專利名稱：：同時(shí)測(cè)定藥物中的?；撬?、ε-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種測(cè)定藥物含量的方法。技術(shù)背景在藥物制劑中，根據(jù)需要可以添加?；撬?Tau，2-氨基己磺酸)、s-氨基己酸(EACA)和L-天門冬氨酸(L-Asp)來實(shí)現(xiàn)不同的藥理功能。?；撬崾且环N含巰基的氨基酸，可通過與甘氨酸和y-氨基丁酸作用的含硫氨基酸代謝而得到。許多研究結(jié)果表明，?；撬嶙鳛樯窠?jīng)抑制遞質(zhì)、抗氧化劑、膜穩(wěn)定劑、透射調(diào)節(jié)器、細(xì)胞內(nèi)釣流量調(diào)節(jié)器，不但具有細(xì)胞保護(hù)性質(zhì)和生理功能，同時(shí)也具有藥理學(xué)功能。很多疾病如Alzheimers疾病、心血管疾病、高膽固醇血癥、癲癇癥、肝功能異常、肌變性、酒精中毒和嚢性纖維化等疾病，都已被證明與生理組織與體液中牛磺酸含量的變化有著密切的關(guān)系。因此，在臨床上，?；撬嵋巡煌潭鹊谋怀晒?yīng)用于各種情況的治療。s-氨基己酸是一種抗纖維蛋白溶解劑，能抑制纖維蛋白溶酶原的激活因子，使纖維蛋白溶酶原不能激活為纖維蛋白溶酶，從而抑制纖維蛋白的溶解，產(chǎn)生止血作用。高濃度時(shí)，s-氨基己酸對(duì)纖維蛋白溶酶還有直接抑制作用，對(duì)于纖維蛋白溶酶活性增高所致的出血癥有良好療效。它能使血栓變得更穩(wěn)定，它是通過抑制血纖維蛋白溶酶原激活物和抗血纖維蛋白溶酶的活性起作用的。s-氨基己酸可能還阻止了血小板糖蛋白受體的纖維蛋白溶酶介導(dǎo)的降解，進(jìn)而保存了血小板的功能。L-天門冬氨酸是十二種天然蛋白質(zhì)氨基酸之一，是構(gòu)成蛋白質(zhì)的一種組成，屬非必需氨基酸，可作為大腦中的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)。同時(shí)它也是尿素循環(huán)的代謝產(chǎn)物之一，也參與了糖異生作用。L-天門冬氨酸是一種神經(jīng)遞質(zhì)，被廣泛用于制藥業(yè)。它在醫(yī)學(xué)上被用作氨性解毒劑、肝功促進(jìn)劑和疲勞解除劑。L-天門冬氨酸和谷氨酸一樣，都屬于酸性氨基酸，在酶活性中心起著重要作用，同時(shí)也保持了蛋白質(zhì)的溶解性和離子性。目前，市場(chǎng)上出售一種復(fù)方牛石黃酸滴眼液中就含有?；撬帷-氨基己酸和L-天門冬氨酸。由國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)委員會(huì)審核批準(zhǔn)的該藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，對(duì)這三種組分的進(jìn)行含量測(cè)定時(shí)是采用的高效液相色譜法(HPLC),其每個(gè)組分的測(cè)定條件見表1。表l復(fù)方l?；撬岬窝垡嘿|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中刈—三種待分析組分的HPLC測(cè)定條件<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>由于測(cè)定條件各不相同，因此高效液相色譜法只能單獨(dú)測(cè)定藥物中的牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸的含量，存在測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)和效率低的以及測(cè)定成本較高的不足。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種能方便和快速地對(duì)藥物中的牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量進(jìn)行毛細(xì)管電泳同時(shí)測(cè)定的方法。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是本發(fā)明同時(shí)測(cè)定藥物中的?；撬?