專利名稱：輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及檢測(cè)試劑盒技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及聯(lián)檢試劑盒技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒。
背景技術(shù)：
感染性腹瀉病是一組廣泛分布并流行世界各地的腸道傳染性疾病，其發(fā)病率高，傳播性快，對(duì)兒童的健康危害尤其嚴(yán)重，其中以細(xì)菌性腹瀉和病毒(主要包括輪狀病毒和腺病毒)感染性腹瀉居多。對(duì)兒童的感染性腹瀉，臨床上一般要對(duì)病原體進(jìn)行鑒別診斷，以便做出相應(yīng)的治療。目前常用的檢測(cè)手段，如糞便常規(guī)、培養(yǎng)和免疫學(xué)檢測(cè)；糞便常規(guī)一般包括糞便的顏色、形態(tài)、糞便細(xì)胞、隱血等指標(biāo)，而培養(yǎng)法主要是針對(duì)一些細(xì)菌性感染；免疫學(xué)檢測(cè)則主要是輪狀病毒、腺病毒等指標(biāo)。在臨床應(yīng)用中，輪狀病毒、腺病毒和隱血三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)兒童腹瀉的鑒別診斷意義重大，輪狀病毒和腺病毒陽性代表了腹瀉是由這兩種病毒感染所致，一般癥狀較輕，病程較短，對(duì)兒童的危害較小；而隱血陽性則說明是出血性腸炎，病程長(zhǎng)，危害大。對(duì)兒童腹瀉的鑒別診斷意義重大。臨床上廣泛應(yīng)用膠體金或乳膠凝集法對(duì)輪狀病毒、腺病毒和隱血進(jìn)行快速檢測(cè)，一般只需10分鐘左右即可對(duì)兒童腹瀉的病原體進(jìn)行診斷。目前已有輪狀病毒、腺病毒和隱血膠體金試紙條，或者輪狀病毒、腺病毒聯(lián)檢的膠體金試紙條，極大地方便了臨床診斷；但尚未發(fā)現(xiàn)輪狀病毒、腺病毒和隱血膠體金試紙條三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)檢的產(chǎn)品或者報(bào)道。
如能將輪狀病毒、腺病毒和隱血膠體金試紙條一次取樣檢測(cè)，將更大地方便檢驗(yàn)人員，提高工作效率。為了解決存在的上述問題，需要提供一種試劑盒，其可以通過一次取樣同時(shí)診斷輪狀病毒、腺病毒和隱血，使用方便。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型的目的是克服了上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺點(diǎn)，提供一種輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒，該輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒可以通過一次取樣同時(shí)診斷輪狀病毒、腺病毒和隱血，應(yīng)用簡(jiǎn)便，聯(lián)檢結(jié)果為下一步準(zhǔn)確治療提供了有力依據(jù)，適于大規(guī)模推廣應(yīng)用。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型的輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒具有如下構(gòu)成:該輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒，其特點(diǎn)是，包括輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條和腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條。較佳地，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體、腺病毒免疫標(biāo)記抗體和隱血免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體、腺病毒檢測(cè)抗體和隱血檢測(cè)抗體。較佳地，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有腺病毒檢測(cè)抗體，所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有隱血免疫標(biāo)記抗體，所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有隱血檢測(cè)抗體。較佳地，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體，所述腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有腺病毒免疫標(biāo)記抗體和隱血免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有腺病毒檢測(cè)抗體和隱血檢測(cè)抗體。較佳地，所述輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體和腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體和腺病毒檢測(cè)抗體，所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有隱血免疫標(biāo)記抗體，所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有隱血檢測(cè)抗體。