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一種葡萄糖檢測裝置及其檢測方法

文檔序號:5957435閱讀:460來源:國知局
專利名稱:一種葡萄糖檢測裝置及其檢測方法
技術領域
本發(fā)明屬于生物電化學傳感器的技術領域,具體涉及ー種葡萄糖檢測裝置及葡萄糖檢測方法。
背景技術
糖尿病是由于胰島素分泌缺陷或生物效應降低引起的一種新陳代謝型疾病。它嚴重地危害人類的健康,對糖尿病患者進行有效的體外血糖值測量及早期的篩查,在積極預防和治療糖尿病中具有十分重要的意義。目前檢測體外血糖值的方法主要有高效液相色譜法、分光光度法、旋光度法、氣相色譜法、電化學生物傳感器等。其中高效液相色譜法應用范圍廣,但是需要昂貴的大型儀器,而且不容易攜??;采用分光光度法需要加入顯色劑,操作過程相對繁瑣,檢測精度低;旋光度法操作簡單,但是通常僅作為一種輔助的檢測方法,檢測精度低;氣相色譜法檢測的精度高,但是往往需要對葡萄糖進行硅醚處理,操作比較復雜;電化學生物傳感器具有線性檢測范圍寬、操作簡便、成本低、靈敏度高等優(yōu)點,在體外血糖值檢測中具有很好的應用前

-5^ O葡萄糖電化學生物傳感器通常是應用葡萄糖氧化酶識別氧化葡萄糖,依據酶與電極間電子傳遞量來實現(xiàn)葡萄糖的檢測。由于葡萄糖氧化酶的氧化還原中心被深埋在酶蛋白的多肽鏈中,導致酶的活性中心與電極間的電子傳遞困難,得不到有效的電流響應,因此常常借助電子傳遞體來實現(xiàn)酶的活性中心與電極間的電子傳遞。目前,基于電子傳遞體的葡萄糖電化學生物傳感器已在血糖儀的組建中得到較好的應用,達到快速檢測血糖濃度的目的,但仍然存在靈敏度低、重現(xiàn)性差、抗干擾能力弱及難于大批量生產等問題。

發(fā)明內容
本發(fā)明的ー個目的是針對目前基于電子傳遞體的葡萄糖電化學生物傳感器使用的酶墨不穩(wěn)定、檢測靈敏度和重現(xiàn)性低的缺陷,提供一種用于葡萄糖檢測的酶墨。本發(fā)明的又ー個目的在于提供一種基于上述酶墨的葡萄糖檢測裝置,以提高檢測的抗干擾度。本發(fā)明的再ー個目的在于提供一種基于上述葡萄糖檢測裝置的葡萄糖檢測方法。為達到上述目的,本發(fā)明提供一種用于葡萄糖檢測的酶墨,所述酶墨是通過以下方法制備而得的酶墨
(1)分別配制濃度為24g/L^40 g/L的葡萄糖氧化酶的三羥甲基氨基甲烷溶液、濃度為2 g/L^8 g/L的ニ茂鐵的こ腈溶液、濃度為O. 075 mmol/L^O. 125 mmol/L的核黃素的三羥甲基氨基甲烷溶液以及濃度為8. 10 mmol/L^13. 5 mmol/L的四丁基高氯酸銨的こ腈溶液;
(2)將ニ茂鐵的こ腈溶液和四丁基高氯酸銨的こ腈溶液按照1:1的體積比混合,得到油相;將葡萄糖氧化酶的三羥甲基氨基甲烷溶液和核黃素的三羥甲基氨基甲烷溶液按照1:1的體積比混合,得到水相;(3)將得到的油相和水相按照1:1的體積比混合后得到所述的酶墨。上述酶墨是由水相和油相按照體積比I: I混合得到的微乳體系,從而保證ニ茂鐵和葡萄糖氧化酶穩(wěn)定存在,并更好地發(fā)揮酶的生物活性;酶墨中采用了適宜濃度的ニ茂鐵作為電子傳遞體,能很好地介導酶的活性中心與電極間的電子傳遞,提高了葡萄糖檢測的靈敏度和重現(xiàn)性;酶墨中采用適宜濃度的四丁基高氯酸銨作為表面活性剤,保證了微乳體系的穩(wěn)定性。