專利名稱：一種3α,7α-二羥基-5β-膽烷酸的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種3a,7a-二羥基-5卩-膽烷酸的制備方法，涉及一種制備鵝去氧膽酸方法。
背景技術(shù)：
鵝去氧膽酸(3a,7a-二羥基-5P-膽垸酸Chenodeoxycholic Acid,CDCA)作 為一種甾體類化合物，主要從動(dòng)物膽汁中提取，在臨床上用于治療各種膽疾及消 化道疾病具有良好的效果，目前也是世界上用量最大的治療膽結(jié)石藥物之一。
1971年Thistle等人研究發(fā)現(xiàn)口服鵝脫氧膽酸(CDCA)可以降低膽石病人膽 汁膽固醇的飽和度，鵝去氧膽酸是一親水性二羥基膽酸，最早從動(dòng)物內(nèi)臟和膽 汁中分離出來(lái)。作為一種溶解膽固醇性結(jié)石的藥物，因具有較強(qiáng)的抑肝作用而 廣泛用于多種肝病的治療。國(guó)內(nèi)學(xué)者意外發(fā)現(xiàn)鵝去氧膽酸具有治療脂肪肝的療 效，可降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、 r-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(r-GT), 降低血脂，明顯緩解脂肪肝癥狀，改善脂肪肝的影像學(xué)表現(xiàn)，且不良反應(yīng)輕微。
鵝去氧膽酸的作用機(jī)制可能與穩(wěn)定肝細(xì)胞膜、保護(hù)線粒體、抑制細(xì)胞凋亡、 調(diào)節(jié)免疫、利膽等因素有關(guān)，通過(guò)上述作用改善脂質(zhì)代謝、保護(hù)肝細(xì)胞、促進(jìn) 膽固醇轉(zhuǎn)化和排泄目的。所以鵝去氧膽酸也是一種治療脂肪肝較為理想的藥物。
此外，鵝去氧膽酸又是合成熊去氧膽酸和其他甾體化合物的原料，作為熊去 氧膽酸的差向異構(gòu)體，它的人工合成也受到越來(lái)越多的關(guān)注。
豬膽是為人們所熟知的豬內(nèi)臟，并大部分被廢棄，實(shí)際上豬膽汁中含有豐富 的豬去氧膽酸，因此以豬去氧膽酸作為原料來(lái)合成鵝去氧膽酸和熊去氧膽酸已經(jīng) 成為這類膽垸酸制備的主流方法，目前主要路線有兩條
路線一，利用l， 2-酮基移位反應(yīng)，使6位羥基轉(zhuǎn)化為7位羥基，豬去氧膽酸 經(jīng)甲酯化，6位羥基選擇性氧化得6-酮，然后在LDA作用下與二甲基硅垸反應(yīng)區(qū)域 選擇性地生成烯醇硅醚，立即與間氯過(guò)苯甲酸反應(yīng)或在含吡啶的二氯甲烷中臭氧 化得3a, 7or二羥基-6羰基-5(3-膽烷酸甲酯，再與苯磺酰肼反應(yīng)后立即用NaBH4 在酸性條件下還原得鵝去氧膽酸甲酯，最后脫脂化得到鵝去氧膽酸，總收率約為 16%。此法反應(yīng)步驟冗長(zhǎng)，收率較低，成本居高不下。
路線二，以豬去氧膽酸為原料，合成3-酮結(jié)構(gòu)單元化合物后經(jīng)6， 7位脫氫、環(huán)氧化、催化氫化實(shí)現(xiàn)重建5(3構(gòu)型的目的，構(gòu)成了AB環(huán)順式結(jié)構(gòu)。豬去氧膽 酸甲酯化后與對(duì)甲苯磺酰氯反應(yīng)生成3p-羥基膽垸酸甲酯，經(jīng)Oppenauer氧化后 用四氯苯醌進(jìn)行脫氫得3-酮膽垸酸甲酯，用間氯過(guò)苯甲酸對(duì)6， 7位雙鍵進(jìn)行環(huán) 氧化得6a,7ot-環(huán)氧-3-酮膽烷酸甲酯，最后脫脂化得到鵝去氧膽酸，總收率約為 28%。但此法采用了鉀-液氨堿金屬還原構(gòu)建7P-OH構(gòu)型，要求低溫反應(yīng)，條件 極為苛刻，操作不便。不利于大規(guī)模生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備3a,7a-二羥基-5(3-膽烷酸的方法。 為達(dá)上述目的，我們利用Shapiro反應(yīng)的1， 2-酮基移位來(lái)合成鵝去氧膽酸， Shapiro反應(yīng)可以十分溫和地把酮基轉(zhuǎn)變成烯烴類化合物，在進(jìn)行Shapiro反應(yīng) 時(shí)，用氫化鋰作為強(qiáng)堿，不加親電試劑，使酮基直接變成烯烴，對(duì)烯烴進(jìn)行環(huán) 氧化后開(kāi)環(huán)，得到鵝去氧膽酸。
<formula>formula see original document page 6</formula>A. 3cc,6a-二輕基-5(3-膽烷酸甲酯[3]的制備
先量取3a,6a-二羥基-5p-膽烷酸(豬去氧膽酸)[2]:無(wú)水甲醇質(zhì)量百分比 濃度為36%-38%的濃鹽酸=1: 5-10: 0.6-1. 2質(zhì)量比，將它們放在反應(yīng)器中，攪 拌溶解后，攪拌下加熱至8(TC進(jìn)行酯化反應(yīng)4-8小時(shí)，停止加熱，冷卻至室溫， 然后在升溫至9(TC蒸餾除去溶劑甲醇，殘余物中加入氯仿，氯仿的加入量為豬 去氧膽酸[2]的10-20倍質(zhì)量比，溶解后氯仿層依次用同體積的飽和碳酸氫鈉溶 液和飽和氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后，過(guò)濾除去干燥劑，濾液升溫至 9(TC蒸餾出去氯仿，得到白色固體，最后在白色固體中加入苯進(jìn)行重結(jié)晶，得到 化合物3a,6a-二羥基-5P-膽烷酸甲酯[3]，苯的加入量為固體重量的4倍。