較佳地，所述輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體和隱血免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體和隱血檢測(cè)抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有腺病毒檢測(cè)抗體。更佳地，所述輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體是抗人輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒檢測(cè)抗體是抗人輪狀病毒抗體，所述腺病毒免疫標(biāo)記抗體是抗人腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒檢測(cè)抗體是抗人腺病毒抗體，所述隱血免疫標(biāo)記抗體是抗人血紅蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)免疫標(biāo)記抗體或抗人白蛋白免疫標(biāo)記抗體，所述隱血檢測(cè)抗體是抗人血紅蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)免疫標(biāo)記抗體或抗人白蛋白免疫標(biāo)記抗體。更佳地,所述輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體是輪狀病毒膠體金標(biāo)記抗體或輪狀病毒乳膠標(biāo)記抗體，所述腺病毒免疫標(biāo)記抗體是腺病毒膠體金標(biāo)記抗體或腺病毒乳膠標(biāo)記抗體，所述隱血免疫標(biāo)記抗體是隱血膠體金標(biāo)記抗體或隱血乳膠標(biāo)記抗體。較佳地，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條并列設(shè)置。較佳地，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒還包括底板，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條分別貼合在所述底板的上下表面上。本實(shí)用新型的有益效果在于:(I)本實(shí)用新型包括輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、腺病毒 免疫層析檢測(cè)試紙條及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條和腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條，從而一次取樣，即可對(duì)輪狀病毒、腺病毒和隱血進(jìn)行檢測(cè)；避免了反復(fù)取樣操作繁瑣以及取樣不均導(dǎo)致的檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。(2)同時(shí)檢測(cè)輪狀病毒、腺病毒和隱血三個(gè)指標(biāo)非常必要，通過本實(shí)用新型的使用，對(duì)輪狀病毒和腺病毒所致的兒童腹瀉，因癥狀較輕，病程較短，對(duì)兒童的危害較小，所以只進(jìn)行一般治療即可；而隱血陽性則說明是出血性腸炎，病程長(zhǎng)，危害大，需進(jìn)行及時(shí)而有效的治療。因此，本實(shí)用新型可以通過一次取樣同時(shí)診斷輪狀病毒、腺病毒和隱血，應(yīng)用簡(jiǎn)便，聯(lián)檢結(jié)果為下一步準(zhǔn)確治療提供了有力依據(jù)，適于大規(guī)模推廣應(yīng)用。

圖1是本實(shí)用新型的一具體實(shí)施例的主視示意圖。其中I是結(jié)合墊(含抗人輪狀病毒膠體金標(biāo)記抗體、抗人腺病毒膠體金標(biāo)記抗體和抗人血紅蛋白膠體金標(biāo)記抗體);2是箭頭；3是部分不透明保護(hù)膜；4是第一檢測(cè)線(包被抗人輪狀病毒抗體)；5是第二檢測(cè)線(包被抗人腺病毒抗體);6是第三檢測(cè)線(包被抗人血紅蛋白抗體)；7是質(zhì)控線；8是層析膜；9是吸水墊。圖2是本實(shí)用新型的另一具體實(shí)施例的主視示意圖。其中，9是結(jié)合墊(含抗人血紅蛋白);10是結(jié)合墊(含抗人輪狀病毒膠體金標(biāo)記抗體、抗人腺病毒膠體金標(biāo)記抗體);2是箭頭；3是部分不透明保護(hù)膜；4是第一檢測(cè)線(包被抗人輪狀病毒抗體)；5是第二檢測(cè)線(包被抗人腺病毒抗體);6是第三檢測(cè)線(包被抗人血紅蛋白抗體);7是質(zhì)控線；8是層析膜；9是吸水墊，14是底板。圖3是本實(shí)用新型的又一具體實(shí)施例的主視示意圖。其中9是結(jié)合墊(含抗人血紅蛋白膠體金標(biāo)記抗體)；12是結(jié)合墊(含抗人輪狀病毒膠體金標(biāo)記抗體)；13是結(jié)合墊(含抗人腺病毒膠體金標(biāo)記抗體)·;2是箭頭；3是部分不透明保護(hù)膜；4是第一檢測(cè)線(包被抗人輪狀病毒抗體);5是第二檢測(cè)線(包被抗人腺病毒抗體)；6是第三檢測(cè)線(包被抗人血紅蛋白抗體);7是質(zhì)控線；8是層析膜；9是吸水墊，14是底板。圖4是本實(shí)用新型的再一具體實(shí)施例的主視示意圖。其中，其中，9是結(jié)合墊(含抗人血紅蛋白);10是結(jié)合墊(含抗人輪狀病毒膠體金標(biāo)記抗體、抗人腺病毒膠體金標(biāo)記抗體)；2是箭頭；3是部分不透明保護(hù)膜；4是第一檢測(cè)線(包被抗人輪狀病毒抗體)；5是第二檢測(cè)線(包被抗人腺病毒抗體);6是第三檢測(cè)線(包被抗人血紅蛋白抗體)；7是質(zhì)控線；8是層析膜；9是吸水墊，14是底板。
