uence of concentration and vehicle pH. Pharm. Res. 22:1525-9 (2005)]。按照本文所描述的方法制備膜。在處死后一小時內自動 物取食管。用柳葉刀將粘膜與肌肉組織分離。為了分離上皮，將粘膜浸漬在60°C的蒸餾水 中持續(xù)2分鐘，然后用刮刀將上皮從下層組織上移除。將由此制得的上述組織儲存在-20°C 直至使用時，當使用時，在將它們固定在Franz類型的豎直擴散池上之前在室溫下解凍， Franz類型的豎直擴散池的示意圖示于圖1中。將食管上皮放置在腔側朝上的再生纖維素 過濾器（孔徑0.45 μ m)上，并且安裝在Franz池的供體隔室和受體隔室之間。該過濾器僅 用作載體，并不干擾活性成分的滲透。暴露的表面為〇.6cm2。受體隔室充有約4ml的生理 溶液（0.9%的NaCl w/v)，并在整個實驗期間保持在恒定的磁力攪拌下。整個系統(tǒng)恒溫控 制在37°C。通過汲取200μ1的受體溶液進行受體隔室的取樣，該200μ1的受體溶液立即 用等體積的新鮮生理溶液取代。以預設的時間間隔取樣，特別是在〇、1、2、3、4、5和6小時 時取樣。
[0075] 實施例2
[0076] 制備了添加和不添加抗壞血酸的不同濃度的抗壞血酸Fe++溶液，并且根據(jù)實施 例1在Franz池中對上述溶液進行了測試：
[0077] 400mg/ml溶液
[0078] 將4g粉末懸浮在10ml生理溶液中并攪拌15分鐘，然后用再生纖維素過濾器（孔 徑0. 45 μ m)過濾該溶液。發(fā)現(xiàn)抗壞血酸Fe++的濃度為397. 92 ± 25. 78mg/ml。pH等于4. 4。
[0079] 600mg/ml溶液
[0080] 將6g粉末懸浮在10ml生理溶液中。磁力攪拌該懸浮液25分鐘，然后用再生纖維 素過濾器（孔徑0.45μπι)過濾。發(fā)現(xiàn)抗壞血酸Fe++的濃度等于638. 84mg/ml。pH等于 4. 4〇
[0081] 1000mg/ml溶液
[0082] 將7g粉末懸浮在6ml生理溶液中。磁力攪拌該懸浮液1小時；結束時用再生 纖維素過濾器（孔徑〇· 45μm)過濾。發(fā)現(xiàn)抗壞血酸Fe++的濃度（其對應于溶解性）為 984.72±74.4711^/1111?？?1等于4.4。
[0083] 50mg/ml添加抗壞血酸的溶液，pH2. 6
[0084] 將250mg抗壞血酸Fe++溶解在5ml生理溶液中。將過量的抗壞血酸（2g)添加到 該溶液中。磁力攪拌該懸浮液30分鐘，并且在用再生纖維素過濾器（孔徑0.45μπι)過濾 之后，以其原樣使用。該溶液的pH為2. 6。
[0085] 350mg/ml添加抗壞血酸的溶液
[0086] 將1.05g抗壞血酸Fe++溶解在3ml生理溶液中。向該溶液添加過量的抗壞血 酸（525mg)，并且用NaOH5N使該溶液的pH恢復至初始值4. 4。發(fā)現(xiàn)溶液的滴定量為 350. 89mg/ml〇
[0087] 通過實施例1的擴散池對這些溶液進行吸收測試，產生了圖2中給出的數(shù)據(jù)。
[0088] 實施例3
[0089] 在如實施例1中的Franz池中測試的FeOOH與麥芽糖糊精的復合物（Fe+++_聚麥 芽糖（分子量300000Da))用作Fe+++。將4g粉末懸浮在10ml生理溶液中。磁力攪拌該懸 浮液15小時，結束時用再生纖維素過濾器（孔徑0. 45μm)過濾該懸浮液。發(fā)現(xiàn)聚麥芽糖 Fe+++的濃度（其對應于溶解性）為270. 23±14.47mg/ml。通過使用實施例1的實驗設計， 聚麥芽糖三價鐵沒有產生滲透，表明如果通過舌下途徑給藥，無論其溶解性如何，聚麥芽糖 三價鐵不是生物可利用的。
[0090] 實施例4
[0091]在如實施例1的吸收測試中使用的另一種Fe+++化合物為檸檬酸鐵。將過量的粉 末懸浮在l〇ml生理溶液中。磁力攪拌該懸浮液15小時，攪拌結束時用再生纖維素過濾器 (孔徑〇.45以111)過濾該懸浮液。發(fā)現(xiàn)朽 1檬酸？6+++的濃度（其對應于溶解性）為28〇11^/1111。 該溶液的pH是1. 2。吸收圖示于圖3中。