、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量的方法，包括如下步驟①準(zhǔn)備待測(cè)樣品:容液；②衍生反應(yīng)，以硼酸鹽緩沖液作為反應(yīng)介質(zhì)，加入待測(cè)樣品溶液、萘二曱醛溶液和氰化鉀溶液進(jìn)入衍生反應(yīng)；③進(jìn)入毛細(xì)管電泳裝置進(jìn)行分離測(cè)定，取得待測(cè)樣品溶液電泳圖；④與牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液電泳圖相比對(duì)，確定待測(cè)樣品中牛石黃酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸的含量。本發(fā)明的有益效果是，能方便和快速地對(duì)藥物中的牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量進(jìn)行同時(shí)測(cè)定，操作簡(jiǎn)便，分析時(shí)間短，試劑消耗量少，為藥物的常規(guī)分析和質(zhì)量控制提供了一種可選擇的方法。本說明書包括如下八幅附圖圖1所示為NDA和NDA標(biāo)記的牛石黃酸、e-氨基己酸和L-天門冬氨酸的激發(fā)和發(fā)射圖譜；圖2所示為反應(yīng)時(shí)間對(duì)三種分析物的熒光強(qiáng)度的影響；圖3A所示為緩沖液pH值對(duì)遷移時(shí)間的影響；圖3B所示為緩沖液pH值對(duì)化合物熒光強(qiáng)度的影響；圖4所示為緩沖溶液濃度對(duì)各組分熒光強(qiáng)度的影響；圖5所示為分離電壓對(duì)樣品分離的影響；圖6所示為混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的電泳圖；圖7所示為樣品A的毛細(xì)管電泳圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說明。同時(shí)測(cè)定藥物中的牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量的方法，包括如下步驟①準(zhǔn)備待測(cè)樣品溶液，待測(cè)藥物樣品用濃度為0.10mol/L的HC1溶液稀釋600倍。②衍生反應(yīng)，以硼酸鹽緩沖液作為反應(yīng)介質(zhì)，加入待測(cè)樣品溶液和萘二曱醛溶液、氰化鉀溶液進(jìn)入衍生反應(yīng)。具體過程為，取150^iLpH值為9.2，濃度為10mmol/L的硼酸鹽緩沖液于0.5mL的聚乙烯管中，再加入10(iL混合標(biāo)準(zhǔn)液或待測(cè)樣品，50|aL濃度為2.0mmol/L的萘二曱醛溶液和50濃度為20mmol/L和氰化鉀溶液，搖勻，在黑暗處室溫下反應(yīng)1~6小時(shí)。③進(jìn)入毛細(xì)管電泳裝置進(jìn)行分離測(cè)定，取得待測(cè)樣品溶液電泳圖。毛細(xì)管電泳裝置選用本申請(qǐng)人在專利號(hào)為200620034929.7、公告號(hào)為CN2921831的實(shí)用新型專利說明書中所公開的高效毛細(xì)管電泳儀。激發(fā)光源選用最大發(fā)射波長(zhǎng)為445nm的藍(lán)色發(fā)光二極管(LED),發(fā)光強(qiáng)度約3mW,半峰約25nm;外接電壓+3.5V;同時(shí)選用波長(zhǎng)為475nm的黃色濾光片。與牛石黃酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液電泳圖相比對(duì)，確定待測(cè)樣品中牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸的含量。?；撬?、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液電泳圖的取得與上述步驟13相同。試劑?；撬?、s-氨基己酸、L-天門冬氨酸、四硼酸鈉和氰化鉀(KCN)可選用美國Sigma公司(St.Louis,MO,USA)產(chǎn)品。2,3-萘二曱醛(NDA)可選用瑞士Fluka公司(Buchs,Switzerland)產(chǎn)品。?；撬帷-氨基己酸和L-天門冬氨酸用濃度為0.10mol/L的鹽酸溶液配成濃度為10g/mL的貯備液。分析前，用0.1mol/L的鹽酸溶液將?；撬?、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸的貯備液稀釋到所需的濃度。NDA配成濃度為2mmol/L的曱醇溶液，放置在4。