專利名稱：具有抗血管生成活性的新的樺木酸衍生物,該衍生物的制備方法及其在治療與血管生成 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的樺木酸衍生物和含有樺木酸衍生物的組合物，樺木酸衍生物的制備方法以及使用該衍生物治療腫瘤和這類增生疾病的方法。本發(fā)明還涉及該新的樺木酸衍生物在抑制和/或預(yù)防與腫瘤有關(guān)血管生成，特別是與前列腺、肺、卵巢和結(jié)腸癌有關(guān)的血管生成中的應(yīng)用。
樺木酸及其某些衍生物的抗癌活性已經(jīng)用皮下植入小鼠肉瘤180細(xì)胞的裸鼠(JP 87,301,580)，其體外抑制p388淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞的生長(zhǎng)(Choi.Y-H等，Planta Medica Vol.XLVII，511-513，1988)，以及抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、特別是通過抑制鳥氨酸脫羧酶發(fā)生作用(Yasukawa，K等，Oncology 48WO 95/04526)等得以證明。
最近，本申請(qǐng)人報(bào)道了樺木酸及其衍生物的抗白血病和抗淋巴瘤活性以及抗前列腺癌、抗肺癌和抗卵巢癌活性，其ED50值小于4.0μg/ml。(1998年3月18日提交的美國(guó)申請(qǐng)09/040,856和1999年2月17日提交的美國(guó)申請(qǐng)09/251,309)。
此外，最近本申請(qǐng)人在其1998年10月6日提交的美國(guó)申請(qǐng)09/166,809中報(bào)道了樺木酸及其衍生物的抗血管生成活性，其中樺木酸及其衍生物顯示抑制內(nèi)皮細(xì)胞在Matrigel涂覆的表面上生長(zhǎng)時(shí)形成管樣結(jié)構(gòu)(TLS)。內(nèi)皮細(xì)胞抗增殖活性以及抗-TLS活性暗示了樺木酸衍生物的抗血管生成活性。
Anderson等(WO 95/04526)曾提到，對(duì)于某些擴(kuò)散至患者全身的癌癥，必然會(huì)發(fā)生稱作轉(zhuǎn)移，細(xì)胞-細(xì)胞粘連的過程。特別是，癌細(xì)胞一定從其原發(fā)部位移行并進(jìn)入血管以便于其遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)移。已知某些癌細(xì)胞通過其細(xì)胞表面的E-選擇蛋白配體與E-選擇蛋白粘附，并且這是轉(zhuǎn)移過程的一個(gè)組成部分。樺木酸及其衍生物干擾選擇蛋白的結(jié)合。樺木酸抑制P-選擇蛋白與2，3，sLex(與P-選擇蛋白結(jié)合的已知化合物)結(jié)合，其IC50值為125μM。它還以劑量依賴的方式抑制P-選擇蛋白與HL-60細(xì)胞結(jié)合，其IC50值為0.75mM。樺木酸及其衍生物還明顯干擾結(jié)腸癌細(xì)胞LS174T與E-選擇蛋白結(jié)合。
Dasgupta等(WO 96/29068)公開了用活性化合物樺木酸抑制腫瘤生長(zhǎng)的方法和組合物。該發(fā)明提供了用天然產(chǎn)物衍生的化合物抑制腫瘤生長(zhǎng)、尤其是抑制黑素瘤生長(zhǎng)的方法和組合物。本發(fā)明還提供了用樺木酸預(yù)防癌細(xì)胞生長(zhǎng)和蔓延的治療方法，其中樺木酸以局部制劑形式使用。
Pezzuto等(美國(guó)專利5,869,535)公開了用樺木酸或其衍生物探查抑制腫瘤生長(zhǎng)的方法和組合物。樺木酸已經(jīng)從Ziziphus mauritiana的干部樹皮中分離出來，通過選擇性細(xì)胞毒性方式抗人癌細(xì)胞系中的黑素瘤，根據(jù)生物活性的特征、使用培養(yǎng)的人黑素瘤細(xì)胞(MEL-2)作為探測(cè)器分段進(jìn)行生物測(cè)定，并且已經(jīng)得到作為活性化合物的樺木酸。所得樺木酸可用于抑制腫瘤生長(zhǎng)，或者可以轉(zhuǎn)化為衍生物以預(yù)防或抑制腫瘤生長(zhǎng)。該發(fā)明還提供了用樺木酸預(yù)防癌細(xì)胞生長(zhǎng)或蔓延的治療方法，其中樺木酸或其衍生物以局部制劑的形式使用。已發(fā)現(xiàn)，樺木酸體外抑制MEL-2細(xì)胞的生長(zhǎng)。但是，樺木酸不影響所試驗(yàn)的其他細(xì)胞系[A431(鱗狀細(xì)胞)，BC-1(乳腺)，COL-2(結(jié)腸)，HT1080(肉瘤)，KB(人口腔表皮樣癌)，LNCaP(前列腺)，LU-1(肺)，U373(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)和ZR-75-1(乳腺)](即ED50值大于20μg/ml)。
Lee等(WO 96/39033)公開了樺木酸和二氫樺木酸?；苌锞哂杏行У目?HIV活性。已經(jīng)對(duì)其C3-羥基，C17-羧酸和C20-外亞甲基進(jìn)行了修飾?？?HIV分析顯示了樺木酸和二氫樺木酸衍生物在急性感染H9淋巴細(xì)胞中的有效抗-HIV活性，其EC50值分別小于1.7×10-5μM。
發(fā)明目的本發(fā)明提供了通過施用藥物有效劑量的樺木酸衍生物治療血管生成的方法。本發(fā)明還提供了新的樺木酸衍生物以及含有這些衍生物和可藥用添加劑、稀釋劑、載體和賦形劑的組合物，組合物中含有或者不含樺木酸。
本發(fā)明的另一目的是提供用于抑制血管生成的新的樺木酸衍生物。
本發(fā)明的另一目的是提供用天然產(chǎn)物衍生的化合物及其衍生物治療、抑制和/或預(yù)防血管生成的化合物和組合物。
本發(fā)明的另一目的是提供用樺木酸衍生物抑制血管生成的治療方法，其中該衍生物全身給藥。
本發(fā)明的再一目的是通過使用天然產(chǎn)物衍生的化合物、例如樺木酸或其衍生物，克服與常規(guī)抗血管生成化療劑有關(guān)的高毒性問題。
本發(fā)明的又一目的是通過使用易于獲得的半合成的樺木酸衍生物，克服與合成抗血管生成抗癌藥不足的問題。
本發(fā)明的另一目的是通過使用易得的天然產(chǎn)物衍生的化合物、例如樺木酸及其衍生物，克服合成抗血管生成劑高成本的問題，預(yù)期樺木酸及其衍生物比其他化療藥便宜。
