床體積水)，再用30v/v%乙醇洗脫，該洗脫部位濃縮除去溶劑后冷凍干燥，得到152克棕黃色粉末，為繁縷黃酮苷提取物，其具有前述的定性反應(yīng)特征。按前述所給方法測(cè)得本實(shí)施例所得提取物中兩個(gè)主要黃酮苷化合物1和化合物2的含量分別為14.15w/w%、13.12w/w%,RSD分別為2.12%、3.40%。實(shí)施例3:繁縷黃酮苷提取物的生物活性實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)高脂祠料致高脂血癥大鼠的總膽固醇和甘油三脂水平。實(shí)驗(yàn)材料動(dòng)物成年SD大鼠，200g左右，雄性，購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。試劑膽酸鈉(北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠(chǎng)，批號(hào)20041102),丙基硫氧嘧啶(蘇州恒益醫(yī)藥原料有限公司，批號(hào)20050220);膽固醇購(gòu)自北京化學(xué)試劑公司；力平之膠嚢(菲諾貝特，法國(guó)利博福尼制藥公司生產(chǎn)，批號(hào)65719)。總膽固醇(CHO)試劑盒、甘油三酯(TG)試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)試劑盒均為北京北化康泰臨床試劑有限公司產(chǎn)品；非水溶性試劑均采用羧曱基纖維素鈉溶液配制成混懸液使用。高脂飼料由15%豬油、2%膽固醇和83%普通詞料組成，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司加工制作。儀器Fluostar微板光學(xué)測(cè)定儀，離心機(jī)。實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果雄性SD大鼠60只，隨機(jī)分為六組，每組10只?？瞻讓?duì)照組、高脂血癥模型組、力平之(3.Smg/kg)對(duì)照組、受試藥品高(SOOmg/kg)、低劑量組(100mg/kg)。除空白對(duì)照組大鼠喂養(yǎng)普通飼料以外，其它各組大鼠都給予高脂飼料喂養(yǎng)30天，每日上午灌服受試藥物；下午灌服膽酸鈉(300mg/kg)和丙基硫氧嘧啶(150mg/kg)。連續(xù)給藥30天時(shí)，目艮眶取血，靜置，離心(2000轉(zhuǎn)/分)15min，取出血清，放于-40。C冰箱備用。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定血清中CHO、TG、LDL-C、HDL-C的含量，以便觀察受試藥物在高脂伺料致大鼠高脂血癥模型的降血脂作用，結(jié)果見(jiàn)表5。表5.繁縷黃酮苷提取物對(duì)高脂血癥大鼠的總膽固醇、甘油三脂和高及低密度脂蛋白膽固醇水平的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*與空白組比較代0.05。*與模型組比較代0.05表5結(jié)果顯示，模型組比空白組的總膽固醇、甘油三脂和低密度脂蛋白膽固醇含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與模型組相比較，陽(yáng)性對(duì)照藥力平之組的總膽固醇、甘油三脂和低密度脂蛋白膽固醇含量顯著降低。高劑量組與模型組比較，總膽固醇和甘油三脂含量顯著降低，而低密度脂蛋白膽固醇含量雖雖有下降趨勢(shì)，但差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與模型組比較，繁縷黃酮苷提取物在500mg14/kg劑量下能顯著降低高脂飼料致高脂血癥大鼠的總膽固醇和甘油三脂水平，表明具有降血脂作用，該結(jié)果提示繁縷黃酮苷提取物對(duì)于高血脂相關(guān)疾病可能具有良好的治療作用。權(quán)利要求1.繁縷黃酮苷提取物，其含有以提取物重量計(jì)18.69-28.03w/w％的芹菜素-6-C-β-D-半乳糖-8-C-α-L-阿拉伯糖苷和芹菜素-6-C-α-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-半乳糖苷。2.權(quán)利要求1的提取物，其中以提取物重量計(jì)含有9.64-14.46w/w。/。的齊菜素-6-C-/-D-半乳糖-8-C-or-L-阿拉伯糖苷。3.權(quán)利要求1的提取物，其中以提取物重量計(jì)含有9.05-13.57w/w。/。的芽菜素-6-C-"-L-阿拉伯糖-8-D-半乳糖苷。4.藥物組合物，其含有如權(quán)利要求1所限定的繁縷黃酮苷提取物以及一種或多種藥用載體或賦形劑。5.權(quán)利要求1中所述的繁縷黃酮苷提取物的制備方法，其包括以下步驟i)將繁縷藥材用含水醇提取兩次，合并提取液；ii)濃縮除去醇，得到濃縮液；水溶解后離心，得到上清液；iii)將上清液進(jìn)行大孔吸附樹(shù)脂柱層析，依次用水和極性有機(jī)溶劑洗脫，洗脫液濃縮后冷凍干燥，得到本發(fā)明繁縷黃酮苷提取物。6.權(quán)利要求5所述的方法，其中所用大孔吸附樹(shù)脂為任何型號(hào)的弱極性大孔吸附樹(shù)脂；提取所用的醇為任何低級(jí)鏈烷醇，其中醇的濃度范圍為5°/。-85v/v%;大孔吸附樹(shù)脂層析洗脫所用極性有機(jī)溶劑為大孔樹(shù)脂允許使用的任何有機(jī)溶劑，其濃度范圍為5%-95v/v%。7.權(quán)利要求5或6所述的方法，其中的醇選自甲醇、乙醇、正丙醇和異丙醇。8.權(quán)利要求5或6所述的方法，其中的有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、丙醇和丙酮。9.權(quán)利要求1的提取物用于制備治療降血脂藥物的用途。全文摘要本發(fā)明涉及繁縷黃酮苷提取物，其含有以提取物重量計(jì)18.69-28.03w/w％的芹菜素-6-C-β-D-半乳糖-8-C-α-L-阿拉伯糖苷和芹菜素-6-C-α-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-半乳糖苷。本發(fā)明還涉及所述繁縷黃酮苷提取物的提取方法，含有該提取物的藥物組合物及其用于制備降血脂藥物的用途。文檔編號(hào)A61K36/185GK101103991SQ20061010562公開(kāi)日2008年1月16日申請(qǐng)日期2006年7月14日優(yōu)先權(quán)日2006年7月14日發(fā)明者喬善義,琦董,元黃申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所