一種超潤滑血清白蛋白淚點塞及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種超潤滑血清白蛋白淚點塞。本發(fā)明所述淚點塞具有主體(2)、第一節(jié)段(1)第二節(jié)段(3)和超潤滑涂層(4)。血清白蛋白淚點塞表面在親水性聚合物溶液浸泡后通過化學(xué)反應(yīng)形成親水性的高分子涂層，當與水接觸時，水溶性高分子的親水基團與水結(jié)合迅速溶漲，具有優(yōu)良的潤滑性能，可減少了淚點塞植入時對軟組織的損傷，減輕疼痛，防止了并發(fā)癥的發(fā)生，因而更適合于臨床應(yīng)用。
【專利說明】
一種超潤滑血清白蛋白淚點塞及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)療器械領(lǐng)域，具體涉及一種超潤滑血清白蛋白淚點塞及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]淚液膜具有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，用于保護眼睛的表面。淚液膜包含三個基本層:外側(cè)的脂質(zhì)層、內(nèi)側(cè)的粘蛋白層，以及脂質(zhì)層和粘蛋白層之間的含水層。每一層都有特定的功能。月旨質(zhì)層防止淚液從眼睛表面蒸發(fā)。含水層為角膜供氧，并且包含對健康眼睛很重要的其他化學(xué)成分。粘蛋白層維持脂質(zhì)層和含水層之間的交互作用，并防止淚液在角膜上成珠。
[0003]“干眼”是經(jīng)受由于正常淚液膜紊亂所導(dǎo)致的角膜潤濕不足的病癥。該病癥包含多種多樣的體征和癥狀，從有異物感的輕的、斷續(xù)的燒灼和/或刮擦，至伴有角膜和結(jié)膜疾病(干燥性角膜炎(KCS))的含水層分泌的嚴重缺乏。
[0004]干眼可以有多種具體起因和促成因素，包括干燥環(huán)境、周圍空氣傳播的污染物、自身免疫病癥等，很多原因都與兩個基本起因相關(guān)。第一，淚腺的淚管可能會阻塞或可能機能障礙，以至于不能有足夠量的淚液到達眼睛。第二、盡管淚腺和淚管能遞送足夠量的淚液至眼睛，但是淚液會從眼睛過快流出，形成干眼狀況。最初，淚點是通過封合或者通過電或激光燒灼來封閉的。盡管這些方法可以提供可接受的結(jié)果，但是他們是不可逆的，除非接受整形修復(fù)手術(shù)。由于有時難以確定干眼是由過多的流出或是由過少的淚液產(chǎn)生引起的，這種方法可能會給患者帶來不必要的創(chuàng)傷，如淚溢。為此，已經(jīng)開發(fā)了暫時性或永久性封閉淚點的裝置。淚點栓塞后，部分封閉淚液排出管道，增加了眼表面其潤滑作用的自然淚液。這種治療能夠長期有效的緩解干眼癥狀。對許多人而言淚道栓塞術(shù)可以有效減少，甚至免除人工淚液的使用。美國MEDENNIUM公司SmartPlug淚點塞，由疏水性丙稀酸聚合物材料制造。Al con公司的可吸收膠原淚點塞(Tears Naturale? Collagen Punctal Plug)和Lacrimedics公司的不可吸收的娃膠淚點塞(Blue OPAQUE Herrick Lacrimal Plug)等。