本發(fā)明的這些和其他目的通過下面的發(fā)明描述將變得清晰可見，下面的描述不是旨在限制本發(fā)明的精神和范圍，而僅僅是對(duì)本發(fā)明優(yōu)選具體實(shí)施方案的說明。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了適用于預(yù)防/抑制血管生成的藥物組合物。樺木酸衍生物抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖并具有高的內(nèi)皮細(xì)胞特異性，因此專一地指向內(nèi)皮細(xì)胞。該衍生物還抑制內(nèi)皮細(xì)胞在Matrigel涂覆的表面上生長(zhǎng)時(shí)形成管樣結(jié)構(gòu)(TLS)。內(nèi)皮細(xì)胞抗增殖活性以及抗-TLS活性非常強(qiáng)烈地暗示了樺木酸衍生物的抗血管生成活性。
該方法包括施用治療有效量的樺木酸衍生物，可以是僅僅為樺木酸衍生物，也可以是含有該衍生物的藥物組合物，以殺死、抑制或預(yù)防與腫瘤有關(guān)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，可以將可藥用載體、稀釋劑、賦形劑和/或溶劑與樺木酸/或其衍生物一起使用。本發(fā)明的治療方法尤其適用于抑制血管生成。
新的樺木酸衍生物具有如下面式1所示的樺木酸的基本結(jié)構(gòu)。 其中R、R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7獨(dú)立地或組合表示下列基團(tuán)R是H；R1是H、Br、Cl、F或I；R2是H并且R3是OH、OCO(CH2)nCH3(其中n＝0-14)、OCOC(CH3)3、OCO(CH2)nX(其中n＝1-7，X＝H、Cl、Br、F)、OCOCH2C6HnX[n＝2-4，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、OSO2(CH2)nX(其中n＝1-7，X＝H或Cl)、OSO2ONH2、OCOC6HnX[n＝0-4，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、OH、OCH3、OC2H5、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、NH2、NH(CH2)nOR[(n＝2-4)，R＝H或COCH3]、NHR、N(R)2[其中R＝CH3、C2H5、C3H7、C4H9]、NHC6HnX、NHCH2C6HnX(其中n＝2-4)、NHCH2C10HnX(n＝2-7)[X＝H、Cl、Br、F、I、CHCl2、CN、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、RCH2NOH(R＝H、CH3、C2H5、C3H7、C4H9)、NHOR(R＝H、COCH3、COC6HnX、OCH2C6HnX、OC6HnX)[n＝2-4，X＝Cl、Br、F、I、CF3、CHCl2、CN、NO2、CH3、NH2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1 to 7)]、N＝CHC6HnX(其中n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)[X＝H、Cl、Br、F、I、CF3、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-3)]、OCO(CH2)nNH2(n＝1-8)、NHCO(CH2)nX(X＝H、Cl或Br、n＝1-4)、NHCOC6HnX、NHCOC10HnX(n＝2-6)、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝Cl、Br、F、I、CF3、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、NHCOC6H4COOH、NHCOC6Hn(COOH)X[其中n＝2或3，X＝H、Cl、Br、F、NO2或NH2)、OCOC6H4COOH、OCOC6Hn(COOH)X(其中n＝2或3，X＝H、Cl、Br、F、NO2或NH2)、OCOCHRR1(R＝H、CH3或Ph；R1＝OH、Cl、Br或OCOCH3)、NHNHC6HnX(n＝2-4)、NHNHCH(OH)C6HnX(n＝2-4)、NHNHC10HnX(n＝2-6)、NHNHCH(OH)C10HnX(n＝2-6)[X＝Cl、Br、F、I、OH、OCH3、OC2H5、NO2、NH2、CHCl2、CF3或CnH2n+1(n＝1-7)]、OCOCH＝C(R)2(R是H、CH3或C2H5)、O-CO-CH＝CH-COOH、O-CO-C(Br)＝CHCOOH、OCOCH2C(R)2COOH(R＝H或CH3)、OCO(CH2)nCOOH(n＝0-3)、 [R＝NH2、NHC6HnX(n＝2-4)、NHC10HnX(n＝2-6)、NHCO(CH2)nX(n＝1-16)[X＝H、Cl、F、Br]、NHCOC6HnX、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOC10HnX(n＝2-6)、N＝CHC6HnX(n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)、NHCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)、NHSO2(CH2)nX(n＝1-7)、NHSO2C6HnX(n＝2-4)[X＝H、Cl、Br、F、CH3、NO2或NH2]，R2與R3一起為O、NNHC6HnX、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHC10HnX(n＝2-6)、NNHCOC10HnX(n＝2-6)、NC6HnX(n＝2-4)、NC10HnX(n＝2-6)[X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、NNHC6HnBrX[(n＝2或3)，X＝F、Cl、NO2、NH2、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)]、NOSO3H、N-OX、NHOX[X是H、CH3、C2H5、COCH3、SO2C6H4CH3、COC6HnX、C6HnX、CH2C6HnX[(n＝2-4)，