本發(fā)明還提供ー種葡萄糖檢測裝置,包括分別連接至電化學工作站并與待檢測溶液接觸的工作電極和對電極,工作電極的表面固定有單壁碳納米管,單壁碳納米管的表面上固定酶墨。優(yōu)選地,所述工作電極和對電極均為在導電玻璃的導電面上用劃痕形成的電極。該方案采用導電玻璃形成電極,與現(xiàn)有技術的一般電極相比,優(yōu)點是既可以同時完成電解池和電極的構筑,也可以減小溶劑可能發(fā)生氧化的影響。上述導電玻璃電極可以根據需要劃成各種形狀和大小,劃出的電極能夠通過各種方式與電化學工作站相連,只要能達到本領域已知的檢測所需的電連接效果即可。作為ー種優(yōu)選的方案,所述劃痕深度大于O. 2微米,所述劃痕包括內劃痕和外劃痕,內劃痕內部形成工作電極,內劃痕與外劃痕之間形成對電極,外劃痕上設有突起的非導電邊界層。在該方案中,對電極環(huán)繞在工作電極外周,從而減少整個裝置占用的空間;內劃痕起到區(qū)分工作電極和對電極的作用,非導電邊界層能夠將待檢測溶液限制在電極范圍內而不會泄露;加入待檢測溶液后,溶液填充內劃痕,從而能夠簡便地建立起工作電極和對電極之間的電連接。作為另ー種優(yōu)選的方案,為了便于與電化學工作站連接,所述劃痕包括內劃痕和外劃痕,內劃痕內部形成工作電極和工作電極接頭,內劃痕與外劃痕之間形成對電極和對電極接頭,工作電極接頭和對電極接頭分別與電化學工作站連接,對電極的外劃痕、對電極和對電極接頭相隔處、工作電極和工作電極接頭相隔處均設有突出的非導電邊界層。該方案與前一方案相比,除了有其優(yōu)點之外,還通過劃痕形成接頭,使電極與相應的接頭一體化,并通過非導電邊界層將電極與相應的接頭分隔開,防止溶液流到接頭上,保證了與電化學工作站連接的可靠性,并進ー步節(jié)省面積、簡化操作。作為更優(yōu)選的方案,對電極和對電極接頭相隔處、工作電極和工作電極接頭相隔處相連,所述工作電極和對電極于相連處的ー側,所述工作電極接頭和對電極接頭位于相連處的另ー側。該方案中形成的非導電邊界層將電極與電極接頭分隔于兩側,更夠進ー步簡化連接。上述非導電邊界層可以由各種非導電物質形成,在一個優(yōu)選的方案中,非導電邊界層由膠黏劑形成。優(yōu)選地,所述對電極同時作為參比電極。其優(yōu)點是所控制的電極電位穩(wěn)定,并且制作簡單,成本低。本發(fā)明裝置適用于基于酶墨的葡萄糖檢測。優(yōu)選地,將本發(fā)明裝置與本發(fā)明酶墨結合使用,在本發(fā)明裝置單壁碳納米管的表面上固定本發(fā)明制備的酶墨,顯著提高葡萄糖檢測的靈敏度和重現(xiàn)性。本發(fā)明還提供ー種葡萄糖檢測方法,包括以下步驟
(I)將不同濃度的葡萄糖溶液滴加到上述葡萄糖檢測裝置中連接工作電極和對電扱,用線性掃描伏安法進行測量,得到不同濃度的葡萄糖溶液的電流隨電位變化的關系 (2)計算不同濃度的葡萄糖溶液的極化電阻的倒數,制定極化電阻倒數與葡萄糖濃度的標準曲線;
(3)將含有葡萄糖的待檢測溶液滴加到步驟(I)使用的的葡萄糖檢測裝置中,用線性掃描伏安法得到電流隨電位變化的關系圖,計算極化電阻的倒數,根據標準曲線計算待檢測溶液中葡萄糖的濃度。當采用上述優(yōu)選的葡萄糖檢測裝置時,將不同濃度的葡萄糖溶液滴加到葡萄糖檢測裝置的非導電邊界層內,從而連接工作電極和對電扱。與現(xiàn)有葡萄糖檢測的技術相比較,本發(fā)明具有如下有益效果