B. 3a-羥基-6-酮-5(3-膽烷酸甲酯[4]的制備
先量取3a，6a-二羥基-5(3-膽垸酸甲酯[3]: 二氯甲垸=1: 7 — 15重量比，然 后將它們放在反應(yīng)器中，開(kāi)動(dòng)攪拌溶解后，分批加入氧化劑重鉻酸吡啶鹽(PDC)， PDC的加入量為3a,6a-二羥基-5p-膽垸酸甲酯[3]的0. 7_1倍質(zhì)量比，加畢后溶 液變成灰褐色，然后再繼續(xù)攪拌反應(yīng)6小時(shí)，過(guò)濾除去不溶物，濾液升溫至55 'C蒸餾除去二氯甲烷，殘余物經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/丙酮=5:1)，得 到白色固體，即化合物3a-羥基-6-酮-5p-膽烷酸甲酯[4]。
C. 3a-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5(H旦烷酸甲酯[5]的制備 先量取3a-羥基-6-酮-513-膽垸酸甲酯[4]:對(duì)甲基苯磺酰肼無(wú)水乙醇=1:
0.5-0.6: 40-50質(zhì)量比，然后將它們放在反應(yīng)器中，并通過(guò)導(dǎo)氣管通入氮?dú)馐?反應(yīng)混合物保護(hù)在氮?dú)夥諊?，然后開(kāi)動(dòng)攪拌并加熱至90'C，反應(yīng)20-28小時(shí)， 然后在此溫度下蒸餾除去乙醇，得到殘余物為桔紅色油狀物，經(jīng)柱層析分離(淋 洗液為石油醚/丙酮二4:l)，得到化合物3a-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5|3-膽烷酸 甲酯[5]。
D. 3cr乙酰基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5(3-膽垸酸甲酯[6]的制備
先量取3a-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5(3-膽垸酸甲酯[5]:吡啶=1:1質(zhì)量比， 然后將它們放在反應(yīng)器中，攪拌溶解后，攪拌下滴加醋酸酐，醋酸酑的加入量為 3cr羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽烷酸甲酯[5]的30-40倍質(zhì)量比，加入完畢后 繼續(xù)室溫?cái)嚢璺磻?yīng)20-30小時(shí)，然后將反應(yīng)混合物倒入同體積的水中，緩慢加入質(zhì)量百分比濃度為10%的鹽酸，直至pH為7，再加入乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯的 加入量為3a-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽烷酸甲酯[5]的20-25倍質(zhì)量比，分 液后有機(jī)層依次用同體積的飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌，再用無(wú)水硫酸鈉干燥， 過(guò)濾除去干燥劑后，濾液升溫至9CTC，蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)柱層析分離 (淋洗液為石油醚/丙酮=7:1)，得到化合物3a-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5卩_ 膽烷酸甲酯[6]。
E. 3a-乙?；?6-烯-5(3-膽垸酸甲酯[7]的制備
先量取氫化鋰甲苯=1: 7質(zhì)量比，然后將它們放在反應(yīng)器中，攪拌下慢 慢滴加3a-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽垸酸甲酯[6]的甲苯溶液(3a-乙酰 基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽烷酸甲酯[6]為氫化鋰的0. 4-0. 5倍質(zhì)量比，甲苯為 氫化鋰的10倍質(zhì)量比)，滴加完畢后，升溫至6(TC繼續(xù)攪拌反應(yīng)10-15小時(shí)， 然后停止反應(yīng)，反應(yīng)溶液為桔紅色。然后再用冰浴冷卻至5'C，并在冰浴條件下 慢慢滴加飽和氯化銨溶液，直至反應(yīng)混合物無(wú)氣泡生成，撤去冰浴，加入同甲苯 體積的質(zhì)量百分比濃度為5%的稀鹽酸溶液洗滌，分液后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干 燥，過(guò)濾除去干燥劑后濾液升溫至125'C蒸餾除去溶劑，得到的殘余物，經(jīng)柱層 析分離(淋洗液為石油醚/丙酮=20:1)，得到化合物3cr乙?；?6-烯-5p-膽垸酸 甲酯[7]。
F. 3a-乙?；?6a,7or環(huán)氧-5|3-膽垸酸甲酯[8]的制備
