專利名稱：從魔芋飛粉中提取神經(jīng)酰胺的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從魔芋中提取有效物質(zhì)的方法，特別是一種從魔芋飛粉中提取神經(jīng)酰胺的方法。
背景技術(shù)：
魔芋是有益的堿性食品，對食用動物性酸性食品過多的人，搭配吃魔芋，可以達到食品酸、堿平衡，對人體健康有利；目前世界各地對魔芋的保健、醫(yī)療作用作了許多臨床試驗研究，結(jié)論基本一致，其中主要成分魔芋葡甘聚糖屬水溶性半纖維素，其突出的營養(yǎng)保健 功能在于能發(fā)揮膳食纖維對營養(yǎng)不平衡的調(diào)節(jié)作用，它與白菜、芹菜等蔬菜類中所含非水溶性的纖維，進入人體后原形排出者不同，它能參與人體的代謝作用及影響腸道菌向有利于健康的方向變化；魔芋除含有大量葡甘聚糖外，還含有生物堿、果膠、17種人體所需的氨基酸和10種礦物質(zhì)微量元素以及豐富的食物纖維，是生物界唯一含有大量葡甘聚糖的植物，對高血脂、高膽固醇、糖尿病、肥胖病、便秘癥等現(xiàn)代富貴病具有很好的防治作用，是中老年人理想的健康食品，深受世界保健食品市場的青睞；在日本，魔芋早已成為席席必備的佳肴，被譽為“魔力食品”。魔芋葡甘聚糖還具有增稠、乳化、膠凝、粘結(jié)、保水等性能，其粉即可作為主料做成各種食品，也可作為食品添加劑以改善其它食品的品質(zhì)，在食品工業(yè)中被用作增稠劑、懸乳齊U、乳化劑、穩(wěn)定劑、品質(zhì)改良劑等食品添加劑，廣泛應(yīng)用于糧食制品、肉制品、飲料、調(diào)味品、豆制品中；另外還可用于化妝品、紡織業(yè)、建筑業(yè)、食用膜、環(huán)境保護、文物保護等領(lǐng)域。由于魔芋的廣泛用途以及世界各地對魔芋的認識，使得魔芋的市場需求越來越大，目前已形成日本市場、韓國及東南亞市場、歐美市場等三大市場。2006年國內(nèi)外需鮮魔芋90萬噸，而產(chǎn)量僅52萬噸，遠遠無法滿足需要。從20世紀80年代開始，中國魔芋開始了產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，種植面積和加工生產(chǎn)量都在飛速發(fā)展，在生產(chǎn)的同時產(chǎn)生的大量魔芋飛粉，由于魔芋飛粉抗營養(yǎng)且含有異味，一般都廢棄不用，不僅浪費，而且污染環(huán)境。但是，魔芋飛粉中神經(jīng)酰胺的含量達O. 15%-0. 20%，與大豆、小麥等其他來源相比，含量相對較高。神經(jīng)酰胺是生物體內(nèi)重要的功能物質(zhì)，具有抗腫瘤、抗肝病毒、降血脂、降血糖、減肥、抗衰老、美白等作用，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥保健品中，具有很高的實際應(yīng)用價值。所以從魔芋飛粉中提取神經(jīng)酰胺是一個很好的增加經(jīng)濟效益和社會效益的途徑。在現(xiàn)有技術(shù)中，有很多提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法，專利申請?zhí)?011103279658公布了“一種從魔芋飛粉中制備神經(jīng)酰胺的方法”，該方法用乙醇浸泡提取、石油醚萃取、用石油醚-乙酸乙酯通過硅膠柱梯度洗脫、然后用乙醇-水通過C18鍵合硅膠ODS柱梯度洗脫，最后得到神經(jīng)酰胺含量達95%以上的樣品，該方法雖然很好，但是由于最初提取方法問題，使得提取率不高；專利申請?zhí)?010105989816公布了 “魔芋神經(jīng)酰胺極其提取方法”，該方法采用乙醇多次浸提，然后用乙酸乙酯萃取濃縮，再用乙醇、乙酸乙酯和石油醚反復(fù)溶解、萃取、濃縮，最后得到的神經(jīng)酰胺產(chǎn)品含量太低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種綜合提取方法，提高對神經(jīng)酰胺的提取率，然后采用適當?shù)娜苊浇M合及其比例通過硅膠柱進行梯度洗脫提取高純度的神經(jīng)酰胺產(chǎn)品；以提高經(jīng)濟效益。