[0092]Fe+++的吸收僅發(fā)生在pH值小于2時；在較高的pH值下，F(xiàn)e+++不再可用，因為它沉 淀。
[0093] 實施例5
[0094] 舌下片劑：
[0095] 將36. 35kg抗壞血酸鐵（相當于5kg的Fe++)，60. 00kg麥芽糊精，20. 00kg抗壞血 酸添加到錐形混合器中?；旌?5分鐘后，按序添加1. 50kg硬脂酸鎂、25. 00kg聚乙烯吡咯 烷酮和3. 00kg檸檬香料。又混合15分鐘后，用直徑為7. 0mm的弧面沖頭將粉末壓實，得到 平均重量為145. 85mg(相當于每片劑5mg的Fe++)的片劑。
[0096] 舌下粉劑：
[0097]將36. 35kg抗壞血酸鐵（相當于5kg的Fe++)，60. 00kg麥芽糖糊精，20. 00kg抗 壞血酸添加到錐形混合器中?；旌?5分鐘后，按序添加47. 39kg果糖和3. 00kg檸檬香料。 又混合15分鐘后，將該粉末分成含40. 75mg(相當于每小袋5mg的Fe++)的小袋。
[0098] 實施例6
[0099] 替代的舌下粉劑（具有粉末混合物的1小袋內容物）：
[0100]抗壞血酸Fe(II)40mg(相當于5mgFe++);果糖60mg;抗壞血酸10mg;梓檬香料5mg。
[0101] 實施例7
[0102] 以抗壞血酸Fe2+舌下給藥30mg的Fe2+。
[0103] 為了研究根據(jù)本發(fā)明的新組合物的體內生物利用度，對健康的志愿者患者（η= 2)進行了隨機的臨床研究，以本文中描述的組合物的形式向他們給藥日劑量為30mg的 Fe2+(根據(jù)上述實施例6的含40mg抗壞血酸Fe2+的6個小袋）。
[0104] 更具體地，參與臨床研究的患者（健康的男性志愿者；年齡18-55歲；體重指數(shù) 18. 5~30kg/m2)在禁食的同時給藥在舌下制劑中量為30mg的Fe2+，分為六個小袋，一袋 吃完緊接著吃另一袋，伴隨有指示以避免在至少4分鐘內吞咽制劑和/或唾液。
[0105] 參與者在給藥前住院兩天直至第二天，并進行醫(yī)學觀察。
[0106]在給藥前24小時和22小時以及在給藥時（時間0. 0)和給藥后0. 033 (2分鐘）， 0· 10 (6 分鐘）；0· 20 (12 分鐘）；0· 33 (20 分鐘）；0· 50 (30 分鐘）；0· 75 (45 分鐘）；1. 00 (60 分鐘）；1. 25 (1小時15分鐘）；1. 50 (1小時30分鐘）；1. 75 (1小時45分鐘）和2. 00 (2小 時）時取血樣。
[0107] 然后對樣品進行分析各指標的（平均）濃度隨時間的趨勢。
[0108] 檢測的值：
[0109] 以μg/dl計測量的總鐵（ICP-MS)
[0110] 以μΜ/l計測量的通過超濾的游離鐵（=NTBI) (ICP-MS)
[0111] 以μg/dl計測量的總鐵結合力（TIBC)(柱分離，Vitros分析儀）
[0112] 以％計測量的轉鐵蛋白飽和度（PTS)
[0113]血清鐵（SI)，以μg/dl計測量，比色法（Vitros分析儀）
[0114]結果：
[0115] 血清鐵隨時間的發(fā)展：

[0118] 總鐵隨時間的發(fā)展：
[0120] 總鐵結合力隨時間的發(fā)展：
[0121]
[0123] 轉鐵蛋白飽和度和游離鐵隨時間的發(fā)展：
[0125] 在上述最后一個表中提供的結果通過圖的方式示出在圖4中，其中橫軸標出時 間，而左側縱軸標出NTBI以及右側縱軸標出飽和度。
[0126] 上述表和圖4示出如本發(fā)明所述通過舌下途徑給藥30mgFe2+(作為抗壞血酸 鹽），在2小時后轉鐵蛋白飽和度（PTS，在給藥時約為24% )的增加達42. 5% (65. 5%的絕 對飽和度），而游離鐵（NTBI)從0到達0· 34μM/1。