(1)本發(fā)明成功提供ー種新的基于微乳體系配制制得的酶墨,不僅避免了ニ茂鐵的流失、很好地保留了ニ茂鐵的電化學活性和酶的生物活性,并且有利于ニ茂鐵介導酶的活性中心與電極間的電子傳遞,提高了葡萄糖檢測的靈敏度和重現(xiàn)性;
(2)本發(fā)明提供一種新的裝置,結構簡單,制備步驟簡易,便于攜帶,成本低廉,利于大批量生產;在本發(fā)明裝置單壁碳納米管的表面上固定本發(fā)明制備的酶墨,所用酶墨的量較少,顯著提高葡萄糖檢測整體技術方案的靈敏度和重現(xiàn)性。(3)本發(fā)明所提供的葡萄糖檢測方法,操作簡單,檢測線性區(qū)間寬,所需的血量少,測量精度高,抗干擾能力強。


圖I :本發(fā)明實施例I中配制酶墨的エ藝流程示意 圖2 :本發(fā)明實施例2構建的葡萄糖檢測裝置的結構示意 圖3 :本發(fā)明實施例3中應用所制作的葡萄糖檢測裝置測定亞鐵氰化鉀在不同掃描速度下的循環(huán)伏安 圖4 :本發(fā)明實施例3中應用所制作的葡萄糖檢測裝置測定亞鐵氰化鉀的氧化峰電流與掃描速度平方根的關系 圖5 :本發(fā)明實施例4中應用固定了單壁碳納米管的葡萄糖檢測裝置測定亞鐵氰化鉀在不同掃描速度下的循環(huán)伏安 圖6 :本發(fā)明實施例4中應用固定了單壁碳納米管的葡萄糖檢測裝置測定亞鐵氰化鉀的氧化峰電流與掃描速度平方根的關系 圖7 :本發(fā)明實施例5中二茂鐵在單壁碳納米管上的循環(huán)伏安 圖8 :本發(fā)明實施例6中酶墨固定單壁碳納米管電極在不同葡萄糖濃度下的線性掃描伏安 圖9 :本發(fā)明實施例6中極化電阻的倒數與葡萄糖濃度間的標準曲線。
具體實施例方式下面結合具體實施例進ー步詳細說明本發(fā)明。根據本發(fā)明設計目的,同類物質的簡單替代以及尺寸形狀的變化,例如改變本發(fā)明的葡萄糖檢測裝置的尺寸大小(如改變エ作電極、對電極及參比電極的大小),改用其它物質構建電解池,改變電極外觀(如改為正方形或其它形狀),簡單改變單壁碳納米管或酶墨用量等均應屬于本發(fā)明的范圍;下述實施例中所使用的試驗方法如無特殊說明,均為本技術領域現(xiàn)有的常規(guī)方法;所使用的材料、試劑等,如無特殊說明,均為可從商業(yè)途徑得到的試劑和材料。實施例I酶墨的配制過程
如圖I所示,首先分別配制濃度為4 g/L的ニ茂鐵的こ腈溶液、濃度為10. 8 mmol/L的四丁基高氯酸銨的こ腈溶液、濃度為32 g/L的葡萄糖氧化酶的三羥甲基氨基甲烷溶液、濃度為O. I mmol/L的核黃素的三羥甲基氨基甲烷溶液;再將濃度為4 g/L的ニ茂鐵的こ腈溶液和濃度為10. 8 mmol/L的四丁基高氯酸銨的こ腈溶液按照1:1的體積比混合,得到油相;同時將濃度為32 g/L的葡萄糖氧化酶的三羥甲基氨基甲烷溶液和濃度為O. I mmol/L的核黃素的三羥甲基氨基甲烷溶液按照1:1的體積比混合,得到水相;最后將油相和水相按照I I的體積比混合,最終得到顏色為黃色、穩(wěn)定而均勻的酶墨,酶墨中二茂鉄、四丁基高氯酸銨、葡萄糖氧化酶、核黃素的濃度分別為I mg/mL、2. 7 mmol/L、8 mg/mL、0. 25 mmol/L ;將配制好的酶墨置于冰箱中。實施例2葡萄糖檢測裝置的制作過程