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是一種從魔芋飛粉中提取神經(jīng)酰胺的方法，由選料、綜合提取、濃縮、萃取、梯度洗脫、干燥、再次梯度洗脫和干燥八大工序完成，具體方法如下。⑴選料收集魔芋飛粉，去掉雜質(zhì)。⑵綜合提取將魔芋飛粉用70%的乙醇溶液按照固液比為I :5-6的標準在70°C溫度下攪拌浸泡10-20min，再用600W功率的超聲波提取40min，然后再攪拌浸泡10_20min，接著將提取浸出液離心，取上清液；然后再將濾渣用95%的乙醇溶液按照固液比為I :4-5的標準在70°C溫度下浸泡，用600W功率的超聲波提取30min，然后再攪拌浸泡10_20min，接著將提取浸出液離心，取上清液，最后將兩次上清液合并。.M農(nóng)縮蒸餾回收乙醇，將殘留液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至黏稠狀。⑷萃取將濃縮液用3-5倍體積的石油醚在60°C溫度下攪拌萃取40-50min，然后靜置分層30min，收集石油醚相；然后再重復(fù)兩次；合并石油醚相，濃縮，獲得神經(jīng)酰胺浸膏。(5)梯度洗脫將硅膠濕法裝柱并用洗脫劑平衡后，將神經(jīng)酰胺浸膏上樣，采用石油醚-乙酸乙酯溶劑溶解并梯度洗脫，洗脫液的梯度變化秩序為石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19體積比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液。(6)干燥蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集后干燥得神經(jīng)酰胺粗品。(7)再次梯度洗脫將硅膠濕法裝柱并用洗脫劑平衡后，將神經(jīng)酰胺粗品用洗脫劑溶解后上樣，采用乙醇-水為溶劑溶解并梯度洗脫，洗脫劑的梯度變化秩序為乙醇水=19:1至1:1體積比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液。(8)干燥蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集后真空冷凍干燥得神經(jīng)酰胺粉粒；經(jīng)HPLC-ELSD檢測，粉粒中神經(jīng)酰胺的含量達95. 5%。本發(fā)明的有益效果是采用適當?shù)囊掖紳舛取⒐桃罕?、溫度、浸泡方法和時間、以及超聲波提取，可以提高神經(jīng)酰胺成分從魔芋飛粉中滲透出來的分量，提高提取率；再通過多次萃取和采用適當?shù)娜苊浇M合及其比例通過硅膠柱進行梯度洗脫，可以提高神經(jīng)酰胺的純度，本發(fā)明從魔芋飛粉中提取神經(jīng)酰胺的提取率達75%，純度達95. 5%。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明。實施例I。取魔芋飛粉1kg，用70%的乙醇溶液5kg在70°C溫度下攪拌浸泡lOmin，再用600W功率的超聲波提取40min，然后再攪拌浸泡lOmin，然后將提取浸出液離心，取上清液；然后再將濾渣用95%的乙醇溶液4kg在70°C溫度下浸泡，用600W功率的超聲波提取30min，然后再攪拌浸泡lOmin，將提取浸出液離心，取上清液，最后將兩次上清液合并；再蒸餾回收乙醇，將殘留液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮得到黏稠狀物質(zhì)50. 5g ;然后用100毫升石油醚在60°C溫度下攪拌萃取40min，然后靜置分層30min，收集石油醚相；然后再重復(fù)兩次；合并石油醚相，濃縮，獲得神經(jīng)酰胺浸膏23. 