[0127] 反之亦然，如Dresow等人，Biometals(2008)，21，273_276的圖1中所示，在圖5中 重復了該圖，將l〇〇mgFe2+(作為抗壞血酸鹽）傳統(tǒng)口服給藥至健康的志愿者，在2小時后 使轉鐵蛋白飽和度增加約45% (從給藥時的約30%至兩小時后約75%的絕對飽和度一見 白色方塊），而游離鐵（NTBI)在相同的兩個小時內從0到達6. 7μΜ/l-見黑色方塊。
[0128] 用根據(jù)本發(fā)明的制劑和劑量得到的結果與最近發(fā)表在文獻（Dresow等人）中的數(shù) 據(jù)進行比較，表明舌下給藥相對于傳統(tǒng)口服（胃腸道）治療的特定效力，特別是在給藥相對 中等的劑量（每天30mgFe2+略低于傳統(tǒng)口服日劑量100mg二價Fe的三分之一）后達到 很好程度的轉鐵蛋白飽和度，同時具有低指數(shù)的游離鐵（"NTBI"，非轉鐵蛋白結合的鐵）， 其中游離鐵是與鐵給藥相關的最高風險因素。
[0129] 因此，根據(jù)本發(fā)明的頰內給藥Fe2+，優(yōu)選舌下給藥Fe2+，允許使用降低的劑量（相 對于傳統(tǒng)口服給藥）使轉鐵蛋白飽和，獲得等效的飽和度，同時伴隨著相關風險的顯著降 低，由此與傳統(tǒng)口服（胃腸道）給藥相比顯著改進給藥二價鐵的風險/利益比。
[0130] 本發(fā)明的優(yōu)選實施方式
[0131] 鑒于前述章節(jié)的教導，本發(fā)明一些優(yōu)選但非排他性的實施方式在下文中描述：
[0132] 第一實施方式:
[0133] -種二價鐵化合物，所述二價鐵化合物的用途是通過頰內吸收，優(yōu)選通過舌下吸 收給藥至患者用于缺鐵治療，所述用途以如下劑量提供二價鐵的給藥：該劑量包括在對于 人類患者每天1~90mg二價Fe，優(yōu)選對于人類患者每天1~60mg二價Fe，更優(yōu)選對于人 類患者每天4~40mg二價Fe，甚至更優(yōu)選對于人類患者每天5~30mg二價Fe的區(qū)間內， 以對于同等程度的轉鐵蛋白飽和度的增加相對于胃腸道給藥降低游離的非轉鐵蛋白結合 的鐵的起始值。
[0134] 第二實施方式:
[0135] -種二價鐵化合物，優(yōu)選根據(jù)第一實施方式的二價鐵化合物，所述二價鐵化合物 的用途是通過頰內吸收，優(yōu)選通過舌下吸收給藥至患者用于治療由腹腔疾病或慢性炎癥性 腸道疾病導致的鐵吸收不良，其中，所述用途以如下劑量提供二價鐵的給藥：該劑量包括在 對于人類患者每天10~90mg二價鐵，優(yōu)選對于人類患者每天30~90mg二價鐵，更優(yōu)選對 于人類患者每天40~90mg二價鐵，甚至更優(yōu)選對于人類患者每天45~90mg二價鐵的區(qū) 間內。
[0136] 第三實施方式:
[0137] 根據(jù)第二實施方式的二價鐵化合物，所述二價鐵化合物的用途是通過頰內吸收， 優(yōu)選通過舌下吸收給藥至患者用于治療由腹腔疾病或慢性炎癥性腸道疾病導致的鐵吸收 不良，所述用途以包括在對于人類患者每天45~65mg二價鐵的區(qū)間內的劑量提供二價鐵 的給藥。
[0138] 第四實施方式:
[0139] -種二價鐵化合物，優(yōu)選根據(jù)第一實施方式的二價鐵化合物，所述二價鐵化合物 的用途是通過頰內吸收，優(yōu)選通過舌下吸收給藥至患者用于治療由失血引起的慢性缺鐵性 貧血，所述用途以如下劑量提供二價鐵的給藥：該劑量包括在對于人類患者每天10~90mg二價Fe，優(yōu)選對于人類患者每天30~90mg二價Fe，更優(yōu)選對于人類患者每天40~90mg 二價Fe，甚至更優(yōu)選對于人類患者每天45~90mg二價Fe的區(qū)間內。
[0140] 第五實施方式:
[0141] 根據(jù)第四實施方式的二價鐵化合物，所述二價鐵化合物的用途是通過頰內吸收， 優(yōu)選通過舌下吸收給藥至患者用于治療由失血引起的慢性缺鐵性貧血，所述用途以包括在 對于人類患者每天45~65mg二價Fe的區(qū)間內的劑量提供二價鐵的給藥。
[0142] 第六實施方式:
[0143] 一種二價鐵化合物，所述二價鐵化合物的用途是用于治療復發(fā)