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)、CF3或CHCl2]、NNHR[R是CH3、C2H5、C2H4OY，Y＝H、烷基、苯基、芐基或其具有Cl、Br、F、I、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)的取代衍生物]，R7是O并且R4是H、OH、Cl、N3、NH2、OR(R＝CH3、C2H5、C3H7、C4H9)、O(CH2)nCOY(n＝1-3)[Y＝OH、OCH3、OC2H5、Cl、CN、N3、NH2]、OCH2CH2OY[Y＝H、CH3、C2H5、COCH3]、OCOCH＝C(R)2(R＝H、CH3或C2H5)、OCO(CH2)nX(n＝1-16)、(X＝H、Cl、F或Br)、OCOC6HnX(n＝0-4)、OCOCH2C6HnX(n＝2-4)[X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、NH(CH2)nCH3(n＝0-9)、NH(CH2)nCOOH(n＝1-8)、OCH2CHO、OCH2CH＝NOX、OCH2CH2NHOX[X＝H、CH3、SO2C6H4CH3、OCOCH3、OCOC6H5、苯基或芐基取代的衍生物]、OCH2CH＝NNHC6HnX、OCH2CH2NHNHC6HnX(n＝2-4)、OCH2CH＝NNHC10HnX(n＝2-6)、OCH2CH2CH2NHNHC10HnX[X＝H、Cl、Br、F、I、CN、CF3、CHCl2、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1)(n＝1-7)]、OCH2CH2N(R)2(R＝H、CH3、C2H5、C3H7、C4H9、C6H5、C6H5CH2或其取代衍生物例如Cl、Br、CN、F、I、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]，R4是H并且R7是NOH、NHOR、N-OR[R是H、CH3、C2H5、SO2C6H4CH3、COCH3、CH2C6HnX、COC6HnX(n＝2-4)，X＝Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CF3、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、RCH2NOH(R＝H、CH3或C2H5)、NH2、NHSO2(CH2)nX(n＝1-7)、NHSO2C6HnX(n＝2-5)[X＝H、Cl、Br、CH3、NO2或NH2]、(NR)2(R是H、CH3、C2H5、C3H7、C4H9、苯基或芐基或其取代衍生物)、N＝CHC6HnX、NHCH2C6HnX(n＝2-4)、N＝CHC10HnX、NHCH2C10HnX[(n＝2-6)，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、NNHC6HnX、NHNHC6HnX、NHNHCH(OH)C6HnX、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHC10HnX、NNHCOC10HnX、NHNHC10HnX、NHNHCH(OH)C10HnX[其中n＝2-6，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)]、NHCOR[R是CH3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、C2H5、C2H4Cl、C3H7、C3H6OH、C3H6Cl、C6H5、C6HnX、CH2C6HnX、COCH2C6HnX(n＝2-4)、C10HnX、CH2C10HnX、COCH2C10HnX(n＝2-6)、X＝Cl、Br、CN、F、I、NO2、NH2、CF3、OH、OCH3、OC2H5、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]，R5是H或Br，R6是CH3、CH2Br、CH2OR[R是CO(CH2)nX、(n＝1-7；X＝H、Cl、Br或F)、CHO、CHNOY、CH2NHOY[Y＝H、CH3、C2H5、SO2C6H5、SO2C6H4CH3、CH2C6HnX、C6HnX(n＝2-4)，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)]、RCH2NOH[其中R是H、CH3、C2H5、C3H7、C4H9]、CH2NH2、CH2NHR或CH2N(R)2[R是CH3、C2H5、C3H7、C4H9、C6H5、C6HnX或CH2C6HnX、COCH2C6HnX(n＝2-4)、CH2C10HnX、COCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝H、Cl、Br、F、CN、I、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CF3、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、COOH、COCl、CONHR(R是烷基或芳基取代的基團(tuán))、CO-OCOR(R是烷基或芳基取代的基團(tuán))、COCH2COR(R是OH、OCH3、OC2H5、NH2或Cl)、COCH2CH2OR[R是H、CO(CH2)nX(n＝1-16)、COC6HnX、COCH2C6HnX(n＝2-4，X＝H、Cl、Br、CN、F、I、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、COO(CH2)nH(n＝1-5)、COO(CH2)nCOY(n＝1-5、Y＝OH、OCH3、OC2H5、Cl或Br)、CH＝NC6HnX(n＝2-4)、CH＝NC10HnX(n＝2-6)、CH＝NNHC6HnX、CH＝NNHCOC6HnX(n＝2-4)、CH＝NNHC10HnX、CH＝NNHCOC10HnX(n＝2-6)、CH2NHNHC6HnX(n＝2-4)、CH2NHNHC10HnX(n＝2-6)、CH2NHNHCH(OH)C6HnX(n＝2-4)、CH2NHNHCH(OH)C10HnX(n＝2-6)[其中X＝H、Cl、Br、F、I、CN、CF3、NO2、NH2、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、R5和R6一起