先量取3a-乙?；?6-烯-5p-膽烷酸甲酯[7]: 二氯甲垸=1: 40-60倍質(zhì)量比， 然后將它們放在反應(yīng)器中，攪拌溶解后用冰浴冷卻反應(yīng)泡合物至0-5'C，然后分 批加入間氯過(guò)氧苯甲酸，間氯過(guò)氧苯甲酸的加入量為3a-乙?；?6-烯-5p-膽烷 酸甲酯[7]的1.2-1.5倍質(zhì)量比，加畢后。繼續(xù)保持在0-5'C下攪拌反應(yīng)20-30 小時(shí)，然后加入同二氯甲烷體積的飽和碳酸氫鈉溶液，攪拌10分鐘后分液，有 機(jī)層用同體積的飽和食鹽水洗滌，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑后升溫 至55'C蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/丙酮=20:1)，得 到化合物3a-乙酰基-6a,7a-環(huán)氧-5p-膽烷酸甲酯[8]。
G. 3a,7a-二羥基-5p-膽垸酸(鵝去氧膽酸)[l]的制備
先量取3a-乙?；?6a,7a-環(huán)氧-5(3-膽垸酸甲酯[8]:干燥的四氫呋喃=1:60-80倍質(zhì)量比，然后將他們放在反應(yīng)器中，攪拌均勻后，分批加入氫化鋁鋰， 氫化鋁鋰的加入量為3a-乙?；?6a，7a-環(huán)氧-5p-膽垸酸甲酯[8]的1. 5-2倍質(zhì)量 比，加畢后升溫至7CTC繼續(xù)攪拌反應(yīng)20-30小時(shí)，然后冷卻至室溫，緩慢滴加 水至無(wú)氣泡放出，再加入乙酸乙酯，乙酸乙酯的加入量為四氫呋喃的2倍質(zhì)量比， 分液，有機(jī)層用同體積的飽和食鹽水洗滌后用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑 后，濾液升溫至9(TC蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/丙 酮=5:1)，得到化合物3a，7a-二羥基-5p-膽垸酸(鵝去氧膽酸)[l]。 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是
1，本發(fā)明采用Shapiro反應(yīng)用的各步原料均為市售，來(lái)源廣泛，供應(yīng)充足。 2，本發(fā)明反應(yīng)條件相對(duì)溫和且工藝簡(jiǎn)單，各步反應(yīng)均為較常規(guī)的操作，經(jīng) 過(guò)七步反應(yīng)得到產(chǎn)物，易于控制，無(wú)需復(fù)雜的設(shè)備。
3，與現(xiàn)有方法比較，本發(fā)明產(chǎn)率達(dá)到50%左右(文獻(xiàn)報(bào)道僅為28%左右)，比 現(xiàn)有技術(shù)提高了一倍，為鵝去氧膽酸的工業(yè)化化學(xué)方法生產(chǎn)創(chuàng)造了條件，并且在 降低污染的同時(shí)也有效的控制了成本,使得該方法的工業(yè)化大生產(chǎn)成為可能。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1
A. 3a，6a-二羥基-5P-膽烷酸甲酯[3]的制備
在裝置有機(jī)械攪拌裝置，溫度計(jì)和回流冷凝管的1L三頸瓶中加入3a,6a-二羥基-5p-膽烷酸(豬去氧膽酸)[2] 50g，加入無(wú)水甲醇400ml，開(kāi)動(dòng)機(jī)械攪拌， 加入質(zhì)百分比濃度為36%-38%的濃鹽酸40ml，攪拌溶解后，攪拌下加熱至80°C 進(jìn)行酯化反應(yīng)6小時(shí)，停止加熱，冷卻至室溫，然后在升溫至9(TC蒸餾除去溶 劑甲醇，殘余物中加入氯仿500ml，溶解后氯仿層依次用飽和碳酸氫鈉溶液500ml 和飽和氯化鈉溶液500ml洗滌，然后氯仿層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后，過(guò)濾出去干燥 劑，濾液升溫至9(TC蒸餾出去氯仿，得到白色固體，再用苯180ml重結(jié)晶白色 固體，得到產(chǎn)物為化合物3a,6a-二羥基-5p-膽烷酸甲酯[3]42. lg，收率81.2%。 熔點(diǎn)122-124°C。
B. 3a-羥基-6-酮-5(3-膽垸酸甲酯[4]的制備
在裝置有機(jī)械攪拌裝置，溫度計(jì)和回流冷凝管的lL三頸瓶中加入3a,6oi-二羥基-5p-膽烷酸甲酯[3] 50g和二氯甲烷350ml，開(kāi)動(dòng)攪拌溶解后，分批加入氧 化劑重鉻酸吡啶鹽(PDC) 41g，加畢后溶液變成灰褐色，然后再繼續(xù)攪拌反應(yīng)6 小時(shí)，過(guò)濾除去不溶物，濾液升溫至55'C蒸餾除去二氯甲垸，殘余物經(jīng)柱層析 分離(淋洗液為石油醚/丙酮=5:1)，得到白色固體24.0g，即3a-羥基-6-酮-5p-膽垸酸甲酯[4]，收率48. 2% 。熔點(diǎn)144-145 。C 。 'H-NMR(CDC1》S0.65 (3H，s,18-CH3),0.85(3H,s，19-CH3),0.92(3H,d，21-CH3)，2.36(lH,br,3-H),3.65(3H,s,-O CH3)。
