一種bmp蛋白制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種BMP蛋白制劑及其制備方法。該制劑包括BMP蛋白，賦形劑，磷脂和多糖。制備方法是將BMP蛋白，賦形劑，磷脂和多糖在0℃條件下，玻璃攪拌棒攪拌均勻。本發(fā)明的BMP蛋白制劑，在骨科手術(shù)治療的過程中，可以暴露于常溫空氣條件下10天以上，保證手術(shù)的順利進(jìn)行，在低溫條件下可以保存30天以上，在冷凍條件下可以長期保存數(shù)年，活性不發(fā)生變化。
【專利說明】
一種BMP蛋白制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種蛋白穩(wěn)定劑，特別涉及一種骨形態(tài)發(fā)生蛋白BMP的制劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)能夠誘導(dǎo)動物或人體間充質(zhì)細(xì)胞分化為骨、軟骨、韌帶、肌腱和神經(jīng)組織。BMP在臨床的價值無可限量。近年來基因重組的BMP-2和BMP-7的安全性和有效性得到了充分的證實，美國FDA也于2002年7月批準(zhǔn)重組骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2用于脊柱融合?；贐MP的安全性和高效誘導(dǎo)成骨活性被越來越多的實驗所證實，在一些國家骨形態(tài)發(fā)生蛋白已進(jìn)入大規(guī)模的臨床實驗階段。
[0003]作為骨科治療的有效蛋白，其穩(wěn)定性需要得到保障。在治療中，為了達(dá)到效果，骨蛋白需要暴露于體外數(shù)天的時間，通過聚合物藥物遞送，釋放到體內(nèi)起作用，儲存于有機(jī)溶劑中的BMP蛋白能保持一定時間的活性，凍干粉保存也具有一定的效果，但是，這些效果都不是很明顯，蛋白質(zhì)還是會講解，生物活性降低速度很快。專利200680021260.0公開了一種骨形態(tài)發(fā)生蛋白，采用凍干的方式，加凍干保護(hù)劑和氧化/還原穩(wěn)定劑。采用凍干的方法雖然有利于長期保存，但是，不利于短期室溫保存，且在凍融的過程中會有蛋白損傷，且損傷不可逆，使得治療效果大大降低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)中缺陷，通過提供一種BMP蛋白制劑解決BMP蛋白室溫短期儲存及手術(shù)過程中長期暴露于體外導(dǎo)致活性迅速降低的問題。
[0005]—種BMP蛋白制劑，包括BMP蛋白，賦形劑，磷脂和多糖。
[0006]所述賦形劑選自甘油，明膠，麥芽糖糊精，羥基乙酸淀粉鈉，羥丙基甲基纖維素，蔗糖硬脂酸酯，辛烯基琥珀酸淀粉酯，mPEG-PLA-賴氨酸中的一種或一種以上。
[0007]所述多糖選自海藻糖，裙帶菜多糖，低聚異麥芽糖，阿拉伯半乳聚糖，β_1，6-葡聚多糖中的一種或一種以上。
[0008]所述磷脂選自卵磷脂，腦磷脂，心磷脂，鞘磷脂，磷脂酰絲氨酸，磷脂酰甘油中的一種或一種以上。
[0009]所述賦形劑占BMP蛋白制劑總重量的30-60%。
[0010]所述磷脂占BMP蛋白制劑總重量的10-20%。
[0011]所述多糖占BMP蛋白制劑總重量的10-20%。
[0012]遞送蛋白質(zhì)的一種醫(yī)學(xué)試劑盒，包括摻入聚合基質(zhì)的BMP蛋白；溶于溶劑的賦形劑，磷脂和多糖。
[0013]所述溶劑為去離子水或乙醇。
[0014]一種BMP蛋白制劑的制備方法，是將BMP蛋白，賦形劑，磷脂和多糖在O V條件下，玻璃攪拌棒攪拌均勻。
[0015]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果:本發(fā)明的BMP蛋白制劑，在骨科手術(shù)治療的過程中，可以暴露于常溫空氣條件下10天以上，保證手術(shù)的順利進(jìn)行，在低溫((TC)條件下可以保存30天以上，在冷凍條件下(-80°C)可以長期保存數(shù)年，活性不發(fā)生變化。
【具體實施方式】
[0016]下面對本發(fā)明的【具體實施方式】進(jìn)行詳細(xì)描述，但應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明的保護(hù)范圍并不受【具體實施方式】的限制。
[0017]實施例1
[0018]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白30份，甘油40份，卵磷脂15份，海藻糖15份。
[0019]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失8%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失5%，在_80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失15%。
[0020]實施例2
[0021 ] 一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白35份，明膠35份，腦磷脂18份，裙帶菜多糖12份。
[0022]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失7%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失6%，在-80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失16%。
[0023]實施例3
[0024]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白25份，羥基乙酸淀粉鈉42份，心磷脂18份，低聚異麥芽糖15份。
[0025]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失7%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失5%，在-80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失14%。
[0026]實施例4
[0027]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白28份，羥丙基甲基纖維素32份，鞘磷脂20份，阿拉伯半乳聚糖20份。
[0028]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失6%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失6%，在_80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失13%。
[0029]實施例5
[0030]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白28份，羥丙基甲基纖維素32份，鞘磷脂20份，β-l，6-葡聚多糖20份。
[0031]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失6%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失6%，在_80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失13%。
[0032]實施例6