具體實(shí)施方式
為了能夠更清楚地理解本實(shí)用新型的技術(shù)內(nèi)容，特舉以下實(shí)施例詳細(xì)說明。其中圖1顯示的是本實(shí)用新型的一具體實(shí)施例，圖2顯示的是本實(shí)用新型的另一具體實(shí)施例，圖3顯示的是本實(shí)用新型的又一具體實(shí)施例，圖4顯示的是本實(shí)用新型的再一具體實(shí)施例。其中相同的部件采用相同的附圖標(biāo)記。請(qǐng)參見圖1-圖4所示，本實(shí)用新型的輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒包括輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條和腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條。請(qǐng)參見圖1所示，在本實(shí)用新型的一具體實(shí)施例中，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒包括輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，即只包括一條檢測(cè)試紙條，可以同時(shí)檢測(cè)輪狀病毒、腺病毒及隱血。請(qǐng)參見圖2和圖4所示，在本實(shí)用新型的二個(gè)具體實(shí)施例中，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒包括輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，即包括兩條檢測(cè)試紙條，分別同時(shí)檢測(cè)輪狀病毒、腺病毒及隱血。請(qǐng)參見圖3所示，在本實(shí)用新型的又一具體實(shí)施例中，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，即包括三條檢測(cè)試紙條，分別同時(shí)檢測(cè)輪狀病毒、腺病毒及隱血?？偹苤庖邔游鰴z測(cè)試紙條一般自上而下依次由樣品墊、結(jié)合墊、層析膜和吸水墊組成；所述結(jié)合墊上包被有免疫標(biāo)記抗體，層析膜上包被有抗體。檢測(cè)時(shí)，免疫標(biāo)記抗體和抗體將分別與被檢測(cè)物質(zhì)結(jié)合從而形成夾心結(jié)構(gòu)。較佳地，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體、腺病毒免疫標(biāo)記抗體和隱血免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體、腺病毒檢測(cè)抗體和隱血檢測(cè)抗體。較佳地，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有腺病毒檢測(cè)抗體。較佳地， 所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體，所述腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有腺病毒免疫標(biāo)記抗體和隱血免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有腺病毒檢測(cè)抗體和隱血檢測(cè)抗體。較佳地，所述輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體和腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體和腺病毒檢測(cè)抗體，所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有隱血免疫標(biāo)記抗體，所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有隱血檢測(cè)抗體。較佳地，所述輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體和隱血免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體和隱血檢測(cè)抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有腺病毒檢測(cè)抗體。更佳地，所述輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體是抗人輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒檢測(cè)抗體是抗人輪狀病毒抗體，所述腺病毒免疫標(biāo)記抗體是抗人腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒檢測(cè)抗體是抗人腺病毒抗體，所述隱血免疫標(biāo)記抗體是抗人血紅蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)免疫標(biāo)記抗體或抗人白蛋白免疫標(biāo)記抗體，所述隱血檢測(cè)抗體是抗人血紅蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)免疫標(biāo)記抗體或抗人白蛋白免疫標(biāo)記抗體。請(qǐng)參見圖1-圖4所示，在本實(shí)用新型的四個(gè)具體實(shí)施例中，所述輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體是抗人輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒檢測(cè)抗體是抗人輪狀病毒抗體。