C的冰箱內(nèi)保存，此溶液需每周配制一次。濃度為20mmol/L的KCN溶液、濃度為10mmol/L的硼酸鹽緩沖液都直接用二次水來配，并用濃度為0.10mol/LNaOH、濃度為0.10mol/LHCl調(diào)節(jié)pH值。溶液進(jìn)入毛細(xì)管前均用0.45|im的濾膜過濾。上述步驟③中，新的毛細(xì)管在第一次使用前均要進(jìn)行活化處理，即依次用濃度為1.0mol/L的NaOH溶液、濃度為O.lmol/L的NaOH溶液、去離子水和緩沖液分別沖洗20min、10min、5min、10min。每天使用前依次用濃度為O.lmol/L的NaOH溶液、去離子水和緩沖液分別沖洗5min、1min、5min。兩次進(jìn)樣之間依次用去離子水、濃度O.lmol/L的NaOH溶液、去離子水和緩沖液分別沖洗3min、3min、2min、3min。待測(cè)樣品溶液以重力進(jìn)樣8s(抬高200mm),電泳電壓為22kV。毛細(xì)管可選用空壁熔融石英毛細(xì)管，內(nèi)徑為75pm(外徑365pm),長(zhǎng)度為50.0cm(有效長(zhǎng)度48.0cm);電泳緩沖液為濃度為10mmol/L的硼酸鹽溶液(pH值9.2)。LED發(fā)射波長(zhǎng)和濾光片波長(zhǎng)的選擇對(duì)熒光的激發(fā)效率有著重要的影響。LED的發(fā)射波長(zhǎng)必須與NDA標(biāo)記的分析物的激發(fā)波長(zhǎng)相匹配。圖1所示為NDA和NDA標(biāo)記的?；撬?、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸的激發(fā)和發(fā)射圖譜,從該圖中我們可以看到，NDA標(biāo)記的牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸最大激發(fā)波長(zhǎng)為446-450nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為485-492nm，兩波峰位置比較接近(斯托克斯位移很小)，僅相差40nm，如果LED最大激發(fā)波長(zhǎng)與NDA標(biāo)記的分析物的激發(fā)波長(zhǎng)靠得比較近，就可能會(huì)產(chǎn)生很高的背景干擾。如果選用最大激發(fā)波長(zhǎng)為445nm，半峰寬為25nm的LED,激發(fā)光和發(fā)射光就只有^f艮少的部分相互重疊。雖然NDA標(biāo)記的分析物在445nm激發(fā)的熒光比450nm略弱，但是，由于這樣產(chǎn)生較低的背景干擾，所以相對(duì)而言就提高了檢測(cè)靈敏度。因此本發(fā)明選用最大激發(fā)波長(zhǎng)為445nm的LED作為激發(fā)光源。此外，由于LED發(fā)出的光并不是單色光，為了消除其對(duì)熒光采集的千擾，必須釆用合適的濾光片將其過濾掉。因此本發(fā)明選擇475nm的濾光片，以降低背景干擾、提高檢測(cè)靈敏度。在堿性條件下NDA能與氨基酸發(fā)生反應(yīng)，因此本發(fā)明選擇硼酸鹽緩沖液(pH9.2,10mmol/L)作為反應(yīng)介質(zhì)。為了優(yōu)化衍生條件，本發(fā)明通過測(cè)定?；撬?、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸的峰面積來考察反應(yīng)時(shí)間對(duì)衍生反應(yīng)的影響。圖2所示為反應(yīng)時(shí)間對(duì)三種分析物的焚光強(qiáng)度的影響，從該圖中可見，衍生反應(yīng)在大約60min時(shí)已進(jìn)行完全，獲得最大的熒光強(qiáng)度，而在反應(yīng)時(shí)間超過6小時(shí)后獲得的熒光強(qiáng)度逐漸減弱，因此，所有樣品都在反應(yīng)后1~6小時(shí)內(nèi)進(jìn)入毛細(xì)管電泳裝置。為了獲得一個(gè)具體的、精確的毛細(xì)管電泳法來分析藥品中的牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸，本發(fā)明對(duì)電泳條件進(jìn)行了優(yōu)化，使分析物能被完全分離和檢測(cè)。以下是本發(fā)明方法中緩沖液的pH值、濃度，電泳電壓和進(jìn)樣時(shí)間等優(yōu)選參數(shù)的確定。