為O、OH、O(CH2)nX(n＝1-6，X＝H、Cl或Br)、OCOC6HnX、OCOCH2C6HnX[n＝2-5，X＝Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、O(CH2)nCOOH(n＝1-3)、NOR、NHOR(R＝H、CH3、C2H5、C3H7、COCH3、COC6H5、苯基或芐基取代的衍生物)、NH2、(NR)2(R＝H、CH3、C2H5、C3H7、C4H9、C6HnX、CH2C6HnX；n＝2-5、X＝Cl、Br、F、I、CF3、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)]、NHCO(CH2)nX[n＝1-16，X＝Cl或Br]、NHCOC6HnX、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOC10HnX、NHCOCH2C10HnX(n＝2-6)(X＝Cl、Br、F、I、CN、CF3、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)]、N＝CHC6HnX(n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)、NHCH2C6HnX(n＝2-5)、NHCH2C10HnX(n＝2-6)、NNHC6HnX、NC6HnX、NHC6HnX(n＝2-4)、NC10HnX、NHC10HnX、NNHC10HnX(n＝2-6)、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHCOC10HnX(n＝2-6)、NR[R＝C6HnX(n＝2-5)、C10HnX(n＝2-7)[X＝H、Cl、Br、Cl、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OCH3、OC2H5、OH或CnH2n+1(n＝1-7)]。樺木酸衍生物的制備下列方法單獨(dú)或者組合使用以制備本發(fā)明的衍生物。
方法II如方法1所述，用合適的酰氯處理在鹵代有機(jī)溶劑中的底物。該反應(yīng)如方法I所述進(jìn)行后處理，得到相應(yīng)的純的3-o-?；苌??？梢允褂玫孽Ｂ鹊膶?shí)例是RCH2(CH2)n、COCI，(其中R＝H、Cl或F、Br，并且n＝0-9)或RCH2(CH)nXCOCI(其中R＝H，X＝OH、OCOCH3并且n＝1)。鹵代溶劑可以選自CCl4、CH2Cl2或C6H5CH3等。實(shí)施例2制備3-氧代衍生物在正常的反應(yīng)條件下，將底物溶解在有機(jī)溶劑中，并加入常規(guī)的氧化劑。該反應(yīng)如方法I所述進(jìn)行后處理，得到相應(yīng)的純的3-氧代衍生物。
可以使用的氧化劑的實(shí)例是CrO3/Py、CrO3/H2SO4或CrO3/AcOH等。正常的反應(yīng)條件是在0℃至室溫?cái)嚢璧孜锱c氧化劑數(shù)小時(shí)。有機(jī)溶劑可以選自丙酮、CH2Cl2、AcOH或其混合物等。
樺木酸的3-氧代-衍生物、二氫樺木酸或其衍生物可用于實(shí)施例4、5、8、10和14的方法。
將苯肼或其苯基取代的類似物或其鹽和乙酸鈉加入溶解在醇溶劑例如甲醇、乙醇和丙醇等中的3-氧代衍生物中，并使其回流約4小時(shí)。該反應(yīng)如實(shí)施例2方法I所述進(jìn)行后處理，得到相應(yīng)的純的苯腙衍生物。
可以使用的鹵代溶劑的實(shí)例是CCl4、CH2Cl2和CHCl3等。
將底物溶解在鹵代溶劑中，并在5-10℃向其中緩緩加入甲磺酰氯。在室溫?cái)嚢柙摶旌衔?-4小時(shí)。通過用水洗滌有機(jī)層對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行后處理。有機(jī)層用無水硫酸鹽干燥、過濾、蒸發(fā)至干得到殘余物，殘余物從乙腈中結(jié)晶，得到純的3-o-甲磺酸基衍生物。
向96孔組織培養(yǎng)板(Nunc，Denmark)的各孔中加入30μl ECV304細(xì)胞懸浮液(50×104細(xì)胞/ml，在含有10％FBS的RPMI 1640中)，然后加入150μl的培養(yǎng)基，并培養(yǎng)(37℃，5％CO2)過夜。然后加入濃度為0.5ug/ml-4ug/ml的20μl試驗(yàn)用樺木酸衍生物。每一濃度一式三份涂板。向?qū)φ湛字袃H加入20μl培養(yǎng)基。培養(yǎng)72小時(shí)后，進(jìn)行MTT分析(Mosmann，1983)，并計(jì)算出所處理細(xì)胞的增殖相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的抑制百分?jǐn)?shù)。
對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性分析在我們1998年3月18日提交的09/040,856號(hào)申請(qǐng)中已有詳細(xì)描述。表I示出了對(duì)ECV304和四種不同腫瘤細(xì)胞系的ED50值和17種有效衍生物的內(nèi)皮細(xì)胞特異性。
表I
ED50＝引起50％細(xì)胞毒性的藥物濃度(μg/ml)，其中細(xì)胞毒性％＝[1-O.D.處理的/O.D.對(duì)照的]*100ECS比率＝ED50腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)/ED50內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)。
ECS小于10＝低ECSECS在10-20＝中等ECSECS大于20＝高ECS我們預(yù)測(cè)′高′和′中等′ECS化合物專一地指向內(nèi)皮細(xì)胞，并且可以分在有效的抗血管生成化合物組，而′低′ECS化合物將補(bǔ)充其已經(jīng)報(bào)道的對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒活性。
表III
