一種重組腺病毒疫苗制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域中一種重組腺病毒疫苗制劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 腺病毒在自然界分布廣泛，在眾多哺乳動物和禽類中都發(fā)現(xiàn)其存在；因其對人致 病性小且不誘導(dǎo)癌變，裝載容量大，宿主細(xì)胞廣，繁殖滴度高，成為近年來病毒載體研究熱 點(diǎn)。但即使是含有穩(wěn)定劑的液體重組腺病毒制劑對溫度也較為敏感，給運(yùn)輸、保存帶來較大 困難，這在很大程度上限制了其在臨床上的應(yīng)用。到目前為止，長期保存的重組腺病毒制劑 基本是保存在_2〇°C。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種安全、穩(wěn)定性好、有效期長的重組腺病毒疫苗制劑及 其制備方法。
[0004] 一種重組腺病毒疫苗制劑，包括冷凍保護(hù)劑、蔗糖、L-組氨酸的組成；為了更好的 保護(hù)重組腺病毒原液活性，所述冷凍保護(hù)劑中還含有三羥甲氨基甲烷、氯化鎂、氯化鈉、吐 溫-80、乙二胺四乙酸、無水乙醇。所述冷凍保護(hù)劑各組分的重量體積比為 ：
[0006] 所述重組腺病毒制劑原液與所述冷凍保護(hù)劑的比例是重組腺病毒制劑原液：冷凍 保護(hù)劑=1 : (0.5~2)。
[0007] -種重組腺病毒疫苗制劑的制備方法，包括如下步驟：
[0008] 將重組腺病毒制劑原液按含腺病毒量I. 0*1012VP/ml的濃度用冷凍保護(hù)劑進(jìn)行稀 釋，混勻后無菌過濾，注入西林瓶中，充氮加塞、扎蓋；燈檢后放入_20°C保存。其中冷凍保 護(hù)劑由蔗糖、L-組氨酸組成；其成品按《中國藥典》（2010版）三部所述方法檢定，合格。
[0009] 用本發(fā)明配方及方法制備獲得的重組腺病毒疫苗制劑，經(jīng)TCID50滴度檢測實(shí)驗(yàn) 證明，制劑保持了重組腺病毒原有活性；并經(jīng)過36個(gè)月的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)證明穩(wěn)定性良好。與 現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明工藝合理，安全性、穩(wěn)定性好，有效期長，為采用重組腺病毒作為載體 的基因治療的臨床試驗(yàn)提供很好的應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 實(shí)施例1
[0011] 冷凍保護(hù)劑配方：三羥甲胺基甲烷：1. 5g，氯化鈉9. lg，蔗糖75g，氯化鎂0. 15g，吐 溫-80 0. 2g，乙二胺四乙酸0. 02g，L-組氨酸I. 3g，無水乙醇lg。
[0012] 制備：
[0013] 按配方將各組分混合，加冷卻至4°C的注射用水至200ml，攪拌溶解，混合均勻，再 將重組腺病毒原液2*10 14VP量加入，混合均勻，補(bǔ)加注射用水至1000ml，攪拌混合均勻，無 菌過濾、灌裝，充氮壓塞、扎蓋，燈檢后，放入-20°C冷凍保存。
[0014] 實(shí)施例2
[0015] 冷凍保護(hù)劑配方：三羥甲胺基甲烷：1. 0g，氯化鈉5. 6g，蔗糖10g，氯化鎂0. 2g，吐 溫-80 0. 3g，乙二胺四乙酸0. 04g，L-組氨酸4. 5g，無水乙醇5g。
[0016] 制備：
[0017] 按配方將各組分混合，加冷卻至4°C的注射用水至200ml，攪拌溶解，混合均勻，再 將重組腺病毒原液2*10 14VP量加入，混合均勻，補(bǔ)加注射用水至1000ml，攪拌混合均勻，無 菌過濾、灌裝，充氮壓塞、扎蓋，燈檢后，放入-20°C冷凍保存。
[0018] 實(shí)施例3
[0019] 冷凍保護(hù)劑配方：三羥甲胺基甲烷：1. 3g，氯化鈉4. 5g，蔗糖50g，氯化鎂0. lg，吐 溫-800.1 g,乙二胺四乙酸0. 015g，L-組氨酸3g，無水乙醇7. 5g。
[0020] 制備：
[0021] 按配方將各組分混合，加冷卻至4°C的注射用水至200ml，攪拌溶解，混合均勻，再 將重組腺病毒原液2*10 14VP量加入，混合均勻，補(bǔ)加注射用水至1000ml，攪拌混合均勻，無 菌過濾、灌裝，充氮壓塞、扎蓋，燈檢后，放入-20°C冷凍保存。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種重組腺病毒疫苗制劑，其特征在于制劑處方中包括冷凍保護(hù)劑、蔗糖、L-組氨 酸的組成。2. 如權(quán)利要求1所述的重組腺病毒疫苗制劑，其特征在于所述保護(hù)劑中還包含三羥甲 氨基甲烷、氯化鎂、氯化鈉、吐溫-80、乙二胺四乙酸、無水乙醇。3. 如權(quán)利要求2所述的重組腺病毒疫苗制劑，其特征在于所述制劑處方各組分質(zhì)量體 積比為：4. 如權(quán)利要求1所述的重組腺病毒疫苗制劑，其特征在于：所述重組腺病毒制劑原液 與所述冷凍保護(hù)劑的比例是重組腺病毒制劑原液：冷凍保護(hù)劑=1 : (0.5~2)。5. -種重組腺病毒疫苗制劑的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟： 將重組腺病毒制劑原液按含腺病毒量1. 〇*l〇12VP/ml的濃度用冷凍保護(hù)劑進(jìn)行稀釋， 混勻后無菌過濾，注入西林瓶中，充氮加塞、扎蓋；燈檢后放入_20°C保存；其中冷凍保護(hù)劑 由蔗糖、L-組氨酸組成。6. 如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述冷凍保存劑中還有三羥甲氨基甲烷、氯 化鎂、氯化鈉、吐溫-80、乙二胺四乙酸、無水乙醇；所述冷凍保護(hù)劑各組分質(zhì)量體積比為：所述重組腺病毒制劑原液與所述冷凍保護(hù)劑的比例是重組腺病毒制劑原液：冷凍保護(hù) 劑=1 : (0· 5 ~2)。
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域中一種重組腺病毒疫苗制劑的制備方法。本發(fā)明目的是提供一種重組腺病毒疫苗制劑。本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種重組腺病毒疫苗制劑，包括重組腺病毒原液及制劑處方。生產(chǎn)上述重組腺病毒疫苗制劑的方法步驟如下：(1)按制劑處方配制好緩沖溶液，最后加入病毒原液，混合均勻后，無菌過濾，分裝于西林瓶中；充氮壓塞、扎蓋。(2)將分裝重組腺病毒疫苗制劑燈檢后放入-20℃保存?？杀４嬷辽?4個(gè)月。
【IPC分類】A61K47/34, C12N15/861, A61K39/235, A61K48/00
【公開號】CN105267960
【申請?zhí)枴緾N201410261625
【發(fā)明人】戴東升, 安俊, 楊仁佳, 焦進(jìn)安, 王星星, 陳婧, 周鵬, 王斐
【申請人】亞寶藥業(yè)太原制藥有限公司
【公開日】2016年1月27日
【申請日】2014年6月13日