顯然，其中的抗人輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體和抗人輪狀病毒抗體結(jié)合人輪狀病毒的不同部位。免疫標(biāo)記抗體采用常規(guī)的免疫標(biāo)記手段標(biāo)記。更佳地，所述輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體是輪狀病毒膠體金標(biāo)記抗體或輪狀病毒乳膠標(biāo)記抗體，所述腺病毒免疫標(biāo)記抗體是腺病毒膠體金標(biāo)記抗體或腺病毒乳膠標(biāo)記抗體，所述隱血免疫標(biāo)記抗體是隱血膠體金標(biāo)記抗體或隱血乳膠標(biāo)記抗體。請(qǐng)參見圖1-圖4所示，在本實(shí)用新型的四個(gè)具體實(shí)施例中，所述輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體是輪狀病毒膠體金標(biāo)記抗體，所述腺病毒免疫標(biāo)記抗體是腺病毒膠體金標(biāo)記抗體，所述隱血免疫標(biāo)記抗體是隱血膠體金標(biāo)記抗體。所述輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條可以采用任何合適的形式放置。請(qǐng)參見圖4所示，在本實(shí)用新型的再一具體實(shí)施例中，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒還包括底板，所述輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條分別貼合在所述底板的上下表面上。請(qǐng)參見圖2所示，在本實(shí)用新型的另一具體實(shí)施例中，所述輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條并列設(shè)置，具體設(shè)置在底板上。所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條可以采用任何合適的形式放置。請(qǐng)參見圖3所示，在本實(shí)用新型的又一具體實(shí)施例中，所述輪 狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條并列設(shè)置。當(dāng)然，其也可以如圖4所示的具體實(shí)施例那樣，分別貼合在所述底板的上下表面上。本實(shí)用新型的輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒還可以包括免疫層析檢測(cè)試劑盒的其它常見試劑，例如樣品緩釋液等等。本實(shí)用新型的輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒的檢測(cè)試紙條的制備過程簡(jiǎn)述如下，應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本實(shí)用新型而不用于限制本實(shí)用新型的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，例如Samtoook等人，分子克隆:實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。實(shí)施例1膠體金標(biāo)記用于輪狀病毒檢測(cè)的抗體(抗人輪狀病毒抗體)膠體金標(biāo)記方法如下:用碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)50ml膠體金溶液pH值至7.7 ;在攪拌的條件下,逐滴緩慢將0.65mllmg/ml待標(biāo)記抗輪狀病毒抗體加入上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30min ;將12.5ml封閉液緩慢加入上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30min ;8000g4°C離心lh，去上清，留疏松沉淀；各管沉淀用25ml洗滌液溶解，6000g4°C離心lh，去上清，留疏松沉淀；各管沉淀用1.2ml洗滌液溶解，轉(zhuǎn)入1.5ml離心管中，4500g4°C離心lh，去上清；所有沉淀用Iml膠體金抗體重懸液重懸，4°C保存。[0045]用于腺病毒診斷的抗體(抗人腺病毒抗體)和用于隱血診斷的抗體(抗人血紅蛋白抗體或抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)抗體或抗人白蛋白抗體)膠體金標(biāo)記方法同上。[0046]實(shí)施例2膠體金墊的噴點(diǎn)[0047]用于輪狀病毒診斷的抗體(抗人輪狀病毒抗體)膠體金墊的噴點(diǎn)方法如下:膠體金抗體溶液稀釋:用膠體金抗體重懸液將上述制備的膠體金抗體結(jié)合物稀釋4倍；設(shè)定點(diǎn)膜儀，開啟點(diǎn)膜儀的電源，設(shè)定噴點(diǎn)程序，噴點(diǎn)量為8ul/cm ；1號(hào)管道為噴點(diǎn)通道；點(diǎn)膜儀初始化:將I號(hào)管道置于膠體金抗體重懸溶液中，選擇初始化程序，初始化6個(gè)循環(huán)；噴點(diǎn):將金標(biāo)墊按固定位置平放在點(diǎn)膜儀上，按控制面板上“G0”鍵開始噴點(diǎn)，點(diǎn)完后取下，檢查噴點(diǎn)好的金標(biāo)墊，噴點(diǎn)的膠體金抗體條帶均勻、連續(xù)和貫通整個(gè)金標(biāo)墊的直線為合格噴點(diǎn)品，兩條直線中出現(xiàn)斷點(diǎn)為不合格噴點(diǎn)品；每放一片金標(biāo)墊，按一次控制面板上的“G0”鍵為噴點(diǎn)一次(一片);噴點(diǎn)結(jié)束，將噴點(diǎn)的金標(biāo)墊置于室溫中自然干燥I小時(shí)，膜上應(yīng)看不到噴點(diǎn)痕跡。