實(shí)施例19如下制備合適的樺木酸衍生物制劑。將該衍生物溶解在最小體積的甲醇中。該衍生物還可以溶解在異丙醇、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或任何其他適宜的溶劑中。將取代的β-環(huán)糊精例如2-羥基丙基β-環(huán)糊精、磺基丁基醚β-環(huán)糊精以約50-1000mg/ml、優(yōu)選250-750mg/ml的濃度分別溶解在水中。將該溶解的樺木酸衍生物以小等分試樣加入衍生的β-環(huán)糊精溶液中，并在低溫下進(jìn)行聲處理直至得到澄清的溶液。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，并將最終的溶液過濾，得到無菌產(chǎn)物。將所得溶液凍干。
全身給藥是指口服、直腸、鼻、透皮和非腸道(即肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下或靜脈內(nèi))給藥。按照良好的臨床慣例，優(yōu)選以產(chǎn)生抗血管生成作用、而不引起不適當(dāng)?shù)挠泻Ω弊饔玫膭┝渴┯迷摻M合物。該組合物可以單獨(dú)或者以與其他治療劑的混合物形式給藥。
每單位劑量提供約10mg至1000mg組成的藥物組合物優(yōu)選為按照常規(guī)方法得到的片劑、錠劑、膠囊、粉劑、水懸浮液或油懸浮液、糖漿、酏劑、植入物或水溶液。當(dāng)然，所用藥物組合物的性質(zhì)取決于所需的給藥途徑。組合物的人用劑量為1.0-200mg/kg/天，優(yōu)選為1.0-50mg/kg/天。
本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案涉及通過對(duì)患者施用藥物有效劑量的所述樺木酸衍生物或其組合，用新的樺木酸衍生物或其組合治療與血管生成有關(guān)的腫瘤患者的方法。本發(fā)明的患者可以是人、哺乳動(dòng)物或其他動(dòng)物。樺木酸衍生物對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的ED50值是0.35-4.0μg/ml。樺木酸衍生物對(duì)前列腺癌的內(nèi)皮細(xì)胞特異性是1.04-21.1。而樺木酸衍生物對(duì)肺癌的內(nèi)皮細(xì)胞特異性是0.43至＞10。然而，樺木酸衍生物對(duì)卵巢癌的內(nèi)皮細(xì)胞特異性是0.54-7.0。樺木酸衍生物對(duì)結(jié)腸癌的內(nèi)皮細(xì)胞特異性是0.87-14.3。
樺木酸衍生物以在可藥用添加劑、載體、稀釋劑、溶劑、填料、潤(rùn)滑劑、賦形劑、粘合劑或穩(wěn)定劑中的形式給藥。優(yōu)選地，該樺木酸衍生物以片劑、錠劑、膠囊、粉劑、水懸浮液或油懸浮液、糖漿、酏劑、植入物或水溶液的形式給藥，并且該樺木酸衍生物或其組合對(duì)患者全身給藥。
權(quán)利要求
1. 其中R、R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7獨(dú)立地或組合表示下列基團(tuán)R是H；R1是H、Br、Cl、F或I；R2是H并且R3是OH、OCO(CH2)nCH3(其中n＝0-14)、OCOC(CH3)3、OCO(CH2)nX(其中n＝1-7，X＝H、Cl、Br、F)、OCOCH2C6HnX[n＝2-4，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、OSO2(CH2)nX(其中n＝1-7，X＝H或Cl)、OSO2ONH2、OCOC6HnX[n＝0-4，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、OH、OCH3、OC2H5、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、NH2、NH(CH2)nOR[(n＝2-4)，R＝H或COCH3]、NHR、N(R)2[其中R＝CH3、C2H5、C3H7、C4H9]、NHC6HnX、NHCH2C6HnX(其中n＝2-4)、NHCH2C10HnX(n＝2-7)[X＝H、Cl、Br、F、I、CHCl2、CN、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、RCH2NOH(R＝H、CH3、C2H5、C3H7、C4H9)、NHOR(R＝H、COCH3、COC6HnX、OCH2C6HnX、OC6HnX)[n＝2-4，X＝Cl、Br、F、I、CF3、CHCl2、CN、NO2、CH3、NH2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1 to 7)]、N＝CHC6HnX(其中n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)[X＝H、Cl、Br、F、I、CF3、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-3)]、OCO(CH2)nNH2(n＝1-8)、NHCO(CH2)nX(X＝H、Cl或Br、n＝1-4)、NHCOC6HnX、NHCOC10HnX(n＝2-6)、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝Cl、Br、F、I、CF3、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、NHCOC6H4COOH、NHCOC6Hn(COOH)X[其中n＝2或3，X＝H、Cl、Br、F、NO2或NH2)、OCOC6H4COOH、OCOC6Hn(COOH)X(其中n＝2或3，X＝H、Cl、Br、F、NO2或NH2)、OCOCHRR1(R＝H、CH3或Ph；R1＝OH、Cl、Br或OCOCH3)、NHNHC6HnX(n＝2-4)、NHNHCH(OH)C6HnX(n＝2-4)、NHNHC10HnX(n＝2-6)、NHNHCH(OH)C10HnX(n＝2-6)[X＝Cl、Br、F、I、OH、OCH3、OC2H5、NO2、NH2、CHCl2、CF3或CnH2n+1(n＝1-7)]、OCOCH＝C(R)2(R是H、CH3或C2H5)、O-CO-CH＝CH-COOH、O-CO-C(Br)＝CHCOOH、OCOCH2C(R)2COOH(R＝H或CH3)、OCO(CH2)nCOOH(n＝0-3)、 [R＝NH2、NHC6HnX(n＝2-4)、NHC10HnX(n＝2-6)、NHCO(CH2)nX(n＝1-16)[X＝H、Cl、F、Br]、NHCOC6HnX、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOC10HnX(n＝2-6)、N＝CHC6HnX(n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)、NHCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)、NHSO2(CH2)nX(n＝1-7)、NHSO2C6HnX(n＝2-4)[X＝H、Cl、Br、F、CH3、NO2或NH2]，R2與R3一起為0、NNHC6HnX、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHC10HnX(n＝2-6)、NNHCOC10HnX(n＝2-6)、NC6HnX(n＝2-4)、NC10HnX(n＝2-6)[X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、NNHC6HnBrX[(n＝2或3)，X＝F、Cl、NO2、NH2、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)]、NOSO3H、N-OX、NHOX[X是H、CH3、C2H5、COCH3、SO2C6H4CH3、COC6HnX、C6HnX、CH2C6HnX[(n＝2-4)，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)、CF3或CHCl2]、NNHR[R是CH3、C2H5、C2H4OY，Y＝H、烷基、苯基、芐基或其具有Cl、Br、F、I、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)的取代衍生物]，R7是O并且R4是H、OH、Cl、N3、NH2、OR(R＝CH3、C2H5、C3H7、C4H9)、O(CH2)nCOY(n＝1-3)[Y＝OH、OCH3、OC2H5、Cl、CN、N3、NH2]、OCH2CH2OY[Y＝H、CH3、C2H5、COCH3]、OCOCH＝C(R)2(R＝H、CH3或C2H5)、OCO(CH2)nX(n＝1-16)、(X＝H、Cl、F或Br)、OCOC6HnX(n＝0-4)、OCOCH2C6HnX(n＝2-4)[X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、NH(CH2)nCH3(n＝0-9)、NH(CH2)nCOOH(n＝1-8)、OCH2CHO、OCH2CH＝NOX、OCH2CH2NHOX[X＝H、CH3、SO2C6H4CH3、OCOCH3、OCOC6H5、苯基或芐基取代的衍生物]、OCH2CH＝NNHC6HnX、OCH2CH2NHNHC6HnX(n＝2-4)、OCH2CH＝NNHC10HnX(n＝2-6)、OCH2CH2CH2NHNHC10HnX[X＝H、Cl、Br、F、I、CN、CF3、CHCl2、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1)(n＝1-7)]、OCH2CH2N(R)2(R＝H、CH3、C2H5、C3H7、C4H9、C6H5、C6H5CH2或其取代衍生物例如Cl、Br、CN、F、I、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]，R4是H并且R7是NOH、NHOR、N-OR[R是H、CH3、C2H5、SO2C6H4CH3、COCH3、CH2C6HnX、COC6HnX(n＝2-4)，X＝Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CF3、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、RCH2NOH(R＝H、CH3或C2H5)、NH2、NHSO2(CH2)nX(n＝1-7)、NHSO2C6HnX(n＝2-5)[X＝H、Cl、Br、CH3、NO2或NH2]、(NR)2(R是H、CH3、C2H5、C3H7、C4H9、苯基或芐基或其取代衍生物)、N＝CHC6HnX、NHCH2C6HnX(n＝2-4)、N＝CHC10HnX、NHCH2C10HnX[(n＝2-6)，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、NNHC6HnX、NHNHC6HnX、NHNHCH(OH)C6HnX、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHC10HnX、NNHCOC10HnX、NHNHC10HnX、NHNHCH(OH)C10HnX[其中n＝2-6，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)]、NHCOR[R是CH3、CH2Cl、CHCl2、CCl3、C2H5、C2H4Cl、C3H7、C3H6OH、C3H6Cl、C6H5、C6HnX、CH2C6HnX、COCH2C6HnX(n＝2-4)、C10HnX、CH2C10HnX、COCH2C10HnX(n＝2-6)、X＝Cl、Br、CN、F、I、NO2、NH2、CF3、OH、OCH3、OC2H5、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]，R5是H或Br，R6是CH3、CH2Br、CH2OR[R是CO(CH2)nX、(n＝1-7；X＝H、Cl、Br或F)、CHO、CHNOY、CH2NHOY[Y＝H、CH3、C2H5、SO2C6H5、SO2C6H4CH3、CH2C6HnX、C6HnX(n＝2-4)，X＝H、Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)]、RCH2NOH[其中R是H、CH3、C2H5、C3H7、C4H9]、CH2NH2、CH2NHR或CH2N(R)2[R是CH3、C2H5、C3H7、C4H9、C6H5、C6HnX或CH2C6HnX、COCH2C6HnX(n＝2-4)、CH2C10HnX、COCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝H、Cl、Br、F、CN、I、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CF3、CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、COOH、COCl、CONHR(R是烷基或芳基取代的基團(tuán))、CO-OCOR(R是烷基或芳基取代的基團(tuán))、COCH2COR(R是OH、OCH3、OC2H5、NH2或Cl)、COCH2CH2OR[R是H、CO(CH2)nX(n＝1-16)、COC6HnX、COCH2C6HnX(n＝2-4，X＝H、Cl、Br、CN、F、I、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7))、COO(CH2)nH(n＝1-5)、COO(CH2)nCOY(n＝1-5、Y＝OH、OCH3、OC2H5、Cl或Br)、CH＝NC6HnX(n＝2-4)、CH＝NC10HnX(n＝2-6)、CH＝NNHC6HnX、CH＝NNHCOC6HnX(n＝2-4)、CH＝NNHC10HnX、CH＝NNHCOC10HnX(n＝2-6)、CH2NHNHC6HnX(n＝2-4)、CH2NHNHC10HnX(n＝2-6)、CH2NHNHCH(OH)C6HnX(n＝2-4)、CH2NHNHCH(OH)C10HnX(n＝2-6)[其中X＝H、Cl、Br、F、I、CN、CF3、NO2、NH2、CHCl2、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]，R5和R6一起為O、OH、O(CH2)nX(n＝1-6，X＝H、Cl或Br)、OCOC6HnX、OCOCH2C6HnX[n＝2-5，X＝Cl、Br、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、OH、OCH3、OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]、O(CH2)nCOOH(n＝1-3)、NOR、NHOR(R＝H、CH3、C2H5、C3H7、COCH3、COC6H5、苯基或芐基取代的衍生物)、NH2、(NR)2(R＝H、CH3、C2H5、C3H7、C4H9、C6HnX、CH2C6HnX；n＝2-5、X＝Cl、Br、F、I、CF3、CN、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)]、NHCO(CH2)nX[n＝1-16，X＝Cl或Br]、NHCOC6HnX、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOC10HnX、NHCOCH2C10HnX(n＝2-6)(X＝Cl、Br、F、I、CN、CF3、NO2、NH2、OH、OCH3、OC2H5、CnH2n+1(n＝1-7)]、N＝CHC6HnX(n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)、NHCH2C6HnX(n＝2-5)、NHCH2C10HnX(n＝2-6)、NNHC6HnX、NC6HnX、NHC6HnX(n＝2-4)、NC10HnX、NHC10HnX、NNHC10HnX(n＝2-6)、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHCOC10HnX(n＝2-6)、NR[R＝C6HnX(n＝2-5)、C10HnX(n＝2-7)[X＝H、Cl、Br、Cl、F、I、CN、NO2、NH2、CF3、CHCl2、OCH3、OC2H5、OH或CnH2n+1(n＝1-7)]。
2.具有式2的權(quán)利要求1的新的樺木酸衍生物 R2＝O、NNHC6H5、NHNHC6H5、NHNHC6H4(CH3) (4)、OCOC6H3F2(3，5)、OCOC6H3F2(2，4)、OCOC6H4(CF3) (3)、OCOC6H4(CF3) (2)、N＝CHC6H3F2(3，4)、OH、OCOC6H4(C5 H11) (4)、OCOCH2C6H3(OCH3)2(2，5)、N＝CHC6H3F2(2，4)、OCOC6H4(C7H15)(4)、OCOC6F5、NOH、OCOC6H3(OCH3)2(3，4)、OCOC6H3(OCH3)2(2，4)、OCOCClF2、OCOC6H4(C6H5) (4)、OCOCH(Cl)C6H5、OCO(CH2)3COOH、OCOC6H4CI(4)、OCOC6H4(CHCl2) (3)，-OCOC6H2(COOH) (2)Cl2(3，6)、OCOCH(Cl)CH3NNHCOC6H4OH(2)或NOCH2C6H4NO2(4)，R3＝H、-CH2CH2COOCH3-COCH＝CH3或3-去氧二氫樺木酸，R4＝CH2CCH3-CH(CH3)2或BrCH2C(Br)CH3。
3.權(quán)利要求1的樺木酸的3-O-?；鶚迥舅嵫苌锏闹苽浞椒ǎ渲兴龇椒ò?i)用酸酐或酰氯在室溫處理樺木酸或樺木酸衍生物4-16小時(shí)；(ii)向步驟(i)的溶液中加入水，和(iii)用有機(jī)溶劑萃取，得到有機(jī)層，所述3-o-?；鶚迥舅嵫苌锎嬖谟谟袡C(jī)層中。
4.權(quán)利要求1的樺木酸的3-氧代-衍生物的制備方法，其中所述方法包括將樺木酸或樺木酸衍生物溶解在有機(jī)溶劑中，并加入氧化劑得到3-氧代衍生物。
5.權(quán)利要求1的2-溴-3-氧代-二氫樺木酸衍生物的制備方法，其中所述方法包括將3-氧代二氫樺木酸或其衍生物溶解在鹵代有機(jī)溶劑中，在0-10℃加入溶解在鹵代有機(jī)溶劑中的液溴，并將該混合物加熱至室溫，得到2-溴-3-氧代衍生物。
6.權(quán)利要求1的3-肟基樺木酸衍生物的制備方法，其中所述方法包括向3-氧代樺木酸衍生物中加入醇溶劑，加入羥胺、苯基羥胺、芐基羥胺或其鹽和乙酸鈉，使該混合物回流，得到3-肟基樺木酸衍生物。
7.權(quán)利要求1的3-氧代樺木酸衍生物的苯腙的制備方法，其中所述方法包括將3-氧代-樺木酸衍生物溶解在醇溶劑中，加入苯肼或其苯基取代的類似物或其鹽和乙酸鈉，使反應(yīng)混合物回流，得到苯腙衍生物。
8.權(quán)利要求1的17-羧基烷基羧酸酯樺木酸衍生物的制備方法，其中所述方法包括將樺木酸或樺木酸衍生物溶解在無水二甲基甲酰胺中，加入氫化鈉，在室溫?cái)嚢?，加入鹵代烷基羧基酯，得到17-羧基烷基羧酸酯樺木酸衍生物。
9.權(quán)利要求1的樺木酸的17-羧基烷基羧酸的制備方法，其中所述方法包括將樺木酸衍生物的17-羧基烷基羧酸酯溶解在醇溶劑中，加入氫氧化物，將反應(yīng)混合物加熱至40-50℃，保持2-4小時(shí)，得到17-羧基烷基羧酸樺木酸衍生物。