[0033]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白40份，蔗糖硬脂酸酯30份，磷脂酰絲氨酸10份，阿拉伯半乳聚糖20份。
[0034]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失6%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失8%，在-80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失17%。
[0035]實施例7
[0036]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白30份，辛烯基琥珀酸淀粉酯20份，mPEG-PLA-賴氨酸20份，磷脂酰甘油10份，阿拉伯半乳聚糖20份。
[0037]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失6%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失8%，在-80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失17%。
[0038]實施例8
[0039]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白30份，甘油40份，卵磷脂15份，海藻糖15份，茼草提取物I份。
[0040]所述茼草提取物的提取方法為:將茼草曬干，磨成粉末，加3-6倍重量份數(shù)的70%乙醇溶液回流提取3次，合并濾液，活性炭脫色，蒸干制成。
[0041]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失1%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失1%，在-80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失2%。
[0042]實施例9
[0043]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白30份，甘油40份，卵磷脂15份，海藻糖15份，硬草提取物I份。
[0044]所述茼草提取物的提取方法為:將硬草曬干，磨成粉末，加3-6倍重量份數(shù)的70%乙醇溶液回流提取3次，合并濾液，活性炭脫色，蒸干制成。
[0045]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失1%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失1%，在-80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失2%。
[0046]對比例I
[0047]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白30份，卵磷脂15份，海藻糖15份。
[0048]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失48%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失55%，在-80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失85%。
[0049]實施例2
[0050]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白30份，甘油40份，海藻糖15份。
[0051]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失38%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失35%，在-80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失55%。
[0052]實施例3
[0053]一種BMP蛋白制劑，由如下重量份數(shù)的物質(zhì)組成:BMP蛋白30份，甘油40份，卵磷脂15份。
[0054]將上述組分的物質(zhì)在低溫條件下輕輕攪拌混勻，在室溫條件下10天內(nèi)活性喪失48%，在(TC條件下儲存30天，活性喪失55%，在-80°C條件下儲存3年，解凍后，活性喪失85%。
[0055]以上公開的僅為本發(fā)明的具體實施例，但是，本發(fā)明并非局限于此，任何本領(lǐng)域的技術(shù)人員能思之的變化都應(yīng)落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項】
1.一種BMP蛋白制劑，其特征在于，包括BMP蛋白，賦形劑，磷脂和多糖。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的BMP蛋白制劑，其特征在于，所述賦形劑選自甘油，明膠，麥芽糖糊精，羥基乙酸淀粉鈉，羥丙基甲基纖維素，蔗糖硬脂酸酯，辛烯基琥珀酸淀粉酯，mPEG-PLA-賴氨酸中的一種或一種以上。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的BMP蛋白制劑，其特征在于，所述多糖選自海藻糖，裙帶菜多糖，低聚異麥芽糖，阿拉伯半乳聚糖，β-1，6-葡聚多糖中的一種或一種以上。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的BMP蛋白制劑，其特征在于，所述磷脂選自卵磷脂，腦磷脂，心磷脂，鞘磷脂，磷脂酰絲氨酸，磷脂酰甘油中的一種或一種以上。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的BMP蛋白制劑，其特征在于，所述賦形劑占BMP蛋白制劑總重量的 30-60 %。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的BMP蛋白制劑，其特征在于，所述磷脂占BMP蛋白制劑總重量的10-20%。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的BMP蛋白制劑，其特征在于，所述多糖占BMP蛋白制劑總重量的10-20%。8.遞送蛋白質(zhì)的一種醫(yī)學(xué)試劑盒，其特征在于，包括摻入聚合基質(zhì)的BMP蛋白；溶于溶劑的賦形劑，磷脂和多糖。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述遞送蛋白質(zhì)的一種醫(yī)學(xué)試劑盒，其特征在于，所述溶劑為去離子水或乙醇。10.一種BMP蛋白制劑的制備方法，其特征在于，將BMP蛋白，賦形劑，磷脂和多糖在O°C條件下，玻璃攪拌棒攪拌均勻。
【文檔編號】A61K47/24GK106075400SQ201610669266
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年8月16日 公開號201610669266.4, CN 106075400 A, CN 106075400A, CN 201610669266, CN-A-106075400, CN106075400 A, CN106075400A, CN201610669266, CN201610669266.4
【發(fā)明人】趙彥濤, 朱加亮, 韓麗偉, 別曉梅, 李晉, 衷鴻賓, 侯樹勛
【申請人】中國人民解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院