7g ;將硅膠濕法裝柱并用石油醚-乙酸乙酯洗脫劑平衡，將神經(jīng)酰胺浸膏用石油醚-乙酸乙酯溶解上樣，采用石油醚-乙酸乙酯溶梯度洗脫，梯度變化秩序為石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19體積比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集后干燥得神經(jīng)酰胺粗品7. 12g ;再次梯度洗脫將硅膠濕法裝柱并用乙醇-水洗脫劑平衡后，將神經(jīng)酰胺粗品用乙醇-水洗脫劑溶解后上樣，采用乙醇-水為洗脫劑梯度洗脫，洗脫劑的梯度變化秩序為乙醇水=19:1至1:1體積比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集后真空冷凍干燥得神經(jīng)酰胺粉粒I. 21g ;經(jīng)HPLC-ELSD檢測，粉粒中神經(jīng)酰胺的含量為95. 5%，原飛粉中神經(jīng)酰胺的含量為O. 152%，提取率為76. 02%。 實施例2。取魔芋飛粉100kg，用70%的乙醇溶液600kg在70°C溫度下攪拌浸泡15min，再用600W功率的超聲波提取40min，然后再攪拌浸泡15min，然后將提取浸出液離心，取上清液；然后再將濾渣用95%的乙醇溶液500kg在70°C溫度下浸泡，用600W功率的超聲波提取30min，然后再攪拌浸泡15min，將提取浸出液離心，取上清液，最后將兩次上清液合并；再蒸餾回收乙醇，將殘留液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮得到黏稠狀物質(zhì)4. 97kg ;然后用10升石油醚在60°C溫度下攪拌萃取45min，然后靜置分層30min，收集石油醚相；然后再重復(fù)兩次；合并石油醚相，濃縮，獲得神經(jīng)酰胺浸膏2. 25kg ;將硅膠濕法裝柱并用石油醚-乙酸乙酯洗脫劑平衡，將神經(jīng)酰胺浸膏用石油醚-乙酸乙酯溶解上樣，采用石油醚-乙酸乙酯溶梯度洗脫，梯度變化秩序為石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19體積比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集后干燥得神經(jīng)酰胺粗品657g ;再次梯度洗脫將硅膠濕法裝柱并用乙醇-水洗脫劑平衡后，將神經(jīng)酰胺粗品用乙醇-水洗脫劑溶解后上樣，采用乙醇-水為洗脫劑梯度洗脫，洗脫劑的梯度變化秩序為乙醇水=19:1至1:1體積比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集后真空冷凍干燥得神經(jīng)酰胺粉粒118g ;經(jīng)HPLC-ELSD檢測，粉粒中神經(jīng)酰胺的含量為95. 1%，原飛粉中神經(jīng)酰胺的含量為O. 152%，提取率為73. 82%。實施例3。取魔芋飛粉1000kg，用70%的乙醇溶液5500kg在70°C溫度下攪拌浸泡20min，再用600W功率的超聲波提取40min，然后再攪拌浸泡20min，然后將提取浸出液離心，取上清液；然后再將濾渣用95%的乙醇溶液4500kg在70°C溫度下浸泡，用600W功率的超聲波提取30min,然后再攪拌浸泡20min，將提取浸出液離心，取上清液，最后將兩次上清液合并；再蒸餾回收乙醇，將殘留液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮得到黏稠狀物質(zhì)48. 9kg ;然后用100升石油醚在60°C溫度下攪拌萃取50min，然后靜置分層30min，收集石油醚相；然后再重復(fù)兩次；合并石油醚相，濃縮，獲得神經(jīng)酰胺浸膏22. 2kg ;將硅膠濕法裝柱并用石油醚-乙酸乙酯洗脫劑平衡，將神經(jīng)酰胺浸膏用石油醚-乙酸乙酯溶解上樣，采用石油醚-乙酸乙酯溶梯度洗脫，梯度變化秩序為石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19體積比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集后干燥得神經(jīng)酰胺粗品6. 