C. 3a-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽烷酸甲酯[5]的制備 在帶有機(jī)械攪拌裝置的2L反應(yīng)瓶中加入3a-羥基-6-酮-5p-膽垸酸甲酯36g，對(duì)甲基苯磺酰肼18.4g和無(wú)水乙醇1500ml，并通過(guò)導(dǎo)氣管通入氮?dú)馐?反應(yīng)混合物保護(hù)在氮?dú)夥諊?，然后開(kāi)動(dòng)攪拌并加熱至9(TC，反應(yīng)24小時(shí)，然 后在此溫度下蒸餾除去乙醇，得到殘余物為桔紅色油狀物，經(jīng)柱層析分離(淋洗 液為石油醚/丙酮=4:1)，得到化合物3a-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽烷酸甲 酯[5] 25g，收率47. 7%。熔點(diǎn)178-180。C。 'H—麗R(CDC1》S0.60(3H, s, 18-CH3), 0.91(3H， d， 21-CH3), 2.43(3H, s, -C6H4CH3), 3.66(3H, s, -OCH3), 7.29-7.83(4H,d,芳 環(huán)氫)。
D. 3a-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽烷酸甲酯[6]的制備 在帶有機(jī)械攪拌裝置的2L反應(yīng)瓶中加入3a-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5(3-
膽烷酸甲酯[5]25g和吡啶25g，攪拌溶解后，攪拌下滴加醋酸酐900ml加入完畢 后繼續(xù)室溫?cái)嚢璺磻?yīng)24小時(shí)，然后將反應(yīng)混合物倒入水中，緩慢加入質(zhì)量百分 比濃度為10%的鹽酸，直至混合物pH為7，再加入乙酸乙酯500ml萃取，分液后 有機(jī)層依次用同體積的飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾 除去干燥劑后濾液升溫至9(TC，蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)柱層析分離(淋洗 液為石油醚/丙酮=7:1)，得到3a-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5P-膽烷酸甲酯[6] 22g，收率82. 2%。 NMR(CDC1》:50.65 (3H， s, 18-CH3), 0.92(3H, d, 21-CH3)，2,17 (3H,s，CH3CO),2.43(3H,s，-C6H4CH3),3.67(3H,s，-OCH3),5.16(lH,s,3-H),7.31-7.85 (4H,d,芳環(huán)氫)。
E. 3a-乙酰基-6-烯-5(3-膽烷酸甲酯[7]的制備在帶有機(jī)械攪拌裝置的1L反應(yīng)瓶中加入氫化鋰40g和甲苯300ml，開(kāi)動(dòng)攪 拌，在攪拌下慢慢滴加3a-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5(3-膽垸酸甲酯[6]的甲苯 溶液(3a-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5卩-膽烷酸甲酯[6]20g，甲苯400ml)，滴 加完畢后，升溫至6(TC繼續(xù)攪拌反應(yīng)12小時(shí)，然后停止反應(yīng)，反應(yīng)溶液為桔紅 色。然后再用冰浴冷卻至5'C，并在冰浴條件下慢慢滴加飽和氯化銨溶液，直至 反應(yīng)混合物無(wú)氣泡生成，撤去冰浴，加入質(zhì)量百分比濃度為5%的稀鹽酸溶液 700ml洗滌，分液后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑后濾液升溫至125 'C蒸餾除去溶劑，得到的殘余物經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/丙酮二20:l)， 得到3a-乙?；?6-烯-5卩-膽垸酸甲酯[7]6. 4g，收率45. 7%。 'H-NMR(CDC13) : S 0.68(3H, s, 18-CH3), 0.86(3H, s, 19-CH3), 0.93(3H, d, 21-CH3)， 3.67(3H,s,-OCH3), 5.00-5.48(2H,br,6,7-H)
F. 3a-乙酰基-6a，7a-環(huán)氧-5p-膽垸酸甲酯[8]的制備 在帶有機(jī)械攪拌裝置的3L反應(yīng)瓶中加入3a-乙酰基-6-烯-5p-膽垸酸甲酯25g和二氯甲烷1000ml，開(kāi)動(dòng)攪拌溶解后，用冰浴冷卻反應(yīng)混合物至0_5°C， 然后分批加入間氯過(guò)氧苯甲酸30g，加畢后。繼續(xù)保持在0-5'C下攪拌反應(yīng)24 小時(shí)，然后加入飽和碳酸氫鈉溶液1000ml，攪拌10分鐘后分液，有機(jī)層用同體 積的飽和食鹽水1000ml洗滌，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑后升溫至 55'C蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/丙酮=20:1)，得到 3a-乙?；?6a,7or環(huán)氧-5P-膽垸酸甲酯[8]23. 5g，收率90. 7%。
G. 3a,7a-二羥基-5P-膽垸酸(鵝去氧膽酸)[l]的制備 在帶有機(jī)械攪拌裝置的2L反應(yīng)瓶中加入3or乙酰基-6a,7a-環(huán)氧_5|3-膽烷酸
