專利名稱：一種鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化學(xué)檢測方法領(lǐng)域，尤其是鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法。
背景技術(shù)：
?；撬?Taurine)又名牛膽酸、牛膽素、其化學(xué)名為2_氨基乙磺酸 (H2N-CH2-CH2-SO3H)，是一種含硫的非蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)氨基酸。研究表明?；撬峋哂袕V泛的生物學(xué)功能，不僅參與維持體內(nèi)的環(huán)境穩(wěn)態(tài)，而且在中樞神經(jīng)、消化系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、心血管、免疫和內(nèi)分泌等系統(tǒng)對生理功能正常發(fā)揮具有重要的調(diào)節(jié)作用。由于人體只能有限地合成?；撬?，因此，膳食中的?；撬峋惋@得非常重要。由于天然牛磺酸的提取技術(shù)復(fù)雜，成本高，價(jià)格高昂，并對人體健康幾乎是無害的，而合成?；撬嵊捎谄浠瘜W(xué)中間產(chǎn)物潛在危害著人體健康，目前技術(shù)中尚未有鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬姆椒ê唾|(zhì)量體系，因此天然?；撬崾袌鲈馐車?yán)重干擾和不正當(dāng)競爭。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對目前技術(shù)中尚未有鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬姆椒ê唾|(zhì)量體系的技術(shù)問題，提供了一種鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法，其特征在于包括如下檢測步驟一種鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法，其特征在于包括如下檢測步驟(1)測定已知的天然牛磺酸和已知的合成?；撬嶂械腟13C、δ 15N, δ %同位素比值；(2)確定測定物質(zhì)為?；撬?；⑶測定待測物質(zhì)的δ 13C、δ 15Ν、δ 34S同位素比值。所述的步驟(1)測定已知的天然牛磺酸和已知的合成?；撬嶂械腃、N、S標(biāo)準(zhǔn)同位素比值包括以下具體步驟①制樣取已知的天然?；撬岷秃铣膳；撬?，分別稱取約0. Img l.Omg干燥的 100目 200目的粉末狀樣品于錫杯中并包裹緊密；②分別測定天然?；撬岷秃铣膳；撬岬摩?13C、δ 15Ν、δ 34S同位素比值通過自動采樣器將制備好的樣品送到ΕΑ-3028-ΗΤ元素分析儀，設(shè)定氧化爐溫度為1000°C 1050°C， 還原爐溫度為630°C 680°C，將樣品中的碳、氮、硫元素通過在氧化爐高溫下燃燒，再經(jīng)還原爐還原轉(zhuǎn)化成為CO2、隊(duì)、SO2氣體，通過氣相色譜柱分離出來，分離柱柱溫為35°C 95°C， 然后用氦氣吹掃進(jìn)入IsoPrime同位素質(zhì)譜儀測定天然牛磺酸和合成?；撬岬摩?13C、δ 15N, δ 34S同位素比值；③校正前述測定的天然牛磺酸和合成?；撬岬摩?13C、δ 15Ν、δ 34S同位素比值分析過程中加入內(nèi)標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行校正，扣除儀器(包含質(zhì)譜儀、元素分析儀參考?xì)?所產(chǎn)生的測定值漂移，可采用雙標(biāo)準(zhǔn)建立測定值和真值的校正曲線法或采用單點(diǎn)校正法(通過儀器分析軟件自動設(shè)計(jì)并給出校正數(shù)據(jù))，以控制數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度。