[0005]人血清白蛋白(Human Serum Albumin或HSA)是血楽中含量最多的蛋白質(zhì)，占血楽總蛋白的40%-60%。人白蛋白的分子結(jié)構(gòu)已于1975年闡明[Meloun B,Moravek,L.,KostkaV.1975.Complete amino acid sequence of human serum albumin.FEBS Letters.58:134-137.]，為含585個氨基酸殘基的單鏈多肽，分子中含17個二硫鍵。人血清白蛋白是構(gòu)成血漿的主要成分，其生理功能主要是維持血漿膠體滲透壓，還具有載體的功能(孫世光，余明蓮，王建民等，人清血白蛋白的臨床應(yīng)用誤區(qū)及其對策，解放軍藥學(xué)學(xué)報，2009，25(4):366-368)。人血清白蛋白作為藥物載體而制成納米顆粒而被國內(nèi)外廣泛研究(于耀宇，李建，李立宏，曲友直，于嘉，鄧建平，高國棟，張文彬，焦德讓，磁性白蛋白納米微粒的制備及其物理性能分析，中國臨床神經(jīng)外科雜志，2011，16:609-611;張良珂，侯世祥，宋相容，盧懿，一種白蛋白納米粒的制備與評價，中國藥學(xué)雜志，2007，42: 365-367;Elmer J，CabralesP,Wang Q,Zhang N , Palmer AF,Synthesi s and b1physical properties ofpolymerized human serum albumin,B1technol Prog,2011,27:290-296；Jain S,MathurRjDas MjSwarnakar NKjMishra AK，Synthesis，pharmacoscintigraphic evaluat1n andantitumor efficacy of methotrexate-loaded,folate-conjugated,stealth albuminnanoparticles，Nanomedi cine (London)，2011，6:1733-1754)。隨著對白蛋白研究逐漸深入，其應(yīng)用范圍不斷拓展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供一種超潤滑的血清白蛋白淚點塞，可以避免在淚點塞植入過程中對軟組織的損傷，以拓展血清白蛋白在醫(yī)療器械領(lǐng)域的應(yīng)用范圍。
[0007]本發(fā)明提供了一種血清白蛋白生物材料的制備方法，包括如下步驟:
[0008](I)、配制溶解血清白蛋白的溶液體系:每體積溶液中含有75%_94.95%的三氟乙醇(ν/ν)，5 % -20 % 的0.01M-2.0M的無機堿(ν/ν)，0.05 % -5 % 的β-巰基乙醇(ν/ν);
[0009](2)、將血清白蛋白溶于上述溶液中，最終溶液中含有5 % -30 % (w/v)的血清白蛋白；
[0010](3)、將血清白蛋白溶液靜置，待反應(yīng)完全后倒掉上層液體，將下層具有較大粘度的血清白蛋白溶液加入到模具中，待干燥凝固后，打開模具，將凝固材料浸泡到含有濃度為
0.5 %?45 % (w/v)的親電官能團的親水性聚合物溶液中，清洗后干燥，制得血清白蛋白生物材料。
[0011]為避免任何歧義，對于各種溶液成分使用的術(shù)語w/v意指重量體積比，是指單位體積溶液內(nèi)含有按重量計的某一百分率組合，例如5%的人血清白蛋白(w/v)是指在100ml體積溶液中含有1g的所述組分。而術(shù)語ν/ν意指體積比，是指單位體積溶液內(nèi)含有按體積計的某一百分率組合，例如75%的三氟乙醇(ν/ν)是指在10ml體積溶液中含有60ml的所述三氟乙醇。其他相應(yīng)的數(shù)值范圍以此類推。
[0012]上述方法中，所述的血清白蛋白的來源可以是人、牛、馬、羊、老鼠等動物的血清白蛋白，優(yōu)選為人血清白蛋白。血清白蛋白可以通過基因工程重組表達生產(chǎn)，或者可從人或者動物血楽中提取。
[0013]上述方法步驟(I)中，溶解血清白蛋白的溶液體系中每體積溶液中優(yōu)選含有80% -90 %的三氟乙醇(ν/ν )，8 % -15 %的0.01Μ-2.0M的無機堿(ν/ν)，I % -5 %的β-巰基乙醇(ν/