[0048]用于腺病毒診斷的抗體(抗人腺病毒抗體)和用于隱血診斷的抗體(抗人血紅蛋白抗體或抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)抗體或抗人白蛋白抗體)膠體金墊噴點(diǎn)方法同上。[0049]實(shí)施例3層析膜的制備[0050]用于輪狀病毒診斷的抗體(抗人輪狀病毒抗體)層析膜制備方法如下:取鼠抗人輪狀病毒抗體500ug，加到5ml刻度離心管中，抗體稀釋液至1ml，容器標(biāo)記T標(biāo)志。取羊抗鼠IgG抗體25ul，加到5ml刻度離心管中，抗體稀釋液至1ml，容器標(biāo)記C標(biāo)志。設(shè)定點(diǎn)膜儀，開啟點(diǎn)膜儀的電源，設(shè)定噴點(diǎn)程序，噴點(diǎn)量為lul/cm ；1號(hào)管道為檢測(cè)帶噴點(diǎn)通道，2號(hào)管道為對(duì)照帶噴點(diǎn)通道；點(diǎn)膜儀初始化:將I號(hào)管道置于檢測(cè)帶溶液中，將2號(hào)管道置于對(duì)照帶溶液中，選擇初始化程序，初始化6個(gè)循環(huán)；噴點(diǎn):將層析膜按固定位置平放在點(diǎn)膜儀上，按控制面板上“G0”鍵開始噴點(diǎn)，點(diǎn)完后取下，檢查噴點(diǎn)好的層析膜，檢測(cè)帶和對(duì)照帶為兩條均勻、連續(xù)和貫通整個(gè)層析膜的直線為合格噴點(diǎn)品，兩條直線中出現(xiàn)斷點(diǎn)為不合格噴點(diǎn)品；每放一片層析膜，按一次控制面板上的“G0”鍵為噴點(diǎn)一次(一片);噴點(diǎn)結(jié)束，將噴點(diǎn)的層析膜置于室溫中自然干燥I小時(shí)，膜上應(yīng)看不到噴點(diǎn)痕跡。[0051 ] 用于腺病毒診斷的抗體(抗人腺病毒抗體)和用于隱血診斷的抗體(抗人血紅蛋白抗體或抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體或抗人 紅細(xì)胞基質(zhì)抗體或抗人白蛋白抗體)層析膜制備方法同上。[0052]實(shí)施例4貼膜、切膜[0053]將底板上較寬部分的保護(hù)紙除去，沿上面保護(hù)紙的下邊緣，將劃好線的層析膜，以C線在上方的方式貼到底板板上；將膠體金墊貼在T線下方，與NC膜少許接觸；將樣品墊貼在膠體金墊下方，與膠體金墊少許接觸；接著除去上方保護(hù)紙，將吸水墊貼在NC膜的上方，與NC膜少許接觸；將保護(hù)紙及指示帶紙逐一貼在組裝好的試紙條外面，組裝成大卡。[0054]接通切割機(jī)電源，設(shè)定切膜程序，設(shè)定切割寬度為4_ ;將大卡合格品平放入切割機(jī)平臺(tái)軌道中，正面朝上，按操作面板上“G0”鍵，開始切割；每放一片大卡合格品，按操作面板上“G0”鍵一次，直至切割完所有大卡合格品；切割完成后，分別將用于檢測(cè)輪狀病毒、腺病毒和隱血的試紙條并列黏貼于底板上，組成并列式的輪狀病毒、腺病毒和隱血聯(lián)檢試紙條。[0055]實(shí)施例5試劑盒組裝[0056]取鋁箔袋和干燥劑；打開熱封機(jī)，預(yù)熱；將待裝袋的試紙條、I袋干燥劑裝入鋁箔袋中；按照規(guī)定的長(zhǎng)度切斷裝有試紙條和干燥劑的鋁箔袋；用熱封機(jī)封好鋁箔袋；貼上標(biāo)簽。[0057]實(shí)施例6臨床樣本驗(yàn)證[0058]將上述的試紙條，用臨床樣本進(jìn)行驗(yàn)證。[0059]試紙條檢測(cè)端(圖1-圖4中試紙條的左端)帶有吸水墊，反應(yīng)時(shí)插入樣品中。[0060]檢測(cè)時(shí)如果C區(qū)出現(xiàn)條帶即質(zhì)控線6，則T區(qū)出現(xiàn)條帶即表示樣品為陽性；未出現(xiàn)條帶則表示陰性。[0061]檢測(cè)時(shí)如果C區(qū)未出現(xiàn)條帶，則表示試紙條失效。[0062]檢測(cè)結(jié)果如下:
權(quán)利要求1.一種輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒，其特征在于，包括輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體、腺病毒免疫標(biāo)記抗體和隱血免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體、腺病毒檢測(cè)抗體和隱血檢測(cè)抗體； 或者包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有腺病毒檢測(cè)抗體，所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有隱血免疫標(biāo)記抗體，所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有隱血檢測(cè)抗體； 或者包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體，所述腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有腺病毒免疫標(biāo)記抗體和隱血免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有腺病毒檢測(cè)抗體和隱血檢測(cè)抗體； 