如附圖2所示,I為導電玻璃導電面基體,2為工作電極,3為對電極(也可作為參比電極),4為工作電極與外電路的接頭,5、6為對電極或者參比電極與外電路的接頭,8為膠黏劑構筑的非導電邊界層,7為非導電邊界層8圍繞形成的用于滴加溶液的槽(由區(qū)域2、3和劃痕9組成),9為電解池中劃分工作電極與對電極的劃痕,深度大于0. 2微米。本發(fā)明采用導電玻璃導電面I作為基體,利用玻璃刀在導電玻璃導電面上刻劃出劃痕9來區(qū)分工作電極2和對電極3 ;用膠黏劑沿著對電極3的外邊界修飾導電玻璃的導電面便得到非導電邊界層8,非導電邊界層8構筑了用于滴加溶液的槽7 ;為將電解池與外電路相連,便留出了工作電極接頭4,以及對電極或參比電極接頭5和6。本發(fā)明中采用的膠黏劑為普通的修正液,屬于非導電物質,本實施例采用的導電玻璃為深圳南玻集團生產的STN-SI-20型號的玻璃(也可采用類似玻璃產品,并不因此限定本發(fā)明),為節(jié)約材料,本實施例中將對電極3和工作電極2設計成同心圓形,并使其面積比例控制在I. 5至2. O之間。實施例3本發(fā)明所制作的葡萄糖檢測裝置的電化學表征 操作步驟如下
(O構建實施例2所述的葡萄糖檢測裝置;
(2)將葡萄糖檢測裝置與電化學工作站連接好;
(3)在葡萄糖檢測裝置的槽內,即圖2中的區(qū)域7(包括區(qū)域2、3和劃痕9)內滴加亞鐵氰化鉀的三羥甲基氨基甲烷溶液;
(4)用循環(huán)伏安法進行檢測,并改變不同的掃描速度,得到不同掃描速度對應的電流與電位的關系 (5)分析不同掃描速度對應的氧化峰電流與相應掃描速度的平方根的變化關系 (6)比較葡萄糖檢測裝置測定亞鐵氰化鉀時不同掃描速度對應的氧化峰電流和還原峰電流的偏差情況;
(7)比較葡萄糖檢測裝置測定亞鐵氰化鉀時不同掃描速度對應的氧化峰電位和還原峰電位的偏差情況。具體操作是
用實施例2中構建的葡萄糖檢測裝置結合電化學工作站測定濃度為0. 2 mmol/L的亞鐵氰化鉀,采用循環(huán)伏安法分別在掃描速度為O. 5,0. 4,0. 3,0. 2,0. 1,0. 05,0. 02 (單位是V/s,對應圖中3為編號I至7)的條件下測定電流隨電位的改變而變化的情況,得到循環(huán)伏安圖見圖3,本實施例采用的電化學工作站均為上海辰華儀器有限公司CHI620C電化學エ作站。利用origin繪圖軟件分別測定不同掃描速度下對應的氧化峰電流,并利用origin繪圖軟件擬合得到氧化峰電流ー掃描速度的平方根關系式Y = 7.86 X 10_7 +8· 65Χ1(Γ6Χ,相關度 R = O. 9958,如圖 4 所示。如圖3所示,隨著掃描速度的變化,氧化峰電位的變化范圍?。徊⒈容^氧化峰電位和還原峰的峰電流大小,可以發(fā)現(xiàn)其差值均在1Χ10_7安的范圍內;在掃描速度比較低吋,氧化峰電位和還原峰電位的差值在均在O. 06 V左右波動。由上述數據及圖3和4可以得出實施例2中構建的葡萄糖檢測裝置的電化學性能很好,構建的電化學體系是穩(wěn)定可行的。實施例4本發(fā)明所制作的葡萄糖檢測裝置中單壁碳納米管固定電極的電化學活性表征