④確定天然?；撬酳13c、δ 15N, δ 34S同位素比值、合成牛磺酸S13c、δ 15N, δ 34S 同位素比值范圍在極顯著水平P < 0. 05的要求下，分別對已知的天然牛磺酸和合成?；撬針悠愤M(jìn)行3次以上平行測定試驗(yàn)，分別測定各自的δ 13C、δ 15Ν、δ 34S同位素比值，計(jì)算其平均值即得到天然?；撬酳13C、δ 15N, δ 34S同位素比值、合成?；撬酳13C、δ 15N, δ 34S同位素比值范圍天然?；撬岬腟13C(PDB)為-19.00 0Z00 -22.00 0Z00，δ 15N(Air-N2)為 6. 00 % 14. 00 %。，δ 34S(CDT)為 19. 00 %。 22. 00 %。；合成牛磺酸 δ 13C(PDB) 為-26. 00%。 -28. 00%。，δ 15N(Air-N2)為-1. 00%。 -3. 00%。，δ 34S(CDT)為 8. 00%。
11. 00% ；所述的步驟( 確定測定物質(zhì)為?；撬崛〈郎y物質(zhì)適量與溴化鉀粉末混合均勻后置于壓片機(jī)內(nèi)壓成，溴化鉀薄片，然后用紅外吸收光譜儀測定溴化鉀薄片紅外光譜，將其紅外光譜吸收圖譜應(yīng)與牛磺酸標(biāo)準(zhǔn)紅外光譜吸收圖譜對照，若一致，則待測物質(zhì)為?；撬?， 則進(jìn)行下一步測定；若不一致，則不是?；撬?，則檢測終止。所述的步驟(3)測定待測物質(zhì)的δ13(、δ 15N, S34S同位素比值確認(rèn)待測物質(zhì)為?；撬岷螅眠B續(xù)流同位素質(zhì)譜儀測定待測物質(zhì)的S"C、δ 15N, δ3、同位素比值，當(dāng) δ 13C(PDB)落 Λ -19. 00 % -22. 00 %。，δ 15N(Air-N2)落入 6. 00 %。 14. 00
δ 34S (CDT)落入19. 00 %。 22. 00 %。范圍，則待測物質(zhì)為天然?；撬幔划?dāng)δ 13C (PDB)落入-26. 00%。 -28. 00%。，δ 15N(Air-N2)落入 _1. 00%。 _3. 00%。，δ 34S(CDT)落入 8. 00%。
11. 00%。范圍，則待測物質(zhì)為合成?；撬帷Ｋ龅牟襟E(1)中的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)依次為=IAEA-C3纖維素，用于C測定；St-AruSt-Li 和硝酸鉀，用于N測定；Ag2S用于S測定。所述的C、N、S同位素比值的計(jì)算公式為δ%。= (R樣品/R標(biāo)樣-1) X 1000，其中 R代表樣品和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中重同位素和輕同位素的比值。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明方法樣品用量少、精密度高、方法穩(wěn)定可靠。
具體實(shí)施例方式實(shí)驗(yàn)條件儀器EuroVector EA-3028-HT/GV Instuments Isoprime 聯(lián)用儀。參考?xì)怏wHe、N2,CO2, CO、SO2 ；純度 He、N2 彡 99. 999 %, CO2 ^ 99. 995 %, CO 彡 99. 9%, SO2 彡 99. 9%。內(nèi)標(biāo)物質(zhì)IAEA-C3 (纖維素，用于C測定)，St-An, St-Li (硝酸鉀，用于N測定)， Ag2S(用于S測定)。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)δ 13C的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為PDB，δ 15N的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為Air-隊(duì)，δ 34S的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為 CDT。分析參數(shù)(I)EA 參數(shù)氧化爐1000°C 1060°C，還原爐630°C 680°C，柱溫;35°C 95°C，載氣(氦氣)壓力=IOOkPa0(2)質(zhì)譜參數(shù)質(zhì)普分析室真空(連續(xù)流模式)1· 5 2. 0 10-6mbar。(3)C分析加速電壓3528.37V;萃取電壓67% AV(加速電壓的百分比)；H板電