或者包括輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，所述輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體和腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體和腺病毒檢測(cè)抗體，所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有隱血免疫標(biāo)記抗體，所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有隱血檢測(cè)抗體； 或者包括輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條和腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條，所述輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體和隱血免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有輪狀病毒檢測(cè)抗體和隱血檢測(cè)抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上具有腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條的層析膜上包被有腺病毒檢測(cè)抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒，其特征在于，所述輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體是抗人輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體，所述輪狀病毒檢測(cè)抗體是抗人輪狀病毒抗體，所述腺病毒免疫標(biāo)記抗 體是抗人腺病毒免疫標(biāo)記抗體，所述腺病毒檢測(cè)抗體是抗人腺病毒抗體，所述隱血免疫標(biāo)記抗體是抗人血紅蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)免疫標(biāo)記抗體或抗人白蛋白免疫標(biāo)記抗體，所述隱血檢測(cè)抗體是抗人血紅蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白免疫標(biāo)記抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)免疫標(biāo)記抗體或抗人白蛋白免疫標(biāo)記抗體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒，其特征在于，所述輪狀病毒免疫標(biāo)記抗體是輪狀病毒膠體金標(biāo)記抗體或輪狀病毒乳膠標(biāo)記抗體，所述腺病毒免疫標(biāo)記抗體是腺病毒膠體金標(biāo)記抗體或腺病毒乳膠標(biāo)記抗體，所述隱血免疫標(biāo)記抗體是隱血膠體金標(biāo)記抗體或隱血乳膠標(biāo)記抗體。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒，其特征在于，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條并列設(shè)置。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒，其特征在于，所述輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒還包括底板，所述輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、所述腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和所述隱血免疫層析檢測(cè)試紙條分別貼合在所述底板的上下表面上 。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種輪狀病毒、腺病毒及隱血聯(lián)檢試劑盒，包括輪狀病毒、腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條、腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和腺病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒及腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條和隱血免疫層析檢測(cè)試紙條，或者包括輪狀病毒及隱血免疫層析檢測(cè)試紙條和腺病毒免疫層析檢測(cè)試紙條，較佳地，免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊和層析膜上分別包被相應(yīng)的免疫標(biāo)記抗體和檢測(cè)抗體，本實(shí)用新型可以通過一次取樣同時(shí)檢測(cè)輪狀病毒、腺病毒和隱血，應(yīng)用簡(jiǎn)便，聯(lián)檢結(jié)果為下一步準(zhǔn)確治療提供了有力依據(jù)，適于大規(guī)模推廣應(yīng)用。
文檔編號(hào)G01N33/569GK203101395SQ20132005287
公開日2013年7月31日 申請(qǐng)日期2013年1月30日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月30日
發(fā)明者韋彥余, 時(shí)振華, 華一民, 趙靜, 賈夢(mèng)玥 申請(qǐng)人:無錫博慧斯生物醫(yī)藥科技有限公司, 無錫市凱奧善生物醫(yī)藥科技有限公司