一種天麻多肽及制備方法和在抗菌抗病毒中的醫(yī)用用圖
【技術(shù)領域】
[0001] 本發(fā)明提供一種天麻多肽，同時還提供了其制備方法，本發(fā)明進一步公開了天麻 多肽在抗菌抗病毒中的醫(yī)用用途，屬于醫(yī)學生物制藥技術(shù)領域。
【背景技術(shù)】
[0002] 天麻作為一種中藥材，具有熄風定驚、鎮(zhèn)靜催眠、鎮(zhèn)痛、抗血小板聚集、抗氧化、延 緩衰老、降壓、抗驚厥、抗癲癇、改善學習記憶，增強非特異性免疫及細胞免疫等功效，然而 目前國內(nèi)外對于天麻多集中于天麻多糖、天麻素、生物堿等有效成分的提取、分離純化及藥 理活性方面的研究。經(jīng)檢索未見天麻多肽相關文獻報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明提供一種天麻多肽，為天然抗菌抗病毒藥物，對大腸桿菌、白色念珠菌、綠 膿桿菌、金黃色葡萄球菌、克雷伯氏桿菌等具有廣譜的抗菌活性，能有效抑制病毒型流感、 乙型肝炎、甲型HlNl流感病毒、艾滋病病毒、冠狀病毒的增殖，同時還能促進皮膚傷口愈 合。
[0004] 本發(fā)明提供一種天麻多肽的制備方法，適用于工業(yè)化生產(chǎn)，提取率高。
[0005] 本發(fā)明提供一種天麻多肽在抗菌抗病毒中的醫(yī)用用途，加入其它增溶劑等輔料可 制成片劑、膠囊、顆粒等口服制劑；凝膠劑，軟膏劑，噴霧劑，洗劑，栓劑等用于皮膚和粘膜的 消毒劑、消毒濕巾、消毒紗布、消毒棉棒、創(chuàng)可貼等各種消毒產(chǎn)品。
[0006] 本發(fā)明所述的天麻多肽，其特征在于： 為一種酸性多肽，分子量范圍在5. 8-7. 8KD，等電點為7. 83-8. 15,其電泳圖如圖1所 不。
[0007] 本發(fā)明的一種天麻多肽的制備方法，包括以下步驟： 1)天麻經(jīng)洗滌、剔出雜質(zhì)后，過篩粉碎40-100目，按料液比1:6-12 (g/ml)，置于濃度 為0. 4%-1%的氯化鈉溶液中，80°C水浴提取2-8h; 2) 減壓過濾后，將得到的天麻蛋白濾液濃縮為0. 5-1. 2 (g/ml)的原藥濃度； 3) 向天麻蛋白濃縮液中按體積比加入0. 2-0. 8%的復合酶水解液，復合酶水解液中含 木瓜蛋白酶1-3%，胰蛋白酶0. 6-1. 5%，風味蛋白酶0. 5-1%，酶解溫度為50-60°C，酶解時間 為30min-1.5h，然后將酶解液過IOKDa膜進行超濾，8000r.p.m離心20min，即得。
[0008] 本發(fā)明一種抗菌抗病毒天麻多肽提取物的制備方法，其特征是，優(yōu)選的天麻粉碎 至80目，料液比1:6(g/ml)，0.6%的氯化鈉溶液，80°C水浴提取4h，天麻蛋白提取液原藥 濃度為lg/mL。
[0009] 本發(fā)明中所述天麻多肽提取物可以與藥學上可接受的載體或賦形劑形成藥物制 劑，所述制劑可以為噴霧劑、氣霧劑、霜劑、軟膏劑、凝膠劑、消毒濕巾、消毒棉棒、消毒紗布 及創(chuàng)可貼等外用劑型；也可以為口服液、顆粒劑、混懸液、乳劑等口服劑型。
[0010] 本發(fā)明積極效果在于： 天麻多肽為天然藥物的特性，療效確切，沒有化學品的諸多不良影響和副作用；天麻多 肽穩(wěn)定性非常好，既耐酸堿又耐高溫，高溫處理及真空干燥后仍保留完整的藥理活性；使用 簡單方便，皮膚滲透性好，無刺激性，不易殘留；不僅有很好的治療作用，還能促進皮膚傷口 愈合。本發(fā)明具有廣譜的抑菌活性，特別是針對常見細菌、引起婦科疾病的真菌及傷口感染 的綠膿桿菌表現(xiàn)出極高的抑菌效果，對流感病毒、乙型肝炎病毒、甲型HlNl流感病毒、冠狀 病毒表現(xiàn)出極強的殺傷力，以天麻多肽為主藥成分的藥物制劑具有廣闊的前景。
[0011]
【附圖說明】： 圖1天麻多肽凝膠電泳圖； 其中，左右兩側(cè)為標準的marker,即標準分子量蛋白質(zhì)的電泳圖，由左向右依次為實 施例1、實施例2、實施例3、實施例4中天麻多肽凝膠電泳圖。
【具體實施方式】
[0012] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步描述，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。