V) O
[0014]上述方法步驟(I)中，所述溶液中的無機堿選自氨水、氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸鈉等或其混合物，優(yōu)選氨水;優(yōu)選無機堿的摩爾濃度為0.01-1Μ，更優(yōu)選為 0.1-0.2Μ。
[0015]上述方法步驟⑵中，優(yōu)選最終溶液中含有1 % -20 % (w/v)的血清白蛋白。
[0016]上述方法步驟(3)中，優(yōu)選將血清白蛋白溶液在10-40°C靜置1-60小時，優(yōu)選在20-30°C靜置12-48小時，更優(yōu)選在室溫靜置20-40小時。
[0017]上述方法步驟(3)中，優(yōu)選將血清白蛋白溶液加入到模具后在10-400C干燥1-60小時，優(yōu)選在20_30°C干燥12-48小時，更優(yōu)選在室溫干燥20-40小時。
[0018]上述方法步驟(3)中，所述的含有親電官能團的親水性聚合物可以選自琥珀酰亞胺丙酸酯基聚乙二醇、琥珀酰亞胺琥珀酸酯基聚乙二醇、琥珀酰亞胺戊二酸酯基聚乙二醇、琥珀酰亞胺癸二酸酯基聚乙二醇、季戊四醇聚乙二醇醚四琥珀酰亞胺戊二酸、季戊四醇聚乙二醇醚四琥珀酰亞胺丁二酸、季戊四醇聚乙二醇醚四琥珀酰亞胺癸二酸中的一種或多種，優(yōu)選為琥珀酰亞胺琥珀酸酯基聚乙二醇。親水性聚合物的分子量為1000?1000000，優(yōu)選為 50000-200000。
[0019]親水性聚合物溶液的作用是在凝固的血清白蛋白生物材料表面通過化學(xué)反應(yīng)形成親水性的高分子涂層，當與水接觸時，水溶性高分子的親水基團與水結(jié)合迅速溶漲，使得血清白蛋白生物材料具有優(yōu)良的潤滑性能。
[0020]上述方法步驟(3)中，血清白蛋白凝固材料在親水性聚合物溶液中浸泡后，優(yōu)選將其清洗至pH為6.0?8.0。清洗液選自水或能維持溶液pH為6.0-8.0、濃度為1-lOOmmol/L的任一種緩沖溶劑，任選自磷酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、TRI S、甘氨?；?甘氨酸、N-二 (羥乙基)甘氨酸、磷酸二氫鈉緩沖液、磷酸氫二鈉緩沖液、醋酸鈉緩沖液、碳酸鈉緩沖液、磷酸鈉緩沖液、賴氨酸緩沖液、精氨酸緩沖液或其混合物；緩沖劑的PH值范圍優(yōu)選為6.5-7.5;緩沖劑的濃度為優(yōu)選為5-50mmol/L，更優(yōu)為10-30mmol/L。優(yōu)選的清洗溶液為去離子水或磷酸緩沖液。清洗后在25?80°C干燥后，制得血清白蛋白生物材料。更優(yōu)選清洗后在30?50 0C干燥后，制得血清白蛋白生物材料。
[0021]本發(fā)明另一目的是利用上述方法制備得到血清白蛋白生物材料。優(yōu)選的，根據(jù)特定的模具制備得到一種血清白蛋白淚點塞，根據(jù)所述模具制備得到的淚點塞具有主體(2)、第一節(jié)段(I)第二節(jié)段(3)和超潤滑涂層(4)，如圖1所示。第一節(jié)段(I)靠在淚點外部，防止淚點塞滑落到淚小管中，第二節(jié)段(3)在淚點塞插入淚點后起定位作用，超潤滑涂層(4)避免在植入過程中對組織的損傷。
[0022]本發(fā)明所述的淚點塞主體為細長圓柱體，所述圓柱體直徑為0.5?4.5mm之間，高度為0.2?3_。更優(yōu)選為圓柱體直徑為0.8?2mm之間，高度為1.5?2.5_。
[0023]本發(fā)明所述的淚點塞的第一節(jié)段I和第二節(jié)段3直徑為0.7?5.5mm，更優(yōu)選為淚點塞的第一節(jié)段I和第二節(jié)段3直徑為I?2.5mm.