1、緩沖液pH值在毛細(xì)管電泳中，緩沖液的pH值對(duì)分離效率和靈敏度有著重要的影響，因?yàn)樗鼘?duì)毛細(xì)管壁表面硅羥基的電離，電滲流和化合物的熒光強(qiáng)度都有影響。為了得到最佳pH值，本發(fā)明考察了pH從8.0到9.6的緩沖液。圖3A所示為緩沖液pH值對(duì)遷移時(shí)間的影響，圖3B所示為緩沖液pH值對(duì)化合物熒光強(qiáng)度的影響，從該兩圖中可見，緩沖液pH值為9.2時(shí)分析物的遷移時(shí)間最短，焚光強(qiáng)度最大，且分離度理想，所以本發(fā)明選擇pH值為9.2的硼酸鹽緩沖液作為電泳緩沖溶液。2、緩沖液濃度緩沖液的濃度對(duì)分離度也有重要的影響，它影響電滲流和焦?fàn)枱?。選擇最佳的離子強(qiáng)度應(yīng)該考慮能產(chǎn)生較低的電流并得較好的峰形。本發(fā)明考察了pH值為9.2的濃度從6到16mmol/L的硼酸鹽緩沖液對(duì)分析物遷移時(shí)間的影響，如圖4，緩沖液濃度從6到10mmol/L，牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸之間的分離度相差不大，遷移時(shí)間逐漸縮短。緩沖液濃度為12mmol/L時(shí)分離時(shí)間達(dá)到最大。從12到16mmol/L,遷移時(shí)間又逐漸縮短，同時(shí)峰形變差，電流增大。因此，本發(fā)明中緩沖液濃度優(yōu)選為10mmol/L,可以得到最高的靈敏度，并保持最佳峰形，產(chǎn)生較低的電流，減少噪音和基線漂移。3、分離電壓外加電壓對(duì)三種分析物的分離度的影響如圖5所示，外加電壓直接影響分析物的遷移時(shí)間。當(dāng)外加電壓為19.0-25.0kV時(shí)，隨著電壓的升高，NDA標(biāo)記的分析物的遷移時(shí)間逐漸減少，峰形也變得更尖銳，但是當(dāng)電壓大于22.0kV時(shí)，電流急劇增大，產(chǎn)生的焦?fàn)枱崾狗蛛x度和重現(xiàn)性都降低了。另一方面，如果電壓太低，分析時(shí)間會(huì)增長(zhǎng)，毛細(xì)管內(nèi)的樣品會(huì)擴(kuò)散，從而導(dǎo)致峰形變寬。為了得到較好的分離效率和理想的分析時(shí)間，本發(fā)明優(yōu)選22.0kV作為分離電壓。4、進(jìn)4羊時(shí)間通過改變進(jìn)樣時(shí)間來優(yōu)化進(jìn)樣量。本發(fā)明釆用的進(jìn)樣方式為重力進(jìn)樣，即將樣品瓶抬高200mm進(jìn)樣。進(jìn)樣時(shí)間從2秒遞增到12秒(每次增加2秒)，得到的NDA標(biāo)記的牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸的峰面積也在如期遞增。然而，過長(zhǎng)的進(jìn)樣時(shí)間會(huì)導(dǎo)致毛細(xì)管過載，從而導(dǎo)致峰形變差。為了得到合適的峰響應(yīng)和較好形狀的峰，選擇8秒作為最佳進(jìn)樣時(shí)間。綜上所述，測(cè)定?；撬帷-氨基己酸和L-天門冬氨酸的優(yōu)選分離條件是緩沖液為pH值9.2、濃度1Ommol/L的硼酸鹽溶液，電泳電壓為22kV,進(jìn)樣時(shí)間為8秒。圖6為NDA標(biāo)記的?；撬?、e-氨基己酸和L-天門冬氨酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在最佳分離條件下得到的電泳圖，三種分析物在7分鐘內(nèi)均達(dá)到基線分離，峰形良好。本發(fā)明的方法學(xué)考察1、線性分別配制六種濃度為1.0-200ng/mL的NDA標(biāo)記的?；撬?、s-氨基己酸標(biāo)準(zhǔn)溶液和濃度為2.0-400ng/mL的NDA標(biāo)記的L-天門冬氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，每種溶液用上述的毛細(xì)管電泳法進(jìn)行分離，重復(fù)三次，對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行最小二乘法處理，以濃度對(duì)峰面積作圖，得到線性回歸曲線。表2列出了相關(guān)系數(shù)、濃度范圍和檢出限等結(jié)果。