[0013] 實施例1 : 1) 天麻經(jīng)洗滌、剔出雜質(zhì)后，粉碎至80目，按料液比1:6 (g/ml)，置于濃度為0. 6%的 氯化鈉溶液中，80°C水浴提取4h; 2) 減壓過濾后，將所得天麻蛋白提取液濃縮為I(g/ml)的原藥濃度； 3) 向濃縮液中按體積比加入0. 4%的復合酶水解液，復合酶水解液中含木瓜蛋白酶 1. 5%，胰蛋白酶0. 8 %，風味蛋白酶0. 6%，酶解溫度為55°C，酶解時間為40min，然后將酶 解液過IOKDa膜進行超濾，8000r.p.m離心20min，所得膜下濾液即為天麻多肽提取物，于 4°C條件下保存?zhèn)溆谩?br>[0014] 4)采用SDS-PAGE電泳法測天麻多肽分子量，以索萊寶公司的超低分子量蛋 白質(zhì)marker作為標準，該標準蛋白是由3種多肽和2種低分子蛋白構(gòu)成，分子量范圍為 3. 3-20. 1KD，經(jīng)試驗得出天麻多肽分子量大概為5. 8-7. 8KD(見附圖1)。
[0015] 實施例2 1)天麻經(jīng)洗滌、剔出雜質(zhì)后，粉碎至100目，按料液比1:8 (g/ml)，置于濃度為0. 4%的 氯化鈉溶液中，80°C水浴提取2h; 2)減壓過濾后，將所得天麻蛋白提取液濃縮為0. 8g/mL的原藥濃度； 3) 向濃縮液中按體積比加入0. 2%的復合酶水解液，復合酶水解液中含木瓜蛋白酶2%， 胰蛋白酶0. 6 %，風味蛋白酶0. 5%，酶解溫度為50°C，酶解時間為30min，然后將酶解液過 IOKDa膜進行超濾，8000r.p.m離心20min，所得濾液即為天麻多肽提取物，于4°C條件下 保存?zhèn)溆茫?4) 采用SDS-PAGE電泳法測天麻多肽分子量，以索萊寶公司的超低分子量蛋白 質(zhì)marker作為標準，該標準蛋白是由3種多肽和2種低分子蛋白構(gòu)成，分子量范圍為 3. 3-20. 1KD，經(jīng)試驗得出天麻多肽分子量大概為5. 8-7. 8KD(見附圖1)。
[0016] 實施例3 1) 天麻經(jīng)洗滌、剔出雜質(zhì)后，粉碎至40目，按料液比1:12 (g/ml)，置于濃度為1%的氯 化鈉溶液中，80°C水浴提取6h; 2) 減壓過濾后，將所得天麻蛋白提取液濃縮為0. 5g/mL的原藥濃度； 3) 向濃縮液中按體積比加入0. 8%的復合酶水解液，復合酶水解液中含木瓜蛋白酶 3%，胰蛋白酶1. 5%，風味蛋白酶1%，酶解溫度為60°C，酶解時間為I. 5h，然后將酶解液過 IOKDa膜進行超濾，8000r.p.m離心20min，所得濾液即為天麻多肽提取物，于4°C條件下 保存?zhèn)溆茫?4) 采用SDS-PAGE電泳法測天麻多肽分子量，以索萊寶公司的超低分子量蛋白 質(zhì)marker作為標準，該標準蛋白是由3種多肽和2種低分子蛋白構(gòu)成，分子量范圍為 3. 3-20. 1KD，經(jīng)試驗得出天麻多肽分子量大概為5. 8-7. 8KD(見附圖1)。
[0017] 實施例4 1) 天麻經(jīng)洗滌、剔出雜質(zhì)后，粉碎至60目，按料液比1:10 (g/ml)，置于濃度為0. 8%的 氯化鈉溶液中，80°C水浴提取8h; 2) 減壓過濾后，將所得天麻蛋白提取液濃縮為I. 2g/mL的原藥濃度； 3) 向濃縮液中按體積比加入0. 5%的復合酶水解液，復合酶水解液中含木瓜蛋白酶1%， 胰蛋白酶1. 2 %，風味蛋白酶0. 8%，酶解溫度為55°C，酶解時間為lh，然后將酶解液過 IOKDa膜進行超濾，8000r.p.m離心20min，所得濾液即為天麻多肽提取物，于4°C條件下 保存?zhèn)溆茫?4) 采用SDS-PAGE電泳法測天麻多肽分子量，以索萊寶公司的超低分子量蛋白 質(zhì)marker作為標準，該標準蛋白是由3種多肽和2種低分子蛋白構(gòu)成，分子量范圍為 3. 3-20. 1KD，經(jīng)試驗得出天麻多肽分子量大概為5. 8-7. 8KD(見附圖1)。
[0018] 以天麻多肽作為活性成分，按照常規(guī)衛(wèi)生用品制備工藝，可制成創(chuàng)可貼、消毒濕 巾、消毒棉棒、消毒紗布等衛(wèi)生消毒材料。
[0019] 對本發(fā)明天麻多肽進行的主要藥效學實驗及結(jié)果如下： 一、體外抗菌試驗 本發(fā)明所提供的天麻多肽提取物具有很好的抗菌性能，在體外對臨床常見耐藥菌株進 行溶出性抗(抑）菌產(chǎn)品抑菌性能測試(實驗方法參見2002年《消毒技術(shù)規(guī)范》)，數(shù)據(jù)結(jié)果 如下：
二、天麻多肽提取物抗病毒實驗 (1