甲酯[8]20g和干燥的四氫呋喃1500ml，攪拌均勻后，分批加入氫化鋁鋰30g， 加畢后升溫至7(TC繼續(xù)攪拌反應(yīng)30小時(shí)，然后冷卻至室溫，緩慢滴加水至無(wú)氣 泡放出，然后轉(zhuǎn)移至大燒杯中再加入乙酸乙酯3000ml，分液，有機(jī)層用飽和食 鹽水約2500ml洗滌后用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑后，濾液升溫至9(TC 蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/丙酮=5:1)，得到3a,7a-二羥基-5p-膽垸酸(鵝去氧膽酸)[1]14g，收率79.6%。產(chǎn)物與標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)驗(yàn)證 結(jié)構(gòu)正確。[a]D2°+12. 0° ， MS: 392(4.5, [M]+)， 393(1.3, [M+H]+)， V匪3422, 2937,1710, 1376cm o
實(shí)施例2
其他步驟與實(shí)施例1相同，只是A步驟的3a,6a-二羥基-5p-膽烷酸甲酯[3] 的制備方法如下
在裝置有機(jī)械攪拌裝置，溫度計(jì)和回流冷凝管的1L三頸瓶中加入3a,6a-二 羥基-5p-膽烷酸(豬去氧膽酸)[2] 50g，加入無(wú)水甲醇625ml，開(kāi)動(dòng)機(jī)械攪拌， 加入含量為36%-38%的濃鹽酸40ml，攪拌溶解后，攪拌下加熱至80。C進(jìn)行酯化 反應(yīng)7小時(shí)，停止加熱，冷卻至室溫，然后在升溫至9CTC蒸餾除去溶劑甲醇， 殘余物中加入氯仿500ml，溶解后氯仿層依次用飽和碳酸氫鈉溶液500ml和飽和 氯化鈉溶液500ml洗滌，然后氯仿層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后，過(guò)濾出去干燥劑，濾 液升溫至9(TC蒸餾出去氯仿，得到白色固體，再用苯180ml重結(jié)晶白色固體， 得到產(chǎn)物為化合物3a,6a-二羥基-5卩-膽烷酸甲酯[3]42. 7g，收率82. 4%。
實(shí)施例3
其他步驟與實(shí)施例1相同，只是A步驟的3a,6a-二羥基-5p-膽垸酸甲酯[3] 的制備方法如下
在裝置有機(jī)械攪拌裝置，溫度計(jì)和回流冷凝管的1L三頸瓶中加入3a,6(x-二羥基-5|3-膽烷酸(豬去氧膽酸)[2] 50g，加入無(wú)水甲醇500ml，開(kāi)動(dòng)機(jī)械攪拌， 加入含量為36%-38%的濃鹽酸60ml，攪拌溶解后，攪拌下加熱至80'C進(jìn)行酯化 反應(yīng)8小時(shí)，停止加熱，冷卻至室溫，然后在升溫至9CTC蒸餾除去溶劑甲醇， 殘余物中加入氯仿500ml，溶解后氯仿層依次用飽和碳酸氫鈉溶液500ml和飽和 氯化鈉溶液500ml洗滌，然后氯仿層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后，過(guò)濾出去干燥劑，濾 液升溫至90'C蒸餾出去氯仿，得到白色固體，再用苯180ml重結(jié)晶白色固體， 得到產(chǎn)物為化合物3a，6a-二羥基-5l3-膽烷酸甲酯[3]42. 9g，收率82. 8%。
實(shí)施例4
其他步驟與實(shí)施例1相同，只是B步驟的3a-羥基-6-酮-5P-膽垸酸甲酯[4] 的制備方法如下
在裝置有機(jī)械攪拌裝置，溫度計(jì)和回流冷凝管的1L三頸瓶中加入3a,6a-二 羥基-5p-膽烷酸甲酯[3] 50g和二氯甲垸380ml，開(kāi)動(dòng)攪拌溶解后，分批加入氧化劑重鉻酸吡啶鹽(PDC) 35g，加畢后溶液變成灰褐色，然后再繼續(xù)攪拌反應(yīng)7 小時(shí)，過(guò)濾除去不溶物，濾液升溫至55'C蒸餾除去二氯甲烷，殘余物經(jīng)柱層析 分離(淋洗液為石油醚/丙酮=5:1)，得到白色固體22.4g，即3a-羥基-6-酮-5(3-膽垸酸甲酯[4]，收率45.0%。 實(shí)施例5
其他步驟與實(shí)施例l相同，只是B步驟的3a-羥基-6-酮-5p-膽垸酸甲酯[4] 的制備方法如下
在裝置有機(jī)械攪拌裝置，溫度計(jì)和回流冷凝管的1L三頸瓶中加入3a,6a-二 羥基-5P-膽垸酸甲酯[3] 50g和二氯甲烷400ml，開(kāi)動(dòng)攪拌溶解后，分批加入氧 化劑重鉻酸吡啶鹽(PDC) 50g，加畢后溶液變成灰褐色，然后再繼續(xù)攪拌反應(yīng)8 小時(shí)，過(guò)濾除去不溶物，濾液升溫至55'C蒸餾除去二氯甲烷，殘余物經(jīng)柱層析 分離(淋洗液為石油醚/丙酮=5:1)，得到白色固體24.5g，即3a-羥基-6-酮-5p-膽烷酸甲酯[4]，收率49.2%。
實(shí)施例6
其他步驟與實(shí)施例1相同，只是C步驟的3cr羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽烷酸甲酯[5]的制備方法如下