[0024]本發(fā)明所述的淚點塞的超潤滑涂層(4)由步驟(3)所述的淚點塞模具制備得到血清白蛋白淚點塞在親水性聚合物溶液中浸泡后形成。血清白蛋白淚點塞表面在親水性聚合物溶液浸泡后通過化學(xué)反應(yīng)形成親水性的高分子涂層，當與水接觸時，水溶性高分子的親水基團與水結(jié)合迅速溶漲，具有優(yōu)良的潤滑性能，可減少了淚點塞植入時對軟組織的損傷，減輕疼痛，防止了并發(fā)癥的發(fā)生。而且，由于重組人血清白蛋白是來源于人體血液或采用基因工程重組表達，與人血液中的血清白蛋白一致，不會引起免疫反應(yīng)。另外，本發(fā)明提供的血清白蛋白淚點塞生產(chǎn)方法質(zhì)量可控，適合于大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。
【附圖說明】
[0025]圖1超潤滑血清白蛋白淚點塞截面示意圖。圖1具有第一節(jié)段1、第二節(jié)段3、主體2和超潤滑涂層4。第一節(jié)段I靠在淚點外部，防止淚點塞滑落到淚小管中，第二節(jié)段3在淚點塞插入淚點后起定位作用，超潤滑涂層4避免在植入過程中對組織的損傷。
【具體實施方式】
[0026]實施例1
[0027]配制溶解血清白蛋白的溶液體系:按照體積百分比取各組分，0.1M氨水10%，I %巰基乙醇，其余為三氟乙醇，攪拌使其充分混合;將血清白蛋白溶于上述溶液中，最終血清蛋白溶液中含有25% (w/v)的血清白蛋白，輕輕用磁棒攪拌30分鐘，用真空栗抽氣30分鐘致氣泡消除;將血清白蛋白溶液室溫靜置，48h后，倒掉上層液體，將下層具有較大粘度的血清白蛋白溶液加入到模具中，室溫空氣中干燥過夜;將模具打開，取出后，浸泡到琥珀酰亞胺丙酸酯基聚乙二醇溶液中，濃度為1 % (w/v)，用去離子水清洗至pH = 7.0，在25 °C干燥，制得超潤滑血清白蛋白淚點塞。
[0028]實施例2
[0029]配制溶解血清白蛋白的溶液體系:按照體積百分比取各組分，0.1M氨水10%，I %巰基乙醇，其余為三氟乙醇，攪拌使其充分混合;將血清白蛋白溶于上述溶液中，最終血清蛋白溶液中含有35% (w/v)的血清白蛋白，輕輕用磁棒攪拌30分鐘，用真空栗抽氣30分鐘致氣泡消除;將血清白蛋白溶液室溫靜置，48h后，倒掉上層液體，將下層具有較大粘度的血清白蛋白溶液加入到模具中，室溫空氣中干燥過夜;將模具打開，取出后，浸泡到琥珀酰亞胺丙酸酯基聚乙二醇溶液中，濃度為1 % (w/v)，用去離子水清洗至pH = 7.0，在37 °C干燥，制得超潤滑血清白蛋白淚點塞。
[0030]實施例3
[0031 ]配制溶解血清白蛋白的溶液體系:按照體積百分比取各組分，0.1M氨水10%，I %巰基乙醇，其余為三氟乙醇，攪拌使其充分混合;將血清白蛋白溶于上述溶液中，最終血清蛋白溶液中含有45% (w/v)的血清白蛋白，輕輕用磁棒攪拌30分鐘，用真空栗抽氣30分鐘致氣泡消除;將血清白蛋白溶液室溫靜置，48h后，倒掉上層液體，將下層具有較大粘度的血清白蛋白溶液加入到模具中，室溫空氣中干燥過夜;將模具打開，取出后，浸泡到琥珀酰亞胺琥珀酸酯基聚乙二醇溶液中，濃度為10%(?八)，用去離子水清洗至?!1 = 7.0，在37°(:干燥，制得超潤滑血清白蛋白淚點塞。
【主權(quán)項】