5壓18. 7462V ；Z板電壓20. 04V ；阱電流:200uA ；電子能量=IOOeV ；推板電壓_8V ；磁體電流4000mA。(4)N分析加速電壓4M6.66V;萃取電壓75^^￥(加速電壓的百分比)；H板電壓33. 9267V ；Z板電壓21. 9959V ；阱電流:200uA ；電子能量=IOOeV ；推板電壓_7V ；磁體電流3500mA。(5) S分析加速電壓2762.94V (伏特)；萃取電壓65 % AV (加速電壓的百分比)；H板電壓8. 82V ；Z板電壓:-46. 5436V ；阱電流:200uA (微安)；電子能量:73. 5eV(電子伏特)；推板電壓_8V ；磁體電流4500mA (毫安)已知的天然?；撬岷鸵阎暮铣膳；撬嶂械腃、N、S標(biāo)準(zhǔn)同位素比值的測定用廣西科學(xué)院工業(yè)生物技術(shù)研究中心生產(chǎn)的南珠貝肉?；撬?天然?；撬幔?99.3%)以及從市場上購買美國Sigma公司生產(chǎn)的合成?；撬針?biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(含量> 99%), 測定天然牛磺酸和合成?；撬嶂械腃、N、S標(biāo)準(zhǔn)同位素比值測定天然?；撬岷秃铣膳；撬嶂械摩?13C、δ 15N, δ 34S同位素比值①制樣取已知的天然?；撬岷秃铣膳；撬?，分別稱取約0. Img l.Omg干燥的 100目 200目的粉末狀樣品于錫杯中并包裹緊密；②分別測定天然牛磺酸和合成?；撬岬腟13C、δ 15N, δ %同位素比值分別通過自動采樣器將制備好的樣品送到ΕΑ-3028-ΗΤ元素分析儀，設(shè)定氧化爐溫度為1000°C 1050°C，還原爐溫度為630°C 680°C，將樣品中的碳、氮、硫元素通過在氧化爐高溫下燃燒，再經(jīng)還原爐還原轉(zhuǎn)化成為C02、N2, SO2氣體，然后通過氣相色譜柱分離出來，氣相色譜柱柱溫為80°C 90°C，然后進(jìn)入IsoPrime連續(xù)流同位素分析儀測定天然?；撬岷秃铣膳；撬岬腟13C、δ15Ν、δ 34S同位素比值；③校正前述測定的天然?；撬岷秃铣膳；撬岬摩?13C、δ 15Ν、δ 34S同位素比值分析過程中加入內(nèi)標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行校正，(其中IAEA-C3纖維素，用于C測定；St-AruSt-Li和硝酸鉀，用于N測定；Ag2S用于S測定)，扣除儀器(包含質(zhì)譜儀、元素分析儀參考?xì)?所產(chǎn)生的測定值漂移，可采用雙標(biāo)準(zhǔn)建立測定值和真值的校正曲線法或采用單點(diǎn)校正法(通過儀器分析軟件自動設(shè)計(jì)并給出校正數(shù)據(jù))，以控制數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度。④確定天然?；撬酑、N、S同位素同位素比值、合成牛磺酸C、N、S同位素標(biāo)準(zhǔn)同位素比值范圍在極顯著水平P < 0. 05的要求下，分別對天然?；撬岷秃铣膳；撬針悠愤M(jìn)行 3次以上平行測定試驗(yàn)，分別測定各自的C、N、S同位素比值，計(jì)算其平均值即得到天然?；撬酑、N、S同位素比值、合成?；撬酑、N、S同位素比值范圍天然?；撬岬腟13C(PDB)為-19.00 %。 -22.00 %。，δ 15N(Air-N2)為 6. 00 % 14. 00 %。，δ 34S(CDT)為 19. 00 %。 22. 00 %。；合成?；撬?δ 13C(PDB) 為-26. 00%。 -28. 00%。，δ 15N(Air-N2)為-1. 00%。 -3. 00%。，δ 34S(CDT)為 8. 00%。