在帶有機(jī)械攪拌裝置的2L反應(yīng)瓶中加入3a-羥基-6-酮-5p-膽烷酸甲酯 [4]36g，對(duì)甲基苯磺酰肼21.6g和無(wú)水乙醇2000ml，并通過(guò)導(dǎo)氣管通入氮?dú)馐?反應(yīng)混合物保護(hù)在氮?dú)夥諊?，然后開(kāi)動(dòng)攪拌并加熱至9(TC，反應(yīng)20小時(shí)，然 后在此溫度下蒸餾除去乙醇，得到殘余物為桔紅色油狀物，經(jīng)柱層析分離(淋洗 液為石油醚/丙酮=4:1)，得到3cr羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽烷酸甲酯[5] 25g，收率47. 7%。
實(shí)施例7
其他步驟與實(shí)施例1相同，只是D步驟的3a-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽垸酸甲酯[6]的制備方法如下
在帶有機(jī)械攪拌裝置的2L反應(yīng)瓶中加入3a-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5|3-膽垸酸甲酯[5]25g和吡卩定25g， 攪拌溶解后，攪拌下滴加醋酸酐750ml加入完畢 后繼續(xù)室溫?cái)嚢璺磻?yīng)30小時(shí)，然后將反應(yīng)混合物倒入水中，緩慢加入質(zhì)量百分比濃度為10%的鹽酸，直至混合物pH為7，再加入乙酸乙酯450ml萃取，分液后 有機(jī)層依次用同體積的飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾 除去干燥劑后，濾液升溫至9(TC，蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)柱層析分離(淋 洗液為石油醚/丙酮=7:1)，得到3a-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5p-膽烷酸甲酯 [6] 21.8g,收率81.5%。 實(shí)施例8
其他步驟與實(shí)施例1相同，只是E步驟的3cr乙?；?6-烯-5(3-膽烷酸甲酯 [7]的制備方法如下
在帶有機(jī)械攪拌裝置的1L反應(yīng)瓶中加入氫化鋰40g和甲苯300ml，開(kāi)動(dòng)攪 拌，在攪拌下慢慢滴加3cr乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5P-膽烷酸甲酯[6]的甲苯 溶液Ga-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5l3-膽烷酸甲酯[6]16g，甲苯400ml)，滴 加完畢后，升溫至60。C繼續(xù)攪拌反應(yīng)12小時(shí)，然后停止反應(yīng)，反應(yīng)溶液為桔紅 色。然后再用冰浴冷卻至5'C，并在冰浴條件下慢慢滴加飽和氯化銨溶液，直至 反應(yīng)混合物無(wú)氣泡生成，撤去冰浴，加入質(zhì)量百分比濃度為5%的稀鹽酸溶液 700ml洗滌，分液后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑后濾液升溫至125 。C蒸餾除去溶劑，得到的殘余物，經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/丙酮=20:1)， 得到3a-乙?；?6-烯-5卩-膽垸酸甲酯[7]6. 8g，收率48. 6%。
實(shí)施例9
其他步驟與實(shí)施例1相同，只是F步驟的3a-乙?；?6a,7a-環(huán)氧-5p-膽烷酸 甲酯[8]的制備方法如下
在帶有機(jī)械攪拌裝置的3L反應(yīng)瓶中加入3cr乙酰基-6-烯-5p-膽烷酸甲酯 [7]25g和二氯甲烷800ml，開(kāi)動(dòng)攪拌溶解后，用冰浴冷卻反應(yīng)混合物至0-5°C, 然后分批加入間氯過(guò)氧苯甲酸34.5g，加畢后。繼續(xù)保持在0-5'C下攪拌反應(yīng)22 小時(shí)，然后加入飽和碳酸氫鈉溶液800ml，攪拌IO分鐘后分液，有機(jī)層用同體 積的飽和食鹽水1000ml洗滌，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑后升溫至 55'C蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/丙酮=20:1)，得到 3cr乙酰基-6a,7or環(huán)氧-5p-膽垸酸甲酯[8]22. 8g，收率88. 0%。
實(shí)施例10其他步驟與實(shí)施例1相同，只是F步驟的3a-乙?；?6a,7a-環(huán)氧-5P-膽垸酸 甲酯[8]的制備方法如下
在帶有機(jī)械攪拌裝置的3L反應(yīng)瓶中加入3a-乙?；?6-烯-5(3-膽垸酸甲酯 [7]25g和二氯甲烷1100ml，開(kāi)動(dòng)攪拌溶解后，用冰浴冷卻反應(yīng)混合物至0-5'C， 然后分批加入間氯過(guò)氧苯甲酸37.5g，加畢后。繼續(xù)保持在0-5。C下攪拌反應(yīng)30 小時(shí)，然后加入飽和碳酸氫鈉溶液1100ml，攪拌10分鐘后分液，有機(jī)層用同體 積的飽和食鹽水1000ml洗滌，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑后升溫至 55匸蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/丙酮=20:1)，得到 3a-乙?；?6a,7a-環(huán)氧-5p-膽烷酸甲酯[8]23.9g，收率92. 2%。
