專利名稱：基于瓊脂糖凝膠的電泳方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種電泳方法，尤其涉及一種基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，屬于生物化學(xué)實驗技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
隨著基因組學(xué)和DNA組學(xué)的不斷發(fā)展，DNA越來越成為人們?nèi)找嫜芯康淖疃嗟奈镔|(zhì)。為了減輕工作量，減少實驗操作步驟，降低實驗成本，同時又能夠有效地清晰地反應(yīng)實驗結(jié)果和鑒定DNA，瓊脂糖凝膠電泳法就隨之應(yīng)運(yùn)而生
發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，提供一種基于瓊脂糖凝膠的電泳方法。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其特征在于包括以下步驟步驟①，制備瓊脂糖溶液并在電泳槽中凝固成膠狀物，構(gòu)成瓊脂糖凝膠；步驟②，向瓊脂糖凝膠的不同區(qū)域加入需要分離的物質(zhì)；步驟③，插上電源進(jìn)行電泳；步驟④，通過溴化こ錠進(jìn)行染色；步驟⑤，通過紫外燈確認(rèn)凝膠上DNA的分離狀況。上述的基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其中步驟①所述的瓊脂糖溶液通過微量移液槍加入到電泳槽中。進(jìn)ー步地，上述的基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其中所述的瓊脂糖凝膠是由半乳糖和3，6-脫水半乳糖交替組成的膠多糖。更進(jìn)一歩地，上述的基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其中所述的瓊脂糖凝膠的濃度為05 2%之間。更進(jìn)一歩地，上述的基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其中步驟③所述的電泳時電壓小于等于20V/cm，溫度低于30°C。再進(jìn)ー步地，上述的基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其中步驟④中以溴酚藍(lán)跑至凝膠總長度的2/3或者離膠板下側(cè)Icm處為結(jié)束點(diǎn)。本發(fā)明技術(shù)方案的優(yōu)點(diǎn)主要體現(xiàn)在能夠簡單而清晰地鑒別出不同分子量的DNA，分離出不同分子量的核酸片段。并且，本方法所需樣品少，減少了原料的浪費(fèi)，特別適于實驗室的學(xué)生實驗。本發(fā)明的目的、優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)，將通過下面優(yōu)選實施例的非限制性說明進(jìn)行解釋。這些實施例僅是應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)方案的典型范例，凡采取等同替換或者等效變換而形成的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明要求保護(hù)的范圍之內(nèi)。
具體實施例方式基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其特征在于包括以下步驟步驟①，制備瓊脂糖溶液并在電泳槽中凝固成一定形狀的膠狀物，構(gòu)成瓊脂糖凝膠。具體來說，瓊脂糖溶液通過微量移液槍加入到電泳槽中。且，瓊脂糖凝膠是由半乳糖和3，6-脫水半乳糖交替組成的膠多糖其濃度為05 2%之間。步驟②，向瓊脂糖凝膠的不同區(qū)域加入需要分離的物質(zhì)。步驟③，插上電源進(jìn)行電泳。具體來說，其電壓小于等于20V/cm，溫度低于30°C。步驟④，通過溴化こ錠進(jìn)行染色，以溴酚藍(lán)跑至凝膠總長度的2/3或者離膠板下側(cè)Icm處為結(jié)束點(diǎn)。步驟⑤，通過紫外燈確認(rèn)凝膠上DNA的分離狀況。就本發(fā)明ー較佳的實施方式來看，首先，將瓊脂糖置于錐形瓶中，加入TAE緩沖液，微波爐加熱煮沸至瓊脂糖全部融化，搖勻，制成瓊脂糖凝膠液。接著，取出電泳槽內(nèi)的制膠槽放入制膠玻璃板，用透明膠帶將玻璃板與內(nèi)槽兩端 邊緣封好，將封好的內(nèi)槽置于水平位置，并在固定位置放好梳子，將冷卻到65°C左右的瓊脂糖凝膠液小心地倒入內(nèi)槽玻璃板上，直到整個玻璃板表面形成均勻膠層，在室溫下靜置直至凝膠完全凝固，垂直輕拔梳子，取下膠帶，將凝膠及內(nèi)槽放入電泳槽中，添加TAE電泳緩沖液至沒過膠板為止。然后，用微量移液器分別將樣品加入膠板的樣品小槽內(nèi)，每加完ー個樣品，應(yīng)更換ー個加樣頭，以防污染，加樣時勿碰壞樣品孔周圍的凝膠面。之后，將加樣后的凝膠板通電進(jìn)行電泳，當(dāng)溴酚藍(lán)移動到距離膠板下沿約Icm處時，停止電泳，電泳完畢后，取出凝膠，用含有溴化こ錠TAE溶液染色約20分鐘，再用清水漂洗10分鐘。最后，觀察照相，在紫外燈下觀察，DNA存在則顯示出紅色熒光條帶，采用凝膠成像系統(tǒng)拍照保存。結(jié)合本發(fā)明的實際使用情況來看，通過上述的文字表述可以看出，采用本發(fā)明后，能夠簡單而清晰地鑒別出不同分子量的DNA，分離出不同分子量的核酸片段。并且，本方法所需樣品少，減少了原料的浪費(fèi)，特別適于實驗室的學(xué)生實驗。
權(quán)利要求
1.基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其特征在于包括以下步驟 步驟①，制備瓊脂糖溶液并在電泳槽中凝固成膠狀物，構(gòu)成瓊脂糖凝膠； 步驟②，向瓊脂糖凝膠的不同區(qū)域加入需要分離的物質(zhì)； 步驟③，插上電源進(jìn)行電泳； 步驟④，通過溴化こ錠進(jìn)行染色； 步驟⑤，通過紫外燈確認(rèn)凝膠上DNA的分離狀況。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其特征在于步驟①所述的瓊脂糖溶液通過微量移液槍加入到電泳槽中。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其特征在于所述的瓊脂糖凝膠是由半乳糖和3，6-脫水半乳糖交替組成的膠多糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其特征在于所述的瓊脂糖凝膠的濃度為05 2%之間。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其特征在于步驟③所述的電泳時電壓小于等于20V/cm,溫度低于30°C。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，其特征在于步驟④中以溴酚藍(lán)跑至凝膠總長度的2/3或者離膠板下側(cè)Icm處為結(jié)束點(diǎn)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種基于瓊脂糖凝膠的電泳方法，特點(diǎn)是首先制備瓊脂糖溶液并在電泳槽中凝固成一定形狀的膠狀物，然后向瓊脂糖凝膠的不同區(qū)域加入需要分離的物質(zhì)并插上電源進(jìn)行電泳，最后通過溴化乙錠的染色，在紫外燈下可以清晰地觀察到凝膠上DNA的分離。本發(fā)明借助了瓊脂糖凝膠的分子篩作用，主要用于分離、鑒定和純化DNA片段。同時，該方法操作簡便，設(shè)備簡單，需樣品量少，分辨能力高，已成為基因工程研究中重要的實驗方法之一。
文檔編號G01N27/447GK102690880SQ20111007123
公開日2012年9月26日 申請日期2011年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月24日
發(fā)明者宦奕奕 申請人:蘇州風(fēng)采信息技術(shù)有限公司