10.權(quán)利要求1的2，20，29-三溴樺木酸衍生物的制備方法，其中所述方法包括將3-氧代樺木酸或其衍生物溶解在鹵代有機(jī)溶劑中，加入溶解在有機(jī)溶劑中的液溴，保持反應(yīng)混合物的溫度在0-10℃，使反應(yīng)混合物恢復(fù)至室溫，得到2，20，29-三溴樺木酸衍生物。
11.權(quán)利要求1的20，29-二溴樺木酸衍生物的制備方法，其中所述方法包括將樺木酸或其衍生物溶解在鹵代有機(jī)溶劑中，前提是該衍生物不是3-氧代樺木酸或其衍生物，加入溶解在有機(jī)溶劑中的液溴，保持反應(yīng)混合物在0-10℃，使反應(yīng)混合物的溫度升至室溫，得到20，29-三溴樺木酸衍生物。
12.權(quán)利要求1的20-羧基烷基羧酸酯樺木酸的制備方法，其中所述方法包括將樺木酸或其衍生物溶解在無水二甲基甲酰胺中，加入氫化鈉，在室溫?cái)嚢瑁尤臌u代烷基羧基酯，得到20-羧基烷基羧酸酯樺木酸衍生物。
13.權(quán)利要求1的樺木酸的20-羧基烷基羧酸的制備方法，其中所述方法包括將樺木酸衍生物的20-羧基烷基羧酸酯溶解在醇溶劑中，加入氫氧化物，將反應(yīng)混合物加熱至40-50℃，保持2-4小時(shí)，得到20-羧基烷基羧酸樺木酸衍生物。
14.權(quán)利要求1的樺木酸的3-氨基衍生物的制備方法，其中所述方法包括(a)在氧化鉑催化劑存在下、將樺木酸的3-肟基衍生物溶解在冰醋酸中，(b)過濾步驟(a)的混合物，和(c)蒸發(fā)步驟(b)的濾液，得到樺木酸的氨基衍生物；a]將樺木酸的3-氧代衍生物溶解在甲醇中，(b)加入硼氫化鈉和硫酸銨并回流；和c]將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干并加入水，得到3-氨基衍生物。
15.權(quán)利要求1的3-O-苯甲?；鶚迥舅嵫苌锏闹苽浞椒?，所述方法包括a)將樺木酸或樺木酸衍生物與苯甲酰氯或其苯基取代的衍生物在室溫混合6-10小時(shí)；b)向步驟(a)的溶液中加入水，和c)用有機(jī)溶劑萃取，得到有機(jī)層，所述3-O-苯甲?；鶚迥舅嵫苌锎嬖谟谟袡C(jī)層中。
16.權(quán)利要求1的3-O-甲磺酸基樺木酸衍生物的制備方法，其中所述方法包括a)將樺木酸衍生物溶解在鹵代溶劑中；b)在0-10℃，用甲磺酰氯處理步驟(a)的混合物；c)在室溫?cái)嚢柙摶旌衔?-4小時(shí)；d)向步驟(c)的混合物中加入水，并分離有機(jī)層；和e)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，蒸發(fā)并用腈溶劑使殘余物結(jié)晶，得到純的3-O-甲磺酸基衍生物。
17.權(quán)利要求1的樺木酸的3-苯基肼基或其苯基取代的衍生物的制備方法，其中所述方法包括a]在鉑海綿催化劑存在下、在氫氣氛(50-70psi)下，將樺木酸的3-苯基腙或其苯基取代的衍生物溶解在冰醋酸中3-5小時(shí)；b]將步驟(a)的混合物過濾；和c]蒸發(fā)步驟(b)的濾液，并結(jié)晶，得到3-苯基肼基樺木酸衍生物。
18.權(quán)利要求1的樺木酸的3-N-羥基乙基衍生物的制備方法，其中所述方法包括將3-氧代衍生物溶解在無水醇溶劑例如甲醇/乙醇中，向上述溶液中加入15-20％鹽酸的醇溶液和2-氨基乙醇，并在室溫?cái)嚢?0-60分鐘，然后加入氰基硼氫化鈉，并在室溫進(jìn)一步攪拌約72小時(shí)，最后通過加入水、然后濾出固體進(jìn)行后處理，得到粗產(chǎn)物，該粗產(chǎn)物從乙醇中結(jié)晶，得到純的3-N-羥基乙基衍生物。
19.權(quán)利要求1的樺木酸的3-N-亞芐基衍生物的制備方法，其中所述方法包括將3-氨基衍生物溶解在醇溶劑例如甲醇/乙醇中，并在堿性碳酸鹽例如碳酸鈉或碳酸鉀存在下、向其中加入苯甲醛或取代的苯甲醛衍生物，在室溫至約50℃攪拌上述混合物數(shù)小時(shí)，最后通過真空除去醇并加入水對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行后處理，水層或者過濾、或者用鹵代有機(jī)溶劑萃取，然后蒸發(fā)，得到3-N-亞芐基衍生物。
20.用新的樺木酸衍生物或其組合治療與血管生成有關(guān)的腫瘤患者的方法，該方法是對(duì)所述患者施用藥物有效劑量的所述樺木酸衍生物或其組合。
21.權(quán)利要求20的方法，其中所述患者是人、哺乳動(dòng)物或其他動(dòng)物。
22.權(quán)利要求20的方法，其中樺木酸衍生物對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的ED50值為0.35-4.0μg/ml。
23.權(quán)利要求20的方法，其中樺木酸衍生物對(duì)前列腺癌的內(nèi)皮細(xì)胞特異性是1.04-21.1。
24.權(quán)利要求20的方法，其中樺木酸衍生物對(duì)肺癌的內(nèi)皮細(xì)胞特異性是0.43至＞10。
25.權(quán)利要求20的方法，其中樺木酸衍生物對(duì)卵巢癌的內(nèi)皮細(xì)胞特異性是0.54-7.0。
26.權(quán)利要求20的方法，其中樺木酸衍生物對(duì)結(jié)腸癌的內(nèi)皮細(xì)胞特異性是0.87-14.3。
27.權(quán)利要求20的方法，其中樺木酸衍生物以在可藥用添加劑、載體、稀釋劑、溶劑、填料、潤(rùn)滑劑、賦形劑、粘合劑或穩(wěn)定劑中的形式對(duì)患者給藥。
28.權(quán)利要求20的方法，其中樺木酸衍生物以片劑、錠劑、膠囊、粉劑、水懸浮液或油懸浮液、糖漿、酏劑、植入物或水溶液的形式給藥。
29.權(quán)利要求20的方法，其中對(duì)人的劑量是1.0-200mg/kg/天。
30.權(quán)利要求20的方法，其中樺木酸衍生物或其組合對(duì)患者全身給藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有抗血管生成活性的新的樺木酸衍生物,該衍生物的制備方法及其治療與血管生成有關(guān)腫瘤的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P43/00GK1373769SQ99816940
公開日2002年10月9日 申請(qǐng)日期1999年9月9日 優(yōu)先權(quán)日1999年9月9日
發(fā)明者M·杰吉, S·拉曼多斯, P·拉詹德恩, M·J·阿曼德斯迪奎 申請(qǐng)人:達(dá)布爾研究基金會(huì)