實(shí)施例11
其他步驟與實(shí)施例1相同，只是G步驟的3a,7a-二羥基-5p-膽垸酸(鵝去氧 膽酸)[l]的制備方法如下
在帶有機(jī)械攪拌裝置的2L反應(yīng)瓶中加入3a-乙酰基-6a,7a-環(huán)氧-5(3-膽垸酸 甲酯[8]20g和干燥的四氫呋喃1600ml，攪拌均勻后，分批加入氫化鋁鋰35g， 加畢后升溫至7(TC繼續(xù)攪拌反應(yīng)24小時(shí)，然后冷卻至室溫，緩慢滴加水至無(wú)氣 泡放出，然后轉(zhuǎn)移至大燒杯中再加入乙酸乙酯3000ml，分液，有機(jī)層用飽和食 鹽水約2500ml洗滌后用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑后，濾液升溫至9(TC 蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/丙酮=5:1),得到化合物 3a,7ot-二羥基-5P-膽垸酸(鵝去氧膽酸)[1]14.2g，收率80. 7%。
實(shí)施例12
其他步驟與實(shí)施例1相同，只是G步驟的3a，7a-二羥基-5(3-膽烷酸(鵝去氧 膽酸)[l]的制備方法如下在帶有機(jī)械攪拌裝置的2L反應(yīng)瓶中加入3a-乙?；?-6a,7a-環(huán)氧-5(3-膽烷酸甲酯[8]20g和干燥的四氫呋喃1800ml，攪拌均勻后，分 批加入氫化鋁鋰40g，加畢后升溫至7(TC繼續(xù)攪拌反應(yīng)20小時(shí)，然后冷卻至室 溫，緩慢滴加水至無(wú)氣泡放出，然后轉(zhuǎn)移至大燒杯中再加入乙酸乙酯3000ml， 分液，有機(jī)層用飽和食鹽水約2500ml洗滌后用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥 劑后，濾液升溫至90'C蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離(淋洗液為石油醚/ 丙酮=5:1)，得到3a,7a-二羥基-5p-膽烷酸(鵝去氧膽酸)[1] 14. 3g，收率81. 3%。
權(quán)利要求
1. 一種3α，7α-二羥基-5β-膽烷酸的制備方法，其特征在于以[1]表示的3α，7α-二羥基-5β-膽烷酸依次按照如下步驟獲得A. 制備3α，6α-二羥基-5β-膽烷酸甲酯[3]先量取3α，6α-二羥基-5β-膽烷酸[2]無(wú)水甲醇質(zhì)量百分濃度為36％-38％的濃鹽酸＝15-100.6-1.2質(zhì)量比，然后將它們放在反應(yīng)器中攪拌溶解，在攪拌下加熱至80℃進(jìn)行酯化反應(yīng)4-8小時(shí)，停止加熱，冷卻至室溫，然后再升溫至90℃蒸餾除去溶劑甲醇后加入氯仿溶解，氯仿的加入量為3α，6α-二羥基-5β-膽烷酸[2]的10-20倍質(zhì)量比，再依次用同體積的飽和碳酸氫鈉溶液和飽和氯化鈉溶液洗滌，再經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后，過(guò)濾除去干燥劑，濾液升溫至90℃蒸餾除去氯仿，得到白色固體，最后在白色固體中加入苯進(jìn)行重結(jié)晶，得到3α，6α-二羥基-5β-膽烷酸甲酯[3]，苯的加入量為白色固體重量的4倍；B. 3α-羥基-6-酮-5β-膽烷酸甲酯[4]的制備先量取A步得到的3α，6α-二羥基-5β-膽烷酸甲酯[3]二氯甲烷＝17—15重量比，然后將它們攪拌溶解后，加入氧化劑重鉻酸吡啶鹽，重鉻酸吡啶鹽的加入量為3α，6α-二羥基-5β-膽烷酸甲酯[3]的0.7-1倍質(zhì)量比，然后再繼續(xù)攪拌反應(yīng)6小時(shí)，過(guò)濾除去不溶物，濾液升溫至55℃蒸餾除去二氯甲烷，殘余物經(jīng)石油醚/丙酮＝5∶1柱層析分離，得到白色固體，即為3α-羥基-6-酮-5β-膽烷酸甲酯[4]。C. 3α-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5β-膽烷酸甲酯[5]的制備先量取B步得到的3α-羥基-6-酮-5β-膽烷酸甲酯[4]對(duì)甲基苯磺酰肼無(wú)水乙醇＝10.5-0.640-50質(zhì)量比，然后將它們放在反應(yīng)器中，并通過(guò)導(dǎo)氣管通入氮?dú)馐狗磻?yīng)混合物保護(hù)在氮?dú)夥諊校缓髷嚢璨⒓訜嶂?0℃，反應(yīng)20-28小時(shí)，再在此溫度下蒸餾除去乙醇，得到殘余物為桔紅色油狀物，經(jīng)石油醚/丙酮＝4∶1柱層析分離，得到3α-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5β-膽烷酸甲酯[5]；D. 