1.一種血清白蛋白生物材料的制備方法，包括如下步驟: (1)、配制溶解血清白蛋白的溶液體系:每體積溶液中含有75%-94.95%的三氟乙醇(v/v)，5 % -20 % 的0.01M-2.0M的無機堿(v/v)，0.05 % -5 % 的β-巰基乙醇(ν/ν); (2)、將血清白蛋白溶于上述溶液中，最終溶液中含有5% -30 % (w/v)的血清白蛋白； (3)、將血清白蛋白溶液靜置，待反應(yīng)完全后倒掉上層液體，將下層具有較大粘度的血清白蛋白溶液加入到模具中，待干燥凝固后，打開模具，將凝固材料浸泡到含有濃度為0.5 %?45 % (w/v)的親電官能團的親水性聚合物溶液中，清洗后干燥，制得血清白蛋白生物材料。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述的血清白蛋白的來源是人、牛、馬、羊、老鼠等動物的血清白蛋白。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述方法步驟(I)中，所述溶液中的無機堿選自氨水、氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸鈉等或其混合物。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述方法步驟(3)中，將血清白蛋白溶液在10-40 °C靜置1-60小時。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述方法步驟(3)中，所述的含有親電官能團的親水性聚合物選自琥珀酰亞胺丙酸酯基聚乙二醇、琥珀酰亞胺琥珀酸酯基聚乙二醇、琥珀酰亞胺戊二酸酯基聚乙二醇、琥珀酰亞胺癸二酸酯基聚乙二醇、季戊四醇聚乙二醇醚四琥珀酰亞胺戊二酸、季戊四醇聚乙二醇醚四琥珀酰亞胺丁二酸、季戊四醇聚乙二醇醚四琥珀酰亞胺癸二酸中的一種或多種。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述方法步驟(3)中，所述的含有親電官能團的親水性聚合物為琥珀酰亞胺琥珀酸酯基聚乙二醇。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述方法步驟⑶中，血清白蛋白凝固材料在親水性聚合物溶液中浸泡后，將其清洗至PH為6.0?8.0;清洗液選自水或能維持溶液pH為6.0 -8.0、濃度為1-10 Ommo I /L的任一種緩沖溶劑，任選自磷酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、TRIS、甘氨酰基-甘氨酸、N-二 (羥乙基)甘氨酸、磷酸二氫鈉緩沖液、磷酸氫二鈉緩沖液、醋酸鈉緩沖液、碳酸鈉緩沖液、磷酸鈉緩沖液、賴氨酸緩沖液、精氨酸緩沖液或其混合物。8.—種血清白蛋白淚點塞，其由權(quán)利要求1-7任一項所述的方法制備而得，所述的淚點塞具有主體(2)、第一節(jié)段(I )、第二節(jié)段(3)和超潤滑涂層(4)。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的血清白蛋白淚點塞，其特征在于:所述的淚點塞主體為細長圓柱體，所述圓柱體直徑為0.5?4.5mm，高度為0.2?3mm。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的血清白蛋白淚點塞，其特征在于:所述的淚點塞的超潤滑涂層(4)由權(quán)利要求1步驟(3)所述的淚點塞模具制備得到血清白蛋白淚點塞在親水性聚合物溶液中浸泡后形成。
【文檔編號】A61L31/10GK105879126SQ201610176245
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年3月24日
【發(fā)明人】汪偉, 李丹, 何銘鋒, 朱家喜, 俞益雷, 李綠巍, 許利利, 朱明華
【申請人】杭州亞慧生物科技有限公司