表2以毛細(xì)管電泳方法同時(shí)測(cè)定三種組分的測(cè)定參數(shù)組分線性斜率(ng/mL)斜率的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(％)截距相關(guān)系數(shù)檢測(cè)限(ng/mL)?；撬?.0-20011540±2892.50381±10.70.99960.4e-氨基己酸1.0-2008863±1611.82285±4.800.99980.4L-天門冬氨酸2.0-40014446±3802.63216±6.960,99960.72、精密度通過統(tǒng)計(jì)重復(fù)測(cè)定各組分的遷移時(shí)間和峰面積可評(píng)〗介方法的重現(xiàn)性，在上述最佳電泳條件下，對(duì)20ng/mLNDA標(biāo)記的?；撬帷-氨基己酸標(biāo)準(zhǔn)溶液和40ng/mLNDA標(biāo)記的L-天門冬氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算其遷移時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。每天進(jìn)樣6次，測(cè)定3天，計(jì)算日間精密度。結(jié)果列于表3中，遷移時(shí)間和峰面積和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別小于1.1%和4.0%。結(jié)果表明，本發(fā)明的測(cè)定方法具有良好的重現(xiàn)性。表3毛細(xì)管電泳方法相關(guān)保留時(shí)間和峰面積的精密度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(％)?；撬醩-氨基己酸L-天門冬氨酸天內(nèi)保留時(shí)間0.320.390.58峰面積1.862.703.02間天保留時(shí)間0.580.721.03峰面積2.303.113.95對(duì)商品滴眼液進(jìn)行加標(biāo)回收率試驗(yàn)，根據(jù)藥物制劑標(biāo)注的含量，把三種化合物配成三種不同的濃度，表4列出了回收率和重現(xiàn)性的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。表4商用滴眼液中三種組分的回收率考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>3.樣品分析本發(fā)明實(shí)驗(yàn)測(cè)定了兩種不同規(guī)格的的復(fù)方?；撬岬窝垡?。其中樣品A(盛澤醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司，濟(jì)南)每瓶為15mL,含?；撬?50mg、s-氨基己酸150mg、L-天門冬氨酸30mg和馬來酸氯苯那每丈1.5mg;輔料及賦形劑為硼酸、氫氧化鉀、硼砂、苯扎氯銨溶液和聚氧乙烯氫化蓖麻油60。樣品B(曼秀雷敦(中山)藥業(yè)有限公司)每瓶為13mL，含牛磺酸130mg、s-氨基己酸130mg、L-天門冬氨酸20.15mg和馬來酸氯苯那敏1.3mg。輔料及賦形劑與樣品A相同。圖8所示為一種藥物制劑(樣品A)的電泳圖，每種物質(zhì)都得到纟艮好的分離。表5反應(yīng)了利用該法的測(cè)定結(jié)果和高效液相色譜法的測(cè)定結(jié)構(gòu)基本一致。用Wilcoxon檢驗(yàn)對(duì)比這兩種方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩種方法得到的結(jié)果沒有明顯差異。表5商用復(fù)方?；撬岬窝垡簶悠返姆治鼋Y(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>本發(fā)明采用毛細(xì)管電泳柱內(nèi)光纖發(fā)光二極管誘導(dǎo)熒光法能方便和快速地對(duì)藥物中的?；撬?、e-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量進(jìn)行同時(shí)測(cè)定。通過分析兩種市售的滴眼液，證實(shí)本發(fā)明方法得到的結(jié)果與高效液相色譜法(HPLC)相當(dāng)，為藥物的常規(guī)分析和質(zhì)量控制提供了一種可選擇的方法，具有操作筒便、分析時(shí)間短、試劑消耗量少的特點(diǎn)。權(quán)利要求1.同時(shí)測(cè)定藥物中的?