3α-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5β-膽烷酸甲酯[6]的制備先量取C步得到的3α-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5β-膽烷酸甲酯[5]吡啶＝11質(zhì)量比，然后攪拌溶解后，攪拌下滴加醋酸酐，醋酸酐的加入量為3α-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5β-膽烷酸甲酯[5]的30-40倍質(zhì)量比，加入完畢后繼續(xù)室溫?cái)嚢璺磻?yīng)20-30小時(shí)，然后將反應(yīng)混合物倒入同體積的水中，緩慢加入質(zhì)量百分比濃度為10％的鹽酸，直至pH為7，再加入乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯的加入量為3α-羥基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5β-膽烷酸甲酯[5]的20-25倍質(zhì)量比，分液后有機(jī)層依次用同體積的飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去無(wú)水硫酸鈉后，濾液升溫至90℃，蒸餾除去溶劑，殘余物經(jīng)過(guò)石油醚/丙酮＝7:1柱層析分離，得到3α-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5β-膽烷酸甲酯[6]；E. 3α-乙?；?6-烯-5β-膽烷酸甲酯[7]的制備先量取氫化鋰甲苯＝17質(zhì)量比，然后將它們放在一起攪拌下滴加溶于甲苯的3α-乙?；?6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5β-膽烷酸甲酯[6]，3α-乙酰基-6-對(duì)甲基苯磺酰腙-5β-膽烷酸甲酯[6]的量為氫化鋰的0.4-0.5倍質(zhì)量比，甲苯的量為氫化鋰的10倍質(zhì)量比，滴加完畢后，升溫至60℃繼續(xù)攪拌反應(yīng)10-15小時(shí)，然后停止反應(yīng)，反應(yīng)溶液為桔紅色；然后再用冰浴冷卻至5℃，并在冰浴條件下慢慢滴加飽和氯化銨溶液，直至反應(yīng)混合物無(wú)氣泡生成，撤去冰浴，加入與甲苯總量體積相同的質(zhì)量百分比濃度為5％的稀鹽酸溶液洗滌，分液后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑無(wú)水硫酸鈉后，濾液升溫至125℃蒸餾除去溶劑甲苯，得到的殘余物，經(jīng)石油醚/丙酮＝201柱層析分離，得到3α-乙酰基-6-烯-5β-膽烷酸甲酯[7]；F. 3α-乙?；?6α，7α-環(huán)氧-5β-膽烷酸甲酯[8]的制備先量取E步得到的3α-乙?；?6-烯-5β-膽烷酸甲酯[7]二氯甲烷＝140-60倍質(zhì)量比，然后將它們攪拌溶解后用冰浴冷卻至0-5℃，然后分批加入間氯過(guò)氧苯甲酸，間氯過(guò)氧苯甲酸的加入量為3α-乙?；?6-烯-5β-膽烷酸甲酯[7]的1.2-1.5倍質(zhì)量比，加畢后繼續(xù)保持在0-5℃下攪拌反應(yīng)20-30小時(shí)，然后加入同二氯甲烷體積相同的飽和碳酸氫鈉溶液，攪拌10分鐘后分液，有機(jī)層用同體積的飽和食鹽水洗滌，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑無(wú)水硫酸鈉后升溫至55℃蒸餾除去溶劑二氯甲烷，殘余物經(jīng)石油醚/丙酮＝20:1柱層析分離，得到3α-乙?；?6α，7α-環(huán)氧-5β-膽烷酸甲酯[8]；G. 3α，7α-二羥基-5β-膽烷酸(鵝去氧膽酸)[1]的制備先量取3α-乙?；?6α，7α-環(huán)氧-5β-膽烷酸甲酯[8]干燥的四氫呋喃＝160-80倍質(zhì)量比，然后將他們攪拌均勻后，分批加入氫化鋁鋰，氫化鋁鋰的加入量為3α-乙?；?6α，7α-環(huán)氧-5β-膽烷酸甲酯[8]的1.5-2倍質(zhì)量比，加畢后升溫至70℃繼續(xù)攪拌反應(yīng)20-30小時(shí)，然后冷卻至室溫，緩慢滴加水至無(wú)氣泡放出，再加入乙酸乙酯，乙酸乙酯的加入量為四氫呋喃的2倍質(zhì)量比，分液，有機(jī)層用與四氫呋喃體積相同的飽和食鹽水洗滌后用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑無(wú)水硫酸鈉后，濾液升溫至90℃蒸餾除去溶劑四氫呋喃，殘余物經(jīng)石油醚/丙酮＝51柱層析分離，得到3α，7α-二羥基-5β-膽烷酸(鵝去氧膽酸)[1]。
全文摘要
一種3α，7α-二羥基-5β-膽烷酸的制備方法，涉及一種鵝去氧膽酸的制備方法。該方法以3α，6α-二羥基-5β-膽烷酸(豬去氧膽酸)作為起始原料，利用改進(jìn)的Shapiro反應(yīng)使得1，2-酮基移位，在Shapiro反應(yīng)中使用氫化鋰作為強(qiáng)堿，不加親電試劑，使酮基直接變成烯烴，再對(duì)烯烴進(jìn)行環(huán)氧化后開(kāi)環(huán)，得到鵝去氧膽酸，本發(fā)明所用原料均為市售，且來(lái)源廣泛、充足，價(jià)格便宜、工藝簡(jiǎn)單，各步反應(yīng)均為常規(guī)操作，相對(duì)現(xiàn)有路線收率提高近一倍，為鵝去氧膽酸化學(xué)合成的規(guī)?；a(chǎn)開(kāi)創(chuàng)了有價(jià)值的途徑。
文檔編號(hào)C07J9/00GK101434632SQ20081020466
公開(kāi)日2009年5月20日 申請(qǐng)日期2008年12月16日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月16日
發(fā)明者杰 宗, 輝 段, 蔣忠良, 靳向樂(lè) 申請(qǐng)人:同濟(jì)大學(xué)