(1)在葡萄糖檢測裝置的工作電極表面,即圖2中的區(qū)域2上固定單壁碳納米管,并讓其在紅外燈下干燥;
(2)將葡萄糖檢測裝置與電化學工作站相連接;
(3)在葡萄糖檢測裝置的槽內,即圖2中的區(qū)域7(包括區(qū)域2、3和劃痕9)內滴加亞鐵氰化鉀的三羥甲基氨基甲烷溶液;
(4)用循環(huán)伏安法進行測量,并改變不同掃描速度,得到不同掃描速度對應的電流與電位的關系 (5)分析不同掃描速度下的氧化峰電流與其掃描速度的平方根的變化圖。具體操作是
在葡萄糖檢測裝置的工作電極上固定單壁碳納米管,并在紅外燈下干燥,結合電化學工作站測定濃度為O. 2 mmol/L的亞鐵氰化鉀,利用循環(huán)伏安法分別在掃描速度為O. 5、0.4,0.3,0.2,0. 1,0. 05,0. 02 (單位是V/s,對應圖5的編號I至7)的條件下測量電流隨電位變化而變化的情況,得到循環(huán)伏安圖見圖5。利用origin繪圖軟件擬合得到氧化峰電流ー掃描速度的平方根關系式Y =2·51Χ1(Γ7 + 4. 75Χ1(Γ5Χ,相關度 R = O. 9954,擬合直線見圖 6。如圖5所示,隨著掃描速度的改變,氧化峰電位的變化比較小;并且氧化峰和還原峰的峰電流差值不大。由附圖5和6可以得出實施例2構建的葡萄糖檢測裝置中單壁碳納米管固定電極的電化學活性好,表現(xiàn)很好的電化學穩(wěn)定性。實施例5本發(fā)明所用的ニ茂鐵固定單壁碳納米管電極的電化學活性檢測
(1)在葡萄糖檢測裝置的工作電極的表面,即圖2中的區(qū)域2上固定單壁碳納米管,并在紅外燈下干燥;
(2)在工作電極的單壁碳納米管上固定含有ニ茂鐵的微乳體系,并在室溫條件下干
燥;
(3)將葡萄糖檢測裝置與電化學工作站相連接;(4)在葡萄糖檢測裝置的槽內,即圖2中的區(qū)域7 (包括區(qū)域2、3和劃痕9)內加入磷酸鹽緩沖溶液;
(6)用循環(huán)伏安法進行測量,得到不同電位對應電流的變化(7)分析得到的循環(huán)伏安圖,驗證用含有二茂鐵的微乳體系固定電解池的可行性。具體操作是
葡萄糖檢測裝置工作電極表面固定的單壁碳納米管穩(wěn)定后,再在單壁碳納米管的表面固定含有二茂鐵的微乳體系,并在室溫條件下干燥,用到的含有二茂鐵的微乳體系的組成是二茂鐵的乙腈溶液四丁基高氯酸銨的乙腈溶液三羥甲基氨基甲烷溶液=1:1:2,最終微乳體系中的二茂鐵和四丁基高氯酸銨的濃度分別I 8/1和2.7 mmol/L,微乳體系均勻且穩(wěn)定的存在;加入磷酸鹽緩沖溶液之后采用的掃描速度為O. 02 Vs得到的循環(huán)伏安圖見圖7 ;通過對其氧化電流與還原電流相等及峰電位差結果分析,固定在單壁碳納米管上的二茂鐵具有很好的電化學活性,表明所制作的裝置及電極適用于二茂鐵進行電子傳遞反應。實施例6本發(fā)明所提供的葡萄糖檢測
(1)在葡萄糖檢測裝置的工作電極表面,即圖2中的區(qū)域2上固定單壁碳納米管;
(2)在工作電極的單壁碳納米管上固定實施例I中的酶墨,并在室溫條件下干燥;
(3)將葡萄糖檢測裝置與電化學工作站相連接;
(4)在葡萄糖檢測裝置的槽內,即圖2中的區(qū)域7(包括區(qū)域2、3和劃痕9)中滴加葡萄糖的磷酸鹽緩沖溶液;
(5)用線性掃描伏安法在掃描速度為O.02 V/s時進行測量,得到不同電位對應的電流的關系(6)測定不同濃度的葡萄糖溶液,并計算相應的極化電阻的倒數,制定標準曲線,用于檢測葡萄糖的濃度。具體操作是