；撬?、ε-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量的方法，包括如下步驟①準(zhǔn)備待測(cè)樣品溶液；②衍生反應(yīng)，以硼酸鹽緩沖液作為反應(yīng)介質(zhì)，加入待測(cè)樣品溶液和萘二甲醛溶液、氰化鉀溶液進(jìn)入衍生反應(yīng)；③進(jìn)入毛細(xì)管電泳裝置進(jìn)行分離測(cè)定，取得待測(cè)樣品溶液電泳圖；④與?；撬帷ⅵ?氨基己酸和L-天門冬氨酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液電泳圖相比對(duì)，確定待測(cè)樣品中?；撬?、ε-氨基己酸和L-天門冬氨酸的含量。2.如權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定藥物中的?；撬?、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量的方法，其特征是步驟①中，所述待測(cè)樣品溶液是將待測(cè)藥物樣品用濃度為0.10mol/L的HC1溶液稀釋600倍。3.如權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定藥物中的?；撬帷-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量的方法，其特征是步驟②中，所述衍生反應(yīng)是取150^L、濃度為10mmol/L的硼酸鹽緩沖液于試管中，再加入10|xL待測(cè)樣品溶液和50pL濃度為2.0mmol/L的萘二曱醛溶液、50jiL濃度為20mmol/L的氰化鉀溶液，搖勻，在黑暗處室溫下反應(yīng)1~6小時(shí)。4.如權(quán)利要求3所述的同時(shí)測(cè)定藥物中的?；撬帷-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量的方法，其特征是所述硼酸鹽緩沖液的pH值為9.2。5.如權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定藥物中的牛磺酸、s-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量的方法，其特征是步驟③中，所述毛細(xì)管電泳裝置選用最大發(fā)射波長(zhǎng)為445nm的藍(lán)色發(fā)光二極管作為激發(fā)光源，熒光信號(hào)通過狹縫和波長(zhǎng)為475nm的黃色濾光片后被光電倍增管收集。6.如權(quán)利要求5所述的同時(shí)測(cè)定藥物中的?；撬帷-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量的方法，其特征是步驟③中，所述待測(cè)樣品溶液的進(jìn)樣時(shí)間為8秒，電泳電壓為22kV。全文摘要本發(fā)明公開了一種同時(shí)測(cè)定藥物中的?；撬?、ε-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量的方法，它包括如下步驟準(zhǔn)備待測(cè)樣品溶液；衍生反應(yīng)，以硼酸鹽緩沖液作為反應(yīng)介質(zhì)，加入待測(cè)樣品溶液和萘二甲醛溶液、氰化鉀溶液進(jìn)入衍生反應(yīng)；進(jìn)入毛細(xì)管電泳裝置進(jìn)行分離測(cè)定，取得待測(cè)樣品溶液電泳圖；與?；撬?、ε-氨基己酸和L-天門冬氨酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液電泳圖相比對(duì)，確定待測(cè)樣品中?；撬?、ε-氨基己酸和L-天門冬氨酸的含量。本發(fā)明的有益效果是，能方便和快速地對(duì)藥物中的?；撬?、ε-氨基己酸和L-天門冬氨酸含量進(jìn)行同時(shí)測(cè)定，操作簡(jiǎn)便，分析時(shí)間短，試劑消耗量少，為藥物的常規(guī)分析和質(zhì)量控制提供了一種可選擇的方法。文檔編號(hào)G01N27/447GK101241104SQ200810044949公開日2008年8月13日申請(qǐng)日期2008年3月12日優(yōu)先權(quán)日2008年3月12日發(fā)明者楊秀培,畢偉文,丹肖,蔡明發(fā),袁紅雁,峰霍申請(qǐng)人:四川大學(xué)