11. 00% ；實(shí)施例的鑒別應(yīng)用實(shí)例一從市場上購買到北海源龍珍珠有限責(zé)任公司生產(chǎn)牛磺酸作為待測物質(zhì)，取待測物質(zhì)適量與溴化鉀粉末混合均勻后置于壓片機(jī)內(nèi)壓成，溴化鉀薄片，然后用紅外吸收光譜儀測定溴化鉀薄片紅外光譜，將其紅外光譜吸收圖譜應(yīng)與牛磺酸標(biāo)準(zhǔn)紅外光譜吸收圖譜對
6照，一致，待測物質(zhì)為?；撬幔侔辞笆龇椒ㄓ眠B續(xù)流同位素質(zhì)譜儀測定待測物質(zhì)的C、N、S 同位素比值依次為:-21. 63%。、10. 21%。、20. 90%。，其 δ 13C(PDB)落入-19. 00%。 -22. 00%, δ 15N(Air-N2)落入 6. 00%。 14. 00%。，δ 34S(CDT)落入 19. 00%。 22. 00%。范圍，所以待測物質(zhì)為天然?；撬?。實(shí)例二從市場上購買到黃網(wǎng)市富馳制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)?；撬嶙鳛榇郎y物質(zhì)，取待測物質(zhì)適量與溴化鉀粉末混合均勻后置于壓片機(jī)內(nèi)壓成，溴化鉀薄片，然后用紅外吸收光譜儀測定溴化鉀薄片紅外光譜，將其紅外光譜吸收圖譜應(yīng)與?；撬針?biāo)準(zhǔn)紅外光譜吸收圖譜對照，一致，待測物質(zhì)為?；撬?，再按前述方法用連續(xù)流同位素質(zhì)譜儀測定待測物質(zhì)的C、N、S同位素同位素比值依次為-27. 54%0、-1. 84%。、9. 76%。，其δ 13C(PDB)落入-26. 00%。 -28. 00%。，δ 15N(Air-N2)落入 _1. 00%。 _3. 00%。，δ 34S(CDT)落入 8. 00%。
11. 00%。范圍，所以待測物質(zhì)為合成?；撬帷?shí)例三從市場上購買到嘉利生物制品有限公司生產(chǎn)?；撬嶙鳛榇郎y物質(zhì)，取待測物質(zhì)適量與溴化鉀粉末混合均勻后置于壓片機(jī)內(nèi)壓成，溴化鉀薄片，然后用紅外吸收光譜儀測定溴化鉀薄片紅外光譜，將其紅外光譜吸收圖譜應(yīng)與?；撬針?biāo)準(zhǔn)紅外光譜吸收圖譜對照，不一致，所以待測物質(zhì)不是?；撬?，則檢測終止。
權(quán)利要求
1.一種鑒別天然牛磺酸和合成?；撬岬臋z測方法，其特征在于包括如下檢測步驟 ⑴測定已知的天然?；撬岷鸵阎暮铣膳；撬嶂械摩?13C、δ 15Ν、δ 34S同位素比值；(2)確定測定物質(zhì)為?；撬幔虎菧y定待測物質(zhì)的δ 13C、δ 15Ν、δ 34S同位素比值。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法，其特征在于所述的步驟⑴測定已知的天然?；撬岷鸵阎暮铣膳；撬嶂械摩?13C、δ 15Ν、δ 34S同位素比值的步驟包括①制樣取已知的天然牛磺酸和合成?；撬幔謩e稱取約0.Img 1. Omg干燥的100 目 200目的粉末狀樣品于錫杯中并包裹緊密；②分別測定天然?；撬岷秃铣膳；撬岬腟13C、δ15N, δ %同位素比值通過自動采樣器將制備好的樣品送到元素分析儀，設(shè)定氧化爐溫度為1000°C 1050°C、還原爐溫度為 600°C 700°C、分離柱柱溫為35°C 95°C，然后用氦氣吹掃進(jìn)同位素質(zhì)譜儀測定天然牛磺酸和合成?；撬岬摩?13C、δ 15Ν、δ 34S同位素比值；③校正前述測定的天然?；撬岷秃铣膳；撬岬腟"C、δ 15N, δ 34S同位素比值分析過程中加入內(nèi)標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行校正；④確定天然?；撬?i3C、δ15N, δ 34S同位素比值范圍、合成牛磺酸S13C、δ 15N, δ 34S 同位素比值范圍在極顯著水平P <0. 05的要求下，對已知的天然牛磺酸和合成?；撬針悠贩謩e進(jìn)行3次以上平行測定試驗(yàn)，分別測定各自的δ 13C、δ 15Ν、δ 34S,計(jì)算其平均值，即得到天然?；撬酳13C、δ 15N, δ 34S同位素比值范圍、合成?；撬酳13C、δ 15N, 5%同位素比值范圍天然?；撬岬?S13C(PDB)為-19.00 % -22.00 %。，δ 15N(Air-N2)為 6. 00 % 14. 00 %。，δ 34S(CDT)為 19. 00 %。 22. 00 %。；合成牛磺酸 δ 13C(PDB) 為-26. 00%。 -28. 00%。，δ 15N(Air-N2)為-1. 00%。 -3. 00%。，δ 34S(CDT)為 8. 00%。