37 kg ;再次梯度洗脫將硅膠濕法裝柱并用乙醇-水洗脫劑平衡后，將神經(jīng)酰胺粗品用乙醇-水洗脫劑溶解后上樣，采用乙醇-水為洗脫劑梯度洗脫，洗脫劑的梯度變化秩序為乙醇水=19:1至1:1體積比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集后真空冷凍干燥得神經(jīng)酰胺粉粒1151g ；經(jīng)HPLC-ELSD檢測，粉粒中神經(jīng)酰胺的含量為94. 8%，原飛粉中神經(jīng)酰胺的含量為O. 152%，提取率為71. 79%。
權(quán)利要求
1.從魔芋飛粉中提取神經(jīng)酰胺的方法，由選料、綜合提取、濃縮、萃取、梯度洗脫、干燥、再次梯度洗脫和干燥八大工序完成，其特征在于具體方法如下 ⑴選料收集魔芋飛粉，去掉雜質(zhì)； ⑵綜合提取將魔芋飛粉用70%的乙醇溶液按照固液比為I :5-6的標準在70°C溫度下攪拌浸泡10-20min，再用600W功率的超聲波提取40min，然后再攪拌浸泡10_20min，接著將提取浸出液離心，取上清液；然后再將濾渣用95%的乙醇溶液按照固液比為I :4-5的標準在70°C溫度下浸泡，用600W功率的超聲波提取30min，然后再攪拌浸泡10_20min，接著將提取浸出液離心，取上清液，最后將兩次上清液合并； 濃縮蒸餾回收乙醇，將殘留液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至黏稠狀； ⑷萃取將濃縮液用3-5倍體積的石油醚在60°C溫度下攪拌萃取40-50min，然后靜置分層30min，收集石油醚相；然后再重復(fù)兩次；合并石油醚相，濃縮，獲得神經(jīng)酰胺浸膏； (5)梯度洗脫將硅膠濕法裝柱并用洗脫劑平衡后，將神經(jīng)酰胺浸膏上樣，采用石油醚-乙酸乙酯溶劑溶解并梯度洗脫，洗脫液的梯度變化秩序為石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19體積比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液； (6)干燥蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集后干燥得神經(jīng)酰胺粗品; ⑴再次梯度洗脫將硅膠濕法裝柱并用洗脫劑平衡后，將神經(jīng)酰胺粗品用洗脫劑溶解后上樣，采用乙醇-水為溶劑溶解并梯度洗脫，洗脫劑的梯度變化秩序為乙醇水=19:1至1:1體積比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液； ⑶干燥蒸餾回收溶劑，靜置殘留物析出白色絮狀物，離心收集后真空冷凍干燥得神經(jīng)酰胺粉粒。
全文摘要
從魔芋飛粉中提取神經(jīng)酰胺的方法，由選料、綜合提取、濃縮、萃取、梯度洗脫、干燥、再次梯度洗脫和干燥八大工序完成；其有益效果是采用適當?shù)囊掖紳舛?、固液比、溫度、浸泡方法和時間、以及超聲波提取，可以提高神經(jīng)酰胺成分從魔芋飛粉中滲透出來的分量，提高提取率；再通過多次萃取和采用適當?shù)娜苊浇M合及其比例通過硅膠柱進行梯度洗脫，可以提高神經(jīng)酰胺的純度，本發(fā)明從魔芋飛粉中提取神經(jīng)酰胺的提取率達75%，純度達95.5%。
文檔編號C07C235/08GK102675139SQ20121013320
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月3日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月3日
發(fā)明者周麟 申請人:重慶市彭水縣天嬌農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司