采用線性掃描伏安法,分別測定0、1、5、10、20、50 (單位是:mmol/L,對應圖8中為I至6)的葡萄糖溶液的不同電位對應的電流的關系圖,見圖8。測量O. 30 O. 35 V電位范圍內的極化電阻的倒數,利用origin繪圖軟件擬合得到極化電阻倒數-葡萄糖濃度關系式Y = 1.425X 10—5 + 1.308X 10_6X,相關度R =
O.9870,見圖 9。因此可利用線性掃描伏安法測得某濃度的葡萄糖的電流隨電位變化的關系圖,結合極化電阻的倒數與葡萄糖濃度間的標準曲線便可得到該葡萄糖溶液的濃度。實施例7干擾物對本發(fā)明所提供的葡萄糖檢測影響的分析
(1)在葡萄糖檢測裝置的工作電極,即圖2中的區(qū)域2上固定單壁碳納米管,并在紅外燈下干燥;
(2)在單壁碳納米管的上再固定實施例I中制備得到的酶墨,并在室溫條件下干燥;
(3)將葡萄糖檢測裝置與電化學工作站相連接;
(4)在葡萄糖檢測裝置的槽內,即圖2中的區(qū)域7(包括區(qū)域2、3和劃痕9)上滴加干擾物,采用線性掃描伏安法在掃描速度為O. 02 V/s的條件下,測量不同電位對應的電流的變化9(5)在干擾物中加入一定濃度的葡萄糖溶液,再用線性掃描伏安法在掃描速度為O.02V/s時,測量不同電位對應的電流的變化(6)計算干擾物中加入的葡萄糖的恢復率,分析葡萄糖電化學傳感器抗干擾的能力。具體操作是
實施例中包括干擾物有葡萄糖飲料、尿液、血液,首先可根據及葡萄糖之前干擾物電流與電位的關系圖結合極化電阻的倒數與葡萄糖濃度間的標準曲線便可得到該干擾物中葡萄糖的濃度;同理可得出加入葡萄糖后各干擾物中葡萄糖的濃度,前后差值即為干擾物中增加的葡萄糖的濃度,增加的濃度比上加入到干擾物中的葡萄糖的濃度即可得到葡萄糖的恢復率。見由表1,葡萄糖的恢復率達到98. 6%以上,表明葡萄糖飲料、血液、尿液等干擾物的出現(xiàn)對本發(fā)明所提供的葡萄糖檢測基本沒有影響,即本發(fā)明的檢測葡萄糖的方法的抗干擾能力強。表一本實施例中干擾物對葡萄糖電化學檢測的影響
權利要求
1.一種用于葡萄糖檢測的酶墨,其特征在于所述酶墨是通過以下方法制備而得的酶產: (1)分別配制濃度為24g/L^40 g/L的葡萄糖氧化酶的三羥甲基氨基甲烷溶液、濃度為2 g/L^8 g/L的ニ茂鐵的こ腈溶液、濃度為O. 075 mmol/L^O. 125 mmol/L的核黃素的三羥甲基氨基甲烷溶液以及濃度為8. 10 mmol/L^13. 5 mmol/L的四丁基高氯酸銨的こ腈溶液; (2)將ニ茂鐵的こ腈溶液和四丁基高氯酸銨的こ腈溶液按照1:1的體積比混合,得到油相;將葡萄糖氧化酶的三羥甲基氨基甲烷溶液和核黃素的三羥甲基氨基甲烷溶液按照1:1的體積比混合,得到水相; (3)將得到的油相和水相按照1:1的體積比混合后得到所述的酶墨。
2.ー種葡萄糖檢測裝置,包括分別連接至電化學工作站并與待檢測溶液接觸的工作電極和對電極,工作電極的表面固定有單壁碳納米管,其特征在于,單壁碳納米管的表面上固定有權利要求I所述的酶墨。
3.如權利要求2所述的葡萄糖檢測裝置,其特征在于,所述工作電極和對電極均為在導電玻璃的導電面上用劃痕形成的電極。