11. 00%。。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法，其特征在于所述的步驟( 確定測定物質(zhì)為?；撬釣槿〈郎y物質(zhì)適量與溴化鉀粉末混合均勻后置于壓片機(jī)內(nèi)壓成，溴化鉀薄片，然后用紅外吸收光譜儀測定溴化鉀薄片紅外光譜，將其紅外光譜吸收圖譜應(yīng)與?；撬針?biāo)準(zhǔn)紅外光譜吸收圖譜對照，若一致，則待測物質(zhì)為?；撬?，則進(jìn)行下一步測定；若不一致，則不是?；撬幔瑒t檢測終止。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法，其特征在于所述的步驟(3)測定待測物質(zhì)的S13C、δ 15N, δ %同位素比值為確認(rèn)待測物質(zhì)為?；撬岷螅眠B續(xù)流同位素質(zhì)譜儀測定待測物質(zhì)的δ 13C、δ 15Ν、δ 34S同位素比值，當(dāng)δ 13C(PDB)落入-19. 00%。 -22. 00%。，δ 15N(Air-N2)落入 6· 00%。 14. 00%。，δ 34S(CDT)落入 19. 00%ο 22. 00 %。范圍，則待測物質(zhì)為天然?；撬?；當(dāng)δ 13C (PDB)落入-26. 00 %。 -28. 00 %。， δ 15N(Air-N2)落入-1. 00%。 -3. 00%。，δ 34S(CDT)落入 8. 00%。 11. 00%。范圍，則待測物質(zhì)為合成?；撬?。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法，其特征在于所述的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)依次為=IAEA-C3纖維素，用于C測定；St-An、St-Li和硝酸鉀，用于N測定； Ag2S用于S測定。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法，其特征在于所述的C、N、S同位素比值的計(jì)算公式為δ %。二(R樣品/R標(biāo)樣-1) X 1000，其中R代表樣品和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中重同位素和輕同位素的比值；S表示待測樣品的重同位素和輕同位素比值對標(biāo)準(zhǔn)樣品的重同位素和輕同位素比值的千分差。
全文摘要
一種鑒別天然?；撬岷秃铣膳；撬岬臋z測方法，主要原理是基于天然?；撬幡?3C、δ15N、δ34S同位素比值與合成?；撬幡?3C、δ15N、δ34S同位素比值不同，利用連續(xù)流同位素質(zhì)譜法檢測?；撬岬摩?3C、δ15N、δ34S同位素比值，進(jìn)而鑒別出天然?；撬崤c合成?；撬?。本發(fā)明方法精確、可靠，適用于從天然生物體中提取的天然?；撬岙a(chǎn)品與合成牛磺酸產(chǎn)品的鑒別，為質(zhì)量監(jiān)督、產(chǎn)品的質(zhì)量鑒定提供依據(jù)。
文檔編號G01N33/48GK102213714SQ201110072850
公開日2011年10月12日 申請日期2011年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月25日
發(fā)明者勞燕文, 盧安根, 徐慧, 石子聰, 莫建光, 蔣艷芳, 陳秋虹, 黃島平 申請人:廣西壯族自治區(qū)分析測試研究中心