4.如權利要求3所述的葡萄糖檢測裝置,其特征在于,所述劃痕包括內劃痕和外劃痕,內劃痕內部形成工作電極,內劃痕與外劃痕之間形成對電極,外劃痕上設有突起的非導電邊界層。
5.如權利要求3所述的葡萄糖檢測裝置,其特征在于,所述劃痕包括內劃痕和外劃痕,內劃痕內部形成工作電極和工作電極接頭,內劃痕與外劃痕之間形成對電極和對電極接頭,工作電極接頭和對電極接頭分別與電化學工作站連接,對電極的外劃痕、對電極和對電極接頭相隔處、工作電極和工作電極接頭相隔處均設有突出的非導電邊界層。
6.如權利要求5所述的葡萄糖檢測裝置,其特征在于對電極和對電極接頭相隔處、エ作電極和工作電極接頭相隔處相連,所述工作電極和對電極位于相連處的ー側,所述工作電極接頭相隔處和對電極接頭相隔處位于相連處的另ー側。
7.如權利要求4-6中任一項所述的葡萄糖檢測裝置,其特征在于所述非導電邊界層由膠黏劑形成。
8.如權利要求4-6中任一項所述的葡萄糖檢測裝置,其特征在于所述對電極同時作為參比電極。
9.ー種葡萄糖檢測方法,其特征在于包括以下步驟 (1)將不同濃度的葡萄糖溶液滴加到權利要求2所述的葡萄糖檢測裝置中連接工作電極和對電極,用線性掃描伏安法進行測量,得到不同濃度的葡萄糖溶液的電流隨電位變化的關系圖; (2)計算不同濃度的葡萄糖溶液的極化電阻的倒數,制定極化電阻倒數與葡萄糖濃度的標準曲線; (3)將含有葡萄糖的待檢測溶液滴加到步驟(I)使用的的葡萄糖檢測裝置中,用線性掃描伏安法得到電流隨電位變化的關系圖,計算極化電阻的倒數,根據標準曲線計算待檢測溶液中葡萄糖的濃度。
10.ー種葡萄糖檢測方法,其特征在于包括以下步驟 (I)將不同濃度的葡萄糖溶液滴加到權利要求4-6中任一項所述的葡萄糖檢測裝置的非導電邊界層內,用線性掃描伏安法進行測量,得到不同濃度的葡萄糖溶液的電流隨電位變化的關系圖; (2)計算不同濃度的葡萄糖溶液的極化電阻的倒數,制定極化電阻倒數與葡萄糖濃度的標準曲線; (3)將含有葡萄糖的待檢測溶液滴加到步驟(I)使用的的葡萄糖檢測裝置的非導電邊界層內,用線性掃描伏安法得到電流隨電位變化的關系圖,計算極化電阻的倒數,根據標準曲線計算待檢測溶液中葡萄糖的濃度。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物電化學傳感器的技術領域,具體涉及一種葡萄糖檢測裝置及其檢測方法。本發(fā)明提供的酶墨組成包括二茂鐵、葡萄糖氧化酶、核黃素及四丁基高氯酸銨,其配制過程是先分別兩兩按比例混合得到油相和水相,再將油相和水按比例相混合得到均一穩(wěn)定的酶墨;所構建的葡萄糖檢測裝置采用導電玻璃導電面作為基體,構建含有工作電極、對電極(可同時作為參比電極)的葡萄糖檢測裝置,并用膠粘劑構筑反應槽;所提供的葡萄糖檢測方法基于所構建的葡萄糖檢測裝置,依據極化電阻的倒數與葡萄糖濃度間的標準曲線,可以測定某體系中葡萄糖的濃度。該葡萄糖檢測裝置便于攜帶,成本低廉,操作簡單,靈敏度高,抗干擾能力強,利于大批量生產。
文檔編號G01N27/48GK102914571SQ20121033806
公開日2013年2月6日 申請日期2012年9月13日 優(yōu)先權日2012年9月13日
發(fā)明者劉俊辰, 李紅 申請人:華南師范大學
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